病理组织切片制作技术ppt课件
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肺毛霉病病理HE染色
考评项目赋标准分，对照考评内容和 考评办 法对考 评项目 进行考 评，评 出各考 评项目 的考评 实际得 分，考 评类目 下各考 评项目 考评实 际得分 之和为 该考评 类目的 考评实 际得分
肺wk.baidu.com霉球菌丝45度分枝HE染色
考评项目赋标准分，对照考评内容和 考评办 法对考 评项目 进行考 评，评 出各考 评项目 的考评 实际得 分，考 评类目 下各考 评项目 考评实 际得分 之和为 该考评 类目的 考评实 际得分
5min 4、无水乙醇、 95%、80%、 70、 50%
梯度乙醇每级1-2min 5、蒸馏水1-2min
（二）、染色（HE染色法）
6、苏木素染液5～15min 7、蒸馏水（洗去多余的染液） 8、分色:1%盐酸-70 %乙醇分色30-60sec 8、蓝化:自来水冲洗（碱化，核蓝色）15-20min 9、蒸馏水（洗去多余的碱） 1-2min 10、逐级入50%、70%、85%乙醇，每级1-2min 11、伊红- 95%乙醇染液15sec～2min 12 、95%、无水乙醇Ⅰ、无水乙醇Ⅱ逐级脱水，每级
五、光镜观察
考评项目赋标准分，对照考评内容和 考评办 法对考 评项目 进行考 评，评 出各考 评项目 的考评 实际得 分，考 评类目 下各考 评项目 考评实 际得分 之和为 该考评 类目的 考评实 际得分
放线菌病硫磺颗粒HE染色300倍
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概括主要流程
取材 固定 脱水 透明 包埋
切片 封固 染色 脱蜡 烤片
考评项目赋标准分，对照考评内容和 考评办 法对考 评项目 进行考 评，评 出各考 评项目 的考评 实际得 分，考 评类目 下各考 评项目 考评实 际得分 之和为 该考评 类目的 考评实 际得分
•Thank you!
（二）固定及目的：
应用化学试剂使组织或细胞中的无机 成分和有机成分凝固或沉淀，以保持其生 活状态的过程称为固定。
固定液是10%福尔马林溶液（4%甲 醛溶液），固定24小时以上。
固定的目的
1、迅速阻止组织、细胞死后变化，防止 自溶与腐败，使之尽量保持生前的状 态与结构。
2、使细胞内的蛋白质、脂肪、糖、酶等 成分转变为不溶性物质，以保持其原 有状态。
(三)、浸蜡与包埋
52-58℃石蜡，浸蜡的全过程在 60℃的温箱中进行。 1：1二甲苯：石蜡30min 石蜡一30min 石蜡二30min 石蜡三30min
（四）切片、粘片
1、切片前处理及切片 2、载玻片处理 3、粘片（展片） 4、烤片
三、脱蜡和染色
（一）、脱蜡 1、二甲苯Ⅰ5-10min 2、二甲苯Ⅱ1-2min 3、1：1二甲苯：乙醇（冬天20min）
3、使组织内各种物质成分产生不同的折 光率，以便染色后易于鉴别和观察。
4、使组织块硬化，便于制作薄片。
固定的注意事项
1、组织块不宜大，厚度小于5mm，长宽 也应小于15×15mm。
2、固定液与组织块的比例应大于10：1。
3、软组织或较大组织块可先经2-3小时固 定后再修整成小块，重新投入新配制 的固定液中继续固定。
1-2min 13、1：1无水乙醇：二甲苯 、二甲苯 Ⅰ 、二甲
苯Ⅱ 各 5min
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四、封固
滴加中性树胶，加盖玻片封 片。
病理组织切片制作技术
实验内容
掌握组织材料的取材、固 定、脱水、透明、包埋、切片、 烤片、脱蜡、染色及封固的基 本操作。
一、取材及固定
（一）取材注意事项： 1、材料新鲜 2、组织块力求小而薄 3、勿使组织块受挤压 4、尽量保持组织的原有形态 5、熟悉取材部位
（一）取材注意事项：
6、选好组织块的切面 7、保持材料的清洁 8、切除不需要的部位
4、肠道可在浆膜面贴上一层厚纸，以防 固定组织变形。
二、固定后处理及切片
(一)、洗涤与修切 (二)、脱水与透明
脱水：将组织块内水分置换的过程。 透明：乙醇和石蜡不互溶，最常用 的透明剂是二甲苯。既能溶于脱水剂 又能溶于包埋剂（石蜡），透明必须 适度 。
50%乙醇30-60min 70%乙醇1-2小时或过夜 80%乙醇1-2小时 95%乙醇1-1.5小时 100%乙醇30min 100%乙醇20min 1：1无水乙醇：二甲苯20min 二甲苯10-30min
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5min 4、无水乙醇、 95%、80%、 70、 50%
梯度乙醇每级1-2min 5、蒸馏水1-2min
（二）、染色（HE染色法）
6、苏木素染液5～15min 7、蒸馏水（洗去多余的染液） 8、分色:1%盐酸-70 %乙醇分色30-60sec 8、蓝化:自来水冲洗（碱化，核蓝色）15-20min 9、蒸馏水（洗去多余的碱） 1-2min 10、逐级入50%、70%、85%乙醇，每级1-2min 11、伊红- 95%乙醇染液15sec～2min 12 、95%、无水乙醇Ⅰ、无水乙醇Ⅱ逐级脱水，每级
五、光镜观察
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概括主要流程
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（二）固定及目的：
应用化学试剂使组织或细胞中的无机 成分和有机成分凝固或沉淀，以保持其生 活状态的过程称为固定。
固定液是10%福尔马林溶液（4%甲 醛溶液），固定24小时以上。
固定的目的
1、迅速阻止组织、细胞死后变化，防止 自溶与腐败，使之尽量保持生前的状 态与结构。
2、使细胞内的蛋白质、脂肪、糖、酶等 成分转变为不溶性物质，以保持其原 有状态。
(三)、浸蜡与包埋
52-58℃石蜡，浸蜡的全过程在 60℃的温箱中进行。 1：1二甲苯：石蜡30min 石蜡一30min 石蜡二30min 石蜡三30min
（四）切片、粘片
1、切片前处理及切片 2、载玻片处理 3、粘片（展片） 4、烤片
三、脱蜡和染色
（一）、脱蜡 1、二甲苯Ⅰ5-10min 2、二甲苯Ⅱ1-2min 3、1：1二甲苯：乙醇（冬天20min）
3、使组织内各种物质成分产生不同的折 光率，以便染色后易于鉴别和观察。
4、使组织块硬化，便于制作薄片。
固定的注意事项
1、组织块不宜大，厚度小于5mm，长宽 也应小于15×15mm。
2、固定液与组织块的比例应大于10：1。
3、软组织或较大组织块可先经2-3小时固 定后再修整成小块，重新投入新配制 的固定液中继续固定。
1-2min 13、1：1无水乙醇：二甲苯 、二甲苯 Ⅰ 、二甲
苯Ⅱ 各 5min
考评项目赋标准分，对照考评内容和 考评办 法对考 评项目 进行考 评，评 出各考 评项目 的考评 实际得 分，考 评类目 下各考 评项目 考评实 际得分 之和为 该考评 类目的 考评实 际得分
四、封固
滴加中性树胶，加盖玻片封 片。
病理组织切片制作技术
实验内容
掌握组织材料的取材、固 定、脱水、透明、包埋、切片、 烤片、脱蜡、染色及封固的基 本操作。
一、取材及固定
（一）取材注意事项： 1、材料新鲜 2、组织块力求小而薄 3、勿使组织块受挤压 4、尽量保持组织的原有形态 5、熟悉取材部位
（一）取材注意事项：
6、选好组织块的切面 7、保持材料的清洁 8、切除不需要的部位
4、肠道可在浆膜面贴上一层厚纸，以防 固定组织变形。
二、固定后处理及切片
(一)、洗涤与修切 (二)、脱水与透明
脱水：将组织块内水分置换的过程。 透明：乙醇和石蜡不互溶，最常用 的透明剂是二甲苯。既能溶于脱水剂 又能溶于包埋剂（石蜡），透明必须 适度 。
50%乙醇30-60min 70%乙醇1-2小时或过夜 80%乙醇1-2小时 95%乙醇1-1.5小时 100%乙醇30min 100%乙醇20min 1：1无水乙醇：二甲苯20min 二甲苯10-30min