国产利福平胶囊生物利用度的实验研究

目录

中文摘要与关键词 (1)

1.引言 (2)

2.材料与方法 (3)

2.1药品与试剂 (3)

2.2主要仪器 (3)

2.3研究对象 (3)

2.4血药浓度测定 (3)

2.4.1色谱条件 (3)

2.4.2标准对照溶液和内标溶液配制 (4)

2.4.3血清处理与测定 (4)

2.4.4制备标准曲线 (4)

2.4.5回收率试验 (4)

2.4.6精密度试验 (4)

2.5生物利用度研究方法 (4)

2.6数据处理 (4)

3.结果 (4)

3.1药代动力学参数 (5)

3.2利福平生物利用度及等效性评价 (5)

4.讨论 (5)

.参考文献 (5)

[摘要]为了探讨抗结核药利福平胶囊的生物利用度，并且依据其生物利用度评价其作用的安全性和疗效，本研究采用交叉设计的方法，对3个生产国产利福平的生产厂家的产品进行了测定，同时以健康志愿者为研究对象，通过反相高效液相色谱法对其口服国产利福平和进口利福平后的血药浓度进行了测定，通过新药数据统计处理软件NDST程序对血药浓度峰值(Cmax)、达到最高峰值的时间(Tmax)

以及半衰期(t

1/2)、药-时曲线下面积(AUC

0-a

)的检测，结果发现，血药浓度经3P87

程序处理后，利福平符合一室模型；被测试剂与标准试剂相互比较得出3个厂家生物利用度都比较高，经检验得出其生物等效性合格。

[关键词]国产；利福平胶囊；生物利用度；实验研究

国产利福平胶囊生物利用度的实验研究

1引言

近年来，结核病在全球范围内又死灰复燃，成为传染病的首位杀手。目前，我国的结核病疫情仍然十分严重，其流行趋势及特点存在结核菌感染人数多、结核病死亡人数多、耐药结核病人多、传染性肺结核病疫情居高不下五多一高的特点。因此，卫生部将结核病列为全国重点控制的重大疾病之一。国产利福平胶囊是一种抗结核药物，该药可以减少患者服药后的不良反应同时，还可以缩短疗程。本次研究以国产利福平胶囊中的主要成分为检测目标，对国产利福平胶囊生物利用度进行了检测，在临床上具有重要的意义。现在报告如下。

2材料与方法

2.1药品与试剂

国产利福平胶囊（300mg，取样于我国3个生产利福平的厂家），以意大利进口利福平胶囊作为参比标准。以利福喷丁（RFT）为内标物；以甲醇、乙睛作为色谱纯试剂，其它均为分析纯。

2.2主要仪器

日立6200高效液相色谱仪。

2.3研究对象

对于每个利福平产品都选择10名健康男性志愿者进行测试，志愿者平均年龄为31.3岁，平均体重为68.8kg，体检结果证明，所以志愿者的肝功、乙肝5项、丙肝1项、肾功能、血糖指数、心电图等都处于正常，精神状态良好，排除试验一周前服用其它药物，试验期间不吸烟、不喝酒；所有志愿者在试验前均签署了知情同意合同书。

2.4血药浓度测定

2.4.1色谱条件

采用日立ODS柱（4mm×150 mm，5um，3056#凝胶）的色谱柱，在柱前加预柱，采取pH值为5.0的流动相（配比为33：67的磷酸二氢钾-甲醇），流速控制在1毫升/分钟，检测波长和柱温分别为336nm和28℃。

2.4.2标准对照溶液和内标溶液的配制

配制10ug/ml的利福平血清溶液作为标准应用液，配制3ug/ml的利福平乙睛溶液作为内标应用液。

2.4.3血清处理与测定

取0.5ml的血清加入pH值为4.0的1mol/L的磷酸缓冲液50ul，充分震荡后向内继续添加1.5ml的内标应用液，旋涡混合数分钟后，在3000转/分下进行离心15分钟，取上层清液于另一试管中在37℃下进行水浴采用吹氮挥干，然后向内加入30%的甲醇，在10000转下离心5分钟后，取上层清液用以进样40ul。2.4.4制备标准曲线

分别配制利福平血清溶液不同梯度为20、15、10、5、2、1、0.5ul/ml，同2.4.3方法进行处理，然后以浓度为横坐标，利福平和内标的峰高比值为纵坐标制备标准曲线：Y=0.1757X-0.03，r=0.9998，其中检测底限为0.026ug/ml（S/N 为3）。

2.4.5回收率试验

采用空白的血清配制利福平浓度为10、5、1ml/L的样品，如上述方法操作，每一个浓度平均测定5次左右，根据标准曲线求的回收率，得出利福平的平均回收率为（105.99±5.51）%。

2.4.6精密度试验

按上述方法配置利福平血清样品高、中、低浓度，在1天内进样5次，求取日内差，另而每天进样1次，进6天，求取日间值。分析结果发现利福平的日内值不大于0.82%，日间值不大于2.90%。

2.5利福平生物利用度研究采用的方法

本次研究采用交叉设计的方法，将10名健康男性志愿者随机分为两组，给予国产和进口利福平交叉服用的方式，交叉服药间隔为10天，服药前让志愿者禁食12小时后，口服利福平胶囊600mg，于服药前后0.5、0.75、1.0、1.5、2.0、4.0、6.0、12.0小时分别采志愿者前臂静脉血3-4ml，制备血清，在服药后统一进行饮食，统一护理。

2.6数据处理采用的方法

每名志愿者服药后的血药浓度-时间数据分别采用3P87程序处理，得出药-时的曲线和主要药代动力学参数，同时采用NDST程序进行处理。

3结果

3.1药代动力学参数

受试者服用两种胶囊的血药浓度经程序处理后，发现利福平符合一室模型，从表1中可以看出其主要药代动力学参数。

3.2国产利福平生物利用度和等效性评价

被测试剂与标准试剂相互比较得出3个厂家生物利用度都比较高，分别为(110.3±17.1)%，(105.7±22.5)%，(107.9±19.9)%，经检验得出其生物等效性合格。

表1 3个厂家利福平胶囊服后主要药代动力学参数显示

注：血药浓度峰值(Cmax)、最高峰值的时间(Tmax)、半衰期(t1/2)、药-时曲线下面积(AUC0-a)；被试制剂(A)，参比制剂(B)。

4讨论

在卫生部为了控制结核病而进行国际招标的药物主要有链霉素、利福平、异烟肼、乙胺丁醇等几种，而当前的利福平、异烟肼在生物利用度上仍然还存一些问题，而这两种药物是结核病治疗的主力药物，同时结核病的控制一般是大范围的开展，所以建议厂商提供相关的生物利用度资料。本次研究中发现，3家利福平生产厂家的生物利用度都比较高，但鉴于样品不是随机抽样，因而还应该继续加强对该产品的质量检测力度。

[参考文献]

[1赵伟杰等.国产利福平胶囊生物利用度考察[J].药物研究.2005,14(3):28～29

[2]张黎莉.复方利福平微丸胶囊中利福平在犬体内的生物利用度研究[J]中国抗生素杂志.2004,29(12):755-757