盐酸苯海拉明片含量测定方法的改进
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
214 标准曲线的制备 精密称取 105 ℃干燥至恒重的盐酸苯海拉明对
照品适量 , 加流动相溶解并稀释成 4mg·ml - 1的储 备液 , 精密称取醋酸氟氢可的松一定量加流动相溶 解并稀释成 0116mg·ml - 1的内标溶液 , 精密量取盐 酸苯海拉明储备液 110 , 210 , 410 , 510 , 610ml 分 置 25ml 量瓶中 , 精密加入内标溶液 5ml , 加流动相 稀释至刻度摇匀 , 分别取 10μl 注入高效液相色谱 仪 , 记录色谱图 。以盐酸苯海拉明浓度与内标浓度 之比为横坐标 , 以盐酸苯海拉明峰面积与内标峰面 积之比为纵坐标计算回归方程为 : Y = 41659 ×10 - 2 X + 31462 ×10 - 2 , r = 019999 , 表明盐酸苯海拉明在 0116～1280μg·ml - 1范围内有良好的线性关系 。 215 供试品的测定
取盐酸苯海拉明对照品一定量用流动相溶解并 稀释 成 0164mg ·ml - 1 , 以 流 动 相 为 空 白 在 190 ～ 700nm 波长范围内扫描 (见图 1) , 结果表明盐酸苯 海拉明的最大吸收波长为 258nm。
图 1 盐酸苯海拉明紫外线吸收图谱
·122 ·
213 内标物的选择 根据高效液相色谱法定量分析中对内标物的要
色 谱 柱 为 Kromasil C18 柱 ( 416mm ×200mm ,
5μm) , 灵 敏 度 0102AUFS , 进 样 量 10μl , 纸 速 215mm·min - 1 , 柱温 36 ℃, 流动相为甲醇 - 1 %硫 酸铵 (65∶35) , 流速 : 110ml·min - 1 。 212 检测波长的确立
按处方模拟制备供试品 , 混合均匀后 , 精密称
217 HPLC 与 UV 法测定结果比较 取不同厂家不同批号的 3 批样品分别用 HPLC
法与 UV 法[1]测定盐酸苯海拉明的含量 , 两种测定 方法结果见表 2 。
表 2 HPLC 与 UV 测定盐酸苯海拉明片含量 ( % , n = 2)
批 号
表 1 HPLC 测定盐酸苯海拉明的回收率
理论量 测得量 回收率 平均回收率
RSD
(mg)
(mg)
( %)
( %)
( %)
014800 014746
98188
015600 015551
99113
99103
0138
017200 017133
99107
图 2 盐酸苯海拉明片 HPLC 图谱 11 盐酸苯海拉明 ( t R = 3146min) ; 21 醋酸氟氢可的松 ( t R = 7113min)
盐酸苯海拉明片含量测定方法的改进
郗素娥 洪艳荣 潘 赢 (河北省秦皇岛市药品检验所 066000)
盐酸苯海拉明片的含量测定[ 1 ] 采用溴甲酚绿与 其定量生成离子对化合物 , 用氯仿萃取离心后进行 分光光度测定 , 操作比较繁琐费时 。本实验采用高 效液相色谱法 , 以醋酸氟氢可的松为内标 , 测定盐 酸苯海拉明片的含量 , 快速 、准确 、灵敏度高 。 1 仪器与试药
1981 : 142
104177
ห้องสมุดไป่ตู้018
29136
1519
980208 - 2
104189
112
32184
618
980209 - 2
107119
111
37174
619
3 讨论 311 原标准采用盐酸溶液 (9 →1000) 溶解后的紫 外分光光度法测定含量 , 由于基质的影响 , 使得样 品不能全部被提取出来 , 以致于样品含量偏低 , 且 重现性也不好 , 改用乙醇作溶媒同法操作 , 测得结 果与 HPLC 法测得结果基本一致 。 312 采用乙醇破乳溶解后用流动相稀释成所需浓 度的 HPLC 法 , 能克服上述缺点 , 测定出样品的真 实含量 , 还可用于其他杂质和降解产物的检查 。
中国药事 2001 年第 15 卷第 2 期
5969179C , r = 019999 , n = 8 。 213 回收率试验
按处方量精密称取依诺沙星 10mg、基质适量 , 置 100ml 量瓶中 , 用乙醇溶解并稀释至刻度 , 摇 匀 , 精取适量 , 用流动相稀释成每 1ml 含依诺沙星 10μg 的溶液 , 滤过 , 弃去初滤液 , 精密量取续滤 液 20μl 注入液相色谱仪 , 记录峰面积 , 由回归方 程计 算 含 量 。回 收 率 为 10011 % , RSD 为 0181 % (n = 6) 。 214 样品测定
·121 ·
果比较 。
表 依诺沙星软膏含量测定结果比较 ( % , n = 4)
样品批号
HPLC 法
RSD
UV 法
RSD
980207 - 1
101127
014
34163
111
980208 - 1
101103
018
37154
414
980209 - 1
105123
019
40105
1418
980207 - 2
求[2]选用了苯巴比妥 、醋酸氟氢可的松作为内标 物 , 结果苯巴比妥峰与盐酸苯海拉明峰不能完全分 离 , 而醋酸氟氢可的松与盐酸苯海拉明分离度良好 (见图 2) 。
中国药事 2001 年第 15 卷第 2 期
取适量 (约相当于盐酸苯海拉明 50mg) 置 25ml 量 瓶中加流动相溶解并稀释至刻度 , 滤过 , 精密量取 续滤液三份各 5ml , 分置 25ml 量瓶中 , 分别精密加 入盐酸苯海拉明储备液 015 , 110 , 210ml 和内标溶 液 5ml , 用流动相稀释至刻度摇匀 , 取 10μl 注入高 效液相色谱仪 , 按色谱条件测定 , 记录色谱图 , 代 入回归方程计算即得 。结果见表 1 。
通过以上对比实验 , 我们认为采用高效液相色 谱法比紫外分光光度法快速 、准确 、灵敏度高 , 完 全可以替代紫外分光光度法 , 为此我们建议在新版 药典中将盐酸苯海拉明片的含量测定方法改为高效 液相色谱法 。
参考文献
1 中国药典 1 二部 , 1995 : 655 2 南京药学院药物分析教研室编 1 药物分析 1 江苏科学出版社 ,
取依 诺 沙 星 软 膏 适 量 ( 约 相 当 于 依 诺 沙 星 10mg) , 精密称定 , 置 100ml 量瓶中 , 加乙醇适量 , 超声溶解 10min , 用乙醇稀释至刻度 , 摇匀 , 精密 量取续滤液用流动相稀释成 10mg/ L 的溶液 , 滤过 , 作为供试品溶液 ; 另取依诺沙星对照品同上方法配 成 10mg/ L 的溶液作为对照品溶液 。分别精密量取 对照品溶液及供试品溶液各 20μl 注入液相色谱仪 , 外标法计算含量 , 结果见表 , 同时与原方法测定结
高效液相色谱仪 , 包括 SP8810 泵 、SC - 100 检 测器 、SP4400 积分仪 (美国光谱物理公司) ; UV 2100 型紫外可见分光光度计 (日本岛津公司) ; 盐 酸苯海拉明对照品 (批号 : 0066 - 9204) 与醋酸氟 氢可的松对照品 (批号 : 009 - 9003) , 由中国药品 生物 制 品 检 定 所 提 供 , 盐 酸 苯 海 拉 明 片 , 批 号 981118 江苏省金潭制药厂 , 批号 95096 江苏省徐州 制药厂 , 批号 960723 河南省许昌地区第二制药厂 ; 甲醇 ( 色谱纯) , 北京昌化精细化工厂 ; 硫酸铵 (分析纯) , 天津南开化工厂 。 2 实验方法与结果 211 色谱条件
981118 950906 960723
HPLC
98131 ±0155 96193 ±0111 98130 ±0125
UV
99149 ±1122 98172 ±0148 100124 ±1126
从 表 2 可 见 UV 法 测 得 值 比 HPLC 法 高 出 1118 %～1194 % , 平均高出 1125 % , 而且 UV 法需 要经过先与酸性染料定量生成离子对化合物后用氯 仿萃取 , 之后分离进行 UV 测定 , 操作繁琐 、费 时。 3 讨论
取本品 20 片 , 精密称定 , 研细 , 精密称取适 量 (约相当于盐酸苯海拉明 16mg) 置 25ml 量瓶中 加流动相适量使溶解 , 精密加入内标溶液 5ml , 加 流动相稀释至刻度 , 摇匀 , 滤过弃去初滤液 , 取续 滤液 10μl 注入高效液相色谱仪 , 记录色谱图 , 按 回归方程计算即得 。 216 回收率测定
照品适量 , 加流动相溶解并稀释成 4mg·ml - 1的储 备液 , 精密称取醋酸氟氢可的松一定量加流动相溶 解并稀释成 0116mg·ml - 1的内标溶液 , 精密量取盐 酸苯海拉明储备液 110 , 210 , 410 , 510 , 610ml 分 置 25ml 量瓶中 , 精密加入内标溶液 5ml , 加流动相 稀释至刻度摇匀 , 分别取 10μl 注入高效液相色谱 仪 , 记录色谱图 。以盐酸苯海拉明浓度与内标浓度 之比为横坐标 , 以盐酸苯海拉明峰面积与内标峰面 积之比为纵坐标计算回归方程为 : Y = 41659 ×10 - 2 X + 31462 ×10 - 2 , r = 019999 , 表明盐酸苯海拉明在 0116～1280μg·ml - 1范围内有良好的线性关系 。 215 供试品的测定
取盐酸苯海拉明对照品一定量用流动相溶解并 稀释 成 0164mg ·ml - 1 , 以 流 动 相 为 空 白 在 190 ～ 700nm 波长范围内扫描 (见图 1) , 结果表明盐酸苯 海拉明的最大吸收波长为 258nm。
图 1 盐酸苯海拉明紫外线吸收图谱
·122 ·
213 内标物的选择 根据高效液相色谱法定量分析中对内标物的要
色 谱 柱 为 Kromasil C18 柱 ( 416mm ×200mm ,
5μm) , 灵 敏 度 0102AUFS , 进 样 量 10μl , 纸 速 215mm·min - 1 , 柱温 36 ℃, 流动相为甲醇 - 1 %硫 酸铵 (65∶35) , 流速 : 110ml·min - 1 。 212 检测波长的确立
按处方模拟制备供试品 , 混合均匀后 , 精密称
217 HPLC 与 UV 法测定结果比较 取不同厂家不同批号的 3 批样品分别用 HPLC
法与 UV 法[1]测定盐酸苯海拉明的含量 , 两种测定 方法结果见表 2 。
表 2 HPLC 与 UV 测定盐酸苯海拉明片含量 ( % , n = 2)
批 号
表 1 HPLC 测定盐酸苯海拉明的回收率
理论量 测得量 回收率 平均回收率
RSD
(mg)
(mg)
( %)
( %)
( %)
014800 014746
98188
015600 015551
99113
99103
0138
017200 017133
99107
图 2 盐酸苯海拉明片 HPLC 图谱 11 盐酸苯海拉明 ( t R = 3146min) ; 21 醋酸氟氢可的松 ( t R = 7113min)
盐酸苯海拉明片含量测定方法的改进
郗素娥 洪艳荣 潘 赢 (河北省秦皇岛市药品检验所 066000)
盐酸苯海拉明片的含量测定[ 1 ] 采用溴甲酚绿与 其定量生成离子对化合物 , 用氯仿萃取离心后进行 分光光度测定 , 操作比较繁琐费时 。本实验采用高 效液相色谱法 , 以醋酸氟氢可的松为内标 , 测定盐 酸苯海拉明片的含量 , 快速 、准确 、灵敏度高 。 1 仪器与试药
1981 : 142
104177
ห้องสมุดไป่ตู้018
29136
1519
980208 - 2
104189
112
32184
618
980209 - 2
107119
111
37174
619
3 讨论 311 原标准采用盐酸溶液 (9 →1000) 溶解后的紫 外分光光度法测定含量 , 由于基质的影响 , 使得样 品不能全部被提取出来 , 以致于样品含量偏低 , 且 重现性也不好 , 改用乙醇作溶媒同法操作 , 测得结 果与 HPLC 法测得结果基本一致 。 312 采用乙醇破乳溶解后用流动相稀释成所需浓 度的 HPLC 法 , 能克服上述缺点 , 测定出样品的真 实含量 , 还可用于其他杂质和降解产物的检查 。
中国药事 2001 年第 15 卷第 2 期
5969179C , r = 019999 , n = 8 。 213 回收率试验
按处方量精密称取依诺沙星 10mg、基质适量 , 置 100ml 量瓶中 , 用乙醇溶解并稀释至刻度 , 摇 匀 , 精取适量 , 用流动相稀释成每 1ml 含依诺沙星 10μg 的溶液 , 滤过 , 弃去初滤液 , 精密量取续滤 液 20μl 注入液相色谱仪 , 记录峰面积 , 由回归方 程计 算 含 量 。回 收 率 为 10011 % , RSD 为 0181 % (n = 6) 。 214 样品测定
·121 ·
果比较 。
表 依诺沙星软膏含量测定结果比较 ( % , n = 4)
样品批号
HPLC 法
RSD
UV 法
RSD
980207 - 1
101127
014
34163
111
980208 - 1
101103
018
37154
414
980209 - 1
105123
019
40105
1418
980207 - 2
求[2]选用了苯巴比妥 、醋酸氟氢可的松作为内标 物 , 结果苯巴比妥峰与盐酸苯海拉明峰不能完全分 离 , 而醋酸氟氢可的松与盐酸苯海拉明分离度良好 (见图 2) 。
中国药事 2001 年第 15 卷第 2 期
取适量 (约相当于盐酸苯海拉明 50mg) 置 25ml 量 瓶中加流动相溶解并稀释至刻度 , 滤过 , 精密量取 续滤液三份各 5ml , 分置 25ml 量瓶中 , 分别精密加 入盐酸苯海拉明储备液 015 , 110 , 210ml 和内标溶 液 5ml , 用流动相稀释至刻度摇匀 , 取 10μl 注入高 效液相色谱仪 , 按色谱条件测定 , 记录色谱图 , 代 入回归方程计算即得 。结果见表 1 。
通过以上对比实验 , 我们认为采用高效液相色 谱法比紫外分光光度法快速 、准确 、灵敏度高 , 完 全可以替代紫外分光光度法 , 为此我们建议在新版 药典中将盐酸苯海拉明片的含量测定方法改为高效 液相色谱法 。
参考文献
1 中国药典 1 二部 , 1995 : 655 2 南京药学院药物分析教研室编 1 药物分析 1 江苏科学出版社 ,
取依 诺 沙 星 软 膏 适 量 ( 约 相 当 于 依 诺 沙 星 10mg) , 精密称定 , 置 100ml 量瓶中 , 加乙醇适量 , 超声溶解 10min , 用乙醇稀释至刻度 , 摇匀 , 精密 量取续滤液用流动相稀释成 10mg/ L 的溶液 , 滤过 , 作为供试品溶液 ; 另取依诺沙星对照品同上方法配 成 10mg/ L 的溶液作为对照品溶液 。分别精密量取 对照品溶液及供试品溶液各 20μl 注入液相色谱仪 , 外标法计算含量 , 结果见表 , 同时与原方法测定结
高效液相色谱仪 , 包括 SP8810 泵 、SC - 100 检 测器 、SP4400 积分仪 (美国光谱物理公司) ; UV 2100 型紫外可见分光光度计 (日本岛津公司) ; 盐 酸苯海拉明对照品 (批号 : 0066 - 9204) 与醋酸氟 氢可的松对照品 (批号 : 009 - 9003) , 由中国药品 生物 制 品 检 定 所 提 供 , 盐 酸 苯 海 拉 明 片 , 批 号 981118 江苏省金潭制药厂 , 批号 95096 江苏省徐州 制药厂 , 批号 960723 河南省许昌地区第二制药厂 ; 甲醇 ( 色谱纯) , 北京昌化精细化工厂 ; 硫酸铵 (分析纯) , 天津南开化工厂 。 2 实验方法与结果 211 色谱条件
981118 950906 960723
HPLC
98131 ±0155 96193 ±0111 98130 ±0125
UV
99149 ±1122 98172 ±0148 100124 ±1126
从 表 2 可 见 UV 法 测 得 值 比 HPLC 法 高 出 1118 %～1194 % , 平均高出 1125 % , 而且 UV 法需 要经过先与酸性染料定量生成离子对化合物后用氯 仿萃取 , 之后分离进行 UV 测定 , 操作繁琐 、费 时。 3 讨论
取本品 20 片 , 精密称定 , 研细 , 精密称取适 量 (约相当于盐酸苯海拉明 16mg) 置 25ml 量瓶中 加流动相适量使溶解 , 精密加入内标溶液 5ml , 加 流动相稀释至刻度 , 摇匀 , 滤过弃去初滤液 , 取续 滤液 10μl 注入高效液相色谱仪 , 记录色谱图 , 按 回归方程计算即得 。 216 回收率测定