大鼠腹主动脉采血技巧

大鼠腹主动脉采血技巧

动脉采血有一定的难度,采血失败常导致或影响动脉血气分析化验结果的准确性。临床对患者常选择:股动脉、桡动脉、足背动脉进行动脉采血。大鼠一般采用腹主动脉采血法,腹主动脉采血法适用于取血量大,不易溶血,不损伤器官,不会出现因操作不当造成的气栓与淤血。

一、其具体操作步骤是:

1. 将大鼠腹腔注射10%水合氯醛以0.03 mL /kg 麻醉;

2. 仰卧固定在大鼠手术台上,背部放置一粗试管以充分暴露腹主动脉,常规消毒后用手术剪刀沿腹正中线剪开腹腔;

3. 准备采血时,先用棉花把肠管推开,将腹主动脉暴露完全(参见下图);

4. 在腹主动脉分叉处向心端1~3 mm处最佳穿刺点。术者右手持穿刺针,针尖斜面朝下,入针角度约25°~30°,朝向心端方向刺入,深度以5 mm左右为宜;

5. 针进血管后尽量不要抖动,缓慢抽血。一般体重200~300 g大鼠可采血液5 mL以上,当然要技术熟练以后~一般测血气,可能需要0.2-0.5ml的血液,具体问问你们单位的检验部门

(学习的目的是增长知识,提高能力,相信一分耕耘一分收获,努力就一定可以获得应有的回报)

小鼠、大鼠采血法介绍

小鼠、大鼠采血法 1.剪尾采血 当所需血量很少时采用本法。固定动物并露出鼠尾。将尾部毛剪去后消毒,然后浸在45℃左右的温水中数分钟,使尾部血管充盈。再将尾擦干,用锐器(刀或剪刀)割去尾尖0.3-0.5cm,让血液自由滴入盛器或用血红蛋白吸管吸取,采血结束,伤口消毒并压迫止血。也可在尾部作一横切口,割破尾动脉或静脉,收集血液的方法同上。每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取血0.1ml,大鼠0.3~0.5ml。 2.鼠尾刺血法 大鼠用血量不多时(仅做白细胞计数或血红蛋白检查),可采用本法。先将鼠尾用温水擦拭,再用酒精消毒和擦拭,使鼠尾充血。用7号或8号注射针头,刺入鼠尾静脉,拔出针头时即有血滴出,一次可采集10~50mm3。如果长期反复取血,应先靠近鼠尾末端穿刺,以后再逐渐向近心端穿刺。 3.眼眶静脉丛采血 采血者的左手拇食两指从背部较紧地握住小鼠或大鼠的颈部(大鼠采血需带上纱手套),应防止动物窒息。当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧,使眶后静脉丛充血。右手持续接7号针头的1ml注射器或长颈(3~4cm)硬质玻璃滴管(毛细管内径0.5-1.0mm),使采血器与鼠面成45℃的夹角,由眼内角刺入,针头斜面先向眼球,刺入后再转180度使斜面对着眼眶后界。刺入浓度,小鼠约2~3mm,大鼠约4~5mm。当感到有阻力时即停止推进,同时,将针退出约0.1-0.5mm,边退边抽。若穿刺适当血液能自然流入毛细管中,当得到所需的血量后,即除去加于颈部的压力,同时,将采血器拔出,以防止术后穿刺孔出血。若技术熟练,用本法短期内可重复采血均无多大困难。左右两眼轮换更好。体重20-25g的小鼠每次可采血0.2-0.3ml;体重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml,可适用于某些生物化学项目的检验。 4.断头取血 采血者的左手拇指和食指以背部较紧地握住大(小)鼠的颈部皮肤,并作动物头朝下倾的姿势。右手用剪刀猛剪鼠颈,约1/2-4/5的颈部前剪断,让血自由滴入盛器。小鼠可采用约0.8~1.2ml;大鼠约5-10ml。 5.心脏采血 鼠类的心脏较小,且心率较快,心脏采血比较困难,故少用。活体采血方法与豚鼠相同。若做开胸一次死亡采血,先将动物作深麻醉,打开胸腔,暴露心脏,用针头刺入右心室,吸取血液。小鼠约0.5-0.6ml;大鼠约0.8-1.2ml。 6.颈动静脉采血 先将动物仰位固定,切开颈部皮肤,分离皮下结缔组织,使颈静脉充分暴露,可用注射器吸出血液。在气管两侧分离出颈动脉,离心端结扎,向心端剪口将血滴入试管内。 7.腹主动脉采血

实验动物采血指南汇总

实验动物采血指南 采血方法的选择,决定于实验的目的所需血量以及动物种类。凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、血红蛋白的测定,血液涂片以及酶活性微量分析法等,可刺破组织取毛细血管的血。当需血量较多时可作静脉采血。静脉采血时,若需反复多次,应自远离心脏端开始,以免发生栓塞而影响整条静脉。例如,研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐代谢紊乱,需要比较动、动脉血氧分压、二氧化碳分压和血液pH值以及K+、Na+、CI-离子浓度,必须采取动脉血液。采血时要注意:⑴采血场所有充足的光线;室温夏季最好保持在25-28℃,冬季,15-20℃为宜;⑵采血用具有采用部位一般需要进行消毒;⑶采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥;⑷若需抗凝全血,在注射器或试管内需预先加入抗凝剂. 1.割(剪)尾采血当所需血量很少时采用本法。固定动物并露出鼠尾。将尾部毛剪去后消毒,然后浸在45℃左右的温水中数分钟,使尾部血管充盈。再将尾擦干,用锐器(刀或剪刀)割去尾尖0.3-0.5cm,让血液自由滴入盛器或用血红蛋白吸管吸取,采血结束,伤口消毒并压迫止血。也可在尾部作一横切口,割破尾动脉或静脉,收集血液的方法同上。每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取血0.1ml,大鼠0.3~

0.5ml。 2.鼠尾刺血法大鼠用血量不多时(仅做白细胞计数或血红蛋白检查),可采用本法。先将鼠尾用温水擦拭,再用酒精消毒和擦拭,使鼠尾充血。用7号或8号注射针头,刺入鼠尾静脉,拔出针头时即有血滴出,一次可采集10~50mm3。如果长期反复取血,应先靠近鼠尾末端穿刺,以后再逐渐向近心端穿刺。 3.眼眶静脉丛采血采血者的左手拇食两指从背部较紧地握住小鼠或大鼠的颈部(大鼠采血需带上纱手套),应防止动物窒息。当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧,使眶后静脉丛充血。右手持续接7号针头的1ml注射器或长颈(3~4cm)硬质玻璃滴管(毛细管内径0.5-1.0mm),使采血器与鼠面成45℃的夹角,由眼内角刺入,针头斜面先向眼球,刺入后再转180度使斜面对着眼眶后界。刺入浓度,小鼠约2~3mm,大鼠约4~5mm。当感到有阻力时即停止推进,同时,将针退出约0.1-0.5mm,边退边抽。若穿刺适当血液能自然流入毛细管中,当得到所需的血量后,即除去加于颈部的压力,同时,将采血器拔出,以防止术后穿刺孔出血。若技术熟练,用本法短期内可重复采血均无多大困难。左右两眼轮换更好。体重20-25g的小鼠每次可采血0.2-0.3ml;体重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml,可适用于某些生物化学项目的检验。 4.断头取血采血者的左手拇指和食指以背部较紧地握住大(小)鼠的颈部皮肤,并作动物头朝下倾的姿势。右手用剪刀猛剪鼠颈,约1/2-4/5的颈部前剪断,让血自由滴入盛器。小鼠可采用约0.8~1.2ml;大鼠约5-10ml。 5.心脏采血鼠类的心脏较小,且心率较快,心脏采血比较困难,故少用。活体采血方法与豚鼠相同。若做开胸一次死亡采血,先将动物作深麻醉,打开胸腔,暴露心脏,用针头刺入右心室,吸取血液。小鼠约0.5-0.6ml;大鼠约0.8-1.2ml。 6.颈动静脉采血先将动物仰位固定,切开颈部皮肤,分离皮下结缔组织,使颈静脉充分暴露,可用注射器吸出血液。在气管两侧分离出颈动脉,离心端结扎,向心端剪口将血滴入试管内。 7.腹主动脉采血最好先将动物麻醉,仰卧固定在手术架上,从腹正中线皮肤切开腹腔,使腹主动脉清楚暴露。用注射器吸出血液,防止溶血。或用无齿镊子剥离结缔组织,夹住动脉近心端,用尖头手术剪刀,剪断动脉,使血液喷入盛器。 8.股动(静)脉采血先由助手握住动物,采血者左手拉直动物下肢,使静脉充盈。或者以搏动为指标,右手用注射器刺入血管。体重15-20g 小鼠采血约0.2-0.8ml,大鼠约0.4-0.6ml。 (二)豚鼠采血法 1.耳缘剪口采血将耳消毒后,用锐器(刀或刀片)割破耳缘,在切口边缘涂抹20%柠檬酸钠溶液,阻止血凝,则血可自切口自动流出,进入盛器。操作时,使耳充血效果较好。此法能采血0.5ml左右。 2.心脏采血取血前应探明心脏搏动最强部位,通常在胸骨左缘的正中,选心跳最显的部位作穿刺。针头宜稍细长些,以免发生手术后穿刺孔出血,其操作手法详见兔心脏采血。因豚鼠身体较小,一般可不必将动物固定在解剖台上,而可由助手握住前后肢进行采血即可。成年豚鼠每周采血应不超过10ml为宜。 3.肌动脉采血将动脉仰位固定在手术台上,剪去腹股沟区的毛,麻醉后,局部用碘酒消毒。切开长约2-3cm的皮肤,使股动脉暴露及分离。然后,用镊子提起股动脉,远端结扎,近端用止血钳夹住,在动脉中央剪一小孔,用无菌玻璃小导管或聚乙烯、聚四氟乙烯管插入,放开止血钳,血液即导管口流出。一次可采血10-20ml。 4.背中足静脉取血助手固定动物,将其右或左右膝关节伸直提到术者面前。术者将

实验大鼠取材方案

实验大鼠取材方案 [取材内容] 1.取大鼠静脉血,分离血浆、血清,-80℃保存。 2.取大鼠门静脉血,分离血清,-80℃保存。 3.取大鼠甲状腺组织,制备甲状腺电镜观察标本,其余组织液氮冰冻保存备用。 4.取大鼠胸腺组织,制备胸腺组织电镜观察标本、免疫组化观察标本,其余组织液氮冰冻 保存备用。 5.取大鼠肺组织,制备肺组织电镜观察标本、免疫组化观察标本,其余组织分装液氮冰冻 保存备用。 6.取大鼠肝脏组织,制备肝脏组织电镜观察标本、免疫组化观察标本,其余组织分装液氮 冰冻保存备用。 7.取大鼠胰腺组织,制备胰腺组织电镜观察标本、免疫组化观察标本,其余组织分装液氮 冰冻保存备用。 8.取大鼠肠系膜淋巴结组织,制备肠系膜淋巴结免疫组化观察标本,其余组织液氮冰冻保 存。 9.取大鼠胃部组织,制备胃粘膜组织电镜观察标本、免疫组化观察标本,其余组织分装液 氮冰冻保存备用。 10.取大鼠空肠组织,制备肠道粘膜组织电镜观察标本、免疫组化观察标本,其余组织分装 液氮冰冻保存备用。 11.取大鼠回肠组织,制备肠道粘膜组织电镜观察标本、免疫组化观察标本,其余组织分装 液氮冰冻保存备用。 12.取大鼠肾组织,制备左肾组织电镜观察标本、免疫组化观察标本,右肾组织液氮冰冻保 存备用。 13.取大鼠肾上腺组织,左侧制备肾上腺组织免疫组化观察标本,右侧肾上腺液氮冰冻保存 备用。 14.取大鼠睾丸组织,左侧制备电镜观察标本、免疫组化观察标本,右侧睾丸液氮冰冻保存 备有。 [试剂及药品] 戊巴比妥钠或10%水合氯醛、75%酒精、生理盐水、多聚甲醛或福尔马林液、3%戊二醛磷酸盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4%戊二醛、肝素钠、器械液(器械清洗消毒液) [器材] 备皮刀、解剖台、弯盘、组织剪、眼科剪、手术刀柄、刀片、小号弯式血管钳、蚊式血管钳、眼科镊、无损伤血管夹、聚乙烯管、三通管、丝线、培养皿、天平、一次性离心管(5ml、

大鼠取材方案

实验大鼠取材方案 [取材内容] 1. 取大歸脉血分离血衆血清-80 C保存。 2. 取大鼠门静脉血分离血清-80 C保存。 3. 取大鼠甲状腺组织.制备甲状腺电镜观察标本其余组织液氮冰冻保存备用〃 4. 取大鼠胸腺组织制备胸腺组织电镜观察标本、免疫组化孵标本其余组织液氮冰冻保存备用。 5. 取大鼠肺组织制备肺组织电镜观察标本,免疫组化观察标本其余组织分装液氮冰搽 保存备用。 6. 取大鼠肝脏组级制备肝脏组织电镜观察标本、免疫组化观察标本其余组织分装液氮冰冻保存备用。 7. 取大鼠觴组级制备康腺组织电镜观察标芯免疫组化观察标本其余组织分装液氮 冰冻保存备用。 8. 取大鼠肠系膜淋巴结组织制备肠系膜淋巴结免疫组化观察标本其余组织液氮冰冻保存。 9. 取鳩胃部组级制备胃粘膜组织电飙察标本免疫组化观察标本其余组织分装液氮冰冻保存备用。 10. 取大鼠空肠组级制备肠道粘膜组级电镜观察标本■免疫组化观集标本其余组级分装

液氮冰冻保存备用。 11. 取大鼠回肠组织制备肠道粘膜组织电镜观舉标技免疫组化观察标本其余组 织分装 液氮冰冻保存备用。 12. 取大關组织制备左肾组级电镜观察标本、免疫组化观察标本右肾组织液氮 冰探保 存备用。 13. 取大嵐肾上腺组织左侧制备肾上腺组级免疫组化观察标本右侧肾上腺液氮冰冻保 存 备用。 14. 取大鼠睾丸组级左侧制备电镜观察标本、免疫组化观察标本右侧睾丸液氮冰冻保存 备有。 [试剂及药品] 戊巴比妥钠或10%水合氯醛、75%酒精、生理盐水、多聚甲醛或福尔马林液、 3 应二醛 磷酸 盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或 4 戍二肚肝素撤m器械清洗消毒液 [器材] 备皮刀、解剖台、弯盘、组织剪、眼科剪、手术刀柄、刀片、小号弯式血管钳、蚊式血管钳、 眼科镊、无损伤血管夹、聚乙烯管、三通管、丝线、培养皿、天平、一次性离2ml、1.5ml 、冻存氤肝麹真空采血管、微量移液議高速敲杠注射器10ml、5ml、

大鼠取血方法

大鼠取血方法 1. 割(剪)尾采血:当所需血量很少时采用本法。每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取 血0.1ml,大鼠0.3?0.5ml。 1.4見尖采血才法 将大杖囲進好?阳50乜左右SL水根池城部妁2 血骨 充血后?用球消黑、擦干BU匕用消澎手术旳的去尾尖3 ■ 10 mi叭魅后从用根那向尼尖檢忙血fl朋尖流岀。此法町采L5 -2 mL 2. 鼠尾刺血法:大鼠用血量不多时(仅做白细胞计数或血红蛋白检查),可采用本法。先将鼠尾用温水擦拭,再用酒精消毒和擦拭,使鼠尾充血。用7号或8号注射针头,刺入鼠尾静脉, 拔出针头时即有血滴出,一次可采集10?50mm3。如果长期反复取血,应先靠近鼠尾末端 穿刺,以后再逐渐向近心端穿刺。 3. 眼眶静脉丛采血:体重20-25g的小鼠每次可采血0.2-0.3ml ;体重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml,可适用于某些生物化学项目的检验。 将天M冊建庄实验台边Sfir左手抓囂大區拥那皮肤囿定头 部,井轻轻向下压迫用導先稚备好的io 号舍JM甘头顶蝎(怦尖斛閒朝内人垂氏插人内就并向眼底方向转动以便切开押体丛「血敕便会连缨不斷地溝人采血用此法大约可取?-3 取血宪毕?立刻用脱册郴压迫也 环境材料 0.9mm x 100mm,背牛人习櫃便用丫 经常骨—断.30mm晴、弁去屮阀段= EP 曲虻人0.1% IH-比钠< >150U/mgJ 0J mL-均匀涧湿? 50P减下I輻 适帀1mL伞血的抗甌效果肛人 取血则感须熒I R J衿住骨的质昂.杯号井汕. 邀当劣备. 1 Mi ■. ■■ iV ■■■. >■ -K> ■宽敬台曲*輕了F组多步驟同时操作] | ■ cm ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■■ ■琴 L9tt?EP &J

小鼠取血方法

1.割(剪)尾采血当所需血量很少时采用本法。固定动物并露出鼠尾。将尾部毛剪去后消毒,然后浸在45℃左右的温水中数分钟,使尾部血管充盈。再将尾擦干,用锐器(刀或剪刀)割去尾尖0.3-0.5cm,让血液自由滴入盛器或用血红蛋白吸管吸取,采血结束,伤口消毒并压迫止血。也可在尾部作一横切口,割破尾动脉或静脉,收集血液的方法同上。每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取血0.1ml,大鼠0.3~0.5ml。 2.鼠尾刺血法大鼠用血量不多时(仅做白细胞计数或血红蛋白检查),可采用本法。先将鼠尾用温水擦拭,再用酒精消毒和擦拭,使鼠尾充血。用7号或8号注射针头,刺入鼠尾静脉,拔出针头时即有血滴出,一次可采集10~50mm3。如果长期反复取血,应先靠近鼠尾末端穿刺,以后再逐渐向近心端穿刺。 3.眼眶静脉丛采血采血者的左手拇食两指从背部较紧地握住小鼠或大鼠的颈部(大鼠采血需带上纱手套),应防止动物窒息。当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧,使眶后静脉丛充血。右手持续接7号针头的1ml注射器或长颈(3~4cm)硬质玻璃滴管(毛细管内径0.5-1.0mm),使采血器与鼠面成45℃的夹角,由眼内角刺入,针头斜面先向眼球,刺入后再转180度使斜面对着眼眶后界。刺入浓度,小鼠约2~3mm,大鼠约4~5mm。当感到有阻力时即停止推进,同时,将针退出约0.1-0.5mm,边退边抽。若穿刺适当血液能自然流入毛细管中,当得到所需的血量后,即除去加于颈部的压力,同时,将采血器拔出,以防止术后穿刺孔出血。若技术熟练,用本法短期内可重复采血均无多大困难。左右两眼轮换更好。体重20-25g的小鼠每次可采血0.2-0.3ml;体重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml,可适用于某些生物化学项目的检验。 4.断头取血采血者的左手拇指和食指以背部较紧地握住大(小)鼠的颈部皮肤,并作动物头朝下倾的姿势。右手用剪刀猛剪鼠颈,约1/2-4/5的颈部前剪断,让血自由滴入盛器。小鼠可采用约0.8~1.2ml;大鼠约5-10ml。 5.心脏采血鼠类的心脏较小,且心率较快,心脏采血比较困难,故少用。活体采血方法与豚鼠相同。若做开胸一次死亡采血,先将动物作深麻醉,打开胸腔,暴露心脏,用针头刺入右心室,吸取血液。小鼠约0.5-0.6ml;大鼠约0.8-1.2ml。 6.颈动静脉采血先将动物仰位固定,切开颈部皮肤,分离皮下结缔组织,使颈静脉充分暴露,可用注射器吸出血液。在气管两侧分离出颈动脉,离心端结扎,向心端剪口将血滴入试管内。 7.腹主动脉采血最好先将动物麻醉,仰卧固定在手术架上,从腹正中线皮肤切开腹腔,使腹主动脉清楚暴露。用注射器吸出血液,防止溶血。或用无齿镊子剥离结缔组织,夹住动脉近心端,用尖头手术剪刀,剪断动脉,使血液喷入盛器。 8.股动(静)脉采血先由助手握住动物,采血者左手拉直动物下肢,使静脉充盈。或者以搏动为指标,右手用注射器刺入血管。体重15-20g 小鼠采血约0.2-0.8ml,大鼠约0.4-0.6ml。

实验动物采血完全指南

实验动物采血完全指南 凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、血红蛋白的测定,血液涂片以及酶活性微量分析法等,可刺破组织取毛细血管的血。当需血量较多时可作静脉采血。静脉采血时,若需反复多次,应自远离心脏端开始,以免发生栓塞而影响整条静脉。例如,研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐代谢紊乱,需要比较动、动脉血氧分压、二氧化碳分压和血液pH值以及K+、Na+、CI-离子浓度,必须采取动脉血液。采血时要注意:⑴采血场所有充足的光线;室温夏季最好保持在25-28℃,冬季,15-20℃为宜;⑵采血用具有采用部位一般需要进行消毒;⑶采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥;⑷若需抗凝全血,在注射器或试管内需预先加入抗凝剂. 1.取少量血 a.尾静脉大鼠、小鼠 b.耳静脉兔、狗、猫、猪、山羊、绵羊 c.眼底静脉丛兔、大鼠、小鼠 c.舌下静脉兔 d.腹壁静脉青蛙、蟾蜍 e.冠、脚蹼皮下静脉鸡、鸭、鹅 2.取中量血 a.后肢外侧皮下小隐静脉狗、猴、猫 b.前肢内侧皮下头静脉狗、猴、猫 c.耳中央动脉兔 d.颈静脉狗、猫、兔 e.心脏豚鼠、大鼠、小鼠 f.断头大鼠、小鼠 g.翼下静脉鸡、鸭、鸽、鹅 h.颈动脉鸡、鸭、鸽、鹅 3.取大量血 a.股动脉、颈动脉狗、猴、猫、兔 b.心脏狗、猴、猫、兔 c.颈静脉马、牛、山羊、绵羊 d.摘眼球大鼠、小鼠

采动物品种最大安全采血量(ml) 最小致死采血量(ml) 小鼠0.2 0.3 大鼠 1 2 豚鼠 5 10 兔10 40 狼狗100 500 猎狗50 200 猴15 60 1.割(剪)尾采血当所需血量很少时采用本法。固定动物并露出鼠尾。将尾部毛剪去后消毒,然后浸在45℃ 左右的温水中数分钟,使尾部血管充盈。再将尾擦干,用锐器(刀或剪刀)割去尾尖0.3-0.5cm,让血液自由滴入盛器或用血红蛋白吸管吸取,采血结束,伤口消毒并压迫止血。也可在尾部作一横切口,割破尾动脉或静脉,收集血液的方法同上。每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取血0.1ml,大鼠 0.3~0.5ml。 2.鼠尾刺血法大鼠用血量不多时(仅做白细胞计数或血红蛋白检查),可采用本法。先将鼠尾用温水擦 拭,再用酒精消毒和擦拭,使鼠尾充血。用7号或8号注射针头,刺入鼠尾静脉,拔出针头时即有血滴出,一次可采集10~50mm3。如果长期反复取血,应先靠近鼠尾末端穿刺,以后再逐渐向近心端穿刺。 3.眼眶静脉丛采血采血者的左手拇食两指从背部较紧地握住小鼠或大鼠的颈部(大鼠采血需带上纱手 套),应防止动物窒息。当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧,使眶后静脉丛充血。右手持续接7号针头的1ml注射器或长颈(3~4cm)硬质玻璃滴管(毛细管内径0.5-1.0mm),使采血器与鼠面成45℃的夹角,由眼内角刺入,针头斜面先向眼球,刺入后再转180度使斜面对着眼眶后界。刺入浓度,小鼠约2~3mm,大鼠约4~5mm。当感到有阻力时即停止推进,同时,将针退出约0.1-0.5mm,边退边抽。若穿刺适当血液能自然流入毛细管中,当得到所需的血量后,即除去加于颈部的压力,同时,将采血器拔出,以防止术后穿刺孔出血。若技术熟练,用本法短期内可重复采血均无多大困难。 左右两眼轮换更好。体重20-25g的小鼠每次可采血0.2-0.3ml;体重200-300g大鼠每次可采血 0.5-1.0ml,可适用于某些生物化学项目的检验。 4.断头取血采血者的左手拇指和食指以背部较紧地握住大(小)鼠的颈部皮肤,并作动物头朝下倾的姿 势。右手用剪刀猛剪鼠颈,约1/2-4/5的颈部前剪断,让血自由滴入盛器。小鼠可采用约0.8~1.2ml; 大鼠约5-10ml。 5.心脏采血鼠类的心脏较小,且心率较快,心脏采血比较困难,故少用。活体采血方法与豚鼠相同。 若做开胸一次死亡采血,先将动物作深麻醉,打开胸腔,暴露心脏,用针头刺入右心室,吸取血液。 小鼠约0.5-0.6ml;大鼠约0.8-1.2ml。 6.颈动静脉采血先将动物仰位固定,切开颈部皮肤,分离皮下结缔组织,使颈静脉充分暴露,可用注 射器吸出血液。在气管两侧分离出颈动脉,离心端结扎,向心端剪口将血滴入试管内。 7.腹主动脉采血最好先将动物麻醉,仰卧固定在手术架上,从腹正中线皮肤切开腹腔,使腹主动脉清 楚暴露。用注射器吸出血液,防止溶血。或用无齿镊子剥离结缔组织,夹住动脉近心端,用尖头手术

实验大鼠常见脏器形态学取材方法和注意事项

实验大鼠常见脏器形态学取材方法和注意事项 [取材内容] 大鼠肺组织、大鼠肝脏组织、大鼠胰腺组织、大鼠胃部组织、大鼠空场回肠组织、大鼠肾组织、门静脉血、淋巴组织、大鼠心脏。 [试剂及药品] 戊巴比妥钠或10%水合氯醛、75%酒精、生理盐水、多聚甲醛或福尔马林液、3戊二醛磷酸盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4戊二醛、肝素钠、器械液器械清洗消毒液 [器材] 备皮刀、解剖台、弯盘、组织剪、眼科剪、手术刀柄、刀片、小号弯式血管钳、蚊式血管钳、眼科镊、无损伤血管夹、聚乙烯管、三通管、丝线、培养皿、天平、一次性离2ml、1.5ml 、冻存管、肝素锂真空采血管、微量移液器、高速离心机、注射器10ml、5ml、 2ml、无菌手套、冰箱、冰盒、液氮罐 [取材动物] 大鼠 [取材步骤] 1. 取材前夜禁食,自由饮水。 2. 小鼠称重,按照50mg/kg的比例用5ml的注射器配合针头抽取戊巴比妥钠备用。 3. 正左手的小指和无名指抓住大鼠的尾巴,另外三个手指抓住大鼠的颈部,使大鼠头部向向下。这样腹腔中的器官就会自然倒向胸部,防止注射器刺入时损伤大肠、小肠等器官。右手持注射器,从腹部近腿根处刺入后再腹部皮下穿行深入,动作轻柔,缓慢注射。注射完药物后,缓缓拔出针头,手指按住针口对小鼠腹部轻柔按摩,促进麻醉药物的吸收,掐小鼠尾部检测小鼠麻醉程度。 4.将小鼠四肢固定于解剖台上,暴露小鼠整个胸部和腹部,修剪去腹部毛发,75%酒精消毒。 5.沿腹侧正中线自阴茎上源由下而上剪开腹部皮肤直至剑突,向两侧钝性剥开皮肤与皮下组织,暴露腹壁浅肌层。沿白线钝性分离腹壁肌肉,剪开腹膜,暴露腹腔,将肝脏向上翻起,显露肝门。 6.门静脉血采集:将剪成斜口的聚乙烯管尖端背向肝门方向插入门静脉,抽取门静脉血2ml,无创血管夹夹闭门静脉止血。将抽取门静脉血加入一次性离心管低温静置过夜,4℃离心,3000-3500/min,10分钟,吸出上清液,分装,-80摄氏度保存备用。 7.肝脏取材:结扎剪断肝门管道系统,钝锐结合完整取出大鼠肝脏,放置于无菌培养皿,生理盐水冲洗,称重并记录。①切取肝左叶约1mm×1mm×1mm组织3

大鼠和小鼠的采血方法

大鼠和小鼠的采血方法(最全) 这里主要介绍几种大小鼠的采血方法,以帮助试验中需要用到相关技术的人员。 1)尾尖取血: 当所需血量很少时采用本法。固定动物并历出鼠尾,将鼠尾在 45 C温水中浸泡数分钟,也可用二甲苯等化学药物涂擦,使局新血管 扩张。将鼠尾擦干,剪去尾尖,血自尾尖流出,让血液滴入盛器或直接用移液器吸取。如需间隔一定时间,多次采取鼠尾尖部血液,每次采血时,将鼠尾剪去很小一段,取血后,先用棉球压迫止血并立即用6%液体火棉胶涂于尾巴伤口处,使伤口外结一层火棉胶薄膜,保护伤口。也可采用切割尾静脉的方法采血,三根尾势脉可交替切割,并自尾尖向尾根方向切割,每次可取0.2?0.3ml血,切割后用棉球压迫止血。这种采血方法在大鼠进行较好,可以较长的间隔时间连续取血,进行血常规检查。 (2)眼眶后静脉丛取血: 当需中等量的血液,而又需避免动物死亡时采用此法。用左手固定鼠,尽量捏紧头部皮肤,使头固定,并轻轻向下压迫颈部两侧,引起头部静脉血液回流困难,使眼球充分外突(示眼眶后静脉丛充血),右手持毛细玻璃管,沿内眦眼眶后壁向喉头方向旋转刺入。刺入深度小鼠2?3mm ,大鼠4?5mm。当感到有阻力时再稍后退,保持水平位,稍加吸引,由于血压的关系,血液即流人玻璃管中。得到所需的血量后,拨出毛细管。若手法恰当,小鼠约可采血0.2?0.3ml,大鼠约可采血0.4?

0.6ml。 (3)断头取血: 当需要较大量的血液,而又不需继续保存动物生命时采用此法。左手捉持动物,使其头略向下倾,右手持剪刀猛力剪掉鼠头,让血液滴入盛器。小鼠可采血0.8?1.0ml,大鼠可采用5?8ml。 (4)眶动脉和眶静脉取血: 此法既能采取较大量的血液,又可避免断头取血法中因组织液的混入导致溶血的现象,现常取代断头取血法。先使动物眼球突出充血后,以弯头眼科镊迅速钳取眼球,并将鼠倒置,头向下,眼眶内很快流出血液,让血液滴入盛器,直至不流为止。此法由于取血过程中动物未死,心脏不断在跳动,因此取血量比断头法多,一般可取鼠体重4?5 %的血液量,是一种较好的取血方法。 (5)心脏取血: 动物仰卧固定在固定板上,剪去心前区部位的被毛,用碘酒酒精消毒皮肤。在左侧第3?4肋间,用左手食指摸到心搏处,右手取连有4?5号针头的注射器,选择心搏最强处穿刺,当针刺入心脏时,血液由于心脏跳动的力量自动进人注射器。此法要求实验者掌握以下要点:要迅速而直接插入心脏,否则,心脏将从针尖处滑脱;如第一次没刺准,将针头抽出重刺,不要在心脏周围乱探,以免损伤心、肺; 要缓慢而稳定的抽吸,否则,太多的真空反而使心脏塌陷。若不需保留动物生命 时,也可麻*醉后切开动物胸部,将注射器直接刺人心脏抽吸血液。(6)大血管取血:

大鼠和小鼠的采血方法(最全)

大鼠和小鼠的采血方法(最全)这里主要介绍几种大小鼠的采血方法,以帮助试验中需要用到相关技术的人员。 1)尾尖取血: 当所需血量很少时采用本法。固定动物并历出鼠尾,将鼠尾在45℃温水中浸泡数分钟,也可用二甲苯等化学药物涂擦,使局新血管扩张。将鼠尾擦干,剪去尾尖,血自尾尖流出,让血液滴入盛器或直接用移液器吸取。如需间隔一定时间,多次采取鼠尾尖部血液,每次采血时,将鼠尾剪去很小一段,取血后,先用棉球压迫止血并立即用6%液体火棉胶涂于尾巴伤口处,使伤口外结一层火棉胶薄膜,保护伤口。也可采用切割尾静脉的方法采血,三根尾势脉可交替切割,并自尾尖向尾根方向切割,每次可取0.2~0.3ml血,切割后用棉球压迫止血。这种采血方法在大鼠进行较好,可以较长的间隔时间连续取血,进行血常规检查。 (2)眼眶后静脉丛取血: 当需中等量的血液,而又需避免动物死亡时采用此法。用左手固定鼠,尽量捏紧头部皮肤,使头固定,并轻轻向下压迫颈部两侧,引起头部静脉血液回流困难,使眼球充分外突(示眼眶后静脉丛充血),右手持毛细玻璃管,沿内眦眼眶后壁向喉头方向旋转刺入。刺入深度小鼠2~3mm,大鼠4~5mm。当感到有阻力时再稍后退,保持水平位,稍加吸引,由于血压的关系,血液即流人玻璃管中。得到所需的血量后,拨出毛细管。若手法恰当,小鼠约可采血0.2~0.3ml,大鼠

约可采血0.4~0.6ml。 (3)断头取血: 当需要较大量的血液,而又不需继续保存动物生命时采用此法。左手捉持动物,使其头略向下倾,右手持剪刀猛力剪掉鼠头,让血液滴入盛器。小鼠可采血0.8~1.0ml,大鼠可采用5~8ml。 (4)眶动脉和眶静脉取血: 此法既能采取较大量的血液,又可避免断头取血法中因组织液的混入导致溶血的现象,现常取代断头取血法。先使动物眼球突出充血后,以弯头眼科镊迅速钳取眼球,并将鼠倒置,头向下,眼眶内很快流出血液,让血液滴入盛器,直至不流为止。此法由于取血过程中动物未死,心脏不断在跳动,因此取血量比断头法多,一般可取鼠体重4~5%的血液量,是一种较好的取血方法。 (5)心脏取血: 动物仰卧固定在固定板上,剪去心前区部位的被毛,用碘酒酒精消毒皮肤。在左侧第3~4肋间,用左手食指摸到心搏处,右手取连有4~5号针头的注射器,选择心搏最强处穿刺,当针刺入心脏时,血液由于心脏跳动的力量自动进人注射器。此法要求实验者掌握以下要点:要迅速而直接插入心脏,否则,心脏将从针尖处滑脱;如第一次没刺准,将针头抽出重刺,不要在心脏周围乱探,以免损伤心、肺;要缓慢而稳定的抽吸,否则,太多的真空反而使心脏塌陷。若不需保留动物生命时,也可麻*醉后切开动物胸部,将注射器直接刺人心脏抽吸血液。

常用实验动物的采血方法简介

常用实验动物的采血方法 一小鼠和大鼠的采血方法 1、剪尾采血:需血量较少时常用此法。先将动物固定,将鼠尾浸在50℃左右温水中浸泡几分钟或用酒精棉球或二甲苯涂擦鼠尾,使尾部血管充盈,剪去尾尖1~2mm(小鼠)或3~5mm(大鼠),便血液顺血管壁自由流入试管或用血红蛋白吸管吸取。采血结束时,伤口消毒并用棉球压迫止血。此法每只鼠一般可采血 10次以上,小鼠每次可取血0.1mL左右,大鼠可取血0.3~0.5ml。 2、眶后静脉丛采血:操作者一手固定小鼠或大鼠,拇指和食指尽量将鼠头部皮肤捏 紧,或轻轻压迫颈部两侧,使鼠眼球突出,眶后静脉丛充血,另一只手持毛细采血管,以45°从内眼角刺入,并向下旋转,感觉刺入静脉丛后,再向外边退边吸,当得到所需血量后,放松加于颈部的压力,并拔出采血器,以防穿刺孔出血。若技术熟练,此方法在短斯内可重复采血,小鼠一次可采血0.2~0.3ml,大鼠可采血约0.5ml。如只进行一次取血,可采用摘眼球法,右手取一眼科弯镊,在鼠右或左侧眼球根部将眼球摘去,并将鼠倒置;头向下,抽取血液。 3、鼠装进固定器,漏出尾巴,同1,使尾部血管充盈,作好尾部消毒,用1 ml针筒接好4号针头,穿刺尾静脉,抽取血液。 4、腋下采血:将麻醉后的小鼠仰卧固定,剪开腋下皮肤,钝性分离腋下的胸肌等组织,暴露腋下血管,剪断腋下静脉,用注射器或吸管吸血。 5、断头采血:用剪刀迅速剪掉动物头部,立即将动物头朝下,提起动物,血液可流入试管中。 6、心脏采血:切开动物胸膛,直接从见到的心脏内采血,也可剪破心脏直接用注射器或吸管吸血。 7、股动脉采血:大量取血时常用此法。需手术分离股动脉,用注射器套上针头刺入血管取血或剪断股动脉用吸管吸取血样,小鼠的一次采血量可达 0.5ml,大鼠可达2.0ml,操作时防止喷血。 二豚鼠、家兔的采血方法 1、家兔耳缘静脉采血 穿刺采血法:是家兔最常用的采血方法。具体方法同耳缘静脉注射给药。此法一次可采血5~lOml,可多次重复使用。针头不可连接注射器,直接让血液滴在有抗凝剂的试管内。 切割采血法:当兔耳部血管被充分扩张后,可用刀片割破耳缘静脉,或用注射针刺破耳缘静脉,让血液自然流出。采血穿刺和注射穿刺方向不同。采血穿刺逆血流方向行针,采血量越大,越要靠近根部行针。 2、兔耳中央动脉采血:经兔耳中央的一条较粗、颜色鲜红的动脉采血,可采到约15 ml/次血。操作方法基本与静脉采血同。由动脉末端,朝向心方向进针,取血完毕后注意止血。 3、豚鼠耳缘切割采血法:方法同兔相同。 4、心脏采血法:对豚鼠、兔、猫、狗都适用。 采血前,将动物麻醉并仰卧固定置实验台上。心前区皮肤脱毛,常规消毒。于左侧第 3、4肋间心尖博动最强处将针头垂直刺入心脏,由于心脏的搏动,血液可自动迸入注射器。如无血液流出,拔出针头后重新穿刺,不能左右来回斜穿,以免造成气胸而导致动物很快死亡。经6~7天后可重复穿刺采血。 5、体表静脉采血 (1)兔后肢胫部皮下静脉采血 将兔仰卧固定,拔去胫部被毛,在胫部上端股部扎以橡皮管,可在胫部外侧皮下,见到皮下静脉。用左手拇指、食指固定好血管,右手持,与皮下静脉平行进针,抽血有回血即可采血。采血完毕后用棉球压迫止血,因为此处

实验大鼠相关操作技术

一、保定技术 保定的定义,是指使用手或以器械对动物个体之活动作部分或完全之限制,以便进行检查、采样、投药、治疗或进行实验操作等之手段而言。保定无疑是进行所有动物实验前的基本步骤,但在进行实验的过程中也需避免使动物产生不必要的伤害,以下为进行实验动物保定时之重要须知: (一) 不可将保定装置视为正常之饲养方式。 (二) 不可仅仅为处理或控制上图方便,而恣意使用保定装置。 (三) 在可完成实验目的为前提下,需尽量缩短保定之时间。 (四) 在进行保定之前,应训练动物去适应保定设备与进行保定的人员,保定人员也应预先熟练保定相关之技术。 (五) 保定期间若动物有受伤或不适之情形时,则应将动物暂时性或永久性移离保定装置,并进行必要之治疗。 二、大鼠的保定 体型较小、未达120 g的大鼠,可以采用类似保定小鼠的方式。体型较大的大鼠,则应双手保定,由一人执行保定,一人双手采样或投药。也可以采用保定架保定。抓取大鼠时穿戴橡胶手套,可以避免因直接接触大鼠所引起的过敏。尽量避免从大鼠的前方来接触他们,可避免受大鼠咬伤。 1.抓取大鼠时可以握住大鼠尾根部,以此对大鼠进行简单的搬运或移动。不可抓取大鼠尾巴末端,抓取末端可能会造成大鼠尾巴的脱落。如将大鼠尾巴提起后大鼠剧烈摇晃反抗,不可突然将抓着尾巴的手放开,大鼠可能会因此而摔伤。 2.由大鼠后方慢慢接近,单手轻握住其胸部,再将其提起,另一手可再抓住其尾根部、两只后脚或下腹部。抓起后如大鼠剧烈挣扎,可轻微摇晃,大鼠的挣扎会稍微和缓。抓取时避免将手指至于大鼠嘴巴可及之处,可避免被大鼠咬伤。 3.大鼠保定架 三、大鼠的采血 采血对非专职实验动物从业人员而言,是一门难度颇高的技术。采血的技术只能靠熟能生巧与细心的摸索正确的手感来精进。采血会造成实验动物较严重的紧迫,因此建议给予适当的麻醉或镇静,可以有助于采血过程的顺畅。成年大鼠的总血量是20至40 ml,单次采血的建议量为2至3 ml,放血可得之总血量是8至12 ml。少量采血时可以使用眼角采血、隐静脉采血、颈静脉采血及尾巴采血,大量采血则采用心脏采血与斩首采血。心脏采血之困难度较高,且需牺牲动物。除非将动物牺牲,否则所有的采血法皆需确认动物的伤口以完全止血不在出血后,才可将动物放回PC笼内。

大鼠腹主动脉真空采血管采血法

万方数据

大鼠腹主动脉真空采血管采血法 作者:李研, 于峰 作者单位:国家沈阳新药安全评价研究中心, 刊名: 卫生毒理学杂志 英文刊名:JOURNAL OF HEALTH TOXICOLOGY 年,卷(期):2001,15(4) 被引用次数:2次 本文读者也读过(10条) 1.安丽.鲍清大鼠颈静脉采血新方法[期刊论文]-中国比较医学杂志2003,13(4) 2.邹洪.闫洪涛.李军.伍松.唐均成.汤礼军.Zou Hong.Yan Hongtao.Li Jun.Wu Song.Tang Juncheng.Tang Lijun 大鼠实验研究中三种采血方法的应用[期刊论文]-西南军医2011,13(5) 3.张颖.望文桢大鼠心脏采血的几点体会[期刊论文]-实验动物科学2008,25(1) 4.金玮.杨安怀.邢怡桥.Jin Wei.Yang Anhuai.Xing Yiqiao大鼠心脏穿刺采血方法的改进[期刊论文]-微循环学杂志2006,16(2) 5.罗卫国.张伟大鼠两种采血方法介绍[期刊论文]-第四军医大学吉林军医学院学报2000,22(1) 6.李卫国.罗艳蕊.翟心慧.张文学大鼠连续定时采血新方法--股动脉插管法[期刊论文]-生物学杂志2001,18(6) 7.王晶晶.焦昆.李兵.殷召雪.孟霞.乔欣.肖迎秋.卢静.WANG Jing-jing.JIAO Kun.LI Bing.YIN Zhao-xue.MENG Xia.QIAO Xin.XIAO Ying-qiu.LU Jing介绍一种新的大鼠颈外静脉插管方法[期刊论文]-实验动物科学2008,25(2) 8.吴清洪.顾为望.林继红.张嘉宁一种大鼠采血方法介绍[期刊论文]-动物医学进展2004,25(1) 9.张海燕.姬凤彩.马新.唐婧.李世东.郭莉丹.张慧洁不同间隔采血对大鼠血常规的影响[期刊论文]-实验动物与比较医学2010,30(4) 10.金玮.金化民.盛晖.姚颐.程帆剑突下入路的大鼠心脏穿刺采血法[期刊论文]-中华实验外科杂志2005,22(12)引证文献(2条) 1.邹洪.闫洪涛.李军.伍松.唐均成.汤礼军大鼠实验研究中三种采血方法的应用[期刊论文]-西南军医 2011(5) 2.谢兴文.许伟.李宁羌活鱼研粉物、水提及酸提物含药血清对骨髓间充质干细胞增殖及向成骨分化的影响[期刊论文]-中国组织工程研究与临床康复 2011(36) 本文链接:https://www.360docs.net/doc/4017828918.html,/Periodical_wsdlxzz200104028.aspx

常用实验动物各种处死方法

常用实验动物各种处死方法 (一)大鼠和小鼠 1脊椎脱臼法:右手抓住尾巴将动物放在鼠笼盖或粗糙的表面上向后拉,用左手拇指和食指用力向下按住鼠头,使颈椎脱臼(脊髓与脑髓拉断),动物立即死亡。 2断头法:此法适用于鼠类小动物。用剪刀在颈部将鼠头剪断,并使颈部对准容器,以免血液四溅。由于脑脊髓离断且大量出血,动物立即死亡。 3击打法:此法适用于大鼠、家兔等。抓住动物尾部,提起,用力摔击头部,或用木捶用力捶其后脑部,动物痉挛后即处死。 4急性失血法: 常剪断动物的股动脉,放血致死。如果正在做手术性或解剖性实验,可剪断颈动脉,腹主动脉或剪破心脏放血。可采用摘眼球法,右手取一眼科弯镊,在鼠右或左侧眼球根部将眼球摘去,并将鼠倒置;头向下,大量失血而致死。 5化学药物致死法:在一密闭容器内,预先放有浸有全身麻醉作用的乙醚或氯仿的棉花,将动物投入容器内,使动物吸入麻醉药而致死。也可皮下注射士的宁(马钱子碱),注射量为小鼠0.76~2.0mg/kg,大鼠为3.0~3.5mg/kg。 (二)狗、猫、兔、豚鼠 1空气栓塞法 此法适用于较大动物的处死。向动物静脉内注射注入一定量的空气使之发生空气栓塞,形成严重的血液循环障碍而死。兔、猫用此法处死需注入20~40ml空气,犬致死的空气剂量为80~150ml。一般注如入后动物能很快死亡。本法的优点是处死方法简单、迅速。缺点是由于动物死于急性循环衰竭,各脏器淤血十分明显。 2急性失血法 先使动物麻醉、暴露股三角区或腹腔,再切断股动脉或腹主动脉,迅速放血。放血时可用湿纱布擦,或用少量自来水冲洗切口,以保持其畅通,动物在3~5分钟内即可死亡。采用此法动物十分安静,对脏器无损害,但器官贫血比较明显。 小鼠等小动物可采用颈总动脉大量失血而致死的方法。犬等大型动物要先麻醉后放血,要使放血的切口保持通畅,一般在股三角区横切约lOcm的切口,切断股动、静脉,便大量失血而死。 3破坏延脑法 对家兔可用木捶用力捶其后脑部,损坏延脑,动物痉挛后死亡。 4化学药物致死法 (1)静脉注射10%氯化钾(kCl)溶液,使动物心肌松弛,失去收缩能力,心脏发生急性扩大致心跳停止而死亡。成年兔由兔耳缘静脉注入10%氯化钾(kCl)溶液5~10ml /只,狗由狗前肢或后肢皮下静脉注入20~30ml/只,即可致死。 (2)静脉注射10%福尔马林溶液,使血液内蛋白凝固,动物由于全身血液循环严重障碍和缺氧而死。狗用20ml/只,即可致死。 (3)皮下注射的士宁致死:用量为:豚鼠为3.0~4.4mg/kg,家兔为0.5~1.Omg/kg,犬为0/3~0.42mg/kg。猫1.0~2.0mg/kg,大白鼠3.0~3.5mg/kg,小白鼠0.76~2.0mg/kg。 如果动物或其组织要送检,必须注明处死方法。 (三)蛙类 常用金属探针插入枕骨大孔,破坏脑脊髓的方法处死。将蛙用湿布包住,露出头部,左手执蛙,并用食指按压其头部前端,拇指按压背部,使头前俯;右手持探针由凹陷处垂直刺入,刺破皮肤即入枕骨大孔。这时将探针尖端转向头方,向前深入颅腔,然后向各方搅动,以捣

大鼠颈静脉采血体会_黄光琳

局解手术学杂志2011年第20卷第3期J REG ANAT OPER SURG,2011,Vol.20,No.3 [参考文献] [1]刘贤奎,孔垂泽,孙志熙,等.睾丸表皮样囊肿(附25例报告)[J].中国男科学杂志,2007,21(8):51-52. [2]郭刚,洪宝发,高江平,等.成人睾丸良性肿瘤的诊断与治疗(附15例报告)[J].临床泌尿外科杂志,2006,21(6):439-441.[3]贺厚光,严春寅,温端玫,等.睾丸表皮样囊肿6例临床分析[J].江苏医药,2010,36(12):1472-1473. [4]罗琳,王劲,单鸿,等.MRI诊断睾丸表皮样囊肿二例[J].临床放射学杂志,2009,28(1):140. (编辑:左艳芳) 大鼠颈静脉采血体会 Experiences of jugular vein blood collection in rats 黄光琳,郑军(三峡大学第一临床医学院肝胆外科,湖北宜昌443003) [关键词]大鼠;颈静脉;采血 [中图分类号]R-332[文献标识码]B[文章编号]1672-5042(2011)03-0330-01 抽取大鼠血液是医学研究中一项最基本最常用的技术,常用的大鼠采血方法包括断头取血、腹主动脉取血、剪尾取血、眼眶后取血、心脏穿刺取血及颈静脉取血等,但是大部分取血方法因有创、采血量不够或不能重复采血而影响实验进程和结果。本文利用颈静脉取血取得了较好的效果,该方法具有创伤小、成功率高、采血量大、可反复采血的优点[1]。现将采血体会报告如下。 1材料与方法 1.1材料 清洁级SD大鼠60只,雌雄各半,体重160 230g。饲养在室温23 25?,湿度40% 70%的室内,自饮经高压灭菌过的自来水,饲料为普通大鼠颗粒饲料。 1.2手术方法 大鼠购回后稳定饲养3d后进行第一次采血,之后每2周1次,共采血300次。以蘸满乙醚的无菌纱布两块放置在1000 mL的烧杯内,将大鼠放入烧杯后加盖3min。将麻醉后的大鼠仰卧平放在解剖台上,操作者左手戴帆布手套固定大鼠头部,用酒精棉签消毒右颈部,消毒区沾染酒精后即可自动分开而显露穿刺区,不必剪毛,肉眼可见到颈动脉在胸锁乳突肌下缘区搏动,在搏动外侧约1mm处作穿刺点;操作者右手持2.5mL 注射器,与胸骨成45? 60?进入皮肤后抽吸注射器成负压,再进针约2mm即可见血液涌出。可根据研究需要抽取相应血量,1次可抽取2 2.5mL,采血完毕后穿刺点轻压3s。 2结果 绝大多数大鼠一次麻醉后即可完成采血,个别采血不顺利者仅需再放入放有乙醚纱布的烧杯1min左右即可再次采血,采血完成后数秒至1min可清醒。一次采血得1.8 2.2mL者 [收稿日期]2010-12-15[修回日期]2011-01-13248次,1.5 1.8mL者32次,1.0 1.5mL者13次,0.5 1.0 mL者7次,多次均不能达到1.8mL者6次,一次性成功率82.67%,溶血例数9次,无死亡例数。 3讨论 大鼠红细胞每45 68d更新一次,一次失血30%后1 2周内可以恢复至正常。我们从实验观察发现,间隔14d采血2.0mL左右对大鼠营养状况及日常活动均无明显影响。大鼠血量约占其体重的6% 8%,1只200g体重的大鼠总血量大约14.0mL,一次采血2.0mL低于全身血量的30%,不会导致失血性休克[2]。我科本着遵循3R原则(Replacement替代,Re-duction减少,Refinement优化),颈静脉采血不仅有效节约了实验动物资源,而且在倡导动物福利方面具有积极意义。乙醚麻醉方法具有简单、经济、苏醒快等优点,大多数大鼠在采血完成后即完全清醒。当部分大鼠在采血过程中醒来时如已找准穿刺点或已抽到血液,则不必重新麻醉,坚持1 2s即可完成采血,必要时再稍吸入少许乙醚可完成操作。有文献报道颈静脉采血不需麻醉直接采血,这种取血方法容易凝血及溶血,对于需要抗凝的研究不适用[2-3]。 熟悉颈静脉采血方法后数秒内即可完成采血,反复采血的优点有效地避免了因动物间的个体差异产生的实验误差,也有利于研究指标的连续性观察。 [参考文献] [1]金玮,杨安怀,邢怡桥.大鼠心脏穿刺采血方法的改进[J].微循环学杂志,2006,16(2):53-55. [2]车兆义,邹悦,宋清斌.大鼠实验中几种常用的采血方法探讨[J].局解手术学杂志,2008,17(2):84-85. [3]安丽,鲍清.大鼠颈静脉采血新方法[J].中国比较医学杂志,2003,13(4):223. (编辑:郭光金) · 033 ·

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