制备固定化酵母细胞

制备固定化酵母细胞（教案）

常州市新桥中学张琴娣

一、教学目标

1、比较直接使用酶、固定化酶和固定化细胞的优点和缺点。

2、尝试制备固定化酵母细胞，并了解利用固定化酵母细胞进行酒精发酵。

3、能运用该部分内容解决一些实际问题。

二、教学重点与难点制备固定化酵母细胞

三、导入新课反馈练习1、2、3题，强调实验的重要性

四、知识回顾

1、列表比较直接使用酶、使用固定化酶和使用固定化细胞催化反应，各有哪些优点和缺点，并各举一例。

2、固定化酶和固定化细胞技术利用的方法有哪些？

3、固定化细胞常用的方法是哪一种？为什么？

4、催化大分子物质反应，应该采用固定化酶的方法还是固定化细胞的方法？为什么？

五、实验操作步骤

1、酵母细胞的活化

称取1g干酵母，放入50ml的小烧杯中，加入蒸馏水10ml，用玻璃棒搅拌，使酵母细胞混合均匀，成糊状，放置1h左右，使其活化（问：什么是活化？活化后酵母细胞的体积会变）

2、配制0.05mol/L的CaCl2溶液

（问：为什么要配制CaCl2溶液？答：）

称取无水CaCl20.83g，放入200ml的烧杯中，加入150ml蒸馏水，使其充分溶解，待用。

3、配制海藻酸钠溶液（该实验成败的关键步骤）

称取0．7g海藻酸钠,放入50ml小烧杯中，加入10ml水，用酒精灯加热，边加热边搅拌,将海藻酸钠调成糊状,直至完全溶化,用蒸馏水定容至10ml。注意，加热时要用小火，或者间断加热，反复几次，直到海藻酸钠溶化为止。

（问：为什么要小火或者间断叫热？

海藻酸钠浓度不能太高，也不能太低。原因是：太高，太低）4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合

将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，加入已活化的酵母细胞，进行充分搅拌，使其混合均匀，再转移至注射器中。（为什么要冷却？）

5、固定化酵母细胞

以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中，观察液滴在CaCl2溶液中形成凝胶珠的情形。将这些凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡30分钟。

（为什么要浸泡30分钟？）

五、反馈练习（见学案）

六、教学反思

1、学生的实验结果并不理想，凝胶珠基本上都带尾巴，可能是海藻酸钠浓度太高或太低。而学生配的海藻酸钠浓度普遍太低，说明蒸馏水加得太多，做得较好的同学，加10ml蒸馏水溶解海藻酸钠后，再加3—5ml。每次买的海藻酸钠批次不同，需要加的蒸馏水的量也不同，所以在学生实验前老师都要预先做一遍。

2、学生在溶解海藻酸钠时加了蒸馏水还没充分搅拌就加热，所以出现海藻酸钠有的形成硬块没有溶化的现象，今后实验过程中要加强这方面的指导。

3、用高考题引入，效果较好，强调实验的重要性很有说服力。

2009-6-12

制备固定化酵母细胞（学案）

班级姓名

一、学习目标

1、比较直接使用酶、固定化酶和固定化细胞的优点和缺点。

2、尝试制备固定化酵母细胞，并了解利用固定化酵母细胞进行酒精发酵。

3、能运用该部分内容解决一些实际问题。

二、学习重点与难点制备固定化酵母细胞

三、知识回顾

1、列表比较直接使用酶、使用固定化酶和使用固定化细胞催化反应，各有哪些优点和缺点，并各举一例。

2、固定化酶和固定化细胞技术利用的方法有哪些？

3、固定化细胞常用的方法是哪一种？为什么？

4、催化大分子物质反应，应该采用固定化酶的方法还是固定化细胞的方法？为什么？

四、实验操作步骤

1、酵母细胞的活化

称取1g干酵母，放入50ml的小烧杯中，加入蒸馏水10ml，用玻璃棒搅拌，使酵母细胞混合均匀，成糊状，放置1h左右，使其活化（问：什么是活化？活化后酵母细胞的体积会变）

2、配制0.05mol/L的CaCl2溶液

（问：为什么要配制CaCl2溶液？答：）

称取无水CaCl20.83g，放入200ml的烧杯中，加入150ml蒸馏水，使其充分溶解，待用。

3、配制海藻酸钠溶液（该实验成败的关键步骤）

称取0．7g海藻酸钠,放入50ml小烧杯中，加入10ml水，用酒精灯加热，边加热边搅拌,将海藻酸钠调成糊状,直至完全溶化,用蒸馏水定容至10ml。注意，加热时要用小火，或者间断加热，反复几次，直到海藻酸钠溶化为止。

（问：为什么要小火或者间断叫热？

海藻酸钠浓度不能太高，也不能太低。原因是：太高，太低）4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合

将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，加入已活化的酵母细胞，进行充分搅拌，使其混合均匀，再转移至注射器中。（为什么要冷却？）

5、固定化酵母细胞

以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中，观察液滴在CaCl2溶液中形成凝胶珠的情形。将这些凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡30分钟。

（为什么要浸泡30分钟？）

五、反馈练习

1．下列有关实验及显色结果的叙述，错误的有（多选）

A．水浴加热条件下，蔗糖与斐林试剂发生作用生成砖红色沉淀

B．沸水浴条件下，脱氧核苷酸与二苯胺发生作用呈现蓝色

C．常温条件下，蛋白质与双缩脲试剂发生作用呈现紫色

D．常温条件下，核糖核酸与甲基绿作用呈现绿色

2．下列关于DNA和蛋白质提取与分离实验的叙述，正确的有(多选)

A．提取细胞中的DNA和蛋白质都需用蒸馏水涨破细胞

B．用不同浓度NaCl溶液反复溶解与析出DNA可去除蛋白质

C．蛋白质提取和分离过程中进行透析可去除溶液中的DNA

D．蛋白质和DNA都可以用电泳的方法进行分离纯化

3．下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述，正确的是（单选）

A．固定化细胞技术在多步连续催化反应方面优势明显

B．固定化酶的应用中，要控制好pH、温度和溶解氧

C．利用固定化酶降解水体中有机磷农药，需提供适宜的营养条件

D．利用固定化酵母细胞进行发酵，糖类的作用只是作为反应底物

4、为提高葡萄酒的品质并降低生产成本，许多厂家使用固定化酵母细胞进行发酵。下面是

制备固定化酵母细胞的实验过程：

A．将干酵母与蒸馏水混合并搅拌，使酵母菌活化

B．将无水氯化钙溶解在蒸馏水中，配成氯化钙溶液

C．用酒精灯大火连续加热海藻酸钠溶液

D．向溶化后冷却至室温的海藻酸钠溶液中加入已活化的酵母细胞，充分搅拌并混合均匀转