实验一血常规检查

二、白细胞计数
操作步骤
取小试管1支，加白细胞稀释液0.38ml。
吸上层清液喇洗吸管2-3次，然后立即混匀。 5 充池后待2-3min，用高倍镜依次计数中央大方格四角和
正中共5个中方格内的红细胞，按数上不数下，数左不 数右的原则进行目视计数。 6 计算：红细胞数/L＝5个中方格内红细胞数 ×5×10×201×106
参考值
男: (4.0～5.5)×1012/L 女：（3.5～5.0）×1012/L 新生儿：（6.0～7.0）×1012 /L
方法
手工法(显微镜) 手工计数费事费力,精确性、准确性也较差。
血细胞分析仪(三分类,五分类) 准确性、精确性、效率大大提高。
血细胞分析仪
近年来，随着血液分析仪在国内检验科迅速普 及，使血常规检验的参数逐渐增多，不仅提高 了工作效率和工作质量，而且为临床医生提供 了更广泛的参考数据。血液分析仪的白细胞分 类计数，先后推出了两分类、三分类、四分类 和五分类的仪器。应该说血液分析仪的飞速发 展，使血常规检验进入了新阶段，这是医学检 验的一大进步。
3 阻抗与射频法 通过四个不同检测系统完成：
（1）嗜酸性粒细胞检测系统：特殊的 pH的溶血剂溶解或萎缩除嗜酸性粒细胞 以外的所有细胞。
（2）嗜碱性粒细胞检测系统： （3）淋巴、单核、粒细胞的检测系统： (4）幼稚细胞检测系统：
四 多角度偏振光散射法术
四个角度测定散射光的密度：
白细胞分类原理
1.电阻抗法
电阻抗法白细胞计数原理是根据血细胞 非传导性的性质,以对电解质溶液中悬浮 颗粒在通过计数小孔时引起的电阻变化 进行检测为基础, 进行白细胞计数和体积 测定。
白细胞直方图：两个明显分离的峰：左 峰：小细胞群（淋巴细胞：35-90fl）,两 峰之间：中间细胞群（中间细胞：90160fl）的分布。右峰：大细胞群（粒细 胞：160-450fl）
2.如无上述稀释液时，也可用新鲜配制 的等渗盐水代替
3.正常数值范围内，两次红细胞计数相 差不得超过10%
4.不允许血红蛋白浓度来折算红细胞数
红细胞减少见于： （1）急性或慢性失血。 （2）红细胞遭受物理、化学或生物因素破坏。 （3）缺乏造血因素、造血障碍和造血组织损伤。 （4）各种原因的血管内或血管外溶血。
①0°：前角光散射粗略地测定细胞大小； ②10°：狭角光散射测细胞结源自文库及其复杂性； ③90°：垂直光散射主要对细胞内部颗粒和细
胞成份进行测量；
④90°：90°消偏振光散射（70°～110°）
从这四个角度同时对每个白细胞进行测量，将 白细胞分为嗜酸粒细胞、中性粒细胞、嗜碱性 粒细胞、淋巴细胞和单核细胞5种。
临床意义
红细胞增多见于： （1）严重呕吐、腹泻、大面积烧伤及晚期消化道
肿瘤患者。多为脱水血浓缩使血液中的有形 成分相对地增多所致。 （2）心肺疾病：先天性心脏病、慢性肺脏疾患及 慢性一氧化碳中毒等。因缺氧必须借助大量 红细胞来维持供氧需要。 （3）干细胞疾患：真性红细胞增多症。
注意事项
1.釆血时不能挤压过甚，以免混入组织 液
采用“由上至下，由左至右，顺序如弓” 的顺序，对压边线细胞采取“数上不数 下，数左不数右”的原则
计数池充液时应注意的问题
1.不可断续充液， 2.充液量要适中， 3.充液完成后不可挪动盖玻片。
一 、红细胞计数
操作步骤
1 稀H液释g1C滴液L2，的0.过配5g滤制以后：蒸用N馏a。水CL稀1.释0g到、2N0a02mSlO。4溶·10解H后2O加5.伊0g红、水溶 2 取小试管1支，加红细胞稀释液2.0ml。 3 用清洁干净微量吸管吸取末稍血10ul。 4 擦去管尖外部余血，轻轻吹入红细胞稀释液底部，再轻
异常直方图示例二
分析与实践
该标本镜检结果为幼稚细胞14％。
血小板直方图的应用
拟合曲线的概念。血小板的体积分布呈 对数分布。所有在拟合区内的均为血小 板，在拟合区外的均非血小板。仪器实 际测定的范围为2-20FL,而拟合覆盖范围 为2-70FL.
所有不符合拟合规律的血小板严格意义 上均应镜检即均不可靠。
2 容量、电导、光散射白细胞分类 （VCS）
体积（volume）：电阻抗原理；
电导性（conductivity）：采用高频电磁 探针测量细胞内部结构—细胞核、细胞 质的比例、细胞内的化学成份；
光散射（scantter）：特别具有对细胞颗 粒的构造和颗粒质量的区别能力，细胞 粗颗粒的光散射要比细颗粒强。
各警示标志说明
R1:大血小板，血小板团，有核红细胞，疟原 虫，
R2：异型淋巴细胞，原幼稚细胞，单核细胞， 嗜酸细胞，嗜碱细胞。
R3:单核细胞，嗜酸细胞，嗜碱细胞，原幼细 胞
R4:中性粒细胞过多。
异常直方图示例一
分析与实践
该标本镜检结果为：中幼粒12％，杆状核34 ％，晚幼粒18％，中性粒25％，单核3％，淋 巴细胞8％。 骨髓检查证实为慢性粒细胞白血病。
血细胞计数
熟悉计数室
血细胞计数板系一长方形厚玻片，常用的改良牛氏 (Improved-Neubauer) 计数板在中央横沟的两边各有 一计数室，两计数室结构完全相同。计数室较两边的 盖玻片支柱低0.1毫米。因此，放上盖玻片时，计数板 与其间距即计数室空间的高为0.1毫米。 (见图)在低 倍显微镜下可见计数室被双线划分成９个边长为１毫 米的大方格。四角的大方格又各分为１６个中方格， 这是用来计数白细胞的。中央大方格被划分为２５个 中方格，每一中方格又划分成１６个小方格。中央大 方格的四角及其中心５个中方格为红细胞或血小板计 数范围。(见图)
血常规检查
苏州大学附属第二医院检验科 郭 敏 谢晓芳
血常规检查
血常规检查（blood routine examination）指对外周血中红细胞、白 细胞和血小板数量和质量的化验检查， 包括RBC、Hb、WBC、PLT及白细胞分 类计数（DC），同时注意观察血涂片中 红细胞及白细胞形态有无异常，某些情 况下应注意观察有无异常细胞或寄生虫 等。