非发酵菌()

微生物检验
❖ 鉴定：氧化酶（-），明胶液化试验（+）， 七叶苷（+），赖氨酸脱羧酶（+）， 氧化分解葡萄糖。
药敏试验
❖ 含内酰胺酶。 ❖ 临床治疗首选磺胺类和奎诺酮类抗生素。 ❖ 对亚胺培南天然耐药 ❖ 不用K-b法做药敏试验。
嗜麦芽窄食单胞菌初步鉴定要点
❖ 在血平板和MAC上生长良好 ❖ 氧化酶（-） ❖ OF试验氧化型 ❖ 赖氨酸脱羧酶阴性 ❖ 可产黄色色素 ❖ 抗生素的敏感方式
黄杆菌属
❖ 3.存在于水、土壤和蔬菜中，还可从口腔、上呼 吸道、皮肤中检出，是条件致病菌，也是引起医 院感染的常见菌。可引起术后感染、菌血症、在 新生儿及婴幼儿的化脓性脑膜炎中分离出脑膜败 血性黄杆菌比例较高。
黄杆菌属
❖ 4. Ｇ-杆菌，需氧代谢，血琼脂培养基生长 良好，典型菌落为淡黄色，氧化酶、触酶、磷酸 酶阳性。
毛抗原。
❖抵抗力:耐潮湿、干燥、紫外线，不耐热和消
毒剂，临床分离的菌株多耐药。
铜绿假单胞菌检验
❖ 1．标本采集 按疾病和检查目的，分别采 取不同的标本：患
者的血液、脑脊液、胸(腹)水、脓液、分泌液、痰、 尿液、十二指肠引流液、粪便等；医院病区或手术 室的空气、水、地面、把手、医疗诊断器械及生活 用品。
检验程序
检验方法
❖直接镜检：G-杆菌
❖分离培养：在普通培养基生长良好，
经18—24h形成圆形、扁平隆起、湿润菌落。 琼脂被染成绿色或黄绿色，约80％-90％ 产生绿脓素或荧光素。在血平板上表现为： 菌落大而扁平、湿润、边缘不齐；有金属 光泽；有生姜样芳香气味；菌落周围有宽 大的兰绿色透明溶血环。
❖ 抗原检测和分型：
微生物检验
❖ 分离培养：血平板形成圆形、灰白 色、光滑、边缘整齐、直径23mm的菌落。洛菲不动杆菌菌落 小，1-1.5mm。溶血不动杆菌可出 现溶血。MAC平板生长良好，鲍 曼不动杆菌可呈轻微红色。
❖ 鉴定：氧化酶（-）、动力（-）、 硝还（+）
药敏试验和结果解释
❖ 可采用K-B法药敏试验 ❖ 鲍曼不动杆菌对全部氨基青霉素、一代二代
头孢菌素和一代奎诺酮类抗生素天然耐药。
鲍曼不动杆菌初步鉴定要点
❖ OF试验：O/❖ MAC 上生长良好，菌落呈轻微粉红色 ❖ 氧化酶（-） ❖ 快速分解葡萄糖和乳糖 ❖ 无动力 ❖ 对青霉素耐药
产碱杆菌属
❖ 1.与临床有关的有粪产碱杆菌及亚型、皮乔特产碱 杆菌、木糖氧化产碱杆菌及亚种，DNA G+C mol%为 56～70，典型菌种为粪产碱杆菌。
生物学性状
❖ 普通琼脂培养基上 能产生水溶性绿色 素，使整个培养基 变为绿色。MAC培养 基上，18-24h可形 成微小无光泽半透 明的菌落。SS平板 上可行成类似沙门 菌的菌落。
生物学性状
❖生化反应：氧化酶阳性，触酶阳性，O/F氧
化型，精双（+）还原硝酸盐。
❖抗原构造和分型：菌体O,鞭毛H,粘液S和菌
微生物特性
❖ G-杆菌，具有端鞭毛1-8根，有动力，无芽孢 无荚膜。
微生物检验
❖ 标本采集：血液标本先增菌 后分离培养，其他标本直接 接种。
❖ 分离培养：营养需求不高， 在血平板和普通琼脂平板上 生长良好，经35℃培养1824h后可形成中等大小、圆 形、光滑、湿润、不溶血的 菌落，并可产黄色色素。 4℃不生长，42 ℃近半数生 长。并在MAC平板上生长良 好。
生物学性状
❖ 形态与染色：G- 杆菌，
多形性，有鞭毛、菌毛、 荚膜，无芽孢,产荧光素和 绿脓素
❖ 培养特性：专性需氧，
4℃不生长42 ℃生长，在 血平板上经35—37℃， 18—24h培养可表现为：菌 落大而扁平、湿润、边缘 不齐,有金属光泽,有生姜 样芳香气味,菌落周围有宽 大的兰绿色透明溶血环。
军团菌属
❖ G-杆菌，无芽孢,无荚膜,有菌毛和单端鞭毛。严格需氧，触 酶+ ,部分菌株氧化酶+。
❖ 营养要求苛刻，生长缓慢，初次分离需用BCYE培养基。 ❖ 鉴定：根据色素产生情况建立BCP斑点实验法。 ❖ 治疗：首选红霉素，可加用利福平、氨曲南 。氨基糖苷类、
青霉素、头孢菌素类无效。
检验结果分析与报告
❖ 1.结合感染症状，在血、尿及无菌体液中 检出特别是重复检出即可确定为病原菌。
❖ 2. 若无感染症状，特别是儿童，检出的革 兰阴性杆菌可视为正常菌群。
❖ 3.注意铜绿假单胞菌的耐药性。
嗜麦芽窄食单胞菌
分类
❖ 分类曾经过两次反复 ，最终定为假单胞菌属。
临床意义
❖ 分布广泛，为条件致病菌，可引起抵抗力低 下患者呼吸道、泌尿道、伤口等部位的感染， 严重者可出现菌血症和心内膜炎。 假单胞菌的感染中居第二位，非发酵菌所致 的感染中居第三位。
❖ 2.人体的正常菌群，是医院感染的病原菌，可引起 抵抗力低下患者发生败血症，并可从患者呼吸道、 尿液、血液及脑脊液中分离出来。
产碱杆菌属
❖ 3.为G-杆菌，呈链状、周鞭毛、有动力，无 荚膜。
❖ 4.在普通培养基上18～24h形成无色透明菌 落 。氧化酶及触酶均阳性，不分解任何糖类， O-F试验碱性，脲酶阴性，不液化明胶。
检验方法
❖鉴定：氧化酶阳性，触酶阳性，O-F试
验氧化型、木糖产酸不产气，液化明胶， 还原硝酸盐产生氮气，吲哚阴性，利用枸 橼酸盐，精氨酸双水解酶阳性。
❖ 铜绿假单胞菌快速鉴定要点：
❖ 1、能产生绿色素。 ❖ 2、血平板上菌落大而扁平、湿润、边缘
不齐；有金属光泽；有生姜样气味；菌 落周围有宽大的兰绿色透明溶血环。 ❖ 3、氧化酶阳性
❖ 营养要求一般，在普通琼脂平板和 MAC平板上均能生长。 SS平板上部 分菌株可生长。
微生物检验
❖ 检验程序：
微生物检验
❖ 标本采集：对于含菌量较多的标本采取直接 接种血平板和麦康凯平板，含菌量较少的标 本需增菌后再培养。
❖ 直接镜检：标本经革兰染色后镜检可见G-球 杆菌常成双排列，并可见白细胞吞噬现象。
❖ 2.本菌能引起眼结膜炎、气管炎、肺炎、脑膜 炎、脑脓肿、心炎、心内膜炎及泌尿生殖系统炎症。 近年来非液化莫拉菌引起脑膜炎及婴幼儿菌血症者 日益多，应引起高度重视。
莫拉菌属
❖ 3.为Ｇ-球杆菌，双短链状排列，具有多形性。 ❖ 4.本菌营养要求较高，血琼脂平板上生长，无色
不溶血的菌落。本菌氧化酶阳性，触酶阳性，无动 力，不分解糖类，吲哚试验阴性。 ❖ 5.对青霉素类敏感，对头孢类、四环素类、氨基 糖甙类药物均为敏感。
黄杆菌属
❖ 1.为一群无动力和芽胞、氧化酶阳性的G-杆菌。 与临床相关菌种有短黄杆菌、脑膜炎败血性黄杆 菌、芳香黄杆菌、水田黄杆菌、嗜糖黄杆菌、嗜 醇黄杆菌、嗜温黄杆菌。模式菌种为水田黄杆菌。
❖ 2.本菌有两个特点：产生黄色素,菌落多数呈黄 色 ； 分 解 碳 水 化 合 物 产 酸 不 产 气 。 DNA G+C mol%含量31～42。
分群依据
❖ 氧化酶试验 ❖ 葡萄糖氧化发酵试验 ❖ 动力试验
二、 非发酵初步分群
假单胞菌属
❖ 假单胞菌属为需氧、有鞭毛、无芽胞、无 荚膜的革兰阴性杆菌，氧化酶试验阳性，DNA G+C为58～71mol％，包括200余种菌。多数为 腐生菌，少数为植物和动物寄生菌，大多为条 件致病菌。 代表菌株为铜绿假单胞菌
黄杆菌属
❖ 5. 临床上常见的脑膜炎败血性黄杆菌及芳香黄 杆菌对广谱抗菌药(如氨基糖甙类、β-内酰胺酶 类、四环素类、氯霉素)有耐药性，应根据药敏 试验选择用药。
莫拉菌属
❖ 1.与临床有关的有缺陷莫拉菌、犬莫拉菌、非 液化莫拉菌、亚特兰大莫拉、林肯莫拉菌、苯丙酮 酸 莫 拉 菌 、 奥 斯 陆 莫 拉 。 DNA G+Cmol ％ 为 40 ～ 47．5。
非发酵革兰阴性杆菌
定义
❖ 非发酵革兰阴性杆菌，指一大群不发酵葡 萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼 性厌氧、无芽胞的革兰阴性杆菌；多为条件 致病菌。
O-F试验
发酵型（F）
氧化型(O)
产碱型(-)
分类
非发酵革兰阴性杆菌包括假单胞菌属、产碱 杆菌属、无色杆菌属、不动杆菌属、莫拉菌属、 金氏杆菌属、黄杆菌属、艾肯菌属、土壤杆菌 属、黄单胞菌属、丛毛单胞菌属等。
共性 :G-杆菌，无芽孢，有荚膜，多数菌 有鞭毛，专性需氧菌，生长温度范围广， 最适35度 ，普通培养基上可以生长，可 产各种水溶性色素。抵抗力强，多种抗生 素耐药
微生物检验
2.鉴定：氧化分解葡萄糖、产酸不产气，触酶 氧化酶阳3.药敏试验 A组：头孢他定、庆大霉素、美洛西林、替卡西林、哌拉西林 B组：头孢吡肟、头孢哌酮、氨曲南、亚胺培南、阿米卡星、
不动杆菌属
分类
❖ 定义：为一群不发酵糖类、氧化酶阴性、不 能运动的G-杆菌。
❖ 属奈瑟菌科 ❖ 17个杂交群 ❖ 临床分离最多的为鲍曼不动杆菌，排在非发
酵菌的第二位，仅次于铜绿假单胞菌。
临床意义
❖ 分布广泛 ❖ 条件致病菌 ❖ 医院感染的常见病原菌
微生物特性
❖ G-球杆菌，常成对排列，也可单个存 在。无芽孢，无鞭毛，粘液型菌株有 荚膜。
妥布霉素、环丙沙星
C组：头孢噻肟、氯霉素 U组：羧苄西林、头孢唑肟、四环素、诺氟沙星、SMZ
铜绿假单胞菌
临床意义
铜绿假单胞菌广泛存在环境中，加之多种传 播途径和污染，因此易感染,特别是免疫力低下 的患者。引起: 1.皮肤感染、呼吸道感染、泌尿道感染、烧伤感 染 2.菌血症、心内膜炎、囊性纤维变性 3.感染眼部的铜绿假单胞菌，可以合成胶原酶， 以致引起角膜穿孔而失明。
临床意义
❖ 假单胞菌属分布广泛，土壤、水和空气中均有 存 在 ， 人 类 非 发 酵 菌 感 染 中 ， 假 单 胞 菌 占 70 ％ ～ 80％，主要为铜绿假单胞菌，其他较为常见的菌种 有嗜麦芽窄食单胞菌、荧光假单胞菌、恶臭假单胞 菌、产碱假单胞菌等。这些菌种也是医院感染的主 要病原菌。