A-实验室常用试剂配方
实验室常用染色液和试剂配方
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实验室常用染色液和试剂配方染色液和试剂在实验室中被广泛使用,用于各种科学研究和实验。
它们可以用来染色细胞、分析化合物和反应产物、诊断疾病等。
下面是一些常用的染色液和试剂配方。
1. Hematoxylin-Eosin染色液:Hematoxylin-Eosin(HE)染色液是一种经典的组织染色方法,常用于病理学研究和诊断。
配方如下:- Hematoxylin染色液:将5 g hematoxylin溶解在100 mL乙醇中,加入2 mL盐酸和900 mL蒸馏水,最后调节pH值为5-6-酸性酒红染液:将0.5g酸性酒红溶解在100mL乙醇中。
- Eosin染色液:将0.5 g eosin溶解在100 mL乙醇中。
2. Giemsa染色液:Giemsa染色液用于染色细胞,特别是白细胞,常用于血液学和微生物学研究。
配方如下:- Giemsa染色液:将4 g Giemsa粉末溶解在1 L蒸馏水中。
可以加入2 mL甲醇增强染色效果。
3.厌氧培养试剂:用于厌氧条件下培养微生物的试剂。
配方如下:- Thioglycollate培养基:将11.5 g thioglycollate溶解在1 L蒸馏水中,加热至溶解。
- Dithiothreitol(DTT)溶液:将1 g DTT溶解在100 mL蒸馏水中,用10 mL离心管分装,-20℃保存。
4. Bradford试剂:用于蛋白质的浓度测定,常用于生物化学和分子生物学实验。
配方如下:- Coomassie Brilliant Blue G-250:将100 mg染料溶解在50 mL浓硫酸中,加热至溶解。
再用1 L蒸馏水稀释至30%浓度。
5. Gill's胶片显影试剂:用于胶片的显影,常用于分子生物学实验。
配方如下:-显影溶液A:将1.5g氯化钴和1g柠檬酸溶解在200mL蒸馏水中,用0.1MNaOH调节pH值至6.4-6.8-显影溶液B:将3g溴化钾和1g柠檬酸溶解在200mL蒸馏水中,用0.1MNaOH调节pH值至6.4-6.86.RIPA裂解缓冲液:用于细胞或组织的裂解,提取蛋白质或RNA,常用于生物化学和分子生物学实验。
实验室常用试剂和缓冲液配方
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实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液配方有很多种,下面将介绍一些常用的试剂和缓冲液的配方:一、试剂的配方1. Tris缓冲液:- 3 M Tris-Cl,pH 7.4(准备方法:将121.1 g Tris粉末溶解在800 mL去离子水中,使用HCl调节pH值至7.4,并将溶液体积加至1 L)2.NaCl溶液:-5MNaCl(准备方法:将287.7gNaCl溶解在800mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)3.验血试剂:-4%NaOH溶液(准备方法:将40gNaOH溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)-5%CuSO4溶液(准备方法:将50gCuSO4溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)-2%K4[Fe(CN)6]溶液(准备方法:将20gK4[Fe(CN)6]溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)4.PBS缓冲液(磷酸盐缓冲液):-10×PBS缓冲液(准备方法:将80gNaCl,2gKCl,11.5gNa2HPO4,2gKH2PO4溶解在800mL去离子水中,并将溶液体积加至1L。
pH值可以调节至7.4左右)5. Tris-EDTA缓冲液(TE缓冲液):- 10 mM Tris-HCl,1 mM EDTA,pH 8.0(准备方法:将12.1 gTris溶解在800 mL去离子水中,然后加入0.37 g EDTA,使用HCl调节pH值至8.0,并将溶液体积加至1 L)二、缓冲液的配方1. Tris-HCl缓冲液:- 50 mM Tris-HCl,100 mM NaCl,1% Triton X-100,pH 7.4(准备方法:将6.05 g Tris,5.8 g NaCl,0.1 g Triton X-100溶解在800mL去离子水中,使用HCl调节pH值至7.4,并将溶液体积加至1 L)2. Tris-Borate缓冲液(TBE缓冲液):- 89 mM Tris,89 mM boric acid,2 mM EDTA,pH 8.3(准备方法:将10.81 g Tris,5.49 g boric acid,3.72 g EDTA溶解在800 mL去离子水中,使用NaOH或HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)3. Tris-Glycine缓冲液:- 25 mM Tris,192 mM glycine,0.1% SDS,pH 8.3(准备方法:将3.03 g Tris,14.35 g glycine溶解在800 mL去离子水中,使用HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)4. Tris-Acetate缓冲液(TAE缓冲液):- 40 mM Tris,20 mM acetic acid,1 mM EDTA,pH 8.3(准备方法:将4.84 g Tris,1.86 g acetic acid,0.37 g EDTA溶解在800 mL去离子水中,使用NaOH或HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)5. Phosphate缓冲液:- 100 mM sodium phosphate,pH 7.0(准备方法:根据目标pH值使用磷酸二氢钠和磷酸氢二钠调节溶液pH至7.0,并将溶液体积加至1 L)以上只是一些常用的试剂和缓冲液的配方,并不是全部。
实验室常用药品试剂的配置与使用
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实验室常⽤药品试剂的配置与使⽤实验室常⽤药品试剂的制备与使⽤(⼀)认识药品规格纯度规格简写标签颜⾊级别特点(⼆)染⾊试剂的配制1.甲基绿(DNA—绿⾊)和吡罗红(RNA—红⾊)染⾊剂配制:a)A液:取甲基绿2 g溶于98 mL蒸馏⽔中,取吡罗红G 5 g溶于95 mL蒸馏⽔中。
取6 mL甲基绿溶液和2 mL吡罗红溶液加⼊到16 mL蒸馏⽔中,置于棕⾊瓶中备⽤。
b)B液:是⼀种缓冲液,由⼄酸钠和⼄酸混合⽽成。
先取⼄酸钠16.4 g,⽤蒸馏⽔溶解⾄1000 mL备⽤;再取⼄酸12 mL,⽤蒸馏⽔稀释⾄1000 mL备⽤。
取配好的⼄酸钠溶液30 mL和稀释的⼄酸20 mL,加蒸馏⽔50 mL,配成pH为4.8的B液(缓冲液)。
c)取A液20 mL和B液80 mL混合,就是实验中所⽤的吡罗红甲基绿染⾊剂。
应该注意的是该试剂应现⽤现配。
2.I2-KI溶液(淀粉—蓝紫⾊,蛋⽩质—黄⾊)配制:将碘化钾3g溶于蒸馏⽔中,待全部溶解后加⼊碘1g,振荡使其溶解,将此液保存在棕⾊玻璃瓶内。
3.苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ(⽊栓化、⾓质化细胞壁—红⾊,脂肪、挥发油、树脂等—红⾊或淡红⾊)配制:苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ⼲粉0.1g与95%⼄醇10 mL混合,过滤后再加⼊10 mL⽢油。
4.1% 醋酸洋红染料(染⾊体—紫红⾊)配制:将洋红1 g与45% 醋酸100 mL煮沸2h 左右,并随时注意补充加⼊蒸馏⽔到原含量。
冷却后过滤,加⼊4% 铁明矾溶液1~2滴,放⼊棕⾊瓶中备⽤。
5.龙胆紫酸性染料(染⾊质—紫⾊)配制:取龙胆紫1 g,溶于少量2% 醋酸溶液中,滴加2% 醋酸溶液,直⾄溶液不呈深紫⾊为⽌。
6.卡宝染⾊剂(染⾊体—红⾊,着⾊深,保存性好)⼜名苯酚-品红染⾊剂配制:a)原液A:将3g碱性品红溶于100 mL 70% 的⼄醇中。
b)原液B:取原液A 10 mL 加⼊到90 mL 5% 苯酸⽔溶液中。
(两周内有效)c)原液C:取原液B 55 mL,加⼊6 mL福尔马林和6 mL冰醋酸。
实验室常用试剂和缓冲液配方
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实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液种类繁多,根据实验需求,可以根据不同的试剂和缓冲液配方来满足实验要求。
以下是一些常见的试剂和缓冲液配方,以及其用途和制备方法。
1. 磷酸缓冲液(Phosphate buffer)磷酸缓冲液常用于生化和分子生物学实验中,用于控制溶液的pH值,适用于酸性和碱性条件下。
常见的配方包括0.1M磷酸盐缓冲液(pH7.2-7.4),需要用磷酸盐和盐酸或氢氧化钠来制备。
2. 氯化钠溶液(Sodium chloride solution)氯化钠溶液是实验室中常见的缓冲液配方之一,通常用于调节生物样品的渗透压和离子浓度。
可以制备不同浓度的氯化钠溶液,常见的配方为0.9%氯化钠溶液(生理盐水)。
3. 碳酸氢盐缓冲液(Bicarbonate buffer)碳酸氢盐缓冲液常用于细胞培养和生理实验中,用于维持细胞培养基或实验液的pH稳定。
一种常见的配方为10mM碳酸氢盐缓冲液(pH7.2-7.4),需要用碳酸氢钠和盐酸来制备。
4. Tris缓冲液(Tris buffer)Tris缓冲液是一种常见的生化实验缓冲液,可以调节到不同的pH值。
常见的配方为50 mM Tris缓冲液(pH 7.4),需要用Tris(三氯甲烷磺酸,Tris-HCl)和盐酸来制备。
5. PBS缓冲液(Phosphate-buffered saline)PBS缓冲液是一种用于细胞和组织处理的常见缓冲液,具有稳定pH值和离子浓度的特点。
常见的配方为10mMPBS缓冲液(pH7.4),需要用磷酸盐和盐酸或氢氧化钠来制备。
6. 甘氨酸缓冲液(Glycine buffer)甘氨酸缓冲液常用于蛋白质电泳实验中,用作电泳缓冲液和传递缓冲液。
常见的配方为25mM甘氨酸缓冲液(pH8.3),需要用甘氨酸和盐酸来制备。
7. BSA溶液(Bovine serum albumin solution)BSA溶液是实验室中常见的蛋白质标准物质,用于测定蛋白质浓度和酶活性等实验。
实验室常用生化试剂配方
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实验室常用生化试剂配方1.常用抗生素配制以及使用说明(参考链霉菌室操作手册2019版)抗生素英文名称及缩写抗性基因贮藏液浓度(mg/ml) 10025(无水乙醇配) 50 25 50 50 25(DMSO配) 100 50 3525(0.15M NaOH配) 50(DMSO配)50 50MM使用终浓度(μg/ml)链霉菌2CMYEME大肠杆菌LA或LB氨苄青霉素氯霉素潮霉素卡那霉素壮观霉素链霉素硫链丝菌素红霉素阿泊拉霉素紫霉素萘锭酮酸 TMPAmpicillin, Amp bla Chloramphenicol, Cml Hygromycin, Hyg Kanamycin, Km Spectinomycin, Spc Streptomycin, Str Thiostrepton, Thio Erythomycin, Ery Apramycin, Am Viomycin,Vio Nalidixic acid Trimethoprimcat hyg aac/aph aadA str tsr ermE aac(3)IV vph-* 10 10 2 5 10 5 100 10-- 25 25 20 25 10 - 50------ 2.5 - 550-100 25 - 25 50 25 25 20 10-30注意事项:(1) –表示无记录或不能使用,贮存液除特别说明外均用无菌水配制,配制过程请确保抗生素粉末充分溶解混匀后再分装;(2)Km 和Am有交叉抗性,同时具有这两种抗性基因时应适当提高抗生素的量,并设置阴性对照;(3)Hyg、Vio易见光分解,配制好后应用锡箔纸包好,使用过程中建议避光操作。
有些抗生素需要在低盐的环境(如DNA培养基)下筛选效率较高,如Hyg, Km, Vio(4)用无菌水配制的抗生素需在超净工作台内用0.22 μm一次性过滤器过滤除菌并分装;氯霉素、TMP、硫链丝菌素可以在超净工作台外配制分装,无需过滤除菌,但需确保配制贮存液所用溶剂(无水乙醇、DMSO)未遭受污染,建议配制氯霉素时使用新的无水乙醇,不要使用抽提质粒或总DNA时用的无水乙醇,以防止污染;DMSO,即二甲亚砜,易挥发,有剧毒;(5)长期不用的抗生素请置于-20℃保存,抗生素粉末按照使用说明一般置于4℃保存,经常使用时可以暂置于4℃保存;(6)抗生素的实际使用浓度请结合实验经验进行适当调整;(7)配制抗生素时应尽量一次性称取抗生素粉末,配制过程中建议穿工作服,戴一次性橡胶手套及口罩,及时清理称量配制抗生素时使用的台面及器具,以避免抗生素及溶剂对自身的损伤及对工作环境的污染。
生化实验室常用试剂配方
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PBS:我们去买复合片,直接配制。
试剂名称:4%多聚甲醛-磷酸二氢钠/氢氧化钠:40ml500ml配方所需药品及剂量:A液:多聚甲醛20g 溶于200ml蒸馏水B液:Na2HPO4·2H2O 3.44g溶于150ml蒸馏水C液:NaOH 1.93g 200ml蒸馏水操作过程A液最好在500ml的三角烧瓶中加热配制(低温比较难溶),至多聚甲醛完全溶解后冷却待用。
注意,在溶解多聚甲醛时,要尽量避免吸入气体或溅入眼内。
B液和C液配制好后,将B液倒入C液中,混合后再加入A液,将pH调至7.2~7.4,最后,补充蒸馏水至500ml 充分混合。
或者将多聚甲醛20g、Na2HPO4·2H2O 3.44g、NaOH 1.93g直接溶于500ml蒸馏水,将pH 调至7.2~7.4即可。
5×Tris-硼酸(TBE)缓冲液(配制1L溶液各成分的用量)Tris碱 54 g硼酸 27.5 gEDTA 2.92 g实际配500ml,那么Tris碱27g,硼酸 13.75g,EDTA 1.46gWestern bloting10%分离胶(两块胶,15ml )4%浓缩胶(两块胶,5ml)超纯水6ml 超纯水 3.2ml40%Acr/Bic (37.5:1)5.25ml 40%Acr/Bic(37.5:1)0.55mlLT 3.75 HT 1.25 10%AP 80 μl 10%AP 50 μl TEMED 7.6 μl TEMED 12.5 μlRunning buffer(1×): Trisbase 3.03g;Glycine 18.8g;SDS1.0g加水至1L可以配成5×(5×电泳缓冲液配方:总量为1L;15.1g Tris 碱;72.0g 甘氨酸;5.0g SDS)Transfer Buffer(1×): 甘氨酸2.9gTris(MW121.14) 5.8gSDS 0.37g甲醇 200ml,加蒸馏水至 1000ml 溶解后4℃保存,溶液可重复使用2-3次。
实验室常用试剂和缓冲液配方
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实验室常用试剂和缓冲液配方PBS(磷酸盐缓冲液)是一种常用的生物化学缓冲液,用于洗涤和稀释生物化学试样。
配方:-NaCl:8g-KCl:0.2g-Na2HPO4:1.42g-KH2PO4:0.24g将上述物质溶解在1升蒸馏水中,调节pH值至7.4、用1M(摩尔浓度)盐酸或1M氢氧化钠进行调节。
2. Luria-Bertani (LB) 培养基配方LB培养基是微生物学研究中常用的培养基,适用于大多数细菌和酵母菌的培养。
配方:- 水解酪蛋白(tryptone):10 g- 酵母粉(yeast extract):5 g-NaCl:10g将上述物质溶解在1升蒸馏水中,用1M盐酸或1M氢氧化钠调节pH 至7.0。
可以选择添加洗涤剂Tween-20(0.1%)以提高溶解度。
SSC缓冲液广泛用于核酸杂交实验等生物学研究中。
配方:-NaCl:175.3g- Na3Citrate·2H2O:88.2 g-EDTA:37.2g将上述物质溶解在1升蒸馏水中,调节pH值至7.0-7.2、可以选择添加DEPC(二硫酰二甲酯)处理,增强其功能。
4.甲醛溶液甲醛溶液常用于生物样品固定以及染色实验。
配方:-甲醛:37%-PBS或水将适量的甲醛加入PBS或水中,制备所需浓度的甲醛溶液。
5. β-羟丁酸钠(β-Hydroxybutyrate)溶液β-羟丁酸钠是一种常用的减少剂,用于生物化学实验中。
配方:-β-羟丁酸钠:1M根据需求将适量的β-羟丁酸钠溶解在合适的溶剂中。
这里只是列举了几个常见的试剂和缓冲液配方,实验室试剂和缓冲液种类丰富多样,具体使用取决于研究目的和实验要求。
在进行实验之前,建议仔细阅读相关文献和制造商提供的说明书,并按照正确的比例和步骤配制试剂和缓冲液。
实验室常用试剂配方
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1.常用PBS:称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4、0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可,高压灭菌。
2.常用PBS(不含K盐):8.5g NaCl、0.8736g NaH2PO4•2H2O、5.531g Na2HPO4•12H2O,800ml三蒸水搅拌,无需调PH,1L定容。
3.DMEM培养基:DMEM干粉溶入800ml三蒸水中,加入3.7g NaHCO3,搅拌后调PH至7.2~7.4,最终用1000ml容量瓶定容,无菌层流间中过滤分装。
4.1640培养基:1640干粉溶入800ml三蒸水中,加入2.0g NaHCO3,搅拌后调PH至7.2~7.4,最终用1000ml容量瓶定容,无菌层流间中过滤分装。
5.胰酶:浓度为0.25%~0.4%,通常是用生理盐水或PBS等平衡盐溶液作为溶剂。
6.胰酶(含EDTA):普通胰酶中额外加入0.01%~0.02%的EDTA7.细胞冻存液:多数细胞配方为10%DMSO+20%血清+70%细胞培养基,也有介绍直接10%DMSO加90%含血清培养液,部分细胞需10%DMSO+90%血清。
理论上血清越多冻存效果越好。
8.谷氨酰胺:标准的谷氨酰胺100×液为200mmol/L(29.22g/L)。
通常培养液中浓度为1~4mmol/L (0.146~0.5844g/L),4o C下半衰期为7天,两周以上需要重新加入。
9.双抗:青霉素—100IU/ml(通常培养液中终浓度为20~100IU/ml均可),链霉素—100ug/ml(通常培养液中浓度为50ug/ml)。
多数体外培养都是使用青霉素和链霉素,上述的工作浓度可在37o C长时间控制轻度污染而对细胞无毒性作用。
10.MTT:0.5克MTT,溶于无酚红的培养基中(就用培养细胞的培养基),浓度为5mg/ml,过滤除菌,4℃避光保存。
实验室常用试剂的配方
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常用试剂的配方常用贮液与溶液 (1)1mol/L亚精胺(Spermidine) (1)1mol/L精胺(Spermine) (1)10mol/L乙酸胺(ammonium acetate) (1)10mg/ml牛血清蛋白(BSA) (1)1mol/L二硫苏糖醇(DTT) (1)8mol/L乙酸钾(potassium acetate) (1)1mol/L氯化钾(KCl) (1)3mol/L乙酸钠(sodium acetate) (1)0.5mol/L EDTA (1)1mol/L HEPES (1)1mol/L HCl (1)25mg/ml IPGT (1)1mol/LMgCl2 (1)100mmol/L PMSF (1)20mg/ml蛋白酶K(proteinase K) (1)10mg/mlRnase(无DNase)(DNase-free RNase) (1)5mol/L氯化钠(NaCl) (1)10N氢氧化钠(NaOH) (1)10%SDS(十二烷基硫酸钠) (1)2mol/L山梨(糖)醇(Sorbitol) (2)100%三氯乙酸(TCA) (2)2.5% X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-半乳糖苷) (2)100×Denhardt试剂(Denhardt’s regent) (2)10×标准DNA连接酶缓冲液(standard DNA ligase buffer)(粘端、平端连接) (2)100 mmol/L dNTP 溶液(dNTP solutions) (2)20%PEG 8000/2.5M NaCl (2)20×SSC (2)DEPC(焦碳酸二乙酯)处理水 (3)甲酰胺(deionized formamide) (3)TE(用于悬浮和贮存DNA) (3)Tris缓冲液(Tris-HCl buffer) (3)30%丙烯酰胺溶液 (3)40%丙烯酰胺 (3)放线菌素D溶液 (4)0.1mol/L腺苷三磷酸(ATP)溶液 (4)10mol/L乙酸酰溶液 (4)10%过硫酸铵溶液 (4)BCIP溶液 (4)2×BES缓冲盐溶液 (4)1mol/L CaCl2溶液 (5)2.5mol/L CaCl2溶液 (5)1mol/L二硫苏糖醇(DTT)溶液 (5)脱氧核苷三磷酸(dNTP)溶液 (5)0.5mol/L EDTA(pH8.0)溶液 (6)2×HEPES缓冲盐溶液 (6)IPTG溶液 (6)1mol/L乙酸镁溶液 (6)1mol/L MgCl2溶液 (6)β-巯基乙醇(BME)溶液 (7)NBT溶液 (7)酚/氯仿溶液 (7)10mmol/L苯甲基磺酰氟(PMSF)溶液 (7)磷酸盐缓冲溶液(PBS)溶液 (7)1mol/L乙酸钾(pH7.5)溶液 (8)乙酸钾溶液(用于碱裂解) (8)3mol/L乙酸钠(pH5.2和pH7.0)溶液 (8)5mol/L NaCl溶液 (8)10%十二烷基硫酸钠(SDS)溶液 (8)20×SSC溶液 (8)20×SSPE溶液 (9)100%三氯乙酸溶液 (9)1mol/L Tris溶液 (9)Tris缓冲盐溶液(TBS)(25mmol/L Tris) (9)X-gal溶液 (9)PBS: (10)TBS: (10)枸橼酸盐缓冲液(Citrate buffer): (10)胰酶(Trypsin): (10)胃酶(Pepsin): (10)DAB: (10)AEC: (10)RIPA: (11)9、Blotto A: (11)10、Blotto B: (11)电泳缓冲液、染料和凝胶加样液 (11)电泳缓冲液 (11)染料 (11)10mg/ml的溴化乙锭(ethidium bromide) (11)凝胶上样液(gel loading solutions) (12)6×聚蔗糖凝胶上样液(室温贮存) (12)6×溴酚蓝/二甲苯青/聚蔗糖凝胶上样液(室温贮存) (12)6×甘油凝胶上样液(4℃贮存) (12)6×蔗糖凝胶上样液(室温贮存) (13)10×十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液(室温贮存) (13)常用培养基 (13)LB培养基 (13)SOC培养基 (13)TB培养基 (14)YPD培养基 (14)常用抗生素 (14)羧苄青霉素(carbenicillin)(50mg/ml) (14)甲氧西林(methicillin)(100mg/ml) (14)卡那霉素(kanamycin)(10mg/ml) (14)氯霉素(chloramphenicol)(25mg/ml) (14)链霉素(streptomycin)(50mg/ml) (14)萘啶酮酸(nalidixic acid)(5mg/ml) (15)四环素(tetracyyline)(10mg/ml) (15)实验室常用贮存液的配制参数 (15)一、核酸及蛋白质常用数据 (15)2.常用核酸的长度与分子量 (15)3.常用核酸蛋白换算数据 (16)4.常用蛋白质分子量标准参照物 (17)5.常用DNA分子量标准参照物 (17)二、常用缓冲液 (18)1.分子克隆常用缓冲液 (18)2.磷酸缓冲液 (18)3.电泳缓冲液 (20)4.凝胶加样缓冲液 (21)5.各种pH值的Tris缓冲液的配制 (22)7.温度对常用缓冲液pH的影响 (24)三、常用酶的配制 (25)1.溶菌酶 (25)2.蛋白水解酶类 (25)3.无DNA酶的RNA酶 (25)四、常用抗生素溶液 (25)五、杂交试验中用于降低背景的封闭剂 (26)六、常用凝胶的技术参数 (27)1.葡聚糖凝胶的某些技术数据 (27)2.聚丙烯酰胺凝胶的技术数据 (29)3.琼脂糖凝胶的技术数据 (29)4.各处凝胶所允许的最大操作压 (30)5.琼脂糖凝胶浓度与线性DNA分辨范围 (30)6.染料在变性聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速度 (30)7.染料在非变性聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速度 (31)七、氨基酸的特性 (31)八、遗传密码 (32)九、常用酸碱技术参数 (33)1.常见的市售酸碱的浓度 (33)2.各种浓度的酸碱贮存液的近似pH值 (34)常用贮液与溶液1mol/L亚精胺(Spermidine)溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。
实验室常用试剂缓冲液的配制方法
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实验室常用试剂缓冲液的配制方法实验室中常常需要使用各种试剂和缓冲液,以下是一些常用试剂和缓冲液的配制方法及其用途。
1.NaCl溶液配制:NaCl作为实验室常用的盐类试剂,可用于生化、分子生物学等多个实验室操作中。
常用浓度为0.9%(w/v)的生理盐水。
配制方法如下:称取对应质量的NaCl加入蒸馏水中,搅拌溶解,用蒸馏水调整至最终体积。
2.血红蛋白溶液配制:血红蛋白溶液可用于实验室的一些生化、免疫学等实验。
常用方法如下:从新鲜血液中分离出血红蛋白,加入适量的生理盐水或缓冲液,控制pH值为7.4-7.6,并用密闭容器保存。
3. Tris-HCl缓冲液配制:Tris-HCl缓冲液在生物化学实验中广泛应用于DNA/RNA电泳、蛋白质电泳等实验。
常用方法如下:按需求称取Tris固体加入一定量的去离子水中,搅拌溶解,用强碱(比如氢氧化钠)或强酸(比如盐酸)调整pH值至所需范围。
1. Tris缓冲液配制:Tris缓冲液常用于酶反应、凝胶电泳等实验中,配制方法如下:称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中,搅拌溶解,用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围,并用去离子水稀释至最终体积。
2.PBS缓冲液配制:PBS缓冲液在生物学实验中用于细胞培养、免疫染色等操作中。
配制方法如下:称取适量的NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4固体加入适量的去离子水中,搅拌溶解,并用去离子水稀释至最终体积,调整pH值至所需范围。
3. Tris-Borate-EDTA(TBE)缓冲液配制:TBE缓冲液常用于核酸凝胶电泳中,配制方法如下:称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中,搅拌溶解,用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围,然后加入Boric acid和EDTA固体,继续搅拌溶解,并用去离子水稀释至最终体积。
以上仅是一些常见的试剂和缓冲液的配制方法,实验室中还会使用到很多其他试剂和缓冲液。
在配制试剂和缓冲液时,需要注意选择合适的纯度的试剂、使用无菌器具和操作台,并遵循相应的实验操作规范和安全要求。
实验室常用试剂配制方法
![实验室常用试剂配制方法](https://img.taocdn.com/s3/m/c656dbe59b89680203d825d4.png)
实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1M Tris-HCl□组份浓度1 M Tris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH 值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl(pH8.8)□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA (pH 7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 量取下列溶液,置于1L烧杯中。
1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0)100mL500 mM EDTA(pH8.0)20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。
3. 将溶液定至1L后,高温高压灭菌。
4. 室温保存。
4、3 M 醋酸钠□组份浓度3 M 醋酸钠(pH5.2)□配制量100mL□配置方法1. 称取40.8gNaOAc•3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL的去离子水搅拌溶解。
2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。
3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。
实验室所需的试剂和仪器
![实验室所需的试剂和仪器](https://img.taocdn.com/s3/m/c95cf070f242336c1eb95e7d.png)
实验室所需的试剂和仪器一、试剂1、 D.D.O<必需>配方:二硫代草酰胺(20gx20瓶)苄胺(500mlx2瓶)2、三氯甲烷(500mlx2箱)3、丙酮(500mlx2箱)4、无水乙醇(500mlx2箱)5、乙酸乙酯(500mlx2箱)6、双氧水(500mlx2箱)7、四氯化碳(500mlx2箱)8、磷酸三丁酯(500mlx1箱)9、氢碘酸(500mlx2瓶)10、过氧化钡(500gx4瓶)11、二氯化锡(500gx4瓶)12、盐酸(500mlx4箱)13、硝酸(500mlx2箱)14、双氧水(500mlx2箱)15、固体硅胶(500gx4瓶)16、纯Pt粉:(1g)17、纯Pd粉:(1g)18:纯Rh粉:(1g)二、仪器1、722S型分光光度计(1台)2、1cm、2cm、3cm比色皿(各6个)3、精确天平(1台)4、马弗炉(1台)5、0.5ml、1ml、2ml移液管(各10支)6、10ml移液管(5支)7、2ml、5ml、10ml大肚移液管(各10支)8、计算器(1台)9、瓷坩埚25或30ml (100只)10、镍坩埚25或30ml (20只)11、干燥器(2l x2个)12、干燥箱(1台)13、60ml“球形”分液漏斗(30个)14、长把坩埚钳(2把)15、医用剪小# (2把)16、医用钳子小# (2把)17、医用脱脂棉(1卷)18、研钵(5套)19、50ml、100ml、250ml、500ml、1000ml烧杯(各12个)20、与以上烧杯型号相对应的表面皿(各6个)30、10ml比色管(10支)31、10ml、25ml、50ml、100ml容量瓶(各12个)32、。
实验室常用溶液及试剂配制剖析
![实验室常用溶液及试剂配制剖析](https://img.taocdn.com/s3/m/9cfd0edf1eb91a37f0115c77.png)
实验室常用溶液及试剂配制实验室常用溶液、试剂的配制表一普通酸碱溶液的配制表二常用酸碱指示剂表三混合酸碱指示剂表四容量分析基准物质的干燥表五缓冲溶液的配制1、氯化钾-盐酸缓冲溶液3、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液4、乙酸-乙酸钠缓冲溶液5、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲溶液6、硼砂-氢氧化钠缓冲溶液7、氨水-氯化铵缓冲溶液8、常用缓冲溶液的配制实验室常用试验方法2九、柠檬酸(C6H8O7·H2O)称取试样1.5g(精确到0.0002g)于三角瓶内,加入水50ml溶解,加酚酞指示剂3滴,用1mol/L氢氧化钠标准溶液滴定至粉红色为终点,同时做空白试验。
计算:X%(一水)= (V1-V0)×C×0.06404 m×(1-0.08566)×100X%(无水)= (V1-V0)×C×0.06404 m×100V1-----消耗氢氧化钠标准溶液的体积,ml;V0-----空白所消耗氢氧化钠标准溶液的体积,ml;C------氢氧化钠标准溶液浓度,mol/L;m---样品质量。
十、钙含量测定(磷酸氢钙CaHPO4、磷酸二氢钙Ca(H2PO4)2·H2O、钙粉等)称取2g(精确到0.0002g)样品,用10ml盐酸(1+1)溶解,转移至100ml容量瓶中定溶,用移液管吸取10ml于250ml锥形瓶中,加50ml水,5ml蔗糖溶液(25g/L),2ml三乙酸胺(1+1),1ml乙二胺(1+1),1滴孔雀绿指示液(1g/L),滴加氢氧化钾溶液(200g/L)至无色,再过量10ml,加0.1g盐酸羟胺(每加一种试剂都要摇匀),加钙黄绿素少许,在黑色背景下用0.05mol/L的EDTA标准溶液滴定至绿色荧光消失呈现紫红色为滴定终点。
Ca%= C×V×0.4008 m ×100C------EDTA标准溶液的浓度,mol/L;V-----消耗EDTA标准溶液的体积,ml;m----样品质量。
实验室常用试剂配制
![实验室常用试剂配制](https://img.taocdn.com/s3/m/e2d18d4d0029bd64783e2cf6.png)
实验室常用溶液及试剂配制实验室常用溶液、试剂的配制表一普通酸碱溶液的配制表二常用酸碱指示剂表三混合酸碱指示剂表四容量分析基准物质的干燥表五缓冲溶液的配制1、氯化钾-盐酸缓冲溶液2、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液3、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液4、乙酸-乙酸钠缓冲溶液5、磷酸二氢钾—氢氧化钠缓冲溶液6、硼砂-氢氧化钠缓冲溶液7、氨水-氯化铵缓冲溶液8、常用缓冲溶液的配制实验室常用试验方法2九、柠檬酸(C6H8O7·H2O)称取试样1.5g(精确到0.0002g)于三角瓶内,加入水50ml溶解,加酚酞指示剂3滴,用1mol/L氢氧化钠标准溶液滴定至粉红色为终点,同时做空白试验。
计算:X%(一水)= (V1-V0)×C×0。
06404 m×(1—0。
08566)×100X%(无水)= (V1—V0)×C×0.06404 m×100V1——-—-消耗氢氧化钠标准溶液的体积,ml;V0-—-—-空白所消耗氢氧化钠标准溶液的体积,ml;C--—-—-氢氧化钠标准溶液浓度,mol/L;m-—-样品质量。
十、钙含量测定(磷酸氢钙CaHPO4、磷酸二氢钙Ca(H2PO4)2·H2O、钙粉等)称取2g(精确到0.0002g)样品,用10ml盐酸(1+1)溶解,转移至100ml容量瓶中定溶,用移液管吸取10ml于250ml 锥形瓶中,加50ml水,5ml蔗糖溶液(25g/L),2ml三乙酸胺(1+1),1ml乙二胺(1+1),1滴孔雀绿指示液(1g/L),滴加氢氧化钾溶液(200g/L)至无色,再过量10ml,加0。
1g盐酸羟胺(每加一种试剂都要摇匀),加钙黄绿素少许,在黑色背景下用0。
05mol/L的EDTA标准溶液滴定至绿色荧光消失呈现紫红色为滴定终点。
Ca%= C×V×0。
4008 m ×100C--—-—-EDTA标准溶液的浓度,mol/L;V-——--消耗EDTA标准溶液的体积,ml;m—-——样品质量。
实验室常用染色液配方
![实验室常用染色液配方](https://img.taocdn.com/s3/m/5809ebe4866fb84ae55c8d6a.png)
实验室常用染色液配方1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液A液:美蓝(Methylene blue)0。
3 克95%酒精毫升B液:氢氧化钾(KOH)0。
01 克蒸馏水100 毫升分别配制A液和B液,然后混合即成。
2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液A液:碱性复红(Basic fuchsin)0。
3 克95%酒精10.O 毫升B液:石炭酸(苯酚)5.0 克蒸馏水95 毫升将碱性复红溶于95%酒精中,配成A液。
将石炭酸溶于蒸馏水中,配成B液。
将两者混合即成。
3、结晶紫染色液(Huclker改订)A液:结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精25.0 毫升B液:草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水100 毫升将结晶紫研细后,加入95%酒精,使之溶解,配成A液。
将草酸铵溶于蒸馏水,配成B液。
两液混合即成。
4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)碘1。
0克碘化钾2。
0克蒸馏水300毫升先将碘化钾溶于少量蒸馏水中,再将碘溶于碘化钾溶液中,溶时可稍加热,最后加足蒸馏水量。
5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克蒸馏水100毫升6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green)5。
0克蒸馏水100毫升先将孔雀绿研细,加少许95%酒精溶解,再加蒸馏水。
7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin)10。
0克蒸馏水100毫升福尔马林(40%甲醛)0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟,加入福尔马林作为防腐剂,用玻璃棉过滤。
8、刚果红染色液刚果红(Congo red)2.0克蒸馏水100毫升9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水95.010、乳酸石碳酸棉蓝染色液(真菌制片,短期保存)石炭酸10.0克甘油20。
0毫升乳酸(比重l.21)10.0毫升棉蓝0.02克蒸馏水10。
0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化,加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,溶解即成。
实验室常用生化试剂配方
![实验室常用生化试剂配方](https://img.taocdn.com/s3/m/b37d4160580102020740be1e650e52ea5418ce51.png)
实验室常用生化试剂配方实验室中常用的生化试剂有很多种,下面是一些常见的生化试剂及其配方的介绍:1.磷酸缓冲液(PBS)PBS是一种常用的缓冲液,用于洗涤细胞和组织,以及稀释试剂等。
它的配方通常包括:-NaCl:8g-KCl:0.2g-Na2HPO4:1.44g-KH2PO4:0.24g将以上试剂溶解于1L去离子水中,调节pH至7.42. Tris缓冲液Tris缓冲液用于调节溶液的pH值,常用于分子生物学实验。
其配方为:- Tris-HCl:12.11 g将Tris-HCl溶解于1L去离子水中,调节pH至所需值。
3.氢氧化钠(NaOH)溶液NaOH是一种常用的碱试剂,可用于调节pH、溶解蛋白质等。
其常见配方为:-NaOH:4g将NaOH溶解于1L去离子水中。
4.氯仿/异丙醇提取液氯仿/异丙醇提取液常用于分离DNA或RNA。
其配方为:-氯仿:24mL-异丙醇:25mL-TE缓冲液:1mL将以上试剂混合,并轻轻摇匀。
5.碳酸氢钠(NaHCO3)缓冲液NaHCO3是一种常用的缓冲液,可用于调节溶液的pH值。
其配方为:-NaHCO3:8.4g将NaHCO3溶解于1L去离子水中,调节pH至所需值。
6.绿色荧光蛋白(GFP)提取液GFP提取液用于提取含有GFP标记的蛋白质。
其配方为:- Tris-HCl(pH 7.5):50 mM-NaCl:150mM-EDTA:1mM- Triton X-100:1%将以上试剂混合,并用PBS稀释至所需浓度。
7.锌离子(Zn2+)溶液锌离子溶液可用于一些酶活性实验。
其配方为:-ZnSO4·7H2O:2.19g将ZnSO4·7H2O溶解于1L去离子水中。
8.溶血液溶血液常用于红细胞计数等实验。
其配方为:-生理盐水:9mL-甲苯:1mL将以上试剂混合,即可得到溶血液。
这只是一小部分生化试剂配方的介绍,实验室中常用的试剂配方非常多,根据具体实验的需要,需要选择合适的试剂及其配方。
实验室常用试剂配方
![实验室常用试剂配方](https://img.taocdn.com/s3/m/897652ace53a580216fcfe9c.png)
1 M Tris-HCl (pH7.4, 7.6, 8.0)组份浓度:1 M Tris-HCl配制量:1 L配制方法:1. 称量121.1 g Tris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
4. 将溶液定容至1 L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
1.5 M Tris-HCl (pH8.8)组份浓度:1.5 M Tris-HCl配制量:1 L配制方法:1. 称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调节pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1 L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
10% (W/V) SDS组份浓度:10% (W/V)SDS配制量:100ml配制方法:1.称量10g高纯度的SDS置于100-200ml烧杯中,加入约80ml的去离子水,68℃加入溶解2.滴加浓盐酸调节pH值至7.23.将溶液定容至100ml后,室温保存。
2 N NaOH#组份浓度:2 N NaOH配制量:100 ml配制方法:1. 量取80 ml去离子水置于100~200 ml塑料烧杯中(NaOH溶解过程中大量放热,有可能使玻璃烧杯炸裂)。
2. 称取8 g NaOH小心地逐渐加入到烧杯中,边加边搅拌。
3. 待NaOH完全溶解后,用去离子水将溶液体积定容至100 ml。
4. 将溶液转移至塑料容器中后,室温保存。
2.5 N HCl#组份浓度:2.5 N HCl配制量:100 ml配制方法:1. 在78.4 ml的去离子水中加入21.6 ml的浓盐酸(11.6 N),均匀混合。
实验室常用试剂配制方法
![实验室常用试剂配制方法](https://img.taocdn.com/s3/m/f13cf91a227916888486d7ec.png)
实验室常用试剂配制方法一、50×TAE:称242g Tris溶于800mL 双蒸水中,加入57.1mL 冰醋酸和18.6g(或100mL 0.5mol/L,pH=8.0)EDTA,再加水定容至1L,室温保存备用。
二、1×TAE:将50×TAE加双蒸水稀释至1×使用。
三、LB液体培养基:称取10g蛋白胨(bacto-typtone)、5g 酵母提取物(bacto-yeast extract)和10g NaCl,溶于950mL 双蒸水中,摇动至完全溶解,定容至1L,120℃湿热灭菌20min,冷却至室温后4℃保存备用。
四、100mg/mL氨苄青霉素(Amp):称取100mg粉末状氨苄青霉素(Amp)置于1.5mL 离心管中,加入800μL 无菌水使其完全溶解,定容至1mL,-20℃保存备用。
五、LA液体培养基:按照x mL培养基加入x μL的比例将100mg/mL的氨苄青霉素(Amp)加入LB液体培养基中,4℃保存备用。
六、LB固体培养基:称取10g蛋白胨(bacto-typtone)、5g 酵母提取物(bacto-yeast extract)、10g NaCl和15g琼脂粉,溶于950mL 双蒸水中,摇动至完全溶解,定容至1L,120℃湿热灭菌20min,稍冷却后按照x mL培养基加入x μL的比例加入100mg/mL的氨苄青霉素(Amp),充分混匀后倒入培养皿中制成琼脂平板,4℃保存备用。
(1L培养基大约可以倒40个平板)七、200mg/mL IPTG:称取2g 粉末状IPTG溶于8mL 双蒸水中,再定容至10mL,配成200mg/mL 溶液,(用0.22μm滤膜过滤除菌,)分装为每份1mL,-20℃保存备用。
八、20mg/mL X-gal:将X-gal溶于二甲基甲酰胺,配成20mg/mL,分装后于-20℃避光保存。
九、DEPC水:将水加入干净玻璃瓶中,加入DEPC至终浓度0.1%(v/v),放置过夜,高压湿热灭菌,4℃保存备用。
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常用试剂配方
1、1M pH8.5或pH8.0 Tris-HCl
1L:800ml H2O中加121.1g Tris,用HCl调pH 8.5定容至1升或用HCl调pH 8.0定容至1升,灭菌。
2、0.5M pH8.0 EDTA
1L:800ml H2O中加186.1g EDTANa2·2H2O,用NaOH调pH 8.0后定容至1升(在加有EDTA二钠盐的悬浊液中加入适量氢氧化钠,同时搅拌,直至溶液澄清,此时溶液pH约为8)。
3、20% SDS
2L:在2L热水中缓慢加入400g SDS,边加边搅拌,溶解后放置热地方保存。
4、5M NaCl
1L:750ml H2O中加292.2g NaCl,溶解后定容至1升,灭菌。
5、缓冲液“S”
100 mM Tris·Cl pH8.5
100 mM NaCl
50 mM EDTA pH8.0
2% SDS
6、10xTE
1L:800ml H2O 中加12.11g Tris,3.72 gEDTANa2 ·2H2O,用HCl调pH 8.0,定容,灭菌。
7、50xTAE
1L:500ml H2O 中加242g Tris,溶解后加100ml 0.5M pH8.0 EDTA和57.1ml冰乙酸,定容。
8、蛋白酶K溶液
用20mM pH8.0Tris·Cl,2mMCaCl2的缓冲液配制浓度为10μg/μl的蛋白酶K溶液或用超纯水配制成相同的浓度。
9、RNAase
用水溶解RNAase,终浓度为10mg/ml,煮沸20min,缓慢冷却,分装,-20℃下保存。
10、3M pH5.2 NaAc
1L:600ml H2O 中加408.24g NaAc·3H2O, 溶解后, 用冰乙酸调pH 5.2,定容灭菌。
11、5M KAc
1L:600ml H2O 中加490.8g KAc·3H2O, 溶解后, 定容灭菌。
12、Loadind-Buffer(琼脂糖电泳)
200ml:100ml H2O 中加80g蔗糖和0.5g溴酚蓝,定容,分装后4℃保存。
13、Bind-Silence配制
500ml 无水乙醇加2ml Bind-Silence原液。
14、Repel配制
500ml 三氯甲烷加10ml 硅烷化试剂。
15、PCR引物配制
引物粉剂5000rpm/min离心1min,1OD值加50μl超纯水,2OD值加100μl超纯水;混匀离心配成原液,-20℃保存,使用时原液稀释10倍(RAPD原液10μl,超纯水90μl;STS或SSR上下引物原液各10μl,超纯水180μl)。
16、EB配制
100mg EB加超纯水10ml溶解。
17、APS配制
APS(过硫酸铵)10g加水定容至100ml。
18、氯仿︰异戊醇(24︰1)、氯仿︰异戊醇︰酚(24︰1︰25)配制
480ml氯仿中加异戊醇20ml配成氯仿异戊醇;氯仿异戊醇与Tris饱和重蒸酚等体积混合配成酚氯仿。
19、2⨯SDS电泳上样缓冲液:1M Tris-HCl (pH 6.8)2.5ml,β-巯基乙醇1.0ml,SDS 0.6 g,甘油2.0ml,0.1%
溴酚蓝1.0ml,ddH2O 3.5ml。
20、氨苄配方(母液浓度:100mg/ml)
溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的蒸馏水中,最后定容至10ml。
抽虑灭菌后分装成小份(0.5ml管中,200ul/管),贮存于-20℃。
常以25ug/ml~50ug/ml(即25~50 mg/l)的终浓度添加于生长培养基,本实验室所用工作浓度为:50ug/ml即50 mg/l。
配制时:氨苄母液:培养基=1:2000,即1ul:2ml。
21、pUC19 DNA/MSPI (HpeII) Marker 配方:pUC19 DNA:Dye solution:H2O = 1:6:20。
22、卡那霉素(kanamycin 母液浓度:100mg/ml)
溶解1g卡那霉素于足量的蒸馏水中,最后定容至10ml。
抽虑灭菌后分装成小份(0.5ml管中,200ul/管),贮存于-20℃。
常以25ug/ml~50ug/ml(即25~50 mg/l)的终浓度添加于生长培养基,本实验室所用工作浓度为:25ug/ml,25mg/l。
配制时:卡那母液:培养基=1:4000,即1ul:4ml。
23、LB培养基
胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L
酵母提取物(Yeast extract) 5g/L
氯化钠(NaCl) 10g/L
琼脂粉7.5g/500ml
调制p H =7.0
24、SDS提取DNA时所用的酚氯仿(1:1)配置
用Tris饱和酚加等体积氯仿,剧烈振荡混匀,然后静置过夜。
上面会有水层封闭,原来水相中Tris就跑到氯仿中。
注意:用的时候要的是下层,吸取时要小心,吸到上层肯定会影响实验效果。
还有注重不要溅到皮肤上,伤害相当厉害!需要马上用大量水清洗。
25、
生素的配置方法
2007-08-15 21:36
氨苄青霉素(ampicillin)(100mg/ml)
溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
羧苄青霉素(carbenicillin)(50mg/ml)
溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
甲氧西林(methicillin)(100mg/ml)
溶解1g甲氧西林钠于足量的水中,最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以37.5ug/ml 终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。
卡那霉素(kanamycin)(10mg/ml)
溶解100mg卡那霉素于足量的水中,最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以
10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
氯霉素(chloramphenicol)(25mg/ml)
溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中,最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以12.5ug/ml~25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
链霉素(streptomycin)(50mg/ml)
溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中,最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
萘啶酮酸(nalidixic acid)(5mg/ml)
溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。
分装成小份于-20℃贮存。
常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
四环素(tetracyyline)(10mg/ml)
溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中,或者将无碱的四环素溶于无水乙醇,定容至10ml。
分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光,于-20℃贮存。
常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。