实验七 维生素B片的含量测定
维生素B片含量测定的方法验证ppt课件
•含量测定 • 2.精密称取维生素B1对照品25mg，置100ml
量瓶中，盐酸溶液（9→1000）定容至刻度 ，摇匀→ 得到对照品溶液。
• 3.将2份溶液用紫外分光光度计在246nm处分
别测定吸光度，计算即得。
7
实验内容与要求
•鉴别试验
•吸收波长选择
•精密度试验：用同一份样品溶液测定6次，计算
•目的
•考察准确度，即用该方法测定的结果与真实值
或参考值接近的程度
•要求
•设计高、中、低三个浓度，每个浓度各分别制
备三份供试品溶液进行测试，计算回收率
•RSD < 2.0%
18
加样回收试验
98~102%
取含量测定时一半的称样量，0.5g/2
19
撰写方法学验证论文
• 线性与范围: 设计对照品溶液的浓度 • 精密度试验 • 稳定性试验 根据实验测定数值进行计算 • 重复性试验 • 加样回收试验: • 设计称样量、对照品加入量 • 含量测定：根据实验测定数值进行计算
• RSD < 2.0%
……仪器分析
13
稳定性试验
• 同批、同法
14
重现性试验
•目的
•考察样品溶液制备方法的可靠程度
•要求
•同批样品按相同方法制备样品溶液，至
少6份,浓度与信号值均要在线性范围内
•RSD < 2.0%
……仪器分析
15
重现性试验(示例)
16
精密度试验（示例 ）
17
加样回收率试验
3
重现性试验
4
加样回收试验
5
稳定性试验
9
线性与范围
•精密称取片粉40.98mg(相当于维生素B125mg)，置100ml量
药物分析维生素B1片的含量测定
差示光谱法举例
六神丸中胆红素的测定 六神丸是家庭常备良药之一，主要由
牛黄、麝香、蟾酥、雄黄、冰片、珍珠六 味药组成，具有清热解毒、消肿止痛等功 效，具易服、高效、速效等特点。
胆红素在453nm下有最大吸收，在可见光照射下易氧化成蓝色产 物，在453nm处吸收度显著降低。胆红素在日光下照射25分钟或在红 外灯下（250W）下照射3.3小时，吸收度即稳定。
有紫外吸收
标准曲线法
吸收度A
0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1
0 0
0.03, 0.641 0.025, 0.543 0.02, 0.445 0.015, 0.338 0.01, 0.227
0.005 0.01 0.015 0.02 0.025 0.03 0.035 浓度C（mg/ml）
结果处理：
由回归方程算出供品的浓度，再计 算标示量%。
y=20.66x+0.0256 代入y值求x
操作注意事项：
1、先作曲线，再进行样品测定。因瓶不够。 2、曲线绘制由两组同学共同完成。 3、漏斗、滤纸、接滤液小杯（两份）干燥，防止稀释。 4、注意在同一台仪器测定，消除仪器误差。
取
样量Βιβλιοθήκη ＝50mg• 【规格】10mg • 【配伍禁忌】维生素B1在碱性溶液中易分解，与
碱性药物如碳酸氢钠、枸橼酸钠配伍，易引起变 质。
ΔA =AVB1+A背==εVB1CL+A背
246n m
266
（一）差示光谱法 原理 (difference spectrophtometry)简称ΔA法
样品1（AVB1+A背）
实验七维生素B片的含量测定
实验七维生素B片的含量测定CKBOOD was revised in the early morning of December 17, 2020. 实验七维生素B：片的含量测定一、实验目的1、掌握吸收系数法测定药物含量的方法。
2、熟悉紫外-可见分光光度计的原理及操作二、实验原理维生素政结构中的卩密噪环为一芳香杂环，具有紫外吸收。
因此可在其最大吸收波长处测定吸光度，进行含量测定。
三、实验仪器和试剂：1•仪器：紫外-可见分洸光度计、量瓶（lOOmL）、台秤、量筒（100mL）、烧杯、分析天平、漏斗、铁架台、铁圈、滤纸、剪刀等。
2.试剂：维生素5片、盐酸溶液（9->1000）四、实验内容：取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于维生素B】25mg）,置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9-1000）约70ml,振摇15分钟，使维生素BN容解,标示量％= xlOO%加盐酸（9-1000）稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5ml, 置另一100ml 量瓶中，再加盐酸溶液（9->1000）稀释至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法，在246nm处测定吸光度，按GH；C1NQS・HC1的吸收系数（E\J为421计算,即得。
五. 实验数据记录及处理六、注意事项（一） 仪器的准备1. 开启电源，使仪器预热20分钟。
2. 开机前，先确认仪器样品室是否有东西挡在光路上，以免影响仪器自检。
（二） 仪器的操作步骤1. 设置波长（246nm ）。
2.测定。
3.数据记录与结果处理。
（三） 将比色皿洗净装盒，关机（四） 填写仪器使用记录，（五） 维生素乩的紫外吸收峰随溶液pH 的变化而不同，因此要严格控制溶液的pH 值。
七、思考题1. 单色光不纯对于测得的吸收曲线有何影响？2. 利用邻组同学的实验结果，比较同一溶液在相同仪器上测得的吸光度有无不同， 试做解释。
A 1 -——x ——xVxDxW 醞100。
维生素B1片的含量测定以及方法验证2
浓度μg/mL 吸光度
7.5
10.0
12.5
15.0
17.5
如
取供试品用稀盐酸配制成85.91ug/mL的溶液，分 别在-20℃、-4℃、室温放置0min、15min、 30min、45min、60min、75min，然后在 246nm波长测的吸光度。
取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约 相当于维生素B115mg），置100mL棕色容量瓶中， 共称9份。其中3份分别加入浓度为70.29ug/mL， 对照液50mL，3份分别加入浓度为101.53ug/mL， 对照液50mL，加盐酸溶液（9到1000）至刻度， 摇匀，精密量取上述溶液5.0mL置100mL量瓶中， 加盐酸溶液（9 → 1000）稀释至刻度，摇匀，在 246nm的波长处测吸光度，计算含量，并求回收 率。
维生素B1
精密称取相当于维生素B1片粉25mg，置于100mL 量瓶中，加盐酸溶液（9 → 1000）约70mL，摇 匀15min使维生素B1溶解，加同种溶剂稀释至刻度， 摇匀，用干燥滤纸过滤，精密量取5mL，置于一 100mL量瓶中，加同种溶剂稀释至刻度，摇匀，用 紫外分光光度法，在246nm波长测定吸收度，计 算含量。
Байду номын сангаас
1、掌握药物含量测定方法验证的指标和方法。
维生素B1是由氨基酸嘧啶环和噻唑环通过亚甲基连 接而成的季铵类化合物，嘧啶环上季铵及嘧啶环上 氨基，为两个碱性基团，可与酸成盐。维生素B1分 子具有共轭双键结构，在紫外有吸收峰，并且维生 素B1紫外吸收峰随pH变化而不同，pH=2 （0.1mol/L）时，最大吸收波长在246nm处，吸 收系数为421（E1cm1%）,根据最大吸收波长处的吸 光度即可计算含量。
维生素B1片的含量测定的方法验证(精)
维生素B1片的含量测定的方法验证专业：药物制剂班级：姓名：学号：紫外分光光度法测定维生素B1片的含量摘要本试验采用紫外分光光度法对维生素B1片的含量进行测定，对此法进行方法验证，证明了此法具有专属性高，回收率高、精密度高，线性好、测定范围宽的特点，并对数据处理方法进行了比较，发现采用对照品比较法进行数据处理受仪器波动影响较小，测定结果可信度较高。
关键词维生素B1 紫外分光光度法含量测定方法验证对照品比较法维生素B1及其制剂及其制剂常采用的方法有非水滴定法，紫外分光光度法和硫色素荧光法。
中国药典用非水溶液滴定法测定原料药，片剂和注射剂采用紫外分光光度法，USP采用硫色素荧光法。
采用非水溶液滴定法可能受到氢卤酸盐的干扰，对操作人员要求较高，采用硫色素滴定法不受氧化破坏产物的干扰，测定准确但操作繁琐，且荧光测定受干扰因素较多，本实验采用紫外分光光度法进行含量测定。
1实验装置及试剂1.1 仪器 BS210S型天平，UV751GD型紫外/可见分光光度计。
1.2 实验材料维生素B1片（来源：成都第一制药，规格：1--00片*10mg，批号：061204），维生素B1标准品（分析纯），维生素B1对照品（200ug/ml，2.0mg/ml），维生素B1标准溶液（0.250mg/ml），空白辅料，盐酸溶液（9→1000）。
2 实验方法处方分析：组成处方量(g 比例(%维生素B110 16.39淀粉20 32.78糊精30 49.18硬脂酸镁 1.0 1.639生产1000片根据处方量分析，维生素B1含16.39%，辅料含83.61%。
平均片重约61mg，取相当于25mg维生素B1的片粉约0.15g。
1、测定方法：取供试品20片，精密称定，研细，称取片粉适量（约相当于维生素B125mg），置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）约70ml，振摇15min使维生素B1溶解，再加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5ml，置另一100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，照分光光度法，在246nm的波长处测定吸收度，按C12H17ClN4OS.HCl的吸收系数（）为421计算，即得。
HPLC法测定复合维生素B片中四种成分的含量
ＨＰＬＣ法测定复合维生素Ｂ片中四种成分的含量目的：建立高效液相色谱法（HPLC）测定复合维生素B片中烟酰胺、维生素B6、维生素B1、维生素B2 四种成分的含量。
方法：采用C18色谱柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为0.005 mol/L己烷磺酸钠-甲醇-冰醋酸（70∶30∶0.5）；流速为1.0 ml/min；检测波长：278 nm；柱温30℃。
结果：烟酰胺、维生素B6、维生素B1、维生素B2分别在100.92~605.52、21.24~127.44、97.88~587.20，42.13~126.38 μg/ml范围内呈良好的线性关系。
结论：本方法简便、快速，可用于复合维生素B片的质量控制。
[Abstract]Objective:To establish a HPLC method for contents determination of the four components in Compound Vitamin B Tablets. Methods: The HPLC system consisted of C18 column(150 mm×4.6 mm,5 μm), 0.005 mol/L sodium hexane sulfonate-methanol-glacial acetic acid(70∶30∶0.5) as the mobile phase with the flow rate of 1.0ml/min ,and 278 nm as the detective length.Results:The linear ranges of nicotinamide,vitamin B6,vitamin B1 and vitamin B2 were 100.92~605.52,21.24~127.44,97.88~587.20，42.13~126.38 μg/ml respectively.Conclusion:This method is simple,rapid and it can be used for the qulity control of Compound Vitamin B Tablets.[Key words]HPLC; Compound Vitamin B Tablets; Nicotinamide;Vitamin B6;Vitamin B1; Vitamin B2;Contents复合维生素B片是由烟酰胺、维生素B6、维生素B1、维生素B2四种成分组成的复方制剂。
维生素B1片的含量测定的方法验证(精)
维生素B1片的含量测定的方法验证专业：药物制剂班级：姓名：学号：紫外分光光度法测定维生素B1片的含量摘要本试验采用紫外分光光度法对维生素B1片的含量进行测定，对此法进行方法验证，证明了此法具有专属性高，回收率高、精密度高，线性好、测定范围宽的特点，并对数据处理方法进行了比较，发现采用对照品比较法进行数据处理受仪器波动影响较小，测定结果可信度较高。
关键词维生素B1 紫外分光光度法含量测定方法验证对照品比较法维生素B1及其制剂及其制剂常采用的方法有非水滴定法，紫外分光光度法和硫色素荧光法。
中国药典用非水溶液滴定法测定原料药，片剂和注射剂采用紫外分光光度法，USP采用硫色素荧光法。
采用非水溶液滴定法可能受到氢卤酸盐的干扰，对操作人员要求较高，采用硫色素滴定法不受氧化破坏产物的干扰，测定准确但操作繁琐，且荧光测定受干扰因素较多，本实验采用紫外分光光度法进行含量测定。
1实验装置及试剂1.1 仪器 BS210S型天平，UV751GD型紫外/可见分光光度计。
1.2 实验材料维生素B1片（来源：成都第一制药，规格：1--00片*10mg，批号：061204），维生素B1标准品（分析纯），维生素B1对照品（200ug/ml，2.0mg/ml），维生素B1标准溶液（0.250mg/ml），空白辅料，盐酸溶液（9→1000）。
2 实验方法处方分析：组成处方量(g 比例(%维生素B110 16.39淀粉20 32.78糊精30 49.18硬脂酸镁 1.0 1.639生产1000片根据处方量分析，维生素B1含16.39%，辅料含83.61%。
平均片重约61mg，取相当于25mg维生素B1的片粉约0.15g。
1、测定方法：取供试品20片，精密称定，研细，称取片粉适量（约相当于维生素B125mg），置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）约70ml，振摇15min使维生素B1溶解，再加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5ml，置另一100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，照分光光度法，在246nm的波长处测定吸收度，按C12H17ClN4OS.HCl的吸收系数（）为421计算，即得。
HPLC法测定维生素B族片中3种组分的含量
HPLC法测定维生素B族片中3种组分的含量摘要：目的获取维生素B片中B1、B2、B6的含量，测量方法是运用高效液相色谱法对三种成分同时进行测量。
方法运用C18柱，流动相以1.0ml/min流动，流质为0.005mol/L的庚烷磺酸钠溶液（0.05%三乙胺0.5%冰醋酸）-甲醇。
紫外检测波长为280nm。
结果本实验中维生素B1,B2,B6线性范围分别为2.964～74.1 mg·ml-1，2.934～73.35 mg·ml-1，2.996～74.9 mg·ml-1 ,三种成分的方法回收率依次是97.5%，99.7%，100.5% ，RSD依次是1.21%，1.5%，0.9%。
结论该方法分离质量佳，高效快捷，能够很好的控制多维片中维生素B1 、B2、B6的质量。
关键词：HPLC法，维生素B族片；维生素B1 ，维生素B2 ，维生素B6 B族维生素由于其水溶性特点在人体新陈代谢中扮演着重要的角色。
维生素B 族片在临床上主要用于防治因缺乏多种B族维生素所致的各种疾病,同时也常作为营养及能量补充剂。
对B族维生素分析检测目前有些报导采用分光光度法[1]电化学法[2]、荧光法，微生物法等，操作繁琐费时。
本文用HPLC法在对含有多种维生素的片剂中维生素B1、维生素B2、维生素B6的含量测定时同时进行测定，得到满意结果，该方法简便、准确、快速、重现性好，可用于对维生素B1 ，维生素B2，维生素B6的质量控制。
1.实验仪器与试药1.1 仪器Agilent 1200高效液相色谱仪1.2 试剂产自国药集团的冰醋酸和三乙胺均为分析纯；而自东京化成工业株式会社进口的庚烷磺酸钠是色谱纯；甲醇（TEDIA COMPANY ,LOT 001917）为色谱纯。
试验过程中的水一律采用蒸馏水；三种成分的对照品全是中国药品生物制品检定所提供，其中维生素B1 对照品的批号是100390-200301；B2 对照品的含量98.7%、批号是100369-200502，维生素B6 对照品的批号是100116-200502）。
紫外分光光度法测定维生素B片的含量
紫外分光光度法测定维生素B1片的含量维生素B1及其制剂及其制剂常采用的方法有非水滴定法，紫外分光光度法和硫色素荧光法。
中国药典用非水溶液滴定法测定原料药，片剂和注射剂采用紫外分光光度法，USP采用硫色素荧光法。
采用非水溶液滴定法可能受到氢卤酸盐的干扰，对操作人员要求较高，采用硫色素滴定法不受氧化破坏产物的干扰，测定准确但操作繁琐，且荧光测定受干扰因素较多，本实验采用紫外分光光度法进行含量测定。
1实验装置及试剂1.1 仪器 BS210S型天平，UV751GD型紫外/可见分光光度计。
1.2 实验材料维生素B1片（来源：成都第一制药，规格：1--00片*10mg，批号：061204），维生素B1标准品（分析纯），维生素B1对照品（200ug/ml，2.0mg/ml），维生素B1标准溶液（0.250mg/ml），空白辅料，盐酸溶液（9→1000）。
2 实验方法处方分析：组成处方量(g) 比例(%)10 16.39维生素B1淀粉20 32.78糊精30 49.18硬脂酸镁 1.0 1.639生产1000片根据处方量分析，维生素B1含16.39%，辅料含83.61%。
平均片重约61mg，取相当于25mg维生素B1的片粉约0.15g。
1、测定方法：取供试品20片，精密称定，研细，称取片粉适量（约相当于维生素B125mg），置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）约70ml，振摇15min使维生素B1溶解，再加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5ml，置另一100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，照分光光度法，在246nm 的波长处测定吸收度，按C12H17ClN4OS.HCl的吸收系数（1%E）为421计算，即得。
1cm2、方法验证2.1.线性和范围精密称取维生素B1对照品约25mg，置100 ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）溶解并稀释至刻度，制备成含维生素B1250μg/ml的对照溶液。
HPLC 法测定复合维生素B片中B族维生素的含量
HPLC 法测定复合维生素B片中B族维生素的含量摘要：目的：建立检测复合维生素b片的质量标准。
方法：采用高效液相色谱法来对复合维生素b片中的烟酰胺、维生素b。
维生素b2、维生素b6进行定性和定量分析。
结果烟酰胺、维生素b1、维生素b2、维生索b6平均回收率分别为烟酰胺：99.2%（rsd=0.77%）；维生素b1： 100.3%（rsd=0.87%）；维生素b2：99.9%（rsd=1.04%）；维生素b6：100.1%（rsd=0.65%）。
结论：该方法准确.灵敏度高，重现性好，可作为复合维生素b片的质量控制方法。
关键词：高效液相色谱法；维生素；复合维生素b片【中图分类号】r917【文献标识码】a【文章编号】1674-7526（2012）08-0283-02复合维生素b片是由维生素b1、维生素b2、烟酰胺、维生素b6和泛酸钙组成。
用于预防和治疗b族维生素缺乏所致的营养不良、厌食、脚气并糙皮病等。
维生素b1是糖代谢所需辅酶的重要组成成份。
维生素b2为组织呼吸所需的重要辅酶组成成份，烟酰胺为辅酶i及ii的组分，脂质代谢，组织呼吸的氧化作用所必需。
维生素b6为多种酶的辅基，参与氨基酸及脂肪的代谢。
泛酸钙为辅酶a的组分，参与糖、脂肪、蛋白质的代谢。
均为维持机体正常代谢和身体健康必不可少的重要物质。
该品种收载于卫生部药品标准化学药品及制剂第一册，没有建立四种维生素同时通过hplc法进行含量测定的方法[1]。
本文建立了一种采用高效液相色谱方法同时测定b族维生素含量的方法。
样品处理简单，方法准确，灵敏度高，可作为复合维生素b片的质量控制方法。
1仪器与试药waters 1225 高效液相色谱仪，烟酰胺对照品（中国药品生物制品检定所，批号：100115-200703，含量99.9%），维生素吡哆辛（中国药品生物制品检定所，批号：100116-200502），维生素b1（中国药品生物制品检定所，批号：100090-200502），维生素b2（中国药品生物制品检定所，批号：100369-200502）；庚烷磺酸钠为分析纯，冰醋酸、三乙胺和甲醇均为色谱纯；复合维生素b片（自制：批号分别为20101001、20101002和20101003）。
B族维生素的含量测定
B族维生素的含量测定B族维生素直接参与了氨基酸和细胞代谢，可以促进红细胞成熟，加强身体能量代谢，提高身体的反应能力和协调能力。
而且B维生素又属于水溶性维生素，可以很简单地通过饮料的方式来补充，因此成为各种品牌的功能性饮料的主要添加剂。
据有关市场调查发现，国产功能性饮料中添加的B族维生素几乎限于维生素B6、B12和烟酰胺3种，偶尔也有同时添加维生素B1的[1]。
故饮料中B1、B6、B12 这三种维生素的含量测定对人们消费与使用饮料具有一定的安全和消费的指向性。
1、维生素B11.1在线荧光衍生一高效液相色谱法陈晓春等使用高效液相色谱仪的在线衍生功能使食品中的维生素B转化为硫胺荧，再以荧光检测器检测其含量。
在线衍生技术克服了离线手工衍生的偏差，与荧光检测器联用能有效提高检测的灵敏度，避免了国标方法中因正丁醇萃取不完全造成的待测物损失。
本方法在精密度，准确度及检出限等各个方面都能满足日常饮料检测工作的需要[2]。
1.2酸性染料比色法何树云等利用维生素B1与酸性染料溴麝香草酚蓝成盐，在420nm波长处测定吸收度。
结果维生素B两点电位滴定法浓度在 2.0—10.0ug／m1范围内与吸收度呈良好线性关系(r=O.998),平均回收率为99.8％,RSD=1.1％(n=4)；与重量法比较结果基本一致，且此法操作简使、快速[3]。
1.3两点电位滴定法冯俊贤等提出了用两点电位滴定法测定维生素Bl含量的新方法。
该法只需在滴定终点前附近记录两次AgN03标准溶液体积和相应的电极电位值，利用两点法公式计算滴定终点，从而确定维生索Bl含量[4]。
2、维生素B22.1高效液相色谱法王浩等使用高效液相色谱法来测定维生素B6。
色谱条件为C18(5μm,4.6mm×250mm i.d)反相色谱柱,流速 1.0mL/min;柱温30℃;流动相:v(甲醇):v(0.2g/L辛烷磺酸钠,体积分数为0.25%的三乙胺溶液,用乙酸调pH3.2)=35:65;进样量50μL;激发波长310nm,发射波长395nm[5]。
化学实验测定某种食品中维生素B含量
化学实验测定某种食品中维生素B含量维生素B是一类非常重要的水溶性维生素，在人体的新陈代谢过程中起着关键作用。
为了准确地测定某种食品中维生素B的含量，化学实验是一种常用的方法。
本文将介绍一种测定某种食品中维生素B含量的实验方法，并解释其原理和步骤。
实验方法：一、原理：本实验采用色谱法测定某种食品中维生素B的含量。
色谱法是基于物质在固定相和流动相作用下在柱状填料上的分配和传递的物理化学原理。
通过色谱柱进行分离和分析，可以得到维生素B的含量。
二、实验步骤：1. 实验前准备：a. 准备所需的仪器和试剂，包括色谱柱、色谱纸、溶剂等。
b. 根据食品样品的特点选择最合适的处理方法，如研磨、提取等。
c. 为了便于比较和计算，准备一系列不同浓度的维生素B标准溶液。
2. 样品处理：a. 将一定质量的食品样品粉碎并加入一定体积的溶剂中，进行提取。
b. 将提取液过滤并收集，待用。
3. 色谱条件设置：a. 将色谱柱装入色谱仪中。
b. 根据所用色谱柱和提取液的特性，选择适当的流动相和流速。
c. 调整色谱仪的工作条件，如列温、检测器灵敏度等。
4. 样品注射和分离：a. 将一定体积的提取液注射到色谱柱中。
b. 开始色谱分离，记录分离曲线。
5. 标准曲线绘制：a. 依次将不同浓度的维生素B标准溶液注射到色谱柱中，记录各峰面积。
b. 根据标准溶液的浓度和峰面积数据，绘制标准曲线。
6. 维生素B含量计算：a. 根据样品的峰面积和标准曲线，计算出样品中维生素B的含量。
b. 进行数据分析和结果评估，得出准确的维生素B含量。
7. 结果分析：a. 根据实验结果，比较不同食品样品中维生素B的含量差异。
b. 分析可能的原因，讨论实验的可靠性和准确性。
c. 提出进一步的改进和探究方向。
通过这个实验方法，我们可以准确地测定某种食品中维生素B的含量，为食品质量控制和营养评估提供依据。
同时，这个方法也可以用于其他维生素或其他类似化合物的测定，具有很大的应用潜力。
维生素b片含量测定的方法验证
维生素B1有紫外吸收，Amax=246nmE，11c%m 421
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实验方法
1. 鉴别反应
取本品约5mg，加氢氧化钠试液2.5ml使其 溶解，加铁氰化钾试液0.5ml与正丁醇5ml， 强力振摇2min，放置使成两液层，上层醇液 即显强烈的蓝色荧光，加酸使成酸性荧光即 消失，再加碱使成碱性，则荧光复现。
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含量测定
1.精密称取片粉40.98mg(相当于维生素B125mg，标示量为每1g药物中含有
0.164g维生素B1)，置100ml量瓶中 → 加盐酸溶液（9→1000）约70ml，摇匀15 分钟使维生素B1溶解，并定容至刻度，摇匀 →干燥滤纸过滤→精密量取续滤 液5.0ml，置100ml量瓶中，盐酸溶液（9→1000）定容至刻度，摇匀 → 得到供 示品溶液。
实验原理
维生素B1又称盐酸硫胺 （thiamine hydrochloride）， 化学名称为氯化4-甲基-3[(2-甲基- 4-氨基-5-嘧啶基)-
甲基]-5-(2-羟基乙基噻唑鎓盐酸盐
H3C
N
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
N
NH2
H2 C
N+
CH2CH2OH
Cl- HCl
CH3
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性质
溶解性：水中易溶，乙醇中微溶，乙醚中不溶 硫色素反应：
要求
设计高、中、低三个浓度，每个浓度各分别 制备三份供试品溶液进行测试，计算回收率
RSD < 2.0%
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加样回收试验
98~102%
序号 1
称样量 （g）
0.16
待测组分 含量
（mg）
对照品加 入量
HPLC法测定维生素B_4片的含量和含量均匀度
Ｃ １ ８柱 （ ４ ． ６ ｍｍ×２ ５ ０ ｍｍ，５肚 ｍ） ，流 动 相 ： 甲 醇一 ０ ． ０ ５ ｍｏ ｌ ・Ｌ 。 磷 酸 二 氢钾 溶 液一 三 乙胺 （ １ ０。 ９ ０。 ０ ． ２ ５ ） ，流速 ：０ ． ８ ｍＬ・ｍｉ ｎ ，检 测 波长 ：２ ６ １ ｎ ｍ。结果 维 生素 Ｂ 在 １ ０ ． ３ ６ ～５ １ ． ８ １ ｇ・ｍＬ 。 范 围 内线
ｖ ｉ ｔ ａ ｍｉ ｎ Ｂ４ ｔ ａ ｂｌ ｅ ｔ ｓ ．Ｍ ｅ ｔ ｈｏ ｄ ｓ Ｗａ ｔ ｅ ｒ ｓ Ｓｕ ｎＦｉ ｒ ｅ Ｔ Ｃ１ ８ ｃ ｏｌ ｕ ｍｎ （ ４． ６ ｍｍ × ２ ５ ０ ｍｍ ， ５ ｍ ） ｗａ ｓ ａ ｄ ｏ ｐｔ ｅ ｄ ｆ ｏ ｒ
文 献 标 识 码 ：Ａ 文 章 编 号 ：ｌ ０ ０ ２ — ７ ７ ７ ７（ ２ ０ １ ３ ）０ ９ — ０ ９ ５ ３ — ０ ３
中 图 分 类 号 ：Ｒ９ ２ ７ ． ２
Ｃｏ ｎｔ ｅ ｎｔ ａ ｎｄ Ｕｎｉ ｆ ｏ ｒ ｍｉ ｔ ｙ Ｄｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｖｉ ｔ ａ ｍｉ ｎ Ｂ４ Ｔａ ｂ ｌ ｅ ｔ ｓ ｂ ｙ Ｈ ＰＬＣ
Ｗａ ｎ ｇ Ｊ ｉ ａ ｎ ａ ｎ ｄ Ｗｕ Ｊ ｕ ｎ （ Ｔａ ｉ ｚ ｈ ｏ ｕ Ｉ ｎ ｓ ｔ ｉ ｔ ｕ ｔ ｅ ｆ ｏ ｒ Ｆ ｏ ｏ ｄ ａ ｎ ｄ Ｄｒ ｕ ｇ Ｃｏ ｎ ｔ ｒ ｏ ｌ ｏ ｆ Ｊ ｉ ａ ｎ ｇ ｓ ｕ Ｐ ｒ ｏ ｖ ｉ ｎ ｃ ｅ ， Ｔａ ｉ ｚ ｈ ｏ ｕ
性 关 系 良好 （ ， ． 一１ ． ０ ０ ０ ，ｎ 一５ ） ；测得 平均 回收 率为 ９ ９ ． ５ １
专属性 强 ，可 用于 维生素 Ｂ 片的质 量控制 。
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实验七维生素B1片的含量测定
一、实验目的
1、掌握吸收系数法测定药物含量的方法。
2、熟悉紫外-可见分光光度计的原理及操作
二、实验原理
维生素B1结构中的嘧啶环为一芳香杂环，具有紫外吸收。
因此可在其最大吸收波长处测定吸光度，进行含量测定。
三、实验仪器和试剂：
1.仪器：
紫外-可见分光光度计、量瓶(100mL)、台秤、量筒(100mL)、烧杯、分析天平、漏斗、铁架台、铁圈、滤纸、剪刀等。
2. 试剂：
维生素B1片、盐酸溶液（9—>1000）
四、实验内容：
取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于维生素B125mg），置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）约70ml，振摇15分钟，使维生素B1溶解，加盐酸（9→1000）稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5ml，置另一100ml量瓶中，再加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法，在246nm处测定吸光度，按C12H17ClN4OS·HCl的吸收系数（E1%1cm）为421计算，即得。
五、实验数据记录及处理
标示量%%100100
1%
11⨯⨯⨯⨯⨯⨯=-
S
m W D V E A cm
六、注意事项
（一） 仪器的准备
1. 开启电源，使仪器预热20分钟。
2. 开机前，先确认仪器样品室是否有东西挡在光路上，以免影响仪器自检。
（二）仪器的操作步骤 1. 设置波长（246nm ）。
2. 测定。
3. 数据记录与结果处理。
（三）将比色皿洗净装盒，关机 （四）填写仪器使用记录，
（五）维生素B 1的紫外吸收峰随溶液pH 的变化而不同，因此要严格控制溶液的pH 值。
七、思考题
1.单色光不纯对于测得的吸收曲线有何影响？
2.利用邻组同学的实验结果，比较同一溶液在相同仪器上测得的吸光度有无不同，试做解释。
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