微生物实验医学知识
医学微生物学实验医学知识
（1）取琼脂平板1个，将底面分成两等份，注明A/B。 （2）用无菌棉签蘸生理盐水，在左手食指头上涂擦。用该指
头在平板A处琼脂表面涂抹，作为消毒前的对照。 （3）用棉签蘸络合碘消毒左手食指。待络合碘干后，依上法
在平板B处琼脂表面涂抹。 （4）置平板于37℃培养18～24h。
2．2个平板均置37℃培养18～24h，观察结果。
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
二、理化因素对微生物的影响
（一）消毒灭菌的常用术语:
1、消毒（disinfection）：杀灭物体上或环境中的病原微生 物、并不一定杀死细菌芽胞或非病原微生物的方法。 消毒剂（disinfectant）：用以消毒的药品
第2页：记录、分析紫外线杀菌试验的结果。
5、无菌操作(aseptic technique)： 防止细菌及其他微生物进入人体或其他物品的操作技术。
（二） 消毒灭菌的方法 资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
干热灭菌法
热力灭菌法 湿热灭菌法
物理方法
辐射杀菌法
紫外线 电离辐射 微波
滤过除菌法
干燥和低温抑菌法等
化学方法
常用的化学消毒剂：乙醇、含碘消毒剂、过氧乙酸、过氧化氢、高 锰酸钾、新洁尔灭等。
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【结果】
平板A处琼脂表面有细菌生长，B处不长细菌或出现 极少的菌落。说明一定浓度的络合碘能杀灭细菌。
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3、抗生素敏感试验（示教）
一种抗生素只对一定种类的生物细胞有拮抗作用，这种作用范 围称抗菌谱。
抗生素的抗菌机制 影响细胞壁的合成； 损伤或破坏细胞膜的结构； 干扰细胞碳水化合物的代谢； 抑制核酸或蛋白质的合成，这些作用都有一定的选择性。
医学微生物学知识点
医学微生物学知识点微生物是指肉眼无法直接看到的微小生物体，包括细菌、真菌、病毒和寄生虫等。
微生物学是研究微生物的生物学科学，与医学密切相关。
本文将介绍医学微生物学的一些重要知识点。
一、细菌细菌是一类单细胞微生物，形态多样，可以是球形、杆状或螺旋形。
细菌广泛存在于自然界中，有些细菌对人体有益，有些则可以导致疾病。
以下是一些与人类健康密切相关的细菌知识点：1. 病原菌：病原菌是指能引起疾病的细菌。
例如，大肠杆菌是一种常见的病原菌，它可以通过污染的食物或水传播，导致胃肠道感染。
2. 耐药细菌：耐药细菌指对抗常规抗生素产生抗药性的细菌。
过度使用抗生素或不合理使用抗生素会导致细菌耐药性的增加，造成严重的公共卫生问题。
3. 碳水化合物发酵菌：这类细菌能够利用碳水化合物进行发酵，产生酸、气体或其他化合物。
例如，链球菌是一种碳水化合物发酵菌，它可以引起咽喉炎和扁桃体炎等疾病。
二、真菌真菌是一类多细胞或单细胞的真核微生物，可以通过孢子进行繁殖。
真菌在自然界中广泛存在，包括霉菌、酵母菌等。
以下是一些与人类健康相关的真菌知识点：1. 真菌感染：真菌感染可以引起皮肤、黏膜和内脏器官的疾病。
例如，白色念珠菌是一种常见的真菌感染病原体，它可以引起阴道念珠菌病和口腔念珠菌病等。
2. 真菌毒素：某些真菌产生毒素，对人体健康有害。
例如，黄曲霉菌产生的黄曲霉毒素可以污染食物，摄入过量可能导致急性中毒或慢性健康问题。
3. 真菌药物：真菌感染通常可以通过抗真菌药物进行治疗，常见的抗真菌药物包括伊曲康唑和氟康唑等。
三、病毒病毒是一种非细胞的微生物，依靠寄生于宿主细胞内复制和繁殖。
病毒能感染人类和其他动植物，引起多种疾病。
以下是一些与人类健康有关的病毒知识点：1. 病毒感染：病毒可以感染人的呼吸道、消化道等器官系统，导致感冒、流感、肠胃炎等疾病。
例如，流感病毒是一种常见的呼吸道病毒，它易于通过飞沫传播。
2. 病毒复制：病毒在寄生于宿主细胞内进行复制。
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个人防护措施及注意事项说明
实验服与护目镜
进入实验室需穿着实验服，佩戴合适的护目镜， 防止试剂飞溅或粉尘刺激。
手套与口罩
根据实验需要选择合适的手套和口罩，避免皮肤 接触有害试剂或吸入有害气体。
实验操作规范
规范实验操作，避免产生气溶胶或飞溅物，减少 交叉污染的风险。
实验废弃物处理及环保要求讲解
废弃物分类处理
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目录
• 微生物学基础 • 医学微生物学概述 • 常见病原微生物介绍 • 微生物检验技术与方法 • 临床标本中常见病原微生物检测实例分析 • 实验室安全与防护措施
01 微生物学基础
微生物定义与分类
微生物定义
微生物是一类形体微小、结构简单、 必须借助光学显微镜或电子显微镜 才能看到的微小生物。
微生物生长与繁殖
01
微生物营养
微生物从外界环境中摄取和利用营养物质的过程称为营养。微生物营养
类型有光能自养型、光能异养型、化能自养型和化能异养型四类。
02 03
微生物生长
微生物在适宜的环境条件下，通过摄取营养物质、合成细胞物质、增加 细胞数量的过程称为生长。生长曲线可分为迟缓期、对数期、稳定期和 衰亡期四个时期。
通过对微生物基因组进行测序和 分析，了解其基因组成和功能， 为微生物的鉴定和分型提供准确
依据。
基因芯片技术
将大量特异性基因探针固定在芯 片上，通过与待测微生物DNA杂
交来鉴定其种类和型别。
宏基因组学技术
通过对环境中所有微生物的基因 组进行高通量测序和分析，了解 微生物群落的组成和功能，为环 境微生物检测和生态学研究提供
尿液标本中常见病原微生物检测实例分析
尿常规检查
医学微生物学实验
医学微生物学实验在医学领域中，微生物学实验扮演着至关重要的角色。
它们为研究人员提供了了解微生物的生长、传播和致病机制的机会。
本文将探讨医学微生物学实验的不同类型和其在医学研究中的应用。
一、培养实验培养实验是最基本的微生物学实验之一。
通过将微生物接种到特定培养基上，并为其提供适宜的环境条件，可以促进微生物的生长和增殖。
培养实验还可用于鉴定微生物的种类和性质。
例如，革兰氏染色法可以帮助鉴定细菌是否为革兰氏阳性或革兰氏阴性。
此外，培养实验也可以用于测试微生物对不同药物的敏感性。
二、抗生素敏感性实验抗生素敏感性实验是评估微生物对抗生素的敏感性的重要方法。
这些实验可以帮助医生选择最合适的抗生素治疗方案，以对抗细菌感染。
一种常用的抗生素敏感性实验是纸片扩散法，它通过在琼脂平板上置放含有不同抗生素的纸片来观察微生物对抗生素的反应。
根据纸片周围形成的抑制区域大小，可以推测微生物对抗生素的敏感性。
三、酶活性实验酶活性实验用于评估微生物代谢过程中酶的活性和效率。
这些实验可以帮助我们了解微生物对特定底物的降解能力以及其在生物合成中所起的作用。
例如，过氧化氢酶活性实验可以检测细菌的生产氢过氧化物的能力，这对于了解某些微生物的致病机制非常重要。
四、PCR实验聚合酶链反应（PCR）是一种常用的分子生物学技术，用于扩增和检测微生物DNA的特定片段。
这种实验可以快速、准确地鉴定微生物的种类和亚型。
PCR实验在病毒检测、感染病原体鉴定以及基因突变的检测上有着广泛的应用。
五、流式细胞术流式细胞术是一种用于分析和分离微生物细胞的高级技术。
它通过将微生物细胞与荧光染料结合，以区分不同类型的细胞，并通过流式细胞术仪对其进行计数和分类。
这种实验可以帮助研究人员迅速而准确地了解微生物种群的组成和动态变化。
六、抗体检测实验抗体检测实验用于检测微生物感染引起的免疫反应。
这些实验可以检测患者体内的特定抗体是否存在，并确定感染的类型和程度。
例如，ELISA实验可以检测人体内是否存在病毒抗体，从而判断是否感染了某种病毒。
医学微生物学知识总结
医学微生物学绪论1．微生物：存在于自然界的一大群体形微小、结构简单、肉眼直接看不见,必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百倍、数千倍。
甚至数万倍才能观察到的微小生物。
3.病原微生物：少数具有致病性,能引起人类、植物病害的微生物。
机会致病性微生物：在正常情况下不致病,只有在特定情况下导致疾病的微生物。
4,郭霍法则：①特殊的病原菌应在同一种疾病中查见,在健康人中不存在；②该特殊病原菌能被分离培养得纯种；③该纯培养物接种至易感动物,能产生同样病症；④自人工感染的实验动物体内能重新分离得到该病原菌纯培养。
5.免疫学：㈠主动免疫；㈡被动免疫。
第一篇细菌学第1章细菌的形态与结构第一节细菌的大小与形态1.观察细菌常采用光学显微镜,一般以微米为单位。
2.按细菌外形可分为：①、球菌（双球菌、链球菌、葡萄球菌、四联球菌、八叠球菌）②、杆菌（链杆菌、棒状杆菌、球杆菌、分枝杆菌、双歧杆菌）③、螺形菌（弧菌、螺菌、螺杆菌）第二节细菌的结构1.基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、核质特殊结构：荚膜、鞭毛、菌毛、芽胞2.革兰阳性菌（G+）：显紫色; 革兰阴性菌（G-）：显红色。
3.4.G-菌的外膜｛脂蛋白LPS（脂质A,核心多糖,特异多糖）脂质双层脂多糖｝脂多糖即G-菌的内毒素。
LPS是G-菌的重要致病物质,使白细胞增多,直至休克死亡；另一方面,LPS也可增强机体非特异性抵抗力,并有抗肿瘤等有益作用。
①脂质A：内毒素的毒性和生物学活性的主要成分,无种属特异性,不同细菌的脂质A骨架基本一致,故不同细菌产生的内毒素的毒性作用均相似。
②核心多糖：有属特异性,位于脂质A的外层。
③特意多糖：即G-菌的菌体抗原（O抗原）,是脂多糖的最外层。
5.细胞壁的功能：维持菌体固有的形态,并保护细菌抵抗低渗环境。
G-菌的外膜是一种有效的屏障结构,使细菌不易受到机体的体液杀菌物质、肠道的胆盐及消化酶等的作用。
6.细菌细胞壁缺陷型（细菌L型）：细菌细胞壁的肽聚糖结构受到理化或生物因素的直接破坏或合成呗抑制,这种细菌壁受损的细菌在高渗环境下仍可存活者称为细菌细胞壁缺陷型。
医学微生物学实验：细菌的分布
一、实验题目：细菌的分布
二、实验目的：
1.熟悉细菌分布的常用检查方法。
2.了解细菌分布的广泛性，树立“有菌”观念，认识“无菌操作”对于微生物学及医学实践的重要意义。
3.了解常规消毒方法
三、实验原理
通过不同途径，采集各种状态下的细菌标本，经过培养观察，证明细菌的分布状态。
四、实验材料
1.自来水、土壤悬液、碘液
2.无菌普通琼脂平板培养基、血平板、酒精灯、接种环、恒温培养箱
五、实验方法及步骤
1.空气中细菌的分布：采用暴皿沉降法，取5个无菌普通琼脂平板培养基，分别置于实验室、办公室、无菌室、卫生间、走廊，在空气中暴露30min后盖上盖子，37℃恒温培养48h。
2.水中细菌的分布：采用划线法。
①取1个无菌普通琼脂平板培养基，在培养皿底部用记号笔划线将培养皿平均分成两部分。
②用酒精灯外焰灼烧接种环杀菌，用接种环接取中段自来水，在培养基一侧表面划线。
③再次灼烧接种环，用接种环取土壤悬液，在培养基另一侧表面划线，再次灼烧接种环。
④盖上盖子，37℃恒温培养48h。
3.手上细菌的分布：采用涂抹法。
取1个无菌普通琼脂平板培养基，在皿底将其平均分为3个部分。
①用手指在第一个区域内轻轻压涂两下；②用自来水简单冲洗手，在第二个区域内轻轻压涂两下；③用碘液将手指消毒，风干后在第三个区域内轻轻压涂两下。
④盖上盖子，37℃恒温培养48h。
4.咽喉部细菌的分布：取1个血平板，近皿咳嗽4-6次，确保有飞沫进入培养皿。
盖上盖子，37℃恒温培养48h。
六、实验结果及分析。
医学微生物学实验报告
医学微生物学实验报告（本科）实验室：姓名：学号：班级：海南医学院微生物学与免疫学教研室编写二OO四年四月第一次实验【实验内容】实验一微生物的形态与结构的观察实验二微生物的分布【结果记录及判定】实验一微生物的形态与结构的观察1、细菌正常形态及特殊结构的观察及记录（示教）：绘图并描述形状：形状：排列：排列：染色性：特殊结构：霍乱弧菌破伤风梭菌芽胞形状：形状：排列：排列：特殊结构：特殊结构：肺炎链球菌荚膜伤寒沙门菌鞭毛形状：形状：排列：排列：特殊结构：特殊结构：炭疽杆菌脑膜炎球菌2、病毒包涵体观察及记录（示教）：绘图并描述描述：狂犬病毒包涵体（H-E染色）3、真菌的形态观察及记录（示教）：绘图并描述形状：形状：排列：排列：特殊结构：特殊结构：白假丝酵母菌皮肤癣菌4、革兰染色法结果观察及记录：绘图并描述形状：形状：排列：排列：染色性：染色性：葡萄球菌大肠埃希菌实验二微生物的分布结果记录：1、空气中的细菌种类（种）：数量（个）：2、水中细菌数检测（1）自来水中细菌的种类（种）：数量（个）：（2）污水中细菌的种类（种）：数量（个）：3、物品和手指上的细菌检查（记录本人结果）物品表面的细菌种类（种）：数量（个）：手指表面的细菌种类（种）：数量（个）：结论：成绩：_________________批改教师签名：____________批改时间：________________第二次实验【实验内容】实验三微生物的分离培养实验四抗菌药物敏感性试验实验五消毒、灭菌、除菌【结果记录及判定】实验三微生物的培养1、细菌分离培养方法（分区划线接种法），生长现象为：2、纯种细菌接种技术（1）琼脂斜面接种培养，大肠埃希菌生长现象：（2）液体培养基接种法，大肠埃希菌生长现象：（3）半固体培养基接种技术①标本名称：大肠埃希菌半固体培养基②标本名称：痢疾志贺菌半固体培养基穿刺线：穿刺线：培养基：培养基：结论：结论：3、沙保弱琼脂平板上的真菌菌落观察及描述（示教）：类酵母型菌落：丝状菌落：实验四抗菌药物敏感性试验实验五消毒、灭菌、除菌一、紫外线灭菌法（示教）玻璃盖遮住平板的一半现象：现象：分析：分析：二、机械除菌法（示教）：1、未经过滤的液体培养基培养后的现象：2、经过过滤的液体培养基培养后的现象：分析：成绩：_________________批改教师签名：____________第三次实验【实验内容】实验六细菌的致病性实验七化脓性感染的细菌学检查【结果记录及分析】实验六细菌的致病性一、透明质酸酶试验（示教，实验动物：家兔）测量试验侧与对照测的黑墨水扩散范围（cm×cm）：实验侧：对照侧：分析：二、破伤风外毒素的毒素作用（实验动物：小鼠）实验现象：实验侧：对照侧：分析：实验七化脓性感染的细菌学检查一、病原性球菌的形态观察（示教）：绘图并描述形状：形状：排列：排列：染色性：染色性：葡萄球菌链球菌形状：形状：排列：排列：染色性：染色性：脑膜炎奈瑟菌淋病奈瑟菌二、病原性球菌的鉴别：三、血清学试验抗“O”试验（乳胶凝集法）实验现象：阳性对照：阴性对照：标本1：标本2：结果判定：标本1为________，标本2为_________。
医学微生物学实验
（2）伤寒杆菌
生物学特性: G镜下为杆状,有菌毛，除个 别外都有周鞭毛，一般无荚 膜，均无芽孢。 兼性厌氧，营养要求不高, 不发酵乳糖或者蔗糖，对葡 萄糖，麦芽糖，甘露糖发酵， 产酸不产气，其他沙门菌产 酸产气，可在普通琼脂培养 基上生长 最适宜温度为37度,最适宜 pH为7.4
菌落特点: 圆形,凸起,无色，细小，半透明,表面光滑, 湿润,直径2-3mm.
紫外线对细菌的影响 取一个平皿，用密涂法将细菌涂布于培养 皿中，然后按图所示揭开平皿盖，臵于紫外线 下照射30分钟，然后盖好盖子，臵37℃培养 24h后取出观察结果。
1.2.2化学消毒剂对细菌的影响
1 促进菌体蛋白质变性或凝固。
2 干扰细菌酶系统和代谢。 3 损伤细菌的细胞膜，影响细菌的化学组成，物理 结构和生理活动，从而发挥防腐、消毒至灭菌作用。
方法： （每4个人一组，两支鲎试剂，一支实验一支对照） 1.取两支鲎试剂打开，分别加入0.1ml 鲎试剂 溶解水，使之溶解 2.其中一支加入0.1ml内毒素，标记上实验组， 另一支加入0.1ml溶解水，作为对照 3.垂直放入37℃温箱，20--30分钟观察结果 结果： 实验组出现凝固，对照组不出现凝固
⊕
-
痢疾杆菌
伤寒杆菌
-/+
分离培养方法
将粪便标本以分区划线法接种到SS培养基。 (每个实验室8个平板） (接种好后，做好标记，用胶布按班绑好) 放入37℃温箱中培养24小时。取出放4℃冰 箱中保存备用。
三、消毒灭菌（2学时）
1. 细菌在Байду номын сангаас然界的分布及理化因素 对细菌的影响
2. 高压蒸汽灭菌法
医学微生物学重点知识总结
医学微生物学重点总结总结性重点：1.引起食物中毒的细菌有哪些2.引起败血症的细菌有哪些3.革兰氏阳性菌及革兰氏阴性菌总结4.重要的细菌，按照革兰氏染色分类，并列明细菌需要记忆的重点。
6．与口腔相关的厌氧菌：【1】脆弱类【2】放线菌1. 生物的概念：微生物是一类存在于自然界中，体型微小、结构简单、肉眼难见，而需要借助光学乃至电子显微镜放大成千上万倍才能观察到的微小生物。
3.微生物与人类的关系:总结：绝大多数微生物对人类和动物、植物有益，少数引起人类和动物植物病害。
微生物对人类的益处：1.营养作用：产生人类必须的一些营养物质，如VitK2.生物拮抗：人体正常菌群占据人类表皮和黏膜，使得致病菌难以粘附3.免疫作用：正常菌群的存在是维持人类免疫力的基础4.抗衰老作用：乳酸杆菌等在胃肠道的大量存在与长寿有明显对应性。
**科赫法则：1. 特殊病原菌应在同一疾病中查见，而健康人中不存在2. 该特殊致病菌能被分离培养得到纯种3. 该纯培养物接种至易感动物能产生同样疾病4．人工感染的实验动物中能重新分离出该致病菌纯培养。
第一章细菌的形态与结构***细菌的定义：广义：泛指各类原核细胞型微生物，包括细菌、放线菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体。
狭义：专指其中数量最大、种类最多，具有典型代表性的细菌。
***对细菌的形态观察时机：选择：适宜生长条件下的对数生长期原因：细菌在不利不环境或者衰老时产生形状多形性，亦称衰退型。
1.微生物根据其形态结构组成的差异分为几大类？各有何特点？三类，分别是球菌、杆菌、螺形菌。
补充：【1】肽聚糖组成区别4.L型细菌的特点及医学意义。
【1】由来：当某些因素（如溶菌酶、青霉素等）破坏或抑制了肽聚糖的合成使细菌细胞壁发生部分或完全缺损，在高渗环境下仍可存活而成为细胞壁缺陷型细菌。
因首先在Lister研究所发现，故称L型细菌。
【2】分类：原生质体：G+菌细胞壁几乎完全缺失，仅剩一层细胞膜原生质球：G-菌因有外膜保护，且胞内渗透压较低，对低渗环境仍有一定抵抗力【2】特性：1.产生因素：青霉素、溶菌酶、胆汁、抗体、补体等2.形态：大小不一，高度多形性，革兰氏染色为阴性3.培养特性：高渗低琼脂培养基，营养要求高，生长缓慢，荷包蛋样菌落4.致病性：引发慢性感染【3】医学意义：1.L型细菌在体内、外均能形成，尤其在使用于细胞壁的药物治疗过程中反复出现，某些L型细菌仍有致病力，可引起尿路感染、骨髓炎、心内膜炎等疾病；2.在进行常规细菌学检查时，L型细菌往往被漏检而造成病原菌感染的漏诊。
医学微生物实验报告
医学微生物实验报告引言：微生物是一类以细胞为基本单位的生物体，包括细菌、真菌、病毒等，在医学领域具有重要的研究与应用价值。
本实验旨在通过对微生物的分离、鉴定及对其功能的评估，了解微生物在医学领域中的重要性。
实验方法：1. 细菌和真菌的分离与培养我们通过从患者样本中采集细菌和真菌，并将其接种于不同的培养基中。
培养基的选择根据不同的微生物需求进行，如营养琼脂平板、血琼脂平板、丙酮酸琼脂平板等。
然后将培养皿放置在适宜的温度和氧气条件下进行培养。
2. 微生物的鉴定与鉴定方法通过观察微生物的形态特征、生长特性以及进行生化试验等，我们可以对其进行初步鉴定。
进一步，可以使用分子生物学的方法，如PCR、测序等，对微生物进行准确的鉴定。
还可以利用培养物对微生物进行进一步的药敏试验，以确定其对不同抗生素的敏感性。
3. 微生物在医学中的应用微生物在医学中具有广泛的应用。
例如，在感染病的诊断中，微生物的鉴定对于选择合适的抗生素非常重要。
此外，微生物还可以应用于生物制药工业，如利用细菌生产抗生素、利用真菌生产泌尿生殖系统药物等。
微生物还可以应用于食品工业，如利用益生菌制造发酵食品。
实验结果：在我们的实验中，我们成功分离了多种不同的细菌和真菌。
通过观察它们的形态特征，我们发现它们具有不同的形状、颜色和大小。
通过进行生化试验，我们确定了它们的一些特性，如氧化酶、内切酶等。
在进一步的鉴定中，我们使用了PCR技术，并与数据库中的标准菌株进行比对，以确保鉴定的准确性。
讨论：微生物的鉴定对于诊断和治疗感染病非常重要。
通过对已知的微生物菌株进行鉴定，我们可以提前做出合适的治疗方案，从而避免病情的进一步恶化。
同时，对微生物的鉴定也有助于预防疾病的传播，提高公共卫生水平。
此外，在医学领域以外，微生物还有其他的应用价值。
例如，微生物在生物制药工业中的应用，可以大大提高抗生素等药物的生产效率，从而满足人们对于药物的需求。
微生物还可以应用于环境保护中，如通过微生物的降解能力来处理废水和废弃物，减少对环境的污染。
医学微生物学实验三
• 盖上平板的盖子，做好标记，放置培养箱内孵育16~18h。
• 下次实验课找到自己的药敏结果，量取抑菌环直径，根据 CLSI（clinical and laboratory standards institute ）标准， 报告细菌对该抗生素敏感(susceptible,S)、耐药(resistant,R) 、中介(intermediate,I)。
MIC：在与微生物生长速率有关的特定时间 间隔内，通常是18－24小时，能够抑制被测菌生 长的最低药物浓度。
抑菌环
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ药物效果越好，抑菌环直径越大；效果越差，抑菌环直径越小。
操作方法
• 无菌挑取孵育16～24h的血平板上4个菌落,沿4个方向均匀抹 无菌M-H琼脂表面，使菌液均匀分布，最后再取一个菌落沿 平板内缘环形涂抹均匀。
直接
涂片镜检 （革兰染色）
接种 血琼脂平板
菌落观察
血浆凝固酶试验
革兰染色
药敏试验 诊断报告
一、脓汁标本中化脓性球菌的鉴定
直接涂片镜检
• 取标本直接涂片，均匀涂成菌膜，自然干 燥，固定后革兰染色，油镜观察。
金黄色葡萄球菌
革兰染色镜检
─────────
形态
排列 染色性
乙型溶血性链球菌
细菌分离培养
• 取一号和二号脓标本，分别接种于血琼脂 平板上，划线分离，37℃培养18~24h后， 观察菌落特征，取单个菌落进行再次革兰 染色镜检。
– 保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏 – 抵抗吞噬细胞的吞噬和消化 – 使感染局限化和形成血栓
游离血浆凝固酶
微生物实验知识点
微生物实验知识点微生物实验是指对微生物进行观察、培养、检测及相关实验操作的科学研究方法。
下面是一些关于微生物实验的知识点：1.实验室安全：进行微生物实验时，必须遵守实验室的安全规范，包括佩戴实验手套、口罩和实验服。
同时，实验室的环境要定期消毒，以防止微生物的交叉污染。
2.微生物培养基：微生物实验常用的培养基有固体培养基和液体培养基。
固体培养基可以用于分离纯培养和观察菌落形态，而液体培养基常用于大规模培养微生物。
3.纯培养与混合培养：纯培养是指从一种微生物中分离出单一的菌株进行培养，得到纯净的培养物；混合培养是指将两种或多种微生物一起培养，观察它们之间的相互作用。
纯培养和混合培养的选择取决于实验的目的和研究内容。
4.微生物的分离与鉴定：微生物实验常用的分离方法包括涂布法、稀释法和过筛方法。
通过形态特征观察、生理生化测试、分子生物学技术等方法，可以鉴定微生物的种属和菌株。
5.微生物生长曲线：微生物生长曲线是研究微生物生长动力学的重要实验方法，通过连续测量微生物的生物量、代谢产物或生长速率，可以得到微生物在一定条件下的生长曲线，以了解微生物的生长特性。
6.抗菌药物敏感性试验：抗菌药物敏感性试验是评价微生物对不同抗菌药物的敏感性和抗性的实验方法。
通过测定微生物对抗菌药物的最小抑菌浓度（MIC）或抑菌圈直径，可以判断微生物对抗菌药物的敏感程度。
7.酶活性检测：微生物实验中常用酶活性检测来评估微生物酶的产生与活性。
通过观察酶的底物转化情况、染色反应、电泳分析等方法，可以确定微生物是否具有特定酶的活性。
8.微生物的遗传转化：遗传转化是指微生物通过吸收外源性的遗传物质，如质粒DNA或线性DNA片段，加入到自身的遗传物质中。
通过转化实验可以在微生物中引入外源基因、观察基因的表达和相关功能的变化，进一步研究微生物基因的功能。
这些知识点涵盖了微生物实验的基本概念、常用实验方法和技术应用，希望对你有帮助！。
医学微生物学实验报告
医学微生物学实验报告医学微生物学实验报告引言：微生物是一类无法看见的微小生物体，它们存在于我们周围的环境中，包括我们自己的身体内。
微生物在医学领域中起着重要的作用，既可以是疾病的致病因子，也可以是药物的生产者。
本实验旨在通过实验方法和观察结果，探索微生物在医学领域中的应用。
实验一：细菌培养和鉴定在实验室中，我们首先收集了一些样本，包括空气、水、土壤和人体表面的皮肤。
然后，我们将这些样本分别接种在不同的培养基上，培养一段时间后观察结果。
结果显示，空气中存在大量的微生物，其中细菌是最常见的。
而水中的微生物数量相对较少，主要是一些单细胞的微生物。
土壤样本中的微生物种类丰富，包括细菌、真菌和寄生虫。
人体表面的皮肤样本中的微生物主要是细菌，这些细菌通常是人体的正常微生物群落的一部分。
通过鉴定这些细菌，我们发现了一些常见的致病菌，如大肠杆菌和金黄色葡萄球菌。
这些细菌在人体中可能引发感染和疾病。
另一方面，我们也发现了一些有益的细菌，如乳酸菌和酵母菌。
这些细菌被广泛应用于食品加工和制药工业中。
实验二：药敏试验药敏试验是一种常用的方法，用于评估细菌对不同抗生素的敏感性。
在本实验中，我们选择了几种常用的抗生素，并将它们分别加入到含有细菌的培养基中。
然后观察细菌在不同抗生素浓度下的生长情况。
结果显示，不同细菌对抗生素的敏感性有所不同。
有些细菌对某种抗生素高度敏感，而对另一种抗生素则不敏感。
这表明了不同抗生素对不同细菌的杀菌效果不同。
药敏试验的结果可以帮助医生选择合适的抗生素治疗感染病例，以提高治疗效果。
实验三：微生物的环境适应能力微生物具有很强的环境适应能力，可以在各种极端条件下生存和繁殖。
在本实验中，我们将细菌分别暴露在高温、低温、酸性和碱性环境中，观察其生长情况。
结果显示，有些细菌对高温和低温环境具有较高的耐受性，而对酸性和碱性环境则较为敏感。
这可能是因为细菌在不同环境下具有不同的生理和代谢特性。
了解细菌的环境适应能力有助于我们预测和控制细菌在不同环境中的生长和传播。
医学微生物实验二(新)
实验要求
实验前认真预习实验内容， 了解实验目的、原理和方 法。
按照实验步骤进行操作， 认真观察实验现象，记录 实验数据。
严格遵守实验室规章制度， 保持实验室卫生和安全。
实验结束后，整理实验器 材和试剂，撰写实验报告。
02
实验原理
微生物的形态与结构
微生物培养
将采集的样本接种在适宜的培养基 上，控制温度和湿度等培养条件， 观察微生物的生长情况。
显微镜检查
使用显微镜观察微生物的形态、染色 反应等特征，进行初步的微生物鉴定 。
生化实验
进行必要的生化实验，如糖发酵实 验、酶活性测定等，进一步确定微 生物的种类。
结果记录与分析
详细记录实验结果，包括微生物的 形态特征、生化反应等，进行分析 和总结。
微生物的繁殖方式
微生物的繁殖方式有分裂繁殖、孢子 繁殖、出芽繁殖等。了解其繁殖方式 有助于理解微生物种群的增长和变化 规律。
03
实验材料与试剂
实验材料
培养基
用于微生物培养的基质，提供微生物所需的营养物质。
显微镜
观察微生物形态和结构的工具。
实验试剂
01
02
03
04
染色剂
用于给微生物染色，以便更好 地观察其形态和结构。
实验方法
细菌分离培养
采用适当的培养基和培养条件 ，分离纯化样本中的细菌，获
得单一菌落。
染色与镜检
对细菌进行染色处理，通过显 微镜观察其形态、染色反应等 特征，初步鉴定细菌种类。
生化鉴定
利用生化实验方法，对细菌进 行进一步的鉴定和分类。
血清学试验
通过血清学试验方法，检测细 菌的抗原或抗体，以确定细菌
医学微生物学实验
无菌操作技术是微生物学实验中的基本技能之一，包括无菌操作前准备、无菌操作过程和无菌操作后处理三个 环节。无菌操作前应对实验室和仪器进行消毒处理，穿戴专用的实验服和手套，实验过程中应避免直接接触样 品和培养基，使用过的器械应及时清洗和消毒。
细菌染色技术
总结词
了解细菌染色的原理和方法，掌握常用的细菌染色技术和应用场景。
详细描述
病毒分离与鉴定技术是医学微生物学实验中 重要的研究方向之一，通过对病毒的分离和 鉴定可以了解病毒的生物学特性和致病机制 ，为疾病的预防和治疗提供科学依据。常用 的病毒分离与鉴定技术包括细胞培养法、动 物接种法、分子生物学方法等，不同的方法
具有不同的优缺点和应用范围。
THANKS
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灭菌方法
采用高压蒸汽灭菌法，将培养基放入高压锅中加热至121℃保持20-30分钟， 以杀灭培养基中的所有微生物。
真菌的分离和纯化
样品采集
从临床样本、环境样本等采集真菌，使用无菌技 术进行操作。
分离方法
将采集的样本接种于真菌培养基上，观察菌落的 形态和颜色等特征，分离出不同的真菌菌落。
纯化方法
采用划线分离法或稀释分离法，将菌落纯化至单 个菌落，获得纯培养物。
02
通过病毒在特定细胞系或动物模型中的感染、复制和致病特点
，进一步确定病毒的种类和亚型。
分子生物学鉴定
03
利用病毒基因组的特异性序列，通过PCR、测序等技术对病毒
进行分子水平的鉴定。
病毒的致病性和防治措施
致病性
不同病毒的致病性各不相同，可引起急性或慢性感染，甚至 导致死亡。了解病毒的致病机制有助于预防和治疗。
总结词
细菌学检查是通过培养、分离、鉴定病原体，为临床诊断和 治疗提供依据。
医学微生物学实验
contents
目录
实验准备基础实验高级实验临床应用实验数据分析与报告
01
实验准备
1
实验材料准备
2
3
根据实验需求，准备适宜的培养基，如普通培养基、特殊培养基等。
培养基
根据实验需要，准备相应的试剂和抗体，如细胞因子、抗体、血清等。
试剂和抗体
根据实验需要，准备适宜的实验动物，如小鼠、大鼠、豚鼠等。
根据不同微生物的特性，制备适合的培养基以支持其生长。
培养基制备
临床样品处理
感染性疾病的诊断
微生物培养
将临床样品接种到特定培养基上，观察微生物的生长情况，包括菌落形态、颜色等。
对临床分离的微生物进行耐药性筛选，了解其对不同抗生素的敏感性或耐药性。
耐药性筛选
通过分子生物学技术，监测耐药基因的存在和传播情况，为临床治疗提供参考。
结果与讨论
将实验结果以图文并茂的形式展示出来，对结果进行深入分析和讨论，为后续研究和应用提供参考。
参考文献
引用相关的参考文献，确保实验报告的完整性和可信度。
实验方法
详细描述实验设计、样品处理、实验操作和数据分析过程，确保实验报告的可靠性和可重复性。
实验报告的撰写
THANK YOU.
谢谢您的观看
实验动物
准备各种类型的显微镜，如倒置显微镜、荧光显微镜等。
显微镜
准备适宜的培养箱，如二氧化碳培养箱、细胞培养箱等。
培养箱
根据实验需要，准备相应的检测仪器，如酶标仪、荧光分光光度计等。
检测仪器
实验仪器准备
03
数据记录与分析
及时记录实验数据并进行统计分析，以便更好地解释实验结果。
实验操作规范
01
医学微生物学实验
特殊染色技术
采用特殊染色技术对微生物进行染 色，以便更清晰地观察其形态特征， 如革兰氏染色、抗酸染色等。
微生物生理生化分析
糖发酵试验
利用不同糖类进行发酵试验，观察微生物是否能分解糖类并产生 酸性或碱性产物，以鉴别微生物的种类。
讨论
在解释结果的基础上，对实验结果进行深入的讨论。探讨实验结果的意义、影响和局限性，以及可能的改进方向。 同时，需要与其他相关研究进行比较和分析，以得出更全面的结论。
实验改进与展望
实验改进
根据实验结果和讨论，对实验过程和方法进行反思和改进。优化实验方案、提高实验效率、减少误差 等，以提高实验的可靠性和可重复性。
氧化酶试验
通过检测微生物细胞膜上的氧化酶活性，判断其对氧气的耐受程度， 有助于鉴别细菌和真菌。
触酶试验
通过检测微生物细胞内的过氧化氢酶活性，判断其对过氧化氢的分 解能力，有助于鉴别细菌和真菌。
微生物遗传学分析
基因测序
通过对微生物的基因组进行测序，比对已知 基因序列数据库，确定微生物的种属和亚种 分类。
图表制作
通过图表的方式呈现数据，如柱状图、 折线图和饼图等，可以直观地展示数 据的变化趋势和差异。图表制作需注 意选择合适的图表类型和格式，使数 据更加清晰易懂。
结果解释与讨论
结果解释
根据实验数据，对实验结果进行解释。分析实验组和对照组之间的差异，探究可能的原因和机制。同时，需要结 合理论知识，对实验结果进行科学的解释。
医学微生物学实验
目录
CONTENTS
• 实验准备 • 实验操作 • 实验结果分析 • 实验总结与讨论 • 参考文献
医学微生物实验报告
医学微生物实验报告医学微生物实验报告引言：微生物在医学领域中扮演着重要的角色。
通过对微生物的研究和实验，我们可以更好地了解它们对人类健康的影响，并开发出更有效的治疗方法。
本实验旨在探究不同微生物对人体的影响，并评估它们在医学上的应用潜力。
实验设计：为了达到实验目的，我们选择了三种常见的微生物进行研究，分别是大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和真菌。
在实验中，我们使用了不同的培养基和条件来培养这些微生物，并观察它们的生长情况和对人体细胞的影响。
实验结果：1. 大肠杆菌：大肠杆菌是一种常见的肠道细菌，它在人体内起着重要的消化和代谢作用。
在我们的实验中，我们发现大肠杆菌在富含营养的培养基中迅速繁殖，并形成典型的菌落。
然而，当大肠杆菌暴露在抗生素中时，它们的生长受到抑制。
这表明抗生素可以用于治疗由大肠杆菌引起的感染。
2. 金黄色葡萄球菌：金黄色葡萄球菌是一种常见的细菌，它可以引起多种感染，包括皮肤感染和呼吸道感染。
在实验中，我们观察到金黄色葡萄球菌在富含葡萄糖的培养基中迅速生长，并产生黄色的色素。
这种色素对人体组织有一定的毒性，可以导致感染的扩散和病情恶化。
因此，对于金黄色葡萄球菌感染，我们需要及时采取适当的抗生素治疗。
3. 真菌：真菌是一类常见的微生物，包括酵母菌和霉菌等。
在实验中，我们发现真菌在富含糖和潮湿环境的培养基中生长迅速。
真菌感染常见于皮肤、口腔和阴道等部位，对人体健康造成一定的威胁。
抗真菌药物可以有效治疗真菌感染，并防止其扩散到其他部位。
讨论与结论：通过本实验，我们得出了以下结论：1. 大肠杆菌在适宜的环境下可以迅速繁殖，但受到抗生素的抑制。
2. 金黄色葡萄球菌在富含葡萄糖的培养基中生长迅速，并产生有毒的黄色色素。
3. 真菌在富含糖和潮湿环境的培养基中生长迅速，常引起皮肤和黏膜感染。
综上所述，微生物对人体健康有着重要的影响。
通过对微生物的研究和实验，我们可以更好地了解它们的生长特性和对人体的影响，从而开发出更有效的治疗方法。
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1)大肠杆菌发酵乳糖和葡萄糖产酸产气（糖发酵试验） ，是斜面及底层均呈黄色并有气泡。
2) 沙门菌和志贺菌只发酵葡萄糖，不发酵乳糖，分解 葡萄糖产的酸使培养基pH下降，酚红指示剂变黄，但 是培养基中的葡萄糖仅有0.1%，在斜面的酸性物质被 氧化成挥发性酸，且细菌氧化氨基酸物质产生的氨的 中和作用，使斜面变红，而底层则为黄色。
❖ 原理：
当颗粒性抗原与其相应的抗体特异结合时，在电 解质存在下，两者比例合适时，可出现凝集颗粒 ，此现象称凝集反应。
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
❖ 试剂与器材
➢ 沙门氏菌属A—E群多价O血清， ➢ SS平板上菌落， ➢ 玻片、消毒缸、酒精灯，记号笔等。
❖ 方法
1.取清洁玻片一张，用记号笔划分成两部分。用移液枪分别在两边加 沙门氏菌属A-E群多价O血清8微升。
泡，用“ ”表示。 4、不发酵糖类，培养基仍为紫色，小管内无气泡，以“-”
表示。
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糖 发 酵 试 验
大肠杆菌 伤寒杆菌 副伤寒杆菌
葡萄糖
+
乳糖
-
-
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硫化氢产生试验
❖ [原理]
某些细菌能分解蛋白质中的含硫氨基酸，如半胱氨酸、 甲硫氨酸，而生成硫化氢。硫化氢遇培养基中的铅盐 或铁盐，形成黑色的硫化铅或硫化亚铁沉淀物。
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[方法]
取糖发酵管培养基，此时培养基应呈澄清、紫色，倒 立小管内无气泡，接种细菌后置37℃温箱培养18－24小 时，观察结果。
[结果]
1、确定细菌是否生长 2、产酸，则培养基指示剂（溴甲酚紫）变为黄色，以“+”
表示。 3、产酸又产气，则培养基除变黄外，在倒置的小管中有气
生 化
碳源和氮源 利用试验
反
IMViC试验
枸橼酸盐利用试验
应 蛋白质和氨基
吲哚试验
酸代谢试验
硫化氢试验
各种酶类试验
抑菌试验
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糖发酵试验
❖ [原理]
根据细菌分解利用糖能力的差异表现出是否产酸产气 作为鉴定菌种的依据。是否产酸，可在糖发酵培养基 中加入指示剂溴甲酚紫（即B.C.P指示剂，其pH在5.2 以下呈黄色，pH在6.8以上呈紫色），经培养后根据 指示剂的颜色变化来判断。是否产气，可在发酵培养 基中放入倒置杜氏小管观察。
大肠杆菌 痢疾杆菌 伤寒杆菌
SS平板 粉红色大菌落 无色细小 半透明菌落 无色细小 半透明菌落
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
（2） 双糖铁培养基接种
双糖铁培养基成分 含有乳糖和葡萄糖：产酸产气
含有硫酸亚铁：如细菌分解含硫氨基酸生成 硫化氢，可形成黑色沉淀
酚红指示剂： 酸：黄 碱：处，请联系改正。
注意！
❖ 本次实验部分涉及生物危险(粪便 中致病微生物)，请谨慎操作(无菌操作 )！
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内容提要
一 肠道杆菌的鉴定（2学时） 革兰染色（1片/人），双糖铁培养
基接种（8支/室），玻片凝集试验 （1片/人） 二 药敏试验（0.5学时）
2.无菌操作下用接种环分别取少许SS平板上菌落（黑色或无色菌落， 以及粉红色大菌落）与血清混合成均匀乳状(注意：取菌量不宜过多 ，使悬液呈轻度乳浊即可)。
3.轻轻摇动玻片，经1-2min后观察结果。
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结果观察
液体变清，并有乳白色凝集块出现者为阳性。 液体仍然混浊，无凝集块出现者为阴性。 如待检菌与沙门氏菌属A-E群多价O血清发生凝 集，则该菌为沙门氏菌属。
征
分析鉴定
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1.细菌的生化反应 ❖ 概念：用生化的方法来检测细菌对各种基质的
代谢作用及代谢产物，借以鉴别细菌种类，这 种生化试验称为细菌的生化反应试验。 ❖ 意义：是鉴别细菌的重要依据。
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糖发酵试验
碳水化合物 代谢试验
甲基红试验 V-P试验
介绍及展示示教平板 三 抗酸染色（2.5学时）
示教，1片/人
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一 肠道杆菌的鉴定（2学时）
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采集标本
增菌培养
分离培养
革兰染色
病
原 革兰染色
接种琼脂斜面纯培养
菌
的 检 验 程 序
观 察 菌 落 特
生 化 试 验
血 清 学 试 验
动 物 试 验
2.肠道杆菌的鉴定
实验目的： 熟悉病原性杆菌的一般鉴定过程
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肠道杆菌的鉴定程序
粪 便→增菌培养（必要时）
↓ SS 培养基
已完成
↓
革兰染色 双糖铁培养基┒
↓
↓
生化反应
血清学鉴定←┛
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（1）观察SS平板上菌落特点
大肠杆菌在SS平板上的菌落特点； 伤寒杆菌在SS平板上的菌落特点；
（3）革兰染色方法与步骤
1、细菌涂片的制备
涂片
干燥
固定
2、染色
初染（结晶紫） 1min 媒染（卢戈氏碘液）1min
冲洗
冲洗
脱色
30s
（95%乙醇）
冲洗
吸干
复染（稀释石碳酸复红） 30s
冲洗
吸水纸
染色完成之后，在涂片区滴上香柏油使用油镜观察实验结果
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（4）伤寒杆菌玻片凝集试验
❖ 注意事项：
注意涂菌时，标明菌落，以免混淆产生错误结 果。
记录结果之后，将玻片放入含消毒液的指定容 器内，切勿任意放置或冲洗。
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（5）结果判断
❖ SS平板：菌落的形态，颜色； ❖ 双糖铁培养基上生化特点； ❖ 革兰染色：形态，排列，染色特点；
❖ [方法]
分别穿刺接种大肠杆菌、伤寒杆菌至两管双糖铁培养 基中。37℃孵育24小时后观察结果。
[结果]
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沿穿刺线部位呈黑褐色，
表明有硫化氢产生，为阳性以
H2S 试验
“+”表示，
不变色者为阴性，以“-”表示。
大肠杆菌：-
伤寒杆菌：+
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
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双糖铁培养基接种方法
将可疑菌落接种于双糖铁培养基上（穿 刺+斜面 ），37度培养24小时，第二天观察结 果。
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双糖铁培养基上各菌的生长现象
大肠杆菌 伤寒杆菌 福氏痢疾杆菌
黄色有气泡 上红下黄中间有黑色沉淀
上红下黄
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