尿中碘的砷铈催化分光光度测定方法技术说明与操作要点
砷铈催化分光光度测定法测定尿中碘的方法探讨
砷铈催化分光光度测定法测定尿中碘的方法探讨碘是人体必需的元素。
碘进入体内可随食物、饮水、食盐等途径摄取,其中90%由肾脏排出。
尿碘可大致反应碘摄入量和血液中的含碘量,碘缺乏和碘过量都可导致一系列疾病。
因此,探讨尿碘的分析方法对指导工业生产,为人群健康监护提供早期敏感指标有一定意义。
实验室参照尿中碘的砷铈催化分光光度测定方法(WS/T107—2006)对测定尿中碘进行了研究,总结了影响实验结果的几个方面因素,使实验更易于操作和控制减少测定误差,结果较为满意。
1.材料与方法1.1原理采用过硫酸铵溶液在100℃条件下,消化尿样与标准, 利用碘对砷铈氧化还原反应的催化作用,H3AsO3 + 2Ce4++H2O →H3AsO4+2Ce3++ 2H+,反应中黄色的Ce4+被还原成无色的Ce3+,碘含量越高,反应速度越快,所剩余的Ce4+则越少,控制反应温度和时间,于420 nm波长下测定体系中剩余Ce4+的吸光度值,求碘含量。
1.2仪器UV754N紫外可见分光光度计(上海精密科学仪器有限公司),DC-0515低温恒温槽(30±0.2℃),多孔电热消化器(孔间温度≤1℃),IKA旋涡混合器。
1.3试剂尿中碘的砷铈催化分光光度测定方法(WS/T107—2006)配套试剂盒(生产日期:110523 有效期至:111123 武汉众生生化技术有限公司)。
1.4分析步骤1.4.1尿碘标准系列(ug/L):0、50、100、150、200、250、3001.4.2测定分别取0.25mL碘标准使用系列溶液及尿样(取样前需摇匀尿液,使所有沉淀物混悬;如果尿样的碘浓度超过标准曲线的点浓度范围,则作适当稀释后取样)各置于玻璃试管中,各管加入1mL过硫酸铵溶液,混匀后置于控温100℃的消化控温装置中,消化60min,取下冷却至室温后置于30℃恒温槽中。
各管加入2.5mL亚砷酸溶液,充分混匀后放置15min,使其温度达到平衡;秒表计时,依顺序每管间隔相同时间(30s)向各管准确加入0.30mL硫酸铈铵溶液,立即混匀。
分光光度法测定尿中碘化物
2 0 优级 纯硫 酸 棕 L, 色瓶 中, 冰箱保存 。氯 酸溶液 : 取 5 0 称 0 g氯酸 钾于 2 L烧 杯
中, 加入 9 0 l 1 m 无碘水加热溶解后 , 2~ 以 3滴/ 的速度加 入 s 35 l 7 m 优级纯高氯酸 , 充分 搅拌直 至加完 。加 高氯 酸过 程 并 中以微火加热 , 温度不能过高 , 冷却后将烧 杯封 口, 置于冰箱
21 00年 9月 第2 2卷 下半 月 第 1 8期
中国民康 医学
Me i ̄ Ju de o m ̄ o hn s e pesHe h fC ie eP o l Mt
Sp 2 1 e .0 0 Vo . 2 S 1 2 HM No 1 .8
【 医学检验与临床 】
分 光 光 度 法 测 定 尿 中 碘 化 物
加入 0 5 l . m 氯酸溶液 , 混匀 后 于消解仪 中, 消解 温度 控制 在 10C一15 , 1 ̄ 1% 消化 1 , h 至溶液无色透 明, 同时做空 白试验 。
大于 1 00的尿样弃 去不用 , .3 尿样保存 过程 中应 防止碘 的污
14 2 标准 曲线 绘制 ..
取标 准系列 各 0 2 于 消化管 中, . ml
酸铈时严格控制时间 间隔为 3 s 用秒 表计 时。硫酸铈 的浓 0, 度 以 0 0 mo L为最佳 。 .5 l /
过夜 , 然后 用布 氏漏 斗抽 滤 , 到氯酸 溶液 , 存 于棕 色瓶 得 贮 中。冰箱保 存。碘标 准溶 液 : 稀释成标准应用液 。
13 样 品的选取 .
14 实 验方 法 .
I, L 贮存 于棕 色瓶 中 , 冰箱保存 。亚砷 酸溶液 : 2 . g优级 将 50
尿碘国标检测方法
尿碘国标检测方法
尿碘的国标检测方法一般是采用砷铈催化分光光度法。
该方法具有操作简便、快速、灵敏、准确等优点,被广泛应用于尿碘的检测。
以下是尿碘国标检测方法的简要步骤:
1. 采集尿液样本:通常采集清晨空腹尿液,避免食物和药物对检测结果的影响。
2. 尿液处理:将尿液样本进行适当的稀释或浓缩,以调整碘的浓度在合适的检测范围内。
3. 催化反应:在尿液中加入一定量的砷铈试剂,进行催化反应。
在反应过程中,碘与砷铈试剂发生氧化还原反应,产生颜色变化。
4. 分光光度法测量:使用分光光度计或类似的仪器,在特定波长下测量反应体系的吸光度。
吸光度与尿碘浓度成正比,通过与标准曲线进行比较,可以确定尿碘的浓度。
5. 结果计算和报告:根据测量得到的吸光度值,通过标准曲线或计算公式,计算出尿碘的浓度,并报告结果。
需要注意的是,尿碘的检测方法可能因实验室和地区而有所差异,具体的操作步骤和条件可能会有所不同。
在进行尿碘检测时,应严格按照检测方法的要求和操作规程进行操作,以确保检测结果的准确性和可靠性。
如果你需要进行尿碘检测,建议咨询专业的医疗机构或实验室,以获取准确的检测结果和相关建议。
尿中碘的砷铈催化分光光度测定方法
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6.4 标准曲线图
以碘标准使用系列溶液的碘浓度为横坐标,吸光 度为纵坐标绘制标准曲线(为凹面向上的下滑曲线) 或以吸光度为对数坐标在半对数坐标系中绘制标准曲 线(为下斜直线)。
长下,用1cm比色杯,以纯水作参比,测定各管的 吸光度值。标准曲线绘制:以碘标准使用系列溶液
(3.5.4)标系中绘制标准曲线。
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5.3 为方便操作, 对0 g/L ~ 300 g/L/300 g/L ~ 1200 g/L浓
度范围尿碘的测定提供了在不同温度下分析步骤5.1.4/5.2.4中所测第 一管(即标准系列中加300g/L/ 1200 g/L碘浓度管)吸光度值达到 0.15~0.18/0.05 ~0.08 时砷铈反应所需时间的参考值(表1/表2)。
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5.1.3 按下秒表计时,依顺序每管间隔相同的一定时间 (均30s或均20s)向各管准确加入0.30mL硫酸铈铵 溶液(3. 4),立即混匀。 5.1.4 待第一管(即标准系列中加300g/L碘浓度管) 的吸光度值达到 0.15~ 0.18 之间时,依顺序每管间
隔同样时间(与5.1.3的间隔时间一致)于400nm波
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3 溶液配制
3.1 过硫酸铵溶液{c[(NH4)2S2O8]=1.0 mol/L}:称取114.1g 过硫酸铵, 溶于 500mL去离子水中,储于棕色瓶,置冰箱(4℃)可保存1个 月。 3.2 硫 酸 溶 液 [c(H2SO4)=2.5mol/L] : 取 140mL 浓 硫 酸 缓 慢 加 入 到 700mL去离子水中,边加边搅拌,冷却后用水稀释至1L。
砷铈催化分光光度测定法测定尿中碘的方法探讨
砷铈催化分光光度测定法测定尿中碘的方法探讨砷铈催化分光光度测定法测定尿中碘的方法探讨碘是人体必需的元素。
碘进入体内可随食物、饮水、食盐等途径摄取,其中90%由肾脏排出。
尿碘可大致反应碘摄入量和血液中的含碘量,碘缺乏和碘过量都可导致一系列疾病。
因此,探讨尿碘的分析方法对指导工业生产,为人群健康监护提供早期敏感指标有一定意义。
实验室参照尿中碘的砷铈催化分光光度测定方法(WS/T107—2006)对测定尿中碘进行了研究,总结了影响实验结果的几个方面因素,使实验更易于操作和控制减少测定误差,结果较为满意。
1.材料与方法1.1原理采用过硫酸铵溶液在100℃条件下,消化尿样与标准, 利用碘对砷铈氧化还原反应的催化作用,H3AsO3 + 2Ce4++H2O →H3As O4+2Ce3++ 2H+,反应中黄色的Ce4+被还原成无色的Ce3+,碘含量越高,反应速度越快,所剩余的Ce4+则越少,控制反应温度和时间,于420 nm波长下测定体系中剩余Ce4+的吸光度值,求碘含量。
1.2仪器UV754N紫外可见分光光度计(上海精密科学仪器有限公司),DC-0515低温恒温槽(30±0.2℃),多孔电热消化器(孔间温度≤1℃),IKA旋涡混合器。
1.3试剂尿中碘的砷铈催化分光光度测定方法(WS/T107—2006)配套试剂盒(生产日期:110523 有效期至:111123 武汉众生生化技术有限公司)。
1.4分析步骤1.4.1尿碘标准系列(ug/L):0、50、100、150、200、250、3001.4.2测定分别取0.25mL碘标准使用系列溶液及尿样(取样前需摇匀尿液,使所有沉淀物混悬;如果尿样的碘浓度超过标准曲线的点浓度范围,则作适当稀释后取样)各置于玻璃试管中,各管加入1mL过硫酸铵溶液,混匀后置于控温100℃的消化控温装置中,消化60min,取下冷却至室温后置于30℃恒温槽中。
各管加入2.5mL亚砷酸溶液,充分混匀后放置15min,使其温度达到平衡;秒表计时,依顺序每管间隔相同时间(30s)向各管准确加入0.30mL硫酸铈铵溶液,立即混匀。
尿碘测定检测方法及注意事项
2015年3月26日
主要内容
尿碘的测定方法 试验操作注意事项
检测方法
WS/T107-2006 尿中碘的砷铈催化分光光度 测定方法
原理:
过硫酸铵在100℃条件下消化样品,利用碘对 砷铈氧化还原反应的催化作用,反应中黄色 的Ce4+被还原成无色的Ce3+,碘含量越高, 反应越快,所剩的Ce4+就越少;控制反应温 度和时间,在420nm波长下测定剩余的Ce4
水浴温度
温度的确定 控制温度的波动 反应时间 反应时间的确定 控制时间的一致 硫酸铈
量的准确
尿碘测定中反应温度、反应时间控制与测定误差——操 作中反应温度波动及反应时间偏离对测定结果的影响
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当按照尿碘测定方法操作结果出现工作曲线碘空白管 的吸光值很小时(例如30℃条件下砷铈反应30min时 碘空白管的测定吸光度<0.7):
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实验室环境:由于碘离子的易氧化性和碘分 子的易挥发性,容量滴定分析用的碘标准溶 液、固体碘、碘酒、碘盐检测场所、上述这 些含大量碘的废液的倒弃水槽等都是实验室 环境中碘污染的主要来源。
建议采用专用实验室操作。 条件实在不够的情况,必须与碘盐实验室分 开且室内不能存放含碘的其他试剂和样品; 必须在远离可能含碘离子的上述这些场所进 行试验操作。保证实验室清洁干净,无碘的 污染。 操作前实验台面需用1%硫代硫酸钠溶液进行 擦拭。
成套试剂盒: 武汉众生生化科技有限公司
谢 谢
2.各管加入2.5ml亚砷酸溶液,充分混匀后放 置15min,使其温度达到平衡;注意将标准系 列管按碘浓度由高至低顺序排列。 3.秒表计时,依顺序每管间隔相同时间(30s )向各管准确加入0.30ml硫酸铈铵溶液,立 即混匀。
尿中碘的砷铈催化分光光度测定方法技术说明与操作要点
• 一、现措施是对WS/T 107-1999 措施旳修 订
•
《尿中碘旳砷铈催化分光光度测
定措施(WS/T 107-2006)》是对采用氯
酸消化尿样旳《WS/T 107-1999 尿碘旳砷
铈催化分光光度测定措施》旳修订。
•
在2023年我国对检测尿碘旳原则
措施WS/T 107-1999进行了修订,此项修
110 115 ℃ 60 min
[0.07mol/L] 4mL [0.05mol/L] 0.50mL 30±0.2℃ (恒温水浴)
15 min 405 nm 0.15 1.0 5.20 mL 19.23 g/L
• WS/T107—2023
0 300 g/L
0.25 mL 1.0mol/L 过硫酸铵 1.0 mL
采用过硫酸铵溶液在100℃条件下消化尿样,利用碘 对砷铈氧化还原反应旳催化作用:
H3AsO3 2Ce4+ H2O H3AsO4 2Ce3+ 2H+ 反应中黄色旳Ce4+ 被还原成无色旳Ce3+,碘含量越 高,反应速度越快,所剩余旳Ce4+ 则越少;控制反应温 度和时间,于420nm 波长下测定体系中剩余Ce4+ 旳吸光 度值,求出碘含量。 碘浓度C与测定吸光度A两者旳定量关系式为:
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8.3 按下秒表计时,依顺序每管间隔相同旳一定时间 (30s)向各管精确加入0.30mL硫酸铈铵溶液(6. 4), 立即混匀。
8.4 待第一管(即原则系列中加300g/L碘浓度管)旳 吸光度值到达0.15~0.20之间时,依顺序每管间隔 一样时间(30s)于420nm波长下,用1cm比色杯, 以水作参比,测定各管旳吸光度值。原则曲线绘制: 以碘原则使用系列溶液(6.5.3)旳碘浓度为横坐标 和吸光度值为对数纵坐标,在半对数坐标系中绘制 原则曲线。
WST107-2006尿中碘的砷铈催化分光光度测定方法修订
WS/T107-2006尿中碘的砷铈催化分光光度测定方法修订原理采用过硫酸铵溶液在100℃条件下消化尿样,利用碘对砷铈氧化还原反应的催化作用:H3AsO3+ 2Ce4++ H2O →H3AsO4+ 2Ce3++ 2H+反应中黄色的Ce4+ 被还原成无色的Ce3+,碘含量越高,反应速度越快,所剩余的Ce4+ 则越少;控制反应温度和时间,于420nm 波长下测定体系中剩余Ce4+ 的吸光度值,求出碘含量。
1. 仪器和器材:与现行标准方法相同。
1.1消化控温加热装置:恒温消解仪,孔间温差≤1℃。
1.2数字显示光栅分光光度计:1cm比色杯。
1.3 恒温水浴:控温精度±0.3℃。
1.4 玻璃试管:15mm⨯150mm或15mm⨯120mm。
1.5 秒表。
2. 试剂:所用试剂品类规格与现行标准方法相同。
2.1所用试剂除另有说明外,均为分析纯试剂,实验用水为去离子水(符合GB/T 6682 二级水规格)。
2.2 过硫酸铵[(NH4)2S2O8,M=228.2]。
2.3 浓硫酸(H2SO4,ρ20=1.84g/mL),优级纯。
2.4 三氧化二砷(As2O3,M=197.8)。
2.5 氯化钠(NaCl,M=58.4),优级纯。
2.6 氢氧化钠(NaOH,M=40.0)。
2.7 硫酸铈铵[Ce(NH4)4(SO4)4·2H2O,M=632.6]。
2.8 碘酸钾(KIO3,M=214.0),基准试剂,使用国家标准物质GBW06110。
3. 溶液配制3.1 过硫酸铵溶液{c[(NH4)2S2O8]=1.0 mol/L}:称取114.1g 过硫酸铵溶解于约400ml纯水后再加纯水至500ml,避光4℃保存,至少稳定1个月。
3.2 硫酸溶液[c(H2SO4)=2.5mol/L]:配制方法与标准法相同。
取140mL浓硫酸缓慢加入到700mL去离子水中,边加边搅拌,冷却后用水稀释至1L。
3.3 亚砷酸溶液[c(H3AsO3)=0.025mol/L]:称取2.5g 三氧化二砷、40.0g氯化钠和1.0g氢氧化钠置于1L的烧杯中,加纯水约500mL,加热至完全溶解后冷至室温,再缓慢加入200ml 2.5mol/L硫酸溶液(3.2),冷至室温后用纯水稀释至1L,储于棕色瓶,室温放置可保存6个月。
尿中碘的砷铈催化分光光度测定方法技术说明与操作要点PPT课件
采用过硫酸铵溶液在100℃条件下消化尿样,利用 碘对砷铈氧化还原反应的催化作用:
H3AsO3 2Ce4+ H2O H3AsO4 2Ce3+ 2H+
反应中黄色的Ce4+ 被还原成无色的Ce3+,碘含量 越高,反应速度越快,所剩余的Ce4+ 则越少;控制反 应温度和时间,于420nm 波长下测定体系中剩余Ce4+ 的吸光度值,求出碘含量。
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厦门市CDC
引进过硫酸铵消化法的依据
1. 过硫酸铵溶液容易配制,稳定性好; 2. 消化温度为95-100℃,1h,产生有害气体少; 3. 准确性好(与其它方法比较)。
方法比较数据来自美国CDC组织的EQUIP项目:
Ensuring the Quality of Urinary Iodine Procedures (尿碘检测质量保证)
(2)修订后的方法除了在控温(水浴30℃0.2℃)反 应条件下进行测定,还可直接在2035℃之间的某一 稳定室温条件下进行测定。
(3)修改和完善了原标准中的某些规定。
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厦门市CDC
该修订后的新标准方法的方法论文 在《中国地方病学杂志》2004年11月出版 的第23卷第6期发表 :
“尿中碘的过硫酸铵消化—砷铈催化分光光度测定方法”
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厦门市CDC
7 样品收集、运输和保存 收 集 不 少 于 5mL 尿 液 , 置 于 聚 乙
烯塑料或玻璃试管中,严密封口以防蒸 发。尿样在现场收集和运输过程中无需 考虑特殊保存条件,在室温下可保存2周; 样品在4℃下可保存2个月,采用聚乙烯 塑料试管装样,密封后冷冻(-20℃)至 少可保存4个月。
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一、现方法是对WS/T 107-1999 方法的修订
尿碘检测方法
尿碘(0-300μg/L)砷铈催化分光光度测定法操作说明1. 原理采用过硫酸铵在100℃条件下消化尿样,利用碘催化砷铈氧化还原反应的原理,在420nm波长下动态测定反应体系中剩余Ce4+的光密度值,根据含碘量与光密度值的对数成线性关系计算尿碘。
2. 仪器消化控温加热装置:控温消解仪(孔间温差1℃)或恒温电热鼓风干燥箱(不锈钢为宜);超级恒温水浴箱:30~0.2℃;数显分光光度计:1cm比色杯;玻璃试管15×120mm或15×150mm若干;秒表3. 分析步骤:3.1溶解消解液:过硫酸铵为固体包装,使用时加去离子水溶解,加水溶解后定容到100mL,或者直接加去离子水87 mL(溶解后总体积约为100mL)。
3.2 分别取碘标准应用系列溶液及混匀尿样(取样前需摇匀尿样,使所有沉淀物混悬)0.25ml置于消化管中,注意将标准系列管按碘浓度由高至低排列。
各管加入1ml 1.0mol/L过硫酸铵溶液,混匀后置于消化控温加热装置中,于100℃消化60min(通风厨不是必需的),取下冷却至室温。
3.3 以下步骤可在20-35℃之间一个稳定的温度环境下(室温或控温)进行,要求温度波动不超过0.3℃。
各管加入2.5ml亚坤酸溶液,充分混匀(可使用混旋器)后放置15min,使其温度达到平衡;注意将标准系列管按碘浓度由高至低顺序排列。
3.4 使用秒表计时,依顺序每管间隔相同(30s)向各管准确加入0.3ml硫酸铈铵溶液,立即混匀。
3.5待第1管(即标准系列溶液中加300μg/L碘浓度)的吸光度值达到0.15-0.20之间时,依顺序每管间隔同样时间(30s)于420nm波长下,用1cm比色杯,以水作参比,测定各管的吸光度值。
3.6样品管含碘量的计算:本方法的含碘量C与测定吸光度A二者的定量关系式为C=a+b InA(或lgA),使用计算器或计算机计算出标准曲线的回归方程,将样品管的吸光度代入此方程,求出样品的含碘量。
尿碘测定检测方法及注意事项
结果计算 回归方程法 标准曲线的碘浓度C( μg/L)与 吸光度值A的回归方程为C=a+b ㏑A(或lgA ),计算标准曲线的回归方程,将样品管的 吸光度值代入此方程,求出所测样品中碘浓 度,再计算尿中碘浓度。
注意事项
实验环境、器皿及试剂应避免碘的污染 器皿:注意切不可与测定碘盐的玻璃器皿混用;另 外水质卫生检验的氨氮纳氏比色法、砷的银盐比色 法使用的试剂含高浓度的碘离子,这些检验工作所 用的器皿不可与尿碘检验的混用,对此还须注意避 免这些试剂对光度计比色皿的污染
2.各管加入2.5ml亚砷酸溶液,充分混匀后放 置15min,使其温度达到平衡;注意将标准系 列管按碘浓度由高至低顺序排列。 3.秒表计时,依顺序每管间隔相同时间(30s )向各管准确加入0.30ml硫酸铈铵溶液,立 即混匀。
4.待第一管(即标准系列中加300μg/L碘浓度 管)的吸光度值达到0.15-0.20之间时,依顺 序每管间隔同样时间(30s)于波长420nm波 长下,用1cm比色杯,以水作参比,测定各 管的吸光度值。 5.标准曲线绘制:以碘标准使用系列溶液的 碘浓度为横坐标和吸光度值为对数纵坐标, 在半对数坐标系中绘制标准曲线。
方法 1、分别取0.2ml碘标准使用系列溶液及尿样 (取样前需摇匀尿液,使所有沉淀物混悬; 如果尿样的碘浓度超过标准曲线的碘浓度范 围,则作适当稀释后取样)各置于玻璃试管 中,各管加入1ml过硫酸铵溶液,混匀后置于 控温100℃的消化控温加热装置中,消化 60min,取下冷却至室温。以下分析步骤2-4 ,可在20℃-35℃之间一个稳定的温度环境下 (室温或控温)进行,要求温度波动不超过 0.3℃。
先检查光度计波长是否准确;
是否使用了已风化或潮解的过硫酸铵固体试剂;
尿中碘的砷铈催化分光光度测定方法和具体流程操作要点
碘测定方法得到了统一,明显提高了尿碘检测质量,
保证了我国尿碘监测结果的可信性和可比性。
• 但是该方法在使用过程中仍存在一定问题,需要 对原标准中某些规定、步骤、试剂等进行改进和完
善。 该标准已实施近5年,应该及时修订,与国际 方法接轨。
• 问题主要在:尿样消化剂—氯酸溶液的配制比
较麻烦,费时费力,其配制质量及稳定性影响尿碘
• (3)修改和完善了原标准中的某些规定。
该修订后的新标准方法的方法论文 在 《中国地方病学杂志》2004年11月出版的第 23卷第6期发表 :
“尿中碘的过硫酸铵消化—砷铈催化分光光度测定方法”
阎玉芹1 张亚平2 刘列钧3 刘嘉玉1 李卫东4 华基礼5 陈祖培1 • 1.天津医科大学内分泌研究所; • 2.厦门市疾病预防控制中心; • 3.国家碘缺乏病参照实验室; • 4.安徽省疾病预防控制中心; • 5.陕西省地方病防治研究所 .
HClO3 → HClO4 + Cl2 氯气为强刺激危害性气体。
• 过硫酸铵溶液受热分解,产生活性氧,起消解样品作用:
(NH4)2S2O8 + H2O → NH4HSO4 + [O] + H+
四、尿碘测定方法原理 —— 砷铈催化分光光度法
采用过硫酸铵溶液在100℃条件下消化尿样,利用碘 对砷铈氧化还原反应的催化作用:
二、主要修订内容简介
• 2004年6-9月原标准研制人员对我国尿碘测定方法标 准——尿碘的砷铈催化分光光度测定方法(WS/T 1071999)进行了修订。主要修订内容有3个方面:
• (1)采用过硫酸铵溶液取代氯酸消化尿样。该溶液极 易配制,并大大减少了消化过程中分解产生有害气体的 污染。
• (2)修订后的方法除了在控温(水浴30℃0.2℃)反 应条件下进行测定,还可直接在2035℃之间的某一稳 定室温条件下进行测定。
尿碘测定检测方法及注意事项.
水浴温度
温度的确定 控制温度的波动 反应时间 反应时间的确定 控制时间的一致 硫酸铈
量的准确
尿碘测定中反应温度、反应时间控制与测定误差——操 作中反应温度波动及反应时间偏离对测定结果的影响
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当按照尿碘测定方法操作结果出现工作曲线碘空白管 的吸光值很小时(例如30℃条件下砷铈反应30min时 碘空白管的测定吸光度<0.7):
方法 1、分别取0.2ml碘标准使用系列溶液及尿样 (取样前需摇匀尿液,使所有沉淀物混悬; 如果尿样的碘浓度超过标准曲线的碘浓度范 围,则作适当稀释后取样)各置于玻璃试管 中,各管加入1ml过硫酸铵溶液,混匀后置于 控温100℃的消化控温加热装置中,消化 60min,取下冷却至室温。以下分析步骤2-4 ,可在20℃-35℃之间一个稳定的温度环境下 (室温或控温)进行,要求温度波动不超过 0.3℃。
先检查光度计波长是否准确;
是否使用了已风化或潮解的过硫酸铵固体试剂;
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是否配制得的Ce4+溶液浓度偏低;
再检查检测体系是否存在碘污染,并予以消除。这 里的检测体系包括:所用试剂、水、所用器皿、实 验室环境; 国家冻干尿碘标准物进行检测质量控制。
采样要求
采样器具的准备
器具:可用玻璃瓶或聚乙烯塑料瓶,必须能够 用塞或盖紧密密封
结果计算 回归方程法 标准曲线的碘浓度C( μg/L)与 吸光度值A的回归方程为C=a+b ㏑A(或lgA ),计算标准曲线的回归方程,将样品管的 吸光度值代入此方程,求出所测样品中碘浓 度,再计算尿中碘浓度。
注意事项
实验环境、器皿及试剂应避免碘的污染 器皿:注意切不可与测定碘盐的玻璃器皿混用;另 外水质卫生检验的氨氮纳氏比色法、砷的银盐比色 法使用的试剂含高浓度的碘离子,这些检验工作所 用的器皿不可与尿碘检验的混用,对此还须注意避 免这些试剂对光度计比色皿的污染
尿碘测定检测方法及注意事项
样品的采集与保存
采样后应尽快送实验室检测,不能尽快检测可放 4℃冰箱保存。 有文献报道尿样放冰箱(4 ℃)可保存 2 个月;如果 长时间内不能检测则应该冷冻保存(- 20 ℃)。
无碘水制备: 1L蒸馏水中加碳酸钠0.25g和高锰酸钾0.10g, 进行蒸馏。
2.各管加入2.5ml亚砷酸溶液,充分混匀后放 置15min,使其温度达到平衡;注意将标准系 列管按碘浓度由高至低顺序排列。 3.秒表计时,依顺序每管间隔相同时间(30s )向各管准确加入0.30ml硫酸铈铵溶液,立 即混匀。
4.待第一管(即标准系列中加300μg/L碘浓度 管)的吸光度值达到0.15-0.20之间时,依顺 序每管间隔同样时间(30s)于波长420nm波 长下,用1cm比色杯,以水作参比,测定各 管的吸光度值。 5.标准曲线绘制:以碘标准使用系列溶液的 碘浓度为横坐标和吸光度值为对数纵坐标, 在半对数坐标系中绘制标准曲线。
先检查光度计波长是否准确;
是否使用了已风化或潮解的过硫酸铵固体试剂;
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是否配制得的Ce4+溶液浓度偏低;
再检查检测体系是否存在碘污染,并予以消除。这 里的检测体系包括:所用试剂、水、所用器皿、实 验室环境; 国家冻干尿碘标准物进行检测质量控制。
采样要求
采样器具的准备
器具:可用玻璃瓶或聚乙烯塑料瓶,必须能够 用塞或盖紧密密封
砷铈反应整个环节都在恒温水浴中进行 硫酸铈加入前要先水浴恒温,以达到温度一 致 用加样枪加入,要求动作快速。 吸取时要注意防止产生气泡,以免影响加入 量。同时最好用干净滤纸擦干吸头外壁,加 样时尽量不要靠试管壁。 硫酸铈溶液在做样品前先试用量,保证吸光 度在0.15-1.0之间。
尿碘的砷铈催化分光光度测定方法
尿碘的砷铈催化分光光度测定方法尿碘的砷铈催化分光光度测定方法是用于测量人类体内碘的重要方法之一。
它基于砷铈催化氧化反应,可快速、准确地测量尿液中的碘含量。
下面我们来介绍一下这种方法的具体实现过程。
1. 实验原理尿液中含有少量的碘化物,为了提高检测的敏感度,需要将碘化物转化为高浓度的碘酸盐,同时利用砷铈的催化作用,氧化碘酸盐生成碘酸和碘酸离子。
这些离子在紫外可见光谱区域有明显的吸收峰,可以通过分光光度法进行测量。
2. 实验步骤(1)尿样处理:取尿液5ml加入5ml硫酸(7.5mol/L)和1.0ml 过氧化氢(30%),振动混合,加热至70℃,并继续加热1小时,使甲基橙变为黄色。
取出冷却后的样品,加入4ml去离子水,调节溶液pH值至4.2-4.3。
(2)标准曲线的绘制:取0.1,0.5,1,1.5,2,2.5,3,3.5μg的I2KIO3混合溶液,加入5ml硫酸(7.5mol/L),1ml过氧化氢(30%),振动混合。
在90℃恒温下反应5小时,并降温至室温。
取5ml上清液,用去离子水调节体积至50ml,用分光光度计在350nm处检测吸光度,得到标准曲线。
(3)样品的检测:取处理好的尿液样品,加入5ml硫酸(7.5mol/L),1ml过氧化氢(30%),振动混合。
在90℃恒温下反应5小时,并降温至室温。
取5ml上清液,用去离子水调节体积至50ml,用分光光度计在350nm处检测吸光度,并根据标准曲线计算出样品中的碘含量。
3. 实验注意事项(1)所有试剂必须是优质的。
硫酸、过氧化氢需使用新开瓶的。
(2)尿液样品必须在处理前保存冷藏,并在处理后尽快进行检测。
(3)操作过程中要求严格控制反应温度和时间,确保反应的充分进行。
4. 结论尿碘的砷铈催化分光光度测定方法是一种简单、快速、准确的检测碘含量的方法。
它可以广泛应用于各种医学、营养学等领域,对于研究人体内碘的代谢和营养状态等问题具有重要的参考价值。
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Level-2
Level-3
Level-4
Level-5
●过硫酸铵法
●氯酸法
● 13
ICP-MS
●过硫酸铵微板法
●其它法 整理课件
结果通报 2004-6
14
整理课件
EQUIP对测定尿碘方法评价的结论
1.各种方法测定结果的总体一致性是可以接受的;
2.各种方法在测定低尿碘时(<50g/L)均较准确,一致 性好;但检测高尿碘时则逐渐出现负偏差;
陈祖培1
整理课件
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对尿碘的砷铈催化分光光度 测定方法(WS/T 107-1999)的
修订简介
目的
必要性
修订内容
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目的
1. 与国际组织的推荐方法接轨; 2. 进一步完善和改进原标准中某些规定
和说明,使其更加简便易操作,更加适 于各级实验室,尤其基层实验室应用。
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必要性
•
该标准自1999年发布和实施以来,使全国的尿
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关于EQUIP
• 来自世界许多国家参与的实验室有约50个。
• 目前在实验室测定尿碘采用的检测方法有: ①过硫酸铵消化法 ②过硫酸铵消化微板法 ③氯酸消化法 ④ ICP-MS法 ⑤其它方法:干灰化法、全自动法等
以ICP-MS法作为评价其它方法的参考值。
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参与尿碘检测质量保证项目考核的分析方法分布
Other 6%
ICP-MS 6%
Ammonium Persulfate Microplate
13%
Chloric Acid 32%
Ammonium Persulfate
43%
结果通报 2003-9
Analytical method distribution of EQUIP labs
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整理课件
结果通报 2000-12
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我国原标准方法与修订后的标准方法比较
内容 标准曲线的线性范围
尿样体积
消化液. 体积 消化温度 消化时间
亚砷酸浓度. 体积 铈液浓度. 体积 反应温度 反应时间 光度测定波长
测300 g/L管 OD值 总反应体积
反应体系中NaCl 浓度 初始 [As3+]/[Ce4+] 总酸度[H+]
WS/T107—1999 0 300 g/L
0.20 mL 28% 氯酸 0.50 mL
110 115 ℃ 60 min
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一、现方法是对WS/T 107-1999 方法的修订
《尿中碘的 砷铈催化分 光光度测定 方法 (WS/T 107-2006)》是对采用氯酸消化尿样的 《WS/T 107-1999 尿碘的砷铈催化分光光度测定方法》的修订。
在 2004 年 我 国 对 检 测 尿 碘 的 标 准 方 法 WS/T 107-1999进行了修订,此项修订工作是受卫生部全国卫生 标准技术委员会委托,由天津医科大学内分泌研究所牵头, 厦门市疾病预防控制中心、国家碘缺乏病参照实验室、安 徽省疾病预防控制中心、山西省地方病防治研究所共同开 展方法研究实验修订完成的。
(3)修改和完善了原标准中的某些规定。
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该修订后的新标准方法的方法论
文
在《中国地方病学杂志》2004年
11月出版的第23卷第6期发表 :
“尿中碘的过硫酸铵消化—砷铈催化分光光度测定方法”
阎玉芹1
张亚平2 刘列钧3 刘嘉玉1 李卫东4 华基礼5
1.天津医科大学内分泌研究所; 2.厦门市疾病预防控制中心; 3.国家碘缺乏病参照实验室; 4.安徽省疾病预防控制中心; 5.陕西省地方病防治研究所 .
碘测定方法得到了统一,明显提高了尿碘检测质量,
保证了我国尿碘监测结果问题,需
要对原标准中某些规定、步骤、试剂等进行改进和
完善。 该标准已实施近5年,应该及时修订,与国
际方法接轨。
• 问题主要在:尿样消化剂—氯酸溶液的配制比
较麻烦,费时费力,其配制质量及稳定性影响尿碘
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二、主要修订内容简介
2004年6-9月原标准研制人员对我国尿碘测定方法标 准——尿碘的砷铈催化分光光度测定方法(WS/T 1071999)进行了修订。主要修订内容有3个方面:
(1)采用过硫酸铵溶液取代氯酸消化尿样。该溶液极 易配制,并大大减少了消化过程中分解产生有害气体 的污染。
(2)修订后的方法除了在控温(水浴30℃0.2℃)反 应条件下进行测定,还可直接在2035℃之间的某一稳 定室温条件下进行测定。
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整理课件
引进过硫酸铵消化法的依据
1. 过硫酸铵溶液容易配制,稳定性好; 2. 消化温度为95-100℃,1h,产生有害气体少; 3. 准确性好(与其它方法比较)。
方法比较数据来自美国CDC组织的EQUIP项目:
Ensuring the Quality of Urinary Iodine Procedures (尿碘检测质量保证)
3.与ICP-MS方法比较,所有其它方法均随着尿碘浓度增 高(尤其>100g/L时)存在一定的负偏差, 但过硫酸 铵法的负偏差最小。
4.仍需继续跟踪观察。
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在多年跟踪尿碘检测的国际先进经验的基础 上,并充分考虑了我国国情以及各级实验室的实 际条件, 针对我国现行的尿碘测定方法标准在操 作中所存在的问题,并考虑与国际组织的推荐方 法接轨,此次修订的我国测定尿碘标准方法采用 过硫酸铵为尿样消化的消化剂。
测定的批间重复性,影响测定结果的稳定性,尤其
对于基层实验室或经验不多的检测人员来说较难掌 握;氯酸消化尿样有刺激性有害气体产生。
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整理课件
修订内容
1.决定 在 尿样 消 化方 法 上改 采 用国 际 组织 ICCIDD/UNICEF/WHO推荐的过硫酸铵消 化法;
2.根据实际需要,建立可在“控温”和“室 温”两种反应温度条件下操作的检测方法;
[尿碘检测技术培训讲义(1)]
尿中碘的砷铈催化分光光度测定方法 (WS/T 107-2006)
技术说明与操作要点
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内容纲要
一、现方法是对WS/T 107-1999 方法的修订 二、主要修订内容简介 三、我国原标准方法与修订后的标准方法比较 四、尿碘测定方法原理 —— 砷铈催化分光光度法 五、尿碘测定方法 六、尿碘测定定量计算式与方法的化学动力学 七、尿碘测定中反应温度、反应时间控制与测定误差 八、有关尿碘测定的几点注意事项 九、结语