叶绿体色素提取与分离实验
叶绿体色素的提取分离实验报告
叶绿体色素的提取分离、理化性质实验报告第一部分提取与分离一实验目的学习应用薄层色谱法分离叶绿体色素的实验方法二实验原理叶绿体是进行光合作用的细胞器。
叶绿体中的叶绿体a(C55H72O5N4Mg)、叶绿素b(C55H72O6N4Mg)、胡萝卜素(C40H56)和叶黄素(C40H56O2)与类囊体膜结合成为色素蛋白复合体。
这些色素都不溶于水，而溶于有机溶剂，故可用乙醇等有机溶剂提取。
提取液可用薄层色谱法加以分离与鉴别。
薄层色谱分析法是将吸附剂均匀的涂在玻璃板上成一薄层，将此吸附剂薄层做固定相，把待分离的样品溶液点在薄层板的下端，然后用一定量的溶剂做流动相，将薄层板的下端浸入到展开剂中。
流动相通过毛细管作用由下而上的逐渐浸润薄层板，并带动样品在板上也向上移动，样品中各组分在吸附剂和展开剂之间发生连续不断的吸附、脱附、再吸附、再脱附……的过程。
由于吸附剂的吸附能力大小不同，吸附力强的物质相对移动慢一些，而吸附力弱的则相对移动快一些，从而使各组分有不同的移动速度而彼此分开。
三实验材料与试剂1 新鲜的菠菜叶片2 体积分数为95%的乙醇，碳酸钙粉末，展开剂(石油醚:丙酮:苯=7:5:1，体积比)3 天平，研钵，漏斗，三角瓶，剪刀，点样毛细管，层析缸，硅胶预制板，滤纸四实验步骤(一)色素提取液的制备1 取新鲜叶片4至5片(2g左右)，洗净，擦干叶表面，去中脉剪碎，放入研钵中。
2 研钵中加入少量碳酸钙粉末，加2至3ml体积分数为95%的乙醇，研磨至糊状，再加10至15ml体积分数为95%的乙醇，上清液用漏斗过滤，残渣再用10ml体积分数为95%的乙醇冲洗一次，一同过滤于三角瓶中，即制成叶绿体色素提取液。
提取液应避光保存。
(二)叶绿体色素的分离1 取硅胶预制板一个，用点样毛细管吸取上述提取液，平行于硅胶板的短边，距下边缘约1cm处用毛细管划线，风干后再划第二次，重复操作3至4次。
2 在干洁的层析缸中加入适量的展开剂，高度约0.5cm，将硅胶预制板带有色素的一端放下，使其浸入展开剂中(但不要使待测样品浸入展开剂中)。
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》实验报告
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》实验报告实验目的：1. 学习叶绿体中色素的提取和分离的方法；2. 观察叶绿体中不同色素的吸收光谱。
实验原理：叶绿体是植物细胞中的特殊细胞器，其中含有多种色素，包括叶绿素 a、叶绿素 b、类胡萝卜素等。
这些色素能够吸收不同波长的光线，并转化为化学能以参与光合作用。
本实验利用溶剂提取和色谱柱分离的方法，将叶绿体中的色素提取出来，并通过紫外-可见光分光光度计测定不同色素的吸收光谱。
实验步骤：1. 取一片鲜叶（最好选择深绿色的叶片）切碎，加入适量的乙醇或醋酸乙酯中浸泡，使叶绿体释放出色素。
注意保持容器密封以避免光照。
2. 将浸泡片刻半小时，使叶绿体彻底释放色素。
3. 将叶绿体悬液过滤，收集含有色素的过滤液。
4. 取一支色谱柱，填充色谱吸附剂（如硅胶），再用无色溶剂（如正己烷）预洗一次。
5. 将收集到的含色素液体加入色谱柱中，用无色溶剂洗脱，收集不同色素的洗脱液。
6. 用紫外-可见光分光光度计测定不同色素的吸收光谱。
实验结果：根据实验数据得到不同色素的吸收光谱曲线，可观察到叶绿素 a 在400-500 nm波长范围内有最大吸收峰，叶绿素 b 在450-550 nm波长范围内有最大吸收峰，类胡萝卜素在500-600 nm波长范围内有最大吸收峰。
根据吸收光谱的不同，可以推测各色素在光合作用中的吸收波长和参与的反应。
实验结论：通过该实验，我们成功地提取和分离了叶绿体中的色素，并观察到不同色素的吸收光谱。
这些实验结果可以帮助我们深入了解植物光合作用的机制，以及不同色素在光合作用中的作用。
同时，该实验也展示了提取和分离生物样品中化学物质的基本实验技巧和原理。
《叶绿体色素的提取和分离》 实验报告
《叶绿体色素的提取和分离》实验报告
叶绿体是植物细胞中的一种细胞质器，主要功能是光合作用。
叶绿体包括一系列色素，其中最重要的是叶绿素。
在本实验中，我们将提取和分离叶绿体色素，以便进一步分析其
结构和功能。
实验步骤：
1. 从新鲜的叶子中剪下片段，用无菌蒸馏水洗涤。
2. 用离心机将叶片离心，离心速度为1000 rpm，时间为5分钟。
3. 将上清液取出并过滤，过滤剂为细孔过滤纸。
5. 将上清液取出，并用1ml无菌蒸馏水洗涤叶绿体色素。
7. 取出上清液，将其光度值调至0.4-0.6。
（400nm处）
8. 将上述上清液转入紫外吸收仪中，观察叶绿素的吸收曲线。
实验结果：
实验得出的叶绿体色素提取液中，吸收最强的波长为680nm和430nm。
这对应着叶绿
体和类胡萝卜素的吸收峰。
实验得到的叶绿体色素移液后，需要经过离心的过程，这样可去除混杂物质，获得更
为纯净的叶绿素。
通过以上实验，我们成功地提取和分离了叶绿体色素。
叶绿素是植物所特有的，它起
到了光合作用的关键作用。
实验中的提取和分离方法，可以为进一步的分析叶绿素的结构
和功能提供帮助。
实验7 叶绿体色素的提取和分离
步
骤
注 意 问 题
分
析
1．提取色素 5 克绿叶剪碎， 放入研钵，加 SiO2、CaCO3 和 5mL 丙酮（或 10mL 无水 乙醇）迅速、充分研磨。 （若 没有无水乙醇，也可用体积 分数为 95%的乙醇，但要加 入适量的无水碳酸钠，除去 水分） 2．收集滤液漏斗基部放一单 层尼龙布，研磨倒入漏斗内 挤压，将滤液收集到小试管
胡萝卜素（橙黄色）
杯要盖培养是胡 萝卜素，扩散
四种色素之所以能被分离，是因为四种色素 随层析液在滤纸上的扩散速度不同。
叶黄素（黄色） 叶绿素 a（蓝绿色） 叶绿素 b（黄绿色）
最慢是叶绿素 b， 含量最多的 是叶绿素 a。
2
尼龙布起过滤作用。
中，用棉花塞塞住试管口。 3．制备滤纸条将干燥的滤纸， 顺着纸纹剪成长 10cm，宽 1cm 干燥 的纸条，一端剪去二个角，并 顺着纸纹剪成 在距这一端 1cm 处划一铅笔 长条 线。 一端剪去二个 角 4．划滤液细线用毛细吸管吸 取少量滤液，沿铅笔线划出 滤液细线越
试管口用棉花塞塞紧是为了防止丙酮挥发。
1
加 SiO2 为了研磨得更充分。 加 CaCO3 防止研磨时叶绿素受到破坏。因为 加 SiO2 加 CaCO3 加丙酮 迅速 叶绿素含镁， 可被细胞液中的有机酸产生的氢 代替， 形成去镁叶绿素， CaCO3 可中和液泡破 坏释放的有机酸，防止叶绿体被破坏。 叶绿体色素易溶于丙酮等有机溶剂。 减少研磨过程叶绿素的分解，减少有毒性的 丙酮挥发。
可吸收更多的滤液。 层析时，色素分离效果好。 可使层析液同时到达滤液细线。
防止色素带之间部分重叠。
细、齐、直的一条滤液细线， 细、 越齐越好。 干后重复三次。 重复三次。 增加色素在滤纸上的附着量，实验结果更明 显。 5．纸层析法分离色素 层析液不能没 防止色素溶解在层析液中，
实验三 叶绿体中色素的提取和分离
叶绿体中色素的提取和分离方案一【实验原理】（1）叶绿体中的色素能够溶解在有机溶剂丙酮中，所以，可以通过研磨法用丙酮提取叶绿体中的色素(若无丙酮亦可用酒精代替)。
（2）纸层析法：层析液（在60℃～90℃下分馏出来20份石油醚+ 2份丙酮+ 1份苯混合而成）是一种脂溶性很强的有机溶剂。
叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同(溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快；溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。
)这样，几分钟之后，叶绿体中的色素就在扩散过程中分解开来。
所以，可以用纸层析法分离出叶绿体中的色素。
【实验器材】新鲜的绿色菠菜叶片，干燥的定性滤纸，烧杯，研钵，小玻璃漏斗，脱脂棉，载玻片，剪刀，小试管，培养皿盖，药勺，量筒，天平。
丙酮，层析液，二氧化硅，碳酸钙。
【实验过程】（一）提取绿色叶片中的色素：1、用天平称取5g绿色的叶片，用剪刀剪碎，放入研钵中；2、向研钵中放入少许二氧化硅和碳酸钙，再加入5ml丙酮。
由于丙酮具有一定的毒性并且很容易挥发。
为了尽量少的吸入丙酮，可以将一片滤纸盖在研钵上，纸的中心穿一个洞，将杵棒套入洞口进行研磨。
※为什么要加入少许少许二氧化硅和碳酸钙？加入二氧化硅是为了研磨的更充分；加入少许碳酸钙是为了保护叶绿体中的色素，为是由于碳酸钙可以中和液泡破裂后释放出的有机酸，调节液体的PH，防止或避免色素被破坏。
※为什么要加入丙酮？丙酮是有机溶剂可以使色素溶解其中，作为色素的溶剂。
3、将研磨液迅速倒入小玻璃漏斗中进行过滤（漏斗基部放一小团脱脂棉）。
将滤液收集到一个小试管中，及时用塞将试管口塞紧。
（以防止滤液中的丙酮挥发）※是否可以用滤纸来代替脱脂棉？不可以，滤纸对光合色素具有较强的吸附能力，使滤液的色素分子减少。
（二）制备滤纸条：取一块预先干燥处理过的定性滤纸，将滤纸剪成长6cm、宽1cm的滤纸条，将滤纸条的一端剪去两角，并在距这一端1cm处用铅笔画一条细的横线。
※在剪裁定性滤纸时，尽量注意双手不要接触纸面，以免手上的油脂或其他脏物污染滤纸，影响色素在纸条上的扩散。
叶绿素的提取、分离和测定
Ca=12.7OD663-2.69OD645 Cb=22.9OD645-4.68OD663 Ct=Ca+Cb=20.2D645+8.02D663
解方程式得
(二）步骤
称取0.5g叶片，剪碎后置于玻璃匀浆器中加纯丙酮5mL，研成匀浆，用80%丙酮10mL洗匀浆器，用80%丙酮定容到25mL，避光静置5min。用移液管吸取上面的绿色清液1mL置于一大试管中，加入丙酮4ml稀释，摇动试管，作测定用。
测量光密度值 取上述提取液以80%丙酮作为空白对照，于663及645nm下读取光密度值
计算结果代入公式求出各来自绿素的含量（单位mg/L）最后计算时需考虑稀释因子
叶绿素a含量（mg/g鲜重）=CA*5 *25*2/1000 =0.25CA
叶绿素b的含量（mg/g鲜重）=0.25CB
研钵、吸管、小烧杯、试管、培养皿等
01
95%酒精、石油醚
02
碳酸钙
03
（二）仪器和药品
（三）步骤
用天平称取15g鲜叶，剪碎放入研钵中，加少量的CaCO3粉末及95%酒精5-10mL研成糊状，再加95%酒精20mL，充分混匀以提取叶片匀浆中的色素，5-10分钟后，过滤入三角烧瓶中加塞待用。
取一张色层分析纸或定性滤纸代用，剪成圆形，直径应略大于培养皿的直径；将圆形滤纸平放在培养皿上，用滴管吸取叶绿素提取液，滴在滤纸的中心位置，稍干后，再重复操作几次；然后取另一滴管吸取石油醚，慢慢地推动叶绿素提取液，不久即可看到分离的各种色素的同心圆环,由内到外依次为：叶绿素a为蓝绿色、叶绿素b为黄绿色、叶黄素呈鲜黄色、胡萝卜素为橙黄色。
叶绿素a、b在长波方面的最大吸收峰分别为为663nm和645nm。
叶绿体色素的提取与分离实验
3、用纸层析法将色素进行分离，在滤纸条上出现最宽旳一 条色素带旳颜色是（ ） A、橙黄色 B、黄色 C、蓝绿色 D、黄绿色
类胡萝卜素 50
叶绿素b 叶绿素a
0
波长
二、捕获光能旳色素和构造
（一）捕获光能旳色素
色素
叶绿素a （蓝绿色）
叶绿素 叶绿素b
（黄绿色） 含量约占3/4
类胡萝卜素
叶黄素 （黄色） 胡萝卜素 （橙黄色）
含量约占1/4
吸收可见 旳太阳光
类胡萝卜素主 要吸收蓝紫光
叶绿素主要吸收 红光和蓝紫光
课堂检测
1、在叶绿体色素旳提取和分离试验中在滤纸条上扩散速度 最快旳色素是（ ） A、叶绿素a B、叶绿素b C、胡萝卜素 D、叶黄素
分别在A、B、C三个研钵中加入2克菠菜，经研磨、提取得到三种颜色旳溶液： 深绿色、黄绿色（或褐色）、几乎无色。注：“+”表达加，“—”表达不加。
处理
二氧化硅（少许） 碳酸钙（少许）
95%乙醇（10ml） 蒸馏水（10ml）
ABC +++ —+ + + —+ —+ —
（1）A处理得到旳溶液颜色是 黄绿色 ，原因是__叶__绿__素_被__破__坏__________
（6）色素分离旳成果：相邻色素带间距最宽旳是 他们旳颜色是 橙黄色 和 黄色 ，主要吸收 蓝紫
胡萝卜素 和 叶黄素 ， 光。
（ D）
A、安装红色透光薄膜 B、安装蓝紫色透光薄膜
叶绿体中色素的提取与分离实验
2.在研磨时要加少许二氧化硅，目的是为了研 磨充分，有利于色素的提取；加少许碳酸钙 的目的是为了防止研磨过程中，叶绿体中的 色素受到破坏。
3.分离色素时，一定不要让滤纸条上的滤液细 线接触到层析液，这是因为色素易溶解在层 析液中，导致色素带不清晰，影响实验效果。
B．滤纸条上滤液细线会变粗而使色素太分散
C．色素会溶解在层析液中而使结果不明显
D．滤纸条上几种色素会混合起来
5．某人做叶绿体中色素分离实验时，使用的 是圆形滤纸，装置如下图。实验结束时在圆形 滤纸上形成四个同心色素圆环，则最内圈所呈 颜色为 （D）
6．叶绿体中色素经层析后，出现在滤 纸上扩散最宽的色素带是（A）,最窄的 色素带是 （C） , 最整齐的色素带是
（C）
A．叶绿素a C．胡萝卜素
B．叶绿素b D．叶黄素
7．叶绿体的色素能在滤纸条上彼此分 离开的原因是 （C）
A．色素提取液中的不同色素已分层 B．阳光的照射使不同的色素彼此分 开
C．滤纸对各种色素的吸附力不同 D．丙酮酸使色素溶解并彼此分离的 扩散速度不同
小结：在叶绿体色素的提取和分离实验中：
【实 验】
叶绿体中色素的提取和 分离
一、实验原理
1.叶绿体中的色素能溶解在丙酮（有机溶剂: 酒精、汽油、苯、石油醚等）中，所以用 丙酮可提取叶绿体中色素。
2.色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的 色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得快， 溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上 的扩散得慢，因而可用层析液将不同的色 素分离。
五、实验讨论： 1．滤纸条上有几条不同颜色的色带？其排 序怎样？宽窄如何？这一说明了什么？
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》实验报告
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》实验报告实验目的：1. 学习叶绿体色素的提取和分离方法。
2. 了解叶绿体中色素的组成和结构。
实验原理：叶绿体是植物和藻类细胞中含有叶绿素的细胞器。
叶绿体中有多种不同类型的色素，包括叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素等。
这些色素通过吸收太阳光能量进行光合作用。
提取叶绿体中的色素可以使用酒精提取法。
酒精可以溶解叶绿体膜，使色素溶解到酒精中。
然后，使用色谱技术可以将不同类型的色素分离出来。
实验材料：1. 鲜叶样品2. 酒精3. 氯仿4. 丙酮实验步骤：1. 将鲜叶样品切碎并置于研钵中。
2. 加入足够量的酒精，用研钵研磨混合，直到叶碎细胞完全破裂。
3. 使用滤纸过滤混合物，得到澄清的叶绿体提取物。
4. 将叶绿体提取物转移到试管中，加入少量氯仿。
5. 等待一段时间，观察到叶绿体提取物分为两个层次：上层为酒精层，下层为氯仿层。
6. 使用滴管将上层的酒精取出，置于干燥的容器中保存。
7. 将下层的氯仿层转移至另一个试管中。
8. 加入适量的丙酮，轻轻摇匀，观察色素在丙酮中溶解。
9. 使用滤纸过滤丙酮溶液，得到单一色素溶液。
实验结果：从叶绿体提取物中分离出不同类型的色素，如叶绿素a、叶绿素b等。
通过色素的溶解性质和色谱技术，可以将这些色素分离出来。
实验总结：通过本次实验，我们学习了叶绿体中色素的提取和分离方法。
了解了叶绿体中的色素组成和结构。
同时，也掌握了使用色谱技术进行色素分离的基本步骤。
这对于进一步研究叶绿体的功能和光合作用具有重要意义。
叶绿体色素实验
叶绿体色素的提取、分离、理化性质和含量测定实验一、叶绿体色素的提取、分离1.实验名称叶绿体色素的提取、分离实验2.实验原理叶绿体中色素与内囊体膜结合成为色素蛋白复合体。
这些色素不溶于水，而溶于有机溶剂，可用乙醇等有机溶剂提取。
提取液用薄层色谱法加以分离和鉴别。
本实验采用酒精提取。
层析法原理： K=Cs/Cm。
3.实验试剂与材料新鲜菠菜叶体积分数百分之九十五的乙醇，碳酸钙粉末，展开剂（石油醚：丙酮：苯=7:5:1）天平，研钵，漏斗，三角瓶，剪刀，点样毛细管，层析缸，硅胶预制板，滤纸4.实验步骤1．叶绿体色素的提取（1）取菠菜或其他植物新鲜叶片4~5片（2g左右），洗净，擦干，去掉中脉，剪碎，放入研钵中。
（2）研钵中加入少量石英砂及碳酸钙粉，加2~3ml 95%乙醇，研磨至糊状，再加10ml 95%乙醇，暗处放置3~5min，上清液过滤于三角瓶中，残渣用10ml 95%乙醇冲洗，一同过滤于三角瓶中。
2.色素分离：取硅胶预制板一个，用毛细管吸取提取液，在板短边据下端1厘米处划一细线，待干后再次划线，重复3,4次。
在层析缸中加入层析液，高度0.5厘米，将预制板放入层析液中进行层析。
改好缸盖。
待色素较好分离后，取出硅胶预制板，迅速用铅笔标出展开剂前沿和各色素带的位置。
5.实验结果与分析滤纸条上出现4条色素带，从上到下依次是：橙黄色胡萝卜素（最快）黄色叶黄素蓝绿色叶绿素a（最多）黄绿色叶绿素b（最慢）二.理化性质1.实验目的验证叶绿素的理化性质。
2.实验原理叶绿素是一种二羧酸——叶绿酸与甲醇和叶绿醇形成的复杂酯，故可与碱起皂化反应而生成醇（甲醇和叶绿醇）和叶绿酸的盐，产生的盐能溶于水中，可用此法将叶绿素与类胡萝卜素分开；叶绿素与类胡萝卜素都具有光学活性，叶绿素吸收光量子而转变成激发态，激发态的叶绿素分子很不稳定，当它变回到基态时可发射出红光量子，因而产生荧光。
叶绿素中的镁可以被H+所取代而成褐色的去镁叶绿素，后者遇铜则成为绿色的铜代叶绿素，铜代叶绿素很稳定，在光下不易破坏，故常用此法制作绿色多汁植物的浸渍标本。
叶绿体中色素的提取与分离实验
（3）对滤纸剪去两角的目的是使层析液同时到达滤液细线。
（4）所画滤液细线越细越齐越好，这样可避免 色素带部分重叠 以取得较好的分离效果。
（5）层析装置加盖的目的是避免层析液挥发影响效果并引起中 毒。
（6）滤纸条上色素带最宽的颜色是蓝绿色，相邻色素带间距离 最近的是叶绿素a与叶绿素b。
A．水
B．丙酮
C．酒精
D．CCl4
3．做色素提取和分离实验的正确装置是 图中（D）
4．在进行叶绿素提取和分离实验时，不能让 层析液没及滤液细线的原因是（C）
A．滤纸条上几种色素会扩散不均匀而影响实 验结果
B．滤纸条上滤液细线会变粗而使色素太分散
C．色素会溶解在层析液中而使结果不明显
D．滤纸条上几种色素会混合起来
【实 验】
叶绿体中色素的提取 和分离
化隆四中
马海龙
一、实验原理
1.叶绿体中的色素能溶解在丙酮（有机溶剂: 酒精、汽油、苯、石油醚等）中，所以用 丙酮可提取叶绿体中色素。
2.色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的 色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得快， 溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上 的扩散得慢，因而可用层析液将不同的色 素分离。
3.层析时不要让滤液细线触及层析液。
四、注意事项
1.因丙酮和层析液都是易挥发且有一定毒性的 有机溶剂，所以研磨要快，收集的滤液要用 棉塞塞住，层析时要加盖，尽量减少有机溶 剂的挥发。
2.在研磨时要加少许二氧化硅，目的是为了研 磨充分，有利于色素的提取；加少许碳酸钙 的目的是为了防止研磨过程中，叶绿体中的 色素受到破坏。
实验步骤
1. 提取叶绿素
研磨法 材料剪碎
叶绿体中色素的提取与分离实验教案
叶绿体中色素的提取与分离实验教案【实验名称】叶绿体中色素的提取与分离实验【实验目的】1.了解叶绿体中的主要色素成分；2.掌握叶绿体色素的提取与分离方法。
【实验原理】叶绿体是植物细胞中的一种细胞器，其中含有许多重要的光合色素，包括叶绿素、类胡萝卜素等。
叶绿素是叶绿体中最主要的光合色素，起到吸收光能并参与光合作用的关键作用。
1.取一片新鲜的绿色叶片，仔细清洗干净；2.将叶片切碎，放入研钵中；3.加入适量的酒精，用研钵研磨叶片，使叶绿素溶解在酒精中；4.将研磨好的悬浮液倒入试管中，用玻璃棒搅拌均匀；5.用过滤纸过滤悬浮液，得到褐绿色的叶绿素酒精溶液。
对于叶绿体中色素的分离，可以通过色谱技术实现。
常用的色谱技术有薄层色谱法和色谱柱法。
其中，薄层色谱法适用于对色素进行初步分离和检测，而色谱柱法适用于对色素进行精细分离和定量分析。
【实验步骤】1.将酒精提取得到的叶绿素酒精溶液滴在薄层色谱板上；2.将薄层色谱板放入色谱槽中，注入色谱移动相，使之静置一段时间，待色素被吸附；3.取出薄层色谱板，将其放在试验纸上，用铅笔轻轻描绘出色素分布的斑点；4.将带有色素斑点的色谱板放入色谱槽中，注入色谱移动相，使之静置一段时间，让色素分离；5.取出色谱板，将其放在试验纸上，再次描绘出色素分布的斑点，比较与第一次描绘的斑点；6.根据色素斑点出现的位置，判断叶绿体中主要含有的色素成分。
【实验记录】实验记录表【实验结果分析】根据色素分离的结果和斑点分布位置的变化，可以初步确定叶绿体中含有的主要色素成分。
叶绿体中主要包含的色素有叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素等。
叶绿素a和叶绿素b是叶绿体中最常见的两种色素，它们在薄层色谱板上的斑点通常位于相对位置较低的地方，而类胡萝卜素则位于相对位置较高的地方。
【实验结论】通过叶绿体中色素的提取与分离实验，初步确定叶绿体中主要包含叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素等色素成分。
【思考题】1.为什么要进行色素的提取与分离实验？2.除了实验中所使用的方法，你还知道其他提取与分离色素的方法吗？3.叶绿体中的色素对光合作用有什么影响？。
叶绿素的提取和分离实验
绿
离 实 验
素 的 提 取
与
分
捕获光能的色素
绿叶中会有哪些种类的色素呢？ 它们分别是什么颜色的？ 各种色素在绿叶的含量相同吗？
实验：绿叶中色素的提取与分离
实验材料和用具 (1)材料：新鲜的绿色叶片(如菠菜叶片) ; (2)用具：无水乙醇，层析液，二氧化硅，碳 酸钙；干燥的定性滤纸，烧杯(100ml)，研钵， 小玻璃漏斗，尼龙布，毛细吸管，剪刀，小试管， 培养皿盖，药勺，量筒(10ml)，天平。
胡萝卜素 叶黄素 叶绿素a
从上到下 胡黄 a b
叶绿素b 层析液
滤液细线
捕获光能的色素
绿叶中会有哪些种类的色素呢？ 它们分别是什么颜色的？ 各种色素在绿叶的含量相同吗？滤纸上色带的排列顺序如何？
实验讨论：
宽窄如何？说明什么？
捕 获 光
类胡萝 胡萝卜素 卜素 (占1/4) 叶黄素
能
的
叶绿素a
色 素
叶绿素
(占3/4)
叶绿素b
实验中的注意事项
(1)选材：应选取鲜嫩、颜色深绿的叶片，以保证含有较多 的色素。
(2)提取色素：研磨要迅速、充分，且加入几种物质（注意 SiO2和CaCO3）的量要成比例，以保证提取较多的色素和色素浓度 适宜。
(3)制备滤纸条：剪去两角，以保证色素在滤纸条上扩散均 匀、整齐，便于观察实验结果，否则，会形成弧形色素带。
实验：绿叶中色素的提取和分离
重点一：实验原理 (1)提取：叶绿体中的色素易溶于无水乙醇等 有机溶剂中。 (2)分离：叶绿体中的各种色素在层析液中溶 解度不同。
重点二：方法与步骤
1．提取色素
SiO2：使绿叶 充分研磨。 CaCO3：防止研 磨时色素受到破坏。 过滤：单层尼 龙布
叶绿体中色素的提取和分离,实验报告
叶绿体中色素的提取和分离,实验报告实验报告设计叶绿体中色素的提取和分离叶绿体中色素的提取和分离一、实验目标1、知识方面（1）探究叶绿体中含有几种种色素：理解它们的特点及与光合作用的关系（2）了解纸层析法的原理。
2、能力方面掌握提取和分离叶绿体中色素的方法。
3、情感态度与价值观方面认识生物科学的价值，乐于学习生物科学，养成质疑、求实、创新及勇于实践的科学精神和科学态度二、实验原理1、色素提取的原理：叶绿体中的色素能溶于有机溶剂中，故可用丙酮和无水乙醇提取色素。
2、色素分离的原理：叶绿体中的各种色素在层析液中的溶解度不同。
溶解度大的色素，在滤纸上随层析液的扩散速度快；溶解度小的色素，在滤纸上随层析液的扩散速度慢。
三、实验准备实验材料：新鲜的绿叶（如新鲜菠菜叶片）。
实验仪器及用具：定性滤纸，研钵，玻璃滤斗，脱脂棉，尼龙布，毛细吸管，剪刀，药勺，量筒（10mL），天平，试管，试管架，滴管，培养皿，三角瓶，烧杯试验试剂：无水乙醇（或丙酮），层析液（CCl4），石英砂（SiO2）和碳酸钙（CaCO3）四、实验步骤1、叶绿体色素的提取（1）取菠菜新鲜叶片5g，洗净，擦干，去掉中脉，剪碎，放入研钵中。
（2）向研钵中加入少许碳酸钙和二氧化硅，再加10mL无水乙醇，进行迅速、充分研磨（二氧化硅有助于研磨得充分，碳酸钙可防止研磨中色素被破坏）。
（3）将研磨液迅速倒入漏斗（漏斗基部放一块单层尼龙布）中进行过滤。
将滤液收集到试管中，及时用棉塞将试管口塞严。
2、制备滤纸条用预先干燥处理过的定性滤纸，将滤纸剪成长10 cm、宽1cm 的滤纸条，在滤纸条的一端剪去两角（防止层析液在滤纸条的边缘扩散过快），并在距离这一端1cm处用铅笔画一条细的横线。
3、画滤液细线用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀地画出一条细而直的滤液细线。
待滤液干后，再画二三次。
4、分离叶绿体中的色素将3 mL层析液到入烧杯中，将滤纸条（有滤液细线的一端朝下）略微斜靠着烧杯的内壁，轻轻地插入到层析液中，随后用培养皿盖盖上烧坏。
叶绿体色素的提取和分离
叶绿体色素的提取和分离Ⅰ．提取与分离一、原理叶绿体中含有绿色素（包括叶绿素a和叶绿素b）和黄色素（包括胡萝卜素和叶黄素）两大类。
它们与类囊体膜相结合成为色素蛋白复合体。
这两类色素都不溶于水，而溶于有机溶剂，故可用乙醇等有机溶剂提取。
提取液可用色谱分析的原理加以分离和鉴别。
因吸附剂对不同物质的吸附力不同，当用适当的溶剂推动时，混合物中各种成分在两相（固定相和流动相）间具有不同的分配系数，所以移动速度不同，经过一定时间后，可将各种色素分离。
常用的色谱分析有薄层层析和柱层析两种。
二、材料、仪器设备及试剂（一）材料菠菜、小白菜叶片（二）仪器设备研钵，漏斗、三角瓶、剪刀，滴管，培养皿（直径11c m），平底短玻管，圆形滤纸（直径11c m），薄层色谱硅胶预制板。
（三）试剂（1）95%乙醇。
（2）石英砂。
（3）碳酸钙粉。
（4）展开剂：按石油醚：丙酮：苯（7:5:1）比例配制（V/V）。
三、实验步骤1．叶绿体色素的提取（1）取小白菜叶片3g左右，洗净，擦干，去掉中脉剪碎，放入研钵中。
（2）研钵中加入少量碳酸钙粉，加2~3m l95%乙醇，研磨至糊状，再加10~15m l9.5%乙醇，上清液用漏斗过滤，残渣再用10m l9．5%乙醇冲洗一次，一同过滤于三角瓶中。
2．叶绿体色素的分离（1）取薄层色谱硅胶预制板一个，用点样毛细管吸取乙醇叶绿体色素提取液，沿硅胶板的长度方向涂在板的一边，使色素扩散的宽度限制在0.5c m以内，风干后，再重复操作数次。
（2）在层析缸中加入适量的展开剂，将硅胶板带有色素的一端插入层析缸中，使硅胶板下端浸入展开剂中（但不要使色素带进入展开剂中）。
迅速盖好层析缸盖。
此时，展开剂借毛细管引力顺滤纸条向上扩散，并把叶绿体色素向上推动，不久即可看到各种色素的色带。
（3）当展开剂前沿接近硅胶板边缘时，取出硅胶板，风干，即可看到分离的各种色素；叶绿素a为蓝绿色，叶绿素b为黄绿色，叶黄素为鲜黄色，胡萝卜素为橙黄色。
实验三叶绿体色素的提取分离和性质分析
提取效率
通过比较不同提取时间、不同溶 剂浓度和不同提取温度对提取效 率的影响，发现最佳提取条件为 提取时间30分钟，溶剂浓度为
95%，提取温度为4°C。
提取物纯度
通过观察提取液的颜色和吸光度 ，可以初步判断提取物的纯度。 在最佳条件下，提取液颜色深且 吸光度较高，说明提取的叶绿体
色素纯度较高。
叶绿体色素的分离结果分析
将叶绿素标准品制作成标准曲线，根据标准曲线计算提 取液中各色素的浓度。
用分光光度计在400~700nm波长范围内扫描色素提取 液，记录各波长下的吸光度值。
根据各色素的浓度和吸光度值，计算各色素的吸收系数 和相对含量。
04
CATALOGUE
结果分析
叶绿体色素的提取结果分析
提取方法
采用研磨法从植物叶片中提取叶 绿体色素，该方法能够充分破碎 细胞壁，释放出叶绿体中的色素
实际应用
生态意义
了解叶绿体色素的组成和性质有助于 深入探究植物对光能的吸收和利用机 制，对于维护生态平衡和保护环境具 有重要意义。
实验结果可用于指导农业生产、园艺 和林业等领域，通过合理调节植物的 光合作用，提高作物的产量和品质。
对实验的反思和改进建议
反思
在实验过程中，需要注意操作的规范性和准确性，以避免误差和干扰因素对实验结果的影响。同时，需要充分考 虑实验的安全性和环保性。
工业应用
叶绿体色素在食品、化妆 品、染料等领域有广泛应 用，具有潜在的经济价值 。
02
CATALOGUE
实验原理
叶绿体色素的组成和结构
叶绿体色素是由多种色素分子构成的 复合物，主要包含叶绿素a、叶绿素 b、叶黄素和胡萝卜素等。
叶绿素a和叶绿素b具有卟啉环结构， 是光合作用的主要色素分子，而叶黄 素和胡萝卜素则具有类胡萝卜素的结 构。
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》在日常生活和工作中，我们都不可避免地要接触到报告，报告中涉及到专业性术语要解释清楚。
你还在对写报告感到一筹莫展吗？下面是我为大家收集的生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》，仅供参考，大家一起来看看吧。
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》1一、实验目的1.学会提取和分离叶绿体中色素的方法。
2.比较、观察叶绿体中四种色素：理解它们的’特点及与光合作用的关系二、实验原理光合色素主要存在于高等植物叶绿体的基粒片层上，而叶绿体中的色素能溶于有机溶剂中。
故要提取色素，要破坏细胞结构，破坏叶绿体膜，使基粒片层结构直接与有机溶剂接触，使色素溶解在有机溶剂中。
叶绿体中的色素有四种，不同色素在层析液(脂溶性强的有机溶剂)中的溶解度不同，因而随层析液的扩散速度也不同。
三、材料用具取新鲜的绿色叶片、定性滤纸、烧杯、研钵、漏斗、纱布、剪刀、小试管、培养皿、毛细吸管、量筒、有机溶剂、层析液(20份石油醚、2份丙酮、1份苯混合)、二氧化硅、碳酸钙。
四、实验过程（见书Ｐ54）1.提取色素：2.制备滤纸条：3.色素分离，纸层析法。
（不要让滤液细线触及层析液）4.观察：层析后，取出滤纸，在通风处吹干。
观察滤纸条上出现色素带的数目、颜色、位置和宽窄。
结果是：4条色素带从上而下依次是：胡萝卜素(橙黄色)、叶黄素(黄色)、叶绿素a(蓝绿色)、叶绿素b(黄绿色)。
五、讨论1.滤纸条上的滤液细线为什么不能接触到层析液？2．提取和分离叶绿体中色素的关键是什么？生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》2一、实验目的1.学会提取和分离叶绿体中色素的方法。
2.比较、观察叶绿体中四种色素：理解它们的特点及与光合作用的关系二、实验原理光合色素主要存在于高等植物叶绿体的基粒片层上，而叶绿体中的色素能溶于有机溶剂中。
故要提取色素，要破坏细胞结构，破坏叶绿体膜，使基粒片层结构直接与有机溶剂接触，使色素溶解在有机溶剂中。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
类胡萝卜素 50
叶绿素b 叶绿素a
0
波长
二、捕获光能的色素和结构
（一）捕获光能的色素
色素
叶绿素a （蓝绿色）
叶绿素 叶绿素b
（黄绿色） 含量约占3/4
类胡萝卜素
叶黄素 （黄色） 胡萝卜素 （橙黄色）
含量约占卜素主 要吸收蓝紫光
叶绿素主要吸收 红光和蓝紫光
课堂检测
1、在叶绿体色素的提取和分离实验中在滤纸条上扩散速度 最快的色素是（ ） A、叶绿素a B、叶绿素b C、胡萝卜素 D、叶黄素
4、在圆形滤纸的中央点上，对叶绿体的色素进行色素分析， 会得到近似，同心的四个色素环，排到在最里圈的色素是 （） A、橙黄色 B、蓝绿色 C、黄色 D、黄绿色
练习
1、在植物实验室的暗室内，为了尽可能地降
低植物光合作用的强度，最好安装（ B）
A、红光灯 B、绿光灯 C、白炽灯 D、蓝光灯
2、为提高大棚蔬菜的产量，哪项措施更有效
5、下图是叶绿体色素的提取与分离实验中所用的材料与用具。请回答： 分别在A、B、C三个研钵中加入2克菠菜，经研磨、提取得到三种颜色的溶液： 深绿色、黄绿色（或褐色）、几乎无色。注：“+”表示加，“—”表示不加。
处理 二氧化硅（少量） 碳酸钙（少量） 95%乙醇（10ml） 蒸馏水（10ml）
ABC +++ —+ + + —+ —+ —
（ D）
A、安装红色透光薄膜 B、安装蓝紫色透光薄膜
C、安装绿色透光薄膜 D、安装无色透光薄膜
练习
3．在圆形滤纸的中央点上粘叶绿体的色素滤液， 进行色素分析，会得到近似同心环状的四个色素圈，
排在外圈的色素呈 [ A]
A．橙黄色 B．黄色 C．蓝绿色 D．黄绿色
4、(1)在“叶绿体色素的提取和分离实验”中，将叶绿体 色素进行分离的方法名称是_纸__层___析__法_。(2)某学生在实验 过程中将划有滤液细线的滤纸条(已重复几次划线)插入层 析液，几分种后取出观察，发现在滤纸条上无色素分带现 象，而其他用同一滤液作实验的同学的滤纸条上却色素分 带明显。其实验失败的原因最可能是_滤__液__线___浸__入__层__析__。液
⑵、分离色素
制备滤纸条：剪去两角－使扩散均匀，防止边
缘毛细现象
画滤液细线：直、细、浓(风干后重复数次）
层析液不能没及滤液细线：防止色素 溶于层析液
层析分离 加盖：防止挥发
洗手：丙酮有毒
类 胡 萝 卜 素
叶 绿 素
吸收光能百分比 叶绿素a、b主要吸收：蓝紫光和红光
100
胡萝卜素和叶黄素主要吸收： 蓝紫光
（1）A处理得到的溶液颜色是 黄绿色 ，原因是__叶__绿__素_被__破__坏__________
（2）B处理得到的溶液颜色是 几乎无色，原因是__色_素__未__被__提__取_出__来_______
（3）C处理得到的溶液颜色是 深绿色 ，
（4）划滤液细线要求____细__、__直__、_浓________ （5）分离色素时关键注意 层析液不要没及滤液细线 ，加盖的目的__防__止__挥_发__
2、叶绿体中色素的提取和分离的实验目的是（ ） A、观察多种色素的吸收光谱 B、验证叶绿体中色素的种类和多种色素的颜色。 C、提取高等植物叶绿体中的色素 D、用纸层析法将色素进行分离
3、用纸层析法将色素进行分离，在滤纸条上出现最宽的一 条色素带的颜色是（ ） A、橙黄色 B、黄色 C、蓝绿色 D、黄绿色
叶绿体中色素的提取和分离实验
一、叶绿体中色素的提取和分离实验
1、实验原理 提取：色素能溶解在有机溶剂中，不溶于水
如：丙酮溶液 无水乙醇 分离：色素在层析液中溶解度不同，使四种色素
随层析液在滤纸上扩散的速度不同而分离
2、实验用具
新鲜的绿叶（菠菜叶）
3.方法与步骤： （1）提取：称
取5g左右的鲜叶，剪碎， 放入研钵中。加少许的 石英砂（充分研磨）和 碳酸钙 (保护叶绿素) 与丙酮溶液。在研钵中 快速研磨。将研磨液进 行过滤。
（6）色素分离的结果：相邻色素带间距最宽的是 他们的颜色是 橙黄色 和 黄色 ，主要吸收 蓝紫
胡萝卜素 和 叶黄素 ， 光。