微生物检测中常用灭菌和消毒方法
实验室如何灭菌，灭菌方法汇总！
实验室如何灭菌，灭菌方法汇总！实验室如何灭菌，灭菌方法汇总！食品论坛昨天消毒和灭菌是微生物实验技术中最基本的操作技术，因此从事药品生产、检验的人员均应了解消毒和灭菌的基本概念、两者的关系，各自的应用方法及其意义，操作时应严格执行相关的操作规程，一方面确保生产与检验工作的效果，另一方面也是对自身安全的保护。
消毒和灭菌的概念：1、消毒：指对病原微生物的繁殖体的致死作用，但不能杀死芽孢等全部微生物，因此消毒是不彻底的，不能代替灭菌。
凡用于消毒的化学药品称为消毒剂，因此人们也常称消毒剂为化学消毒剂。
2、灭菌：杀灭物体中所有活的微生物（含芽孢）的作用，灭菌是采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。
通常用物理方法来达到灭菌的目的。
二、消毒和灭菌的关系1、共性：杀灭微生物以控制其污染和防止传播。
2、区别：消毒灭菌方法目前常用的消毒灭菌方法多采用物理方法(如干热灭菌法、湿热灭菌法、过滤除菌法、射线杀菌法等)和化学方法(消毒剂、抗生素)两大类。
1.干热灭菌法干热灭菌法是利用恒温干燥箱内120ºC~150ºC的高热，并保持90~120分钟，杀死细菌和芽孢，达到灭菌目的的一种方法。
主要适用于不便在压力蒸汽灭菌器中进行灭菌，且不易被高温损坏的玻璃器皿、金属器械以及不能和蒸汽接触的物品的灭菌。
用此方法灭菌的物品干燥，易于贮存。
酒精灯火焰烧灼灭菌法也是属于干热灭菌的方法之一。
在进行动物细胞体外培养工作时，常须利用工作台面上的酒精灯火焰对金属器具及玻璃器皿口缘进行补充灭菌。
2.湿热灭菌法压力蒸汽湿热灭菌法是目前最常用的一种灭菌方法。
它利用高压蒸汽以及在蒸汽环境中存在的潜热作用和良好的穿透力，使菌体蛋白质凝固变性而使微生物死亡。
适合于布类工作衣、各种器皿、金属器械、胶塞、蒸馏水、棉塞、纸和某些培养液的灭菌。
高压蒸汽灭菌器的蒸汽压力一般调整为1.0～1.1kg/cm2，维持20～30min即可达到灭菌效果。
常用消毒灭菌方法及原理
清洁剂和酶净剂
清洁剂
用于清除物品表面的污垢和脏物，一般不对 微生物产生直接杀伤作用。
酶净剂
含有酶，可分解有机质，是一种辅助清洁剂。
过滤灭菌
原理
在特定材料的滤器上过滤， 将细菌滤掉，达到灭菌的效 果。
应用
适用于纯化、分离、过滤产 物灭菌，如生化制品、医用 液体等。
缺点
一般无法过滤病毒和微生物 内的内毒素。
消毒剂的选择原则
• 有效杀灭目标微生物 • 不损坏被消毒物品 • 易于使用、操作和储存 • 在短时间内达到消毒效果 • 经济、环保无污染
消毒剂的使用方法
• 使用前先清洁表面污垢 • 按说明书比例配制消毒液 • 浸泡法、喷雾法、拖地法等不同应用方法 • 安全操作、避免误食、误伤
消毒剂的注意事项
• 注意消毒剂的有效期、储存温度、密闭程度 • 不能直接使用未稀释过的浓缩消毒液 • 注意个别人的过敏反应，戴好手套和口罩 • 不内服，外敷注意用量控制
3 注意事项
操作必须有专业人员，慎重操作。
气态灭菌
原理
应用 优点
通过气体灌注灭菌，让灭菌剂均匀弥散在 被灭菌物体表面，使病原体失去生长繁殖 能力。
适用于微小或不透明的物体灭菌，如医院 医疗器械薄膜包装袋、静脉输液袋等。
速度快、温度低、不会损坏物品。
吸附型灭菌
原理
通过吸附灭菌剂杀死病原 体，杀菌后再通过吸附剂 脱硝。
紫外线灭菌原理与应用
1
原理
紫外线通过破坏微生物的DNA和核酸结构，使它们丧失繁殖和生存能力。
2
应用
适用于小区域的消毒灭菌，如空气净化器、冰箱、水龙头、键盘、手机等。
3
优点
安全，环保，消毒效果强。
微生物消毒与灭菌
超声波主要通过四方面的作用达到杀菌目的： ① 震荡：使微生物细胞内含物强烈震荡而被破坏 ② 氧化杀菌：因在水溶液中超声波能产生过氧化氢 ③ 产生热效应：破坏细胞的酶系统； ④ 空（腔）化作用：即在液体中形成许多真空状态的 小空腔，空腔崩破产生的巨大压力使细胞裂解。
四、过滤除菌法
滤过除菌 :通过机械阻留作用将液体或空气中的细菌 等微生物除去的方法。但滤过除菌常不能除去病毒 、霉形体以及细菌L型等小颗粒。
应用
①低温常用于保存菌种。 但是，反复冻融对微生物 不宜。 各种细菌对低温的抵抗力亦不同。
（细菌、酵母菌、霉菌0－4℃；病毒、某些细菌－20 －－70℃，最好在液氮中（－196℃）可长期保存； 但是巴氏杆菌、脑膜炎双球菌等低温敏感，低温比在 室温中死亡更快。）
②冷冻保存食品——细菌生长繁殖停止
（2）冷冻真空干燥法
应用： ①细菌滤器－－不耐热物品的灭菌（如不耐高温的营 养液、血清、毒素、抗生素、V、酶、维生素等） ②空气除菌－－超净工作台；SPF动物的饲养；GMP 厂房的洁净度（四级）
滤菌过程
五、干燥及低温抑菌法
1.干燥 干燥可致微生物死亡
干燥－－缺水－－生化反应受阻－－新陈代谢障碍－－ 死亡。甚至引起菌体蛋白质变性和由于盐类浓度的增 高而逐渐导致死亡。
或称抑菌剂。 消毒剂和防腐剂区别：无严格的界限
化学治疗剂：用于消除宿主体内病原微生物或其他 寄生虫的化学药物称为化学治疗剂。化学治疗剂对 于宿主和病原微生物的作用具有选择性，它们使其 生命活动受到抑制或使其死亡，而对宿主细胞毒副 作用甚小。
消毒剂与治疗剂的区别：对宿主组织细胞的作用。
消毒剂特点：在杀灭病原微生物的同时，对肌体的 组织细胞也有损害作用。因此，只用于局部（少数 不被吸收可由于消化道）、器械、环境。
微生物检测中常用的灭菌和消毒方法
微生物检测中常用的灭菌和消毒方法消毒和灭菌两个词在实际使用中常被混用，其实它们的含义是有所不同的。
消毒是指应用消毒剂等方法杀灭物体表面和内部的病原菌营养体的方法，而灭菌是指用物理和化学方法杀死物体表面和内部的所有微生物，使之呈无菌状态。
物理方法一、温度利用温度进行灭菌、消毒或防腐，是最常用而又方便有效的方法。
高温可使微生物细胞内的蛋白质和酶类发生变性而失活，从而起灭菌作用，低温通常起抑菌作用。
1.干热灭菌法a.灼烧灭菌法：利用火焰直接把微生物烧死。
此法彻底可靠，灭菌迅速，但易焚毁物品，所以使用范围有限，只适合于接种针、环、试管口及不能用的污染物品或实验动物的尸体等的灭菌。
b.干热空气灭菌法：这是实验室中常用的一种方法，即把待灭菌的物品均匀地放入烘箱中，升温至160℃，恒温1小时即可。
此法适用于玻璃皿、金属用具等的灭菌。
2.湿热灭菌法在同样的温度下，湿热灭菌的效果比干热灭菌好，这是因为一方面细胞内蛋白质含水量高，容易变性。
另一方面高温水蒸汽对蛋白质有高度的穿透力，从而加速蛋白质变性而迅速死亡。
a.巴氏消毒法：有些食物会因高温破坏营养成分或影响质量，如牛奶、酱油、啤酒等，所以只能用较低的温度来杀死其中的病原微生物，这样既保持食物的营养和风味，又进行了消毒，保证了食品卫生。
该法一般在62℃，30分钟即可达到消毒目的。
此法为法国微生物学家巴斯德首创，故名为巴氏消毒法。
b.煮沸消毒法：直接将要消毒的物品放入清水中，煮沸15分钟，即可杀死细菌的全部营养和部分芽孢。
若在清水中加入1%碳酸钠或2%的石炭酸，则效果更好。
此法适用于注射器、毛巾及解剖用具的消毒。
c.间歇灭菌法：上述两种方法在常压下，只能起到消毒作用，而很难做到完全无菌。
若采用间歇灭菌的方法，就能杀灭物品中所有的微生物。
具体做法是：将待灭菌的物品加热至100℃，15~30分钟，杀死其中的营养体。
然后冷却，放入37℃恒温箱中过夜，让残留的芽孢萌发成营养体。
微生物实验室消毒灭菌要求和流程及注意事项
微生物实验室消毒灭菌要求和流程及注意事项微生物实验室是一个高度严谨和敏感的环境，对实验室的消毒灭菌要求十分严格。
这是因为微生物实验室是进行微生物研究和实验的地方，如果实验室内存在细菌或其他微生物的污染，将会对实验结果产生严重的影响。
因此，消毒灭菌是微生物实验室必不可少的环节。
本文将详细介绍微生物实验室消毒灭菌的要求、流程和注意事项。
一、要求1.彻底灭菌：微生物实验室内的所有物品、设备和工作台面都必须进行彻底的灭菌，以杀灭所有可能存在的细菌和其他微生物。
2.防止交叉污染：实验室内的不同区域和工作台面之间要做到完全隔离，以防止不同区域之间的交叉污染。
3.定期检测：实验室内的灭菌设备和方法需要定期检测和验证，以确保其灭菌效果符合要求。
4.合理使用消毒剂：选择合适的消毒剂，并严格按照说明书使用，不得随意更换或混用消毒剂。
5.严格遵守操作规程：所有实验室工作人员都必须严格遵守消毒灭菌的操作规程，不得有任何疏漏和违规行为。
二、流程1.清洁表面：先用清水和洗涤剂对工作台面、器皿和设备进行清洁，将表面的杂质和细菌清除干净。
2.消毒涂布：使用合适的消毒涂布剂对清洁后的表面进行喷洒，确保表面被均匀覆盖。
3.静置时间：让消毒涂布剂在表面停留一定时间，让其发挥充分的杀菌作用。
4.擦拭干净：用纯净水或消毒液擦拭表面，将残留的消毒剂和死菌彻底清除，确保表面干净无菌。
5.验证结果：使用生物指示物或其他灭菌效果验证方法对表面进行检测，确保其灭菌效果符合要求。
6.记录和归档：将每次的消毒灭菌操作记录在案，并进行归档保存，以备日后查阅和追溯。
三、注意事项1.选择合适的消毒剂：不同的表面和设备可能需要使用不同的消毒剂，要选择合适的消毒剂进行消毒处理。
2.避免混用消毒剂：不得将不同种类的消毒剂混合使用，以免产生反应或影响消毒效果。
3.注意消毒涂布剂的浓度和使用方法：严格按照说明书中的浓度和使用方法进行操作，不得随意添加或更改浓度。
4.物品的储存和保存：已经消毒灭菌过的物品要储存到干净无菌的环境中，以免受到二次污染。
微生物的消毒和灭菌技术
微生物的消毒和灭菌技术一、微生物消毒和灭菌的概念消毒:是指杀死病原微生物、但不一定能杀死细菌芽孢的方法。
通常用化学的方法来达到消毒的作用。
用于用于消毒的化学药物叫做消毒剂。
灭菌:是指把物体上所有的微生物(包括细菌芽孢在内全部杀死的方法, 通常用物理方法来达到灭菌的目的。
灭菌方法分为物理灭菌法和化学灭菌法。
防腐:是指防止或抑制微生物生长繁殖的方法。
用于防腐的化学药物叫做防腐剂。
无菌:不含活菌的意思,是灭菌的结果。
防止微生物进入机体或物体的操作技术称为无菌操作二、微生物的消毒方法常用的消毒方法有物理法和化学法。
物理法就是用物理方法杀灭或清除病原微生物和其他有害生物,主要有热消毒法、紫外线消毒法、电离辐射法、微波法等。
最常用的物理消毒方法是热消毒法和紫外线消毒法。
热消毒法(煮沸法 :是最简单有效的消毒方法,不需要特殊设备即可进行。
杀灭繁殖型细菌与病毒效果好, 对芽胞作用较小。
煮沸时间一般为 10~30分钟。
金属器械、棉织品、食具、玻璃制品等可用煮沸消毒。
但毛皮、呢绒和塑料制品等不能煮沸消毒。
热消毒法不适用于芽胞污染的消毒紫外线消毒法就是利用紫外线照射使微生物诱变致死, 达到将被服中的有害微生物除掉的目的。
消毒用紫外线灯管有 15W 、 20W 、 30W 等规则。
瓦数代表灯管在 25~40℃时紫外线输出能量。
灯管寿命一般为 3000~4000小时, 超过此时限效果不可靠。
紫外线对一般细菌、病毒均有杀灭作用。
革兰阴性菌最敏感, 其次为革兰阳生菌。
但结核杆菌却有较强抵抗力。
一般紫外线消毒对细菌芽胞无效。
紫外线广泛用于室内空气消毒, 如手术室、烧伤病房、传染病房、实验室等。
灯管距地面约 2.0~2.5m 高。
每 10~15cm 2面积可设 30W 灯管一个,最好每照射 2小时后,间歇 1小时后再照,以免臭氧浓度过高。
灯管用铝制灯罩作反向或侧向照射,可用于有人在的条件下消毒空气。
对污染表面消毒时, 灯管距表面不超过 1m , 灯管周围 1.5~2cm 处为消毒有效范围。
实训二 微生物实验常用灭菌和消毒方法
实训二微生物实验常用灭菌和消毒方法一、实验目的1、学习微生物实验常用灭菌消毒方法；2、掌握高压蒸汽灭菌法、干热灭菌法等常用灭菌方法；3、熟悉灭菌消毒过程中的注意事项。
二、实验原理消毒是指杀灭或清除传播媒介上病原微生物，但不一定杀灭芽孢，使其达到无害化的处理。
灭菌是指杀灭或清除传播媒介上所有微生物，包括芽孢。
灭菌方法通常分为：（1）加热灭菌；（2）过滤除菌；（3）射线灭菌和消毒；（4）化学药剂灭菌和消毒。
以下介绍几种微生物实验常用灭菌消毒方法。
（一）干热灭菌干热灭菌是指利用干热空气杀灭微生物，一般在电烘箱中进行。
由于蛋白质在干燥无水的情况下不容易凝固，干热灭菌所需温度较湿热灭菌高，时间也较湿热灭菌长。
一般须在140℃左右保持恒温3-4h，方能达到灭菌的目的。
干热灭菌适用于空玻璃器皿的灭菌，凡带有橡胶的物品和培养基，都不能进行干热灭菌。
烘箱内装入物品应留有空隙，以利于空气流动，否则箱内受热不均，部分物品灭菌不彻底。
（二）高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌是一种湿热灭菌方法，是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽。
待锅内冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀，继续加热。
由于此时水蒸气无法排出，增加了灭菌锅内的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度，导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌目的。
高压蒸汽是最有效的灭菌法，能迅速地达到完全彻底灭菌的效果。
一般在121℃灭菌15-30min，所有微生物包括芽孢在内都可杀死。
在同一温度下，湿热杀菌效果比干热好，因为微生物细胞蛋白质在湿热情况下更易凝固。
高压蒸汽灭菌锅有立式和卧式两种。
各种微生物的营养体在100℃温度下半小时即可被杀死，而其芽孢和孢子在这种条件下却不会失去生活力。
间歇灭菌就是根据这一原理进行的。
间歇灭菌是保持100℃，30min杀死培养基内杂菌的营养体，然后将含有芽胞和孢子的培养基在温箱内或室温放置24h，使芽孢和孢子萌发为营养体，再用100℃处理30min，再放置24h。
灭菌与消毒的原理与方法
灭菌与消毒的原理与方法随着现代医学与生物科技的发展，灭菌与消毒的重要性越来越被人们所重视。
在医院、实验室、食品生产等领域，必须采取有效的灭菌与消毒措施，以杀死细菌、病毒和真菌等微生物，保障人们的健康与安全。
本文将简要介绍灭菌与消毒的原理、分类及常用方法。
一、灭菌与消毒的原理灭菌和消毒都是为了杀死细菌、病毒和真菌等微生物，防止传染病的发生。
灭菌是彻底杀灭所有微生物的过程，而消毒则是将病原菌的数量降低到安全水平的过程。
灭菌和消毒的原理是相似的，就是通过杀灭或去除微生物的细胞壁、膜、核酸或蛋白质等结构，破坏微生物的生命活动，从而防止其繁殖和传播。
常用的灭菌与消毒方法包括物理方法和化学方法。
二、灭菌与消毒的分类1. 物理消毒方法物理消毒方法主要是利用物理因素如高温、过滤、辐射和低温等，来杀灭或去除微生物。
高温消毒：通常采用干热灭菌和湿热灭菌。
干热灭菌通常在160-180°下，使细菌死亡，但较耗时；而湿热灭菌则在蒸汽压力灭菌器中，在121°下灭菌。
这一方法较快，但不适用于某些材料。
过滤消毒：利用特定孔径的过滤膜过滤掉细菌、病毒和真菌。
这种方式可以过滤掉直径大于0.22微米的大部分微生物。
紫外线消毒：利用特定波长的紫外线光线杀灭细菌、病毒和真菌等微生物，是一种比较温和的消毒方法。
2. 化学消毒方法常用的化学消毒剂有氯化物、过氧化物、大环内酯和醇等。
这些化学消毒剂可以杀灭微生物，有效防止病菌的传播，但存在使用安全性和副作用的问题，需要根据实际情况谨慎选择。
三、灭菌与消毒的方法1. 食品灭菌与消毒食品灭菌与消毒主要是为了杀灭或去除食品中的致病微生物，以保证食品的安全和卫生。
高温消毒是常用的灭菌方法。
对于具有抗热性的细菌和孢子，需要高温灭菌。
而利用紫外线消毒和化学消毒剂消毒并不常用于食品。
2. 医疗器械消毒医疗器械的灭菌和消毒具有重要意义，不仅可以防止交叉感染，同时还能保护医护人员和患者的健康。
微生物灭菌方法有哪些
微生物灭菌方法有哪些
微生物灭菌方法包括以下几种：
1. 高温灭菌：包括煮沸法、蒸汽灭菌法和干热灭菌法。
煮沸法将物体浸入沸水中煮沸一段时间来杀灭微生物。
蒸汽灭菌法使用高压蒸汽来灭菌，常见的蒸汽灭菌设备是压力锅和蒸汽灭菌器。
干热灭菌法通过高温烘烤来灭菌，常用于灭菌器械或耐高温的材料。
2. 化学灭菌：使用化学物质来消灭微生物。
常见的化学灭菌方法包括酒精消毒、酚消毒、氯消毒、过氧化氢（双氧水）消毒等。
不同的化学物质具有不同的杀菌能力和适用范围。
3. 紫外线灭菌：利用紫外线照射来灭菌。
紫外线具有较强的杀菌能力，常用于清洁室、空气净化器等场所的微生物灭菌。
4. 离子辐射灭菌：如γ射线、X射线和电子束辐照，能够穿透物体并破坏细菌和其他微生物的细胞结构，达到灭菌的效果。
常用于灭菌医疗用品、食品等。
5. 过滤灭菌：通过过滤器将微生物从液体或气体中格外，常见的过滤器有微孔膜过滤器和深层过滤器。
过滤灭菌对于瓶装水、药水等液体以及空气中微生物的去除效果较好。
病原微生物实验室的消毒与灭菌
病原微生物实验室的消毒与灭菌消毒和灭菌是保护人员和环境不被病原微生物感染和污染的重要环节。
含有病原微生物的废物必须经过灭菌才能作为普通废物处理；对操作中可能产生的迸溅或泄漏，必须通过消毒达到对病原微生物的杀灭，对操作人员进行保护，对环境保护。
消毒和灭菌的基本常识对于实验室生物安全是至关重要的。
消毒是通过物理或化学手段杀灭或清除病原微生物，但不一定能杀死所有细菌芽孢的方法。
灭菌是杀灭物体上的所有微生物，包括病原性和非病原性微生物、细菌繁殖体和芽孢的一切方法[1]。
消毒与灭菌的方法可分为物理方法和化学方法两大类：①物理消毒灭菌法：包括热力法、射线法和过滤法三种。
超声波、干燥、冷冻也能杀菌抑菌。
热力灭菌法是利用热能去变性蛋白质或核酸、破坏细胞膜或胞膜来实现杀死微生物。
分干热灭菌和湿热灭菌两大类。
②化学消毒灭菌法：消毒剂在常用的浓度下，只对细胞的繁殖体有效，对其芽孢则需要提高消毒剂的浓度和延长作用时间[2]。
1 物理消毒灭菌法1.1热力灭菌法1.1.1干热灭菌法常用的干热灭菌法有：干烤、烧灼、焚烧。
焚烧常用于可废弃的污染物及人或动物的尸体的灭菌；烧灼用于微生物实验室内接种微生物所用器材的灭菌，也可用于外科手术器材的应急处理。
干烤灭菌可用于耐高温的玻璃制品、金属制品、糖瓷制品、油劑等的灭菌。
干烤灭菌是在干烤箱内进行的。
使用烤箱灭菌时，要求器械和用品应洗净、凉干或擦干，物品包装不易过大，粉剂和油剂厚度不宜超过1.3cm，箱内装载物品不宜超过烤箱高度的2/3，物品间应留有空隙。
灭菌时间应从温度升高到要求时算起，一般170℃时需60 min，160℃时需120 min。
1.1.2常用的湿热灭菌方法煮沸、流通蒸汽、低热消毒（巴氏消毒）、间歇灭菌（廷德氏灭菌）、高压蒸汽灭菌等方法。
高压蒸汽灭菌法可杀灭包括芽孢在内的所有微生物，是灭菌效果最好、应用最广的灭菌方法。
本实验室使用的是全自动立式高压灭菌器，在103.4KPa蒸汽压下，温度达到121.3℃，维持15～20 min。
消毒和灭菌常用的方法
消毒和灭菌常用方法
一、物理方法
1.干热灭菌法：利用高温对微生物的杀灭作用，一般在160℃下持续1-2小
时，可以杀灭一切微生物，包括细菌、病毒、真菌和芽孢等。
此方法常用于玻璃器皿、金属器具等物品的灭菌。
2.湿热灭菌法：利用高温湿度的蒸汽对微生物的杀灭作用，通常在121℃下
持续30分钟，也可以杀灭一切微生物。
此方法适用于不耐高温的物品，如塑料、橡胶、玻璃器皿等。
3.过滤法：通过物理手段将微生物从空气中或液体中分离出来，主要用于空
气或液体中微生物的分离和去除。
二、化学方法
1.化学药剂灭菌法：利用化学药剂对微生物的杀灭作用，常用的化学药剂有
甲醛、乙醇、次氯酸钠等。
此方法适用于表面消毒、空气消毒等。
2.熏蒸法：将具有杀灭作用的化学气体导入密闭的空间，使其杀灭空间内的
微生物。
此方法常用于仓库、车厢等场所的消毒。
三、生物方法
生物方法主要是利用某些微生物本身具有的杀灭或抑制其他微生物生长的作用，如乳酸菌、霉菌等。
这些微生物可以分泌某些抗菌物质，对其他微生物的生长起到抑制作用。
生物方法常用于食品保存、生物防治等领域。
四、辐射方法
辐射方法主要包括紫外线照射和臭氧照射等方法，这些方法主要利用紫外线和臭氧具有杀菌作用，对细菌、病毒等微生物的生长起到抑制作用。
辐射方法常用于表面消毒、空气消毒等方面。
以上就是消毒和灭菌常用方法的简要介绍，不同的方法具有不同的适用范围和优缺点，在实际应用中需要根据具体情况选择合适的方法。
常用6种灭菌方法有哪些
常用6种灭菌方法有哪些灭菌是指将物品或环境中的微生物杀灭或去除的过程，常用于医疗、食品加工、实验室等领域。
常用的灭菌方法有热力灭菌、化学灭菌、辐射灭菌、过滤灭菌、紫外线灭菌和等离子体灭菌。
首先，热力灭菌是利用高温将细菌、真菌和病毒杀灭的方法。
常见的热力灭菌方法包括蒸汽灭菌和干热灭菌。
蒸汽灭菌是将物品置于高温高压的蒸汽中，通过热量和湿热作用杀灭微生物。
干热灭菌则是利用高温烘烤的方式将微生物杀灭。
其次，化学灭菌是利用化学药剂将微生物杀灭的方法。
常见的化学灭菌方法包括乙醛灭菌、过氧化氢灭菌和氯气灭菌。
乙醛灭菌是利用乙醛蒸气对物品进行灭菌，适用于对热敏感物品的灭菌。
过氧化氢灭菌则是利用过氧化氢气体对物品进行灭菌，具有快速、高效的特点。
氯气灭菌是利用氯气对物品进行灭菌，常用于食品加工行业。
第三，辐射灭菌是利用辐射对微生物进行杀灭的方法。
常见的辐射灭菌方法包括紫外线辐射和γ射线辐射。
紫外线辐射是利用紫外线对物品表面进行灭菌，适用于空气、水、表面的消毒。
γ射线辐射则是利用γ射线对物品进行灭菌，具有穿透力强、杀灭效果好的特点。
第四，过滤灭菌是利用微孔滤膜对微生物进行过滤和捕获的方法。
常见的过滤灭菌方法包括微孔滤膜过滤和膜过滤。
微孔滤膜过滤是利用孔径在0.2微米以下的滤膜对微生物进行过滤，适用于对细菌、真菌和病毒的捕获。
膜过滤则是利用薄膜对微生物进行过滤，常用于实验室和医疗领域。
第五，紫外线灭菌是利用紫外线对微生物进行杀灭的方法。
紫外线具有较强的杀菌作用，能够破坏微生物的DNA结构，达到灭菌的效果。
紫外线灭菌常用于空气、水和表面的消毒，具有快速、方便的特点。
最后，等离子体灭菌是利用等离子体对微生物进行杀灭的方法。
等离子体具有高能量和高温度，能够对微生物进行彻底的灭菌。
等离子体灭菌常用于医疗器械、药品包装等领域，具有高效、无残留的特点。
综上所述，常用的灭菌方法包括热力灭菌、化学灭菌、辐射灭菌、过滤灭菌、紫外线灭菌和等离子体灭菌。
常见的微生物消毒与灭菌方法
常见的微生物消毒与灭菌方法物理灭菌法（一）加热灭菌法加热可破坏微生物中酶、蛋白质和核酸，导致微生物死亡。
加热灭菌又分干热灭菌法和湿热灭菌法。
在同一温度下，湿热灭菌的效果比干热灭菌好。
主要是因湿热灭菌时，有水分存在，蛋白质容易变性。
水分又易使微生物膜壁润湿，湿热的穿透力比干热大。
干热灭菌法常用的有火焰灭菌法与干热空气灭菌法两种。
（二）紫外线灭菌法是指用紫外线照射杀灭微生物的方法。
一般用于灭菌的紫外线波长是200~300nm，灭菌力最强的波长是253.7nm。
紫外线作用于核酸蛋白促使其变性，同时空气受紫外线照射后产生微量臭氧，从而起共同杀菌作用。
紫外线进行直线传播，可被不同的表面反射，穿透力微弱，但较易穿透清洁空气及纯净的水。
因此本法适用于照射物体表面之灭菌、无菌室的空气及水的灭菌；不适用于药液的灭菌、固体物质深部的灭菌；普通玻璃可吸收紫外线，因此装于玻璃容器中的药物不能用此法灭菌。
紫外线对人体照射过久，会发生结膜炎，红斑及皮肤烧灼等现象，故一般在人入室前开启紫外线灯1~2小时，关闭后人才进入洁净室。
如果必须在人进去后仍要开紫外线灭菌，则人的皮肤及眼睛应有有效的防护措施。
一般在6~15m3的空间可装置30瓦紫外线灯一盏，离地面2.5~3m为宜。
用紫外线照射灭菌时要注意下列问题：1、紫外线的杀菌力，随使用时间增加而减退，一般使用时间达到额定时间70%时应更换紫外线灯管，以保证杀菌效果。
国产紫外线灯平均寿命一般为2000h。
2、紫外线的杀菌作用随菌种不同而不同，杀霉菌的照射量要比杀杆菌大40~50倍。
3、紫外线照射通常按相对湿度为60%的基础设计，室内湿度增加时，照射量应相应增加。
4、紫外线灭菌效果与照射的时间长短有关，这需要通过验证来确定照射时间。
5、紫外照射灯的安装形式及高度，应根据实际情况,参考使用说明决定。
灭菌方法的验证采用生物指示剂挑战试验，生物指示剂多用枯草芽孢杆菌。
（三）微波灭菌法微波是指频率在30~3000MHz之间的电磁波。
医疗机构常用的消毒与灭菌方法
⑵应尽量将同类物品放在一 起灭菌，若将不同类物品装放在 一起，则以最难达到灭菌物品所 需要的温度和时间为准。
⑶物品装放时，上下左右相 互间均应间隔一定距离以利蒸汽 置换空气；
⑷难于灭菌的大包放在上层 ，较易灭菌的小包放在下层；金 属物品放在下层，织物包放在上 层； ⑸启闭式筛孔容器，应将筛 孔的盖打开。
2、包装： ⑴包装材料应允许物品内部 空气的排出和蒸汽的透入。市售 的普通铝饭盒与搪瓷盆，不得用 于装放待灭菌的物品，应用自动 启闭式或带通气孔的器具装放； 常用的有储物槽（盒）；
（2）布包装层数不少于两层， 用下排气式压力蒸汽灭菌器的物 品包，体积不得超过 30cm×30cm×25cm ； 用于预真空和脉动真空压力 蒸汽灭菌器的物品包，体积不得 超过30cm×30cm×50cm。 金属包的重量不超过7公斤， 敷料包不超过5公斤；
不能用于凡士林等油类和粉 剂的灭菌。预真空式压力蒸汽灭 菌器因所抽负压较强，可使瓶内 液体溢出，因此不能用于瓶装液 体的灭菌。
（三）灭菌前物品的准备
1 、清洗：灭菌前应将物品彻 底清洗干净，物品洗涤后，应干 燥并及时包装。清洗不彻底是灭 菌失败的因素之一。特别是接触 脓血便的物品污染严重，不容易 清洗，有机物残留影响了灭菌效 果。对于污染的医疗器械处理程 序应该是先消毒、再清洗。
医院的无菌器材中心供应室 往往将之作为灭菌的首选方法。 主要用于对耐热、耐湿物品的处 理。因此，正确的掌握压力蒸汽灭
菌器的使用方法及注意事项等知识， 对保证灭菌效果，减少医院性感染 是非常必要的。
（一）压力蒸汽Biblioteka 菌的分类根据排冷空气的方式和程度不同， 分为下排气式和预真空式两大类。手 提式、立式、卧式压力蒸汽灭菌器均 属于下排气式压力蒸汽灭菌器。
微生物试剂配制和灭菌标准
微生物试剂的配制和灭菌是在微生物实验室中非常重要的步骤，以确保实验的准确性和可重复性。
以下是一般的微生物试剂配制和灭菌标准：微生物试剂的配制：1. 培养基配制：-使用高质量的培养基成分，例如肉汤、酵母提取物、葡萄糖等。
-通过称量和混合来准确配制培养基，确保成分的准确性和一致性。
-使用蒸馏水或去离子水作为配制培养基的溶剂。
2. 试剂和缓冲液的配制：-使用高纯度的试剂，确保配制过程的精确性。
-采用标准的实验室操作程序，使用适当的实验室设备，如搅拌器、pH计等。
3. 灭菌步骤：-在配制之前，确保工作区域、仪器和培养器具已经经过适当的清洁和消毒。
-配制过程中，使用无菌技术，避免微生物污染。
微生物试剂的灭菌：1. 高压蒸气灭菌（常用于培养基、培养器具等）：-使用高压蒸气灭菌器（例如，高压蒸汽灭菌器或自动压力蒸气灭菌器）。
-遵循制造商的使用指南和操作规程。
-通常，121摄氏度、15分钟是一个常见的高压蒸气灭菌条件。
2. 紫外线灭菌（常用于表面消毒）：-将试剂瓶、培养皿等物品暴露在紫外线灯下，以进行表面消毒。
-通常需要较长时间的照射，同时确保灭菌面暴露在紫外线下。
3. 过滤灭菌（用于灭菌液体培养基等）：-使用合适的微孔过滤器，选择合适的孔径，将液体通过过滤器。
-这种方法适用于温度敏感的试剂。
4. 酒精喷雾或浸泡（常用于实验台面等表面的消毒）：-使用酒精（通常是70%的乙醇）进行喷雾或浸泡，以对实验台面等表面进行消毒。
在进行微生物试验时，遵循实验室安全操作规程和制定的消毒程序非常重要。
此外，对于每种试剂和培养基，应该查阅制造商提供的具体使用说明书，以确保正确的配制和灭菌。
微生物实验报告(微生物形态观察、分布、灭菌消毒)
FOR PERSONAL USE ONLY IN STUDY AND RESEARCH; NOT FOR COMMERCIAL USE微生物实验微生物实验细菌形态观察细菌分布消毒灭菌细菌形态观察一、实验目的1.掌握光学显微镜（油镜）的使用及日常维护2.掌握细菌的三种形态3.掌握临床常见细菌的形态及染色4.掌握细菌的特殊结构5.了解支原体、衣原体、立克次氏体、螺旋体及真菌的结构特点二、实验原理1. 普通光学显微镜（油镜）的使用1. 在标本欲检部位滴一滴香柏油，然后转换油镜头2. 从侧面观察并慢慢转动粗调节器，使油镜头浸没在油滴内，当油镜头几乎接触玻片时停止转动，以免碰撞玻片，用双眼观察目镜，同时调节细调节器，直至细菌清晰3. 根据需要调节显微镜亮度2. 普通光学显微镜的维护1.移动显微镜时，用右手持镜壁，左手托镜座，平端于胸前2.油镜用毕后，要立即用擦镜纸擦去香柏油；再用滴有二甲苯的擦镜纸擦油镜头；最后，用干净擦镜纸将镜头上的二甲苯擦去，以免损伤油镜头3.镜头擦净后，降低接物镜并将其转成八字形，罩好镜罩放入柜内4.做好使用记录3．微生物知识1．细菌按形态分类：球菌：球形（包括双球菌、四联球菌、八叠球菌、葡萄球菌、链球菌等）杆菌：杆状（包括单杆菌、双杆菌、链杆菌、分枝杆菌、双歧杆菌等）螺旋菌：螺旋状（包括螺旋菌、弧菌等）2．细菌的基本结构细胞壁、细胞膜、细胞质、核质、核蛋白体3．细菌的特殊结构荚膜：如肺炎双球菌鞭毛：又分单毛菌、双毛菌、丛毛菌、周毛菌。
如：变形杆菌为周毛菌菌毛芽胞：如破伤风梭菌、炭疽芽胞杆菌、肉毒梭菌4．微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称，包括原核类、真核类和非细胞类。
原核类：细菌、放线菌、蓝藻、衣原体、支原体、立克次氏体真核类：真菌、原生动物、显微藻类非细胞类：病毒、亚病毒5．真菌单细胞：圆形、芽生孢子。
如：酵母菌多细胞：菌丝及孢子、孢子出芽。
如：霉菌6．白假私酵母菌（白念）生物学性状：G+单细胞真菌、芽生孢子、类酵母型菌落厚膜孢子、假菌丝有助于鉴定致病性：皮肤粘膜——鹅口疮、内脏感染、CNS感染微生物学检查：直接涂片、染色后镜检——菌体、芽生孢子、假菌丝7．新型隐球菌生物学性状：圆形酵母型菌、外周有厚荚膜（比菌体大1-3倍）致病性：吸入后侵犯皮肤、粘膜等——慢性炎症和脓肿；侵袭CNS——亚急性或慢性脑膜炎微生物学检查：脑脊液离心后取沉淀、痰和脓标本直接检查；墨汁负染见出芽菌体外围有宽厚荚膜为阳性三、实验材料记号笔：1支；大镊子：1支；火柴：1盒；蜡笔：1支；试管架：1个；酒精灯：1个；接种环：1支；Olympus显微镜：1台；显微镜使用记录本：1个四、实验内容1. 观察细菌三种形态1）球菌链球菌、葡萄球菌、肺炎双球菌（子弹形）、脑膜炎双球菌（蚕豆形）、四联菌2）杆菌破伤风杆菌、白喉杆菌（异染颗粒）、绿脓杆菌、伤寒杆菌、变形杆菌3）螺形菌弧菌——霍乱弧菌；螺菌；螺杆菌——幽门螺杆菌；弯曲菌2. 观察细菌的特殊结构芽胞、鞭毛、荚膜、异染颗粒、钩端螺旋体、幽门螺杆菌3. 绘图葡萄球菌(staphyloccocus)；肺炎双球菌(pneumo coccus)；脑膜炎球菌(meningococcus)；破伤风杆菌（Clostridium Tantenus）；霍乱弧菌（vibrio cholera)；芽胞(spore)；鞭毛（flagellum)；荚膜(capsule)；钩端螺旋体(leptospira)五、实验结果绘8幅细菌镜下图，已交。
微生物实验室消毒灭菌要求和流程及注意事项
微生物实验室消毒灭菌要求和流程及注意事项微生物实验室是一个重要的实验室环境，其中进行的实验与研究涉及到生物安全性以及实验结果的准确性。
因此，实验室的消毒灭菌工作显得尤为重要。
本文将从微生物实验室消毒灭菌的要求、流程和注意事项三个方面进行介绍。
一、微生物实验室消毒灭菌要求1.1杀灭微生物微生物实验室中存在着大量的微生物，包括细菌、真菌、病毒等。
因此，实验室的消毒灭菌工作首要目标就是要杀灭这些微生物，确保实验室环境的洁净和安全。
1.2避免交叉污染微生物实验室中通常同时进行多项实验和研究，存在着不同微生物的接触和可能的交叉污染。
因此，消毒灭菌工作还要求能够有效地避免交叉污染，保证实验结果的准确性。
1.3保护实验人员在进行消毒灭菌工作时，也要考虑到实验人员的健康安全，尽量减少有害物质对人体的伤害。
因此，选择合适的消毒灭菌方法也是十分重要的。
二、微生物实验室消毒灭菌流程2.1常规清洁在进行消毒灭菌之前，首先要进行常规的清洁工作。
清洁工作包括对实验室的工作台面、实验器具、试剂瓶等进行清洁，尽量减少细菌和微生物的数量。
2.2选择合适的消毒灭菌方法根据实验室的具体情况，选择合适的消毒灭菌方法。
常见的消毒灭菌方法有高温消毒、化学消毒等，选择合适的方法可以更好地达到杀灭微生物的目的。
2.3进行消毒灭菌根据选择的消毒灭菌方法，进行实际的消毒灭菌工作。
在操作过程中，要注意掌握正确的操作方法，确保消毒灭菌的效果。
2.4定期检测消毒灭菌后，要进行定期的检测工作，确保实验室环境的洁净和安全。
如果发现环境存在问题，需要及时进行再次的消毒灭菌处理。
三、微生物实验室消毒灭菌注意事项3.1选择合适的消毒剂在选择消毒剂时，要根据具体的消毒对象和消毒要求进行选择。
不同的消毒剂有不同的杀菌谱和杀菌速度，选择合适的消毒剂能够更好地满足消毒灭菌的要求。
3.2遵守操作规程进行消毒灭菌工作时，要严格遵守相关的操作规程，掌握正确的操作方法。
尤其是在使用化学消毒剂时，要注意保护好自己，避免对皮肤和呼吸道造成伤害。
消毒与灭菌效果的评价方法与标准
消毒与灭菌效果的评价方法与标准消毒与灭菌是保障公共卫生和个人健康的重要手段，而评价其效果的方法与标准则是确保消毒与灭菌工作质量的关键。
本文将介绍消毒与灭菌效果的评价方法与标准，以期为相关工作提供参考和指导。
一、微生物浓度检测法。
微生物浓度检测法是一种常用的评价消毒与灭菌效果的方法。
通过取样检测被消毒或灭菌的物品或场所中的微生物浓度，可以客观地评价消毒与灭菌的效果。
通常采用培养基培养法或PCR法进行微生物浓度检测，其中培养基培养法具有操作简便、成本低廉的特点，而PCR法则能够快速准确地检测微生物的DNA，具有高灵敏度和特异性。
二、生物指示剂法。
生物指示剂法是一种直接评价灭菌效果的方法。
通过将含有高浓度孢子的生物指示剂置于被灭菌物品或场所中，再进行灭菌处理，最后检测生物指示剂的存活情况，可以评价灭菌效果。
生物指示剂法具有直接、准确的特点，能够客观地评价灭菌效果，是一种常用的灭菌效果评价方法。
三、化学指标法。
化学指标法是一种通过检测消毒剂残留量评价消毒效果的方法。
通过检测消毒剂在被消毒物品或场所中的残留量，可以客观地评价消毒效果。
常用的消毒剂残留检测方法包括高效液相色谱法、气相色谱法等，这些方法能够准确地检测各种消毒剂的残留量，为评价消毒效果提供了可靠的依据。
消毒与灭菌效果的评价标准主要包括国家标准、行业标准和企业标准。
国家标准是指国家制定的关于消毒与灭菌效果评价的标准，具有普适性和权威性；行业标准是指某个行业制定的关于消毒与灭菌效果评价的标准，具有针对性和实用性；企业标准是指某个企业制定的关于消毒与灭菌效果评价的标准，具有针对性和操作性。
这些评价标准为消毒与灭菌效果的评价提供了具体的指导和要求，有助于保障消毒与灭菌工作的质量。
在实际工作中，需要根据被消毒或灭菌物品的特点和使用要求，选择合适的评价方法和标准，并严格执行，以确保消毒与灭菌效果的可靠性和有效性。
同时，还应定期对消毒与灭菌效果进行评价，及时调整消毒与灭菌措施，确保工作质量和效果。
微生物灭菌方法有哪些
微生物灭菌方法有哪些
微生物灭菌是指通过一系列的方法和技术，将物体表面或内部的微生物完全清除，以防止细菌、真菌、病毒等微生物的生长和繁殖。
在医疗、食品加工、实验室等领域，微生物灭菌是非常重要的环节。
那么，微生物灭菌方法有哪些呢？接下来，我们将详细介绍几种常见的微生物灭菌方法。
首先，热力灭菌是一种常见的微生物灭菌方法。
通过高温将物体表面或内部的
微生物杀灭，达到灭菌的目的。
常见的热力灭菌方法包括高温蒸汽灭菌、干热灭菌和热水灭菌。
其中，高温蒸汽灭菌是最常用的方法之一，通过高压蒸汽将物体进行灭菌，适用于实验室器皿、医疗器械等物品的灭菌。
其次，化学灭菌也是一种常见的微生物灭菌方法。
化学灭菌是利用化学物质对
微生物进行杀灭的方法，常用的化学灭菌剂包括乙醛、过氧化氢、氯气等。
这些化学物质能够有效地杀灭细菌、真菌和病毒，广泛应用于医疗器械的灭菌和食品加工中。
另外，辐射灭菌也是一种常用的微生物灭菌方法。
通过紫外线辐射或电子束辐
射对物体进行灭菌，达到杀灭微生物的目的。
紫外线辐射常用于空气和水的消毒，而电子束辐射则常用于医疗器械的灭菌。
最后，过滤灭菌也是一种常见的微生物灭菌方法。
通过微孔滤膜对空气或液体
进行过滤，将微生物截留在滤膜上，达到灭菌的目的。
过滤灭菌常用于实验室中对培养基和生物制品的灭菌。
综上所述，微生物灭菌方法包括热力灭菌、化学灭菌、辐射灭菌和过滤灭菌等
多种方法。
在实际应用中，根据不同的场景和要求，选择合适的灭菌方法非常重要。
只有做好微生物灭菌工作，才能有效地保护人们的健康和安全。
微生物检测中常用的化学杀菌剂和消毒剂配制方法汇总!
微生物检测中常用的化学杀菌剂和消毒剂配制方法汇总！一、乙醇溶液二、84消毒液84消毒液也是试验室常用的消毒剂。
可用于器皿和工作台面的消毒，也可在废液缸加入肯定浓度的84消毒液，盛放移液枪枪头，防止污染。
0.5%的84消毒液配制方法：用自来水或蒸馏水1000mL加入5mL 84消毒液。
三、新洁尔灭新洁尔灭一般用于盖片、载片、器皿和皮肤的消毒。
新洁尔灭溶液分0.1%和0.25%的两种消毒液。
器皿消毒一般用0.1%的浓度，药物杀菌试验一般用0.25%的浓度。
0.1%的新洁尔灭溶液配制方法：用5%新洁尔灭原液和蒸馏水按1：50稀释。
0.25%的新洁尔灭溶液配制方法：用5%新洁尔灭原液和蒸馏水按1：20稀释。
四、福尔马林（甲醛）溶液福尔马林溶液有0.3%和10%两种消毒液。
0.3%用于免疫血清的制备，10%用于浸泡绒毛尿囊膜。
0.3%福尔马林溶液的配制方法：称取0.3g甲醛，溶解定容至100mL 0.85%生理盐水中。
10%福尔马林溶液的配制方法：称取10g甲醛，溶解定容到100mL蒸馏水中。
五、碘酊溶液碘酊溶液俗称碘酒，用于药物杀菌试验。
碘酊溶液的配制方法：称取2g碘和1.5g碘化钾，加入少量的50%乙醇，搅拌溶解，完全溶解后，再加入50%乙醇稀释至100mL即可。
六、汞溴红汞溴红又称红汞、红溴汞。
用于伤口和体表的消毒。
汞溴红的配制方法：称取2g红汞，加入少量无菌蒸馏水溶解，稀释至100mL，即配成2%的水溶液，也就是我们常见的红药水。
七、石炭酸（苯酚）溶液石炭酸溶液既可以用来做杀菌剂又可以做防腐剂。
3%～5%的溶液可用于空气、地面、桌面和器皿的消毒，0.5%的石炭酸溶液可用做免疫血清的防腐剂。
5%、2%、0.5%石炭酸溶液的配制：先将50g石炭酸在水浴锅内加热溶解后，再用蒸馏水定容至1000mL，即得5%的石炭酸溶液。
取100mL5%的石炭酸溶液，加入150mL蒸馏水，即得2%的。
将5%石炭酸按1：9稀释即得0.5%的石炭酸溶液。
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微生物检测中常用灭菌和消毒方法
物理方法
温度：
利用温度进行灭菌、消毒或防腐，是最常用而又方便有效的方法。
高温可使微生物细胞内的蛋白质和酶类发生变性而失活，从而起灭菌作用，低温通常起抑菌作用。
1.干热灭菌法：
a.灼烧灭菌法：
利用火焰直接把微生物烧死。
此法彻底可靠，灭菌迅速，但易焚毁物品，所以使用范围有限，只适合于接种针、环、试管口及不能用的污染物品或实验动物的尸体等的灭菌。
b.干热空气灭菌法：
这是实验室中常用的一种方法，即把待灭菌的物品均匀地放入烘箱中，升温至160℃，恒温1小时即可。
此法适用于玻璃皿、金属用具等的灭菌。
2.湿热灭菌法：
在同样的温度下，湿热灭菌的效果比干热灭菌好，这是因为一方面细胞内蛋白质含水量高，容易变性。
另一方面高温水蒸汽对蛋白质有高度的穿透力，从而，加速蛋白质变性而迅速死亡。
a.巴氏消毒法：
有些食物会因高温破坏营养成分或影响质量，如，牛奶、酱油、啤酒等，所以只能用较低的温度来杀死其中的病原微生物，这样既保持食物的营养和风味，又进行了消毒，保证了食品卫生。
该法一般在62℃，30分钟即可达到消毒目的。
此法为法国微生物学家巴斯德首创，故名为巴氏消毒法。
b.煮沸消毒法：
直接将要消毒的物品放入清水中，煮沸15分钟，即可杀死细菌的全部营养和部分芽孢。
若在清水中加入1%碳酸钠或2%的石炭酸，则效果更好。
此法适用于注射器、毛巾及解剖用具的消毒。
c.间歇灭菌法：
上述两种方法在常压下，只能起到消毒作用，而很难做到完全无菌。
若采用间歇灭菌的方法，就能杀灭物品中所有的微生物。
具体做法是：将待灭菌的物品加热至100℃，15～30分钟，杀死其中的营养体。
然后冷却，放入37℃恒温箱中过夜，让残留的芽孢萌发成营养体。
第2天再重复上述步骤，三次左右，就可达到灭菌的目的。
此法不需加压灭菌锅，适于推广，但操作麻烦，所需时间长。
d.加压蒸汽灭菌法：
这是发酵工业、医疗保健、食品检测和微生物学实验室中最常用的一种灭菌方法。
它适用于各种耐热、体积大的培养基的灭菌，也适用于玻璃器皿、工作服等物品的灭菌。
加压蒸汽灭菌是把待灭菌的物品放在一个可密闭的加压蒸汽灭菌锅中进行的，以大量蒸汽使其中压力升高。
由于蒸汽压的上升，水的沸点也随之提高。
在蒸汽压达到1.055公斤/厘米2时，加压蒸汽灭菌锅内的温度可达到121℃。
在这种情况下，微生物（包括：芽孢）在15～20分钟便会被杀死，而达到灭菌目的，如，灭菌的对象是砂土、石蜡油等面积大、含菌多、传热差的物品，则应适当延长灭菌时间。
在加压蒸汽灭菌中，要引起注意的一个问题是，在恒压之前，一定要排尽灭菌锅中的冷空气，否则表上的蒸汽压与蒸汽温度之间不具对应关系，这样会大大降低灭菌效果。
3.影响灭菌的因素：
a.不同的微生物或同种微生物的不同菌龄对高温的敏感性不同。
多数微生物的营养体和病毒在50～65℃，10分钟就会被杀死；但各种孢子、特别是芽孢最能抗热，其中抗热性最强的是嗜热脂肪芽孢杆菌，要在121℃，12分钟才被杀死。
对同种微生物来讲，幼龄菌比老龄菌对热更敏感。
b.微生物的数量多少显然会影响灭菌的效果，数量越多，热死时间越长。
c.培养基的成分与组成也会影响灭菌效果。
一般地讲，蛋白质、糖或脂肪存在，则提高抗热性，pH在7附近，抗热性最强，偏向两极，则抗热能力下降，而不同的盐类可能对灭菌产生不同的影响；固体培养基要比液体培养基灭菌时间长。
4.灭菌对培养基成分的影响：
a.pH值普遍下降。
b.产生混浊或沉淀，这主要是由于一些离子发生化学反应而产生混浊或沉淀。
例如,Ca2+与PO4-3化合，就会产生磷酸钙沉淀。
c.不少培养基颜色加深。
d.体积和浓度有所变化。
e.营养成分有时受到破坏。
辐射
利用辐射进行灭菌消毒，可以避免高温灭菌或化学药剂消毒的缺点，所以应用越来越广，目前主要应用在以下几个方面：
1）接种室、手术室、食品、药物包装室常应用紫外线杀菌。
2）应用β射线作食品表面杀菌，γ射线用于食品内部杀菌。
经辐射后的食品，因大量微生物被杀灭，再用冷冻保藏，可使保存期延长。
过滤
采用机械方法，设计一种滤孔比细菌还小的筛子，做成各种过滤器。
通过过滤，只让液体培养基从筛子中流下，而把各种微生物菌体留在筛子上面，从而达到除菌的目的。
这种灭菌方法适用于一些对热不稳定的体积小的液体培养基的灭菌以及气体的灭菌。
它的最大优点是不破坏培养基中各种物质的化学成分。
但是比细菌还小的病毒仍然能留在液体培养基内，有时会给实验带来一定的麻烦。
化学方法
一般化学药剂无法杀死所有的微生物，而只能杀死其中的病原微生物，所以，是起消毒剂的作用，而不是灭菌剂。
能迅速杀灭病原微生物的药物，称为消毒剂。
能抑制或阻止微生物生长繁殖的药物，称为防腐剂。
但是一种化学药物是杀菌还是抑菌，常不易严格区分。
消毒剂在低浓度时也能杀菌（如，
1：1000硫柳汞）。
由于消毒防腐剂没有选择性，因此，对一切活细胞都有毒性，不仅能杀死或抑制病原微生物，而且对人体组织细胞也有损伤作用，所以只能用于体表、器械、排泄物和周围环境的消毒。
常用的化学消毒剂有：石碳酸、来苏水（甲醛溶液）、氯化汞、碘酒、酒精等。
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