纳氏试剂配制方法的探讨管理

氨氮，是以游离氨（NH3）或铵盐（NH4+）形式存在于水中，两者的组成取决于水体的PH值和水温。当PH值高是游离（NH3）的比例较高，反之铵盐的比例较高。氨氮是水体中的营养素，可导致水富营养化现象产生，是水体中的主要耗氧污染物，氨氮是我国水体环境监测的主要指标，是各级监测站点的必测项目。

测定水体中的各种形态的氮化物有助于评价水体被污染和"自净"情况，氨氮含量较高时对鱼类有毒害作用，甚至会导致鱼类死亡，氨氮含量高时对人体健康也会有危害作用。在当今环保意识不断增强的趋势下氨氮的测定越来越受到人们的重视。

测定氨氮的方法有很多，通常有钠氏试剂比色法、苯酚-次氯酸盐比色法、电极法、离子色谱法等。其中，纳氏试剂比色法是测定水体中氨氮经典的国家标准分析方法。其原理是以游离态的氨或铵离子的形式存在的氨氮与纳氏试剂反应生成淡红棕色的络合物，该络合物的吸光度与氨氮的含量成正比。纳氏试剂比色法的测试范围是水样体积为50毫升，使用20mm比色皿时，其检出限为0.025 mg/L，上限是2.0mg/L，下限为0.10mg/L。因纳氏试剂比色法具有操作简便、灵敏等特点，成为广大监测人员最常用的分析氨氮的方法。但二氯化汞的用量偏高，二氯化汞是剧毒药物，降低它的使用量，有利于分析人员的安全和减少二次污染，但又不影响分析数据的可靠性和精密度。

1.实验步骤

1.1实验仪器

50ml具塞比色管；分光光度计；20mm比色皿。

1.2试剂配置

配制试剂用水均应为无氨水。

1.2.1无氨水：可用一般纯水通过强酸性阳离子交换树脂或加硫酸和高锰酸钾后，重蒸馏得到。

1.2.2纳氏试剂：称取15.0g氢氧化钾，溶于50ml水中，充分冷却至室温。

另称取5.0g碘化钾溶于10 ml水中，在搅拌下，将2.50g二氯化汞粉末分多次加入碘化钾溶液中，直到溶液呈深黄色或出现红色沉淀溶解缓慢时，充分搅拌混合，并改为滴加二氯化汞饱和溶液，当出现朱红色沉淀不再溶解时，停止滴加。

在搅拌下，将冷却的氢氧化钾溶液缓慢地加入到上述二氯化汞和碘化钾混合溶液中，并稀释至100ml，于暗处静置24h，倾出上清液，贮于聚乙烯瓶内，用橡皮塞或聚乙烯盖子盖紧，存放暗处，可稳定一个月。

1.2.3酒石酸钾钠溶液：称取50g酒石酸钾钠(KNaC4H4O6?4H2O)溶于100ml水中，加热煮沸以除去氨，放冷，定容至100ml。

1.2.4氨氮标准贮备溶液：称取3.8190g经100--105℃干燥2h的优级纯氯化铵(NH4Cl)溶于水中，移入1000ml容量瓶中，稀释至标线。此溶液每毫升含1.00mg氨氮。

1.2.5氨氮标准使用溶液：移取5.00ml铵标准贮备液于500ml容量瓶中，用水

稀释至标线。此溶液每毫升含0.010mg氨氮。

1.3测定步骤

标准曲线的绘制：吸取 0 、0.50、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00和10.0ml氨氮标准使用液于50mL比色管中，加水至标线，加1.0mL酒石酸钾钠溶液，混匀。加1.5ml纳氏试剂，混匀。放置10min后，在波长420nm处，用20mm比色皿，以水为参比，测定吸光度。

由测得的吸光度，减去零浓度空白的吸光度后，得到校正吸光度，绘制以氨氮含量（mg）对校正吸光度的标准曲线。

水样的测定：分取适量的水样（使氨氮含量不超过0.1mg），加入50ml比色管中，稀释至标线，加1.0ml酒石酸钾钠溶液，混匀，加1.5mL的纳氏试剂，混匀，放置10min后，在波长420nm处，用20mm比色皿，以水为参比，测定吸光度。。

空白试验：以无氨水代替水样，作全程序空白测定。

1.4计算

水样氨氮的质量浓度按下式计算：

式中：As为水样吸光度；Ab为空白实验的吸光度；a为标准曲线的截距；b为标准曲线的斜率；V为水样体积（mL）。

1.5特别说明

1.5.1纳氏试剂中二氯化汞与碘化钾的比例，对显色反应的灵敏度有较大影响。根据反应公式计算，二氯化汞和碘化钾的理论比为

2.1：5，当接近理论比时，纳式试剂的灵敏度改善，本改进方法中，二氯化汞与碘化钾的加入量由HJ535-2009方法中的2.50：5.0减少为2.10：5.0 。

1.5.2实验证明配制纳氏试剂加入二氯化汞时，为加快反应时间、节省配置时间，可低温加

热。纳氏试剂和酒石酸钾钠溶液常温避光保存即可。

1.5.3静置后生成的沉淀应除去。

2.结果和分析

2.1标准曲线

通过试验所做5条标准曲线的斜率、截距、相关系数（见表1）均符合要求，结果表明该改进方法的灵敏度和稳定性都很好。

表1 标准曲线参数值

回归方程:Y=bx+a

2.2空白测定

分别用HJ535-2009和改进法连续做了5组空白（每隔一天做一组，每组4个样，HJ535-2009和改进法各2个样。均取平均值统计）。HJ535-2009测定的空白改进后测定的空白吸光度基本一样（见表2）

试验证明，改进后的精密度较好。

表2 国标法和改进法测定空白吸光度对比

2.3样品分析

采用改进法分别对2个不同浓度标样进行氨氮测试分析，均在真值允许范围内，其中绝对误差、相对误差、加标回收率（见表3），说明改进法准确度和精密度都符合要求。

表3 改进法测定标样结果

3.小结

3.1纳式试剂法测定氨氮改进方法的精密度、准确度和HJ535-2009一致，完全能满足实际工作的需要。

3.2纳式试剂法测定氨氮改进方法的空白吸光度与HJ535-2009的空白吸光度基本一样。

3.3纳式试剂法测定氨氮

改进方法有效的减少了二氯化汞的用量，由于汞具有挥发和渗人体器官储积的特点，减少汞用量也相应降低了该物质对分析人员的危害。