实验一:影响酶活性的因素实验设计PPT教学课件
酶活性测定的主要影响因素及控制.ppt
K V 10 6
v L
3.4 K的校准(酶校准物)
使用公认的酶校准物对K值进行校准,它是 国际上目前酶测定标准化新途径。
使用酶校准物的优点, 除具有实测ε值换算出的校准K值所具有的 一切优点外, 还可促进方法间的一致性和增加常规酶方 法的可靠性,可使不同实验室之间的测定 结果相对统一。
只是在延滞期去除部分干扰物。 这种模式可采用单一试剂剂型。
2.3 底物启动模式与样品启动模式
双试剂与单试剂酶促反应时间进程曲线
2.3 需要注意
某些双试剂剂型是基于试剂稳定性考虑, 并没有将底物单独作为第二试剂,也起不 到消除内源性干扰的作用。
2.4 正向反应与逆向反应
一般根据测定底物或产物的难易程度来决定。 除原则上选择对底物亲和力大,酶转换率高的
检测系统
光度计的准确性、重复性、线性范围和杂散光等 均会造成结果的偏差。
3 仪器影响因素的控制
在日常工作中,除常规做好仪器和设备的 正确使用和维护外,
重点应注意仪器的校准问题。
3.1 酶活性浓度的计算公式
U / L A K min
K V 10 6
vL
摩尔吸光系数 和系数 K 均为常数, 和 K受仪器诸多因素的影响,
反应时底物浓度高,反应时间短; 这也是淀粉酶的碘淀粉比色法逐渐被色素源底物
所取代的原因之一。 除部分测定NADH减少可以看成测底物的消耗量外,
已很少采用测定底物消耗量的项目。
2.2 检测底物或检测产物的选择
底物与产物
举例
ALT测定(赖氏法-定时法) L-丙氨酸 + α-酮戊二酸 A LT α-丙酮酸 + L-谷氨酸
人教版高中生物必修1实验《探究影响酶活性的因素》课件
• 设计实验:
1)材料用具: • 3%可溶性淀粉溶液 • 稀释唾液(含唾液淀粉 酶 ,最适温度为37℃) • 热水 • 蒸馏水 • 冰块 • 碘液 • 试管、烧杯、酒精灯、 温度计等相关实验器具
实验设计提示: 1.能否用H2O2来探究 本实验? 2.设计几组实验?你 将设置哪几个温度从 而使各组的差异更明 显? 3.怎样观察或检测酶 的活性?
最适PH 6.8
6.8 8.3 8.0~9.0 1.5~2.2
探究一:PH对酶活性的影响
• 提出问题:酶的活性会不会受PH的影响呢? • 作出假设:酶的活性受PH的影响 • 设计实验:
Байду номын сангаас
• 设计实验:
1)材料用具: 新鲜的猪肝研磨液 (含过氧化氢酶, ) 3%过氧化氢溶液 蒸馏水 5%HCl 5%NaOH溶液 试管 量筒 滴管 试管夹 PH试纸等相关实 验器具
取3支试管 编号 分别加H2O2 1 2ml 2 1ml 2ml 3 2ml
分别加入 分别加入肝 脏研磨液 分别加入肝脏研 分别加入
磨液(含H2O2酶)
蒸馏水 2滴 1ml 蒸馏水 2滴 1ml
5%HCl 2滴 1ml 5%HCl 2滴 1ml 2 滴
5%NaOH 2滴 1ml 5%NaOH 2滴 1ml 2 滴
实 验 结 果
作出假设:温度会影响酶的活性 设计实验:
取6支试管编号
分别加入
1
淀粉 2ml
1′
淀粉酶 1ml 冰块
2
淀粉 2ml
2′
淀粉酶 1ml
3
淀粉 2ml
3′
淀粉酶 1ml 热水
分别保温3分钟
蒸馏水
将2支试管混合 摇匀
探究影响酶活性的条件公开课-PPT
影响酶活性的条件及其拓展实验
临沂第24中学 王慧
探究影响酶活性的条件
1.教材分析 2.学情分析 3.教学目标 4.方法设计 5.过程.内容设计 6.反思与评价
一、教材分析
酶
基 础
细胞代谢
二.学情分析
1、知识:掌握了酶的本质、作用,了解特性
2、实验探究方面: 掌握了一定的探究实验的方法
3、不足:对于酶作用特点理解不透彻 自主设计实验的能力有待提高
3组探究强酸
4组探究强碱
5组探究重金属
结果:只有低温条件下的酶活性可以恢复,其
他四组酶活性不能恢复
不同条件对酶活性的影响原理不同
酶的作用条件温和
六.教学反思与自我评价
教师引导探究
加深了对控制变量(重点) 酶活性及作用特点的理解
进一步提高了实验设计创新 能力与实际操作能力(难点)
学生自主探究
解决探究中遇 到的问题
探究影响酶活性的条件(18张PPT)
探究影响酶活性的条件(18张PPT)
五.过程、内容设计
(二)教师启发引导如何探究
探究影响酶活性的条件有哪些?
1.你要研究哪一种酶,这种酶怎样获得? 2.你怎么知道酶活性是否发生改变 3.可以改变酶活性的条件有哪一些 4.控制变量:自变量?因变量?无关变量?
你怎样控制自变量,观察检测因变量? 5.你的实验应该遵循什么样的原则,你怎样
遵循这样原则?
探究影响酶活性的条件(18张PPT)
探究影响酶活性的条件(18张PPT)
五.过程、内容设计
(三)小组合作,设计实验方案
方案设计内容: 1.实验材料、实验工具 2.实验过程的设计 3.实验结果的记录
探究影响酶活性的条件(18张PPT)
影响酶活性的因素28页PPT
实验报告的书写
1.实验目的 2.实验原理 3.实验步骤 4.实验结果 5.实验分析
影响酶作用的因素
一、实验目的
通过对唾液淀粉酶活性的观察,验证 温度、pH、激活剂、抑制剂等对酶活性 的影响。
二、实验原理
唾液淀粉酶存在于唾液中,其作用 的底物是淀粉。
淀粉酶
淀粉
I2:蓝色
淀粉酶
糊精(大分子,小分子)
2. 器材
恒温水浴锅 电炉
比色板
四、实验操作
1.唾液淀粉酶的制备
取干净的纸杯,盛上蒸馏水。 用蒸馏水漱口。 口含约20ml蒸馏水,2-3分钟后,吐入一干净试 管中,棉花过滤。
管别
对照组 实验组
淀粉管
3ml 3ml
稀释唾液
——
蒸馏水
2ml
同时放于 2分钟后 30-40oC 水浴中
2ml
——
2分钟后做碘液检查:在比色板上滴上碘液,于
二管各取一滴加入,看是否开始水解,以后每隔
2分钟再取一滴加以检查,约6-10分钟后实验管
水解过程由蓝紫
红棕
无色,此
时水解完成。但对照管仍蓝色。
观察两管淀粉在水解后的乳样光泽
分别取两管溶液5滴,加入班氏试剂0.5ml,加热 煮沸,观察有何现象发生。
2.pH对唾液淀粉酶活性的影响
一、实验目的 了解pH对酶活性的影响及最适pH的定义。
3. 温度对唾液淀粉酶活力 的影响
一、实验目的 了解温度对酶活性的影响并了解最适温度的定义。
二、原理 对温度敏感是酶的一个重要特性,酶作为生物催化剂,和
一般催化剂一样呈现出温度效应,提高温度可以提高酶促反应 速度,但另一方面又会加速酶蛋白的变性速度,所以在较低的 温度范围内,酶反应速度随温度升高而增大,但是超过一定温 度后,反应速度反而下降。酶反应速度达到最大时的温度称为 酶的最适温度。酶的最适温度不是一个常数,它与作用时间的 长短有关系。
高中生物《探究影响酶活性的条件》课件ppt
3.分组探究,自主学习
3.分组探究,自主学习
4.成果交流,评价反思
(PH对酶活性的影响)
4.成果交流,评价反思
(温度对酶活性的影响)
5.拓展延伸,学以致用
第一组
第二组
思考:
课本84页建议用淀粉酶对淀 粉的分解来探究温度对酶活 性的影响,请思考这个实验 的自变量应该是什么,是否 可以用斐林试剂检验分解产 物的方式来检测?
酶活性与温度和PH的关系
《普通高中课程标准实验教科书 ·生物必修1》第五章
探究影响酶活性的条件
1
选课理由
2
设计与创新
3
教学策略
4
教学反思
拓展延伸
实验流程
学以致用 成果交流
评价反思
分组探究
自主学习
作出假设
设计实验
创设情景
激趣设疑
1、创设情境,激趣设疑
资料一:
事实:
1.姜撞奶制作需 要加热 2.生姜里存在生 姜蛋白酶。
问题:
1.姜汁和牛奶原本 都是液体,相撞后 成为凝胶态,这说 明了什么? 2.这种变化能不能 随时随地发生,需 要哪些条件? 3.根据事实能提出 什么问题?
资料二:
唾液淀粉酶,胃蛋白酶等消化酶 都是在消化道中起作用的。不同 部位消化液的PH不一样,唾液的 PH为6.2-7.4,胃液的PH为0.91.5,小肠液的PH为7.6。唾液淀粉 酶会随唾液流入胃,胃蛋白酶会 随食糜进入小肠,但是它们均会 失去酶的催化作用。
1、实验教学中遇到的困难及解决办法
②缺乏定量检测来观察温度和PH对酶 活性的影响
对教材资源进行整合,通过 排水法收集气体的方式定量 检测,并绘制相关数学模型
1、实验教学中遇到的困难及解决办法
酶活性的测定PPT课件
照管;也可以先用蛋白沉淀剂或其他试剂停止反 应后,再加底物予以抵销。
11
酶的区域化分布
表7-3 诊断常用血清酶的来源
血清酶
符号
鸟氨酸氨基甲酰转移酶
OCT
卵磷脂胆固醇酰基转移酶 LCAT
谷氨酸脱氢酶
GLDHΒιβλιοθήκη 山梨醇脱氢酶SDH
丙氨酸氨基转移酶
ALT
异柠檬酸脱氢酶
ICD
-谷氨酰转肽酶
-GT
5ˊ-核苷酸酶
5ˊ-NT
单胺氧化酶
MAO
天门冬氨酸氨基转移酶
AST
肌酸激酶
CK
乳酸脱氢酶
LDH
碱性磷酸酶
ALP
酸性磷酸酶
ACP
淀粉酶
AMS
脂肪酶
LPS
来源
肝 肝 肝 肝 肝、肾、心 肝、胎盘、心 肝、胆、肾、小肠 肝、胆道 肝、肾、脑 心、肝、骨骼肌 骨骼肌、心、脑 心、肾、骨骼肌、肝、肺 小肠、胎盘、肝、肾 前列腺、红细胞、血小板 胰、唾液腺
5
6
米-曼氏方程:
Vmax〔S〕 v = —————
〔S〕+ Km
上式中v代表反应速度,Vmax代表最大反应速度, 〔S〕代表底物浓度,Km称为米氏常数。
7
由米-曼氏方程可以导出:
(Vmax-v)〔S〕 Km = ———————
v
当v = 1/2Vmax时,Km =〔S〕。因此Km值为反应速度相当于 最大反应速度一半时的底物浓度。Km值是酶的特征常数,具有重 要的应用价值。
应加入不抑制该酶活性的防腐剂并冰箱保存,以 防止底物被分解或变质 • 4、在测定过程中所用器材应绝对清洁,不应含有 酶的抑制物 • 5、使酶活性测定在线性期内进行
《探究影响酶活性的条件》说课课件
探究影响酶活性的条件本课程旨在探究影响酶活性的条件,通过各种实验方法和观察结果,帮助学生理解酶活性受环境条件影响的原理和机制。
学习目标•了解酶的基本概念和功能•掌握影响酶活性的主要条件因素•能够设计实验并分析结果,推测酶活性受影响的机制课程内容1. 酶的基本概念和功能•酶是一种特殊的生物催化剂•酶在生物体中的作用和功能•酶与底物的亲和力及酶底物复合物的形成2. 影响酶活性的条件因素2.1 温度•温度对酶活性的影响机制•操作实验:在不同温度下测定酶活性的变化•数据分析:绘制温度对酶活性的影响曲线并进行解释2.2 pH值•pH值对酶活性的影响机制•操作实验:在不同pH值下测定酶活性的变化•数据分析:绘制pH值对酶活性的影响曲线并进行解释2.3 底物浓度•底物浓度对酶活性的影响机制•操作实验:在不同底物浓度下测定酶活性的变化•数据分析:绘制底物浓度对酶活性的影响曲线并进行解释2.4 酶浓度•酶浓度对酶活性的影响机制•操作实验:在不同酶浓度下测定酶活性的变化•数据分析:绘制酶浓度对酶活性的影响曲线并进行解释3. 实验设计与结果分析•设计实验:根据已学知识设计一组实验来考察酶活性在不同条件下的变化•实验操作:按照设计的方案进行实验,记录实验数据•数据分析:对实验数据进行统计和分析,从中得出并解释结果教学方法和原则•教师讲解与学生互动相结合,培养学生的分析和解决问题的能力•实验操作与结果分析相结合,让学生亲自体验科学实验的过程•给予学生启发式的问题,引导学生主动思考和探索难点和重点•理解酶活性受温度、pH值、底物浓度、酶浓度等条件因素影响的原理和机制•掌握如何设计实验来探究酶活性受条件因素的变化规律•分析实验结果,推测酶活性受影响的机制和原因课程结束思考•酶活性对于生物体的正常生理活动和代谢过程的重要性•酶活性受环境条件影响的现实意义和应用前景注意: 以上内容仅为示例,实际写作时请根据具体要求进行调整。
酶活性的调节PPT课件
去磷酸化是磷酸化酶的逆反应,可以将磷酸基团从酶的特定氨基酸残基上移除, 从而调节酶的活性。例如,在钙调蛋白激酶的调节中,去磷酸化可以激活酶的 活性,从而促进钙离子依赖性信号转导。
别构酶的活性调节
别构效应剂
别构酶通常具有一个或多个结合位点,可以与小分子效应剂结合。当效应剂与酶 结合时,它们可以改变酶的三维结构,从而影响酶的活性。
酶的合成调节
转录水平调节
通过调节相关基因的表达,控制 酶的合成量。
翻译水平调节
通过控制mRNA的稳定性、翻译起 始和延伸等过程,影响酶的合成。
酶的降解
通过酶的水解或其他降解机制,控 制酶在细胞内的浓度和活性。
03 酶活性调节的实例
CHAPTER
磷酸化与去磷酸化
磷酸化
通过将磷酸基团连接到酶的特定氨基酸残基上,磷酸化可以激活或抑制酶的活 性。例如,在糖原磷酸化酶的调节中,磷酸化可以抑制酶的活性,从而控制糖 原的分解。
05 酶活性调节的实际应用
CHAPTER
药物设计中的酶活性调节
总结词
药物设计中的酶活性调节主要关注通过调节酶活性来治疗疾病。
详细描述
在药物设计中,酶活性的调节是一个关键环节。许多药物的作用机制都是通过调节体内酶的活性来发挥治疗作用 的。例如,某些药物可以抑制某些酶的活性,从而降低疾病的症状。
农业生物技术中的酶活性调节
翻译水平调节
翻译水平调节是指通过控制特定mRNA分子的翻译来调节酶的合成量。例如,在肾上腺素的合成中, 通过增加肾上腺素受体的数量来增强肾上腺素的合成和分泌。
04 酶活性调节的研究进展
CHAPTER
酶活性调节的基因工程研究
基因敲除与敲入
基因表达调控
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以唾液淀粉酶为例,氯(Cl-)离子可使该酶活性增强,铜 离子(Cu2+)则强烈抑制该酶活性。
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三、实验器材
材料:唾液
试剂:蒸馏水,1%淀粉溶液,0.1%CuSO4,0.1%NaCl, 0.1%Na2SO4 碘液,各种pH的磷酸缓冲液:5.0;6.8 ;8.0
用具:一次性纸杯,试管,玻璃漏斗,试管架,试管 夹,恒温水浴锅,冰浴,电磁炉,沸水浴,滤纸
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二、实验原理
温度对酶的活性有显著影响。本实验以唾液淀粉酶为例。 唾液淀粉酶催化淀粉水解生成各种糊精和麦芽糖。
(C6H10O5)n→(C6H10O5)m→qC12H22O11 (n>m)
淀粉
糊精
麦芽糖
溶液的pH显著影响酶活性,pH既影响酶蛋白的本身,也 影响底物的解离,从而改变酶与底物的结合和催化作用。 在某一定pH时,酶活性达最大值,这一pH称酶的最适pH 。
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(二)pH对酶活性的影响
取试管4只、编号、按下表操作:
观察记录实验现象:
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(三)激动剂和抑制剂对酶活性的影响 取试管4只、编号、按下表操作:
观察记录实验现象:
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观察并记录
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讨论:
本次实验中影响实验成败的关键环节有哪些?
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四、操作步骤
(一)温度对酶活性的影响
1.漱口后,收集唾液2mL,加蒸馏水稀释10-20 倍,过滤;
2.取试管两只,各加稀释唾液2ml,一管直接加 热,煮沸;另一管置冰水浴中,预冷5分钟, 放置备用;
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3.另取试管4只、编号、按下表操作:
观察记录实验现象:
课前要求
遵守实验室有关规定,服从老师安排; 准时进行实验,不得迟到,早退; 穿实验服,不做与实验无关的事; 实验室不要打闹,激烈的活动; 整理实验台面,清洗手,值日生做好清洁
卫生; 撰写实验报告
2020/12/101实验一 影响酶活性的因素
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一、实验目的
通过实验,了解温度、pH、激动剂和抑制 剂等因素对酶活性的影响。
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PPT精品课件
谢谢观看
Thank You For Watching
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