2012 药物半数致死量(有效量)测定解析

如增加记录起效和维持时间，翻正反射消失的深度 可获得对量效关系和个体差异的更深刻认识。
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【注意事项】
1. 本实验为定量药物效价测定，要求较高的 精确性，在实验过程中要求实验者做到尽可 能的精确程度。 2. 为了减少误差，需严格控制除药物剂量外 的所有非处理因素，如最好由一人给药。 3. 动物种类、体重范围、给药途径、实验观 察时间等因素对ＬＤ50及ＥＤ50的测定结果 都有影响，在报告结果时都应加以注明。

治疗指数与安全范围

一般而言，治疗指数(TI)是表示药物安全性的 指标。该数值越大，表明有效剂量与致死剂 量 (或中毒剂量)间距离愈大，愈安全，但只 适用于治疗效应和致死效应的量效曲线相互 平行的药物，对于两种量效曲线不平行(斜率 不同)的药物，还应参考安全范围（margin of safety，MS），即ED95与LD5之间的距离或 安全指数SI(SI= LD5／ED95)来评价药物的安 全性。
最 小 有 效 量 最 小 中 毒 量
无效量
常 用 量
中 毒 量
致 死 量
量效关系与相关概念的示意图
剂 量
无效量
最 小 有 效 量
常用量
最 小 极 中 量 毒 量
中 毒 量
致 死 量
无效
治疗作用
效 应
安全范围
毒 性 作 用
死亡
质反应量效关系曲线
100 80 60
40 20 0
思考：何意？何用？ 1 . LD50 /ED50的本质 2 . 治疗指数（TI）= LD50 /ED50
质反应量效关系曲线与 药物安全性的评价
质反应实验中，以对数剂量为横坐标、反应百分率为纵坐标 绘图，形成一条对称的“S”形曲线。 半数有效量（ED50）：50％的实验动物有效时对应的剂量。 半数致死量（LD50）：50％的实验动物死亡时对应的剂量。 药物安全性的评价 治疗指数（TI）= LD50/ED50 安全系数（SF）＝ LD5/ED95 可靠安全系数（CSF）＝ LD1/ED99 三者数值大，说明药物安全性好。
分组及给药


取小鼠50只（ 18～22克 ）， 雌雄各半， 不同性别动物按体重随机分成五组。每组 各动物称重，标记后分别按设计的容积和 浓度腹腔注射给药。ＬＤ50（或ＥＤ50 ）测 定时是否要设对照组，应视药物性质等情 况而定。 必须注意：正式实验如单人操作时宜从浓 度偏高的剂量组开始给药！起效快和对后 续实验有重要提示作用。思考！
质反应量效关系曲线

曲线中实验动物数有50％出现阳性结果 （反应）所需的剂量，如以死亡为指标称 为半数致死量，如以某种效应的有或无则 为半数有效量（50％Effective dose，ＥＤ 50）表示。 ＬＤ50 /ＥＤ50为半数致死量与半数有效量 的比值（倍数）称为治疗指数（therapeutic index，TI）。
实验的观察指标：


ＬＤ50：规定的观察时间内记录动物的死亡 数为指标，记录并统计动物的死亡率。 ＥＤ50：以翻正反射消失作为判断动物睡眠 的指标。把受试小白鼠轻轻地置于仰卧位， 如果在半分钟内不能翻正，即认为小白鼠处 于睡眠状态。记录并统计动物睡眠发生率。
【实验试剂与器材】


小鼠罩 重量称 注射器（1.0ml）及针头 戊巴比妥钠 苦味酸（标记动物号用）
药物半数致死量（有效量）测定
Determination of 50% lethal (effective) dose of sodium pentobarbital
中山大学 中山医学院
林明栋
【实验目的】

应用随机、重复、对照的实验设计原则， 进行设计及测定药物的质反应的量效关系。 掌握测定药物半数有效量（ＥＤ50）和/或 半数致死量（ＬＤ50）的方法、原理、实 验步骤、计算过程及意义 。 测出药物的ＥＤ50或ＬＤ50及相关参数， 认识生物个体差异及评价急性毒性大小的 方法。
反应百分率
ED50
LD50
剂量
质反应的量效曲线
100
number responding
cumulative frequency distribution
50
Leabharlann Baidu
frequency distribution
0
5
10 8 concentration (mg/L)
20
Fig.2-3 The frequency curve and cumulative frequency curve of a drug action in a quantal-effect experiment.
【实验方法与步骤】




预试：目的是找到0％（Ｄmin）和100％（Ｄmax） 死亡的大致剂量范围。给药量：0.2ml/10g体重。 正式实验：在此剂量范围内安排５～６个对数剂 量实验组，便于用对数剂量对死亡数百分率作图 和计算数据。 本实验备有：50, 40 ,32, 25.6 ,20.5,16.4 五个剂量 组(组间公比=0.8)；昆明小鼠120只雌雄各半。 每个同学做4～5个连续的浓度，每浓度一只小鼠。 实施：规范操作，观察计时； 分工合作，统一计算
预实验结果

40mg/kg 组：(0.2 ml/10g )腹腔注射给药

5～15分钟内，出现翻正反射消失(睡眠)；
实验分组、记录和统计
不同剂量戊巴比妥钠对小鼠睡眠的影响
剂量 （mg/kg） 50 40 32 25.6 21.8 实验鼠数 睡眠鼠数 反应百分率 ED50 （％） （mg/kg）
10 10 10 10 10
观察与记录


记录观察时间内实验动物的症状、死亡 （或有效）时间。 整个实验应记录的事项： 日期、药物名称、 批号及制药单位、配药的溶剂、药液浓度、 给药途径、给药容积及给药剂量、动物名 称、性别及体重、实验时室温、给药时间、 中毒症状及出现的时间、死亡表现及时间、 各组死亡率、计算所得的ＬＤ50 （或ＥＤ 50 ）。


【实验要求】
1、掌握小白鼠半数致死量或半数有效量 测定的基本方法。
2、熟悉动物实验常用的随机分组和实验 方法。 3、掌握Bliss 法等半数致死量或半数有 效量的计算方法。
【实验原理】
半数致死量（50％Lethal dose，简写为ＬＤ50） 是指能够导致50%实验对象死亡的药物剂量。 戊巴比妥钠为镇静催眠药，随着剂量加大，相 继出现镇静、催眠、抗惊厥、麻醉、死亡。