白血病免疫分型

AML免疫分型总结
尽管CD14是单核细胞比较特异标记，在M4和M5中表达 反而较低，这可能与CD14主要表达于成熟单核、弱表达 于幼单核，而原始单核细胞表面无表达有关，其对单核细 胞白血病的诊断价值有限，应与其他单抗和细胞化学染色 结合判断。 21例M5中，CD64和CD15阳性率均大于80%，而HLADR 100%阳性，CD34和CD117表达不定，提示CD64和 CD15同时强阳性伴HLA-DR高表达提示M5可能性大， 与文献报道一致。
白血病免疫分型
中国医科大学附属盛京医院血液研究室 张继红
Contents
1
血细胞抗原分化
2
流式细胞术检测白血病免疫分型
3
AML免疫分型特点总结
4
ALL免疫分型特点总结源自文库
5
其他白血病免疫分型分析
血细胞分化体系图
B lymphoid maturation
T lymphoid maturation
Neurotrophil maturation
应用积分方案把急性白血病分为四大类型
单表型急性白血病：某一系列积分大于2分，其他系列为0分。 表达某一系列抗原为主的白血病（伴髓系分化抗原表达的ALL和
伴淋系分化抗原表达的AML）：某一系列积分大于2分，伴有 另一系列抗原的表达，但积分小于2分或等于2分。 双表型急性白血病：至少两个系列同时大于2分。 未分化型急性白血病：所有系列积分均小于或等于2分。
髓片
POX染色
AML-M0
AML-M1
AML-M2
AML-M3
AML-M3v
AML-M4EO
AML-M4b
AML-M5b
AML-M6
AML-M7
AML免疫分型总结
192例AML病例中免疫分型结果示髓系抗原CD13、CD33、 MPO最常见，其次CD117也是髓系比较敏感的指标，在 原始细胞百分比高的AML亚型中有较高的阳性率。
白血病免疫分型---CD45-SSC设门
CD45是白细胞的共同抗原成分,所有人类白细胞均表达CD45，包括 淋巴细胞、单核细胞、多形核细胞、嗜酸、嗜碱性细胞、胸腺细胞、 脾细胞、扁桃腺细胞以及骨髓前体细胞。 造血系统细胞CD45表达量与细胞分化程度的高低紧密相关，即分化 程 度 高 的 细 胞 CD45 表 达 量 高 ， 分 化 程 度 低 的 细 胞 CD45 表 达 量 低 （淋 巴细胞>单核细胞>成熟粒细胞>原幼细胞，在红细胞中不表 达。 SSC是侧向角参数，反应细胞的颗粒度（成熟粒细胞>单核细胞>原 幼 细 胞 > 淋 巴 细 胞 ） 。 目 前 ， 国 际 上 采 用 CD45—SSC 设 门 （Gating），可将白血病细胞与正常细胞分开，增加白血病免疫分 型的准确性。
CD15
CD1a
CD64
2008年WHO细胞系别确定标准
髓系：MPO（流式细胞术、免疫组化或者细胞化 学） 或单核系分化（非特异性酯酶弥漫性阳性， 或者CD11c、CD14、CD36、CD64、溶酶体， 两个及以上阳性） T系：胞浆CD3（流式使用抗CD3ε链的抗体；免 疫组化使用的多克隆抗体会检测到非T细胞特异性 的CD3ζ链） 或胞膜CD3（MPAL中比较罕见） B系：CD19强表达加下述标志中至少一个强表达： CD79a、胞浆CD22、CD10 或CD19弱表达加下述标志中至少两个强表达： CD79a、胞浆CD22、CD10
丧失系列规律性（lineage infidelity) : 过高，过低，不表达，交叉
丧失分化发育的阶段性（differentiation asynchrony) : 早期与晚期抗原同表达
免疫分型诊断时的四个步骤
根据白血病细胞表达的系列相关抗原，确定其系列来 源。如：淋系T/B、粒单系、红系、巨核系等 根据白血病细胞表达的系列分化其相关抗原进一步分 型。如：早前B，前B，普通B… 伴系表达抗体（对检测MRD有意义） 靶向抗体指导治疗（CD52，CD33，CD20） 注意抗体组合的问题：PE，APC，PerCP，FITC
Monocytoid maturation
白血病的形态学
白血病免疫分型的特点
白血病免疫分型诊断与形态学比较更客观、更精确(淋系、 M0、M6 、M7及MAL) 属于同一种FAB型的病例，可能具有不同的免疫表型 覆盖率高于基因及染色体，尤其对淋巴系统 慢性淋巴细胞白血病/淋巴瘤 敏感性高于形态及染色体，可达103-104 ----微小残留白血病 比染色体及基因分析快捷，但特异性比之差 目前，免疫分型对粒-单核细胞和单核细胞白血病的鉴别尚有 一定困难.亦受主观因素的影响
有文献报道M3缺乏CD117的表达，而本组资料中有 84.6%的M3病例表达CD117,与Paitta和zheng jine报 道的结果一致。这一差异可能与各研究的病例数较少或所 使用的单克隆抗体来源不同有关。
39例病例中有34例CD34与DR均为双阴性，因此强自发荧 光、CD34与DR双阴性并且表达相关髓系抗原对于M3与 其他亚型AML的鉴别诊断具有一定参考价值。
急性髓细胞白血病
亚型 M0 M1 M2 M3 M4 M5 M6 M7
典型的免疫标记 CD34,CD33,CD13 MPO,CD34,CD33,CD13 MPO,CD34,CD15,CD13 MPO, CD33,CD13(HLA-DR阴性) MPO,CD33,CD15,CD14,CD13 MPO,CD33,CD14,CD13 CD33,GlyA CD33,CD41,CD42b,CD61
弱抗原结合强荧光素 弱荧光素结合强抗原
欧洲组白血病免疫分类的标志积分系统（EGIL）
积分 B淋巴细胞系
T淋巴细胞系
髓系
2
cCD79a
c/mCD3
MPO
cIgM
抗TCR
cCD22
1
CD19
CD2
CD117
CD20
CD5
CD13
CD10
CD8
CD33
CD10
CD65
0.5
TdT
TdT
CD14
CD24
CD7
正常人血液白细胞CD45-SSC设门散点图
R1：淋巴细胞 R2：单核细胞 R3：中性粒细胞 R4：嗜酸性粒细胞 R5：原始细胞
正常人骨髓有核细胞CD45-SSC设门散点图
R1：淋巴细胞 R2：粒系细胞 R3：单核细胞 R4：原始细胞 R5：幼红细胞
白血病细胞的特性
白血病细胞的异常表现在： 抗原系列异常和时间异常