HPLC中常用的检测器
不同液相检测器的区别
不同液相检测器的区别公司标准化编码 [QQX96QT-XQQB89Q8-NQQJ6Q8-MQM9N]高效液相色谱仪的常用检测器有哪几种，有什么区别高效液相色谱仪常用检测器种类及分析检测器的作用是将柱流出物中样品组成和含量的变化转化为可供检测的信号，常用检测器有紫外吸收、荧光、示差折光、化学发光等。
1.紫外可见吸收检测器(ultraviolet_visibledetector,UVD)紫外可见吸收检测器(UVD)是HPLC中应用最广泛的检测器之一，几乎所有的液相色谱仪都配有这种检测器。
其特点是灵敏度较高，线性范围宽，噪声低，适用于梯度洗脱，对强吸收物质检测限可达1ng，检测后不破坏样品，可用于制备，并能与任何检测器串联使用。
紫外可见检测器的工作原理与结构同一般分光光度计相似，实际上就是装有流动地的紫外可见光度计。
(1)紫外吸收检测器紫外吸收检测器常用氘灯作光源，氘灯则发射出紫外-可见区范围的连续波长，并安装一个光栅型单色器，其波长选择范围宽(190nm-800nm)。
它有两个流通池，一个作参比，一个作测量用，光源发出的紫外光照射到流通池上，若两流通池都通过纯的均匀溶剂，则它们在紫外波长下几乎无吸收，光电管上接受到的辐射强度相等，无信号输出。
当组分进入测量池时，吸收一定的紫外光，使两光电管接受到的辐射强度不等，这时有信号输出，输出信号大小与组分浓度有关。
局限：流动相的选择受到一定限制，即具有一定紫外吸收的溶剂不能做流动相，每种溶剂都有截止波长，当小于该截止波长的紫外光通过溶剂时，溶剂的透光率降至10%以下，因此，紫外吸收检测器的工作波长不能小于溶剂的截止波长。
(2)光电二极管阵列检测器(photodiodearraydetector，PDAD)也称快速扫描紫外可见分光检测器，是一种新型的光吸收式检测器。
它采用光电二极管阵列作为检测元件，构成多通道并行工作，同时检测由光栅分光，再入射到阵列式接收器上的全部波长的光信号，然后对二极管阵列快速扫描采集数据，得到吸收值(A)是保留时间(tR)和波长(l)函数的三维色谱光谱图。
高效液相色谱常用的检测器的适应范围及工作原理
高效液相色谱常用的检测器的适应范围及工作原理高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography, HPLC）是现代化学分析技术中最常用的一种分离和分析方法之一，其核心部分是检测器。
液相色谱检测器的选择主要与分析物的化学性质以及检测要求有关。
本文将介绍常见的高效液相色谱检测器及其适应范围和工作原理。
一、紫外检测器紫外检测器是液相色谱最基本的检测器之一，也是最常用的一种检测器。
利用紫外线在分子中的吸收特性，可对分析物进行检测和定量分析。
该检测器的灵敏度较高，检测精度较高，且对多种化合物均有良好的适应性。
其适应范围主要包括多种天然产物、非天然产物、药物、生物大分子等。
二、荧光检测器荧光检测器是另一种常见的液相色谱检测器。
该检测器通过激发分析物所带有的荧光原子或分子，从而检测和识别分析物，并完成定量检测。
荧光检测器具有高灵敏度、高选择性、分析速度快等特点。
其适应范围主要包括药物、染料等。
三、电化学检测器电化学检测器可以测量液相色谱中化合物之间的电化学反应以及氧化还原反应和电导率的变化。
该检测器对含有化合物的样品可以提供非常高的灵敏度和精度。
电化学检测器特别适用于具有化学反应性的化合物的分析。
其适应范围主要包括有机化学物质、生化物质、食品、化妆品等领域。
四、质谱检测器质谱检测器作为高效液相色谱技术的升级版，可以在分子级别上对样品进行分析。
该检测器的主要作用是在分离后的化合物中，继续通过质谱仪进行定性和定量的分析。
质谱检测器适用范围广泛，可以用于药物、生物物质、食品、环境样品等领域的分析和检测。
五、散射检测器散射检测器可以检测非常低浓度的化合物，该检测器适用于具有高分子物质的分析。
由于高分子物质的分析需要非常低的检测量，因此散射检测器成为一种最好的分析工具。
散射检测器适用范围主要包括聚合物、羟基酸、脱氧核糖核酸等。
综合来看，高效液相色谱常用的检测器适应范围较广，能够应对多种化学物质的检测需求。
hplc法测定蛋白所需要的仪器和试剂
hplc法测定蛋白所需要的仪器和试剂
HPLC法是一种常用的蛋白质分析方法，需要使用特定的仪器
和试剂。
本文将介绍HPLC法测定蛋白所需要的仪器和试剂。
一、仪器
1.高效液相色谱仪
高效液相色谱仪是HPLC法测定蛋白的核心仪器。
它由进样器、色谱柱、检测器和数据处理系统组成。
进样器用于将待分析的蛋白样品引入色谱柱，色谱柱则用于分离蛋白质，检测器则用于检测分离后的蛋白质峰，数据处理系统则用于处理并分析检测结果。
2.离心机
离心机用于将蛋白样品离心，去除悬浮在液体中的杂质。
3.超声波清洗器
超声波清洗器用于清洗色谱柱和其他实验器具，以保证实验结果的准确性。
4.微量分光光度计
微量分光光度计用于测定蛋白样品的浓度，以便进行标准曲线的绘制和样品浓度的计算。
二、试剂
1.缓冲液
缓冲液用于调节样品的pH值，以使其适合于HPLC分析。
2.色谱柱填料
色谱柱填料用于填充色谱柱，根据不同的实验需求可以选择不同的填料材料。
3.溶剂
溶剂用于溶解蛋白样品和制备缓冲液。
4.标准品
标准品用于绘制标准曲线，以便计算样品中蛋白质的浓度。
以上就是HPLC法测定蛋白所需要的仪器和试剂。
在进行实验前，需要根据实验需求选择合适的仪器和试剂，并严格按照操作规程进行实验，以保证实验结果的准确性。
hplc检测器种类及特点
hplc检测器种类及特点HPLC检测器种类及特点HPLC（高效液相色谱法）是一种常用的分离和分析技术，广泛应用于各个领域的实验室。
HPLC系统由多个部分组成，其中检测器是其中之一，用于监测样品在色谱柱中的分离和识别。
不同类型的HPLC检测器具有不同的特点和适用范围，本文将详细介绍一些主要的HPLC检测器种类及其特点。
紫外检测器（UV检测器）：紫外检测器是使用紫外线（UV）光源照射样品，并测量样品吸收/透射的紫外光强度的一种检测器。
这种检测器适用于大多数化学物质，因为大多数有机化合物和某些无机化合物（如金属离子）对紫外线具有吸收能力。
紫外检测器的工作原理是通过比较进样溶液和参比溶液对紫外光的吸收量来确定样品的存在和浓度。
UV检测器具有极高的检测灵敏度和广泛的线性范围，且对各种溶剂和化合物的稳定性较好。
然而，该检测器不能提供化合物的结构信息，因为它只是根据吸收强度进行检测。
荧光检测器：荧光检测器是在分离柱后的样品流中使用荧光探针，通过测量样品产生的荧光强度来检测化合物。
这种检测器适用于大多数有荧光性质的化合物，包括天然化合物、药物、色素等。
荧光检测器的工作原理是在激发光源（通常是紫外线）的作用下，分子从低能级跃迁到高能级，然后放射出荧光光子。
荧光检测器具有较高的检测灵敏度和特异性，且具有多通道检测的能力，可以同时测定多个组分。
然而，荧光检测器对环境和溶剂的要求比较高，并且需要选择合适的激发波长和荧光波长。
电化学检测器：电化学检测器是使用电化学技术进行检测的一种检测器。
电化学检测器可以测量样品中的电子转移反应、电荷转移反应、离子传递等电化学过程。
常见的电化学检测器有电导检测器（CD）和安培检测器（AD）。
电导检测器是通过电荷传递反应量测样品离子浓度的一种方法，适用于带电离子和非离子。
安培检测器则是通过测量样品中电流强度来识别化合物的一种方法，适用于具有可测电流的化合物。
电化学检测器具有非常高的选择性和灵敏度，能够检测到微量的化合物，但它们对电极的选择和维护要求较高。
hplc的基本机构和主要功能。
hplc的基本机构和主要功能。
HPLC（高效液相色谱法）是一种分离、检测和定量分析化学物质的技术方法。
其基本机构主要包括以下几个部分：
1. 柱子（色谱柱）：用于分离样品中的化合物。
柱子通常由一种或多种含有极性或非极性填料的管状物质构成。
2. 注射器（样品进样系统）：用于将待分析的样品注入到色谱柱中。
3. 流动相（溶液）：用于携带样品通过色谱柱，其中流动相中可能包含有机溶剂、缓冲溶液等。
4. 流动相泵：用于提供流动相的压力，以保证样品在柱子中的流动。
5. 检测器：用于检测样品在柱子中的分离情况，并进行信号转换。
常用的检测器包括紫外/可见光检测器、荧光检测器、电化学检测器等。
6. 数据处理系统：用于收集、处理和分析检测器产生的数据。
HPLC的主要功能包括：
1. 分离：能够分离和提取样品中的化学混合物，使不同成分能够被分离开来。
2. 定量：能够测定样品中各成分的含量，通过峰面积或峰高进行定量分析。
3. 检测：能够检测和鉴定样品中的目标化合物，可以通过各种检测器进行定性和定量分析。
4. 可靠性：具有高度的精确度和重现性，能够进行准确和可靠的分析。
5. 快速性和高效性：具有较高的分析速度，可以在短时间内进行大量样品的分析。
高效液相色谱仪组成及检测器种类
高效液相色谱仪组成及检测器种类HPLC主要由四个核心组成部分：溶剂系统、进样系统、分离柱和检测器。
下面将详细介绍HPLC的组成部分及常见的检测器种类。
1.溶剂系统：溶剂系统是HPLC的基础部分，主要由溶剂瓶、溶剂泵和混合器组成。
溶剂系统的主要功能是提供流动相，使待分离物质在分离柱中迅速传递，并保持色谱的稳定。
常见的溶剂选择有水、有机溶剂（如甲醇、乙醇）和酸碱溶液等。
2.进样系统：进样系统主要由进样装置和进样口组成。
进样系统的主要功能是将待测样品溶液精确地进样到分离柱中，进行分离分析。
常见的进样方式有手动进样、自动进样和微量进样等。
3.分离柱：分离柱是HPLC用于分离待测物质的核心部分，其主要作用是将混合物中的化合物按照其化学性质进行分离。
分离柱通常由不同类型的填料填充而成，包括反相色谱柱、离子交换色谱柱、凝胶过滤柱等。
根据填料粒径的不同，分离柱可以分为常规柱和超高效柱。
4.检测器：检测器是HPLC中用于检测分离柱中物质浓度的装置。
根据不同的原理和应用要求，常见的HPLC检测器包括：(1) 紫外可见检测器（UV-Vis Detector）：紫外可见检测器是HPLC常用的检测器之一，主要通过测量样品在紫外或可见光区域的吸收来确定成分的浓度。
该检测器具有灵敏度高、通用性强、操作简单等特点。
(2) 荧光检测器（Fluorescence Detector）：荧光检测器主要通过测量分析物在激发光源作用下发射出的荧光信号来确定成分的浓度。
该检测器具有灵敏度高、选择性好、检测限低等特点，广泛应用于药物分析、环境分析、食品安全等领域。
(3) 折射率检测器（Refractive Index Detector）：折射率检测器主要通过测量分析物引起的溶剂折射率变化来确定成分的浓度。
该检测器适用于不含色团的非极性物质的检测，具有灵敏度较低、通用性强的特点。
(4) 质谱检测器（Mass Spectrometer）：质谱检测器将柱前的液相分离与质谱技术相结合，可实现化学物质的分离和结构表征。
HPLC检测器
检测器⑴紫外光度检测器它的作用原理是基于被分析试样组分对特定波长紫外光的选择性吸收，组分浓度与吸光度的关系遵守比尔定律。
最常用的检测器，应用最广，对大部分有机化合物有响应。
特点：a.灵敏度高：其最小检测量10-9g·mL-1,故即使对紫外光吸收很弱的物质，也可以检测；b. 线性范围宽；（比尔定律）c. 流通池可做的很小(1mm × 10mm ，容积8μL)；d. 对流动相的流速和温度变化不敏感可用于梯度洗脱；e. 波长可选，易于操作：如，使用装有流通池的可见紫外分光光度计（可变波长检测器）。
缺点：对紫外光完全不吸收的试样不能检测；同时溶剂的选择受到限制。
⑵光电二极管阵列检测器紫外检测器的重要进展；阵列由1024个光电二极管阵列，每个光电二极管宽仅50μm，各检测一窄段波长。
如图所示，在检测器中，光源发出的紫外或可见光通过液相色谱流通池，在此流动相中的各个组分进行特征吸收，然后通过狭缝，进入单色其进行分光，最后由光电二极管阵列检测，得到各个组分的吸收信号。
经计算机快速处理，得三维立体谱图。
⑶荧光检测器荧光检测器是一种高灵敏度、高选择性检测器。
对多环芳烃，维生素B、黄曲霉素、卟啉类化合物、农药、药物、氨基酸、甾类化合物等有响应。
荧光检测器的结构及工作原理和荧光光度计相似。
⑷差示折光检测器除紫外检测器之外应用最多的检测器。
差示折光检测器是借连续测定流通池中溶液折射率的方法来测定试样浓度的检测器。
溶液的折射率是纯溶剂（流动相）和纯溶质（试样）折射率乘以各物质的浓度之和。
因此溶有试样的流动相和纯流动相之间折射率之差表示试样在流动相中的浓度。
⑸电导检测器其作用原理是根据物质在某些介质中电离后所产生电导变化来测定电离物质含量。
仪器分析技术w6202-2高效液相谱仪常用检测器的分类及工作原理和应用
高效液相色谱仪常见检测器分类及工作原理和应用
主讲教师：长春职业技术学院 王磊
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检测器的分类 常用检测器的工作原理及应用
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检测器的分类
高效液相色谱仪常用检测器分类及工作原理和应用
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高效液相色谱仪常用的检测器
主要特点
池体积可制作的很小，检测后不破坏杨品， 可用于制备
灵敏度比紫外检测器高，噪音低，线性范围 宽，适用梯度洗脱及制备色谱；紫外吸收大 的溶剂不能做流动相
易受背景荧光、pH和溶剂的影响，适用于痕 量分析
可检测所有物质，不适合微量分析
蒸发光散射检测器 ELSD 纳克级激光计数检测器NQAQ
任何挥发型低于流动想的样品均能 被检测
高效液相色谱仪常见检测器分类及工作原理和应用
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常见检测器的工作原理及应用
荧光检测器的应用
环境中的污染物
– 多环芳烃(PAH)，多酚， 氨基甲酸酯等
食品、饮料 – 食品中的毒素；例如：黄 曲霉毒素
– 染料 – 维生素及衍生氨基酸 生物技术及制药
多环芳烃（PAH）
H3C CH3
CH3
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常见检测器的工作原理及应用
荧光检测原理
原理：发荧光的化合物吸收光使其分子达 到激发态，当其返回到基态时发射光的现象即 荧光。
检测过程：由光源发出的光，经激发光单 色器后，得到所需波长的激发光。经过样品池 被样品吸收，并使其被激发后发射出荧光。再 经选择发射波长的单色器分光后，单一波长的 发射光波被送至检测器进行检测，吸光强度与 激发光强度成正比。
紫外可见吸收检测器
色谱分析期末考试题库及答案
色谱分析期末考试题库及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 色谱分析中，固定相是：A. 流动相B. 柱子C. 样品D. 检测器答案：B2. 色谱图上，峰的宽度与下列哪项因素有关？A. 柱长B. 柱径C. 流动相流速D. 所有选项答案：D3. 高效液相色谱（HPLC）中，常用的检测器是：A. 紫外检测器B. 质谱检测器C. 火焰光度检测器D. 所有选项答案：D4. 下列哪项是色谱分析中常见的分离模式？A. 离子交换B. 反相C. 凝胶渗透D. 所有选项5. 色谱分析中，样品的分离效果与下列哪项无关？A. 固定相的选择B. 流动相的组成C. 柱温D. 样品的浓度答案：D6. 色谱分析中，样品的洗脱顺序与下列哪项无关？A. 样品与固定相的相互作用B. 样品与流动相的相互作用C. 样品的分子量D. 样品的沸点答案：D7. 色谱分析中，峰面积与下列哪项无关？A. 样品量B. 检测器的灵敏度C. 流动相的流速D. 样品的分子量答案：D8. 色谱分析中，柱效与下列哪项有关？A. 柱长B. 柱径C. 柱内填料的粒径D. 所有选项答案：D9. 色谱分析中，样品的分离度与下列哪项有关？B. 样品的保留时间C. 样品的洗脱时间D. 所有选项答案：D10. 色谱分析中，样品的保留时间与下列哪项有关？A. 样品与固定相的相互作用B. 流动相的流速C. 柱温D. 所有选项答案：D二、填空题（每题2分，共20分）1. 色谱分析中，样品的分离是通过_________和_________的相互作用实现的。
答案：样品固定相2. 色谱分析中，提高柱效的方法之一是减小_________。
答案：填料粒径3. 在反相色谱中，固定相通常是_________。
答案：非极性4. 色谱分析中，样品的保留时间是指样品从进样到_________的时间。
答案：检测器5. 色谱分析中，样品的分离度可以通过改变_________来优化。
答案：流动相组成6. 色谱分析中，样品的检测可以通过_________来实现。
高效液相色谱仪组成及检测器种类
高效液相色谱仪组成及检测器种类引言高效液相色谱仪（High Performance Liquid Chromatography, HPLC）是一种广泛应用于分离与分析化学领域的仪器。
它采用液体为流动相，将样品溶解在溶剂中，通过样品与固定相之间的相互作用进行分离。
本文将介绍高效液相色谱仪的组成以及常用的检测器种类。
高效液相色谱仪的组成液相输送系统高效液相色谱仪的核心部分是液相输送系统。
它包括溶剂管理系统、进样装置和柱温控制装置。
1.溶剂管理系统：溶剂管理系统主要由溶剂储存瓶、溶剂泵和混合器组成。
溶剂储存瓶用于存放溶剂，溶剂泵负责将溶剂从储存瓶中抽取并送入进样装置。
2.进样装置：进样装置用于将待测样品注入色谱柱中。
常见的进样方式有自动进样器和手动进样器。
自动进样器通常能够实现精确的样品量注入，并具有较高的重复性。
3.柱温控制装置：柱温控制装置用于控制色谱柱的温度，提供恒温环境以保证分析结果的准确性和重现性。
色谱柱色谱柱是高效液相色谱仪中起到分离样品的重要组成部分。
根据不同的应用需求和样品特性，可选择不同类型的色谱柱，如反相柱、离子交换柱、凝胶柱等。
1.反相柱：反相柱是最常用的色谱柱类型，广泛应用于多种领域。
它以疏水性为基础，用于分离非极性或有机溶剂溶解的样品。
2.离子交换柱：离子交换柱主要用于分离离子化合物，根据样品离子性选择阴离子或阳离子交换柱。
3.凝胶柱：凝胶柱适用于分离生物大分子，如蛋白质、核酸等。
凝胶柱内部常含有凝胶材料，通过凝胶间的空隙大小来实现不同分子量的分离。
柱后检测系统柱后检测系统是高效液相色谱仪中的另一个重要组成部分，它用于检测分离后的样品，并将数据转化为电信号输出。
常见的柱后检测系统包括：1.紫外可见检测器（UV-Vis Detector）：紫外可见检测器利用样品在紫外或可见光区域的吸收特性进行检测。
它具有广泛线性范围和较高的检测灵敏度。
紫外可见检测器适用于大多数有色或紫外可见吸收的标准分析物。
高效液相色谱常用的检测器的适应范围及工作原理
高效液相色谱常用的检测器的适应范围及工作原理
高效液相色谱（HPLC）是一种常用的色谱分析技术，具有分离效率高、检测灵敏度高、样品处理简单等优点。
在HPLC中，检测器是
至关重要的组成部分，它能够将分离出的化合物转化为可测量的信号。
本文将介绍HPLC常用的检测器的适应范围及工作原理。
1. 紫外检测器
紫外检测器是HPLC中最常用的检测器之一，它适用于检测含有
芳香环的化合物。
紫外检测器的工作原理是，分离出的化合物通过紫外光的吸收而产生信号。
紫外检测器的检测波长通常为200-400 nm，其中254 nm和280 nm是最常用的波长。
2. 荧光检测器
荧光检测器适用于具有荧光性质的化合物。
荧光检测器的工作原理是，分离出的化合物被激发产生荧光信号，荧光信号经过荧光检测器的荧光探测器检测后输出。
荧光检测器的灵敏度高，但有些化合物可能需要通过前处理方法使其具有荧光性质。
3. 电化学检测器
电化学检测器适用于检测具有电化学反应性质的化合物，如氨基酸、糖类、药物等。
电化学检测器的工作原理是，化合物在电极上发生氧化还原反应，产生电流信号，通过电流信号来检测化合物的含量。
4. 蒸发光散射检测器
蒸发光散射检测器适用于检测具有低紫外吸收、低荧光性质的化合物，如脂肪酸、磷脂等。
蒸发光散射检测器的工作原理是，通过蒸
发将化合物转化为气态，再通过光散射检测器检测出化合物的含量。
总之，不同类型的检测器适用于不同类型的化合物，选择合适的检测器能够提高HPLC的分析效率和准确性。
HPLC上岗培训考试试题
HPLC上岗培训考试试题HPLC（高效液相色谱）是一种常用的分析技术，广泛应用于制药、化工、环境监测等领域。
为了提高分析人员的技能水平，许多实验室都会组织HPLC上岗培训考试，以确保操作人员掌握相关知识和技能。
本文将针对HPLC上岗培训考试试题展开讨论。
一、基础知识篇1. HPLC的英文全称是什么？HPLC的英文全称是High Performance Liquid Chromatography，即高效液相色谱。
2. HPLC的工作原理是什么？HPLC利用固定相和流动相之间的相互作用，通过样品在固定相上的分配和再分配，实现对样品成分的分离和定量分析。
3. HPLC中常用的固定相有哪些？常用的固定相有反相、离子交换、凝胶、亲水性等。
4. HPLC中常用的流动相有哪些？常用的流动相有水、有机溶剂、缓冲液等。
5. HPLC中常用的检测器有哪些？常用的检测器有紫外检测器、荧光检测器、电导检测器等。
二、方法开发与优化篇1. 在HPLC方法开发中，如何选择合适的固定相？选择固定相时需要考虑样品的性质、分离目标和分析条件等因素。
一般来说，反相固定相适用于非极性或弱极性化合物的分离，离子交换固定相适用于离子化合物的分离。
2. 在HPLC方法开发中，如何选择合适的流动相？选择流动相时需要考虑样品的性质、分离目标和分析条件等因素。
一般来说，水和有机溶剂的组合常用于非极性或弱极性化合物的分离，而缓冲液常用于离子化合物的分离。
3. 在HPLC方法开发中，如何选择合适的检测器？选择检测器时需要考虑样品的性质、分离目标和分析条件等因素。
紫外检测器适用于吸收性化合物的检测，荧光检测器适用于荧光性化合物的检测，电导检测器适用于离子化合物的检测。
4. 在HPLC方法开发中，如何优化分离条件？优化分离条件可以通过调整流速、温度、pH值、固定相类型等参数来实现。
一般来说，较高的流速可以缩短分析时间，适当的温度可以提高分离效果，合适的pH值可以影响离子化合物的分离。
高效液相色谱——电喷雾式检测器的校准方法
高效液相色谱——电喷雾式检测器的校准方法1. 引言高效液相色谱（HPLC）作为一种重要的分析方法，在科研和工业领域有着广泛的应用。
而在HPLC分析中，检测器起着至关重要的作用，其准确性直接影响到实验结果的可靠性。
电喷雾式检测器作为HPLC 中常用的一种检测器，其校准方法对于保证分析结果的准确性至关重要。
2. 电喷雾式检测器的工作原理电喷雾式检测器是利用毛细管内的溶液在高压电场的作用下被喷成细小的液滴，形成雾状物，再通过干燥后使得待检化合物得以赴电离，最后通过质谱仪进行检测。
其工作原理复杂，所以对其进行校准尤为重要。
3. 校准方法的基本步骤a. 校准前的准备工作：检查仪器的各个部件是否完好，保证流动相的纯度和稳定性。
b. 内部标定：使用标准物质进行内部标定，并通过仪器的自动调节功能使其达到最佳状态。
c. 校准曲线的绘制：使用不同浓度的标准溶液进行测试，绘制出校准曲线。
d. 稳定性评估：检测器在长时间运行后的性能是否稳定，需要进行稳定性评估，确保实验结果的准确性和可靠性。
4. 校准方法的注意事项a. 校准曲线的选择：根据分析物的特性选择合适的校准曲线类型，可采用线性、二次、对数等不同类型的校准曲线。
b. 校准标准物质的选择：校准物质的纯度和稳定性对校准结果有着重要影响，因此需要选择高纯度和稳定性的标准物质。
c. 校准条件的选择：在校准过程中需要考虑到流动相的选择、流速的设定、温度的控制等因素，以保证校准的准确性和可重复性。
5. 个人观点和理解电喷雾式检测器的校准方法十分重要，它不仅仅是为了保证仪器的准确性和稳定性，更是为了保证分析结果的准确性和可靠性。
在实际操作中，需要严格按照校准方法的步骤进行操作，并且需要耐心细致地进行校准曲线的绘制和稳定性的评估。
只有这样，才能保证实验结果的高质量和可信度。
6. 总结电喷雾式检测器的校准方法是HPLC分析中至关重要的一环。
通过内部标定、校准曲线的绘制和稳定性评估等步骤，可以保证检测器的准确性和稳定性。
液相岗考试题库及答案
液相岗考试题库及答案一、选择题1. 液相色谱法中，色谱柱的固定相通常是什么？A. 气体B. 液体C. 固体D. 离子答案：B2. 在高效液相色谱（HPLC）中，常用的检测器类型不包括以下哪一种？A. UV-Vis检测器B. 荧光检测器C. 质谱检测器D. 热导检测器答案：D3. 液相色谱中，以下哪种条件会导致色谱峰的展宽？A. 增加柱温B. 降低柱温C. 增加流速D. 减小样品体积答案：C4. 液相色谱中，色谱峰的保留时间与以下哪个参数无关？A. 样品的化学性质B. 固定相的性质C. 流动相的组成D. 色谱柱的长度答案：D5. 液相色谱中，样品的分离度与以下哪个参数无关？A. 样品的分子大小B. 样品的极性C. 色谱柱的类型D. 检测器的灵敏度答案：D二、填空题6. 液相色谱法中，样品的分离基于样品分子与________和________之间的相互作用。
答案：固定相；流动相7. 在液相色谱中，柱效是指色谱柱的________能力。
答案：分离8. 液相色谱中，样品的洗脱顺序通常与样品的________有关。
答案：极性9. 液相色谱中，等度洗脱是指流动相的组成在分离过程中________。
答案：保持不变10. 液相色谱中，梯度洗脱是指流动相的组成在分离过程中按照预定的________进行变化。
答案：程序三、简答题11. 简述液相色谱法的基本原理。
答案：液相色谱法是一种分离技术，它基于样品分子在固定相和流动相之间的分配系数差异。
样品通过色谱柱时，不同组分的分子与固定相的相互作用力不同，导致它们在色谱柱中的移动速度不同，从而实现分离。
12. 解释什么是梯度洗脱，并说明其在液相色谱中的应用。
答案：梯度洗脱是一种在液相色谱中使用的洗脱技术，它通过在分离过程中逐渐改变流动相的组成来实现样品的分离。
这种方法可以提高分离效率，尤其适用于分离具有不同极性或分子大小的复杂样品。
13. 描述液相色谱中常用的几种检测器，并简要说明它们的特点。
HPLC几种最常用的主要检测器(四)
HPLC几种最常用的主要检测器（四）(4)目前用法最多的几种非挑选性(通用性)HPLC检测器。
①示差折光检测器(RID)。
示差折光检测器在20年前是一种用法最多的非挑选性检测器；它是一种利用物质的折射率变幻，来做定性或定量测量的仪器。
图2-66是一种典型的示差折光检测器。
1-微调器；2-粗调器；3-池棱镜；4-参比溶液；5-样品；6-检测池；7-透镜；8-光检测器(光接收器) 图2-66 反射式折光仪光路图②蒸发光散射检测器(ELSD)。
ELSD 是目前HPLC中用法最广泛的一种非挑选性的通用型检测器。
我国2010版药典中十分重视它的应用。
我国上海通微公司近几年推出了一种UM5000型ELSD，已经销售100多台，深受广阔用户欢迎。
下面容易介绍UM5000型ELSD的有关状况。
a．国产UM 5000型ELSD工作原理：UM 5000型ELSD是我国“＋五”国家科技攻关方案重大项目研发成绩，是我国首台国产化的ELSD，其性能指标达到国际同类产品先进水平。
它可检测挥发性低于流淌相的任何样品，而不需要样品含有发色基团。
ELSD的敏捷度比示差折光检测器高，对温度变幻不敏感，基线稳定，适合干梯度洗脱液相色谱联用。
UM 5000型ELSD的形状2-67所示。
图2-67 UM 5000型ELSD的形状图雾化原理为液体流淌相在载气压力的作用下在雾化室内改变成细小的液滴，从而使溶剂更易于蒸发。
液滴的大小和匀称性是保证检测器的敏捷度和重复性的重要因素。
UM5000型蒸发光散射检测器，通过对气压和温度的精确控制，确保在雾化室内形成一个较窄的液滴尺寸分布，使液滴蒸发所需要的温度大大降低。
蒸发原理为载气把液滴从雾化室运输到漂移管举行蒸发。
在漂移管中，溶剂被除去，留下微粒或纯溶质的小滴。
UM5000型ELSD采纳低温蒸发模式，维持了颗粒的匀称性，对半挥发性物质和热敏性化合物同样具有较好的敏捷度。
检测：光源采纳650nm激光，溶质颗粒从漂移管出来后进入光检测池，并穿过激光光束。
hplc名词解释
hplc名词解释HPLC，全称高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography），是一种常用的分离与分析技术，属于色谱技术的一种。
HPLC利用液相在固定相上的分离原理，通过样品在高压下通过柱床的流动，在固定相的作用下，根据样品中化学物质的相互作用、分离效果和保留时间等，实现样品的分离与定量分析。
HPLC的名词解释如下：1. 高效液相色谱仪（High Performance Liquid Chromatograph）：用于HPLC分析的主要仪器，包括进样器、泵、柱、检测器等部分，用于实现样品的分离和分析。
2. 压力容器（Pressure Vessel）：用于提供高压流动液相的容器，通常是由不锈钢制成，能够耐受较高的压力。
3. 柱床（Column Bed）：用于样品分离的部分，可由固定相填充或涂覆在柱内壁上，根据样品的性质和分离需求选择不同的柱床材料和固定相类型。
4. 保留时间（Retention Time）：溶质在柱中停留的时间，是进行分离和定量分析的重要参数。
5. 梯度洗脱（Gradient Elution）：在分离过程中改变流动液相的成分或浓度，以提高分离效果和减少分析时间的方法。
6. 反相色谱（Reverse Phase Chromatography）：常用的HPLC分离模式之一，使用非极性固定相和极性溶剂作为流动相，根据样品溶质的极性差异进行分离。
7. UV检测器（UV Detector）：常用的HPLC检测器之一，利用溶质吸收紫外光的特性来测定样品的浓度。
8. 标准曲线（Standard Curve）：通过一系列已知浓度的标准溶液制备的曲线，用于根据待测样品的响应值来计算其浓度。
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能会掩盖前期脱洗的色谱峰
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注意事项: a: 洗脱液的组成一定要恒定，不能使用梯度洗脱。 b: 不能使检测池带压工作，在与其它检测器串联使用时应放在最
后。 c: 流速要恒定，泵的流速波动要小于0.5％，使用往复泵时要用阻
尼装置。 d: 温度要恒定，恒温控制要达±10-4℃,在使用时预热时间要充足
，否则基线漂移十分严重 。
通用型检测器 约有80％的分析样品具有紫外吸收,可以使用这种检测器检测。
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优点: a: 灵敏度高，检测下限约为 10-6 g／ml b: 线性范围广 C: 对温度和流速不敏感，适于进行梯度洗脱
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限制: a: 没有紫外吸收的物质不能检测 b: 应尽可能选择在检测波长下没有背景吸收的流动相 (限制了一些 一些截止波长在200~300nm之间的良好溶剂的使用 )
阵列的每一单元有一只光敏二极管和一只与之并联的电容器． 光电二极管紫外检测器n个单元同时检测，从而使采样时间减 少到普通的１／Ｎ．使用２１１个二极管的阵列元件，最快时，每 １０ms可完成一次测量．每秒中可以收集２００００～１００００ ０个数据．
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与普通UV-VIS检测器不同之处:
a: 普通UV-VIS检测器是先用单色器分光，只让特定波长的光进入 流动池。 而二极管阵列UV-VIS检测器是先让所有波长的光都通过流动池，然 后通过一系列分光技术，使所有波长的光在接受器上被检测.
率乘以各自的摩尔浓度之和． 溶有样品的流动相与流动相本身之间折射率之差就表示样品
在流动相中的浓度．原则上，凡是与流动相折射指数有差别的样品 都可以测定它的浓度．
通用型检测器 (浓度检测器 ) 检测限可达１０－６ ～１０－７g/ml
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优点: 通用性强，操作简便
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缺点: a: 灵敏度低 b:过于娇贵---室温的变化会影响基线的稳定性 ,大的溶剂前沿峰可
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6:蒸发光散射检测器 (ELSD)
原理: 色谱柱流出液进入雾化器形成微小液滴，与通入的气体 (通常是
氮气，有时也用空气)混合均匀，经过加热的漂移管，蒸发除去流动 相，样品组分形成气溶胶，用强光或激光照射气溶胶，产生光散射 ，用光电二极管检测散射光。
散射光的强度(I)与组分的质量(m)有下述关系： I=km 或lgI=b lgm+lgk
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2:荧光检测器
原理: 物质的分子或原子经光照射后，有些电子被激发至较高的能 级，这些
电子从高能级 跃至低能级时，物质会发出比入射光 波长较 长的光，这种 光称为荧光。荧光检测器就是在样品的激发波长处检测发射光的强弱.
在样品浓度足够低时,下，荧光强度与如射光强度,量子效率及样品浓度 成线形关系。
荧光强度: F=I0 εφ L C
例子：花生酱提取物中衡量黄曲霉素的荧光检测法
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缺点: a:适用范围有一定的局限性 –只适用于有荧光基团＆衍生化之后
有荧光基团的化合物 b: 定量分析时线性范围较窄
它适合于 稠环芳烃、氨基酸、胺类、维生素、蛋 白质等荧光物质 的测定
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3:二极管阵列检测器（diode-array detector, DAD）
柱后补加适量电解质溶液，这并不影响分离效率） 现在在药物分析领域里面已经没有其他方法常用了.
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5:示差折光检测器 (RID)
原理: 化合物的折光率不同,光会偏转。光偏转的程度与样品的浓度
成正比。 根据不同浓度的物质具有不同折射率来进行组分检测的。 溶液的折射率是溶剂（流动相）和溶质（样品）各自的折射
b:普通UV-VIS检测器只能得到二维的谱图,而DAD可以得到 比较光谱法 吸收比法 双波长法
b: 色谱峰鉴定 与标准品或标准光谱比较 正常紫外光谱的比较
三维色谱能提供更多全面的信息。
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4:电化学检测器
理论基础 a: 法拉第第一定律 在电介过程中，电极上起反应的物质量
（W）与通过电介池的电量（Q）成正比。
b: 法拉第第二定律 各种不同的电介质溶液中，通过相同的电量 时，电极上析出的电极产物的当量数相同。 （96487库仑）
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优点: a:专用型检测器,具很强的专属性。 b:线性范围可达106，宽广 c:高灵敏度 10-12g/l，可与荧光相比，
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缺点: a: 只能测定具有电解活性（电氧化一还原性）物质 b: 要求洗脱液具有导电性（可向洗脱液中加入少量电解质，或在
荧光检测器是一种选择性检测器
不到20%的物质使用这种检测手段,许多药物如喹诺酮类药物采用这种检 测方法.
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在垂直的方向上 进行检测
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优点: a: 灵敏度非常高(灵敏度在目前常用的HPLC检测器中最高 )，其
检出限可达10-9g/ml，(比紫外检测器高2—3个数量级，适合于痕量 分析 )
b: 可以用于梯度洗脱 c: 对仪器的稳定性（如温度和压力的稳定性）依赖较小 d: 选择性好，优于紫外
原理: 光电二极管阵列（或CCD阵列，硅靶摄像管等）作为检测元件的
UV-VIS检测器。它可构成多通道并行工作，同时检测由光栅分光， 再入射到阵列式接受器上的全部波长的信号，然后，对二极管阵列 快速扫描采集数据，得到的是时间、光强度和波长的三维谱图。
１９７６年Ｎilano等人首先报道这种检测器，它不必停留就可获 得“在流”色谱的全部光谱信息，可跟随色谱峰扫描，用来观察色 谱柱流出组分的每个瞬间的动态光谱吸收图．
由于比其他快速扫描检测器具有结构简单，工作可靠，性能好 的优点，自一问世，就得到迅速发展．
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结构： 核心是二极管阵列元件，它由一系列光敏二极管蚀刻在硅片上
组成．一般，每个阵列又２００～１０２４个光电二极管组成，他 们的光敏范围是２００～６００nm，每只二极管的分辨率是１～ ２nm，光电二极管越多，分辨率越高．
HPLC中常用的检测器
1:紫外-可见光（UV-VIS）检测器
工作原理： 基于Lambert-Beer定律，即被测组分对紫外光或可见光具有吸
收，且吸收强度与组分浓度成正比
A=lg Io/I=εbc
其中A为吸光度（消光值）,Io为入射光强，I为透射光强，ε为样 品的吸光度（消光系数）b为光程长，c为样品浓度。