血清蛋白质测定

• 3、r球蛋白增多与M蛋白 • 正常SPE中γ球蛋白区带：IgG；IgM；IgA； IgD；IgE • M蛋白是浆细胞或B淋巴细胞单克隆恶性增 殖所产生的一种大量的异常免疫球蛋白， 因其多见于多发性骨髓瘤 (multiple myeloma)、巨球蛋白血症 (macroglobulinemia)及恶性淋巴瘤 (malignant lymphoma)，都是以M开头的 疾病，故称为“M蛋白”。
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运输载体类: 血浆脂蛋白 前清蛋白和清蛋白 甲状腺素结合球蛋白 皮质素结合球蛋白 视黄醇结合蛋白转铁蛋白 结合珠蛋白 血色素结合蛋白 铜蓝蛋白
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补体蛋白类 补体蛋白C B因子 D因子 备解素
• P因子又称备解素（properdin），是替代途径中除C3以外 最先发现的一种血浆蛋白。现已探明，P因子以聚合体形式 而存在：即三聚体（54%）、二聚体（26%）和四聚体 （20%）都有，但特异活性的顺序依次为：四聚体>三聚体> 二聚体。P因子为由4条相同的肽链（分子量各55kDa）组成 的四聚体分子，链间以非共价键相连接，分子量为220kDa。 P因子的生物学活性是以高亲和力与c 3bBb和C 3bnBb相结 合，结合后通过发生构象改变而加固C3b与Bb间的结合力， 从而可使其半衰期由2分钟延长至26分钟。另外，P因子还 可封闭H因子的抑制作用，更增加了上述两种酶的稳定性及 活性，有利于促进替代途径级联反应的继续进行。因此，P 因子实际上是替代途径中的一个重要的正调节分子。因其常 成为c 3bBb和C3bnBb复合物中的组成成分之一，故将其作 为补体系统的固有成分在此一并描述。此外，在膜增生性肾 小球肾炎病人血清中发现有一种C3肾炎因子（C3nephritic factor,C3NeF）实际为C 3bBb的自身抗体，也可与C3bBb 结合而增加c 3bnBb的稳定性，使其半衰期处长10-30倍。
不同个体间的变异（CV%）
结合珠蛋白 α1-酸性糖蛋白 转铁蛋白
9.5 11 2.5
71 42 9
α1-抗胰蛋白酶
α2-巨球蛋白
3
3
16
17
• 2、急性时相反应蛋白（acute phase reactants,APR) • 概念：在炎症、创伤、心肌梗塞、感染、 肿瘤等情况下血浆中浓度显著上升或降低 的蛋白质。 • 升高的有：AAT、AAG、CER、C3、C4、 CRP、Flb、hP等 • 降低的有：PA、Alb及TRF，称为负性 APR。
方法：琼脂凝胶电泳 染料：氨基黑
正常血清蛋白电泳图
• 2、异常血清蛋白电泳 • （1）双白蛋白血症型：主要特征： 在白蛋白部位有两个区带，光密度 计扫描出现双峰，呈剪刀状。 产生原因：双白蛋白血症分为持 久型和暂时型两种。持久型主 要 是一种家族性血清蛋白异常的疾病， 极少见，为 常染色体不完全显性 遗传；而暂时型主要是指肾功 能不全的患者在治疗期间使用大 剂量的β-内酰胺类 抗生素，可形 成快泳动性的白蛋白成分，治疗中 断 即逐渐消失。
• 3、类固醇激素
二、血清蛋白质电泳组分的临床分 析
• 1、正常血清蛋白电泳（serum protein electrophoresis,SPE) • 正常参考值： Alb: 57%-68% α1: 1.0%-5.7% α2: 4.9%-11.2% β: 7%-13% γ: 9.8%-18.2%
• 凝血蛋白类: • 14个凝血因子中的13个均为蛋白质。
• 免疫球蛋白: • IgG 、IgA、IgM、IgD、IgE
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蛋白酶抑制物 A1-抗胰蛋白酶（a1-AT） A1-抗糜蛋白酶（a1-ACT) A2-巨球蛋白（ a2-MG)
• 血清酶类: • 血浆固有酶LCAT、脂蛋白酯酶、凝血酶原、 纤溶酶等
第八章
体液蛋白质检验
人类白蛋白分子
本章内容概要：
第一节 概述
第二节 体液蛋白质测定
第一节 概
机体主要的 机体蛋白质： 生物大分子
述
含量：人体固体成分的45% 种类：10万，3000~5000种/单细胞 功能：生长，代谢、血凝、运动、免 疫、信息传递等
体液蛋白质的检测：
疾病发生
体液蛋白质
异常
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（三）影响血浆蛋白质浓度的因素 1、关于血浆蛋白质的正常参考值 A、年龄组的差异 ⑴AFP、AGM、a1AT浓度在新生儿期显著高于成人； Alb\Fib\IgG与成人接近。其他成分特别是IgM\IgA及C3、 C4补体成分均偏低。 • ⑵对8~95岁的年龄组分布调查有以下几个特征 • ①Alb在50岁以前保持恒定，50岁以后有下降趋势；② AA天灾男30岁、女40后有上升趋势；③a1脂蛋白、 AAT40后有上升趋势；④Hp随年龄增加而增加；⑤AGM 在40岁以前随年龄增加而下降，到年老时 由有上升。
• ⑹血浆蛋白质广泛应用于组织和细胞的培 养，血浆中含有各总细胞刺激因子和抑制 因子，它们对稀薄啊的活力、增殖、分化、 胞内酶的合成及细胞特殊功能起者特殊的 作用。 • ⑺在人类不少疾病，包括两种常见的疾 病——动脉粥样硬化及肿瘤的发病学研究， 以及最常见的糖尿病及其并发症的发病机 制中，血浆蛋白质均有广泛涉及。
• 一、血浆蛋白质的功能和分类 • 蛋白质（protein)：是人体内含量和种类最 多的物质。有10万多种。 • 血浆蛋白质（plasma protein):血浆中含量 最多的成分。有1000多种。目前已研究的 不下500种，其中已分离出纯品的有200多 种。
• （一）蛋白质概述： • 研究进展领域： • ⑴生物化学家：分离纯化各种组分。研究其物理 性质、氨基酸的组成及其顺序，以及某些蛋白质 中结合的 糖、脂类、金属化合物、活性多肽、类 固醇激素等，研究其合成、降解、转换更新与代 谢调节的研究。 • ⑵生理学家与病理生理学家；注重蛋白质的生理 功能，研究其胶体性质、缓冲性质和生理作用， 运输、结合功能等。
• 蛋白类激素 • 胰岛素、胰高血糖素、生长素等
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3、血浆蛋白质的功能： ⑴营养：其中的氨基酸 ⑵缓冲与胶体渗透压：维持血液渗透压 ⑶运输：类固醇、甲状腺激素、维生素A、D、脂 类、金属、微量元素、药物等； ⑷免疫与防疫功能：免疫球蛋白、补体 ⑸凝血与纤溶 ⑹酶的特殊功能 ⑺代谢调控
• B、关于性别差异 • ⑴男性成人略高于女性的有：Alb、AAT、 IgA等 • ⑵女性略高于男性成人的有：CER、AGM、 a1脂蛋白等；在妊娠期明显增高的有： CER、TRF等。 • C、个体不同时期的差异及个体间的差异
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五种血浆蛋白在个体内与人群间的差异
个体内不同时间的变异（CV%）
• 血浆蛋白
• 正常血清蛋白电泳（serum protein electrophoresis,SPE) • 正常参考值： Alb:57%-68% α1:1.0%-5.7% α2:4.9%-11.2% β:7%-13% γ:9.8%-18.2%
• 2.功能分类法
• • • • 血浆蛋白质 • • • 运输载体类 补体蛋白类 血清酶类 蛋白酶抑制物 免疫球蛋白 凝血蛋白类 蛋白类激素
• ⑵临床意义 • ①可以作为个体营养状态的评价指标 • ②血浆白蛋白明显减少时，可以影响许多 配体在循环血液中的存在形式； • ③白蛋白增高较少见，在严重失水时，对 监测血浓缩有诊断意义；
• （二）血浆蛋白质的分类 • 1.电泳分类法 • 2.功能分类法
• 1、电泳法：（醋纤膜电泳） • 正常人血清的区带电泳结果和扫描图像 • 从左至右的5个区带依次为白蛋白及α1、α2、β和γ球 蛋白区。有时在慢电泳时β球蛋白可分为β1球蛋白和β2球 蛋白。 • 白蛋白区的成分包括白蛋白、前白蛋白和部分α1脂蛋白; • α1区包括α1抗胰酶蛋白、α1脂蛋白、Ｇc球蛋白; • α2区包括触珠蛋白、铜蓝蛋白、α2巨球蛋白等; • β1区包括转铁蛋白、补体Ｃ3ｃ、C4等; • β2区包括Ｃ3ｂ、 β2微球蛋白、Fb; • γ区包括IgA、IgＧ、IgＭ、CRP等。
• （4）α1球蛋白缺陷型： • 主要特征：α1球蛋白明显降低，有 时可接近零，血清总蛋白及 其它各 组分的蛋白通常没有明显变化。 产生原因：此病通常认为是先天 性或家族性的，系由于α1抗胰 蛋白 酶合成低下所致。因为血中α1抗胰 蛋白酶减少 或缺乏，致使血中或组 织中的胰蛋白酶活性相对增 加，肺 结缔组织破坏亢进，对青年可以发 生肺气肿 ，当合并感染时，可见白 蛋白减低，但由于α1抗胰 蛋白酶减 少，即使有炎性病灶，α1区带也不 增加。
• （3）低白蛋白血症型： • 主要特征：血清总蛋白 浓度明显减低，其中以白 蛋白减低为主。 产生原因：由于合成蛋 白质所需的氨基酸长期供 应不足，以致 血清中的主 要成分白蛋白合成减少。 常见于慢性营 养失调、肝 硬化、肝炎、肾炎、肾病 综合症、大面 积烧伤或内 分泌紊乱、垂体病等。
检查结果：Alb 44.2%(↓)；α1 4.6%(N)；α2 14.6%(↑) β 18.3%(↑)；γ 18.3%(N)； 慢性肾炎患者。
• ⑶血浆蛋白质 具有遗传的变异：如Hp、TFP等在 不同的人群中常见有结构上的差异，以及某些蛋白 质的缺乏表现出一定的临床症状，具有临床意义； 遗传学家利用蛋白质结构上的差异作为研究人群与 家族遗传特征的标志。 • ⑷临床生化检验中，微量蛋白质的检测及其技术的 进展，用于诊断各种恶性肿瘤或各种病理变化过程 等。 • ⑸在进化与个体发育的生物化学研究中，已发现有 不少正常胎儿时期的蛋白质可以在恶性肿瘤病人中 重新出现，如甲胎蛋白。血浆蛋白质合成的调控， 如APR的表达与释放，在临床医学中长期受注意而 又未完全解决的课题，它与限制炎症过程密切相关。
• （5）.α2球蛋白缺陷型：主要 特征： • α2球蛋白带有时可轻度减低， 其它组分多正常。 产生原因：在此区带出现缺 陷的主要有结合珠蛋白、血浆 铜蓝蛋白，分别称无结合珠蛋 白血症和铜蓝蛋 白缺乏症。前 者极少见，没有特别症状，有 时 可伴有轻度贫血。铜蓝蛋白缺 陷已知有Willson 氏病，特别 在肝、脑和角膜较多。
• （2）先天性白蛋白缺陷型：主要特 征：由于血清白蛋白的显著降低， 血清总蛋白也随之降 低，α1、α2球 蛋白明显增高，γ球蛋白也增高。 严 重无白蛋白血症时，白蛋白有时 可降为零。 产生原因：本病是极少见的先天 性疾病，可能由于肝细胞内白 蛋白 合成功能遗传性缺陷或明显低下所 致。该病患 者的白蛋白含量尽管只 有正常人的0.05%， 而其血 浆胶渗 透压仍为正常人水平的 1/2左右， 这是由于球蛋白代偿性增加所致， 如传铁蛋白为正常人的 2 -3倍， α1 巨球蛋白为正常人的3.5倍， β脂蛋 白为3 倍，IgM为3倍，这时血清白 蛋白的半衰期也明显延长， 可为正 常人的3-4倍， 对维持血浆胶体渗透 压 均有一定作用。
• 特点是区带窄而浓,扫描峰高而尖,基底部窄, 在γ区高与宽的比例≥2,β区则≥1(正常时小 于此比例),其他区带明显减少。
三、血浆蛋白质种类及其异常
• 1、前白蛋白（prealbumin,PA）：分子量5.4万， 由肝细胞合成。在pH8.6电泳中移速比白蛋白快 而得名。 • ⑴功能：①营养 半衰期12小时； • ②运载 结合T3、T4、结合维生素A。 • ⑵意义：测定其在血浆中的浓度对于了解蛋白质 的营养不良和肝功能不全，比白蛋白和TFR具有 更高的敏感性，在急性炎症、恶性肿瘤、肝硬化 或肾炎时其浓度下降。
• 2、白蛋白（aibumin,Alb)：由肝实质细胞合成，半衰期 15~19天，含量最多的蛋白质，占40%~60%。在肝细胞 中没有贮存。 • 分子结构1975年阐明，含585个氨基酸残基的单链多 肽，分子量66458，含17个二硫键（—S—S—），不含 糖的组分。 • ⑴功能 • ①运载：胆红素、长链脂肪酸、胆汁酸盐、前列腺素、类 固醇激素、金属离子（铜、镍、钙等）； • ②营养：内源性氨基酸 • ③维持血浆蛋白质胶体渗透压、缓冲酸碱作用。 • 血液中80％的渗透压是由白蛋白承担的。