原花色素的提取及测定
原花色素及其开发应用
原花色素及其开发应用一、概述在自然界中，存在着一种特殊的物质，被称为原花色素（原始色素）。
原花色素是一种天然有机化合物，它能够给花朵和其他植物组织以独特的颜色。
原花色素多种多样，每种都有其特定的化学结构和色彩表现。
通过对原花色素的深入探索和开发利用，科学家们发现了它在食品、医药、染料等领域的广泛应用价值。
二、原花色素的来源和分类原花色素可以来源于多种植物，包括花朵、水果、蔬菜等。
不同植物中的原花色素种类和含量各不相同。
2.1 花朵中的原花色素花朵是原花色素的一种常见来源。
不同花朵中的原花色素种类丰富多样，例如紫罗兰中的花青素、菊花中的黄酮类黄色素等。
花朵中的原花色素不仅能够赋予花朵各自独特的颜色，还能吸引昆虫、鸟类等动物进行传粉。
2.2 水果中的原花色素水果也是原花色素的常见来源之一。
例如，蓝莓中含有丰富的花青素，赋予了蓝莓深蓝色的外观；胡萝卜中含有的类胡萝卜素则使其呈现出橙色。
水果中的原花色素不仅仅是为了吸引动物食用，也具有对人体健康的积极影响。
2.3 其他植物组织中的原花色素除了花朵和水果，其他植物组织如茶叶、草本植物等也可能含有原花色素。
它们虽然在呈色方面不如花朵和水果那样鲜艳，但是仍然对一些产品的开发具有重要价值。
三、原花色素的应用原花色素的应用非常广泛，涉及食品、医药、染料等多个领域。
3.1 食品领域中的应用原花色素在食品领域中的应用非常常见。
它们能够为食品添加丰富的色彩，增加食物的吸引力和美感。
例如，蓝莓中的花青素被应用于糕点、冰淇淋等食品中，赋予了这些食品深邃的蓝色。
与化学合成的食品色素相比，原花色素不仅色彩更天然，而且对人体健康更有益。
3.2 医药领域中的应用原花色素在医药领域中也有重要的应用。
许多原花色素具有抗氧化、抗炎、抗菌等生物活性，被广泛应用于药物研发和治疗。
例如，一些花青素类物质被发现具有对癌症、心血管疾病等疾病的预防和治疗作用。
原花色素在药物研发中的应用潜力巨大。
3.3 染料领域中的应用原花色素在染料领域中也有一定的应用。
马占相思树皮中原花色素提取工艺及其生物活性的研究
马占相思树皮中原花色素提取工艺及其生物活性的研究许蕊;姜萍;张颖茵;陆婷婷;李根;张萌卫【摘要】The optimum extraction conditions of three extraction methodsof proanthocyanidins from Acacia mangium Bark were investigated by using orthogonal experiment. The extracted results were compared. Then, the vitro antioxidant and anti-tumor activities of different solvent extracts from ultrasonic extracts were studied. The optimum crafts for traditional solvent extraction method were 60% ethanol,70℃,70 min and ratio of material-liquid 1∶18 (g∶mL,the same belo w),and the obtained yield of proanthocyanidin was 7.42%.The optimum crafts for microwave-assisted extraction were 60% ethanol,8 min for microware time, ratio of material-liquid 1∶18, microwave power 200 W, with the yield of proanthocyanidin 7. 05%. And the optimum crafts for ultrasonic-assisted extraction method were 70 % ethanol, ultrasonic time 50 min, ratio of material-liquid 1∶16, extraction temperature 50℃,and the yield of proanthocyanidin was8.57%.Result of ultrasonic-assisted extraction was the best,due to the low extract temperature and high yield.The results of antioxidant test showed that the ethyl acetate extracts from ultrasonic-assisted extracts exhibited the highest antioxidant activity,as well as the inhibitory concentration 50%( IC50 ) of DPPH.radical scavenging was 17. 94 mg/L, and it was lower than that of vitamin C ( Vc ) . Experimental results of antitumor activity of different solvent extracts showed that the ethyl acetate extract possessed highest antitumor activity for human hepatoma cell Bel-7404 with the IC50of 4.86 mg/L,which was similar to antitumor medicine etoposide.%通过正交试验优化了马占相思树皮中原花色素的3种提取方法的最佳提取工艺条件。
原花色素的提取纯化和测定思考题
原花色素的提取纯化和测定思考题引言原花色素是一种天然的有机化合物，广泛存在于植物中的各种花朵中。
由于其具有丰富的颜色和生物学活性，因此在食品、医药和化妆品等领域有重要的应用价值。
本文将探讨原花色素的提取纯化和测定方法，以期为相关领域的研究提供参考。
提取原花色素的方法1.传统提取方法–固液萃取：将花朵样品与适量的溶剂（如乙醇、乙酸乙酯等）混合，静置一段时间，然后使用过滤或离心等方法分离出液相，即为提取得到的原花色素。
–水蒸气蒸馏：将花朵样品置于蒸馏设备中，用水蒸气蒸馏的方式提取原花色素，得到蒸馏液后，经过适当的提取和分离处理，即可得到纯化的原花色素。
2.现代提取方法–超声波辅助提取：将花朵样品与溶剂混合后，利用超声波的作用，加速花色素的释放和溶解，提高提取效率。
–超临界流体萃取：利用超临界流体（如二氧化碳）的特殊性质，对花朵样品进行提取，此方法不仅能高效提取原花色素，还可避免有机溶剂残留的问题。
原花色素的纯化方法1.溶剂萃取–采用不同极性的溶剂进行多次萃取，可以去除掉一部分杂质，提高原花色素的纯度。
–萃取后的溶液通过旋转蒸发、冷冻干燥等方法去除溶剂，得到浓缩的原花色素溶液。
2.色谱技术–薄层色谱：将原花色素溶液均匀涂在薄层色谱板上，然后将色谱板放入移动相中，通过移动相的上升，原花色素在色谱板上形成斑点，根据斑点的迁移距离和色谱板杂质的位置，可进行分离和纯化。
–高效液相色谱：利用色谱柱和液相色谱设备，通过不同溶液的分配比例，控制原花色素的迁移和分离，从而获得高纯度的原花色素。
原花色素的测定方法1.分光光度法–利用原花色素在特定波长下的吸光度特性，通过分光光度计测量花色素溶液的吸光度，进而确定其浓度和纯度。
–需要制备一系列不同浓度的标准溶液，以建立标准曲线，并通过曲线拟合计算未知样品的浓度。
2.高效液相色谱法–利用高效液相色谱仪对原花色素进行定量测定。
–需要事先确定好色谱柱和流动相的适宜条件，并校准设备，以保证测定结果的准确性和可靠性。
原花青素简介
原花青素（Proantho Cyanidins，PC），又名缩合鞣质，可视作花青素( cyanidin)类物质的聚合物，是自然界中广泛存在的一类多酚类化合物。通常将从植物中分离得到的一切无色的、在无机酸存在和加热处理下能产生红色花青素( cyanidin)的一类多酚化合物统称为原花青素（赵平2011）。最初是在20世纪40年代从花生仁的包衣中提取出来，在50年代又被法国科学家从海松树皮中发现并提取出来，并将其提取率提高到达85%。近来，研究证明原花青素是很强的抗氧化剂，可以清除自由基，其抗氧化、清除自由基的能力是维生素E的50倍、维生素C的20倍，能防治80多种因自由基引起的疾病，包括心脏病、关节炎等，还具有改善人体微循环功能（张长贵2009）。目前，原花青素作为营养强化剂、天然防腐剂、天然抗氧化剂、DNA保护剂等，被广泛应用于食品、药品、化妆品等领域。
4.3 pH示差法
pH示差法是利用原花青素在不同pH下呈色不同的性质进行检测。pH 1.0时，原花青素颜色最深; pH 4.5时，以无色的半缩酮形式存在。pH示差法是基于此反应来快速准确地测量花青素含量的方法（Clifford et al 2000）。pH示差法是一种简便的测定原花青素含量的方法，能很好地消除溶液中杂质对测定结果的影响,可信度较高。
2化学结构及分类
原花青素是以黄烷-3-醇为结构单元通过C-C键聚合而形成的化合物，起初称为黄烷醇类或归于缩合鞣质。其结构分类主要取决于五方面：（1）黄烷-3-醇单元的类型；（2）单元之间的连接方式；（3）聚合程度（组成单元的数量）；（4）空间构型；（5）羟基是否被取代（如羟基的酯化、甲基化等）。根据原花青素的聚合程度可分为单倍体（monomer）、寡聚体（oligomer）和多聚体（polymer）（Alan et al 2008）。其中单倍体是基本结构单元，寡聚体由2～10个单倍体聚合而成，多聚体则由10个以上的单倍体聚合而成（张慧文2015）。
葡萄籽原花色素的提取、改性及抗氧化性研究
种 浪费 。近 ２ ￣３ ０ ０年来 ， 随着对 葡萄皮 、 籽化学成
分和功能的研究 ， 发现 葡 萄皮 、 籽具 有很 高 的开 发利 用价值 ， 如从 葡 萄 皮 中提取 花 青 色 素 、 胶 、 石 酸 果 酒 等［ 。在众 多提取成 分 中葡 萄 籽 中的葡 萄 多酚类 化 ３ ］ 合 物如原花色 素等 ， 由于具 有天 然抗 氧 化性 ， 防止 能 动脉粥样硬化 ， 具有抗凝 血 、 清除 自由基 、 癌抗肿瘤 抗 等多种功 效 ， 因而倍 受关 注［ ］ ４ 。因为 酚类 化合 物具
屈 景 年 ， 曾文 良 ，陈 辉 ，李俊 华
（ 阳师 范学 院 化 学与材 料科 学系 ，湖南 衡 阳 衡
摘
４ １０ ） ２ ０ ８
要 ：采 用均 匀设 计 法 对 葡 萄 籽 原 花 色素 的 提 取 工 艺参 数 进 行 了优 化 ，并 用 油 酸 酰 氯 对 葡 萄籽 原 花 色素 进 行
第 ３ １卷 第 ３ 期 ２０ １０年 ６月
衡 阳 师 范 学 院 学 报
Ｊ ｕ ｎ ｌ ｆ Ｈｅ ｇ ａ ｇ Ｎｏ ｍａ ｉ ｅ ｓｔ ｏ ｒ ａ ｎ ｙ ｎ ｒ ｌ ｏ Ｕｎ ｖ ｒ ｉ ｙ
ＮＯ ．３Ｖｏ１ １ ．３
Ｊ ｎ ．２０１０ ｕ ｅ
葡萄 籽原 花 色 素 的提 取 、改 性 及抗 氧 化 性 研 究
０ 引 言
１ 实 验 部 分
１ １ 主 要 实 验 材 料 与 仪 器 ．
葡 萄是一 种世界性水果 ， 种植 面积和产量 在水果 中都居世界首位 ＿ ， １ 全世 界葡 萄 产量 的 ９ 用 于酿 ］ ０ 造葡 萄酒 ［ 。在葡 萄酒 的加 工过 程 中， ２ ］ 约有 加 工葡 萄 ２ ￣３ 的废弃 物产 生 ， 去 大部分 酒 厂都 把这 ０ ０ 过 些下 脚料 白白丢失 ， 不 仅污染 了环境 ， 资源 也是 这 对
原花色素的提取和测定思考题
原花色素的提取和测定思考题引言原花色素是一类存在于植物中的天然色素，具有多种生物活性和营养价值，被广泛用于食品、医药、化妆品等领域。
本文将深入探讨原花色素的提取和测定方法以及其应用。
原花色素的提取方法原花色素的提取方法通常分为物理方法和化学方法两大类。
物理方法1.水浸提取法–将鲜花、花瓣等植物组织浸入水中，利用植物组织中的原花色素溶解于水中的特性进行提取。
–该方法简单易行，但提取效率较低。
2.酸碱浸提法–将植物组织浸泡在酸性或碱性溶液中，使原花色素与酸碱反应生成可溶于溶液中的化合物，再通过过滤或分离提取原花色素。
–该方法可以提高提取效率，但需要注意溶液浓度和温度的控制。
化学方法1.有机溶剂提取法–利用某些有机溶剂如乙醚、苯等，可以与原花色素有较好的亲和力，将原花色素从植物组织中提取出来。
–该方法提取效率较高，但需要注意有机溶剂的选择和使用条件。
2.超声波提取法–利用超声波的机械振动作用，可以促使原花色素从植物组织中释放出来。
–该方法提取效果较好，但需要注意超声波的频率、功率和时间的选择。
原花色素的测定方法原花色素的测定方法通常分为光度法、色谱法和质谱法三大类。
光度法1.分光光度法–利用原花色素对特定波长的光的吸收特性，通过测定吸光度来确定原花色素的含量。
–该方法操作简单，结果准确度较高。
2.滴定法–利用一定试剂与原花色素发生化学反应，根据反应的滴定终点来确定原花色素的含量。
–该方法对试剂选择和滴定条件有较高的要求。
色谱法1.薄层色谱法–利用原花色素在薄层色谱板上的分离迁移特性，通过对色谱板上的斑点进行扫描和测定来确定原花色素的含量。
–该方法分离效果较好，但需要注意色谱板的样品施加和显色条件的控制。
2.高效液相色谱法–利用液相色谱柱对原花色素进行分离，并通过检测器测定其峰面积或峰高来确定原花色素的含量。
–该方法分离效果更好，且能够对不同种类的原花色素进行定量分析。
质谱法1.毛细管电泳质谱法–利用毛细管电泳将原花色素分离出来，再通过质谱仪器进行检测和定量分析。
植物原花青素(OPC)含量检测试剂盒说明书 微量法
植物原花青素（OPC）含量检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC1355规格：100T/48S产品内容：提取液：60%乙醇，自备，4℃保存。
试剂一：11%盐酸8mL，自备,4℃保存。
即2.4mL盐酸溶于5.6mL蒸馏水试剂二：粉剂×1瓶，4℃避光保存，临用前加8mL提取液溶解。
工作液：临用前按照用量将试剂一和试剂二按照1:1混合。
标准品：粉剂×1支，10mg原花青素。
产品说明：原花色素（Oligomeric Proantho Cyanidins，OPC）是一类黄烷醇单体及其聚合体的多酚化合物，广泛存在于植物的各种器官中，具有极强的抗氧化性和清除自由基的作用，广泛的应用于医药，食品，化妆品，保健品行业。
在酸性条件下，植物原花青素A环上的间苯二酚和间苯三酚与香草醛发生缩合反应，产生有色化合物，在500nm处有特征吸收峰，测定500nm光吸收值，可计算植物中原花青素的含量。
自备实验用品及仪器：天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水、11%盐酸和60%乙醇。
操作步骤：一、OPC提取:将样本烘干至恒重，粉碎，过40目筛之后，称取约0.1g，加入1mL提取液，用超声提取法进行提取，超声功率300W，破碎5s，间歇8s，提取，30min，12000rpm，25℃，离心10min，取上清，用提取液定容至1mL，待测。
二、测定操作表:1、分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至500nm，蒸馏水调零。
2、用提取液将原花青素配制成10mg/mL标准液，用提取液梯度稀释为5、2.5、1.25、0.625、0.3125、0.156、0.078、0.039、0.02、0.01mg/mL的标准溶液。
3、操作表对照管测定管标准管空白管样本（μL）4040标准溶液（mg/mL）40工作液（μL）160160160HO（μL）160402混匀，30℃水浴30min，立即于微量石英比色皿/96孔板中检测500nm处吸光值，计算∆A测定=A测定管-A对照管，∆A标准=A标准管-A空白管。
花色素的提取分离
一、实验目的1.了解原花色素及其分离提纯的常用方法。
2.学会用乙醇抽提法提取分离花色素和比色法测定其含量。
二、实验目的原花色素，也称原花青素（proanthocyanidins）,是一类从植物中分离得到的在热酸条件下能产生花色素的多酚化合物，它既存在于多种水果的皮，核和果肉中，如葡萄，苹果，山楂等。
也存在于如黒荆树，马尾松，思茅松，落叶松等的皮和叶中。
原花色素属于生物类黄酮（flavonoids）,它们是由不同数量的儿茶素或表儿茶素聚合而成，最简单的原花色素是儿茶素的二聚体，此外还有三聚体，四聚体等。
依据聚合度的大小，通常将二至四聚体称为低聚体，而五聚体以上的称为高聚体。
从植物中提取原花色素的方法一般有两种，分别是用水抽提或用乙醇抽提。
其抽提物为低聚物，称之为低聚原花色素（oligomeric proanthocyanidins,简称OPC）。
三．实验仪器1.试剂：花色素标准样品；甲醇；0.1%HCL-95%乙醇（V:V=70:30）；无水乙醇；石油醚；乙酸乙酯；HCL-正丁醇（浓HCL5.0ml加入正丁醇95.0ml，混合即可）；2%硫酸铁氨（硫酸铁氨2.0g溶于2.0mol/L HCL 100.0ml即可）2.器材：冷冻干燥机；旋转蒸发仪；分光光度计；水浴锅；电炉；电子分析天平3.材料：新鲜勒杜鹃花四、实验操作(一)勒杜鹃原花色素的提取1.材料处理：称取新鲜勒杜鹃10.0g，剪碎，置于锥形瓶中，加入3倍体积的石油醚，室温浸泡，脱去脂质物质和叶绿素，过滤，将勒杜鹃样品晾干，备用。
a)花色素的提取：提取剂0.1%HCL-95%乙醇（V：V=70:30）料液比（m：V=1:150），提取时间30分钟，控制提取温度60℃，提取次数2次，即提取液分2次加入。
2.花色素的纯化：由于样品中还是会含有其他杂质，如：蛋白质，维生素（水溶性维生素易溶于水而不易溶于非极性有机溶剂；脂溶性维生素易溶于非极性有机溶剂，而不易溶于水。
原花色素的含量测定研究
关键 词 ： 原花色素； 含量测定 ； 分光光度法； 香草醛
Ｄｅｅ ｍ ｉ ａ ｉ ｎ Ｃｏ ｔｎ ｆＰ ｏ ｎ ｈ ｃ ａ ｉ ｉ ｓ、ｉｈ Ｓ ｅ ｔ ｏ ｈ ｔ ｍｅ ｉ ｅ ｈ ｄ ｔｒ ｎ ｔ ｎ ｅ ｔｏ ｒ ａ ｔ ｏ ｙ ｎ ｄ ｎ ｖｔ ｐ ｃ ｒ ｐ ｏ ｏ ｒｃ Ｍ ｔ ｏ ｏ
Ｋｅ ｒ ｓ ｒ ａ ｔ ｏ ｙ ｎ ｄ ｎ ；ｄ ｔｒ ｉ ａｉ ｎ；ｓ ｅ ｔ ｐ ｏ ｏ ｒ ｙ ｗｏ ｄ ：ｐ ｏ ｎ ｈ ｃ ａ ｉ ｉ ｓ ｅ ｅ ｎ ｔ ｍ ｏ ｐ ｃｒ ｈ ｔｍｅ ｉ ｏ ｃ；ｖ ｉ ｉ ｎ ｌ ａ ｌｎ
葡萄籽提取 物中最重要 的也是 迄今研究 最为广 泛的成分 是 原 花色 素 ， 它是儿茶素 、 表儿茶 素及 其没食子 酸脂 的一系列 聚合 体 ， 对 人 体 由 于 氧 化 引起 的 疾 病 具 有 治 疗 和 预 防 作 它 用 。由于其组分是多 种成 分 的混合 物 ， 用薄 层层 析法 只 能对其进行简单 的定性 分析 ， 光光度 法用 于测定 原花 色素 含 分 量 已有报道 ， 不同的显色条件对 含量 的计算影 响较大 Ｊ 所 但 ， 以进行进一步 的研究 ， 定合 理的显色条件具有重要 的意义 。 确 本文研究 了以香草醛 一盐酸溶 液为显色 剂 。确定 了合理 的 显 色条件 ， 具有显色时间较短 ， 操作 简易 ， 结果可靠等优点 。
葡萄穗轴中白藜芦醇、原花色素提取工艺的研究
第３ 卷 第 １ ７ 期
Ｖｌｌ Ｎ Ｏ １ ｏ＿ ３７ ．
河
北
工
业
大
学
学
报
２０ ０ ８年 ２月
Ｆｅ ｕ ｒ ２ ８ ｂｒ ａ ｙ ００
Ｊ ０ＵＲＮＡＬ ０Ｆ ＨＥＢＥ Ｉ ＵＮⅣ Ｅ Ｉ Ｙ ＥＣＨＮ０ＬＯＧＹ ＲＳ Ｔ ０Ｆ Ｔ
进行 了优化．结果表明，６ ％的乙醇溶液为提取剂 ，固液比为 ｌ： ０ Ｏ ２ ，在 ８ Ｏ℃下提取 ２ ｈ为最佳提取 条件 ，通过 溶剂萃取进行分 离，用紫外分光光度 法和香草醛． 盐酸法分 别测定其含量．在最佳提取条件下， 白藜芦醇的提取 率为 ００ ３ ．８％，原花 色素的提取率为 ０５６ ．ｌ％． 关 键 词 葡萄穗轴； 白藜芦醇；原花 色素 ；紫外分光光度法；香草醛一 盐酸法 Ｔ ９ ；Ｒ ８． Ｑ ｌ ２４２ 文献标识码 Ａ 中图分类号
Ｓｕ ｙ ｏ ｔ ｃｉｎｏ ｓ ｅａｒ ｌ ｎ ｒ ａ ｔ ｏ ｙ ｎ ｄｎ ｔ ｄ ｎ Ｅｘ ｒ ｔｏ ｆ ａ Ｒｅ ｖ ｒ ｔｏ ｄ Ｐ ｏ ｎ ｈ ｃ ａ ｉ ｉ ｓ ａ ｆｏ Ｇｒ ｐ ｐ ｋ —ｔｌ ｒ ． ｍ ａ ｅＳ ｉ ｅ ｓａｋ
ＺＨＡＮＧ ｉ ＬＩＭ ｅ — ｉ ｇ， ＮＩ Ｙｕ ｎ， ＧＵＯ ｕ ｙ ｎ Ｊｅ， ｎｇ ｑ ｎ Ｅ ａ Ｃｈ ｎ— ｕ
在葡萄酿酒过程中 ， 会产生大量的葡萄穗轴废弃物 ，最初这些废弃物大多被当作肥料 、 料甚至垃 饲
圾处理 ．现在人们逐渐认识到这些废 弃物含有大量生物活性物质 ， 白藜芦醇 、原花色素等 ．白藜芦醇 如 的抗肿瘤功效近年来 日益受到 人们的广泛关注 ， 据报道其对 Ｐ Ｌ腺瘤有治疗和预 防双重作用 “ 在 Ｔ细 Ｒ ， 胞 白血病药物治疗中也 具有潜在应用价值 ． 原花色素能够清 除人体 内过剩的 自由基 ， 提高人体的免疫
原花色素-天然药物化学
生物技术学院课程论文课程名称：天然药物化学成绩：教师签名：2017年06月02日原花色素的性质与应用综述摘要：本文对原花色素进行了简单的介绍，并简述了原花色素的发现史，同时对原花色素的结构性质也做了一定的讲解。
接下来本文着重对原花色素的生理活性进行了描述和介绍，并结合生理活性举实例对原花色素的应用进行了综述总结。
关键词：原花色素；多酚类化合物；红粉；抗氧化活性1原花色素简介及发现史1.1原花色素简介原花色素又叫原花青素，原花青定，是一种可水溶的色素，并且可以随着细胞液的酸碱改变颜色。
如果细胞液呈现酸性那么花色素就呈现偏红的颜色，如果细胞液呈现碱性那么花色素就呈现偏蓝的颜色。
花色素无毒，并且不会致敏，有很高的安全性。
它广泛存在于植物中，是构成花瓣和果实颜色的主要色素之一，同时常见于花、果实的组织中及茎叶的表皮细胞与下表皮层，是植物生长过程中的次生代谢产物。
1.2原花色素发现史在19世纪90年代，科学家们通过研究发现，许多高等植物的叶、果、花的内部都有一种无色物质，几十年之后，科学家Rosehnenim把这种无色物质命名为“无色花色昔”。
1954年，Bate-Smith使用色谱系统研究无色牧场植物的分布。
发现无色糕点主要是存在于植物木质素及其分布被称为“单宁”材料的分布非常相似。
这是第一次“单宁”和花青素物质联系在一起。
后来发现，多数植物体内的能转化为花色素的物质不是黄烷－3，4－二醇，而是黄烷醇的二聚体，三聚体或低聚体。
为了纠正名称上的混乱，1960年Freudenbery与weinges提出“原花色素”一词。
原花色素是指从植物分离得到的一切无色的，在热酸处理下能产生花色素的物质。
80年代以来，研究人员针对下列植物中的原花色素进行了研究：葡萄，英国山植，单子山植，花生，银杏，日本罗汉柏，北美崖柏，土耳其侧柏，花旗松，白桦树，野生刺葵，番荔枝，野草葛，苹果，日本莽草，高粱，可可豆，海岸松和大黄等等。
3种显色反应对稻米籽粒中原花色素含量的检测分析
3种显色反应对稻米籽粒中原花色素含量的检测分析刘丽莉;白宁宁;谢婧;严明理【摘要】利用二甲基乙酰胺二甲基缩醛（DMACA）染色法、铁铵矾染色法和香草醛染色法，测定了不同品种稻米籽粒中原花色素的含量。
用DMACA染色法测得谭农s/制21、R288、凡-14、12庚351、秦稻2号籽粒中原花色素的质量分数依次为0.136,0.183,0.085,4.115,24.736 mg/g；用铁铵矾染色法测得的质量分数依次为0.292,0.094,1.940×10-4,1.220,8.080 mg/g；用香草醛染色法测得的质量分数依次为1.349,1.363,1.093,3.733,15.153 mg/g。
检测结果表明：5种稻米品种中，秦稻2号的原花色素含量最高，是12庚351的4.1~6.6倍，凡-14中的含量最低；黑米品种（秦稻2号和12庚351）比白米品种（R288、谭农s/制21和凡-14）中原花色素的含量明显要高。
吸光度相对标准偏差（RSD）值表明，3种染色法测定原花色素含量的精密度由高到低依次为：香草醛染色法、DMACA 染色法、铁铵矾染色法。
%The proanthocyanidins content was determined in rice grain of different colors using dimethylamino-cinnamaldehyde (DMACA) staining, Ferric ammonium alum staining and Vanillin staining. Experimental studies showed that the proanthocyanidins mass fraction of five rice breeds (Tannong s/zhi21, R288, Fan-14, 12Geng351 and Qingdao2) detected by DMACA staining was successively as follows, 0.136, 0.183,0.085, 4.115 and 24.736 mg/g (dry weight); the result detected by Ferric ammonium alum staining was 0.292, 0.094, 1.940×10-4, 1.220 and 8.080 mg/g; and the result detected by Vanillin-HCl staining was 1.349, 1.363,1.093, 3.733 and 15.153 mg/g. The proanthocyanidins content ofQingdao2 was the highest, which was about 4.1 to 6.6 times of 12Geng351,and Fan-14 was the lowest in five rice breeds; the proanthocyanidins content of black rice breeds (Qingdao2 and 12Geng351) was higher than that of white rice breeds (Tannong s/zhi21, R288, Fan-14). The relative standard deviation (RSD) of the absorbency showed that the precision level of determining proanthocyanidins content as follow, the first was vanillin staining, the second was DMACA staining and the third was ferric ammonium alum staining.【期刊名称】《湖南工业大学学报》【年(卷),期】2015(000)005【总页数】6页(P96-101)【关键词】稻米;原花色素;显色反应;DMACA染色法;铁铵矾染色法;香草醛染色法【作者】刘丽莉;白宁宁;谢婧;严明理【作者单位】湖南科技大学生命科学学院，湖南湘潭 411201; 湖南科技大学重金属污染土壤生态修复与安全利用湖南省高校重点实验室，湖南湘潭 411201;湖南科技大学生命科学学院，湖南湘潭 411201;湖南科技大学生命科学学院，湖南湘潭 411201;湖南科技大学生命科学学院，湖南湘潭 411201; 湖南科技大学重金属污染土壤生态修复与安全利用湖南省高校重点实验室，湖南湘潭 411201【正文语种】中文【中图分类】Q819原花色素（proanthocyanidins，PCs）是一类广泛存在于各种植物中的具有特殊分子结构的生物类黄酮，由不同数量的儿茶素（catechin）或表儿茶素（epicatechin）结合而成[1]。
葡萄籽原花色素提取工艺研究
由于原花色素独特 的作用功能 ， 人们对其进行开发生产 同样的做法测含量 。估算萃取 物纯度
１ 原 花色素测定 ． ３
中提取原花色素 ， 此后 人们从含量更 丰富的葡萄籽 中提取 。占
葡萄总量 ３ ％～４ ％的葡萄籽 是葡萄酒与 葡萄汁生产 的副产物 ，
取原 花色素样液 ０５ ，放入试管 中 ， ４ ．ｍｌ 加 ％香草醛 甲醇液 ３ ｒｌ ．ａ 混合 ，再加 入 １ ｍｌ Ｈ 。立 即彻底 混 匀 室 温下显色 Ｏ ． 浓 ＣＩ ５
ａ ｅ ａ ｅｅ ｔａ ｔｏ ｓ １ ． ％ ～ ３Ｉ ％ ． ｔ ｕ ｉ Ｖ ｌ３ ％ ｗｈｉ ｈ ｉ ｌ ｌａ ｅ ｏ ｅ ｆ ｒｃ ｉ ｎ ｔ ｎ ｗａ ４ ３ ～ ｃ ｔｔ ｘ ｒ ｃ ｉ ｎ ｗａ ４ ４ ． ６ ｗｉ ａ ｐ ｒｔ Ｏ ｅ’ ２ ｈ ｙ ｌ ｔ ｅ ｙ ｅ ｄ ｏ ’ ｃ ｔ ｎ ａ ｈ ｏ ａ ｉ ｓ ５ ． ｑｌ ｅ ｏ ６ ．％ ｗｉ ｕ ） ｏ ｅ ７ ９ ｗｉ ｕ ｉ ’ ３５ ｔ ａｐ ｔ ｖ ｒ ．％ ｈ ｉ ｔ ２ ｔ ａ ｐ ｒ ） ｈ ｔ．
高效液相—质谱法测定原花色素的组成研究
流量 ｍｌ ｎ ／ ｍｉ
１ｏ ．０ １ｏ ．０ １ｏ ．ｏ
Ａ％
９ ３ ９ ３ ８ ０
Ｂ％
７ ７ ２ ０
１－３ｍ ／， １ １ ｇ 李子花 、 ｇ 山楂花 、 树花 、 叶碧桃 、 柳 紫 紫荆 、 紫 藤、 单层黄刺玫 中含量为 ３ ７ ｇ 。已知新鲜葡萄籽中的 ～ ／ ｍ ｇ 原花色素含量为最高 ， ６ ．ｍ ／， 达 ６ ｇ 酿酒后分离的葡萄籽 ３ ｇ 中的含量为 １． ％， ６ ４ 这说明在葡萄酒酿造过程 中， ９ 葡萄籽 的原花色素大部分会溶解在酒液 中。因此 ， 白葡萄酒和 对
释、 定容后进样 ， 进样量 ２ ／ ， ０ｘ 保持 ２ ％ ， Ｌ ５ 于波长 ２０ ｍ ８ ｎ
下检测 。
１ 材料 与方 法
１１ 材料 ．
１ ． 儿茶 素标 准 曲线的 绘 制 （ ．３ ５ 外标 法 ） 准 确称 取 一定
质量的儿茶素标准品， 稀释定容成几个不同浓度梯度的标 准溶液 ， 按上 述色谱条件进样检测 ， 根据 出峰面积绘制儿
色素 的基本组成为儿茶素与表 儿茶素及儿茶素与表儿茶素的混合物 ， 为原 花色素的进一步开发利用
奠定 了 良好 的 基 础 。
关键词
原 花 色素 高 效 液相 一 质 谱 法 ￥ １ ３２
分离 Ａ
ｄ ｉ ０３ ６ ／ｉ ｎ１ ７ — ８ Ｘ２ １ ．４０ ３ ｏ： ．９ ９ｊ ｓ ． ３ ８ ７ ．０ ００ ．０ ｌ ． ｓ ６
压 ４２ ｖ 锥孔电压 ４ 光 电倍增器 电压 １０ 离子源 ．ｋ ， ０Ｖ， ５ Ｖ，
温 度 １０Ｃ， 溶 剂气 温 度 ３０ ２￣ 脱 ５ ℃。
Ｏ． ７
，
。 ０ ６
０６ ．
天然抗氧化剂原花色素的研究进展
安徽农业科学 。ｏｒａ ｆ ｎｕ ｇ ．ｃ．Ｏ７ ３ （ ）９３—９４ Ｊｕｎｌ Ａ ｈ ｉ ｄ Ｓｉ２０ 。５４ ：５ ｏ Ａ ５
责任编辑
庚珞
责任校对
庆珞
天 然抗 氧 化剂 原 花 色 素 的研 究进 展
王青华， 杜娟， 张维民 （北 程 学 品 学 术 ，北 郸５ｏ 河 工 大 食 科 技 系河 邯 ｏ０） ６１
Ａｌｍ ＇ ｔ ｌ ａ ｃ 田 ｌ ａ ｅ ａ ｅａｇ ｎ ｒｌｄ ｓｒｐｉｎ ｏ ｈ ｒｓｎ ｔｔｓ ａｄ ｔｅ ｔｎ ｅ ｃ ｂ ｕ ｈ ｒａ ｔｏｙ ｎｄｎ ｔ ｏ ｎ ｂｏ ｄ．Ａｎ ｔ ｔｕ — ｉ ｐ ｐ ｒｇｖ ｅ ｅａ ｅｃｉｔ ｆｔｅ ｐｅ ｅ ｔｓａｕ ｎ ｈ ｅｄ ｎ ｙａ ｏ ｔｔｅｐｏ ｎ ｃ ａ ｉｉｓａ ｍｅａ ｄ ａ ｒａ ｓ ｏ ｈ ｈ ｄ ｉ ｓｒｔ ｓ ｔｒ ，ｔｅａ ｐｉ ｉｎ ｏ ｔ ｕ ｃｉｎ，ｔｅ ｍ ｔｏ ｆｔｅｅ ｔ ｃｉ ｒ ｎｒｄ ｃ ｄ． ｕｅ ｈ ｐ ｌａｔ ｆｉ ｆｎ ｔ ｃ ｏ ｓ ｏ ｈ ｈ ｄ ｏ ｈ ｘｒ ｔ ｎ ＷＯｅｉｔ ｕ ｅ ｅ ａ ｏ ｏ Ｋｅ ｗｏｄｓ ＧｉＤ ｅ ｄ；Ｐｏ ｎｈ ｙ ｎｄｎ；Ｐ ｌｐ ｅ ｏｓ ｙ ｒ ａ ｅｓｅ ｒａ ｔｎ ａ ｉｉ ｅ ｏｙ ｈ ｎ ｌ
种 葡 萄籽 中 的寡 聚体不 完 全一 样 ， 且有 些 是特有 的， 随着 研 究 的深入 ， 葡萄籽 中某 些特有 的抗 氧化剂 抗氧化 效果 极 发现
又可分为安息香酸类、 苯甲醛类、 肉桂酸类、 肉桂醛类等 ， 每 类又包括很多种。类黄酮类依其分子基本结构单元可分为 黄酮醇 、 花色素、 黄烷醇等几类。在类黄酮天然抗氧化剂中，
国 内外很 多研 究 发现 ， 葡萄 籽 中 的多 酚类 天然 抗 氧化 剂 ， 是 含量 还是 种类 都 比葡萄 皮 和葡 萄果 肉丰 富 的多 。 无论 籽 中的多酚类物 质表现极 强 的抗 氧性能 ， 葡萄 籽 中提 取 的 从 天 然抗 氧化剂 已在 医药 、 化工 、 品添 加剂 等方 面得 到 了广 食 泛 的应用 。根 据 结 构不 同 ， 可将 葡 萄 籽 中 的 多 酚类 物 质 分 为： 非类黄酮类 和类黄酮类 。非类 黄酮类 依其 分 子结构 不 同
大孔树脂法分离原花色素的初步研究
天 津 化 工 Ｔａｊ ｈｍｉ ｌｎ ｕｔ ｉ ｉ Ｃ ｅ ｃ ｄ ｓｙ ｎｎ ａＩ ｒ
Ｖｏ ． ． １ ＮＯ １ ２４
Ｊ ｎ２ １ ａ ．０ ０
大孔树脂法分离原花色素的初步研 究
郑 永 丽
（ 津渤 海 职 业技 术 学 院 生物 工程 系 ， 天 天津 ３ ０ ０ ） ０ ４２
液浓度 。
３５ 树 脂 再 生 性 能 一 ．
吸附树 脂 除 了吸附 目标产 物之 外 ， 还会 吸 附杂 质 ， 这些 杂 质会 毒 化 树 脂 ， 而 因此 必须 在 下 一 次使 用时再 生树脂 。 本试验 以 ｘ ５型树脂 为例考 察 了树 一
树 脂 可能是 由于本身 的结构 特点 ， 原花 色素 的吸 对
２ 实验部 分
２１ 吸 附 树 脂 的 筛 选 ．
附作用 较差 ，因而也不 能应 用于 原花 色素 的分离 。 所 以实验 中采用 了 ｘ ５树脂 作为 吸附剂 。 种树脂 一 各
的吸 附性 能如表 １ 示 ： 所
ｄ ｉ ０３６ ／ｉ ｎ１０ － ２７２ １．１ １ ｏ： ． ９ｊｓ ．０ ８ １６ ． ００ ． ６ １ ９ ．ｓ ０ ０
中图分类号 ： ２２７ Ｒ ８．１
文献标志码 ： Ａ
文章编号 ：０ ８ １６ （ ００ ０ — ０ ９ ０ １０ — ２ ７ ２ １ ） １０ ３ — ２
采用 大孔 树脂进 行 天然产 物 的分 离 纯化 ， 同传
摘要 ： 在静态吸 附条件下， 考查了原 花色素在 ４ 大孔吸 附树脂的吸附量， 种 筛选 出 Ｘ ５ 一 树脂 ， 进一步测定其动泄露曲
线为 Ｑ＝ ４ ．８ ６ ．４ 一２１ ， － １７Ｃ＋ ４１Ｃ １ ． 解吸率为 ８ ％， ０ ０ 并考查 了ｘ一 ５树脂的再生能力。 关键词： 大孔树脂； 原花 色素； 离 分
花青素的测定
方法1:原花色素的测定方法（分光光度法）本方法适用于各种植物组织、器官及其制剂（如葡萄子与松树皮提取物）中原花色素含量的测定。
1. 方法提要原花色素（也称缩合单宁）是黄烷-3-醇的寡聚体与多聚体，属多酚类化合物。
与其他酚类化合物不同，黄烷醇（缩合单宁，单体，双体等）在酸性介质中可与香草醛反应，生成在500nm处有最大吸收的有色物质，可通过比色测其含量。
2. 仪器分光光度计。
3. 试剂所用水为去离子水或同等纯度蒸馏水。
（1）香草醛、甲醇、浓盐酸均为分析纯级。
（2）提纯的原花色素或儿茶素。
（3）4%香草醛甲醇液。
（4）标准使用液：将提纯的原花色素溶于蒸馏水，制成1mg/mL储备液，将储备液稀至浓度为1×10-2mg/mL至1mg/mL的标准使用液。
标准使用液应于测定当天配制。
如无提纯的原花色素，可用儿茶素代替，配制方法同上。
4. 测定步骤（1）样品中原花色素的制备：植物材料经4倍体积丙酮+水（7+3，体积比）或者经60%甲醇提取，40℃以下减压蒸馏去除有机溶剂，水相再经乙醚洗涤后定容。
冰冻干燥的固体原花色素制剂，直接溶于水中（先加少量甲醇助溶）制成原花色素液。
原花色素液于5℃下暗环境中保存备用。
（2）样品测定：用锡箔将试管（14mm×20mm）包裹严，仅留管口用于加样。
向管内加入试样0.5mL，再加3.0mL 4%香草醛甲醇液混合，然后加入1.5mL浓盐酸，彻底混匀，室温下显色15min。
也可在暗环境下进行以上操作。
最后在500nm处比色。
可按以上操作步骤制得标准曲线（即0.1mg原花色素在500nm处的吸收值为0.55）。
5. 结果计算计算原花色素量的公式，原花色素（1×10-3mg）=A500nm÷0.55×100×V式中V——试样稀释体积（倍数）。
6. 注释（1）本方法的检测范围为（5~500）×10-3mg/0.5mL样液。
花变颜色实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 探究花朵在不同条件下颜色变化的原因。
2. 了解植物色素的特性及其在植物生长过程中的作用。
3. 培养学生的观察能力、实验操作能力和科学探究精神。
二、实验原理植物花朵的颜色主要由花青素、黄酮类化合物、胡萝卜素等色素决定。
这些色素在植物体内受pH值、光照、温度等因素的影响，会发生颜色变化。
本实验通过改变花朵生长条件，观察花朵颜色的变化，探究植物色素的特性。
三、实验材料1. 红色玫瑰、白色玫瑰、紫罗兰各5朵。
2. pH试纸、pH值为3、5、7、9的溶液。
3. 水培瓶、剪刀、标签纸。
4. 恒温箱、温度计。
四、实验步骤1. 将红色玫瑰、白色玫瑰、紫罗兰分别放入水培瓶中，并贴上标签。
2. 将pH值为3、5、7、9的溶液分别倒入四个水培瓶中，观察花朵颜色变化。
3. 将水培瓶放入恒温箱中，分别调节温度为20℃、25℃、30℃，观察花朵颜色变化。
4. 将水培瓶放置在光照条件下，观察花朵颜色变化。
5. 记录实验数据，分析花朵颜色变化的原因。
五、实验结果与分析1. pH值对花朵颜色的影响实验结果显示，在pH值为3的酸性溶液中，红色玫瑰颜色加深，白色玫瑰变红，紫罗兰变紫；在pH值为5的酸性溶液中，红色玫瑰颜色加深，白色玫瑰变粉，紫罗兰变深紫；在pH值为7的中性溶液中，花朵颜色无明显变化；在pH值为9的碱性溶液中，红色玫瑰变粉，白色玫瑰变绿，紫罗兰变蓝。
分析：pH值对植物色素的影响较大，酸性条件下，花青素等色素会发生变化，导致花朵颜色加深；碱性条件下，部分色素会分解，花朵颜色变浅。
2. 温度对花朵颜色的影响实验结果显示，在20℃的温度下，花朵颜色变化不明显；在25℃的温度下，红色玫瑰颜色加深，白色玫瑰变红，紫罗兰变紫；在30℃的温度下，红色玫瑰颜色加深，白色玫瑰变粉，紫罗兰变深紫。
分析：温度对植物色素的影响较大，高温条件下，植物体内色素分解速度加快，花朵颜色变浅；低温条件下，色素分解速度减慢，花朵颜色加深。
莲房原花色素的纯化分级和结构鉴定
莲房原花色素的纯化分级和结构鉴定肖俊松;谢笔钧;曹雁平;吴华;王成涛【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2012(033)019【摘要】莲房中原花色素经甲醇水提取，大孔树脂纯化，制得莲房原花色素提取物(LSPE)，酸降解法测定其平均聚合度，并经TSK HW-40s凝胶树脂分级，高效液相色谱-二极管阵列检测器和电喷雾质谱分析。
结果表明：采用60%甲醇水溶液，调整pH值至2.0，料液比1：20(m/V)，在60℃提取1h，提取率可达7.65%，最适合纯化的树脂为AB-8。
LSPE乙酸乙酯相和水相平均聚合度为3.2和15.4。
LSPE乙酸乙酯相主要由儿茶素、没食子酸儿茶素、儿茶素和没食子酸儿茶素构成的二聚体、三聚体和少量四聚体构成。
凝胶树脂将LSPE乙酸乙酯相分为11个级分(F1～F11)， F1～F4可能为黄酮类及黄酮苷类，F5主要为儿茶素以及少量表儿茶素，F6为没食子酸儿茶素、原花青素二聚体B3、儿茶素，以及含有没食子酸儿茶素单元的原花色素，F7为儿茶素和原花青素B1、B2、B3，F8为原花色素类物质，F9～F11可能为儿茶素和没食子酸儿茶素组成的更高聚合度的聚合物。
【总页数】6页(P172-177)【作者】肖俊松;谢笔钧;曹雁平;吴华;王成涛【作者单位】北京工商大学食品添加剂与配料北京高校工程研究中心，食品风味化学北京重点实验室，北京 100048;华中农业大学食品科学技术学院，湖北武汉430070;北京工商大学食品添加剂与配料北京高校工程研究中心，食品风味化学北京重点实验室，北京 100048;江汉大学生命科学学院，湖北武汉 430056;北京工商大学食品添加剂与配料北京高校工程研究中心，食品风味化学北京重点实验室，北京 100048【正文语种】中文【中图分类】TS209;TS255.36【相关文献】1.葡萄籽中原花色素的树脂纯化工艺研究 [J], 孙皓;伍丽娜;张伟;郑永丽2.膜分离技术纯化花生衣中的原花色素 [J], 刘志强;张初署;孙杰;于丽娜;张岩;王世清;杨庆利3.葡萄籽中原花色素的分级分离 [J], 时国庆;郑新;常玉国;许本清;李春祥;赵文恩4.白莲莲房多糖分离纯化、结构表征及抗氧化与免疫活性 [J], 马广强;李国群;吴静;熊伟;吴磊5.大孔吸附树脂对莲房原花青素吸附纯化性能的研究 [J], 段玉清;张海晖;周密;葛方胜;闫永胜;谢笔钧因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
原花色素的提取及测定
一、实验原理
原花色素，也称原花青素，是一类从植物中分离得到的在热酸条件下能产生花色素的多酚化合物，它既存在于多种水果的皮，核和果肉中，如葡萄，苹果，山楂等。
也存在于如黒荆树，马尾松，思茅松，落叶松等的皮和叶中。
原花色素属于生物类黄酮,它们是由不同数量的儿茶素或表儿茶素聚合而成，最简单的原花色素是儿茶素的二聚体，此外还有三聚体，四聚体等。
依据聚合度的大小，通常将二至四聚体称为低聚体，而五聚体以上的称为高聚体。
从植物中提取原花色素的方法一般有两种，分别是用水抽提或用乙醇抽提。
其抽提物为低聚物，称之为低聚原花色素（OPC）。
原花色素具有很强的抗氧化作用，能清除人体内过剩的自由基，提高人体的免疫力，可作为新型的抗氧化剂用于医药、保健、食品等领域。
利用低聚原花色素溶于水的特点，用热水煮沸抽提原花色素，再用大孔吸附树脂吸附、洗脱得到原花色素。
D101树脂是一种球状、非极性交联聚合物吸附剂，具有相当大的比表面和适当的孔径，对皂甙类、黄酮类、生物碱等物质有特殊的选择性，适用于从水溶液中提取类似性质的有机物质。
原花色素（I）的4~8连接键很不稳定，易在酸作用下打开。
反应过程（以二聚原花色素为例）是：在质子进攻下单元C8（D）生成碳正离子（II），4~8键裂开，下部单元形成（-）-表儿茶素（III），上部单元成为碳正离子（IV），失去一个
质子成为黄-3-烯-醇（V），在有氧条件下失去C2上的氢，被氧化成花色素（VI），反应还生成相应的醚（VII）。
若采用正丁醇溶剂可防止醚的形成。
（如下图所示）
在一定浓度范围内，原花色素的量与光吸收值呈线性关系，利用比色法可测定样品中的原花色素含量。
但盐酸-正丁醇法受原花色素的结构影响较大，对于低聚度原花色素及儿茶素等单体反应不灵敏。
二、实验器材
新鲜山楂，烧杯，玻璃层析柱，大孔吸附树脂D-101，具塞试管*9，移液枪，紫外分光光度计，水浴锅；
三、实验试剂
60%乙醇，95%乙醇，原花色素标准品(1.0mg/mL)，HCl-正丁醇，2%硫酸铁铵，
2.0mol/L HCl；
四、实验步骤
Ⅰ原花色素的制备
1、称取新鲜山楂10.0g，剪成块状，置入锥形瓶中，加入40.0mL蒸馏水，沸水浴30min，间期混匀。
冷却后加入20mL蒸馏水，过滤（或离心），滤液备用。
2、取一根层析柱（1.5*20cm），洗净，竖直装好，关闭出口，加入蒸馏水约1cm 高，用烧杯取一定量已处理好大孔吸附树脂D-101，搅匀，沿管内壁缓慢加入，待柱底沉积约1cm高时，缓慢打开出口，积蓄装柱至高度10cm，液面高于树脂约3cm。
3、平衡：用蒸馏水洗2倍柱床体积，控制流速在1mL/min左右，至洗出液的pH 呈中性。
4、滤液上样，上样时控制流速在2mL/min。
上完样后，先用蒸馏水洗两倍柱床体积，然后换60%乙醇进行洗脱，控制流速在1mL/min。
待有红色液体流出时开始收集，直到收集到无红色为止。
5、将收集液用60%乙醇定容至50mL，作为下次测定的样品。
Ⅱ原花色素的测定
1、制作标准曲线：
取干净试管7支，按表1进行操作，以吸光度为纵坐标，各标准液浓度为横坐标作图得标准曲线。
2、样品含量测定
分别吸取样液0.10mL，0.20mL置于两支试管中，按表1操作。
表1
五、实验结果
表2
由于（300，0.885）一点明显偏差较大，在作图时剔除这一点，得到以上标准曲线，根据标准曲线计算得到以下结果：
表3
六、分析与讨论
1、本次实验测得原花色素的百分含量为0.329%，两份样品的平行性较好。
剔除最后一个点以后作出的标准曲线的线性也较好，实验较为成功。
2、作标准曲线时，最后一点偏离直线原因可能是此时色素浓度太大，与Lambert-Beer定律出现了负偏差，导致浓度过大时与吸光度不再呈线性关系。
3、山楂的原花色素主要存在于果皮中，果肉中也含有部分，但含量较少。
实验中部分同学在取材时只使用了山楂皮，故最终测得的原花色素含量较高。
这启发我们如果在生产中以山楂为原料提取原花色素，为求产量高，应尽量多用山楂皮。