细胞DNA倍体分析技术在妇科检测中应用(齐齐哈尔)
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HPV-16 E6/E7 :中心体数目异常
HPV-16 Onkoproteins E6/E7: Wrong Number of Centrosomes
E7: 由于错误的中心粒导致中心体加倍出错 E6: 多余的中心体导致有丝分裂呈现多极化并产生异倍体
Duensing und Münger: Human papillomaviruses and centrosome duplication errors: modeling the origins of genomic instability. Oncogene 21, 6241-6248 (2002)
肿瘤发生的机理
首先是细胞DNA改变(非整倍体细胞) 细胞内DNA异常到一定程度出现细胞形态改变
检测细胞DNA的改变 是监测肿瘤发生发展最有效手段
DNA筛查健康体检应用
可应用于包括肺癌、 口腔癌、宫颈癌、 膀胱癌等体检筛查。
DNA技术应用于宫颈癌检测
宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一
宫颈癌致病及高危因素
液基细胞学和巴氏涂片
意大利 临床试验
– 22466: 巴氏涂片 – 22708: 液基细胞学 – ≥ CIN 2
• Sensitivity (敏感性)相等 • Specificity (特异性)降低 – CIN 1 • 敏感性提高 Ronco G, et al,2007.BMJ
液基解决了制片问题,但不能从根本上降低漏诊和误诊
染色体数目与结构的改变足以引发某种癌症,而单个基因的突 变则没有如此强大的力量。
彼得·迪斯贝格(Peter Duesberg) 发表于2007年《环球科学》杂志第6期 “医药·科学” 栏目
染色体整倍性出现在正常、炎 症、化生以及增生的细胞
染色体非整倍性出现 在几乎所有癌细胞
癌症是一种DNA的疾病:非整倍体程度加重,蛋白质合成紊乱, 细胞呈现恶性特征,出现形态改变和异常增殖,最终形成肿瘤。
原位癌和浸润癌的癌 细胞
细胞DNA倍体分析检测与HPV检测的区别
HPV-DNA检测HPV病毒感染和患病风险; 细胞DNA倍体检测体细胞的DNA含量,DI>2.5 (细胞DNA含量>5C)即为病变细胞。
正常宫颈细胞的恶性转化
1. HPV-DNA整合到细胞核DNA上 2. 病毒蛋白E6/E7干扰中心体合成 3. 纺锤丝缺陷 4. 最初的,较少的非整倍体细胞 5. 进一步,严重的非整倍体细胞 6. 恶性转化
HPV:200 多种亚型,根据其致癌性的大小分为两类:
低危型:HPV6,11,42,43,44等,常引起外生殖器湿疣等良 性病变。
高危型:HPV16,18,31,33,52,58,等, 与宫颈癌及其癌前病变有关。
HPV感染与宫颈癌发病率
——《妇科细胞病理学诊断与临床处理》 赵澄泉、杨敏
HPV感染是自限性疾病,大部分感染HPV病毒的病人可以自愈,只有极 少数发展为宫颈癌;——70%以上的感染人群在30个月内自愈,感染人群 中致癌率不足1%。
宫颈癌筛查历程
巴氏涂片
液基薄层制片
形态学+辅助诊 断方法
形态学诊断
TCT(膜式) LCT(沉降) LPT(界面化学)
计算机图像分 析(DNA倍体) HPV检测
其他…
Leabharlann Baidu氏检查
——最早的防癌检查
George N. Papanicolaou (1883 - 1962 ) 巴氏涂片有50余年的应用历史,用取材器从 宫颈上皮的移行区采取标本并涂于玻片上, 细胞经巴氏染色后镜下观察形态
高于HPV
各种肿瘤检测技术
致癌因素作用
HPV(宫颈癌) DNA-ICM(定量)
体细胞基因突变
细胞学正常的HPV感染率
ASCCP指南:
二、细胞DNA倍体分析 (计算机辅助诊断技术)
通过DNA病变检测早期 肿瘤细胞,是一种定量的 检测技术。
2009年获得中华医学会病 理学分会认证。
采用细胞DNA倍体分析系统检测进行细 胞扫描。分析其染色情况,具备准确、 客观、简便、高效的特点。
巴氏:第一个建议通过测量细胞核DNA含量检测肿瘤细胞
HPV检测与DNA倍体分析的对比
检测对象
液基标本或宫颈分泌物
检测对象
液基标本
检测时间:2-6h
检测时间:5小时左右
临床意义:
病毒检测。阳性代表为 病毒感染和患病风险。
临床意义
病变检测。阳性说明有病 变细胞。
宫颈癌病变时间历程
高危型 细胞核 HPV感染 DNA改变
细胞形态 出现变化
癌前 5-10年
细胞DNA倍体分析技术在妇科肿瘤 检测中的应用
厦门麦克奥迪医学检验所 厦门现代病理诊断中心
内容简介
细胞DNA倍体分析技术原理 细胞DNA倍体分析技术在宫颈癌检测中的应用 细胞DNA倍体分析的其他应用 临床取材及报告解读
癌症病因探讨 ——染色体倍体理论
在所有已知的肿瘤中,承载着数千个基因的染色体伤痕累累— 复制失常、屡屡断裂、结构重排甚至整体缺失。越来越多的证 据显示,染色体的混乱状态并非恶性转化的副作用,而是癌症 发生的直接原因和推动力。
行为因素 --过早性行为,多性伴侣,性紊乱 生物因素
--病毒因素:HPV(Human papillomavirus,人乳头状瘤
病毒)感染,HSV感染,MCV感染等
--宿主因素:性传播疾病(Sexually transmitted diseases,
STDs),免疫系统水平低下,服用复合避孕药等
--环境协同因素 遗传易感性
传统诊断细胞学的局限性
• 制约细胞学诊断质量的客观因素 1.来自送检临床方面的因素 ; 2.来自标本制作技术方面的因素 。
• 制约细胞学医生诊断质量的主观因素 1. 经验及主观认识上的差异 ; 2.疲劳等其他因素。
形态学的补充方法探讨
简单、经济、高效…
一、HPV 人乳头瘤病毒
子宫颈癌是目前唯一病因明确的癌症, HPV感染是宫颈癌及其癌前病变 的最主要病因。
癌症
死亡
几种常见宫颈癌检测方法比较
检测方法 检测靶标
检测意义
特点
巴氏涂片/液 基细胞学
HPV病毒检 测
宫颈上皮细胞 HPV病毒DNA
提示宫颈细胞 已发生的病变
情况
形态学,定性检 测,敏感性低
提示是否有高 敏感性高,特异
危病毒感染
性低
细胞DNA倍 体检测
细胞DNA异倍 体
提示早期细胞 病变
敏感显著高于巴 氏涂片,特异性