第3章 消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全

三）、Filtration 过滤 ）、
• sterilize solutions that may be damaged or denatured by high temperatures or chemical agents
四）、干燥与低温抑菌法
二、 化学消毒灭菌法 （Chemical method for sterilization） ）
第3章 消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全 章
第一节 消毒灭菌的常用术语
Basic terms
• • • • • sterilization灭菌 disinfection消毒 Antisepsis 防腐 Bacteriostasis抑菌 Asepsis 无菌
1、消毒(disinfection) ： 杀死物体上病原微生物的方法,称为消 毒。(不一定能杀死含芽胞的细菌和非病原微生物) Disinfection (消毒):
(一)干热灭菌法(dry heat sterilization) 干热灭菌法(dry 1. 原 理 : 脱 水 干 燥 和 大 分 子 变 性 。 mechanism: The cells get dried through dehydration(脱水）. 脱水） 脱水 2.方法: 方法: ⑴焚烧（burn ）; 焚烧（ 用于微生物实验的接种环和试管口的灭菌; ⑵烧灼（cautery ）:用于微生物实验的接种环和试管口的灭菌; 烧灼（ 烤箱灭菌;160℃--170 170℃ 小时;适用于高温下不 ⑶干烤（bake ）:烤箱灭菌;160℃--170℃,2小时;适用于高温下不 干烤（ 变质、不损坏、不蒸发的物品,例玻璃器皿、瓷器、 变质、 不损坏、 不蒸发的物品, 例玻璃器皿 、瓷器 、 玻璃注射器等 的灭菌。 的灭菌。 ⑷ 红外线（ infrared):是一种 0.77-1000µm 波长的电磁波， 其中1红外线 （ 是一种0 77-1000 m 波长的电磁波 ， 其中 1 是一种 10µm波长的热效应最强，但只能加热物体表面，温度与时间同干烤。 10 m波长的热效应最强，但只能加热物体表面，温度与时间同干烤。
6、清洁：指能减少微生物附着在无机物体表面的数量的方法，达到人类可以接 受的水平，以满足公众的健康需要。 净化：指能显著减少或破坏一定空间中微生物数量和生物活性的方法，
第二节 消毒灭菌的方法
一、 物理消毒灭菌法 主要有:热力、紫外线、电力辐射、超声波等。 主要有:热力、紫外线、电力辐射、超声波等。
2、中效消毒剂（intermediate-level disinfectants）:不能杀灭细菌芽胞，但能 中效消毒剂（ 不能杀灭细菌芽胞， 中效消毒剂 ） 不能杀灭细菌芽胞 杀灭细菌繁殖体（包括结核分枝杆菌）、真菌和大多数病毒。 杀灭细菌繁殖体（包括结核分枝杆菌）、真菌和大多数病毒。 ）、真菌和大多数病毒 1）含碘消毒剂：常用为碘酊、碘伏，多用于皮肤粘膜、体温计和其他物品表面 的消毒。碘酊对皮肤有刺激性，消毒后需用75%乙醇擦净。碘伏易洗脱，刺激性 轻。 2）醇类消毒剂：乙醇（70%~75%）或异丙醇（杀菌作用强，但毒性大，用于医 疗器材和皮肤的消毒或浸泡体温计）。 3）酚类消毒剂：石碳酸、煤酚皂溶液（即来苏），对环境可造成污染，现已不 用。
Ionizing Radiation 电离辐射
• X-rays and gamma rays • more energy and penetrating power than UV • used to sterilize pharmaceuticals and disposable medical supplies such as syringes, surgical gloves, catheters导尿管, and sutures缝合线 • used to retard spoilage in seafoods, meats, poultry, and fruits
※湿热灭菌的效力比干热灭菌的大,原因: 湿热灭菌的效力比干热灭菌的大,原因: ⑴湿热中细菌菌体蛋白较易凝固; 湿热中细菌菌体蛋白较易凝固; ⑵穿透力比干热大; 穿透力比干热大; ⑶湿热的蒸气有潜热存在。 湿热的蒸气有潜热存在。
二）、紫外线的杀菌作用（radiation for sterilization ) 紫外线的杀菌作用（ 波长200~300nm的紫外线具杀菌作用，其中以265~266nm最强。 波长200~300nm的紫外线具杀菌作用，其中以265~266nm最强。 200 nm的紫外线具杀菌作用 265 nm最强 原理:作用于DNA,使一条DNA上相邻的二个T共价结合而形成双聚体, DNA,使一条DNA上相邻的二个 原理:作用于DNA,使一条DNA上相邻的二个T共价结合而形成双聚体, 因而改变DNA的分子构型 干扰DNA的复制与转录, DNA的复制与转录 因而改变DNA的分子构型,干扰DNA的复制与转录,导致细菌的死亡或 DNA的分子构型, 变异。 变异。 应用：手术室传染病房细菌实验室的空气消毒， 应用：手术室传染病房细菌实验室的空气消毒，或不耐热物品的表 面消毒。 面消毒。
第三节
消毒灭菌的运用
一、医疗器械物品的消毒灭菌
用时需进入无菌组织的物品。所有这些物品都应该灭菌。 （一）高危器械物品 用时需进入无菌组织的物品。所有这些物品都应该灭菌。 用时不进入无菌组织但接触黏膜的器械。采用消毒即可。 （二）中危器械物品 用时不进入无菌组织但接触黏膜的器械。采用消毒即可。 （三）低危器械物品 只接触未损伤皮肤但不进入无菌组织和不接触黏膜的物品。 只接触未损伤皮肤但不进入无菌组织和不接触黏膜的物品。
destroys or removes all microbial life，including bacteria spore and viruses.
3、抑菌(bacteriostasis) ：抑制体内或体外细菌的生长繁殖， 如各种抗生素即为常用抑菌剂。
4、防腐(antisepsis) ：防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法，细菌一般不死亡。 Antisepsis (防腐): Use chemical agents to inhibit or destroy the growth of microorganisms on skin or other living tissue .
3、低效消毒剂（low-level disinfectants）:可杀灭多数细菌繁殖体，但不能杀 低效消毒剂（ 可杀灭多数细菌繁殖体， 低效消毒剂 ） 可杀灭多数细菌繁殖体 灭细菌芽胞、结核分枝杆菌及某些抵抗力较强的真菌和病毒。 灭细菌芽胞、结核分枝杆菌及某些抵抗力较强的真菌和病毒。 1）季铵盐类消毒剂：我国使用最普遍的是苯扎溴铵（新洁尔灭（阳离子表面活 性剂），使用时不能与肥皂（阴离子表面活性剂）合用）。可用于皮肤、粘膜、 物品表面、地面消毒。 2）氯乙定（洗必泰）：为双胍类化合物，不能与阴离子表面活性剂合用，可用 于皮肤、粘膜、物品表面、地面消毒。 3）高锰酸钾：多用于可用于皮肤、粘膜冲洗、浸泡消毒以及食具、蔬菜、水果 的消毒。 消毒剂的应用见表2—2
一般用后清洗、消毒即可。 一般用后清洗、消毒即可。 （四）快速周转的医疗器械
二、室内空气消毒灭菌 紫外线照射（ 最常用； 滤过除菌： 1.物理消毒法 ①紫外线照射（1.5W/m3，1h）最常用；②滤过除菌：空气通过 孔径小于0 μm的高效过滤装置以除去细菌和带菌尘埃 的高效过滤装置以除去细菌和带菌尘埃。 孔径小于0.2 μm的高效过滤装置以除去细菌和带菌尘埃。 2 ．化学消毒法 包括化学消毒剂喷雾和熏蒸： 过氧乙酸（浓度0 喷雾、 包括化学消毒剂喷雾和熏蒸：①过氧乙酸（浓度0.5%）喷雾、
Reduce or eliminate pathogens in or on inanimate objects to a safe level, which are no longer health hazard.
2、灭菌(sterilization) ：杀灭物体上所有微生物的方法。(包括 杀灭病原微生物和非病原微生物、细菌的繁殖体和芽胞)要求比消 毒高。Sterilization (灭菌): A physical or chemical process that completely
消毒剂） 一）、化学消毒剂的杀菌机制(Mechanism of disinfectant(消毒剂） 化学消毒剂的杀菌机制 消毒剂 killing bacteria) ⑴ 菌 体 蛋 白 质 变 性 或 凝 固 （ denaturizing the proteins of bacteria ）：例酚类(高浓度)醇类等; 例酚类(高浓度)醇类等; ⑵干扰细菌的酶系统和代谢（disturb enzyme activity ）：例重 干扰细菌的酶系统和代谢（ 金属与细菌的-SH基结合使有关酶失去活性; 金属与细菌的-SH基结合使有关酶失去活性; 基结合使有关酶失去活性 ⑶损伤菌细胞膜（damage the cellular membrane ）：例表面活 损伤菌细胞膜（ 性剂和脂溶剂（新洁尔灭等） 性剂和脂溶剂（新洁尔灭等）
（二）湿热灭菌法(wet heat sterilization) 湿热灭菌法(wet 1．巴氏消毒法(pasteurization) ：法国巴斯德创用 巴氏消毒法 30秒 ⑴62℃，30分钟；⑵71.7℃15—30秒 62℃ 30分钟； 71. 分钟 15 30 2.煮沸法 3.流动蒸气灭菌法:又称常压蒸气灭菌法 流动蒸气灭菌法: 4.间歇蒸气灭菌法:Arnold(呵诺氏灭菌器) 间歇蒸气灭菌法:Arnold(呵诺氏灭菌器) 呵诺氏灭菌器 此法用于不耐高热的含糖、牛奶等培养基的消毒。 此法用于不耐高热的含糖、牛奶等培养基的消毒。 5.高压蒸气灭菌法:最有效的一种灭菌方法 高压蒸气灭菌法: 121. 15—20分钟。 20分钟 1.05kg/cm2(15 磅 ) 、 121.3℃ ，15 20分钟。用于一般培养 05kg/cm 15磅 生理盐水、手术敷料等耐高温耐湿等物品的灭菌。 基、生理盐水、手术敷料等耐高温耐湿等物品的灭菌。