HPLC中常用的检测器

通用型检测器 约有80％的分析样品具有紫外吸收,可以使用这种检测器检测。
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优点: a: 灵敏度高，检测下限约为 10-6 g／ml b: 线性范围广 C: 对温度和流速不敏感，适于进行梯度洗脱
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限制: a: 没有紫外吸收的物质不能检测 b: 应尽可能选择在检测波长下没有背景吸收的流动相 (限制了一些 一些截止波长在200~300nm之间的良好溶剂的使用 )
能会掩盖前期脱洗的色谱峰
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注意事项: a: 洗脱液的组成一定要恒定，不能使用梯度洗脱。 b: 不能使检测池带压工作，在与其它检测器串联使用时应放在最
后。 c: 流速要恒定，泵的流速波动要小于0.5％，使用往复泵时要用阻
尼装置。 d: 温度要恒定，恒温控制要达±10-4℃,在使用时预热时间要充足
，否则基线漂移十分严重 。
柱后补加适量电解质溶液，这并不影响分离效率） 现在在药物分析领域里面已经没有其他方法常用了.
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5:示差折光检测器 (RID)
原理: 化合物的折光率不同,光会偏转。光偏转的程度与样品的浓度
成正比。 根据不同浓度的物质具有不同折射率来进行组分检测的。 溶液的折射率是溶剂（流动相）和溶质（样品）各自的折射
阵列的每一单元有一只光敏二极管和一只与之并联的电容器． 光电二极管紫外检测器n个单元同时检测，从而使采样时间减 少到普通的１／Ｎ．使用２１１个二极管的阵列元件，最快时，每 １０ms可完成一次测量．每秒中可以收集２００００～１００００ ０个数据．
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与普通UV-VIS检测器不同之处:
a: 普通UV-VIS检测器是先用单色器分光，只让特定波长的光进入 流动池。 而二极管阵列UV-VIS检测器是先让所有波长的光都通过流动池，然 后通过一系列分光技术，使所有波长的光在接受器上被检测.
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2:荧光检测器
原理: 物质的分子或原子经光照射后，有些电子被激发至较高的能 级，这些
电子从高能级 跃至低能级时，物质会发出比入射光 波长较 长的光，这种 光称为荧光。荧光检测器就是在样品的激发波长处检测发射光的强弱.
在样品浓度足够低时,下，荧光强度与如射光强度,量子效率及样品浓度 成线形关系。
荧光强度: F=I0 εφ L C
原理: 光电二极管阵列（或CCD阵列，硅靶摄像管等）作为检测元件的
UV-VIS检测器。它可构成多通道并行工作，同时检测由光栅分光， 再入射到阵列式接受器上的全部波长的信号，然后，对二极管阵列 快速扫描采集数据，得到的是时间、光强度和波长的三维谱图。
１９７６年Ｎilano等人首先报道这种检测器，它不必停留就可获 得“在流”色谱的全部光谱信息，可跟随色谱峰扫描，用来观察色 谱柱流出组分的每个瞬间的动态光谱吸收图．
b:普通UV-VIS检测器只能得到二维的谱图,而DAD可以得到三维图 谱.
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应用
a: 色谱峰纯度检查 比较光谱法 吸收比法 双波长法
b: 色谱峰鉴定 与标准品或标准光谱比较 正常紫外光谱的比较
三维色谱能提供更多全面的信息。
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4:电化学检测器
理论基础 a: 法拉第第一定律 在电介过程中，电极上起反应的物质量
HPLC中常用的检测器
1:紫外-可见光（UV-VIS）检测器
工作原理： 基于Lambert-Beer定律，即被测组分对紫外光或可见光具有吸
收，且吸收强度与组分浓度成正比
A=lg Io/I=εbc
其中A为吸光度（消光值）,Io为入射光强，I为透射光强，ε为样 品的吸光度（消光系数）b为光程长，c为样品浓度。
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6:蒸发光散射检测器 (ELSD)
原理: 色谱柱流出液进入雾化器形成微小液滴，与通入的气体 (通常是
氮气，有时也用空气)混合均匀，经过加热的漂移管，蒸发除去流动 相，样品组分形成气溶胶，用强光或激光照射气溶胶，产生光散射 ，用光电二极管检测散射光。
散射光的强度(I)与组分的质量(m)有下述关系： I=km 或lgI=b lgm+lgk
例子：花生酱提取物中衡量黄曲霉素的荧光检测法
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缺点: a:适用范围有一定的局限性 –只适用于有荧光基团＆衍生化之后
有荧光基团的化合物 b: 定量分析时线性范围较窄
它适合于 稠环芳烃、氨基酸、胺类、维生素、蛋 白质等荧光物质 的测定
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3:二极管阵列检测器（diode-array detector, DAD）
率乘以各自的摩尔浓度之和． 溶有样品的流动相与流动相本身之间折射率之差就表示样品
在流动相中的浓度．原则上，凡是与流动相折射指数有差别的样品 都可以测定它的浓度．
通用型检测器 (浓度检测器 ) 检测限可达１０－６ ～１０－７g/ml
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优点: 通用性强，操作简便
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缺点: a: 灵敏度低 b:过于娇贵---室温的变化会影响基线的稳定性 ,大的溶剂前沿峰可
荧光检测器是一种选择性检测器
不到20%的物质使用这种检测手段,许多药物如喹诺酮类药物采用这种检 测方法.
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在垂直的方向上 进行检测
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优点: a: 灵敏度非常高(灵敏度在目前常用的HPLC检测器中最高 )，其
检出限可达10-9g/ml，(比紫外检测器高2—3个数量级，适合于痕量 分析 )
b: 可以用于梯度洗脱 c: 对仪器的稳定性（如温度和压力的稳定性）依赖较小 d: 选择性好，优于紫外
由于比其他快速扫描检测器具有结构简单，工作可靠，性能好 的优点，自一问世，就得到迅速发展．
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结构： 核心是二极管阵列元件，它由一系列光敏二极管蚀刻在硅片上
组成．一般，每个阵列又２００～１０２４个光电二极管组成，他 们的光敏范围是２００～６００nm，每只二极管的分辨率是１～ ２nm，光电二极管越多，分辨率越高．
（W）与通过电介池的电量（Q）成正比。
b: 法拉第第二定律 各种不同的电介质溶液中，通过相同的电量 时，电极上析出的电极产物的当量数相同。 （96487库仑）
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优点: a:专用型检测器,具很强的专属性。 b:线性范围可达106，宽广 c:高灵敏度 10-12g/l，可与荧光相比，
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缺点: a: 只能测定具有电解活性（电氧化一还原性）物质 b: 要求洗脱液具有导电性（可向洗脱液中加入少量电解质，或在
其中k和b为与蒸发室(漂移管)温度、雾化气体压力及流动相性质等 实验条件有关的常数。