细菌检测合格判定标准

未消毒……………………………………………菌落总数<100cfu/管(瓶)
已消毒……………………………………………菌落总数<10cfu/管(瓶)
已消毒半成品贮料桶……………………………菌落总数<10cfu/桶
5、生产设备（灌装机）
（配料锅出料口）……………………菌落总数<10cfu/cm2
6、灌装间工作台面…………………………………菌落总数<100cfu/cm2
３、菌落计数方法：先用肉眼观察，点数菌落数，然后再用放大５～１０倍的放大镜检查，以防遗漏。记下各平皿的菌数后，求出同一稀释度各平皿生长的平均菌落数。若平皿中有连成片状的菌落或花点样菌落蔓延生长时，该平皿不宜计数。若片状菌落不到平皿中的一半，而其余一半中菌落数分布又很多均匀，则可将此半个平皿菌落计数后乘以２，以代表全皿菌落数。
测定菌落总数便于判明样品被细菌污染的程度，是对样品进行卫生学总评价的综合依据。
所需仪器和设备
1、天平
2、高压灭菌器，电炉
3、三角烧瓶、硅胶塞
4、不锈钢勺、小试管5、２ml度玻璃试管6、９cm玻璃平皿
7、恒温培养箱
8、量筒
9、１000ml搪瓷杯
所用培养基和试剂
（一）生理盐水的配制
１、称取8.5克分析纯氯化钠，把氯化钠放入１000ml搪瓷杯中，蒸馏水加至1000ml,用不锈钢勺子将氯化钠搅拌至溶解后，用量筒量取90ml加入三角烧瓶中，塞上硅胶塞，用报纸把瓶塞包好，用橡皮圈扎好，121度,20min高压灭菌。每次配生理盐水2-3L（看生产量而定）备用。
7、消毒的手
质检部微检室……………………………………菌落总数<5cfu/手
折布室……………………………………………菌落总数<300cfu/手
灌装间……………………………………………菌落总数<300cfu/手
8、消毒毛巾…………………………………………菌落总数<10cfu/cm2
9、去离子水…………………………………………菌落总数<100cfu/ml
２、融化并冷至45--50度的卵磷脂、吐温80营养琼脂培养基，加入0.1%TTC溶液,（１00ml培养基加1ml 0.1%TTC溶液,混匀后倾注于各平皿内，每皿约10ml,另注入一个不加样品的灭菌空平皿内，作空白对照，随即转动平皿，使样品与培养基充分混匀，待琼脂凝固后用纸包好翻转平皿，置37度培养箱内培养48h.如有细菌呈红色，而化妆品颗粒颜色无变化。这是加ＴＴＣ起的作用。
名称：
细菌检测合格判定标准
职能部门：
质检部
页数：
第1页 共１页
文件编号：
ZJQM0103
版别：
A
生效日期：
2003.9.25
修改状态：
第2次修改
编制
审核
批准
1、成品
膏霜、乳液类产品………………………………菌落总数<10cfu/g（ml）
洗面奶、面膜、洗涤类产品……………………菌落总数<50cfu/g（ml）
2、半成品……………………………………………菌落总数<10cfu/g（ml）
3、空气
质检部微检室……………………………………菌落总数<10cfu/m3
消毒室、灌装间…………………………………菌落总数<500cfu/m3
配料间……………………………………………菌落总数<1000cfu/m3
4、包装容器及半成品贮料桶
名称：
菌落总数检验操作规程
职能部门：
质检部
页数：
第1页 共４页
文件编号：
CS021506
版别：
A
生效日期：
2002．12．20
修改状态：
第0次修改
编制
审核
批准
菌落总数是指化妆品检样经过处理，在一定条件下培养后（如培养基成分、培养时间、pH值、需氧性质等），１g或1ml检样中所含菌落总数。所得结果只包括一群本方法规定的条件下生长的嗜中温的需氧性菌落总数。
４、菌落计数及报告方法
首先选取平均菌落数在３０～３００个之间的平皿，作为菌落总数测定的范围。当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，即以该平皿菌落数乘其稀释倍数。若有两个稀释度，其平均菌落数均在３０～３００个之间，则应求出两菌落总数之比值来决定，若其比值小于或等于２，应报告其平均数，若大于２则报告其中稀释度较低的平皿的菌落数。若所有稀释度的平均菌落数均大于３００个，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。若所有稀
文件编号：
版别：
A
生效日期：
修改状态：
第0次修改
混匀。制成１：１0稀释液。
油溶性样品的制备：
称取10g样品放到灭菌的研钵中，加10ml灭菌液体石蜡，研磨成粘稠状，再加10ml灭菌的吐温80,研磨成粘稠状，加70ml灭菌生理盐水，制成１：１0稀释液。
检样的测定：
１、用灭菌吸管取１：10稀释液（用洗耳球协作）2ml,分别注入到两个平皿内，每平皿1ml.
名称：
菌落总数检验操作规程
职能部门：
质检部
页数：
第２页 共４页
文件编号：
版别：
A
生效日期：
修改状态：
第0次修改
（二）培养基
我公司选用加工好的卵磷脂、吐温80营养琼脂培养基，这种培养基是培养化妆品菌落数专用。只需按照说明从中称取需要的克数（55g），放入搪瓷杯中，加水至1000ml，浸泡10min，用电炉加热至完全溶解好，注意煮培养基要一边加热，一边不停搅拌，避免煮糊了培养基。培养基煮好后，倒入三角瓶中，塞上胶塞，用报纸包好，用皮圈扎好，１21度,20min高压灭菌。培养基不能多次高压灭菌，这样会破坏其有效成分使培养基变色。最好高压灭菌后，把培养基放在4度的冰箱中存放，用时用水浴加热融化后使用。
2、无菌操作前无菌室要先开紫外灯照射45min。操作人员进入无菌室先用洗洁精洗手，在无菌室缓冲间换衣服，戴口罩，人与小推车一齐到风淋室，开启风淋高设备后才能进无菌室操作。
3、水溶性产品的制备：
称取10g样品放入灭菌的90ml生理盐水中的锥形瓶中，充分
名称：
菌落总数检验操作规程
职能部门：
质检部
页数：
第３页 共４页
1.1%氯化三苯四氮唑（ＴＴＣ）
称取0.1gＴＴＣ，放入三角瓶中，加水100ml，溶解后，塞上胶塞，用报纸包好，用皮圈扎好，１21度,20min高压灭菌。
平皿、小勺用报纸包好，１21度,20min高压灭菌。
菌落总数检验收的操作方法：
1、收到车间送检样品后，按要求填写记录，写好标签（每样品写２张小标签），用法75%酒精擦干净样品，并把样品放入干净的小筐中，放在无菌室中的小推车上，把高压灭菌后的所需生理盐水、平皿、吸管放在小推车上。用小盆装１000ml水，加入４瓶盖新洁而灭消毒水配成0.1%水溶液作为无菌操作时洗手和擦操作台用。
例表：菌落计数结果及报告方式
例次
不同稀释度平均菌落数
10-110-210-3
两稀释度菌数之比
菌落总数
CFU／ml
或
CFU／g
报告方式
CFU／ml或CFU／g
１
1365164 20
---
16400
16000或1.6×104
２
2760295 46
1.6
38000
38000或3.8×104
３
2890271 60
2.2
27100
27000或2.7×104
４
不可计4650 513
---
513000
510000或5.1×105
５
2711 5
---
270
270或2.7×102
６
不可计305 12
---
30500
31000或3.1×104
７
000
---
<1x10
<10
名称：
菌落总数检验操作规程
职能部门：
质检部
页数：
第４页 共 页
文件编号：
版别：
A
生效日期：
修改状态：
第0次修改
释度的平均菌落数均小于３０个，则应按稀释度最低的平均菌数乘以稀释倍数报告之。若所有稀释度的平均菌落均不在３０～３００之间，其中一个稀释度大于３００个，而相邻的另一稀释度小于３０个时，则以接近３０或３００的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。若所有的稀释度均无菌生长，报告数为每g或每mＬ小于１０ＣＦＵ。菌落计数的报告，菌落数在１０以内时，按实有数值报告之，大于１００时，采用二位有效数字，在二位有效数字后面的数值，应以四舍五入法计算。为了缩短数字后面零的个数，可用１０的指数来表示。在报告菌落数为“不可计”时，应注明样品的稀释度。