绞股蓝皂苷提取方法的研究现状

绞股蓝皂苷提取方法的研究现状

【摘要】绞股蓝为葫芦科绞股蓝属多年生草质藤本植物，以全草药食两用，含有皂苷、黄酮、多糖等成分。其中皂苷为主要的药用成分之一，具有抗肿瘤、抗氧化、降血糖、降血脂、降血压、增强免疫力等作用。本文对近年来有关皂苷的提取方法作以综述。

【关键词】绞股蓝；绞股蓝皂苷；提取方法

绞股蓝Gyrtostemma pentaphyllum(Thunb.) Makino为葫芦科绞股蓝属多年生攀缘草质藤本植物，又名七叶胆、公罗锅底。绞股蓝以全草供药食兼用，味苦、性寒，具有清热解毒、补气、止咳、祛痰之功效[1]。近期的研究表明，绞股蓝具有抗肿瘤、抗疲劳、抗衰老、调节脂质代谢、降低过氧化脂质、镇静、催眠、镇痛、防治老年性白发等作用[2]。绞股蓝中含有皂苷类、黄酮类、氨基酸、糖、微量元素等成分[3]。其中皂苷为主要的药用成分之一，在药品和保健食品中有广阔的应用前景，为便于查阅、分析和研究目前有关绞股蓝总皂苷的实验资料，对其提取方法进行以下综述。

1.溶剂提取法

溶剂提取法是实际工作中应用最普遍的方法，它是根据被提取成分的溶解性能，选用合适的溶剂和方法来提取。其作用原理是溶剂穿透入药材粉末的细胞膜，溶解溶质，形成细胞内外溶质浓度差，将溶质渗出细胞膜，达到提取目的[4]。

1.1 水提取

水浸提法有方法简单、成本低、安全无污染等特点。林硕等[5]通过实验确定水提取的最佳提取工艺为:料液比1:35,温度85℃,时间90min。在此最佳条件下绞股蓝皂苷平均提取得率为7.7943%,提取纯度为26.8522%,各提取得率相对标准差RSD为1.2099%。皂苷提取率与纯度较高，提取工艺稳定，符合工业化生产要求。

1.2 乙醇提取

董玉睿[6]采用正交试验设计法,以绞股蓝总皂苷提取量为考察指标,对影响绞股蓝总皂

苷提取工艺的因素进行了优选。结果表明：提取时间、提取次数对提取效果有显著影响,乙醇用量的影响不显著。确定绞股蓝总皂苷的最佳提取工艺为：药材加8倍量70%的乙醇,回流提取3次,每次2h。

超微粉碎技术能在一定程度上破坏绞股蓝细胞壁，增加了植物细胞的比表面积，使绞股蓝粉体有效成分溶出更迅速、完全。邓美林等用乙醇提取绞股蓝超微粉总皂苷，在单因素基础上，通过正交试验，确定了最佳提取工艺条件，绞股蓝粉碎粒度D50为3.03μm，乙醇70%vol，料液比（g∶mL）为1∶30，提取时间为60min，提取温度为60℃，绞股蓝总皂苷提取率为4.25%[7]。

2. 超声波提取法

超声波是频率高于20kHz的弹性机械波，传播过程中产生空化效应、热效应和机械效应[8]。其原理为超声波的空化效应产生极大的压力造成被粉碎物细胞壁及整个生物体的破碎，而且整个破碎过程在瞬间完成；同时，超声波产生的振动作用加强了胞内物质的释放、扩散及溶解，有利于胞内有效成分的提取[9]。

林硕等[10]采用常规水浴提取、40kHz和28kHz超声波提取三种方法分别提取绞股蓝皂苷，得出结论：与常规水浴提取相比，40kHz超声波对绞股蓝皂苷的提取过程无明显强化作用；

28kHz超声波对绞股蓝皂苷提取过程的强化作用明显；28kHz超声波提取绞股蓝皂苷的最佳提取工艺为：料液比1:30，提取温度70℃，提取时间60min，在此条件下皂苷得7.5934%，且提取结果重现性好，可信度高。

3. 微波提取法

微波提取技术是一种新型的天然产物有效成分提取技术,利用频率为300～300 000MHz 的电磁波辐射提取物,使提取物内的极性分子产生高速摆动而发生相互摩擦,产生热量,提供能量的快速传递和充分利用。微波提取过程的原理有两个方面,一是强化了传递过程,热量通过微波转换得到,从而实现高强度的均匀加热,这是传统提取过程做不到的,而质量的传递由于分子的高速摆动及温度的升高而得到强化;二是植物内极性分子吸收微波产生热量,发生汽化或膨胀,内渗透压增加而破坏植物的细胞结构[11～13]。

张育松[14]采用单因素设计组合，进行了微波辅助提取绞股蓝皂苷的试验。结果表明：微波辅助提取绞股蓝皂苷的最佳条件为:料液比1：25、溶剂pH值为8、浸提温度70℃、浸提时间120min、微波辐射强度中等、微波辐射处理时间180s。

郭辉力，邓泽元[15]研究微波干法辅助提取绞股蓝总皂苷的新工艺,通过正交试验得出微波处理的最佳工艺条件为:功率800W、100%微波辐照、每次处理时间2min;然后用70%乙醇快速浸泡提取,所得绞股蓝总皂苷的提取率为8.37%。与乙醇回流提取法相比较,提取时间缩短了近9h,提取率提高了15.8%。

4. 酶法提取

4.1 果胶酶提取

果胶酶提取绞股蓝皂苷，其机理是利用果胶酶酶解反应，除去细胞壁中的果胶物质，从而破除细胞壁，以便皂苷的溶出[16]。

林硕等[17]利用果胶酶提取绞股蓝皂苷, 确定果胶酶提取绞股蓝皂苷的最佳工艺为：果胶酶用量为0.35％，pH值为4.0，酶解温度为50℃，酶解时间为90min，高温灭酶提取16min。在此工艺条件下皂苷得率达7.9201％，在常规水酶法提取基础上增加了9.4148％，相对标准偏差RSD为0.9764％，提取结果稳定，符合工业化生产要求。

4.2 纤维素酶提取

纤维素是植物细胞壁的主要成分，是由β-D-葡萄糖以1,4-β葡萄糖苷键连接，用纤维素酶酶解可以破坏β-D-葡萄糖苷键，使细胞壁破坏，有利于对有效成分的提取[18]。

黄山等[19]用纤维素酶提取法提取绞股蓝总皂苷得到了最佳工艺条件：料液1:14、溶剂PH4.5、酶用量0.4%、酶解温度45℃、酶解反应时间120min。采用酶水解后，绞股蓝总皂苷的含量为4.60%，较热水浸提法提高了17.05%，为酶法提取绞股蓝总皂苷工艺的确定提供了依据。

5. 超声波协同酶法提取

洪秀云等[20]人综合酶法和超声波法提取绞股蓝总皂苷的优势,首次采用超声波协同酶法提取绞股蓝皂苷，分别采用常规水浴法、单一酶法、单一超声波法、超声波协同酶法等试验方案进行处理。结果表明采用超声波协同酶法促进效果更为明显，其中酶解后超声波处理比先超声波后酶解的处理方法，绞股蓝总皂苷的提取率更高，达到7.494%，比常规水浴法、单一酶法、单一超声波法分别提高了79.28%、34.37%、43.04%。结论:超声波协同酶法能显著提高绞股蓝总皂苷的提取率。

6. 动态连续逆流提取法