动物细胞工程PPT课件
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动物细胞工程复习课件
体内的
细胞，从小鼠体内提取分离该细胞之前，应
给小鼠注射效应__B___________类物质。 常用（__2__）__d_过___程__是_或一_个____抗____原_______________的__诱过导程。，该过程的进行
(3)假设仅考虑某两个细细胞胞融合的融合，则可形成 种类 型培养的C，细D胞细聚，胞乙因二的醇此名需称用是___灭__活__的__病，_培毒其养特基点筛是选出D细胞3用于 _____________________________选_择__性_________。
单克隆抗体最主要的优点：特异 性强，灵敏度高，并能大量制备。
抗体的传统生产方法 抗原 反复注射动物 从动物的血清中分离抗体
该法制备抗体的缺点：
产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度 低。 如何解决这个问题呢？ 单克隆抗体！
⑵用于治疗疾病和运载药物 ①特异性强、灵敏度高 生物导弹——单克隆抗体＋抗癌药物 ②疗效高、毒副作用小
杂交瘤细胞特点： 既能产生特异性抗 体，又能大量增殖。
（二选）：选 能产生所需专 一抗体的杂交 瘤细胞
体外培养 小鼠腹腔内培养
获得产生相应 抗体的B细胞
√ B-B 、B-瘤 、瘤-瘤
（未融合的B、瘤）
（一选）选择 性培养基：只 有杂交瘤细胞 才能存活
2.3单克隆抗体的应用
诊断试剂——最广泛应用 准确、高效、简易、快速
杂交瘤细胞
既能无限增殖又能产生特异性抗体
(4)在培养时通过___有__丝___分裂方式大量繁殖。D细胞体 外培养需要注意的条件是（要求答5项） __________________________________。 无菌、无毒的环境；充足的营养；适宜的温度和pH；适宜 的气（体5）环单境克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面，与 常规抗体相比，其特点是_________________。
动物细胞工程ppt课件
4.气体环境 ①气体的组成及作用 95%空气（O2）：细胞代谢所必需
5%CO2：维持培养液的pH ②培养装置: 培养皿或松盖培养瓶 置于 CO2培养箱中进行培养
（含有95%空气和5%CO2的混合气体）
培养皿
培养瓶
CO2培养箱
二、动物细胞培养的过程
①培养前用什么方法分散成单个细 胞？ ②体外培养动物细胞有哪些类型？ ③什么是细胞贴壁？什么是接触抑 制？ ④什么是原代培养和传代培养？ ⑤为什么要进行分瓶培养？怎么处 理？ ⑥动物细胞培养与植物组织培养有 什么相同之处与不同之处？
像建立骨髓库一样，有研究团队正在尝试建立HLA（Human Leukocyte Antigen，人类白细胞抗原）多态性丰富的iPS细胞库，可以为 需要的人找到HLA匹配度较高的iPS细胞，这样不仅可以节省时间、成本 ，还能减轻异体干细胞移植后发生的免疫排斥反应。
二、拓展应用 现在关于iPS细胞的研究正在不断深入。请你从以下两个方面来查阅
基本营养：水、无机盐、有机碳源、有机氮源 特殊物质：维生素、血清
血清
含有尚未研究清楚的细胞所需的营养物质 营养基构成：合成培养基 + 血清等一些天然成分
将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成 的培养基。
培养基的类型：固体培养基 or 液体培养基（培养液）
一、动物细胞培养的条件 2.无菌、无毒的环境 措施1: 灭菌处理——对象？ 培养液和所有培养用具 措施2: 操作在无菌环境下进行。 措施3: 培养液中适量添加 抗生素 。——抑制细菌生长 措施4：定期更换培养液——目的？清除代谢物，防止细胞代谢物积累对
【思考】动物细胞的整个培养过程中可能多次用到胰蛋白酶或胶原蛋白酶？
第一次使用的目的是使组织细胞分散开；
5%CO2：维持培养液的pH ②培养装置: 培养皿或松盖培养瓶 置于 CO2培养箱中进行培养
（含有95%空气和5%CO2的混合气体）
培养皿
培养瓶
CO2培养箱
二、动物细胞培养的过程
①培养前用什么方法分散成单个细 胞？ ②体外培养动物细胞有哪些类型？ ③什么是细胞贴壁？什么是接触抑 制？ ④什么是原代培养和传代培养？ ⑤为什么要进行分瓶培养？怎么处 理？ ⑥动物细胞培养与植物组织培养有 什么相同之处与不同之处？
像建立骨髓库一样，有研究团队正在尝试建立HLA（Human Leukocyte Antigen，人类白细胞抗原）多态性丰富的iPS细胞库，可以为 需要的人找到HLA匹配度较高的iPS细胞，这样不仅可以节省时间、成本 ，还能减轻异体干细胞移植后发生的免疫排斥反应。
二、拓展应用 现在关于iPS细胞的研究正在不断深入。请你从以下两个方面来查阅
基本营养：水、无机盐、有机碳源、有机氮源 特殊物质：维生素、血清
血清
含有尚未研究清楚的细胞所需的营养物质 营养基构成：合成培养基 + 血清等一些天然成分
将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成 的培养基。
培养基的类型：固体培养基 or 液体培养基（培养液）
一、动物细胞培养的条件 2.无菌、无毒的环境 措施1: 灭菌处理——对象？ 培养液和所有培养用具 措施2: 操作在无菌环境下进行。 措施3: 培养液中适量添加 抗生素 。——抑制细菌生长 措施4：定期更换培养液——目的？清除代谢物，防止细胞代谢物积累对
【思考】动物细胞的整个培养过程中可能多次用到胰蛋白酶或胶原蛋白酶？
第一次使用的目的是使组织细胞分散开；
高三生物---动物细胞工程专题公开课一等奖课件省赛课获奖课件
应用前景
1、加紧家畜遗传改良进程 2、保护频危物种 3、器官移植供体 4、运用生物反映器生产生物蛋
白
存在问题
成功率低 存在健康问题
许多克隆动物体现出遗传和生理缺点，如体 型过大，异常肥胖，发育困难，脏器缺点， 免疫失调等。
克隆动物食品的安全问题
练习
中国自主完毕的首批成年体细胞克隆牛在山东曹 县陆续降生。克隆牛有3个母亲,A牛提供细胞核即 供体细胞,B牛提供去除细胞核的卵细胞即受体细胞 ,两种细胞在电脉冲的刺激下融合之后,通过细胞分 裂形成早期胚胎,再将这个胚胎植入C牛子宫内。 请回答下列问题: (1)哺育出的克隆牛几乎就是 A(供核牛) 牛复制品, 这是由于控制牛性状遗传的物质重要存在于 ____细_胞_核_____中。 (2)克隆牛的哺育成功阐明了 体_细_胞__的_细_胞__核_几_乎_含__有_发_育__为_新_个_体__的_全_部__遗_传_信_息。
动物细胞培养就是从动物机体内取出有关的 组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适 宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
思考：动物细胞培养的过程 是如何的呢？
阅读思考：
1 为什么细胞培养要分散成单个细胞培养？ 2 如何分散？ 2 用胰蛋白酶分散细胞，阐明细胞间的物质重要 3 成分是什么？用胃蛋白酶行吗？
1.在进行动物细胞培养时，用胰蛋白酶分散细胞，阐明细胞 间的物质重要是蛋白质。 2.动物细胞培养适宜的PH为7.2—7.4，此环境下胃蛋白酶 （2.0）没有活性，而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。
动物细胞生长特性：
细胞贴壁：
悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称 为细胞贴壁。
规定：
培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴 附。
充足的营养 气体
《动物细胞工程》课件
1
2
3
利用动物细胞工程可以将外源基因导入动物细胞，培育出转基因动物，提高其生产性能和抗病能力。
转基因技术
动物细胞工程可用于生产疫苗，通过培养动物细胞并表达病毒抗原，制备出高效、安全的动物疫苗。
动物疫苗
动物细胞工程可以用于构建生物反应器，通过大规模培养动物细胞生产各类蛋白质和生物活性物质。
生物反应器
选择适当的细胞
通过物理、化学或生物方法诱导细胞融合。常用的物理方法有电融合和激光融合，化学方法有聚乙二醇（PEG）诱导融合，生物方法有病毒诱导融合。
诱导细胞融合
通过特定的筛选和鉴定方法，从大量细胞中筛选出融合细胞，并进行鉴定。常用的筛选和鉴定方法有荧光染色法、免疫学检测法和分子生物学检测法等。
筛选和鉴定融合细胞
技术难度大
动物细胞工程的实施需要高超的技术水平和精细的操作技巧，如何提高技术成熟度和降低成本是亟待解决的问题。
伦理和法律问题
动物细胞工程的实践涉及到伦理和法律问题，如人道关怀、动物权益保护等，需要在实践中严格遵守相关法规和伦理准则。
安全性和有效性问题
动物细胞工程产品的安全性和有效性需要经过严格的评估和验证，以确保其不会对人类健康和生态环境造成不良影响。
1970年代
随着技术的不断进步和应用领域的拓展，动物细胞工程在医学、农业、工业等领域得到广泛应用。
1990年代至今
02
动物细胞培养技术
细胞具有增殖和分化的能力
动物细胞具有自我复制和分化的能力，可以在适宜的环境下生长和繁殖。
03
动物细胞融合技术
选择要进行融合的细胞，通常选择同种或同种的细胞进行融合。
感谢观看
THANKS
基因转移技术
02
动物细胞工程ppt
1. 既然胰蛋白酶能将细胞消化 掉，那将动物组织分散成单 个细胞要注意什么问题呢？
2. 能够用胃蛋白酶代替胰蛋白 酶吗？为什么？
（四）、动物细胞培养的条件
1、无菌、无毒的环境
添加一定量的抗生素，定期更换培养液
2、营养
添加：糖（葡萄糖）、氨基酸、促生长因子、无 机盐、微量元素、动物血清等。
保证细胞 顺利的生 长增殖
课堂反馈练习
A
0
2、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是
（）
1
A．获得不死性的细胞 B．10代以内细胞
D
C．原代细胞
D．传代细胞
0
1、动物细胞工程技术的基础是 （ ）
2
A.动物细胞融合 B.单克隆抗体
C.胚胎移植 D.动物细胞培养
3、在动物细胞培养的有关叙述中正确的是：（ ） A、动B物细胞培养的目的只是为了获得大量的细胞 分 泌蛋白
1
2
二、单克隆抗体
抗体是机体受抗原刺激 01 后产生的、并能与该抗 原发生特异性结合的具 有免疫功能的球蛋白。
什么是抗体？
02 B淋巴细胞产生抗体。
单克隆抗体
01
由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型 相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、
特异性强的抗体称为单克隆抗体。
202X
专题2.2动物细 胞工程
单击此处添加文本具体内容，简明扼要地 阐述你的观点
动物细胞培养 单克隆抗体制备 动物细胞工程技术
动物细胞融合
细胞核移植 动物细胞工程的基
础
01
动物细胞培养和核移植技术
单击此处添加正文，文字是您思想的提炼，为了演示发 布的良好效果，请言简意赅地阐述您的观点。
2. 能够用胃蛋白酶代替胰蛋白 酶吗？为什么？
（四）、动物细胞培养的条件
1、无菌、无毒的环境
添加一定量的抗生素，定期更换培养液
2、营养
添加：糖（葡萄糖）、氨基酸、促生长因子、无 机盐、微量元素、动物血清等。
保证细胞 顺利的生 长增殖
课堂反馈练习
A
0
2、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是
（）
1
A．获得不死性的细胞 B．10代以内细胞
D
C．原代细胞
D．传代细胞
0
1、动物细胞工程技术的基础是 （ ）
2
A.动物细胞融合 B.单克隆抗体
C.胚胎移植 D.动物细胞培养
3、在动物细胞培养的有关叙述中正确的是：（ ） A、动B物细胞培养的目的只是为了获得大量的细胞 分 泌蛋白
1
2
二、单克隆抗体
抗体是机体受抗原刺激 01 后产生的、并能与该抗 原发生特异性结合的具 有免疫功能的球蛋白。
什么是抗体？
02 B淋巴细胞产生抗体。
单克隆抗体
01
由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型 相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、
特异性强的抗体称为单克隆抗体。
202X
专题2.2动物细 胞工程
单击此处添加文本具体内容，简明扼要地 阐述你的观点
动物细胞培养 单克隆抗体制备 动物细胞工程技术
动物细胞融合
细胞核移植 动物细胞工程的基
础
01
动物细胞培养和核移植技术
单击此处添加正文，文字是您思想的提炼，为了演示发 布的良好效果，请言简意赅地阐述您的观点。
《动物细胞工程》课件
动物胚胎
剪碎
胰蛋白酶
或幼龄动
物的组织、 器官，它
细胞悬浮液
用胰蛋白酶分散细 胞，说明细胞间的
们细胞增 殖能力强，
原代培养
物质主要是蛋白质。 动物细胞培养适宜
分裂旺盛， 分化程度
10代细胞
的PH为7.2—7.4， 此环境下胃蛋白酶
低，容易 培养。
洗涤、稀释、
细胞株
（2.0）没有活性， 而胰蛋白酶(7.2-8.4)
（2）单克隆抗体制备过程中应 用哪些细胞 工程技术手段？ （3）制备过程为何要经过两次筛选？
10
单克隆抗体的制备 抗原 小鼠
B淋巴细胞
骨髓瘤细胞
细胞培养
细胞融合，
杂交瘤细胞
筛选
筛选，继续培养
体外培养
体内培养
单克隆抗体
11
单克隆抗体有何应用？
主要用于疾病的诊断、治疗和预防。 与常规抗体相比，具有特异性强、灵敏度 高的优点。如；各种癌症、肝炎病毒、 SARS病毒、细菌及血吸虫等数百种疾病的 诊断；在疾病治疗方面，单克隆抗体犹如 人体卫士，能识别“自己”与“异己”， 一旦发现 致病因素便与之结合将其杀死。 若在单抗上带上抗癌药物制成“生物导 弹”，将药物定向带到癌细胞所在部位， 既消灭了癌细胞又不会伤害健康细胞。
保留融合活性 （诱导细胞融合）
3、动物细胞融合的用途
制备单克隆抗体
5
(三)单克隆抗体
提出问题：长期以来，人们为了获得抗体，采用的是 把某种抗原反复注射到动物体内，然后从动物血清中 分离出所需抗体的方法。用这种方法获得的抗体，不 仅产量低，而且抗体的特异性差，纯度低，反应不够 灵敏。
• 思考：
（1）请概括单克隆抗体的概念 （2）根据阿根廷科学家米尔斯坦和德国科学家柯勒设计的 实验
动物细胞工程(完整ppt课件
.
动物细胞培养过程
动物胚胎或幼龄动
胰蛋白酶
加培养液
单个细胞
细胞
物的组织、器官 剪碎
制成 悬浮
液
细胞部系分细胞“癌变”，细胞株
遗传物质改变，无 限传代
养原 代 培
壁细 胞 贴
细胞
50代细胞 剥离、分瓶
10代 细胞
动物细胞培养不能 最终培养成动物体
传代培养
.
动物细胞生长特性
细胞贴壁：
悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上， 称为细胞贴壁。
3、体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细 胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？
不是，克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞 核，但核外还有少部分DNA（如线粒体DNA） 来自受体卵母细胞
4.动物克隆实例很多，为何多莉就举世闻名呢？
在1997年2月英国罗斯林研究所维尔穆特博士科研组 公布体细胞克隆羊“多莉”培育成功之前，胚胎细胞核 移植技术已经有了很大的发展。实际上，“多莉”的克 隆在核移植技术上沿袭了胚胎细胞核移植的全部过程， 但这并不能减低“多莉”的重大意义，因为它是世界上 第一例经体细胞核移植出生的动物，是克隆技术领域研 究的巨大突破。这一巨大进展意味着：在理论上证明了，
程
妊娠、出生
克隆羊多利
.
思考题
１、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之 前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？
为使核移植动物的遗传物质全部来自有利用 价值的动物提供的细胞。 ２、用于核移植的供体细胞一般都选用传代10 代以内的细胞，为什么？ 10代以内的细胞一般保持正常二倍体的核型， 未发生突变
.
脱组 分织
化
植物细胞B
胞 促进融合 壁
的方法？
动物细胞培养过程
动物胚胎或幼龄动
胰蛋白酶
加培养液
单个细胞
细胞
物的组织、器官 剪碎
制成 悬浮
液
细胞部系分细胞“癌变”，细胞株
遗传物质改变，无 限传代
养原 代 培
壁细 胞 贴
细胞
50代细胞 剥离、分瓶
10代 细胞
动物细胞培养不能 最终培养成动物体
传代培养
.
动物细胞生长特性
细胞贴壁：
悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上， 称为细胞贴壁。
3、体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细 胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？
不是，克隆动物绝大部分DNA来自供体细胞 核，但核外还有少部分DNA（如线粒体DNA） 来自受体卵母细胞
4.动物克隆实例很多，为何多莉就举世闻名呢？
在1997年2月英国罗斯林研究所维尔穆特博士科研组 公布体细胞克隆羊“多莉”培育成功之前，胚胎细胞核 移植技术已经有了很大的发展。实际上，“多莉”的克 隆在核移植技术上沿袭了胚胎细胞核移植的全部过程， 但这并不能减低“多莉”的重大意义，因为它是世界上 第一例经体细胞核移植出生的动物，是克隆技术领域研 究的巨大突破。这一巨大进展意味着：在理论上证明了，
程
妊娠、出生
克隆羊多利
.
思考题
１、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之 前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？
为使核移植动物的遗传物质全部来自有利用 价值的动物提供的细胞。 ２、用于核移植的供体细胞一般都选用传代10 代以内的细胞，为什么？ 10代以内的细胞一般保持正常二倍体的核型， 未发生突变
.
脱组 分织
化
植物细胞B
胞 促进融合 壁
的方法？
动物细胞工程教学PPT
传代培养
将原代细胞进行传代培养， 使其在体外持续增殖的过 程。
细胞冻存与复苏
通过冷冻保存细胞，以便 在需要时进行复苏和培养。
动物细胞培养的常见问题与解决方案
01 02
污染问题
动物细胞培养过程中常见的污染源包括细菌、霉菌和支原体等。解决方 案包括定期检查培养环境、严格控制培养基和器具的灭菌过程以及及时 处理污染细胞。
动物细胞工程实验技术
动物细胞融合技术
动物细胞融合技术是指将两个或多个 动物细胞融合成一个细胞的过程，是 动物细胞工程中的重要技术之一。
动物细胞融合技术需要使用特定的融 合剂或电刺激等方法，使细胞膜融合， 形成异核或多核细胞。
该技术可用于制备单克隆抗体、诱导 多功能干细胞、研究细胞分化机制等 方面。
动物染色体工程需要严格遵守 伦理和法律规定，确保实验动 物的福利和安全。
动物基因编辑技术
动物基因编辑技术是指通过特定的基 因编辑工具对动物基因进行精确的修 饰和改造的技术。
动物基因编辑技术可以采用CRISPRCas9等基因编辑系统，对目标基因进 行敲除、敲入或定点突变等操作。
该技术可用于研究基因功能、治疗遗 传性疾病、制备转基因动物等方面。
经济和社会发展
动物细胞工程的发展将带动相关产业的发展，创 造就业机会，促进经济发展和社会进步。
THANKS
感谢观看
动物细胞工程教学
• 动物细胞工程概述 • 动物细胞培养技术 • 动物细胞工程实验技术 • 动物细胞工程的应用案例 • 动物细胞工程的未来展望
01
动物细胞工程概述
定义与特点
定义
动物细胞工程是以动物细胞为研究对象，通过细胞培养、细胞融合、基因转移 等技术手段，实现动物细胞在数量和质量上的改变，以应用于医学、农业、生 物工程等领域的技术。
动物细胞工程 上课课件
1、在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么 必须先去掉受体卵母细胞的核？
提示：为使克隆动物的遗传物质全部来自优良性状的供体动物 提供的体细胞。
2、用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细 胞，想一想，这是为什么？
提示：10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。
3、你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物， 是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？
用纤维素酶、 果胶酶去壁
细胞膜的流动性、 细胞增殖
用胰蛋白酶 使细胞分散
物理法:离心、振动、电激 物理法:离心、振动、电激
诱导方法 化学法：聚乙二醇
化学法：聚乙二醇
生物法：灭活的病毒
用途和 意义
克服远缘杂交的不亲和障 （1）制备单克隆抗体
碍，大大扩展杂交的亲本 （2）诊断、治疗、预防疾
组合范围
病，例如“生物导弹”
１）作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质，并与 抗原特异性结合
优点：准确、高效、简易、快速
治疗疾病：主要用于癌症治疗
2）用于
运载药物：制成“生物导弹”
优点:疗效高、毒副作用小
课堂练习
1、动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确
的是（ C ）
①诱导融合的方法完全相同
②所用的技术手段不相同
③所采用的原理完全相同
提示：克隆动物绝大部分DNA来自于供体细胞核，但还有少量的 DNA来自于受体卵母细胞。此外，动物的一些行为、习性的形成 与所处环境有很大关系。
3.克隆动物的研究意义：
1）克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白 2）改良动物品种 3）治疗人类疾病，作为供体 4）保护濒危动物
4．体细胞核移植技术存在的问题：
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细胞
物的组织、器官 剪碎
制成 悬浮
液
部分细胞 无限传代
原代培养
50代细胞
传代培养 10代细胞
动物细胞培养不能 最终培养成生物体
6
思考讨论总结：
1.动物细胞培养取材时，一般是取胚胎组织或幼龄动 物的组织或器官，请解释原因？
细胞的衰老与动物机体的衰老有着密切的关系，细胞的增殖 能力与供体的年龄有关，幼龄动物细胞增殖能力强，有丝分 裂旺盛，老龄动物则相反。所以，一般来说幼年动物的组织 细胞比老年动物的组织细胞易于培养。同样，组织细胞的分 化程度越低，则增殖能力越强，所以更容易培养。
动物组织或细胞培养的容易程度：
幼体组织或细胞 ＞ 老龄组织或细胞
分化程度低的组织或细胞 ＞ 分化程度高的组织或细胞
肿瘤组织或细胞 ＞ 正常组织或细胞 7
思考讨论总结：
2.在动物细胞培养过程中，为什么要用胰蛋白酶对取 出的动物组织进行处理？
胰蛋白酶处理动物组织，可以使动物组织细胞 间的胶原纤维和细胞外的其他成分酶解，获得单 个细胞;成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细 胞的生长和增殖.
核移植
胚胎细胞核移植
体细胞核移植 受体细胞：MⅡ期的 （难度高） 卵母细胞
15
16
Ａ母绵羊
Ｂ母绵羊
多
卵细胞
乳腺细胞
莉
羊 的
细胞质
细胞核
培
细胞核移植
融合后的卵细胞
育 过
卵裂 早期胚胎
胚胎移植
程
C母绵羊子宫
妊娠 分娩
17
多莉羊
练习：世界上第一只克隆绵羊“多莉”的培育等程序 如图所示。请仔细看图后回答问题：
如果将牛的细胞与植物细胞杂交，得到绿色的小奶 牛，那岂不是只要晒晒太阳就可以挤出牛奶啦！ 动物细胞也能融合吗？
1
动物 细胞 工程 常用 技术
动物细胞与组织培养 核移植与体细胞克隆 动物细胞融合 单克隆抗体技术
动物细胞与组织培养是动物细胞工程的基础
2
3
问题讨论
烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮 肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人 来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想 如何来治疗该病人？
⑴写出 ａ、ｂ所指的细胞工程 各称：ａ ｂ 。
⑵实施细胞工程ａ时，所需的
受体细胞大多采用动物卵细胞 的原因是： 。
⑶多莉面部的毛色是
，
判断依据：
。
⑷继植物组织培养之后，克隆
绵羊培育成功，证明动物细胞
也具有
。
⑸请举例说明克隆绵羊培育成 功的实际意义： 。
黑面绵羊去 白面绵羊卵 核卵细胞 腺细胞核
a 重组细胞
电脉冲处理 早期胚胎
b 另一头母绵羊子宫
妊娠、出生 克隆绵羊多莉
18
克隆动物的研究意义
1.克隆动物作为生物 反应器，生产医用蛋白 2.改良动物品种 3.治疗人类疾病， 作为供体 4.保护濒危动物
9
思考：多细胞动物和人体的
4.动物细胞培养条件：细胞都生活在内环境中，根
据你所学的知识，认为体培
①、无菌、无毒的环境
养细胞应该模拟内环境的哪 些内容呢？
（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）
②、营养
（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。）
③、温度和PH
36.5+（-）0.5度, 7.2-7.4 保证细胞顺利的
• 细胞株：原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细 胞衰老死亡，少数细胞存活到40~50代，这种传代细胞为细胞 株。
• 细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有 部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制 传代，这种传代细胞为细胞系。
• 细胞株和细胞系的区别： 细胞系的遗传物质改变，具有癌细胞 的特点，失去接触抑制，容易传代培养。
④、气体环境：
生长增殖
O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）
10
5.动物细胞培养要经过脱分化的过程吗？为什么？
脱分化又称去分化，是指分化细胞失去特有的结
构和功能变为具有未分化细胞特性的过程。植物的任
何一部分，甚至单个细胞都具有长成完整植株的能力。
但要发育成完整植株，必须先脱分化，脱分化的细胞
具有发育成任何组织的能力，然后进行再分化，形成
比较项目
植物组织培养
动物细胞培养
原理 培养基性质
细胞的全能性 固体培养基
细胞增殖 液体培养基
培养基特有成分 培养结果
蔗糖、植物 激素
植物体
培养目的
快速繁殖、培育 无病毒植株等
葡萄糖、动 物血清
细胞群体
获得细胞 或细胞产物
13
14
1.概念：细胞核移植P42 体细胞克隆P42
体细胞克隆的关键是细胞核移植技术
使培养的动物细胞定向分化，通常采用定向诱导动物
干细胞，使其分化成所需要的组织或器官。
11
6.动物细胞培养技术的应用:
• ①.蛋白质生物制品的生产
如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体
• ②.健康细胞培养
培养健康细胞用于烧伤病人皮肤移植
• ③.细胞的生理、药理、病理研究
12
7.植物细胞和动物细胞培养的比较
进一步思考：
①.植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗？ ②.胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？ ③.细胞膜的主要成份是什么？胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？ ④.既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个细胞要注 意什么问题呢？能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？
注意时间的控制;不能，因为两者最适PH不同，而正常组织细胞 的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近
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3.有关概念:
• 原代培养：从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。培养的 第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。其生物学 特性未发生的大变化，最接近于体内组织或细胞的生长特性， 很适合用于药物测试、基因表达等实验研究。
• 传代培养：将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液， 分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。
完整植株。植物细胞培养主要用于农林生产中的作物、
苗木育种，快速繁育种苗、培育无病毒植株等，这就
要求植物的组织或细胞先进行脱分化。动物细胞的培
养有各种用途，一般而言，动物细胞培养不需经过脱
分化过程。因高度分化的动物细胞发育潜能变窄，失
去了发育成完整个体的能力，所以，动物细胞也就没
有类似植物组织或细胞培养时的脱分化过程了。要想
取该患者的皮肤进行细胞培养,获 得足量的细胞后再移植。
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• 就是指在体外模拟 动物体内环境，将 动物细胞或组织在 无菌、度适宜和 营养充足的条件下 培养，使其继续生 长、增殖并维持原 有结构和功能的技 术过程。
阅读课本观察图片， 简述动物细胞培养 的基本过程？
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加培养液
动物胚胎或幼龄动 胰蛋白酶 单个细胞