第3章 消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全

一般用后清洗、消毒即可。 一般用后清洗、消毒即可。 （四）快速周转的医疗器械
二、室内空气消毒灭菌 紫外线照射（ 最常用； 滤过除菌： 1.物理消毒法 ①紫外线照射（1.5W/m3，1h）最常用；②滤过除菌：空气通过 孔径小于0 μm的高效过滤装置以除去细菌和带菌尘埃 的高效过滤装置以除去细菌和带菌尘埃。 孔径小于0.2 μm的高效过滤装置以除去细菌和带菌尘埃。 2 ．化学消毒法 包括化学消毒剂喷雾和熏蒸： 过氧乙酸（浓度0 喷雾、 包括化学消毒剂喷雾和熏蒸：①过氧乙酸（浓度0.5%）喷雾、
Controlling Microorganisms By Physical Agents： •High Temperature •Radiation 辐射 •Filtration 过滤 •Low Temperature •Desiccation干燥
一）、热力灭菌法(Heat sterilization) 热力灭菌法(Heat 无芽胞细菌经55℃--60℃ 作用30 60分钟死亡 湿热80 30—60 分钟死亡; 80℃ 无芽胞细菌经 55℃--60℃ 作用 30 60 分钟死亡 ; 湿热 80℃ 经 55 60 5—6分钟可杀灭所有细菌繁殖体、真菌和酵母菌。 6分钟可杀灭所有细菌繁殖体、真菌和酵母菌。 干热灭菌法(dry 干热灭菌法(dry heat sterilization) 湿热灭菌法(wet heat sterilization) 湿热灭菌法(wet
Reduce or eliminate pathogens in or on inanimate objects to a safe level, which are no longer health hazard.
2、灭菌(sterilization) ：杀灭物体上所有微生物的方法。(包括 杀灭病原微生物和非病原微生物、细菌的繁殖体和芽胞)要求比消 毒高。Sterilization (灭菌): A physical or chemical process that completely
Ionizing Radiation 电离辐射
• X-rays and gamma rays • more energy and penetrating power than UV • used to sterilize pharmaceuticals and disposable medical supplies such as syringes, surgical gloves, catheters导尿管, and sutures缝合线 • used to retard spoilage in seafoods, meats, poultry, and fruits
(一)干热灭菌法(dry heat sterilization) 干热灭菌法(dry 1. 原 理 : 脱 水 干 燥 和 大 分 子 变 性 。 mechanism: The cells get dried through dehydration(脱水）. 脱水） 脱水 2.方法: 方法: ⑴焚烧（burn ）; 焚烧（ 用于微生物实验的接种环和试管口的灭菌; ⑵烧灼（cautery ）:用于微生物实验的接种环和试管口的灭菌; 烧灼（ 烤箱灭菌;160℃--170 170℃ 小时;适用于高温下不 ⑶干烤（bake ）:烤箱灭菌;160℃--170℃,2小时;适用于高温下不 干烤（ 变质、不损坏、不蒸发的物品,例玻璃器皿、瓷器、 变质、 不损坏、 不蒸发的物品, 例玻璃器皿 、瓷器 、 玻璃注射器等 的灭菌。 的灭菌。 ⑷ 红外线（ infrared):是一种 0.77-1000µm 波长的电磁波， 其中1红外线 （ 是一种0 77-1000 m 波长的电磁波 ， 其中 1 是一种 10µm波长的热效应最强，但只能加热物体表面，温度与时间同干烤。 10 m波长的热效应最强，但只能加热物体表面，温度与时间同干烤。
5、无菌(asepsis) ：不存在活菌的意思。 无菌操作(asepsis manipulaiton )：防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。 Asepsis (无菌): No living microorganisms exist. The skill that prevents microbe from entering the body or other objects is called aseptic technique (无菌操作).
三）、Filtration 过滤 ）、
• sterilize solutions that may be damaged or denatured by high temperatures or chemical agents
四）、干燥与低温抑菌法
二、 化学消毒灭菌法 （Chemical method for sterilization） ）
3、低效消毒剂（low-level disinfectants）:可杀灭多数细菌繁殖体，但不能杀 低效消毒剂（ 可杀灭多数细菌繁殖体， 低效消毒剂 ） 可杀灭多数细菌繁殖体 灭细菌芽胞、结核分枝杆菌及某些抵抗力较强的真菌和病毒。 灭细菌芽胞、结核分枝杆菌及某些抵抗力较强的真菌和病毒。 1）季铵盐类消毒剂：我国使用最普遍的是苯扎溴铵（新洁尔灭（阳离子表面活 性剂），使用时不能与肥皂（阴离子表面活性剂）合用）。可用于皮肤、粘膜、 物品表面、地面消毒。 2）氯乙定（洗必泰）：为双胍类化合物，不能与阴离子表面活性剂合用，可用 于皮肤、粘膜、物品表面、地面消毒。 3）高锰酸钾：多用于可用于皮肤、粘膜冲洗、浸泡消毒以及食具、蔬菜、水果 的消毒。 消毒剂的应用见表2—2
※湿热灭菌的效力比干热灭菌的大,原因: 湿热灭菌的效力比干热灭菌的大,原因: ⑴湿热中细菌菌体蛋白较易凝固; 湿热中细菌菌体蛋白较易凝固; ⑵穿透力比干热大; 穿透力比干热大; ⑶湿热的蒸气有潜热存在。 湿热的蒸气有潜热存在。
二）、紫外线的杀菌作用（radiation for sterilization ) 紫外线的杀菌作用（ 波长200~300nm的紫外线具杀菌作用，其中以265~266nm最强。 波长200~300nm的紫外线具杀菌作用，其中以265~266nm最强。 200 nm的紫外线具杀菌作用 265 nm最强 原理:作用于DNA,使一条DNA上相邻的二个T共价结合而形成双聚体, DNA,使一条DNA上相邻的二个 原理:作用于DNA,使一条DNA上相邻的二个T共价结合而形成双聚体, 因而改变DNA的分子构型 干扰DNA的复制与转录, DNA的复制与转录 因而改变DNA的分子构型,干扰DNA的复制与转录,导致细菌的死亡或 DNA的分子构型, 变异。 变异。 应用：手术室传染病房细菌实验室的空气消毒， 应用：手术室传染病房细菌实验室的空气消毒，或不耐热物品的表 面消毒。 面消毒。
6、清洁：指能减少微生物附着在无机物体表面的数量的方法，达到人类可以接 受的水平，以满足公众的健康需要。 净化：指能显著减少或破坏一定空间中微生物数量和生物活性的方法，
第二节 消毒灭菌的方法
一、 物理消毒灭菌法 主要有:热力、紫外线、电力辐射、超声波等。 主要有:热力、紫外线、电力辐射、超声波等。
二）、消毒剂的种类与应用（自学） ）、消毒剂的种类与应用 自学）
按其杀菌能力分为三大类： 按其杀菌能力分为三大类： 1、高效消毒剂（high-level disinfectants）:杀灭包括细菌、芽胞在内的所有微 、高效消毒剂（ 杀灭包括细菌、 ） 杀灭包括细菌 生物 1）含氯消毒剂：对金属制品有腐蚀作用，主要用于物品表面、应用水、皮肤、 地面、排泄物和污水等的消毒。 2）过氧化物消毒剂：过氧化氢、过氧乙酸。其中过氧乙酸不能用于金属器械的 消毒，可用于其他物品表面和皮肤的消毒，熏蒸可用于空气消毒。 3 3）醛类消毒剂：甲醛和戊二醛，为烷化剂。具有广谱、高效、快速的杀菌作用。 4）环氧乙烷
destroys or removes all microbial life，including bacteria spore and viruses.
3、抑菌(bacteriostasis) ：抑制体内或体外细菌的生长繁殖， 如各种抗生素即为常用抑菌剂。
4、防腐(antisepsis) ：防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法，细菌一般不死亡。 Antisepsis (防腐): Use chemical agents to inhibit or destroy the growth of microorganisms on skin or other living tissue .
第3章 消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全 章
第一节 消毒灭菌的常用术语
Bቤተ መጻሕፍቲ ባይዱsic terms
• • • • • sterilization灭菌 disinfection消毒 Antisepsis 防腐 Bacteriostasis抑菌 Asepsis 无菌
1、消毒(disinfection) ： 杀死物体上病原微生物的方法,称为消 毒。(不一定能杀死含芽胞的细菌和非病原微生物) Disinfection (消毒):
第三节
消毒灭菌的运用
一、医疗器械物品的消毒灭菌
用时需进入无菌组织的物品。所有这些物品都应该灭菌。 （一）高危器械物品 用时需进入无菌组织的物品。所有这些物品都应该灭菌。 用时不进入无菌组织但接触黏膜的器械。采用消毒即可。 （二）中危器械物品 用时不进入无菌组织但接触黏膜的器械。采用消毒即可。 （三）低危器械物品 只接触未损伤皮肤但不进入无菌组织和不接触黏膜的物品。 只接触未损伤皮肤但不进入无菌组织和不接触黏膜的物品。
（二）湿热灭菌法(wet heat sterilization) 湿热灭菌法(wet 1．巴氏消毒法(pasteurization) ：法国巴斯德创用 巴氏消毒法 30秒 ⑴62℃，30分钟；⑵71.7℃15—30秒 62℃ 30分钟； 71. 分钟 15 30 2.煮沸法 3.流动蒸气灭菌法:又称常压蒸气灭菌法 流动蒸气灭菌法: 4.间歇蒸气灭菌法:Arnold(呵诺氏灭菌器) 间歇蒸气灭菌法:Arnold(呵诺氏灭菌器) 呵诺氏灭菌器 此法用于不耐高热的含糖、牛奶等培养基的消毒。 此法用于不耐高热的含糖、牛奶等培养基的消毒。 5.高压蒸气灭菌法:最有效的一种灭菌方法 高压蒸气灭菌法: 121. 15—20分钟。 20分钟 1.05kg/cm2(15 磅 ) 、 121.3℃ ，15 20分钟。用于一般培养 05kg/cm 15磅 生理盐水、手术敷料等耐高温耐湿等物品的灭菌。 基、生理盐水、手术敷料等耐高温耐湿等物品的灭菌。
消毒剂） 一）、化学消毒剂的杀菌机制(Mechanism of disinfectant(消毒剂） 化学消毒剂的杀菌机制 消毒剂 killing bacteria) ⑴ 菌 体 蛋 白 质 变 性 或 凝 固 （ denaturizing the proteins of bacteria ）：例酚类(高浓度)醇类等; 例酚类(高浓度)醇类等; ⑵干扰细菌的酶系统和代谢（disturb enzyme activity ）：例重 干扰细菌的酶系统和代谢（ 金属与细菌的-SH基结合使有关酶失去活性; 金属与细菌的-SH基结合使有关酶失去活性; 基结合使有关酶失去活性 ⑶损伤菌细胞膜（damage the cellular membrane ）：例表面活 损伤菌细胞膜（ 性剂和脂溶剂（新洁尔灭等） 性剂和脂溶剂（新洁尔灭等）
2、中效消毒剂（intermediate-level disinfectants）:不能杀灭细菌芽胞，但能 中效消毒剂（ 不能杀灭细菌芽胞， 中效消毒剂 ） 不能杀灭细菌芽胞 杀灭细菌繁殖体（包括结核分枝杆菌）、真菌和大多数病毒。 杀灭细菌繁殖体（包括结核分枝杆菌）、真菌和大多数病毒。 ）、真菌和大多数病毒 1）含碘消毒剂：常用为碘酊、碘伏，多用于皮肤粘膜、体温计和其他物品表面 的消毒。碘酊对皮肤有刺激性，消毒后需用75%乙醇擦净。碘伏易洗脱，刺激性 轻。 2）醇类消毒剂：乙醇（70%~75%）或异丙醇（杀菌作用强，但毒性大，用于医 疗器材和皮肤的消毒或浸泡体温计）。 3）酚类消毒剂：石碳酸、煤酚皂溶液（即来苏），对环境可造成污染，现已不 用。