微生物培养基的分类方法
微生物培养方法
微生物培养方法微生物培养是一种用于研究微生物生理生化特性、生长繁殖规律及其与环境条件的关系等的重要技术手段。
以下是一些常见的微生物培养方法：1、固体培养基培养法固体培养基是在培养液中加入凝固剂，使培养基成为凝固状态的培养基。
这种培养基具有良好的稳定性，可以防止培养液中的微生物在培养过程中流失，同时也可以使微生物在固体表面生长繁殖，方便观察和检测。
固体培养基一般用于细菌、放线菌、酵母菌等微生物的培养。
2、液体培养基培养法液体培养基是一种不添加凝固剂的培养基，使培养基呈液体状态。
液体培养基中，微生物在培养液中自由悬浮生长繁殖，可以充分接触培养液中的营养物质，有利于微生物的生长繁殖。
液体培养基一般用于工业生产中的微生物培养，如发酵工业中制备各种发酵产品。
3、半固体培养基培养法半固体培养基是在液体培养基中加入少量凝固剂，使培养基成为半凝固状态的培养基。
这种培养基可以固定培养液中的微生物，同时也可以使微生物在半固体表面生长繁殖。
半固体培养基一般用于观察微生物的运动和生长情况。
4、厌氧培养法有些微生物需要在无氧或低氧分压条件下生长繁殖，因此需要采用厌氧培养法。
厌氧培养法一般采用密闭容器或厌氧手套箱中进行，可以提供无氧或低氧环境。
在厌氧培养法中，需要使用专门的厌氧培养基和厌氧菌株，以保证微生物的生长繁殖。
5、富集培养法富集培养法是一种常用的分离高浓度微生物的方法。
该方法是通过在培养基中添加一些特殊成分，如高浓度营养物质、抑制剂等，以抑制其他微生物的生长繁殖，从而增加目标微生物的数量和浓度。
富集培养法一般用于从自然界或工业生产中分离特定种类的微生物。
微生物培养方法有很多种，每种方法都有其特定的适用范围和特点。
在实际操作中，需要根据具体情况选择合适的培养方法，以达到最佳的培养效果。
还需要注意无菌操作、环境控制等方面的技术细节，以保证微生物生长繁殖的良好环境和条件。
微生物的分离培养方法微生物的分离培养是微生物研究中常用的技术之一，它能够将目标微生物从复杂的微生物群体中分离出来，并进行纯培养。
微生物培养基的分类有哪些
微生物培养基的分类有哪些•微生物培养基由多种物质混合而成，用于促进和支持微生物的生长和鉴定。
培养基之中含有营养物质、能源物质、促生长因子、矿物质、金属盐、缓冲盐、胶凝剂（用于固体培养基）。
默克提供复杂配方的培养基，确保准确、可重现的微生物试验结果。
培养基仍然是制药和食品饮料行业中微生物计数和检测的金标准。
微生物培养基制剂可为液体（肉汤）、固体（琼脂平板）、或半固体（深层琼脂），其中固体和半固体培养基含琼脂或明胶等凝固剂。
默克的产品包括一系列的粉末或颗粒状的脱水培养基。
出色的制粒技术为您带来最大的便利性和安全性，同时符合最高水平的行业性能标准。
即用型培养基在标准生产条件下生产，为时间、设备和熟练人员时常捉襟见肘的微生物实验室解决了无数难题。
默克提供即用型90和55mm琼脂平皿、液体培养基瓶、试管或2mL安瓿、肉汤和冲洗液，全面服务您的微生物检测应用。
生物负荷检测培养基生物负荷检测用于测定成品或未灭菌原料中活性需氧菌数目。
默克提供R2A等慢速生长菌培养基，以及生物负荷检测所需的大豆胰蛋白胨消化物培养基，如胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)和沙氏葡萄糖琼脂（如SDA）。
现可针对特定的需氧菌检测需求提供特殊培养基。
此外，默克还提供生物负荷检测用标准固体培养基平皿(90 mm)、各种瓶装和试管装的增菌培养物液体培养基以及氯化钠-蛋白胨缓冲液。
环境监测培养基表面和人员监控是维持生产车间洁净，最大限度降低污染风险的关键手段。
探索默克的即用型接触平皿、接触玻片和拭子，以对这些监控进行效率监测。
默克提供用于主动式空气监测的沉降和接触平皿装培养基，以及适用于对应空气监测系统的琼脂试纸条。
各种各样的沉降平皿制剂可在生产过程中关键点实现连续被动监测。
默克针对无菌生产的关键洁净室，提供了ICR拭子、三层袋装和伽马辐照的接触和沉降平皿。
培养基灌装试验培养基培养基灌装（又称工艺模拟）是重要的微生物试验，利用无菌培养基代替药物或饮料产品评估无菌工艺性能。
微生物培养基选择指南
微生物培养基选择指南•介绍•微生物培养基的类型•FAQ•微生物培养基选择指南微生物培养基简介微生物学研究需要能在实验室提供各种不同种类的细菌、酵母或病毒。
诸如发酵、蛋白质和疫苗生产的大规模过程需要大量处于生理活性状态的细菌。
因此，针对各种应用需要有能提供适当的生化环境并保持微生物所有特征的合适的营养培养基。
任何微生物培养基都应包括营养素、能量、必需矿物质、缓冲剂和pH指示剂。
有时它们还包括选择剂和固化剂。
专性寄生虫，如噬菌体，也可在含有宿主细菌的营养培养基中进行培养。
以下是默克典型微生物培养基的基本成分：•营养来源–蛋白质、维生素、矿物质和碳水化合物的来源；主要是蛋白胨和肉提取物的混合物•能量源–碳水化合物的来源；主要是葡萄糖•基本矿物质–微量和大量矿物质的来源；主要存在于蛋白胨和肉提取物中•缓冲剂–保持最佳pH值的试剂；主要是特定的氨基酸、磷酸盐、柠檬酸盐和两性离子•pH指示剂–通过颜色变化指示培养基pH值变化的试剂；主要是酚红•选择剂–仅允许特定细菌生长的试剂；例如抗生素、亚碲酸盐、叠氮化物和胆汁盐•固化剂–在需要时可将培养基保持在固态或半固态的试剂；广泛使用的是琼脂，尽管有时使用的是明胶•特定的物质，如生长因子、酶，也可被掺入至特定的细菌培养基中微生物培养基的类型•简单或基础培养基：包括营养肉汤和蛋白胨水；在分子生物学研究实验室通常用于分离和培养各种细菌•复杂培养基：含有多种营养成分的混合物；氨基酸来源的确切组成并不明确。
例如巧克力琼脂、MacConkey琼脂、Lowenstein-Jensen培养基•明确培养基：含有某些细菌所需的已知和明确的碳和氮源•特定培养基：含有会刺激难养菌繁殖、阻止有害细菌繁殖的特定物质，或能区分不同类型细菌的指示剂•细菌培养基LB培养基溶菌肉汤或LB是培养大肠杆菌最为常用的培养基。
它最初是由BertaniG创建以用于培养志贺氏菌指示菌。
LB是一种富含蛋白胨、酵母提取物、NaCl和琼脂（用于固体培养基）的丰富培养基。
培养基的种类
培养基的种类繁多。
因考虑的角度不同，可将培养基分成以下一些类型：（一）根据所培养微生物的种类作分类根据微生物的种类可分为：细菌、放线菌、酵母菌和霉菌培养基。
常用的异养型细菌培养基为牛肉膏蛋白胨培养基，常用的自养型细菌培养基是无机的合成培养基，常用的放线菌培养基为高氏一号合成培养基，常用的酵母菌培养基为麦芽汁培养基，常用的霉菌培养基为察氏合成培养基。
（二）根据对培养基成分的了解程度作分类1. 天然培养基指一类利用动、植物或微生物体包括用其提取物制成的培养基，这是一类营养成分既复杂又丰富、难以说出其确切化学组成的培养基。
例如牛肉膏蛋白胨培养基。
天然培养基的优点是营养丰富、种类多样、配制方便、价格低廉；缺点是化学成分不清楚、不稳定。
因此，这类培养基只适用于一般实验室中的菌种培养、发酵工业中生产菌种的培养和某些发酵产物的生产等。
常见的天然培养基成分有：麦芽汁、肉浸汁、鱼粉、麸皮、玉米粉、花生饼粉、玉米浆及马铃薯等。
实验室中常用牛肉膏、蛋白胨及酵母膏等。
2. 合成培养基又称组合培养基或综合培养基，是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。
例如高氏一号培养基、察氏培养基等。
合成培养基的优点是成分精确、重演性高；缺点是价格较贵，配制麻烦，且微生物生长比较一般。
因此，通常仅适用于营养、代谢、生理、生化、遗传、育种、菌种鉴定或生物测定等对定量要求较高的研究工作中。
3. 半合成培养基又称半组合培养基，指一类主要以化学试剂配制，同时还加有某种或某些天然成分的培养基。
例如培养真菌的马铃薯蔗糖培养基等。
严格地讲，凡含有未经特殊处理的琼脂的任何合成培养基，实质上都是一种半合成培养基。
半合成培养基特点是配制方便，成本低，微生物生长良好。
发酵生产和实验室中应用的大多数培养基都属于半合成培养基。
（三）根据培养基的物理状态作分类1. 液体培养基呈液体状态的培养基为液体培养基。
它广泛用于微生物学实验和生产，在实验室中主要用于微生物的生理、代谢研究和获取大量菌体，在发酵生产中绝大多数发酵都采用液体培养基。
微生物培养基的分类
细菌。 小曲白酒-边糖化边发酵、酱油-高盐稀醪发酵
3.液体培养基
把各种营养物质都溶解于水中，混合制成的液 体状态的培养基。
培养基中不加任何凝固剂。通过振荡和搅拌增加通 气量。
特点：成分均匀，便于灭菌处理、运输和监测。
细 菌：7～7.5 放线菌：7.8～8.0 酵母菌、霉菌：4.5～ 6.0
生长和代谢--改变培养基pH。
维持pH值的恒定方式：
在培养基里加PH缓冲剂(6.4～7.2)或不溶性的碳
酸盐。
（CaCO3）
磷酸二氢钾(碱性)或 磷酸氢二钾(酸性)
PH=6.8
4.原料来源的选择
⑴微生物学实验--便于观察实验现象 原料：选择易加工，使用方便的原料。 碳源--试剂纯葡萄糖、蔗糖、淀粉等。 氮源--蛋白胨、牛肉膏、酵母膏。 ⑵发酵生产 原料--廉价且易于获得的原料
应用：微生物生理生化特性研究、大规模的工业生 产（啤酒、葡萄酒、乳制品生产）。
液体流乙醇酸盐流体培养基
好氧菌，厌氧菌，兼性厌氧菌的检验
（三）按照培养基的功能分 (1)基础培养基:含有一般微生物生长繁殖所需的基
本营养物质的培养基。 用途:作为一些特殊培养基的基础成分。 细菌:牛肉膏蛋白胨培养基 霉菌:马铃薯葡萄糖琼脂培养基 酵母菌:麦芽汁琼脂培养基
成分：蛋白胨10克 乳糖5克 蔗糖5克 K2HPO42克 *伊红Y0.4克 美蓝0.06克 蒸馏水1000ml
伊红和美蓝作用:抑菌某些细菌生长和鉴别染色，产酸指示剂。 ①区分大肠杆菌和沙门氏菌和志贺氏菌 大肠杆菌：发酵乳糖产酸，使伊红与美蓝结合生成沉淀，呈现 紫黑色菌落，经反射可看到绿色金属光泽。 沙门氏菌和志贺氏菌:不能发酵乳糖,形成无色菌落. ②区分大肠杆菌和产气肠杆菌 大肠杆菌:在EMB上,菌落较小,有绿色金属光泽。 产气杆菌：菌落较大，湿润，呈灰棕色
工业微生物学实验试题(附解析)-生物工程-生物技术-制药工程-天津科技大学-04
是
。
10 ． 革 兰 氏 染 色 中 对 染 色 标 本 进 行 固 定 的 目 的
是：
、
、
。
第 2 页 （共 6 页）
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姓名:
2008 - 2009 学年第 一 学期本科试卷
课程名称:工业微生物学实验(B）
四、简答题（共 36 分）
1．列表说明细菌、酵母、霉菌的培养基种类，培养温度，PH 值，个体形态的 观察方法。
学号:
专 业:
学 院:
第 3 页 （共 11 页）
年级：06 级 专业：食品科学与工程（本科）课程号：0431030706
2. 简述酵母菌死亡率测定的原理。 3. 简述湿热灭菌比干热灭菌更有效的原因。
年级：06 级 专业：食品科学与工程（本科）课程号：0431030706
试题解析
一、名词解释（共 16 分，每小题 4 分）
1．大肠菌群 大肠菌群系指一群在 37℃、24h 能发酵乳糖，产酸、产气，需氧和兼性厌氧的 革兰氏阴性无芽孢杆菌。
2．培养基 是人工配制的能满足微生物生长繁殖和积累代谢产物的营养基质。
斜面表面又转成 红色 。而底层在比较短的培养时间为 黄 色。有的糖，培养基上下全为 黄 色。
7．根据微生物菌种保藏的原理，一般微生物菌种保藏常需满足的条件是：
低温 、 干燥 、__缺氧（隔绝空气） 。
8．糖发酵实验中加杜氏管的目的是便于观察 产气
现象。
9. 乳糖胆盐发酵培养基（大肠菌群测定）中加入胆盐的目的是 抑制革兰氏
菌种 细菌 酵母 霉菌
培养基
温度
肉汤培养基
培养基的概念、种类及用途
培养基的概念、分类及用途各位同学，大家好，今天我们来学习《微生物检验技术》中有关培养基的基本知识，微生物的培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配置出供其生长繁殖的营养基质，也就是说，培养基实际上是微生物所需要的各种营养物质，那么构成培养基的成分就非常重要。
一般微生物的培养基呢，都含有水，碳源，氮源，无机盐等营养物质，虽然不同的微生物所需要的营养物质有一定差异，但是他们都需要刚刚提到的这四种物质，所以这是配制培养基最基本的四类物质，大家需要记住它。
那么在此基础上，培养基还需要满足微生物对PH值，特殊的营养物质以及氧气等等的要求，那么我们通过两个例子来帮助大家理解，比方说牛肉膏蛋白胨培养基里面的牛肉膏，其中呢有含有牛肉成分，那么它可以为微生物的生长提供碳源和氮源，另外还有磷酸盐，维生素等等，那么蛋白胨，听这个名字大家应该知道，里面的蛋白质成分可以为微生物培养提供碳源和氮源，另外呢，还可以提供维生素，那么氯化钠主要是提供无机盐，最后还有水。
培养基的制备还需要满足微生物对PH值，特殊营养物质以及氧气的需求。
我们举几个例子帮助大家理解，如果要培养乳酸杆菌，那么我们需要在培养剂里添加维生素，培养霉菌的时候，要把PH值调至酸性，如果是细菌的话，PH值调至中性或微碱性，如果是厌氧微生物呢，就放在无氧条件下培养。
这是培养基的概念及成分。
接下来我们来简单介绍一下培养基的分类。
首先我们来说两种最基本的分类方法，按成分划分和按状态划分。
按成分划分的话，主要是分三种，天然培养基、合成培养基和半合成培养基。
那什么叫合成培养基？培养基不都是人工合成的吗？合成培养基指的是：培养基中的成分全部已知。
注意这个已知它的要求非常严格。
比如说我配一个马铃薯琼脂培养基，合成培养基需要你知道马铃薯中有哪些化学成分。
比如有多少糖？有多少氨基酸？有多少生长因子等等，所以说这个叫做天然培养基，因为你的用的主要的材料是天然的成分：马铃薯。
实际在实验室中，真正严格的纯的合成培养基是不多见的，这个原因很多，第一个，合成培养基的制备非常麻烦，它需要东西很多，每一种物质都需已知并自行添加。
生物-微生物的基本培养技术
微生物的基本培养技术[高中生物] 1.概述培养基的成分和配制方法。
2.区分消毒和灭菌，掌握不同物品的灭菌方法。
3.概述微生物纯培养的基本操作要求。
一、培养基的配制1．培养基的概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
2．作用：用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。
3．培养基种类Error!特别提醒 (1)固体培养基中的琼脂仅作为凝固剂，不能为微生物生长提供能量和碳源。
(2)病毒为非细胞结构生物，只能在活细胞中营寄生生活，目前不能利用人工培养基来培养。
4．培养基的营养构成(1)主要营养物质：水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源(提供氮元素的物质)和无机盐。
(2)某种常见的细菌培养基——牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成组分含量提供的主要营养牛肉膏 5 g碳源、磷酸盐和维生素等蛋白胨10 g氮源和维生素等NaCl 5 g无机盐H2O定容至1 000 mL水(3)还需满足微生物对pH、特殊营养物质以及O2的需求。
例如：在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加维生素；在培养霉菌时，一般需要将培养基调至酸性；在培养细菌时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性；在培养厌氧微生物时，需要提供无氧的条件。
判断正误(1)用于发酵的微生物主要指细菌和真菌( )(2)培养基中加入琼脂的目的是提供碳源( )(3)所有微生物在培养时，培养基中都需加入氮源( )(4)培养不同微生物的培养基成分完全一样( )答案 (1)√ (2)× (3)× (4)×探讨点 概述培养基的种类和营养构成资料一：配制培养酵母菌的培养基：称取去皮的马铃薯200 g，切成小块，加水1 000 mL，加热煮沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。
向滤液中加入20 g葡萄糖(也可用蔗糖代替)、15～20 g琼脂，用蒸馏水定容至1 000 mL。
资料二：100 g马铃薯中含有80 g水、2 g蛋白质、16 g碳水化合物，还有维生素、无机盐等。
培养基的种类
培养基的种类由于各种微生物所需要的营养不同，所以培养基的种类很多。
据估计目前约有数千种不同的培养基，这些培养基可根据所含成分、物理性质以及不同的使用目的等而分成若干类型。
1.按照培养基的化学成分分培养基按其所含成分，可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类。
(1)合成培养基。
合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。
这种培养基的化学成分清楚，组成成分精确，重复性强，但价格较贵，而且微生物在这类培养基中生长较慢。
如高氏一号合成培养基、察氏培养基等。
主要用于工业生产。
(2)天然培养基。
由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养细菌。
这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，所以常被采用。
(3)半合成培养基。
在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。
这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。
2.按照培养基的物理性质分培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。
(1)固体培养基。
是在培养基中加入凝固剂，有琼脂、明胶、硅胶等。
固体培养基常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面。
(2)液体培养基。
液体培养基中不加任何凝固剂。
这种培养基的成分均匀，微生物能充分接触和利用培养基中的养料，适于作生理等研究，由于发酵率高，操作方便，也常用于发酵工业。
(3)半固体培养基。
是在液体培养基中加入少量凝固剂而呈半固体状态。
可用于观察细菌的运动、鉴定菌种和测定噬菌体的效价等方面。
3.按照培养的微生物的种类分培养基按微生物的种类可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基和霉菌培养基等四类。
常用的细菌培养基有营养肉汤和营养琼脂培养基；常用的放线菌培养基为高氏1号培养基；常用的酵母菌培养基有马铃薯蔗糖培养基和麦芽汁培养基；常用的霉菌培养基有马铃薯蔗糖培养基、豆芽汁葡萄糖（或蔗糖）琼脂培养基和察氏培养基等。
13常见微生物的培养特征
放线菌的菌落特征
菌落较小，表面丝绒状有皱折，或粉末状，干燥、较厚，不透明 菌落与培养基结合紧密，菌落正反面、中心与边缘颜色常不一致，常具泥腥味
酵母菌的菌落特征
菌落大而厚，圆形，边沿齐整，表面、湿润、粘稠，质地均匀，色泽多 为红色或乳白色，菌落与培养基结合不紧密，常具酒香味
种；颗粒状的典型菌落，菌落的正反面颜D色：往游往动不一放致线，菌菌；落
D：边卡缘那培养霉基素的链平霉面菌有变；形现象；有特E殊：气小味单（胞土霉菌气；味）
E：等除。虫链霉菌；
F：皱双孢马杜拉放
在 F：生液磺体酸培链养霉基上菌：集结成团，有些线沿菌试管壁生长形成菌
膜，也有沉淀，无混浊。
酵母？菌（菌株？？？）在 查氏琼脂平板上25 ℃培养 7d 后菌落直径18~19mm ， 圆形，边缘齐整不蔓延，表 面丝绒状并具放射状沟纹， 较厚，中央稍凸起，，菌丝 初为浅黄褐色近于淡粉红色， 老后颜色变深，有黄色渗出 液，背面呈黄褐色。
四大类细胞型微生物的菌落特征
细菌的菌落特征
基酵呈母菌浑菌浊落 状态。
细菌菌落
二、霉菌的菌落特征
由粗而长的分枝状菌丝组成,菌落疏松, 呈绒毛状、絮状或蜘蛛网状,比细菌菌落大几 倍到几十倍,有的没有固定大小。
各种霉菌,在一定培养基上形成的菌落大 小、形状、颜色等相对稳定,所以菌落特征也 为分类依据之一。
基质中（培养基中）未知菌落所属微 生物类群的初步鉴别
四大类微生物培养特征观察
一、培养基分类 （一）液体培养基
（二）、半固体 培养基：
沿穿刺线生长
扩散生长
意义：用于鉴别细菌有无动力。
微生物培养基
线虫：如蛔虫、钩虫等
培养目的
微生物生长：提供微生物生长所需的营养物质
01
微生物鉴定：鉴定微生物的种类和特性
03
微生物分离：分离特定微生物，如细菌、真菌等
02
微生物保存：保存微生物，以便后续研究或应用
04
培养条件
营养成分：选择适合微生物生长的营养成分
1
酸碱度：选择适合微生物生长的酸碱度
2
温度：选择适合微生物生长的温度
按照用途分类：选择培养基、增殖培养基、鉴别培养基
按照培养方式分类：固体培养基、液体培养基、半固体培养基
按照微生物种类分类：细菌培养基、真菌培养基、病毒培养基
01
03
02
04
培养基的类型
固体培养基
B
D
A
C
特点：含有凝固剂，使培养基呈固体状态
成分：包括营养物质、凝固剂、指示剂等
应用：常用于微生物的分离、鉴定和计数
优点：便于观察和计数，可长期保存
液体培养基
1
特点：液体状态，易于混合和分散
2
应用：微生物培养、发酵、生物制药等领域
3
成分：营养物质、缓冲剂、pH调节剂等
4
优点：操作简便，易于控制微生物生长条件
5
缺点：易受污染，需要严格无菌操作
6
实例：LB培养基、M9培养基等
半固体培养基
特点：半固体状态，既有液体的流动性，又有固体的支撑性
避光保存
避光保存可以防止微生物培养基中的成分发生光化学反应，影响实验结果。
04
避光保存可以延长微生物培养基的保质期，降低成本。
03
避光保存可以防止微生物培养基中的成分受到光照的影响，保持其稳定性。
微生物的营养和培养基--培养基
f).碳源过多，易形成较低的pH；碳源不足，易引起菌体的衰老
一、培养基
２ 培养基配制原则
➢ 条件适宜：物理化学条件适宜； ➢ pH条件适宜：各类微生物的最适生长pH值各不相同；
➢在微生物的生长和代谢过程中，培养基的初始pH值会发生改变； ➢为了维持培养基pH的相对恒定，通常在培养基中加入pH缓冲剂，或在进行 工业发酵时补加酸、碱。
微生物学基础
单元五 微生物的营养和培养基
项目二 微生物的培养基
一、培养基
1 培养基概述 ➢ 定义：由人工配制的、适合于不同微生物生长繁殖 或积累代谢产物用的营养物质（混合养料）； ➢ 特点：具备微生物所需要的五大营养要素（碳源、 氮源、能源、无机盐、生长因子、水），且应比例 适当；一旦配成必须立即灭菌； ➢ 用途： ➢ 促使微生物生长； ➢ 积累代谢产物； ➢ 分离微生物菌种； ➢ 鉴定微生物种类； ➢ 微生物细胞计数； ➢ 菌种保藏； ➢ 制备微生物制品。
一、培养基
２
培养基配制原则
➢ 经济节约：根据培养目的选择原料及其来源； ➢ 培养目的：a).是培养菌体还是积累代谢产物？ 培养菌体时：氮源含量宜高（碳氮比低） b).是实验室种子培养还是大规模发酵？ 种子培养时：精；规模发酵时：粗
c).代谢产物是初级代谢产物还是次级代谢产物？
次级代谢产物时：要加入特殊元素；
一、培养基
２ 培养基配制原则
➢ 目的明确：培养基组分满足微生物的需要； ➢ 营养协调：营养物的浓度与比例应恰当； ➢ 条件适宜：物理化学条件适宜（pH、渗透压、水活度aw、氧化还原电势）； ➢ 经济节约：根据培养目的选择原料及其来源。
微生物培养基基础知识简介
SS琼脂(沙门氏 和志贺氏 菌)
注：G+:革兰氏阳性菌，G-:革兰氏阴性菌。
培养基名称 多粘菌素B-吖啶黄氯化锂-头孢拉定-七 叶苷-甘露醇 (PALCAM)琼脂
添加成分 氯化锂、苯基乙醇、 甘氨酸酐、多粘菌 素B、头孢拉定、七 叶苷、柠檬酸铁胺
选择原理 氯化锂、苯基乙 醇、甘氨酸酐可 抑制G+和G-生 长，头孢拉定和 多粘菌素B抑制标 本中污染的G-。 高浓度NaCl抑制 除葡萄球属菌以 外的大多数细菌 卵黄乳液可检测 卵磷脂酶活性， 多粘菌素B抑制标 本中污染的G-。
鉴别特征 检测七叶苷 水解反应， 酚磺酞指示 剂反映甘露 醇发酵试验 甘露醇发 酵，菌落由 黄变红，pH 值下降 不发酵甘露 醇而呈现溴 麝香草酚蓝 的蓝色。
用途 用于分离和培 养单核细胞增 多性李斯特氏 菌。
甘露醇盐琼脂
7.5%NaCl、甘露醇 和中性红的结合物
用于分离金黄 色葡萄球菌
多粘菌素B、丙酮酸 多粘菌素B-丙酮酸 盐、卵黄-甘露醇、 盐-卵黄-甘露醇-溴 麝香草酚蓝(PEMBA) 溴麝香草酚蓝 琼脂 月桂基硫酸盐胰蛋 白胨(LST)肉汤 Skirrow’s培养基 月桂基硫酸钠
按物理性质可分为 液体培养基
适用范围：广泛用于细菌的增菌和检验，也是制备其他培 养基的基础成分。
固体培养基
适用范围：微生物的分离培养、菌种鉴定、菌落计数和菌 种保藏。
半固体培养基
适用范围： 琼脂含量为0.2%~0.7%，低于固体培养基所 含比例，常用于观察细菌的运动、菌种鉴定及测定噬菌体 的效价等。
常用的生化试验培养基
糖发 酵试 验培 养基 糖醇发酵试验培养基 血清菊糖试验培养基 胆汁七叶苷试验培养基 氨基酸脱羧酶试验培养基 耐热DNA酶培养基 DNA酶试验培养基 氧化酶试验 酶类 测定 培养 基和 试剂 尿素酶试验培养基 磷酸酶试验培养基 马尿酸盐试验培养基 触酶试验培养基 ß-半乳糖苷(ONPG)试验培养基 苯丙氨酸试验培养基 淀粉培养基 粘液酸利用试验培养基 碳源 和氮 源利 用试 验培 养基 丙二酸盐试验培养基 醋酸盐试验培养基 葡萄糖酸盐试验培养基 枸橼酸盐试验培养基 碳源利用试验培养基 检查细菌对不同糖(醇)类的发酵能力，达到鉴定细菌的目的 用于肺炎链球菌与其它链球菌鉴别。 要用于鉴别D群链球菌与其它链球菌的区别，以及肠杆菌科的某些种、某些厌氧菌（如脆弱拟杆菌等） 的初步鉴别。 检查细菌使氨基酸脱羧基形成胺使培养基变碱的能力。常用的氨基酸有赖氨酸、鸟氨酸和精氨酸。 用于检测细菌所产生的耐热脱氧核糖核酸酶 供细菌DNA酶测定用。 区别假单胞菌与氧化酶阴性的肠杆菌科细菌。 用于细菌尿素酶测定。 测定细菌产生磷酸酶的能力。用于区别葡萄球菌有无致病性，致病性葡萄球菌呈阳性。还有助于克 雷伯菌属与肠杆菌属的鉴定。 测定细菌水解马尿酸钠能力。该培养基常用方法有2种：三氯化铁法和茚三酮法 用于链球菌及革兰阳性球菌初步分群。 用于乳糖迟缓发酵菌和不发酵菌的鉴别。 苯丙氨酸脱氨酶是变形杆菌属、普罗威登斯菌属和摩根菌属所特有，可与肠杆菌科及其它细菌区别。 也有助于种的鉴别，如苯丙酮酸莫拉菌呈阳性，其它莫拉菌属的菌种呈阴性。 用于链球菌和白喉棒状杆菌的分型鉴定。 用于无动力不产气不发酵乳糖的大肠埃希菌与志贺菌属的鉴别。前者多数为阳性，后者均为阴性。 主要用于下述菌属的鉴定：阳性菌有粪产碱杆菌、亚利桑那菌、克雷伯菌；阴性菌有不动杆菌属、 沙门菌属、放线菌属；特别是枸橼酸杆菌，用于属内种的鉴定如弗劳地、异型枸橼酸杆菌呈阳性， 而丙二酸盐阴性枸椽酸杆菌呈阴性。 用于肠杆菌科的鉴定 帮助属间鉴别、种间鉴别和沙雷菌属菌种的鉴定。 鉴定细菌对枸橼酸盐及无机铵的利用能力。 测定细菌利用碳源的能力。
微生物培养基的分类方法
微生物培养基的分类方法由于各种生物分子实验所需要的营养不同，所以培养基的种类很多。
就目前能提供的就有数千种不同的培养基，这些培养基可根据所含成分、物理状态、使用目的等而分成若干不同的类型。
这里给大家大致介绍培养基的分类类型。
1.按照培养基的成分分类培养基按其所含成分，可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类。
(1)合成培养基。
合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。
这种培养基的化学成分清楚，组成成分精确，重复性强，但价格较贵，而且微生物在这类培养基中生长较慢。
如高氏一号合成培养基、察氏(Czapek)培养基等。
(2)天然培养基。
由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养细菌。
这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，所以常被采用。
(3)半合成培养基。
在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。
这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。
2.按照培养基的物理状态分类培养基按其物理状态可分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基三类。
(1)固体培养基。
是在培养基中加入凝固剂，有琼脂、明胶、硅胶等。
固体培养基常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面。
(2)半固体培养基。
是在液体培养基中加入少量凝固剂而呈半固体状态。
可用于观察细菌的运动、鉴定菌种和测定噬菌体的效价等方面。
(3)液体培养基。
液体培养基中不加任何凝固剂。
这种培养基的成分均匀，微生物能充分接触和利用培养基中的养料，适于作生理等研究，由于发酵率高，操作方便，也常用于发酵工业。
3.按照微生物的种类分类培养基按微生物的种类可分为细菌培养基、放线菌培养基、霉菌培养基和酵母菌培养基四类。
常用的细菌培养基有营养肉汤和营养琼脂培养基;常用的放线菌培养基为高氏1号培养基;常用的霉菌培养基有马铃薯蔗糖培养基、豆芽汁葡萄糖(或蔗糖)琼脂培养基和察氏培养基;常用的酵母菌培养基有马铃薯蔗糖培养基和麦芽汁培养基等。
高中生物选择性必修三 第二单元 微生物的培养技术及应用((含答案))高二生物单元复习知识清单
第一章发酵工程第2节微生物的培养技术及应用一、微生物的基本培养技术1.研究和应用微生物的前提（即发酵工程的重要基础）：防止杂菌污染，获得纯净的微生物培养物。
（P9）2.在实验室培养微生物的要求：(1)为微生物提供合适的营养和环境条件(培养基）。
(2)要确保其他微生物无法混入，并将需要的微生物分离出来（无菌技术）。
（P9）（一）培养基的配制1．培养基概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
（P9）2.培养基作用：用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。
（P9）3．培养基的分类（按照物理性质分类）（P9）（1）液体培养基：不含凝固剂（如琼脂），呈液体状态。
用途：扩大培养获得大量菌种、常用于工业生产。
（2）固体培养基：含凝固剂（如琼脂），呈固体状态。
用途：分离、计数、鉴定等。
拓展了解：培养基的分类（按照化学成分分类）（1）天然培养基：含化学成分不明确的天然物质。
用途：工业生产。
（2）合成培养基：培养基成分明确。
用途：分类、鉴定。
培养基的分类（按照用途分类）（1）选择培养基：允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长。
用途：培养、分离出特定微生物。
（2）鉴别培养基：在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物。
用途：鉴别不同种类微生物。
4.怎样将液体培养基制成固体培养基？加入适量琼脂。
（P9）5.实验室中最常用的培养基之一：琼脂固体培养基。
（P9）6.微生物在琼脂固体培养基的表面或内部生长，可以形成菌落。
（P9）7.培养基的基本成分：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物的需求。
（P10）质，此外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O28.碳源:（1）概念：提供碳元素的物质。
（2）分类:无机碳源，如CO2、CO32-、HCO3-等。
有机氮源，如葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等。
（3）适用范围（一般情况下）添加无机碳源培养基用来培养自养微生物；添加有机碳源培养基用来培养异养微生物。
常见微生物培养基
常见微生物培养基Medium含有碳水化合物、含氮应用化学药品配成并标液体培养基不易长期保有不同。
一般培养基在对一些需严格灭菌的培2~6。
C的冰箱内。
1、细菌培养基配方一牛肉膏琼脂培养基牛肉膏0.3克 1.00.5 1.5水100毫升在烧杯内加水100火上加热。
待烧杯内各10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.27.6,30分钟。
配方二马铃薯培养基250500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。
在烧杯上做好2pH值调到7.5左右。
每支试管内加入10毫升用。
配方三根瘤菌培养基葡萄糖10克磷酸氢二钾0.5克碳酸钙3克硫酸镁0.2克酵母粉0.4克琼脂20克水1000毫升1%结晶紫溶液1毫升2、放线菌培养基配方一可溶性淀粉2克硝酸钾0.1克磷酸氢二钾0.05克氯化钠0.05克硫酸镁0.05克硫酸亚铁0.001克琼脂2克水100毫升595它溶解。
在烧杯外做好pH值到7.27.4备用。
配方二面粉琼脂培养基面粉60克琼脂20克水1000毫升50030分钟。
另取500pH值到7.43、真菌培养基配方一Sabouraud’s蛋白胨10克琼脂20克麦芽糖40克水1000毫升40本培养菌是培养许多种类真菌所常用的。
配方二马铃薯糖琼脂培养基2001000液中加入10煮沸溶解后加糖20用。
把这培养基的pH值调到7.27.4杆菌。
配方三黄豆芽汁培养基黄豆芽100克琼脂15克葡萄糖20克水1000毫升301000把这培养基的pH值调到7.27.4。
配方四豌豆琼脂培养基豌豆80粒琼脂5克水200毫升取8014、食用菌菌种培养基配方一马铃薯—蔗糖--琼脂培养基20%马铃薯煮汁1000毫升蔗糖20克琼脂18克200100020分钟足水分到100020%pH配方二综合马铃薯培养基20%马铃薯煮汁1000 毫升磷酸二氢钾3克硫酸镁1.5克葡萄糖20克维生素10毫克琼脂18克先配制20%整pH值到6该培养基用于培养和保存灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种。
微生物培养基的分类
培养基应具有的条件：
1.含有满足微生物生长发育的水分、碳源、氮源、 生长因子及基本的离子（磷、硫、钠、钙、镁、钾、 铁）及各种微量元素。
2.具有适宜的酸碱度(pH)。 3.具有一定的缓冲能力及一定的氧化还原电位和合 适的渗透压。
一、配制培养基的原则
优点:化学成分精确、重复性强。 缺点:配制过程复杂，微生物生长较慢，价格昂贵。
应用：实验室内，研究微生物营养、代谢、菌种选
育、菌种鉴定、生物测定等定量要求较高的研究。
2.天然培养基
又称复杂培养基，采用动植物组织或微生物细胞 或其提取物和粗消化产物制成的。 营养物质来源于天然物质。
天然物质：牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、麦芽汁、玉米粉、
成培养基的基础上添加某些有机物。
如马铃薯蔗糖培养基。
马铃薯蔗糖培养基成分: 去皮马铃薯200克，葡萄糖20克，水1000mL.
优点：有效地满足微生物对营养物质的要求，适合 大多数微生物。 应用：生产上、实验室
（二）根据培养基的物理状态分 1.固体培养基
在液体培养基中加入凝固剂（1.5～2.0%的琼脂）， 使液体培养基凝固呈固体状态，或直接由天然的固体 营养物质制成的培养基，如白酒、固体食醋生产。
与选择培养基区别： 加富培养基：增加所要分离的微生物数量，成为优 势菌，逐步淘汰其他微生物。 选择培养基：抑制不需要微生物的生长，使所需要 菌成为优势菌。
(4)鉴别培养基
培养基中加有指示剂，从而用肉眼就能使目的 微生物或待分离微生物的菌落与其他微生物菌落区别开来。
用途：微生物的分类、鉴定或筛选菌种。 常用的鉴别培养基：伊红-美蓝琼脂培养基（EMB）
1.选择适宜的营养物质 根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基。
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微生物培养基的分类方法
由于各种生物分子实验所需要的营养不同，所以培养基的种类很多。
就目前能提供的就有数千种不同的培养基，这些培养基可根据所含成分、物理状态、使用目的等而分成若干不同的类型。
这里给大家大致介绍培养基的分类类型。
1.按照培养基的成分分类
培养基按其所含成分，可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类。
(1)合成培养基。
合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。
这种培养基的化学成分清楚，组成成分精确，重复性强，但价格较贵，而且微生物在这类培养基中生长较慢。
如高氏一号合成培养基、察氏(Czapek)培养基等。
(2)天然培养基。
由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养细菌。
这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，所以常被采用。
(3)半合成培养基。
在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。
这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。
2.按照培养基的物理状态分类
培养基按其物理状态可分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基三类。
(1)固体培养基。
是在培养基中加入凝固剂，有琼脂、明胶、硅胶等。
固体培养基常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面。
(2)半固体培养基。
是在液体培养基中加入少量凝固剂而呈半固体状态。
可用于观察细菌的运动、鉴定菌种和测定噬菌体的效价等方面。
(3)液体培养基。
液体培养基中不加任何凝固剂。
这种培养基的成分均匀，微生物能充分接触和利用培养基中的养料，适于作生理等研究，由于发酵率高，操作方便，也常用于发酵工业。
3.按照微生物的种类分类
培养基按微生物的种类可分为细菌培养基、放线菌培养基、霉菌培养基和酵母菌培养基四类。
常用的细菌培养基有营养肉汤和营养琼脂培养基;常用的放线菌培养基为高氏1号培养基;常用的霉菌培养基有马铃薯蔗糖培养基、豆芽汁葡萄糖(或蔗糖)琼脂培养基和察氏培养基;常用的酵母菌培养基有马铃薯蔗糖培养基和麦芽汁培养基等。
4.按照培养基用途分类
培养基按其特殊用途可分为加富培养基、基础培养基、选择性培养基和鉴别培养基。