免疫毒性
药物免疫毒性非临床研究技术指导原则
2024年1月目录一、概述 (1)二、一般原则 (1)三、基本内容 (2)（一）证据权重分析评价策略 (2)（二）免疫毒性非临床评价关注点 (3)1、免疫抑制 (3)2、免疫增强 (5)3、免疫系统发育毒性 (7)（三）免疫毒性研究方法的选择 (8)（四）免疫毒性非临床研究的时间安排 (9)四、参考文献 (10)五、附录 (11)免疫毒性评价方法 (11)一、概述免疫系统由免疫器官/组织、免疫细胞以及免疫活性物质组成，包括固有免疫（非特异性免疫）和适应性免疫（特异性免疫）。
药物可能影响固有免疫和适应性免疫的一个或多个方面，从而影响免疫系统的平衡，如诱导免疫抑制或免疫增强。
免疫系统平衡的失调可引起全身或局部的异常免疫反应，影响机体的免疫应答。
因此，评估药物对免疫系统的不良影响是药物安全性评价的重要组成部分。
本指导原则中，药物免疫毒性是指非期望的免疫抑制或增强，包括免疫调节药物放大的药理作用所导致的不良反应。
药物免疫毒性非临床研究应充分表征药物对免疫系统的影响，为药物的风险-获益评估提供支持。
本指导原则适用于药物的免疫毒性非临床评价，不包括细胞和基因治疗产品、佐剂疫苗、血液制品。
本指导原则旨在为药物免疫毒性非临床研究评价策略和所涉及的试验方法提供一般性的技术指导和参考。
二、一般原则药物免疫毒性非临床研究应采用具体问题具体分析的原则，充分考虑药物本身的特点和临床应用情况等，基于证据权重分析（WoE）的评价策略分阶段逐步开展，并对风险-获益进行综合评估。
药物免疫毒性非临床安全性研究一般应当在经过药物非临床研究质量管理规范（GLP）认证的机构开展，并遵守GLP。
对于某些采用特殊的病原体、特殊的试验设施（如宿主抵抗力试验等）、特殊指标检测等难以满足GLP要求的特殊情况，应尽可能地最大限度遵循GLP，保证数据的真实、完整、可溯源。
三、基本内容（一）证据权重分析评价策略在药物研究和开发的过程中，需要对其免疫毒性风险进行评估，通常包括：对药物的结构、作用机制、同类药物数据等一般信息进行全面调研；在人和/或动物细胞、组织器官中进行体外或离体试验获得靶向和非靶向免疫效应信息；在相关动物种属中进行体内毒性研究等。
化学物质的致癌和免疫毒性机制及其评估方法
化学物质的致癌和免疫毒性机制及其评估方法化学物质是人类工业、农业、医疗和科学研究中广泛使用的一类物质。
虽然化学物质在许多应用中发挥了积极的作用，但是它们也可能对人体健康产生负面影响。
化学物质的致癌和免疫毒性是目前研究的热点问题之一。
本文将介绍化学物质的致癌和免疫毒性机制及其评估方法。
一、化学物质的致癌机制癌症是一种由异常细胞增殖引起的疾病，在全球范围内造成了很大的健康问题。
化学物质是导致癌症的主要因素之一。
化学物质对人体产生致癌作用的机制包括基因突变、表观遗传学改变、细胞信号转导异常、肿瘤微环境改变等。
化学物质通过基因突变引起癌症是一个重要的机制。
基因突变是DNA序列的改变，可能会影响基因的功能。
化学物质可以通过与DNA结合形成致突变物，导致DNA单链或双链断裂、碱基损伤，进而产生DNA序列改变。
中、高度活性的致癌物质可以形成致癌基原，与DNA结合的频率和亲和力非常高，会提高突变发生的可能性，从而导致癌症的发生。
表观遗传学改变也是一种可能导致癌症的机制。
表观遗传学指的是细胞在不改变DNA序列的情况下，通过化学修饰和其他机制来改变基因表达。
该机制涉及到DNA甲基化、组蛋白修饰、非编码RNA和染色体重塑等，非常复杂。
研究表明，化学物质可以通过改变表观遗传机制来影响基因表达，从而导致癌症的发生。
细胞信号转导异常是另一个可能导致癌症的机制。
细胞信号转导网络是一个复杂的细胞生物学过程，包括多个分子间的相互作用和调节。
化学物质可以通过抑制或激活这些信号途径来干扰细胞分裂、增殖或程序性死亡等信号处理过程，最终导致肿瘤细胞的增生。
肿瘤微环境改变也可能是导致癌症的机制之一。
正常细胞和癌细胞相互作用以及其他环境因素（如免疫系统、炎症反应等）可以影响肿瘤的生长和扩散。
化学物质可以干扰体内肿瘤微环境的平衡，并且导致细胞因子、生长因子、炎症介质等变化，从而产生肿瘤。
二、化学物质的免疫毒性机制除了致癌作用，化学物质也可能影响人体免疫系统的正常功能，导致免疫毒性。
免疫毒性表现--超敏反应
免疫毒性表现--超敏反应
超敏反应也称变态反应，是机体受同一抗原再次刺激后所引起的病理性免疫应答（异常的免疫增强），可导致生理功能紊乱或组织损伤。
（1）化学物引起过敏的类型：据此可将超敏反应分为四个类型。
致敏化学物可作为半抗原与组织蛋白等大分子结合成完全抗原，刺激机体免疫系统（致敏）。
经过一定的潜伏期，当机体的免疫应答能力达到了一定水平时再次接触同一化学物（激发），就会产生超敏反应。
化学物引起的超敏反应类型（类型、参与成分、机制、临床表现、致敏化学物）
1）Ⅰ型
速发型：IgE、肥大细胞、嗜碱性粒细胞、致敏细胞释放血管活性物质等，引起哮喘、鼻炎，如二异氰酸酯；
2）Ⅱ型
细胞毒：IgG或IgM，抗体与带相应抗原的靶细胞结合，活化补体并进行巨噬细胞吞噬，如K细胞杀伤作用；
3）Ⅲ型
免疫复合物型：IgG、IgM或IgA抗原抗体复合物在组织中沉淀引起细胞浸润、释放水解酶等，如肾小球肾炎等自身免疫性疾病；
4）Ⅳ型
迟发型：TD亚群细胞，致敏TD释放淋巴因子吸引巨噬细胞，并发挥作用，如接触性皮炎。
Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型超敏反应由抗体介导，二次接触抗原后应答较快，数分钟到数小时内出现；Ⅳ型由迟发型超敏反应T淋巴细胞（TD）参与，多在二次抗原接触后24～48小时发生。
（2）化学毒物引起超敏反应的主要表现：接触性皮炎、职业性哮喘等。
接触性皮炎为Ⅳ型超敏反应，可由染料及其中间体、大漆及合成树脂、劣质化妆品等引起。
职业性哮喘为I 型超敏反应，可由甲苯二异氰酸酯（TDⅠ）、四氯苯酐等引起。
农民肺和棉尘肺等过敏性肺炎为Ⅲ型超敏反应。
免疫毒性及评价
可诱发超敏反应的外源性化学物质：
来源 药物
食品 化妆品
工业化学物
植物 混合物有机体
种类 青霉素类、磺胺类、新霉素、哌嗪、螺旋霉素、盐酸安普罗胺、抗生 素粉尘、抗组胺药、奎尼丁、麻醉药、血浆代用品 蓖麻子、生咖啡豆、木瓜蛋白酶、胰腺提取物、谷物和面粉、食品添 加剂、真菌 美容护肤品、香水、染发剂、脱毛剂、指甲油、除臭剂 乙（ 撑）二 胺、邻苯 二 甲 酸酐 、偏 苯 三 酸酐 、二 异 氰 酸酯 类（ TMI、HDI、 MDI、 TDI）、 金 属盐 类 、有 机 磷、 染 料（ 次 苯 基二 胺等 ）、 重 金属 （ 镍 、 汞 、 铬 酸 盐等 ）、 抗 氧化 剂 、 增塑 剂 、 鞣革 制 剂（ 甲醛 等 ） 毒常青藤、橡树、漆树、豚草、花粉等 棉尘、木尘、动物产品
这里已被生命所抛弃，留下的只是一个寂静的春天，无声无息....
中文名称 滴滴涕(DDT)
• 英文名称 2,2-bis(4-Chlorophenyl)-1,1,1trichloroethane
• 别 名 2,2-双(4-氯苯基)-1,1,1-三氯乙烷(即 p,p‘-DDT)；
• 侵入途径：吸入、食入、经皮吸收。
免疫毒性及其评价
免疫毒理学：
Immunotoxicolog y
研究外源性因素对机体免疫系统产生的有 害作用及其机理。
• 免疫毒理学（Immunotoxicology）： 是毒理学与免疫学间的边缘学科，也是 毒理学的一个新分支，它是研究外源化 学物质（xenobiotics）和物理因素对 机体免疫系统产生的有害作用及其机理。
工业化学物 有机溶剂、多卤代芳烃、多氯联苯、多环芳烃、乙二醇醚类
重金属及其化合物、空气污染物、紫外线、粉尘（二氧化硅、石棉等）、 环境污染物
化学毒物的免疫毒性
第二节 化学毒 物对机体免疫 功能影响 及其作用机制
第一节 机体免疫系统及免疫功能
2009-6-30
化学毒物可通过干扰神经内分泌网络等，使机体免疫功能低下 即免疫抑制，导致个体易受感染因素或肿瘤等的攻击；
也可影响免疫细胞的抗原识别能力或敏感性，引起病理性免疫 应答，表现为过敏反应或自身免疫性疾病。
2009-6-30
感应阶段
反应阶段
效应阶段
作用 对象
作用 方式
体液免疫
细胞免疫
抗原多经吞噬细胞的摄取和处理，T细胞的呈递
产生高效而短 命的效应B细 胞（几小时～ 几天） 产生寿命长的 记忆细胞，如 遇同样抗原再 度入侵，立即 发生免疫反应 以消灭之
产生效应T细胞（可存活数月至数年） 产生记忆细胞
• (2)多环芳烃类
• (3)农药类 DDT、敌百虫、甲基对硫磷等。
• (4)金属 铅、镉、砷、汞、镍、锌、铜、甲基汞等。
• (5)大气污染物 二氧化氮、二氧化硫、臭氧、一氧化碳等。
• (6)工业污染物 氯乙烯、苯、苯乙烯、联苯胺、三硝基甲苯、石 棉等。
• (7)治疗用药物 环磷酰胺、氨甲蝶呤、6-巯基嘌呤、5-氟尿嘧啶、 环孢菌素A、雌二醇、白消安等。
之，自发肿瘤及X射线照射引起的肿瘤抗原性最弱。 二．化学致癌物诱发肿瘤抗原的特异性 化学致癌剂或物理因素等因素诱发的肿瘤抗原特异性高，每个
肿瘤的抗原间很少出现交叉反应。
三．机体抗肿瘤的免疫机制 当肿瘤发生后，机体可通过体液免疫效应机制发挥抗肿瘤作用。
机体的抗肿瘤免疫效应机制包括细胞免疫和体液免疫两方面，
第二节 化学毒物对机体免疫功能影响
及其作用机制
I型超敏反应
免疫毒性
(一)黏膜相关淋巴组织的结构 1.有结构的淋巴组织：小肠派氏集合淋巴结、 扁挑体、阑尾、微皱褶细胞等。 2.弥散淋巴组织：上皮淋巴细胞、粘膜固有层 淋巴细胞。 (二)黏膜相关淋巴组织的功能 屏障、下调应答、定向淋巴运输作用。
淋巴细胞的循环
淋巴细胞归巢：成熟淋巴细胞的不同亚群从血循 环进入外周淋巴组织的特定区域定居，称为淋巴细胞 归巢(lymphocye homing)。 淋巴细胞再循环:各种免疫器官中的淋巴细胞并 不是定居不动的群体，而是通过血液和淋巴液循环进 行有规律的迁移。淋巴细胞在血液、淋巴液和淋巴器 官之间反复循环的过程称为淋巴细胞再循环 (lymphocye (recirculation)。
免疫系统在机体中的作用
免疫防御（immune defense） 宿主抵御、清除入侵病原微生物的免疫防 护作用。 免疫稳定 宿主可及时清除体内衰老、损伤或变性的 体细胞，对自身成分处于耐受状态，以维系 机体内环境相对稳定的生理功能。 免疫监视（immune surveillance） 宿主可及时识别和清除体内突变细胞的功 能。
目前认为肿瘤抗原产生的分子机制： 1、在细胞转化和癌变过程中产生新的蛋白质分子； 2、糖基化等原因所导致的异常细胞蛋白质独特降解产物； 3、突变导致的蛋白质正常分子结构改变；
4、隐蔽的自身抗原分子的报露；
5、膜蛋白分子的异常聚集； 6、胚胎抗原或分化抗原的异常表达； 7、某些蛋白的翻译后修饰障碍
肿瘤特异性抗原(tumor specific antigen,TSA） 指仅表达于某种肿瘤细胞表面而不存在于正常 细胞上的新抗原，故又称独特肿瘤抗原。肿瘤特异 性移植抗原或肿瘤排斥抗原。 肿瘤相关抗原（tumor associated antigen,TAA） 指既存在于肿瘤组织或细胞，也存在于正常组织或 细胞的抗原物质，只是其在正常细胞的表达量超过正常 细胞。
免疫治疗的毒性管理
免疫治疗的毒性管理免疫治疗作为一种创新的癌症治疗方法，为许多患者带来了新的希望。
然而，就像任何治疗手段一样，免疫治疗也可能伴随着一些毒性反应。
有效的毒性管理对于保障患者的治疗效果和生活质量至关重要。
免疫治疗的作用机制独特，它通过激活人体自身的免疫系统来攻击肿瘤细胞。
但有时，免疫系统过度活跃可能会导致正常组织受到损伤，从而引发各种毒性反应。
这些毒性反应可以累及身体的多个器官和系统，常见的包括皮肤、胃肠道、肝脏、内分泌系统、肺部等。
皮肤毒性是免疫治疗中较为常见的一种。
患者可能会出现皮疹、瘙痒、红斑，严重的情况下甚至会出现大疱性皮炎。
对于轻度的皮肤症状，可以通过使用保湿霜、局部糖皮质激素等进行治疗。
如果症状较为严重，可能需要口服糖皮质激素或者暂时停止免疫治疗。
胃肠道毒性也是不容忽视的。
患者可能会出现腹泻、腹痛、结肠炎等症状。
轻度的腹泻可以通过调整饮食、使用止泻药物来控制。
但对于严重的结肠炎，可能需要使用高剂量的糖皮质激素，甚至免疫抑制剂。
肝脏毒性表现为转氨酶升高、胆红素升高等。
在治疗过程中，需要定期监测肝功能指标。
如果发现异常，应根据严重程度采取相应的措施，如暂停免疫治疗、使用保肝药物等。
内分泌系统的毒性反应可能会影响甲状腺、垂体、肾上腺等器官的功能。
例如，甲状腺功能减退或亢进，患者可能会感到疲劳、体重变化、情绪波动等。
对于内分泌系统的问题，需要及时补充相应的激素进行替代治疗。
肺部毒性相对较为严重，可能表现为肺炎。
患者可能会出现咳嗽、呼吸困难等症状。
一旦怀疑有肺部毒性，需要立即进行胸部影像学检查，并采取积极的治疗措施，包括使用糖皮质激素等。
在免疫治疗的过程中，早期发现和准确评估毒性反应是至关重要的。
这就需要医护人员对患者进行密切的监测和随访。
在治疗前，要对患者进行全面的评估，包括了解患者的基础健康状况、合并疾病等。
治疗过程中，要定期进行相关的实验室检查和影像学检查，以及时发现潜在的毒性反应。
患者的教育也是毒性管理的重要环节。
生物技术药物免疫毒性和免疫原性
额外的免疫毒性试验方法
• 免疫功能检测
hypersensitivity 目前预测IV型变态反应
autoimmunity host resistance
Buehler试验、豚鼠最大化试验 （GPMT）、小鼠耳肿胀试验、小鼠局部 淋巴结试验(LLNA)
PLNA（报告抗原TNP-Ficoll、TNPOvalbumin）
%
免疫细胞表型检测
—CD4/CD8比例
CD4/CD8
1.8 1.6 1.4 1.2
1 0.8
比 0.6 例
0.4 0.2
0
对照组
低剂量
中剂量
高剂量
图 猕猴iv 4周 LHRHA-PE38后外周血CD4/CD8比例
免疫毒性试验结果分析
• 统计学意义与生物学意义（尤其单一指标） • 变化程度 • 与剂量/暴露关系 • 与拟用临床剂量的关系 • 疗程关系 • 涉及动物种属数量和受影响的终点 • 可能继发于其他因素 (e.g., stress,） • 可能的细胞靶点和（或）作用机制 • 引起这些变化的剂量与产生其他毒性的剂量关系 • 可逆性
• 放射免疫沉淀法（RIP） 液相法，中等或高通量水平
• 表面等离子体共振 液相法，不需结合物（酶标记抗体），能检测到 不同亲和力的抗体和各亚型抗体
• 电化学发光法 液相法，可检测各种抗体亚型
抗体检测方法考察
• 方法学考察
—灵敏度：500-1000ng/ml，低滴度抗体检出 —受试物干扰：如有文献报道，如血清中受试物 浓度大于0.15µg/ml，则难以检测到抗受试物抗体。 一般从1：10开始稀释或对样品进行处理。长效? —精确度：利用阳性对照品重复测量 —阴性对照血清一般需从15只动物或50人中抽取
食品毒理学·化学毒物的免疫毒性
基因组学：通过 分析基因表达变 化了解免疫反应 的机制和调控
蛋白质组学：通 过分析蛋白质表 达变化了解免疫 反应的机制和调 控
基因组学和蛋白 质组学的结合： 可以更全面地了 解免疫反应的机 制和调控
应用实例：如通 过基因组学和蛋 白质组学的分析 了解化学毒物对 免疫系统的影响 为免疫毒性评价 提供依据。
加强化学物质的管理和控制
建立完善的化学物质管理制度
加强化学物质的分类和标识管 理
提高化学物质的安全储存和运 输标准
加强化学物质的使用和废弃物 处理管理
提高公众对化学毒物的认识和防范意识
化学毒物的种类和危害：介绍常见的化学毒物及其对人体的危害
预防措施：介绍如何预防化学毒物对人体的危害如佩戴口罩、手套等防护用品
第一道防线
免疫系统可以 识别并清除外 来病原体和体
内异常细胞
免疫系统可以 调节机体的免 疫反应防止自 身免疫性疾病
的发生
免疫系统在维 持机体内环境 稳定和健康方 面起着重要作
用
化学毒物对免疫系统的损害能如T细胞、B细胞、巨噬细 胞等导致免疫功能下降。
自身免疫性疾病： 化学毒物可能诱 发自身免疫性疾 病如类风湿性关 节炎、系统性红 斑狼疮等。
免疫抑制：化学 毒物可能抑制免 疫系统的功能导 致人体对疾病的 抵抗力下降。
03
化学毒物的免疫毒性机 制
化学毒物的代谢过程
吸收：化学毒 物通过皮肤、 呼吸道、消化 道等途径进入
体内
分布：化学毒 物在血液、组 织、器官等部
控制措施：介绍如何控制化学毒物对人体的危害如加强监管、减少排放等
提高公众意识：介绍如何提高公众对化学毒物的认识和防范意识如加强宣传教育、提高公众意 识等
免疫毒性及评价
复合物型肾小球肾炎 胺、重金属、有机溶剂
溶血性贫血
甲基多巴、青霉素、甲灭酸、苯妥英、干扰素-α 、磺胺药
血小板减少症
乙酰唑胺、氯噻嗪、利福平、奎尼丁、氨基水杨酸、
硬皮病类
2010.6
19
免疫毒性及其评价
常春藤联盟由美国东北部之八所学校组合
而成：布朗大学、哥伦比亚大学、康奈尔
大学、达特茅斯学院、哈佛大学、宾夕法
尼亚大学、普林斯顿大学、及耶鲁大学。
2010.6
20
免疫毒性及其评价
2010.6
常春藤联盟各校校徽
21
免疫毒性及其评价
2010.6
哈佛一角
22
免疫毒性及其评价
化妆品
美容护肤品、香水、染发剂、脱毛剂、指甲油、除臭剂
乙（撑）二胺、邻苯二甲酸酐、偏苯三酸酐、二异氰酸酯类（TMI、HDI、
工业化学物 MDI、TDI）、金属盐类、有机磷、染料（次苯基二胺等）、重金属（镍、
汞、铬酸盐等）、抗氧化剂、增塑剂、鞣革制剂（甲醛等）
植物
毒常青藤、橡树、漆树、豚草、花粉等
混合物有机体 棉尘、木尘、动物产品
7
免疫毒性及其评价
Ⅰ型超敏反应即速发型超敏反应
2010.6
8
免疫毒性及其评价
Ⅰ型超敏反应即速发型超敏反应
表现：
吸入
过敏性鼻炎
花粉、尘螨、真菌孢子、动物毛屑 。
2010.6
9
过敏性哮喘
免疫毒性及其评价
Ⅰ型超敏反应即速发型超敏反应
“麸质过敏症(Celiac Disease)”，又称乳糜 泻。
麸质过敏症的病人容易出 现 严重腹泻、腹痛、胀 气、粪便酸臭的症状。
12
免疫相关毒性管理制度
免疫相关毒性管理制度一、前言免疫相关毒性是指由于机体免疫系统对外源性或内源性物质的异常免疫反应而引起的毒性反应。
在生物医学研究和临床治疗中，免疫相关毒性是一个重要的问题，一旦发生，可能会对患者的生命安全和治疗效果造成严重影响。
因此，建立科学、规范的免疫相关毒性管理制度，对于保障患者安全和促进医疗事业的发展至关重要。
二、免疫相关毒性管理制度的制定目的1、规范免疫相关毒性的监测和评估，减少患者的不良反应发生率；2、促进医疗机构免疫治疗工作的规范化、标准化；3、提高医务人员对免疫相关毒性的认识和应对能力；4、促进免疫治疗技术的持续改进和发展；5、保护患者的生命安全和权益。
三、免疫相关毒性管理制度的内容1、免疫治疗前期准备工作（1）建立严格的患者筛选机制，特别是对于可能存在药物过敏史或免疫相关疾病的患者，必须谨慎评估；（2）详细了解患者的病史，包括疾病情况、过敏史、用药史等，并进行必要的实验室检查；（3）根据患者的个体情况，制定个性化的治疗方案，并告知患者可能的治疗风险和不良反应。
2、免疫治疗过程中的监测和评估（1）定期监测患者的免疫指标和生化指标，包括免疫球蛋白、淋巴细胞亚群、细胞因子等；（2）密切观察患者的临床症状和体征变化，及时发现免疫相关不良反应的迹象；（3）建立免疫相关毒性的评估标准和分级，以便及时进行干预和处理。
3、免疫相关毒性的处理与干预（1）对于轻度免疫相关毒性反应，可停药观察，必要时对症处理；（2）对于中度免疫相关毒性反应，应及时调整治疗方案，减量或暂停药物使用，并采取相应的对症治疗措施；（3）对于重度免疫相关毒性反应，应立即停止治疗，进行紧急处理，必要时转院进行更专业的治疗。
4、免疫治疗后的随访管理（1）治疗结束后，应定期追踪患者的疗效和不良反应情况；（2）建立免疫治疗后续跟踪机制，定期复查免疫指标和体征；（3）对于出现不良反应的患者，应及时介入干预，帮助患者尽快康复。
四、免疫相关毒性管理机制的落实1、加强医务人员的培训（1）对医务人员进行免疫相关毒性管理的培训和考核，提高其免疫治疗的专业水平；（2）建立免疫相关毒性管理的专业团队，定期进行学术交流和病例讨论。
生物技术的免疫原性和免疫毒性
• ICH. preclinical safety evaluation of biotechnology-derived
pharmaceuticals s6
• ICH. immunotoxicity studies for human pharmaceuticals s8 • FDA.Immunotoxicology Evaluation of Investigational New Drugs • 吕秋军等. 生物技术药物临床前安全性评价研究进展。中国新药杂
免疫毒性研究内容二
• 额外的免疫毒性试验（additional studies），如
(1) 常规免疫毒性检测结果提示免疫毒性，感染↑ (2) 受试品的结构，与已知免疫调节剂相似 (3) 药代动力学结果:原型药或代谢产物在免疫组织 蓄积
(4) 适应症:如用于抗HIV药物
(5) 药理作用：常对免疫系统有影响
常规的免疫毒性检测结果
—引流淋巴组织检查
Ａ
Ｂ
图 猴经口免疫HIV-BPV 假病毒后回肠粘膜下集合淋巴小结 Ａ：对照组，Ｂ：高剂量组
常规的免疫毒性检测
—免疫抑制/增强
• 全血细胞变化、白细胞变化或淋巴细胞变化等。 • 免疫器官重量改变或组织学检查显示相关器官或 组织细胞密度变化 • 血清免疫球蛋白变化 • 用药组感染发生率升高 • 用药组肿瘤发生率增多(除遗传毒性、激素效应或 肝酶诱导外)
免疫功能检测
—分泌IFNγ细胞
图
猴经口免疫HIV-BPV 假病毒后外周血p24特异性的分泌IFN－γ的淋巴细胞数量
免疫细胞表型检测
—CD22阳性比例
16
CD22 %
14 12 10 8 6 4 2 0 Control 25mg/kg 75mg/kg 225mg/kg 12周 恢复期4周
中药、天然药物免疫毒性（过敏性、光过敏反应）
中药、天然药物免疫毒性（过敏性、光过敏反应）研究的技术指导原则研究的技术指导原则⼀、概述免疫毒理学是毒理学中⼀门重要的分⽀学科，其⽬的是探讨外源性化合物对机体（⼈和实验动物）免疫系统产⽣的不良影响及机理。
免疫毒性是指外源性化合物对机体免疫系统的损伤作⽤，包括两类，⼀是免疫抑制，即免疫系统的⼴泛抑制，可致机体对感染的易感性增加及肿瘤发⽣率增⾼；另⼀是免疫增强，即免疫系统反应性过度增强，可能包括免疫性产⽣，过敏反应（超敏反应或变态反应）、⾃⾝免疫反应以及不良免疫刺激等。
过敏反应指变态反应，⼜称超敏反应，是指机体受同⼀抗原再次刺激后产⽣的⼀种异常或病理性免疫反应。
按抗原与抗体或细胞反应的⽅式和补体是否参加等，将过敏反应分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ四型。
其中Ⅰ型过敏反应是了解得最多的⼀种过敏反应，⽬前采⽤的过敏试验⽅法多数是根据Ⅰ型过敏反应发病机制的不同环节⽽设计建⽴的。
光过敏反应为IV型过敏反应的特殊类型，是局部给药和全⾝给药后，分布在⽪肤的药物中所含的感光物质与光线产⽣复合作⽤使得⽤药后⽪肤对光线产⽣的不良反应。
中药、天然药物为⼀种外源性物质，也可能作为过敏原引发机体产⽣过敏反应。
由于免疫系统是增⽣活跃的系统，因此对外源性物质⾮常敏感，但每⼀种化学物质都有其特定的靶器官，因此不必盲⽬地对所有受试物进⾏免疫毒性监测，⽽是选择性地对某些受试物特别是以免疫系统为靶器官的毒物进⾏研究。
⽤于某些适应症的药物，因其作⽤机制的特殊性，对⼈体免疫系统可能产⽣影响；另外，当受试物是已知的免疫调节剂的情况，或在安全性评价过程中初步发现对免疫系统有明显影响的药物也应进⾏免疫毒性的评价。
若需要进⾏其他免疫毒性评价的药物，建议可在其长期毒性试验中，增加免疫系统损伤的评价指标。
因⼈群免疫毒理学研究存在下述困难：在⼈群中观察到免疫功能损伤需要的时间较长，且⼈群接触的剂量较低，也难以观察到剂量-反应关系。
⼈群免疫毒理学研究中缺乏特异性指标，缺乏⾮损伤性⽅法。
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接触性皮炎
Maybe due to either TH1 or CTL mediated hypersensitivity
自身免疫：
自身免疫是指机体免疫系统对自身成分发生免 疫应答的现象，自身免疫性疾病是因机体免疫系统对 自身成分发生免疫应答而导致的疾病。
自身免疫性疾病的临床表现很复杂，可分为器官特异 性和器官非特异性两大类。自身免疫性疾病以女性为 多见，女性的发病率大约是男性的2.7倍
青霉素、磺胺、普鲁卡因、有机碘化合物等药物
昆虫
能够诱导变态反应的抗 原性物质。
吸入性变应原
花粉 尘螨或其排泄物 真菌或其孢子 动物皮屑或羽毛
药物
青霉素 磺胺 普鲁卡因 有机碘化物
食入性变应原
参与I型超敏反应的细胞
肥大细胞
嗜硷性粒细胞
嗜硷性颗粒
嗜酸性粒细胞
静息肥大细胞
激活后 5 分钟
激活后 60 分钟
获得性（特异性）免疫：指非遗传所致
，个体通过与外源性物质接触而被诱导和激活 的特异性的免疫能力。
特异性免疫
天 花 病 毒
天 花 病 人
接种牛痘
特异性免疫：可分为体液免疫和细
胞免疫；及主动免疫和被动免疫。
体液免疫：以B 细胞产生抗体来达到保护
目的的免疫机制。属后天的免疫机制。
细胞免疫：凡是由免疫细胞发挥效应以清
凡具有免疫抑制的化学物均能降低机体对细菌、 病毒、肿瘤及寄生虫的抵抗力。本表列举能改变 宿主抵抗力的一些化学物质及药物等
外源化学物免疫抑制的机制：
外源化学物引起免疫抑制的机制并未 完全明了，而且不同的外源化学物可通 过不同的机制影响免疫功能，总的来说 可以分为直接作用和间接作用两大类。
直接作用
• 细胞毒作用 外源化学物直接作用于免疫细胞和免疫器官， 引起细胞死亡，免疫细胞数目减少，免疫器官 萎缩，免疫功能抑制。
• 对淋巴细胞成熟过程的影响 外源化学物骨髓干细胞
• 对淋巴细胞增殖、分化的影响
间接作用
• 内分泌素 TCDD和乙醇都可引起糖皮质激素升高
• 环境因素 • 营养障碍
超敏反应
• 是指机体受同一抗原再次刺激后产生的一 种异常或病理性免疫反应。超敏反应与免 疫反应本质上都是机体对某些抗原物质的 特异性免疫应答，但超敏反应主要表现为 组织损伤和/或生理功能紊乱，免疫反应则 主要表现为生理性防御效应。
铅：降低对感染性疾病的抵抗力 砷化物：患病毒性带状疱疹的发病率较高
缺锌影响机体免疫功能
• 影响淋巴细胞增殖分化 • 影响免疫记忆 • 影响免疫细胞分泌细胞因子 • 影响吞噬细胞和NK活性
铅对免疫功能的影响
• 铅具有免疫毒性，在较低剂量可引起免疫功能 改变，增加机体对内毒素和病原体的易感性
• 体液免疫：抗体减少、B细胞表面受体减少、 免疫记忆丧失
常见的I型超敏反应
一、全身性过敏反应 1、药物过敏性休克 2、血清过敏性休克
二、呼吸道过敏反应 1、过敏性哮喘 2、过敏性鼻炎
三、消化道过敏反应：过敏性肠炎
四、皮肤过敏反应：荨麻疹
Skin Prick Test
In this test a small needle is used to gently prick the skin through a drop of fluid containing a known allergen. It is usually done on the forearm, although with young children it may be done on the back so they don't have to see what is happening. A negative reaction means that you do not have an allergy to that particular allergen.
诱导体内自身抗原 刺激机体免疫活性细胞 产生自身抗体，免疫复合物沉积 激活补体，组织损伤
பைடு நூலகம்
Systemic lupus erythematosus 全身性红斑狼疮
免疫毒性检测方案
日本推荐的免疫毒性检测方案
大鼠免疫毒性检测方案(NIPHEP)
美国国家研究委员会推荐的人群 免疫方案
美国食品与药品管理局（FDA）及其药品 评价和研究中心（CDER）于2002年10月正式 公布了新药研究中的免疫毒理学评价规范。提 出要考虑药物对免疫系统五个方面的影响，除 了免疫抑制、超敏反应和自身免疫外，还有免 疫原性（immunogenecity）和不良免疫刺激 （adverse immunostimulation）
分类
根据发生机制和临床特点，可分为： • Ⅰ型超敏反应—速发型或过敏反应型 • Ⅱ型超敏反应—细胞毒型或细胞溶解型 • Ⅲ型超敏反应—免疫复合物型或血管炎型 • Ⅳ型超敏反应—迟发型或细胞介导型
Carl Prausnits-Giles 1876-1963
Robin Coombs 1921--
一、I型超敏反应（速发型）
1、免疫器官
中枢免疫系统 (胸腺、骨髓) 外周免疫系统 (脾、淋巴结、扁桃体)
2、免疫细胞
淋巴细胞（T细胞、B细胞等） 吞噬细胞（巨噬细胞等）
3、免疫物质：体液中的各种抗体和淋巴因子
免疫：机体受到抗原物质刺激而产
生特异性免疫应答的过程。
先天性（非特异性）免疫：机体依赖自
身天然存在的屏障结构来防御有害物质或病原 微生物，这些结构包括皮肤、黏膜、血液和淋 巴组织中的巨噬细胞、自然杀伤细胞及各种细 胞因子等。
• Gordon G, Gibson R. Immunotoxicology. England: Academic Press, 1983
免疫毒理学的里程碑
• The international seminar on Immunotoxicology: the Immune System as a Target for Toxic Damage, in Luxembourg in 1984. (CEC-IPCS)
• Ⅳ型超敏反应是由效应T细胞与相应抗原作 用后，引起的以单个核细胞浸润和组织细胞 损伤为主要特征的炎症反应。
接触性皮炎
传染性迟发型超敏反应
Patch test
This test is used to diagnose delayed allergic reactions such as Contact Dermatitis. It involves taping traces of various known contact allergens on the skin underneath special aluminium discs and keeping them there for 48 hours. It can test for allergy to Rubber, Nickel, Lanolin, dyes, cosmetics, solvents, preservatives, and medication.
变应原（allergens）是指能够选择性地激活 CD4+Th2细胞，诱导产生特异性IgE抗体应答， 引起变态反应的抗原性物质。
天然变应原： 相对分子量较小（10-20kDa） 可溶性蛋白质抗原
临床常见的变应原：花粉颗粒、尘螨或其排泄物、 真菌或其孢子、昆虫或其毒液、动物皮屑或羽毛，牛 奶、鸡蛋、鱼虾、蟹贝等食物
• 细胞免疫：增殖分化障碍 • 非特异性免疫：巨噬细胞数量减少，功能降低
汞对免疫功能的影响
• 中枢神经系统的不可逆损伤 • 大剂量导致免疫功能下降和免疫抑制 • 小剂量引起自身免疫性疾病
– 与遗传因素和个体敏感性关系密切 – 与TH1/TH2失衡有关 – 以肾炎为主
• 抑制巨噬细胞分泌TNF 、NO • 引起细胞凋亡
III型超敏反应（免疫复合物型）
• 是由中等大小可溶性免疫复合物沉积于局 部或全身毛细血管基底膜后，通过激活补 体和血小板、嗜碱性、嗜中性粒细胞参与 作用下，引起的以充血水肿、局部坏死和 中性粒细胞浸润为主要特征的炎症反应和 组织损伤
IV型超敏反应（迟发型）
• 即迟发型超敏反应（delayed type hypersensitivity，DTH）
获得性免疫：也可分为主动免疫和被动
免疫。
主动免疫：打预防针
被动免疫：注射丙种球蛋白
免疫毒理学概念：
免疫毒理学（immunotoxico1ogy）是毒 理学与免疫学间的边缘学科，也是毒理学 的一个新分支。它主要研究外源化学物和 物理因素对机体免疫系统的有害作用及其 机制。免疫毒理学是在免疫学和毒理学的 基础上发展起来的，是一门十分年轻的学 科。
除异物的作用即称为细胞免疫。由T细胞介导。
体液免疫作用机制
体液免疫
抗原 T细胞
吞噬细胞
抗体
效应 B细胞 B细胞
抗 体 与 抗 原 结 合
记忆细胞
细 胞 免 疫 作 用 机 制
体液免疫和细胞免疫的关系
• 体液免疫与细胞免疫之间，既各自有其 独特的作用，又可以相互配合共同发挥 免疫效应。
• 进入体内尚未进入细胞的抗原（如细菌 的外毒素、少量的细菌或病毒等）主要 由体液中的抗体发挥体液免疫作用；而 这些抗原一旦进入细胞内部，就要靠细 胞免疫来将它们消灭、清除了。
化学物对免疫系统的影响：
免疫抑制 超敏反应 自身免疫反应
免疫抑制作用的靶部位：
细胞免疫 体液免疫 非特异性免疫 宿主抵抗力
具有免疫抑制作用的外源化学物：
多卤代芳烃：PCB、PBB、TCDD 多环芳烃：DMBA、B（a）P、 农药：DDT、PCP、敌百虫、甲基对硫
磷 金属：铅、镉、砷、汞 气体污染物：NO2、SO2、臭氧、CO 工业污染物：氯乙烯、苯、石棉 治疗药物：CP、5-FU、