枯草芽孢杆菌PPT课件
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枯草芽孢杆菌 ppt课件
P XYL - xylR是从木糖诱导启动子枯草芽孢杆菌。对于这种启动子，我们尚未成功克隆到报告载体中以评 价活性。
ppt课件
13
三，诱导性芽胞杆菌启动子
启动子的最后一组包括来自两个诱导型启动子的枯草芽孢杆菌，P LIAI和xylR -P XYL。一种新的抗生素 诱导的启动子P lial其响应于干扰细胞壁的完整性和生物合成的抗生素。在刺激的情况下，双组分系统 LiaRS被激活。活化的响应调节剂LiaR与启动子的操纵子结合并诱导ia基因座的转录。当启动子启动时， 表达了两种蛋白质LiaI和LiaH。该启动子的主要优点是在不存在诱导物及其高动态范围的情况下具有非 常低的基础活性。用不同浓度的杆菌肽测量诱导，证明在大范围的启动子活性中具有浓度依赖性反应。
活性。 二，组成型芽孢杆菌启动子
构建了三种新的枯草芽孢杆菌启动子（P liaG，P veg，P lepA）PliaG该启动子显示比Anderson启动子 高得多的活性，但与其他评估的芽孢杆菌启动子相比仍然相对较弱。Pveg这个推动者是我们评估中最强 的。PlepA该启动子的活性在最强的芽孢杆菌启动子P veg的活性和弱P liaG之间。
另外，由于枯草芽孢杆菌本来的生活环境是在土壤中，它必须时刻准备应对
环境的变化，于是枯草芽孢杆菌进化出了一种分化机制，可以根据外界环境
分化为不同的性状，这就为潜在的多种应用提供了基础。
ppt课件
16
bead zillus：为基本生物砖枯草芽孢杆菌和孢子的蛋白质展示的平台
我们选择使用枯草芽孢杆菌来设计新的视野，并为这种模型生物提供工具，用于大肠杆菌 的iGEM世界。因此，我们在BioBrick标准中创建了由定义的启动子以及报告基因，表达和 空载体组成的芽孢杆菌 B io B rick B ox（B 4—22）。枯草芽孢杆菌天然产生耐应力的内生 孢子，其可以根据合适的环境条件发芽。为了突出使用这种独特的功能，我们开发Sporo beads。这些是表面融合蛋白的孢子。我们将GFP（绿色荧光蛋白）融合到最外层。扩大 这个想法，我们设计了一个孢粉矢量可以轻松地创建任何孢粉珠。为了保证孢粉珠的安全， 我们通过敲除基因参与防止发芽，并制定了自杀开关在发芽的情况下接通。随着项目Bead zillus，我们的团队展示了枯草芽孢杆菌的强大性质。
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三，诱导性芽胞杆菌启动子
启动子的最后一组包括来自两个诱导型启动子的枯草芽孢杆菌，P LIAI和xylR -P XYL。一种新的抗生素 诱导的启动子P lial其响应于干扰细胞壁的完整性和生物合成的抗生素。在刺激的情况下，双组分系统 LiaRS被激活。活化的响应调节剂LiaR与启动子的操纵子结合并诱导ia基因座的转录。当启动子启动时， 表达了两种蛋白质LiaI和LiaH。该启动子的主要优点是在不存在诱导物及其高动态范围的情况下具有非 常低的基础活性。用不同浓度的杆菌肽测量诱导，证明在大范围的启动子活性中具有浓度依赖性反应。
活性。 二，组成型芽孢杆菌启动子
构建了三种新的枯草芽孢杆菌启动子（P liaG，P veg，P lepA）PliaG该启动子显示比Anderson启动子 高得多的活性，但与其他评估的芽孢杆菌启动子相比仍然相对较弱。Pveg这个推动者是我们评估中最强 的。PlepA该启动子的活性在最强的芽孢杆菌启动子P veg的活性和弱P liaG之间。
另外，由于枯草芽孢杆菌本来的生活环境是在土壤中，它必须时刻准备应对
环境的变化，于是枯草芽孢杆菌进化出了一种分化机制，可以根据外界环境
分化为不同的性状，这就为潜在的多种应用提供了基础。
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bead zillus：为基本生物砖枯草芽孢杆菌和孢子的蛋白质展示的平台
我们选择使用枯草芽孢杆菌来设计新的视野，并为这种模型生物提供工具，用于大肠杆菌 的iGEM世界。因此，我们在BioBrick标准中创建了由定义的启动子以及报告基因，表达和 空载体组成的芽孢杆菌 B io B rick B ox（B 4—22）。枯草芽孢杆菌天然产生耐应力的内生 孢子，其可以根据合适的环境条件发芽。为了突出使用这种独特的功能，我们开发Sporo beads。这些是表面融合蛋白的孢子。我们将GFP（绿色荧光蛋白）融合到最外层。扩大 这个想法，我们设计了一个孢粉矢量可以轻松地创建任何孢粉珠。为了保证孢粉珠的安全， 我们通过敲除基因参与防止发芽，并制定了自杀开关在发芽的情况下接通。随着项目Bead zillus，我们的团队展示了枯草芽孢杆菌的强大性质。
枯草芽孢杆菌习性及其培养PPT课件
然后，将接种环从柄部至环端逐渐通过火焰 灭菌，复原。
不要直接烧环，以免残留在接种环上的菌体 爆溅而污染空间。平板接种时，通常把平板的面 20
21
OD600 测量细菌培养液在600nm处的吸光值，得到的OD600的数值如果在0.6-0.8之间，表 明细菌处于旺盛生长的对数生长期，OD600>3表明细菌已经饱和等。细菌的生长情况,可以通 过测OD600来监测。细菌的生长比较好的时期是在OD600为1时
9
枯草芽孢杆菌在0.03 %~0.3 %猪胆盐溶液中存 活率均超过90 %，这说明， 枯草芽孢杆菌对胆盐具有 良好的耐受性。 在不同质量浓度猪胆盐液 体培养基中，枯草芽孢杆 菌均得到了增殖，但增殖 幅度不大，说明猪胆盐对 枯草芽孢杆菌的增殖具有 抑制作用，当猪胆盐质量 浓度为0.3 %时，其抑制作 用明显增加。
注意事项：
1．可与低浓度抗生素同时使用，不得与杀菌剂、消毒剂、化学药品、农 药等同时存放使用。 2．若使用过量不会对动物造成任何伤害。初次使用时，环境突变时，动 物患病时加倍使用。 3．包装开启后最好一次性用完，未用完密封保存。
13
菌种培养
斜面培养法 菌种 枯草芽孢杆菌
培养基 营养琼脂 33g/L，自然pH值
5
成份含量：
枯草芽孢杆菌及生 物酶、维生素、微 量元素等辅助剂， 活菌数≥250亿/克。 形状：浅黄色粉末
6
适应生长条件
相关试验结果表明：该株枯草芽孢杆菌具有良好 的耐高 温、耐酸性和耐胆盐能力， 在90 ℃水浴中处理10 min后其存活率接近80 % 在pH等于2的人工胃液中处理6 h后存活率仍超过76 % 在质量浓度为0.3 %的猪胆盐溶液中处理4 h后存活率超过 90 % 在含猪胆盐的培养基中，仍可以生长增殖。 为微生物添加剂产品的开发提供了优良的菌种。
不要直接烧环，以免残留在接种环上的菌体 爆溅而污染空间。平板接种时，通常把平板的面 20
21
OD600 测量细菌培养液在600nm处的吸光值，得到的OD600的数值如果在0.6-0.8之间，表 明细菌处于旺盛生长的对数生长期，OD600>3表明细菌已经饱和等。细菌的生长情况,可以通 过测OD600来监测。细菌的生长比较好的时期是在OD600为1时
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枯草芽孢杆菌在0.03 %~0.3 %猪胆盐溶液中存 活率均超过90 %，这说明， 枯草芽孢杆菌对胆盐具有 良好的耐受性。 在不同质量浓度猪胆盐液 体培养基中，枯草芽孢杆 菌均得到了增殖，但增殖 幅度不大，说明猪胆盐对 枯草芽孢杆菌的增殖具有 抑制作用，当猪胆盐质量 浓度为0.3 %时，其抑制作 用明显增加。
注意事项：
1．可与低浓度抗生素同时使用，不得与杀菌剂、消毒剂、化学药品、农 药等同时存放使用。 2．若使用过量不会对动物造成任何伤害。初次使用时，环境突变时，动 物患病时加倍使用。 3．包装开启后最好一次性用完，未用完密封保存。
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菌种培养
斜面培养法 菌种 枯草芽孢杆菌
培养基 营养琼脂 33g/L，自然pH值
5
成份含量：
枯草芽孢杆菌及生 物酶、维生素、微 量元素等辅助剂， 活菌数≥250亿/克。 形状：浅黄色粉末
6
适应生长条件
相关试验结果表明：该株枯草芽孢杆菌具有良好 的耐高 温、耐酸性和耐胆盐能力， 在90 ℃水浴中处理10 min后其存活率接近80 % 在pH等于2的人工胃液中处理6 h后存活率仍超过76 % 在质量浓度为0.3 %的猪胆盐溶液中处理4 h后存活率超过 90 % 在含猪胆盐的培养基中，仍可以生长增殖。 为微生物添加剂产品的开发提供了优良的菌种。
枯草杆菌 生物兴趣小组(共35张PPT)
9、 复染：滴加蕃红复染3-5min， 水洗。
至此，革兰氏染色结束。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
观察荚膜和鞭毛标本片
周生
一端生一束
荚膜
革兰氏染色法是一种鉴别性的染色方法。 美国用枯草芽孢杆菌QST713菌株开发出活菌制剂杀菌剂SerenadeTM，用于防治多种作物的白粉病、霜露病、疫病、灰霉病等病害，用于防 治叶部病害(灰霉病、白粉病)和根部病害(枯萎病、根腐病、黑斑病等)，用于防治番茄晚疫病、灰霉病和小麦白粉病，还可作为增产促进剂。 [1]刘惠知，孔利华，周映华，黄建军. 确定N源后，在保持C含量不变的情况下，分别用葡萄糖，蔗糖，玉米粉，玉米淀粉，大米粉作为C源制作发酵培养基，其它组分不变，相同 条件下培养48h，测定活菌数和芽孢率，确定最佳C源。 本品还有婴幼儿生长发育所必须的多种维生素、微量元素及矿物质钙，可补充因消化不良或腹泻所致的缺乏。 利用蛋白质工程技术，能够在生产新酶之前对该酶的性质进行改良和调整，从而改善酶的活性或者赋予酶新的所需性质。 稻草粗细程度对枯草芽孢杆菌生长的影响 枯草芽孢杆菌迅速消耗环境中的游离氧，造成肠道低氧，促进有益厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降低肠道PH值，间接抑制其它致病 菌生长 研究证明，枯草芽孢杆菌的活菌制剂可以作为口服液用于治疗肠炎、支气管炎和腹泻等多种疾病，也用来预防和治疗烧伤面的感染。 通用名称：枯草杆菌二联活菌颗粒
这些浮游植物的光合作用，又为池内底栖水产动物的呼吸、有机物的分解提供氧气，从而使养殖水体形成一个良性的生态循环； 精、番红染 色液、蒸馏水。 8 pH对枯草芽孢杆菌生长的影响
培养方法
先用接种环接种1环试管菌 种到牛肉膏蛋白胨液体培 养基中，200r/min，37℃培 养24h，进行扩大培养和活 化，然后再取1mL液体种接 种到发酵培养基中，37℃培 养48h。
枯草芽孢杆菌PPT课件
29
枯草芽胞杆菌在水质净化中的应用
• 近年来，世界各国的水产养殖业均遭受了各种病害的困扰， 多种流行病在人工养殖的虾贝、鱼类等水产动物中相继爆 发，已经严重地制约了水产养殖业的发展。枯草芽胞杆菌 属本身是养殖水体中常见的菌种，且能够快速分解有机质， 促进H2S、亚硝酸盐氧化，并且对环境的适应能力强、生 长快速的细菌。
• 李春凤等研究了肉鸡日粮中添加枯草芽胞杆菌B7对其生长性能、饲料蛋白消 化率的影响，肉鸡日粮中添加适量的枯草芽胞杆菌能显著提高其生长性能和 饲料利用率。
• 潘康成等研究枯草芽孢杆菌制剂对肉鸡生长、胴体和鸡肉品质的影响，结果 表明枯草芽孢杆菌可以提高试验末期平均体重、净增重、日增重和饲料转化 率，鸡肌肉氨基酸总量、必需氨基酸和鲜味氨基酸含量均增加。
28
• 1992 年，Nakamura 等首次克隆了纳豆激酶基因并测定了全基因序 列，使得利用基因工程技术提高纳豆激酶活性及产量成为可能。近年 来，我国掀起对纳豆激酶的研究和开发热潮，纳豆激酶的药用价值日 益突出，通过利用基因工程菌生产纳豆激酶，致使对纳豆激酶基因的 克隆表达、纯化及表达产物的产量和活性方面的研究取得了很大进 展 在我国传统大豆发酵食品豆豉中发现了类似纳豆激酶的高活力的纤 溶酶，将其产生菌株鉴定为枯草芽孢杆菌，并将豆豉纤溶酶基因克隆 到了毕赤酵母中。与此同时，韩国也在其传统大豆发酵食品中发现了 类似的纤溶酶。近期，陈晔等通过枯草芽孢杆菌培养，利用（NH4） 2SO4沉淀、Sephadex G100 柱层析对该酶发酵液进行分离纯化， 已经分离纯化出了枯草芽孢杆菌（B.subtilis ZY21）溶栓酶。 以上研 究证明，日本、中国及韩国先后发现的这3种纤溶酶应该均由枯草杆 菌分泌的，只是菌株不同而已。
23
• 魏利辉等人在温室实验中，施用工程菌BsW的菌悬液处理番茄植株， 6周后根系上的卵块和根结数目明显减少，防效达到60.0%。具有促 生和抑制线虫作用基因工程菌的构建，为研究和开发新型微生物农药， 提供了一个新的视角。
枯草芽胞杆菌在水质净化中的应用
• 近年来，世界各国的水产养殖业均遭受了各种病害的困扰， 多种流行病在人工养殖的虾贝、鱼类等水产动物中相继爆 发，已经严重地制约了水产养殖业的发展。枯草芽胞杆菌 属本身是养殖水体中常见的菌种，且能够快速分解有机质， 促进H2S、亚硝酸盐氧化，并且对环境的适应能力强、生 长快速的细菌。
• 李春凤等研究了肉鸡日粮中添加枯草芽胞杆菌B7对其生长性能、饲料蛋白消 化率的影响，肉鸡日粮中添加适量的枯草芽胞杆菌能显著提高其生长性能和 饲料利用率。
• 潘康成等研究枯草芽孢杆菌制剂对肉鸡生长、胴体和鸡肉品质的影响，结果 表明枯草芽孢杆菌可以提高试验末期平均体重、净增重、日增重和饲料转化 率，鸡肌肉氨基酸总量、必需氨基酸和鲜味氨基酸含量均增加。
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• 1992 年，Nakamura 等首次克隆了纳豆激酶基因并测定了全基因序 列，使得利用基因工程技术提高纳豆激酶活性及产量成为可能。近年 来，我国掀起对纳豆激酶的研究和开发热潮，纳豆激酶的药用价值日 益突出，通过利用基因工程菌生产纳豆激酶，致使对纳豆激酶基因的 克隆表达、纯化及表达产物的产量和活性方面的研究取得了很大进 展 在我国传统大豆发酵食品豆豉中发现了类似纳豆激酶的高活力的纤 溶酶，将其产生菌株鉴定为枯草芽孢杆菌，并将豆豉纤溶酶基因克隆 到了毕赤酵母中。与此同时，韩国也在其传统大豆发酵食品中发现了 类似的纤溶酶。近期，陈晔等通过枯草芽孢杆菌培养，利用（NH4） 2SO4沉淀、Sephadex G100 柱层析对该酶发酵液进行分离纯化， 已经分离纯化出了枯草芽孢杆菌（B.subtilis ZY21）溶栓酶。 以上研 究证明，日本、中国及韩国先后发现的这3种纤溶酶应该均由枯草杆 菌分泌的，只是菌株不同而已。
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• 魏利辉等人在温室实验中，施用工程菌BsW的菌悬液处理番茄植株， 6周后根系上的卵块和根结数目明显减少，防效达到60.0%。具有促 生和抑制线虫作用基因工程菌的构建，为研究和开发新型微生物农药， 提供了一个新的视角。
《枯草芽孢杆菌》课件
未来发展方向与挑战
未来研究需要深入挖掘枯草芽孢杆菌 的生物活性物质及其作用机制，为其 在医药、农业和环保等领域的应用提 供理论支持。
枯草芽孢杆菌在食品和饲料添加剂领 域的应用前景广阔，但需要加强对其 安全性评价和质量控制的研究。
针对枯草芽孢杆菌的发酵工艺和大规 模生产技术需要进行优化，以提高其 产量和生物活性物质的稳定性。
总结词
枯草芽孢杆菌的培养方法与条 件对其生长和代谢具有重要影
响。
温度
枯草芽孢杆菌的最适生长温度为 30-37℃，过高或过低的温度均 会影响其生长。
湿度
保持培养环境的相对湿度在适 宜范围内，以防止培养基干燥 或过度湿润。
氧气
根据需要选择有氧或厌氧培养 ，枯草芽孢杆菌既能在有氧环 境下生长，也能在厌氧条件下
06 枯草芽孢杆菌的研究进展 与展望
研究现状与趋势
枯草芽孢杆菌是土壤和植物微生态中的重要成员，具有多种生物活性，如抗菌、抗 肿瘤、免疫调节等。
目前，枯草芽孢杆菌的研究主要集中在基因组学、蛋白质组学和代谢组学等方面， 旨在揭示其生物活性机制和潜在应用价值。
随着测序技术和生物信息学的不断发展，枯草芽孢杆菌的全基因组测序已经完成， 为其功能基因组学研究奠定了基础。
培养基的选择与制备
01
02
03
总结词
培养基是枯草芽孢杆菌生 长的必要条件，选择合适 的培养基对于其分离和培 养至关重要。
成分
培养基通常包含碳源、氮 源、无机盐、维生素等， 根据枯草芽孢杆菌的生长 需求进行选择和配比。
制备方法
按照配方比例称取各成分， 溶解、调节pH值后进行灭 菌处理，备用。
培养方法与条件控制
应用
枯草芽孢杆菌在农业、工业和医学等 领域有广泛应用，如生物肥料、生物 防治、生物降解等。
枯草芽孢杆菌PPT课件
1
2
枯草芽孢杆菌
广泛分布于土壤、空 气和腐败有机物上 易在枯草浸汁中繁殖
故名:枯草芽孢杆菌
3
枯草芽孢杆菌
拉丁学名：Bacillus subtilis
• 芽孢杆菌属的一种 • 单个细胞
0.7~0.8×2～3微米 • 细胞染色均匀，很
少成链
4
枯草芽孢杆菌
革兰氏阳性菌，无荚膜，周生 鞭毛，能运动，需氧型
解色氨酸形成吲哚.
纯 菌
10
Other
• 有的菌株是α-淀粉酶和中性蛋白酶的重要 生产菌
• 有的菌株具有强烈降解核苷酸的酶系，故 常作选育核苷生产菌的亲株或制取5'-核苷 酸酶的菌种,在遗传学研究中应用广泛
11
经济用途
*可使葡萄糖、半乳糖、 麦芽糖及甘露醇产酸，能 利用柠檬酸盐水解酪 蛋白 和淀粉。
13
枯草芽孢杆菌常用培养基配方：
1L蒸馏水+20g葡萄糖+15g蛋白胨+5g氯化 钠+0.5g牛肉膏+20g琼脂
14
thank you
Maked by
zhaoming&amulu &lijie
15
2019/12/25
16
培养基中生长时， 常形成皱醭
菌落
7
（
枯
草
芽
孢
杆
菌
在
营
养
琼
脂
平
板
上
的
菌 落 形
在液体培养基中不混浊或轻度 混浊，表面有呈暗色、带皱褶
态 ）
的菌膜飘浮
枯 草 芽 孢 杆 菌 群 落
8
2019/12/25
9
枯草芽孢杆菌的一些特点
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枯草芽孢杆菌
广泛分布于土壤、空 气和腐败有机物上 易在枯草浸汁中繁殖
故名:枯草芽孢杆菌
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枯草芽孢杆菌
拉丁学名：Bacillus subtilis
• 芽孢杆菌属的一种 • 单个细胞
0.7~0.8×2～3微米 • 细胞染色均匀，很
少成链
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枯草芽孢杆菌
革兰氏阳性菌，无荚膜，周生 鞭毛，能运动，需氧型
解色氨酸形成吲哚.
纯 菌
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Other
• 有的菌株是α-淀粉酶和中性蛋白酶的重要 生产菌
• 有的菌株具有强烈降解核苷酸的酶系，故 常作选育核苷生产菌的亲株或制取5'-核苷 酸酶的菌种,在遗传学研究中应用广泛
11
经济用途
*可使葡萄糖、半乳糖、 麦芽糖及甘露醇产酸，能 利用柠檬酸盐水解酪 蛋白 和淀粉。
13
枯草芽孢杆菌常用培养基配方：
1L蒸馏水+20g葡萄糖+15g蛋白胨+5g氯化 钠+0.5g牛肉膏+20g琼脂
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培养基中生长时， 常形成皱醭
菌落
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（
枯
草
芽
孢
杆
菌
在
营
养
琼
脂
平
板
上
的
菌 落 形
在液体培养基中不混浊或轻度 混浊，表面有呈暗色、带皱褶
态 ）
的菌膜飘浮
枯 草 芽 孢 杆 菌 群 落
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枯草芽孢杆菌的一些特点
枯草芽孢杆菌PPT精选文档共36页
文 家 。汉 族 ，东 晋 浔阳 柴桑 人 （今 江西 九江 ） 。曾 做过 几 年小 官， 后辞 官 回家 ，从 此 隐居 ，田 园生 活 是陶 渊明 诗 的主 要题 材， 相 关作 品有 《饮 酒 》 、 《 归 园 田 居 》 、 《 桃花 源 记 》 、 《 五 柳先 生 传 》 、 《 归 去来 兮 辞 》 等 。
枯草芽孢杆菌PPT精选文档
6
、
露
凝
无
游
氛
，
天
高
风
景
澈
。
7、翩翩新 来燕，双双入我庐 ，先巢故尚在，相 将还旧居。
8
、
吁
嗟
身
后
名
，
于
我
若
浮
烟
。
9、 陶渊 明（ 约 365年 —427年 ），字 元亮， （又 一说名 潜，字 渊明 ）号五 柳先生 ，私 谥“靖 节”， 东晋 末期南 朝宋初 期诗 人、文 学家、 辞赋 家、散
1
0
、
倚
南
窗
以
寄
傲
，
审
容
膝
之
易
安
。
41、学问是异常珍贵的东西，从任何源泉吸 收都不可耻。——阿卜·日·法拉兹
42、只有在人群中间，才能认识自 己。——德国
43、重复别人所说的话，只需要教育； 而要挑战别人所说的话，则需要头脑。—— 玛丽·佩蒂博恩·普尔
44、卓越的人一大优点是：在不利与艰 难的遭遇里百折不饶。——贝多芬
45、自己的饭量自己知道。——苏联
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露
凝
无
游
氛
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天
高
风
景
澈
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7、翩翩新 来燕，双双入我庐 ，先巢故尚在，相 将还旧居。
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嗟
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于
我
若
浮
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9、 陶渊 明（ 约 365年 —427年 ），字 元亮， （又 一说名 潜，字 渊明 ）号五 柳先生 ，私 谥“靖 节”， 东晋 末期南 朝宋初 期诗 人、文 学家、 辞赋 家、散
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之
易
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41、学问是异常珍贵的东西，从任何源泉吸 收都不可耻。——阿卜·日·法拉兹
42、只有在人群中间，才能认识自 己。——德国
43、重复别人所说的话，只需要教育； 而要挑战别人所说的话，则需要头脑。—— 玛丽·佩蒂博恩·普尔
44、卓越的人一大优点是：在不利与艰 难的遭遇里百折不饶。——贝多芬
45、自己的饭量自己知道。——苏联
枯草芽孢杆菌培养基优化ppt
06
参考文献
参考文献
《Biochemistry and Molecular Biology of Bacillus subtilis and Other Gram-Positive Microorganisms》
《Biosynthesis of antibiotics and related secondary metabolites》
培养基优化目的和意义
通过优化培养基组成和条件，可以提高枯草芽孢杆菌的产 量和抗菌活性，为农业、医药等领域提供更多、更好的生 物防治制剂。
优化培养基可以降低生产成本，提高产业化应用的可行性 。
培养基优化策略及方法
通过单因素实验法，分别考察不同碳源、氮源、无机盐等对枯草芽孢杆菌生长和 抗菌活性的影响，确定最佳组成和浓度。 采用正交实验法，对培养基主要成分进行优化组合，得到最佳培养基配方。
在正交实验中，当初始pH值为7 时，枯草芽孢杆菌的菌落数达
到最大值。
结果分析与讨论
根据单因素和正交实 验的结果，我们可以 得出以下结论
葡萄糖浓度对枯草芽 孢杆菌的生长具有显 著影响，最佳浓度为 0.5%。
蛋白胨是促进枯草芽 孢杆菌生长的重要氮 源，最佳浓度为 0.75%。
初始pH值对枯草芽孢 杆菌的生长也有较大 影响，最佳值为7。
2023
枯草芽孢杆菌培养基优化
目录
• 引言 • 枯草芽孢杆菌培养基优化原理 • 枯草芽孢杆菌培养基优化实验方案 • 实验结果分析与讨论 • 结论与展望 • 参考文献
01
引言
枯草芽孢杆菌简介
枯草芽孢杆菌是一种广泛分布在土壤、空气、水等环境中的 益生菌，具有耐高温、耐旱、耐盐等特点。
枯草芽孢杆菌可以产生多种抗菌物质，如枯草菌素、制霉菌 素等，对多种植物病原菌具有抑制作用。
相关主题
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1
枯草芽胞杆菌的概念 枯草芽胞杆菌的发展历史 枯草芽胞杆菌的理化性质 枯草芽胞杆菌的作用机理 枯草芽孢杆菌的应用
2
1 枯草芽胞杆菌的概念
3
• 枯草芽胞杆菌是一类好氧型、内生抗逆孢子的杆状细菌， 广泛存在于土壤湖泊、海洋和动植物的体表自身没有致病 性，只具有单层细胞外膜，能直接将许多蛋白质分泌到培 养基中。在营养缺乏的条件下，枯草芽胞杆菌停止生长， 同时加快代谢作用，产生多种大分子的水解酶和抗生素， 并诱导自身的能动性和趋化性，从而恢复生长。在极端的 条件下，还可以诱导产生抗逆性很强的内源孢子。正是由 于枯草芽孢杆菌无致病性，并可以分泌多种酶和抗生素， 而且还具有良好的发酵基础，所以用途十分广泛。
枯草芽孢杆菌菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、 制霉菌素、短杆菌肽等活性物质，这些活性物质对致病菌 或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用，并且枯草 芽孢杆菌迅速消耗环境中的游离氧，造成肠道低氧，促进 有益厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降低肠道pH 值，间接抑制其它致病菌生长。
14
• 姜华等人采用全自动微生物鉴定系统和分子生物学鉴定方 法，从辽宁碱蓬中分离纯化出7种细菌：枯草芽孢杆菌、 环状芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、缓慢葡萄 球菌、松鼠葡萄球菌和无乳链球菌其中，枯草芽孢杆菌对 供试的10种真菌有抑菌作用，尤其对草酸青霉菌丝干物质 抑制率可达86.4%，对茄病镰孢菌和串珠镰孢菌的抑制率 分别为52.2%和41.4%。
ห้องสมุดไป่ตู้17
枯草芽胞杆菌的消化作用
• 枯草芽孢杆菌菌体自身合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、 纤维素酶等酶类，在消化道中与动物体内的消化酶类一同 发挥作用。
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2019/10/31
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• 李卫芬等研究了饲料中添加枯草芽孢杆菌对草鱼消化道酶 活性和肠道菌群数量的影响。选用体质量为（51. 37±0. 58)g 的健康无病草鱼300尾，随机分为对照组和处理组两 组，每组设3个重复，每个重复放50尾鱼，对照组饲喂基 础日粮，处理组饲喂含枯草芽孢杆菌（108 CFU/kg饲料） 的基础日粮，日投喂量为鱼体质量的3%，饲养时间为45 d。结果表明：饲料中添加枯草芽孢杆菌能够改善草鱼肠 道菌群组成，并提高消化道特定消化酶活性。
7
1、自1958 年Spizizen 发现枯草杆菌168 菌株能摄取外源基因以后，随着DNA 重组技术的建立，特别是金黄色葡萄球菌带抗性标志的质粒可作为其载体的 发现，枯草杆菌基因工程研究迅速发展。
2、1945年Johnson等报道，枯草芽孢杆菌具有防治植物病害的作用。此后，用 枯草芽孢杆菌制备生防制剂防治植物病害的研究成为国内外研究的热点。
11
4枯草芽胞杆菌的作用机理
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近年来国内外对于芽孢杆菌应用方面的研究日益增多， 枯草芽孢杆菌作为一种生防细菌越来越引起人们的关注。 枯草芽胞杆菌的作用机理主要有： 1、枯草芽胞杆菌的抑菌作用 2、枯草芽胞杆菌的免疫作用 3、枯草芽胞杆菌的消化作用 4、枯草芽胞杆菌的其他作用
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枯草芽胞杆菌的抑菌作用
8
虽然目前对该菌种的研究仍然处于实验室 的初始阶段的水平，但是枯草研报杆菌有 一系列的优良性状吸引这一些的科学家的 目光，他们相信随着经济的发展，枯草芽 抱杆菌资源对在工、农、医等方面有重大 应用价值，开发利用更具有重要意义。
9
3枯草芽胞杆菌的理化性质
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理化性质
枯草芽胞杆菌在孢子状态下稳定性极好，有耐氧化、耐挤压、耐高温、 耐积水、耐酸等特性并能分泌多种酶类物质和生长为之因子。有资料 表明，枯草芽孢杆菌能长期耐60℃高温，在120℃温度下能存活20 分钟，在100℃下2min损失5%-10%；在贮存和加工条件下芽孢杆 菌也有很高的耐受能力；在pH值2.2-7.0范围内枯草芽孢杆菌有较高 的存活率，在酸性胃环境中能保持活性，并可耐唾液和胆汁的攻击， 是饲料微生物中可100%直达大小肠的活菌；有较高的蛋白酶、纤维 素酶和淀粉酶活性，对植物碳水化合物有较强的降解能力。
4
枯草芽胞杆菌在营养琼脂培养基中的形态
5
2枯草芽胞杆菌研究的发展历史
6
• 关于枯草芽孢杆菌的研究与应用已有100多年的历史，早 期大部分工作集中在形态观察、分类鉴定、生理机制、功 能发掘及防治等方面。
• 近年来，对枯草芽孢杆菌的研究渐进到遗传学与分子生物 学领域，研究内容体现在特定功能基因的寻找并克隆到需 要的物种中或者通过诱变、基因工程等手段对枯草芽孢杆 菌生产菌进行遗传改造等。
3、1980年Papavizas G C报道，枯草芽孢杆菌可以防治水稻等作物的多种土传 真菌病害。
4、1992年Hwang等报道，用枯草芽孢杆菌可以防治豌豆的Rhizoctoni根腐病。 5、上世纪90 年代，唐文华等和刘伊强等将枯草芽孢杆菌与Bt 通过细胞融合获
得了具有抑菌杀虫作用的融合子，从而使得该菌既有抗虫性又有抗药性，成 为一种极有前景的农药制剂。
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枯草芽胞杆菌的其他作用
• 能合成维生素B1、B2、B6、烟酸等多种B族维生素，提高 动物体内干扰素和巨噬细胞的活性，此外枯草芽胞杆菌也 具有抗氧化和促进新陈代谢的作用。李卫芬等发现水体中 添加芽孢杆菌制剂可以提高草鱼机体免疫力和抗氧化活性， 但也使草鱼肠道受到一定程度的应激胁迫。
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枯草芽胞杆菌的免疫作用
• 枯草芽胞杆菌可以刺激动物免疫器官的生长发育，激活T、 B淋巴细胞，提高免疫球蛋白和抗体水平，增强细胞免疫 和体液免疫功能，提高群体免疫力。
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• 边连全等为了研究枯草芽孢杆菌－菊糖合生元对断奶仔猪生长性能及 体液免疫功能的影响，对72头21日龄断奶的三元杂交仔猪进行试验。 各组试猪分别灌喂培养基（对照组）、培养基+3.5 mg /mL菊糖（菊 糖组）、培养基+1.25×108 CFU/mL 枯草芽孢杆菌（枯草芽孢杆菌 组）、培养基+ 3.5mg /mL 菊糖+ 1.25×108 CFU/mL 枯草芽孢杆菌 （合生元组），各组灌喂量为16 mL /d，试验期为14 d。结果表明： 枯草芽孢杆菌－菊糖合生元可提高断奶仔猪的生长性能与体液免疫功 能。
枯草芽胞杆菌的概念 枯草芽胞杆菌的发展历史 枯草芽胞杆菌的理化性质 枯草芽胞杆菌的作用机理 枯草芽孢杆菌的应用
2
1 枯草芽胞杆菌的概念
3
• 枯草芽胞杆菌是一类好氧型、内生抗逆孢子的杆状细菌， 广泛存在于土壤湖泊、海洋和动植物的体表自身没有致病 性，只具有单层细胞外膜，能直接将许多蛋白质分泌到培 养基中。在营养缺乏的条件下，枯草芽胞杆菌停止生长， 同时加快代谢作用，产生多种大分子的水解酶和抗生素， 并诱导自身的能动性和趋化性，从而恢复生长。在极端的 条件下，还可以诱导产生抗逆性很强的内源孢子。正是由 于枯草芽孢杆菌无致病性，并可以分泌多种酶和抗生素， 而且还具有良好的发酵基础，所以用途十分广泛。
枯草芽孢杆菌菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、 制霉菌素、短杆菌肽等活性物质，这些活性物质对致病菌 或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用，并且枯草 芽孢杆菌迅速消耗环境中的游离氧，造成肠道低氧，促进 有益厌氧菌生长，并产生乳酸等有机酸类，降低肠道pH 值，间接抑制其它致病菌生长。
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• 姜华等人采用全自动微生物鉴定系统和分子生物学鉴定方 法，从辽宁碱蓬中分离纯化出7种细菌：枯草芽孢杆菌、 环状芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、铜绿假单胞菌、缓慢葡萄 球菌、松鼠葡萄球菌和无乳链球菌其中，枯草芽孢杆菌对 供试的10种真菌有抑菌作用，尤其对草酸青霉菌丝干物质 抑制率可达86.4%，对茄病镰孢菌和串珠镰孢菌的抑制率 分别为52.2%和41.4%。
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枯草芽胞杆菌的消化作用
• 枯草芽孢杆菌菌体自身合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、 纤维素酶等酶类，在消化道中与动物体内的消化酶类一同 发挥作用。
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• 李卫芬等研究了饲料中添加枯草芽孢杆菌对草鱼消化道酶 活性和肠道菌群数量的影响。选用体质量为（51. 37±0. 58)g 的健康无病草鱼300尾，随机分为对照组和处理组两 组，每组设3个重复，每个重复放50尾鱼，对照组饲喂基 础日粮，处理组饲喂含枯草芽孢杆菌（108 CFU/kg饲料） 的基础日粮，日投喂量为鱼体质量的3%，饲养时间为45 d。结果表明：饲料中添加枯草芽孢杆菌能够改善草鱼肠 道菌群组成，并提高消化道特定消化酶活性。
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1、自1958 年Spizizen 发现枯草杆菌168 菌株能摄取外源基因以后，随着DNA 重组技术的建立，特别是金黄色葡萄球菌带抗性标志的质粒可作为其载体的 发现，枯草杆菌基因工程研究迅速发展。
2、1945年Johnson等报道，枯草芽孢杆菌具有防治植物病害的作用。此后，用 枯草芽孢杆菌制备生防制剂防治植物病害的研究成为国内外研究的热点。
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4枯草芽胞杆菌的作用机理
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近年来国内外对于芽孢杆菌应用方面的研究日益增多， 枯草芽孢杆菌作为一种生防细菌越来越引起人们的关注。 枯草芽胞杆菌的作用机理主要有： 1、枯草芽胞杆菌的抑菌作用 2、枯草芽胞杆菌的免疫作用 3、枯草芽胞杆菌的消化作用 4、枯草芽胞杆菌的其他作用
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枯草芽胞杆菌的抑菌作用
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虽然目前对该菌种的研究仍然处于实验室 的初始阶段的水平，但是枯草研报杆菌有 一系列的优良性状吸引这一些的科学家的 目光，他们相信随着经济的发展，枯草芽 抱杆菌资源对在工、农、医等方面有重大 应用价值，开发利用更具有重要意义。
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3枯草芽胞杆菌的理化性质
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理化性质
枯草芽胞杆菌在孢子状态下稳定性极好，有耐氧化、耐挤压、耐高温、 耐积水、耐酸等特性并能分泌多种酶类物质和生长为之因子。有资料 表明，枯草芽孢杆菌能长期耐60℃高温，在120℃温度下能存活20 分钟，在100℃下2min损失5%-10%；在贮存和加工条件下芽孢杆 菌也有很高的耐受能力；在pH值2.2-7.0范围内枯草芽孢杆菌有较高 的存活率，在酸性胃环境中能保持活性，并可耐唾液和胆汁的攻击， 是饲料微生物中可100%直达大小肠的活菌；有较高的蛋白酶、纤维 素酶和淀粉酶活性，对植物碳水化合物有较强的降解能力。
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枯草芽胞杆菌在营养琼脂培养基中的形态
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2枯草芽胞杆菌研究的发展历史
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• 关于枯草芽孢杆菌的研究与应用已有100多年的历史，早 期大部分工作集中在形态观察、分类鉴定、生理机制、功 能发掘及防治等方面。
• 近年来，对枯草芽孢杆菌的研究渐进到遗传学与分子生物 学领域，研究内容体现在特定功能基因的寻找并克隆到需 要的物种中或者通过诱变、基因工程等手段对枯草芽孢杆 菌生产菌进行遗传改造等。
3、1980年Papavizas G C报道，枯草芽孢杆菌可以防治水稻等作物的多种土传 真菌病害。
4、1992年Hwang等报道，用枯草芽孢杆菌可以防治豌豆的Rhizoctoni根腐病。 5、上世纪90 年代，唐文华等和刘伊强等将枯草芽孢杆菌与Bt 通过细胞融合获
得了具有抑菌杀虫作用的融合子，从而使得该菌既有抗虫性又有抗药性，成 为一种极有前景的农药制剂。
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枯草芽胞杆菌的其他作用
• 能合成维生素B1、B2、B6、烟酸等多种B族维生素，提高 动物体内干扰素和巨噬细胞的活性，此外枯草芽胞杆菌也 具有抗氧化和促进新陈代谢的作用。李卫芬等发现水体中 添加芽孢杆菌制剂可以提高草鱼机体免疫力和抗氧化活性， 但也使草鱼肠道受到一定程度的应激胁迫。
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枯草芽胞杆菌的免疫作用
• 枯草芽胞杆菌可以刺激动物免疫器官的生长发育，激活T、 B淋巴细胞，提高免疫球蛋白和抗体水平，增强细胞免疫 和体液免疫功能，提高群体免疫力。
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• 边连全等为了研究枯草芽孢杆菌－菊糖合生元对断奶仔猪生长性能及 体液免疫功能的影响，对72头21日龄断奶的三元杂交仔猪进行试验。 各组试猪分别灌喂培养基（对照组）、培养基+3.5 mg /mL菊糖（菊 糖组）、培养基+1.25×108 CFU/mL 枯草芽孢杆菌（枯草芽孢杆菌 组）、培养基+ 3.5mg /mL 菊糖+ 1.25×108 CFU/mL 枯草芽孢杆菌 （合生元组），各组灌喂量为16 mL /d，试验期为14 d。结果表明： 枯草芽孢杆菌－菊糖合生元可提高断奶仔猪的生长性能与体液免疫功 能。