第23章 感染性疾病与免疫学检验(免疫学)

抗链球菌溶血素“O” 抗链激酶试验 抗透明质酸酶（ADH） 抗DNA酶B（DNA-B） 抗链球菌多糖体（ASP）
ASO的临床检测
胶乳凝集 试验
免疫散射 比浊法
ASO检测的临床意义

ASO增高常见于： 急性咽炎等上呼吸道感染 风湿性心肌炎 心包炎 风湿性关节炎 急性肾小球肾炎等 免疫功能不全ASO可不增高
一）类脂抗原试验
1、性病研究实验室试验（ venereal disease research laboratory，VDRL） 2、不加热血清反应素试验（unheated serum reagin， USR） 3、快速血浆反应素试验（ rapid plasma reagin， RPR）
二）密螺旋体抗体试验
可对血清中的 HBsAg进行定量检测， 对肝炎病人动态疗效 观察很有价值
临床意义 （1）乙肝的筛选和普查。 （2）HBsAg阴性不能完全排除乙型肝炎。 （3）同时出现HBsAg和抗-HBs，可能是不同亚型重 复感染。 （4）如果仅表现为HBsAg阳性者，传染性较弱。
乙型肝炎表面抗体(HBsAb)
主要内容
• 抗感染免疫的机制
• 感染的类型和特点
• 感染免疫的检验
第一部分
概述
抗感染免疫的机制
非特异性抗感染机制
特异性抗感染机制
感染对机体免疫功能的影响
Stages of Response to Infection
Course of Typical Acute Infection
机体的抗感染免疫机制
（二）乙型肝炎病毒
乙型肝炎的诊断标志物
乙型肝炎表面抗原（HBsAg） 乙肝病毒前S1抗原 抗乙肝病毒前S1抗体 乙肝病毒前S2抗原 抗乙肝病毒前S2抗体 乙型肝炎核心抗原（HBcAg）
乙肝核心抗体-IgM 乙肝核心抗体-IgG 乙型肝炎表面抗体（抗-HBs） 乙型肝炎e抗原（HBeAg） 乙型肝炎e抗体（抗-HBe ）
巨噬细胞的抗寄生虫作用 直接吞噬和杀伤小型寄生虫 分泌细胞毒性因子，直接杀伤小型胞外寄生虫或 抑制寄生虫在体内繁殖 激活其他效应细胞而增强抗寄生虫效应 介导ADCC作用 中性粒细胞的抗寄生虫作用:吞噬杀伤、呼吸爆发、 ADCC 嗜酸粒细胞的抗寄生虫作用：吞噬杀伤、ADCC
4.抗寄生虫的体液免疫 激活补体 阻止黏附 阻止寄生虫侵入 调理作用 ADCC 5. 抗寄生虫的细胞免疫 CD4＋和CD8＋细胞均参与抗寄生虫免疫
感染性疾病及 免疫学检验
卫生部公布2011年6月全国法定 报告传染病疫情
• 共报告甲、乙类传染病发病318287例，死亡743人。 • 甲、乙类传染病发病数居前五位的病种为：肺结核、乙
肝、痢疾、梅毒、淋病，占总数的86.50%。死亡数居前
五位的病种为：狂犬病、肺结核、艾滋病、乙肝、出血 热，占死亡总数的89.77％。 • 丙类传染病发病104926例，死亡14人。发病数居前三位 的病种为：其它感染性腹泻病、流行性腮腺炎、流行性 感冒，占发病总数的97.68%。
尤其适用于肠道病原菌抗原的检测
二、微生物特异性抗体的检测
抗体检测的原则：不同的方法、定量、结果的价值 交叉反应
第四部分 常见感染性疾病的免 疫学检测
第一节 细菌感染的免疫检测
一、链球菌感染
（一）化脓性链球菌
免疫学检查
生物学性状
是引起化脓性疾病的常见细菌 A群链球菌有较强的侵袭力 可产生多种酶和外毒素
酶联免疫吸附试 验 (ELISA）
检测伤寒杆菌 的抗原和抗体
三、结核分枝杆菌感染
生物学性状
分枝杆菌科分枝杆菌属 人型和牛型是人类的主要致病菌 可诱导抗感染细胞免疫和体液免
疫反应
痰涂片结核杆菌抗酸染色
免疫学检测方法
分枝杆菌抗原检测 结核特异性IgG的检测
特异性免疫复合物
四、螺旋体
也可出现于慢性肝炎
肝硬化或无症状的HBsAg携带者可长期存在
乙型肝炎核心抗原(HBcAg)
生物学性状
是乙肝病毒存在的直接标志
HBcAg与HBV复制呈正相关
可反映HBV的活动性及复制程度
有助于乙肝疗效和预后的判断
临床意义 （1）急性乙肝的诊断
（2）预后判断
（3）区分慢性活动性或非活动性肝炎 （4）暴发型乙型肝炎诊断
二、病毒感染与抗病毒免疫机制
（一）病毒的致病机理 1. 病毒直接损害靶细胞 杀细胞效应 细胞膜改变 细胞转化 病毒抗原的改变
Байду номын сангаас
2. 病毒感染并直接损伤免疫细胞 :如HIV
3.抗病毒免疫应答介导宿主细胞损伤 抗病毒抗体与胞膜表面的病毒抗原结合 引起损伤 循环中病毒抗原-抗体复合物沉积于某些组织的血管壁引 起损伤 致敏CTL杀伤病毒感染细胞 TDTH细胞释放细胞因子引起炎症性损伤 4.病毒感染诱导病理性自身免疫应答
（二）抗病毒感染的免疫机制
• 抗病毒的体液免疫 1.中和作用：局部sIgA、循环中和抗体 2.促进病毒被吞噬或裂解 3.裂解病毒感染细胞：ADCC、CDC
• 抗病毒的细胞免疫 1.NK细胞 2.CTL 3.TDTH：IFN－r、IL－2等
细胞免 疫在抗 病毒感 染中起 主导作 用
三、寄生虫感染与抗寄生虫免疫机制
四、微生物感染类型与免疫学检测
一）胞内和胞外感染与免疫学检测 胞外感染：体液免疫 胞内感染：细胞免疫（病毒、衣原体、立克次体） 二）微生物感染的模式与免疫学检测 急性感染：IgM及病原检测 慢性感染：IgG 隐伏感染：IgG (HSV、EBV…)
第三部分 免疫学检测的应用
一、微生物抗原的检测
菌种（毒株）的鉴定及直接检测标本中的抗原
HBV血清学标物
HBs Ag 抗 HBs 抗 HBc HBe Ag 抗 HBe
临床意义
潜伏期或者急性乙肝早期 急性或者慢性感染，以抗HBV-IgM鉴别（“大三阳”） 乙肝后期或者慢性携带者（“小三阳”） 痊愈或者恢复期，有免疫力 痊愈，有免疫力 过去感染，但无法检出抗HBs；低水平慢性感染 疫苗接种或者很早以前曾感染过
乙型肝炎e抗原(HBeAg)
生物学性状 是乙肝传染性的标志 HBeAg阳性可能性越大 HBsAg效价越高检出率就越高
HBeAg阳性标志着较强的感染和传染性
乙型肝炎e抗体(HBeAb)
生物学性状
多出现于急性肝炎恢复期的病人中
比抗-HBs转阳要早 常在HBsAg即将消失或已经消失时检出 存在于乙肝恢复期及痊愈的病人血清中
1、荧光密螺旋体吸收试验（fluorenscent treponemal antibody-absorption， FTA-ABStest） 2、梅毒螺旋体血凝试验（ treponemal pallidum hemagglutination test，TPHA) 3、ELISA：区分IgM和IgG，判断先天性梅毒或活 动性神经梅毒。 4、WB——二三期梅毒，不适于先天性梅毒。
第三节 病毒感染性疾病的免疫检测
病毒入侵后能引起全身感染，抗病毒的防御机制和抗 细菌机制相似，但巨噬细胞、NK细胞、干扰素和补体 等所发挥的作用更为明显。病毒具有较强的免疫原性， 能诱导机体产生免疫应答，有助于病毒的清除并预防 再次感染。
一、流感病毒感染
（一）流感病毒
生物学性状 流感病毒可分为甲、乙、丙三型 甲型和乙型流感病毒经常发生变异 易造成暴发和新的流行
血液传染性
高 高 低 无 无 未知 无
+ + + -
+ + +
+ + + + +
-
+ + -
+ + -
乙肝病毒前S1蛋白(pre-S1)
生物学性状 仅在HBV-DNA阳性血清中检出
传播病毒的危险性明显高
乙肝病毒前S2蛋白(pre-S2)
生物学性状

有一个高免疫性的抗原决定蔟
具有多聚蛋白受体
机体
各部位的
天然免疫成分
感染对机体免疫功能状态的影响
1. 感染可增强机体免疫功能 2. 感染使机体免疫功能降低, 免疫调节紊 乱, 导致其他传染病、自身免疫病及超 敏反应性疾病的发生
感染导致免疫功能抑制的机制
1.病毒在某些免疫细胞内增殖，导致免疫功能受损
2.某些病毒感染可引起抑制性T细胞活化 3.巨细胞病毒感染时可出现抑制性巨噬细胞 4.HIV感染CD4+T细胞，可导致细胞免疫功能下降
（二）猪链球菌
生物学性状
由多种链球菌感染引起猪多种临床症状的
传染病 猪链球菌病病血清型众多、抗原结构复杂 目前该病分布范围极广
猪链球菌的免疫学诊断
ELISA 免疫荧光技术 SPA协同凝集试验 乳胶凝集试验
二、伤寒沙门氏菌感染
免疫学检测方法
肥达氏凝 集试验 凝集时抗体效 价≥1:80为阳性
HBV的感染和复制有密切的关系
作为HBV复制标志之一 与HBV-DNA活动呈正相关
生物学性状
是一种保护性抗体 是机体感染或接种乙肝疫苗的标志
如一过性HBsAg阳性，则抗-HBs可以为阴性
临床意义 （1）阳性提示急性感染后的康复。 （2）短暂性的抗-HBs阳性。 （3）HBV疫苗接种后，可出现抗-HBs阳性。 （4）抗-HBs与HBsAg同时阳性:暴发性肝炎或慢 性活动性肝炎患者。 （5）HBsAg消失同时伴抗-HBs的出现:临床上慢 性乙型肝炎治疗的最终目标。
第二部分 感染的类型与免疫特点
• 细菌感染与抗细菌免疫机制 • 病毒感染与抗病毒免疫机制 • 寄生虫感染与抗寄生虫免疫机制
一、细菌感染与抗细菌免疫机制
• 侵袭力：黏附和穿入、繁殖与扩散、抗吞噬
• 毒素：内毒素、外毒素（细胞毒、神经毒、 肠毒素）
• 抗细菌免疫机制
1.中和作用：抗毒素
2.抗菌体抗体：sIgA阻抑黏附、调理作用、溶菌杀菌作用 3.细胞免疫抵御胞内寄生菌:如结核杆菌、麻风杆菌、布氏 杆菌、伤寒杆菌、百日咳杆菌等
免 疫 学 诊 断
抗体检测 特异性IgM 特异性IgG
抗原检测
血凝抑制试验 神经氨酸抑制试验 琼脂免疫扩散试验 ELISA法 抗体斑点-ELISA（Dot-ELISA）
二、轮状病毒感染
轮状病毒（rotavirus）是婴幼儿胃肠炎和腹泻的重要病原体
轮状病毒感染的实验室检查 电镜检查病毒颗粒 免疫学检测 RT-PCR法
乙型肝炎核心抗体(HBcAb-IgM)
生物学性状

早期HBV感染的特异性血清学标志
效价降低常提示预后较好
有助于区分慢性活动性或非活动性肝炎
暴发型乙型肝炎诊断
乙型肝炎核心抗体(HBcAb-IgG)
生物学性状
出现较早 不是保护性抗体
有流行病学调查意义
不同血清标志物组合模式的临床意义
流感病毒电镜照片
免疫学诊断 病毒抗原的检测 常采用免疫荧光或酶标记技术 快速、灵敏度高 有助早期诊断 病毒抗体的检测 血凝抑制试验 补体结合试验 时间分辨免疫荧光技术
（二）禽流感病毒
禽流行性感冒（AI）简称禽流感 是一种从呼吸系统到严重的全身性败血症等多种症状的综合病征 高致病性禽流感亚型多为H5或H7血清型
乙型肝炎表面抗原(HBsAg)
生物学性状 存在于Dane颗粒的表面 位于病毒表面 是一种糖蛋白 4种亚型(adr,adw,ayr,ayw) 判断HBV感染的指标之一 刺激机体产生保护性抗体即抗-HBs
检测方法： SPRIA（固相放射免疫法） ELISA（酶联免疫吸附试验） RPHA（反向间接血凝试验） 化学发光法
轮状病毒电镜照片
免疫学诊断
抗原检测 ELISA
免疫酶斑点试验
抗体检测：
可采用ELISA法
检测血清中特异性IgM、IgG抗体， 通常感染5天后可测出IgM水平升高
三、肝炎病毒感染
（一）甲型肝炎病毒
生物学性状

免疫学检测
属小RNA病毒科 仅有1个血清型
特异性抗体检测 ELISA 化学发光法
1.寄生虫感染的特征 分布广、危害大 生活史复杂、抗原种类多 易逃避免疫攻击 易感性与遗传有关
2. 寄生虫逃避免疫攻击
• 寄生虫抗原变异
• 含超氧化歧化酶
• 表面包被的糖磷脂可清除氧化代谢产物
• 下调所寄居巨噬细胞表面MHC II表达
• 隐蔽自身 ：如形成包囊，物理屏障（粗厚的表 皮）等
3.抗寄生虫感染的非特异性免疫