安捷伦确认方案精编WORD版

安捷伦确认方案精编W O R D版IBM system office room 【A0816H-A0912AAAHH-GX8Q8-GNTHHJ8】检验仪器确认方案仪器名称：高效液相色谱仪仪器型号：Agilent 1260仪器编号：方案编号：QF/YA-FA-2011-312江西青峰药业有限公司编制目录确认方案审批 (2)确认小组成员与确认计划 (3)确认方案 (4)1．概述 (4)2．目的 (4)3、确认依据 (4)4、确认使用的主要文件与资料 (4)5、安装确认（IQ） (4)6、运行确认（OQ） (8)7、性能确认（PQ） (8)8、偏差及其处理 (12)9、风险管理 (12)10、确认批准、结果评价与建议 (13)确认方案审批1、确认小组成员2.1 确认方案的培训：2011年10月16日前完成2.2 安装确认及仪器的操作培训：2011年10月16日至2011年10月22日。

2.3 运行确认与性能确认；2011年10月24日至2011年10月30日。

运行确认可在性能确认时一并进行确认。

确认方案1、概述Agilent 1260液相色谱仪是江西青峰药业有限公司用于检测成品、原料、中间产品的检测设备。

该仪器主要由四元梯度泵（内置脱气机）、自动进样器、柱温箱、紫外可变波长检测器、色谱工作站及计算机组成。

由高压输液泵将规定的流动相泵入色谱柱，自动进样器注入供试品，由流动相带入色谱柱内，各组分在色谱柱内被分离，并依次进入检测器，由色谱工作站软件记录和处理色谱信号，从而达到分析目的。

该仪器安装于中心化验室的液相分析室东北角。

为市售非定制的分析仪器，故只进行安装确认、运行确认及性能确认。

并且由于运行确认为仪器安装确认完成后，测试仪器功能是否满足设计要求和用户需求的过程，性能确认考察仪器运行的可靠性，主要运行参数的稳定和结果的重现性，两者较多重复，故运行确认与性能确认一并进行。

2、目的确认安捷伦1260高效液相色谱仪能满足公司产品检验的需求及符合GMP要求；3、确认依据《药品生产质量管理规范》（2010版）、《中国药典》2010年版。

4、确认所需使用的主要文件与资料检查人：年月日5、安装确认5.1 开箱检查检查外包装应完好无损，仪器各部件、配件与供货合同一致，仪器出厂合格证书及使用说明书等技术资料齐全（参照合同清单）检查情况如下：表1 开箱检查结果检查人：年月日审核人：年月日表2 仪器技术资料检查人：年月日表3 设备型号确认检查人： 年月 日 5.2 安装环境确认表4 安装环境确认检查人： 年 月 日5.3 公用设施确认表5 公用设施确认检查人：年月日5.4 计算机配置的确认表6 计算机配置的确认检查人：年月日5.5 仪器组装的确认仪器由厂方技术工程师进行安装，并按厂方标准验收。

安装完后，对安装情况进行检查，操作人员起草仪器操作规程草案。

表7 仪器组装的检查检查人：年月日6、运行确认6.1 运行确认项目与可接受标准7、性能确认7.1 测试项目与可接受标准7.2.1 输液系统泄漏检查将仪器各部分连接好，以100%甲醇为流动相，流量为1.0ml/min，启动仪器，压力平稳后保持10分钟，用干燥的滤纸在各管路连接处检查，应无漏液，泵排液阀出口应无液体漏出。

7.2.2 泵流量设定值误差（S S）与稳定性误差（S R）以水为流动相，将流量分别设定为0.5ml/min（最小流量）、1.0ml/min、2.0ml/min （最大流量），待流量稳定后，用一干燥的已精密称定重量的具塞锥形瓶，在液体出口处接收流出液，同是以秒表(分度值不大于0.1S)计时，至规定时间（接收时间分别为10分钟、5分钟、5分钟），立即停止接收，加塞，精密称定，每一流量重复测试三次，按以下公式计算流量的设定值误差，流量的稳定性误差。

注：测试完后，色谱柱与色谱系统立即用甲醇冲洗、替换。

7.2.3 梯度误差(Gci)将泵和检测器连接，不连接色谱柱，以水为流动相A，0.5%（ml/ml）丙酮溶液为流动相B，按下表设置梯度洗脱程序，检测器波长设为265nm，流量1.0ml/min，以水作为样品，进样20ul，执行梯度，记录色谱图。

（表15）100i G H H i, Gci=（Ci-G ）÷GGi 为单元B 的梯度；Hi 为每步梯度的响应值；100H 为100%流动相B 时的响应值；Gci 为梯度误差；G 为设置的流动相B 的比例7.3 柱温箱的确认选择35℃，45℃进行检定，启动柱温箱，设置柱温为规定值，通电升温，将已校正过的数字温度计或温度巡检仪探头放在柱温箱内，待温度恒定后，读取温度读数，每隔10分钟记录一次温度，共计7次，7次读数的平均值与设定值之差即为温度设定值误差（?T ），7次读数中最大值与最小值之差即为控温稳定性（Tc ）7.4 紫外可变波长检测器7.4.1 波长示值误差取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg ，精密称定，置1000ml 量瓶中，用0.005mol/L 硫酸溶液溶解并稀释至刻度。

将色谱柱与检测器连接管路断开，用注射器吸取水注射检测池，反复冲洗数次，开启仪器，设定检测波长为检定波长低10nm ，加用注射器吸取上述重铬酸钾溶液，注入检测池反复冲洗数，使充满检测池，记录检测器响应值，每10s改变一次波长，每次增加1nm，直至检测波长比检定波长高10nm，记录每次改变波长后的检测器响应值，以响应值最大所对应的波长为仪器波长测定值，以波长设定值为横座标，响应值为纵座标绘制曲线图。

需要检定的波长为：235nm，257nm，313nm与350nm。

例：检定235nm波长，则设置检测器波长为225nm，再以每增加1nm改变波长，记录响应值，至至245nm。

7.4.2 基线噪音和基线漂移选用C18色谱柱，以100%甲醇为流动相，流量为1.0ml/min，检测波长254nm，检测器参数为默认值，启动仪器，待仪器稳定后，记录基线60分钟，以1分钟内基线波动幅度作为基线噪音，60分钟内基丝偏离原点的值作为基线漂移7.5 整机性能测试7.5.1 线性：将仪器各部件连接好，选用C18柱，设定检测波长为254nm，以乙腈-水（65：35）为流动相，流速：1.0ml/min，柱温：30℃。

精密吸取测试用标准溶液（含有0.15%邻苯二甲酸二甲酯、0.15%邻苯二甲酸二乙酯、0.01%联苯和0.03%三联苯的甲醇溶液）1μl、5μl、10μl、20μl、30μl、50μl，分别注入色谱仪记录色谱图，以进样量为横座标，峰面积为纵座标，绘制曲线图，计算4个成分峰的回归方程，其相关系数（r2）均应不小于0.9999。

7.5.2 重复性将仪器各部件连接好，选用C18柱，设定检测波长为254nm，以乙腈-水（65：35）为流动相，流速：1.0ml/min，柱温：30℃。

精密吸取测试用标准溶液（含有0.15%邻苯二甲酸二甲酯、0.15%邻苯二甲酸二乙酯、0.01%联苯和0.03%三联苯的甲醇溶液）10μl，连续进样6次，分别计算4个成分的保留时间与峰面积的平均值、相对标准偏差（RSD）。

Xi为第i次测得的保留时间或峰面积；X为6次测量结果的算术平均值；i为测量序号。

7.5.2 进样残留测试按重复性项下测试条件测试，进样前用流动相充分平衡，精密吸取甲醇、测试用标准溶液、甲醇各10μl，依次注入色谱仪，分别记录色谱图。

计算后一次注入甲醇所得色谱图中的邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二乙酯、联苯和三联苯峰的峰面积，与标准溶液色谱相应峰的峰面积比较，均不得超过对应峰面积的0.01%。

8、偏差及其处理确认如出现偏差或漏项，应按偏差管理程序处理，由质量管理部部长批准。

9、风险管理9.1 风险分析与评估9.1.1 严重性的定义和排列9.1.2 可能性（发生频率）的定义和排列9.1.3 对安装、运行、性能确认逐项进行评估，如确认项目符合预定的接受标准，则其可能性、严重性评分为1。

确认结果不符合可接受标准或有漏项、偏差及其它风险，按“9.1.1”、“9.1.2”的定义，进行评价打分（风险得分=严重性×可能性），如果风险得分为1~4分为低风险，可以不制定下一步措施，如果两者的乘积为6~9分为中、高风险，必须制下一步措施消除或者降低风险后，再进行确认。

9.2 风险管理结论10、确认批准、结果评价与建议批准人：日期：运行确认测试记录评价：测试人：年月日审核人：年月日江西青峰药业有限公司液相色谱仪测试记录文件编码：R-QC-7007-00测试者：复核者：风险评估表评估结论：评估人：年月日审核人：年月日Agilent 1260高效液相色谱仪操作规程（草案）1、仪器系统组成本仪器包括高压输液泵（G1311C）、柱温箱（G1316A）、紫外可变波长检测器（G1314B）、自动进样器（G1329B）及色谱工作站（G2028A）、计算机、打印机组成。

仪器配备有4个溶剂单元，100位样品盘，进样瓶规格为2ml，柱温箱为升温式，柱温设置温度应高于室温。

2、准备2.1 准备所需流动相，用合适的0.45um水膜或者有机膜过滤，超声脱气至无气泡产生。

2.2 根据待检样品的需要更换合适的色谱柱、预柱。

（注意色谱柱方向）2.3 配制标准品溶液和样品，用合适的0.45 um水膜或者有机膜过滤。

2.4 检查各仪器部件的电源线、数据线和输液管道连接是否正确。

3、开机3.1 接通电源，一次开启不间断电源、从上往下打开液相色谱仪各模块前左下方的电源开关，LC各模块进入自检，右上角的指示灯会有不同颜色闪烁几下，最后变成橘黄色显示启动完成；3.2 打开计算机电源，点击<开始>图标，选择<所有程序>\<仪器2 连机>\点击或直击双击\<仪器2 连机>桌面工作站图标，启动工作站。

4、方法设定及确认4.1 方法编辑：在<方法>下拉菜单中选择“编辑完整的方法”，按提示设置检测波长、柱温、进样量、各管路溶剂的比例、流速等一系列参数，确认无误后确认，保存方法。

一般每次分析均应建立不同的方法文件，并将该文件存储在数据文件夹中。

4.2 从化学工作站的方法和运行模块“视图””首选项”中选择添加数据、序列、方法路径；或者“调用方法”（指原来已经编好的，电脑存档），一般是方法存在如E：\HPLC数据\样品名\样品名.M即运行此方法；.M 为方法文件。

4.3 脱机中设定方法：可以从<仪器2 脱机>中设置方法，再从<仪器2 连机>中调用方法即可。

5、平衡系统5.1 更换好预先配置好的流动相，打开排液阀，设置流量为4.0ml/分钟，启动泵，排液5分钟（即排液20ml），将泵流量设为零，关闭排液阀。

5.2 首先使用100%甲醇，以0.5ml/分钟的流量冲洗色谱柱20分钟，再用新配的10%甲醇，以1.0ml/分钟的流量冲洗系统15～20分钟（如流动相中仅含有机溶剂和水，如甲醇-水或乙腈-水，则可不必用10%甲醇溶液冲洗），再换流动相，平衡系统，直至柱压稳定、基线平稳。