细菌学检查

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肠道微生态细菌学检查

肠道微生态细菌学检查

肠道微生态细菌学检查肠道微生态细菌学检查是一种用于分析和评估肠道微生物群落组成的方法。

肠道微生态细菌是指寄生在人体肠道内的微生物,包括细菌、真菌、病毒等。

肠道微生态细菌与人体健康密切相关,它们参与人体的消化、免疫调节、营养吸收等多种生理功能。

通过肠道微生态细菌学检查,可以获取有关肠道微生物群落的丰度、多样性和组成信息。

这项检查通常采用16S rRNA基因测序技术,通过对样本中的细菌16S rRNA基因进行测序和分析,可以获得肠道微生物的分类信息。

此外,还可以通过测定肠道微生物的代谢产物、酶活性等指标,了解肠道微生物的功能特征。

肠道微生态细菌学检查在临床上有着广泛的应用。

首先,它可以帮助医生了解肠道微生物群落的结构和功能状态,为诊断和治疗提供依据。

例如,在肠道炎症性疾病(如克罗恩病和溃疡性结肠炎)的治疗中,通过分析肠道微生物群落的变化,可以判断治疗效果并进行个体化治疗。

其次,肠道微生态细菌学检查还可以用于评估肠道微生物对药物的代谢情况,从而指导药物的使用和调整剂量。

此外,还可以通过调整饮食和生活方式,改善肠道微生态平衡,预防和治疗肠道相关疾病。

肠道微生态细菌学检查的操作步骤相对简单。

首先,需要采集新鲜的粪便样本,保持样本的完整性和纯净性。

然后,将样本送至实验室进行DNA提取和16S rRNA基因测序。

在测序完成后,需要进行数据分析和解读,得出肠道微生物群落的组成和功能特征。

在进行肠道微生态细菌学检查时,需要注意一些问题。

首先,样本的采集和保存应严格按照操作规范进行,以避免外界污染和损伤DNA。

其次,数据分析和解读需要结合临床情况进行综合考虑,不能单纯依赖检查结果。

最后,肠道微生态细菌学检查目前仍处于研究阶段,一些检测方法和结果的临床意义还需要进一步验证和探索。

肠道微生态细菌学检查是一种重要的分析肠道微生物群落的方法,对于了解肠道微生态平衡、指导临床诊疗和个体化治疗具有重要意义。

随着技术的不断进步和研究的深入,肠道微生态细菌学检查在临床实践中的应用将会越来越广泛,为人类的健康和疾病治疗带来更多的希望。

临床标本的细菌学检查-精品文档

临床标本的细菌学检查-精品文档

法尿 和液 操标 作本 流细 程菌
检 验 方
Uricult 操作步骤
Uricult 菌落比密图
临床标本的细菌学检查
第一节 血液及骨髓标本
一 血液标本
血液标本的细菌培养是诊断菌血症或败血 症的基本方法。
如从患者血液中检出细菌,一般应视为病 原菌。
常见的病原菌主要有金黄色或表皮葡萄球 菌、链球菌(A、B群、肺炎链球菌等)、 肠球菌、产单核细胞李斯特菌、脑膜炎奈 瑟菌、伤寒及副伤寒沙门菌和厌氧菌等。
(2)结核分枝杆菌涂片检查 (3)新生隐球菌涂片检查 2. 分离培养 3. 报告方式 培养48小时,仍无菌生长者报告“培养 2天无细菌生长”。查见细菌报告细菌,报告菌名和 药敏结果。
第三节 呼吸系统标本
下呼吸道的痰液是无细菌的,而经口腔咳出的痰 带有多种上呼吸道的正常寄生菌(如草绿色链球 菌)。若从患者痰标本中查见致病菌或条件致病 菌,提示有上呼吸道感染。
脑脊液无论涂片或培养必须于 采集后立即送检不宜将其置于 冰箱保存,否则影响检出率。
法脑 和脊 操液 作标 流本 程细 图菌
学 检 验 方
(二)检验方法和操作流程
1. 涂片检查 (1) 一般细菌涂片检查: 例如:革兰阴性、凹面相对的球菌,可能是脑膜
炎奈瑟菌;链状排列的革兰阳性球菌;长丝状等多形 态性的革兰阴性杆菌,可能是流感嗜血杆菌。
验呼 方吸 法系 和统 操标 作本 流细 程菌
学 检
(二)检验方法和操作流程
1. 肉眼观察
2. 涂片检查 其一依据100×镜下观察白细胞和
上皮细胞数目多少来评定(如表);其二是初步判 定是否有病原存在。
痰标本镜下分类
分级 A B C
白细胞(个) >25 >25 <10

医学:水的细菌学检查-细菌总数的测定

医学:水的细菌学检查-细菌总数的测定
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培养基
普通肉汤培养基
用于一般细菌的培养,含有适合细菌 生长的营养成分。
选择性培养基
根据需要选择适合特定细菌的选择性 培养基,以筛选和鉴别特定细菌。
实验设备
灭菌锅
恒温培养箱
显微镜
移液器
用于培养基和实验器具 的灭菌,确保无菌状态。
用于细菌的培养,保持 恒定的温度和湿度。
观察细菌形态和染色情 况,进行细菌鉴定。
取适量水样,加入培养基中, 在恒温培养箱中培养24小时, 观察并记录菌落数。
实验日期
XXXX年XX月XX日
实验材料
水样、培养基、无菌吸管、培 养皿
实验结果
菌落数分别为XX、XX、XX、 XX、XX。
结果解读
根据实验结果,可以 得出水样中细菌总数 的数量。
分析细菌总数高的可 能原因,如环境污染、 水质处理不当等。
将细菌总数与国家标 准进行比较,判断水 样的卫生质量。
误差分析
误差来源
取样过程中可能存在的污 染、培养基的质量问题、 操作过程中的失误等。
误差控制
采用无菌操作技术,确保 培养基的质量,提高实验 人员的操作技能和责任心。
误差消除
重复实验,取多次测量的 平均值作为最终结果,以 提高实验的准确性和可靠 性。
根据细菌的生长速度和培养基的特性,确定培养时间,一般为18-48小时。
结果观察
观察内容
在培养期间,观察细菌的生长情况, 记录菌落的数量、形态等信息。
结果判定
根据菌落的数量和分布情况,判断水 样中细菌总数的多少,并评估水质的 安全性。

细菌的形态学检查常用的方法

细菌的形态学检查常用的方法

细菌的形态学检查常用的方法
细菌的形态学检查是指通过观察细菌的形态、结构和大小来进
行分类和鉴定的方法。

常用的方法包括:
1. 显微镜观察,使用光学显微镜或电子显微镜观察细菌的形态
和结构。

通过放大细菌的形态特征,如形状、大小、细胞壁结构等
来进行分类和鉴定。

2. 染色法,常用的染色方法包括革兰氏染色、折射率染色、吉
姆萨染色等,这些染色方法可以使细菌在显微镜下更清晰地显示出
形态特征,有助于鉴定。

3. 形态培养特性,利用不同的培养基和培养条件,观察细菌在
不同环境下的生长特性和形态变化,如菌落形态、生长速度等。

4. 生化反应,通过观察细菌对不同生化试剂的反应,如碘试验、氧化酶试验等,来鉴定细菌的形态学特征。

5. 分子生物学方法,包括PCR、序列分析等技术,通过对细菌
的基因组进行分析,可以更准确地鉴定细菌的形态学特征。

综上所述,细菌的形态学检查常用的方法包括显微镜观察、染色法、形态培养特性、生化反应和分子生物学方法,这些方法可以从不同角度全面地观察和鉴定细菌的形态学特征。

简述尿细菌学检查的注意事项

简述尿细菌学检查的注意事项

简述尿细菌学检查的注意事项
尿细菌学检查是泌尿系统感染诊断的重要依据,为了确保检查结果的准确性,受检者需要注意以下事项:
1. 收集尿液样本前,受检者需要仔细清洗外阴部,确保清洁无菌。

使用无菌容器留取中段尿,避免杂菌污染。

中段尿是指排尿过程中尿液的中间部分,避免收集初段尿和末段尿,因为初段尿可能含有尿道口的杂菌,而末段尿可能受到膀胱内沉淀物的污染。

2. 尿液样本应在无菌环境下保存,并及时送检。

避免尿液长时间暴露在空气中,以免受到外界杂菌的污染。

同时,要确保容器干燥、清洁、无菌,以保持尿液的纯净。

3. 男性受检者在留取尿液样本前,应将包皮翻开清洗干净,以确保尿液不受包皮垢的污染。

同时,留取中段尿,避免前列腺液和尿道分泌物的干扰。

4. 女性受检者应清洗外阴部,并使用无菌棉球擦干。

留取中段尿时,应避免阴道分泌物和粪便等污染尿液。

在月经期间或阴道用药后不宜进行尿细菌学检查。

5. 受检者应遵医嘱留取尿液样本,遵循正确的留尿方法和注意事项。

如有疑虑或特殊情况,请及时咨询医生或专业人士的建议。

尿细菌学检查是泌尿系统感染诊断的重要手段,正确留取尿液样本是确保检查结果准确性的关键。

因此,受检者需严格遵守以上注意事项,以获得可靠的结果。

尿细菌学检查的要求

尿细菌学检查的要求

尿细菌学检查的要求
尿细菌学检查是诊断尿路感染的重要依据,也是指导临床合理用药的关键手段。

在进行尿细菌学检查时,需要注意以下几个方面:1、清洗外生殖器:在进行尿细菌学检查前,应清洗外生殖器,以避免污染尿液。

清洗时,可以用温水或肥皂水清洗,但不要使用消毒剂,以免影响检查结果。

2、留取中段尿:在留取尿液标本时,应先排出一些尿液,以排出尿道口的细菌。

然后,留取中段尿,即取尿标本时不要使用初段尿液,尽量使用中段尿液进行检查。

这样可以避免尿道口和尿道内细菌的污染,提高检查结果的准确性。

3、避免污染:在留取尿液标本的过程中,应避免尿液被污染。

不要将尿液留在马桶或便池中,以免受到周围环境的污染。

同时,在留取尿液标本的容器中,应避免接触皮肤或使用已经被污染的容器。

4、及时送检:在留取尿液标本后,应尽快将其送往实验室进行检查。

如果尿液长时间放置在容器中,可能会导致细菌繁殖,影响检查结果的准确性。

5、特殊情况的处理:对于一些特殊情况,如使用抗菌药、尿道插管、留置尿管等,可能会影响尿细菌学检查的结果。

此时,应根据具体情况进行处理,如在使用抗菌药前留取尿液标本、尽量减少插管和留置尿管的时间等。

总之,在进行尿细菌学检查时,应严格遵守相关要求,以确保检查结果的准确性和可靠性。

同时,对于特殊情况的处理,也应根据具体情况进行适当调整。

如有疑虑或异常结果,应及时咨询医生或专业人士的建议。

《医学微生物学》三大常规的微生物学检查

《医学微生物学》三大常规的微生物学检查

《医学微生物学》三大常规的微生物学检查从临床标本中分离细菌的目的是为疾病的病原学做诊断,或查找与疾病相关的微生物,以及对抗生素的敏感性,这对于临床诊断、治疗、预后和进行流行病学调查是很有价值的。

因此,对临床标本的处理和检测应掌握以下原则。

1.临床标本的正确采集和处理对于疾病的正确诊断关系很大。

病人标本一般应在应用抗菌药物前采集。

对血液、脑脊液或穿刺液等标本,应严格按照无菌技术进行采集;对鼻咽拭子、肛拭子、粪便等标本,虽无须严格无菌操作,但也应尽量避免杂菌混入。

2.采集容器上应贴好送检号及病人姓名的标签,连同检验单一起尽早送检验室。

若路途较远,应冷藏保存送检;对脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等特殊标本,送检时应35℃~37℃保温。

3.人体很多部位与外界相通,存在有正常菌群,但不致病,故在涂片检查或分离培养时,应区别标本中是常居菌群的污染还是致病菌。

另外,对某些无菌的部位,如血液、骨髓、脑脊液等,如检查出细菌应视为致病菌,但必须要排除采样及操作中的污染。

4.根据标本来源和可能存在的病原菌,选定各种分离培养基和孵育环境。

如痰标本一般选用血平板,用于化脓性链球菌、无乳链球菌、肺炎链球菌、白喉棒状杆菌等的分离。

【血液标本检查】正常人的血液是无菌的。

当细菌侵入血流并在其中生长繁殖,产生毒素等,可引起菌血症或败血症。

细菌学检验对其诊断和治疗具有极其重要的意义。

一、标本采集l.标本采集必须严格遵守无菌操作,即应去除皮肤上的细菌,又应注意空气中的细菌。

穿刺部位以碘酒、酒精棉球消毒,用干燥的灭菌注射器抽取血液,立即注入选定的液体培养基瓶内,充分混匀以防凝固。

2.采血一般应在治疗前,并在高热、寒战时作培养。

伤寒在发病一周内即菌血症期间采血;化脓性脑膜炎,鼠疫应在发热1~2d内采血;亚急性细菌性心内膜炎也宜于发热高峰采血或多次采血,且每隔1~2h采血一次,连续3~4次,可获较高的阳性率。

3.采血量应相当于培养液的1/10,通常是50ml培养液采血5ml,这样可使存在于血液中的补体、抗体、调理素、溶菌酶等抑制因子被稀释,使之减弱或失去抑制作用。

临床标本的细菌学检查汇总

临床标本的细菌学检查汇总


二 生殖道标本


正常的内生殖器是无菌的,而外生殖器 (包括男性尿道口和女性阴道)有多种细 菌寄生。 查见病原菌提示有细菌感染。 常见的病原菌主要有葡萄球菌、肠球菌、 链球菌、淋病奈瑟菌、大肠埃细菌、变形 杆菌等。

(一)标本采集 1.女性生殖道标本 2.男性生殖道标本 3.梅毒螺旋体标本
第五节 泌尿、生殖道标本
一 尿液标本



中段尿培养加计数对于泌尿道感染的诊断有重要 价值。细菌培养必须结合菌落计数辨别是否为病 原菌。 有致病菌或条件致病菌生长,菌落计数>105/ml, 提示感染(膀胱炎,肾盂肾炎、肾或膀胱结核 等)。 常见病原菌主要有大肠埃希菌、葡萄球菌、链球 菌、变形杆菌和伤寒沙门菌等。
(2)男性
(一)标本采集
1. 中段尿标本采集法 (1)女性:
(3)儿童、婴儿
(4)两侧肾盂尿
(5)膀胱穿刺
(二)检验方法和操作流程 ■1.涂片检查 (1)一般细菌及淋病奈瑟菌 (2)念珠菌 (3)结核分枝杆菌 ■ 2.一般细菌培养 如培养2d无细菌生长,即可弃 去。 (1)倾注平板法 (2)平板接种环法 (3)标准接种环法:若定量接种环含量为.001ml, 则整个平板菌落数超过100个,可报告“菌落数 >105/ml”。 (4)Uricult 半定量法
法尿 和液 操标 作本t 操作步骤
Uricult 菌落比密图
Uricult 细菌种类标准模式 图
4.特殊菌落培养 (1)淋病奈瑟菌培养 (2)厌氧菌培养 (3)结核分枝杆菌培养 5.报告方式 培养48h无细菌生长,报告“2 天无细菌生长”。查见细菌,报告菌名及 其菌落计数(菌落数/ml)和药敏结果。

细菌与病毒的病原学检查法

细菌与病毒的病原学检查法
抗原检测:
凝集试验、对流免疫电泳、酶免疫技术、免疫荧光技 术
核酸检测:
1.核酸杂交技术:Southern印迹杂交、Northern印迹 杂交、原位杂交
2.PCR技术 3.基因芯片 4.16rRNA基因序列分析:编码rRNA,保守区、可变 区
三、抗体的检测(血清学诊断)
凝集试验:直接、间接、协同、冷凝集 沉淀试验:环状、絮状、双向、对流电泳 补体结合试验: 酶联免疫吸附试验(ELISA):
取双份血清,抗体效价比早期高4倍以上有意
义。
第二节 病毒感染的微生物学检查法
一、形态学检查
1.电子显微镜检查
直接镜检法:107颗粒/ml,电镜观察病毒
颗粒的形态和结构
免疫电镜法(IEM):
标本+特异性抗体 病毒颗粒聚集 电镜 观察
轮状病毒的粪便、HAV、HBV的血清、疱疹 病毒的疱疹液,可早期诊断。
三、病毒在培养细胞中增殖的鉴定指标
细胞的变化:CPE 红细胞吸附(HAd): 红细胞凝集: 病毒干扰作用:风疹病毒,埃可病毒,Vero细
胞。
中和试验(NT):是病毒在活体内或细胞培
养中被特异性抗体中和而失去感染性的一种试验
空斑形成试验:蚀斑形成单位(PFU),感染
性病毒的滴度用PFU/ml表示。
四、病毒成分的检测
血凝抑制试验
病毒+红细胞 血凝现象
病毒+抗体+红细胞 血凝现象消失
用于流感病毒、副流感病毒的诊断、流行 病学调查及鉴定病毒的型和亚型。
ELISA法:HSV、CMV、EB病毒等
蛋白印迹技术:用已知病毒蛋白检测未
知病毒
病毒抗原的检测:HIV和HBV抗原
病毒核酸的检测

尿细菌学检查的注意事项

尿细菌学检查的注意事项

尿细菌学检查的注意事项
尿细菌学检查是一种常见的临床检查方法,用于检测尿液中是否存在细菌感染。

以下是尿细菌学检查的注意事项:
1. 收集尿液的时间:尿液应该在早上第一次排尿后收集,这样可以避免尿液中的细菌数量过多或过少的情况。

2. 收集尿液的方法:应该使用无菌尿杯收集尿液,避免手部或其他物品的污染。

女性在收集尿液时应该注意清洁外阴部,避免将外部的细菌带入尿液中。

3. 尿液的数量:应该收集足够的尿液,一般来说,需要收集30毫升以上的尿液,以确保检测结果的准确性。

4. 尿液的保存:尿液应该尽快送到实验室进行检测,如果不能立即送到实验室,可以将尿液保存在冰箱中,但是不要超过24小时。

5. 检测方法:尿细菌学检查可以通过显微镜观察尿液中的细菌数量和形态,也可以通过培养细菌来确定细菌的种类和数量。

6. 注意交叉感染:在进行尿细菌学检查时,应该注意避免交叉感染,即避免将细菌从一个样本传染到另一个样本中。

总之,尿细菌学检查是一种非常重要的临床检查方法,在进行检查时应该注意以上几点,以确保检测结果的准确性。

尿细菌学检查结果

尿细菌学检查结果

尿细菌学检查结果
尿细菌学检查结果如下:
淡黄至无色:见于大量饮水、尿崩症、糖尿病。

橙色至黄褐色:胆红素尿。

肝细胞性黄疸、阻塞性黄疸,服用大黄、番泻叶等。

棕褐色或浓茶色:血红蛋白尿,体内溶血,常见于蚕豆病,阵发性睡眠性血红蛋白尿,血型不合之输血。

红色:血尿。

绿色:细菌尿(铜绿假单胞菌)。

乳白色:见于乳糜尿(丝虫病等),脂肪尿。

可将尿液加热煮沸后再检,若尿中含有大量维生素C,可致假阴性。

胆红素(Bilirubin):可检测含量为≥5mg/L的胆红素,尿中含有多量维生素C时,可减弱阳性。

尿胆原(Urobilinogen):可检测2-10mg/L含量的尿胆原,不受尿中胆红素含量的影响。

亚硝酸盐(Nitrite):用于泌尿道感染的筛选试验。

凡能将尿中蛋白质代谢产物硝酸盐还原为亚硝酸盐的细菌,本试验阳性,如大肠埃希菌等肠杆菌科细菌、铜绿假单胞菌等。

常见临床标本细菌学检验简述

常见临床标本细菌学检验简述

分离培养
将标本接种在适宜的培养 基上进行细菌分离培养。
注意事项
01 确保采集工具的无菌性,避免交叉感染。
02 采集足够的标本量,以保证检验结果的准 确性。
03
及时送检,避免延误检验时间。
04
注意个人防护,避免感染。
PART 02
临床标本细菌学检验方法
分离培养
分离培养
将临床标本接种于适宜的固体或 液体培养基上,在适宜的温度和 环境下进行培养,使细菌得以生
免疫学鉴定
利用抗原-抗体反应的原理 ,通过免疫学方法进行细 菌的鉴定。
药敏试验
纸片扩散法
将含有不同抗菌药物的纸片贴在已接 种细菌的平板上,观察细菌的生长情 况,以判断细菌对抗菌药物的敏感程 度。
稀释法
E试验
将细菌接种在含有抗菌药物的平板上 ,通过测量抑菌圈的大小来判断细菌 对抗菌药物的敏感程度。
通过不断增加抗菌药物的浓度,观察 细菌的生长情况,以判断细菌对抗菌 药物的敏感程度。
结果解读
1 2
解读临床意义
根据细菌培养和药敏试验结果,判断细菌种类、 感染部位及病原体对抗生素的敏感性,为临床医 生提供诊断和治疗依据。
鉴别病原菌
通过细菌形态、染色、生化反应等实验手段,鉴 别不同病原菌,有助于针对性地选择抗菌药物。
3
判断耐药性
监测细菌对抗生素的耐药性,预测治疗效果,为 临床医生提供抗菌药物选择的参考依据。
伤口分泌物标本
用无菌棉签擦拭伤 口表面分泌物。
血液标本
采集静脉血液,常 用无菌注射器抽取 。
呼吸道标本
采集鼻咽拭子或痰 液,用无菌棉签擦 拭鼻咽部或咳痰。
粪便标本
采集新鲜粪便,避 免污染。

细菌学检查

细菌学检查

细菌学检查非发酵菌鼻疽假单胞菌鼻疽假单胞菌(P.Mallei)是鼻疽病的病原菌。

可从患者血液、脓液、痰中分离到。

【临床意义】对马、骡、驴的传染性很强,犬、猫、羊等都可被感染。

可通过擦伤皮肤、直接接触和吸入本菌而感染。

人类感染较少见,但经常与病畜接触的人也可患鼻疽病。

实验室感染也可发生。

产碱假单胞菌【临床意义】为条件致病菌,可引起脓胸、眼部感染、脓肿等恶臭假单胞菌恶臭假单胞菌(P.Putida)为鱼类的一种病原菌,常可从腐败的鱼类中检出,偶尔可从尿路感染患者的尿中及血库存血中分离出来。

非发酵菌非发酵菌(Nonfermenter)大多是条件致病菌。

包括十几个菌属的数十个种别,如假单胞菌属、不动杆菌属、黄杆菌属、产碱杆菌属、莫拉氏菌属等。

由于非发酵菌有很多菌属,每个菌属又有多个种,因此对其必须先进行初步分群,即先进行科、属的鉴别,然后再进行种间鉴别。

腐败假单胞菌腐败假单胞菌(P.Putrefacien)为腐物寄生菌,分布非常广泛,河水、污水、土壤、牛奶、鸡蛋等均有存在。

可引起奶油、鱼、肉变质并产生H2S。

【临床意义】本菌为条件致病菌。

可引起人类中耳炎、创伤后溃疡、败血症、呼吸道感染,以及糖尿病或体弱患者的皮肤化脓性溃疡。

假单胞菌属假单胞菌属(Reudomona)分布很广,水、污水、土壤和空气中均存在。

本属有几十个菌种,临床较常见的有十种左右。

代谢菌种为铜绿色假单胞菌。

人类感染的非发酵菌,假单胞菌占70%~80%。

主要是铜绿色假单胞菌(占55%~65%)。

类鼻疽假单胞菌类鼻疽假单胞菌(P.Peudomallei)可引起类疽病。

【临床意义】为条件致病菌。

人类接触污染的污水、土壤或通过直接接触(划破皮肤或擦伤)而进入人体,也可从呼吸道、消化道进入人体而感染。

但罕见人与人之间相互传染。

本菌可潜伏体内几年不发病,在多发地区这种隐性感染是很高的。

败血性类鼻疽病如不及时治疗进展迅速,且死亡率很高。

类产碱假单胞菌类产碱假单胞菌(P.Peudoalcaligene)与产碱假单胞菌很相似,属于假单胞菌中的产碱群。

细菌的检查方法范文

细菌的检查方法范文

细菌的检查方法范文细菌检查是一种具有重要意义的实验室检查方法,它是通过检验样本中是否含有细菌来帮助医生判断疾病的病因和选择合适的治疗方案。

本文将介绍几种常见的细菌检查方法。

一、细菌培养细菌培养是一种最基本的细菌检查方法。

它通过将病原体样本(如血液、尿液等)接种于特定的培养基上,并提供适宜的环境条件(如温度、湿度等),使细菌能够繁殖生长。

在培养基上形成的细菌菌落能够用于鉴定细菌种类和进行药敏试验,从而帮助医生确定合适的抗生素治疗方案。

二、细菌染色细菌染色是一种常见的细菌检查方法,它通过使用染色剂将细菌染色,从而使其在显微镜下能够被观察到。

常用的细菌染色方法包括革兰氏染色和抗酸染色。

革兰氏染色用于区分革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌,而抗酸染色则用于检测酸性染料抗拒的细菌(如结核菌)。

三、细菌抗生素敏感性试验细菌抗生素敏感性试验是一种用于评估细菌对抗生素的敏感性的方法。

它常用于指导临床医生选择合适的抗生素治疗方案。

目前常用的细菌抗生素敏感性试验方法有药敏试验和聚合酶链反应法(PCR)等。

药敏试验通过将培养好的细菌与不同的抗生素接触,并观察细菌的生长情况,从而判断其对该抗生素的敏感性。

PCR则是一种利用特定引物扩增标靶序列的分子生物学技术,能够快速、准确地检测细菌是否对其中一种抗生素具有耐药性。

四、免疫学检测免疫学检测是一种通过检测体液或细胞中特定抗体或抗原的方法,可用于检测细菌感染。

常用的细菌免疫学检测方法包括酶联免疫吸附测定法(ELISA)、流式细胞术等。

这些方法能够检测到体液中与细菌感染相关的特定抗体或抗原,从而提供对细菌感染的诊断和判断。

五、细菌核酸检测细菌核酸检测是近年来广泛应用的一种细菌检测方法。

它通过从样本中提取细菌核酸,利用特定引物和核酸扩增技术(如PCR)进行扩增,从而检测和鉴定细菌的存在。

这种方法具有高度的敏感性和特异性,能够快速、准确地检测细菌感染。

细菌检查方法的选择通常由临床需要和实验室设备等因素决定。

下呼吸道感染细菌学检验操作规范

下呼吸道感染细菌学检验操作规范

下呼吸道感染细菌学检验操作规范下呼吸道感染细菌学检验操作规范1. 检验前准备检验前要检查所需器材是否齐备,且有使用期限、试剂是否过期。

根据标本性质准备适当的试验室和器材,如培养基、消毒剂、培养皿、显微镜、荧光显微镜等。

2. 标本的采集下呼吸道感染标本需由医生经过特殊训练后采集。

标本采集应在患者用药前进行,避免影响细菌培养。

应采集晨起的第一口咳痰标本,或在空腹情况下采集医生所要求的标本。

标本采集应该避免因细菌其他来源被污染。

3. 标本的存储和运输标本应在采集后尽快送至检验室。

标本在送到检验室的途中应密封,并且避免被震动或过热过冷。

气管切开标本应立即进行培养,对于咳痰标本应在收到后的半小时内进行处理。

4. 标本的处理将留有量行的痰液用橡皮塞挤入干净的西门子杯内,有时也可采用锡制雾化器或喷雾器快速将痰液或分泌物喷在玻片上。

用火焰或消毒器对冷凝吸入性肺炎标本进行消毒,尽可能在细菌沉淀区进行采样。

迅速挤压蓝色鼻咽拭子并置入培养皿内。

标本处理时要注意避免散播细菌。

5. 涂片染色将涂片涂上标本,然后进行染色。

无需特殊之处,可以参照常规的涂片染色法。

6. 培养用普通、选择性和不同的富集培养基进行培养。

常用的培养条件和相关的检测菌株如下:a. 长链球菌–用5%的羊血琼脂培养,将其置于CO2孵育箱中。

b. 肺炎球菌,草绿色链球菌,葡萄球菌–用血精灵琼脂培养。

c. 肺炎链球菌–用富集培养基,如VP培养基、耐苯唑芥庚烷琼脂(PBG琼脂)等。

为了纯化不同类型的肺炎链球菌,还可以选择使用灭菌的吞噬细胞进行富集,例如照片长杆菌(F. tularensis.)。

d. 泡沫状微生物和厌氧菌–分别用PPLO或厌氧和普通琼脂培养。

7. 鉴定和鉴别根据培养结果和临床表现,可对菌株进行初步鉴定和分类。

在进行鉴定过程中,应遵循规范化的步骤,选择正确的API、鉴定手段等,并在鉴定手册中查找相关鉴定概念、流程、依据以及最近的病原学方面的知识,避免误判或漏判。

细菌学检验ppt课件

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二、染色标本
(一)常用染料 1.碱性染料:碱性复红、结晶紫、美蓝等 2.酸性染料:有伊红、刚果红等 3.复合染料(中性染料)及荧光染料:复合染料有
瑞氏染料(伊红美蓝)、姬姆萨染料(伊红天青) 等;荧光染料有荧光标记的抗体
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革兰染色(gram stain) 方法:
(二)常用的染色方法
1、结晶紫初染
1 min
2、卢戈氏碘液媒染 1 min
革兰阳性球菌
3、95%酒精脱色 30sec~1 min
4、稀释石炭酸复红复染 1 min
原理:
G+等电点低,带正电荷的碱性燃 料作色牢固
G+细胞壁肽聚糖层多,G-细胞壁 脂质含量高
G+含有多量核糖核酸镁盐与结晶 紫、碘结合成大分子复合物
革兰阴性杆菌
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(一)培养基的组成成分
1.营养物质 蛋白胨、肉浸液、牛肉膏、糖类、醇类、血液、 无机盐类、鸡蛋和动物血清生长因子
2.凝固物质 琼脂、明胶、卵白
3.抑制剂和指示剂 胆盐、蔷薇酸等,酚红、中性红、溴甲酚紫等
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(二)培养基种类
1.基础培养基(based medium) 2.营养培养基(nutrient medium) 3.鉴别培养基(differential medium) 4.选择培养基(selective medium) 5.特殊培养基(special medium)
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1.基础培养基(based medium)
含有大所属细菌生长所需 的基本营养成分,最常用的是 肉浸液,俗称肉汤(broth), 主要成分含牛肉浸液和蛋白胨。 用于培养一般细菌

临床标本的细菌学检验.ppt

临床标本的细菌学检验.ppt
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• 结果报告
1. 阳性结果报告: (1) 初级报告 (2) 最终报告
2. 阴性结果报告:
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中枢神经系统感染的细菌学 检查
• 脑脊液为一水样透明液体,存在于脑室 和蛛网膜下腔内。在生理情况下,血液 和脑脊液之间有血脑屏障,阻碍各种微 生物通过血液进入中枢神经系统。正常 人的脑脊液是绝对无菌的。在病理情况 下,血脑屏障受到破坏,病原微生物及 其产物进入脑脊液,引起中枢神经系统 损害。此时在脑脊液中可培养检出病原 微生物 。
their toxins in tissues or in the blood. Systemic disease caused by the spread of the microorganisms via the circulating blood is commonly called SEPTICEMIA. 一过性、间歇性、持续性
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脑膜炎类型
观察物
细菌性的 结核性的 真菌性的 病毒性的
优势白细 胞类型

分裂的多形核 嗜中性粒细胞
单核细胞
很低

5-20mg/100ml 20-40mg/100ml
单核细胞
低 20-40mg/ml
蛋白
增高
增高
增高
涂片染色 革兰染色
抗酸染色
印度墨汁
单核细胞
正常 65-70mg/ml
感染早期 轻度增高
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•菌血症时血液中的细菌并不多,通常仅10~20 CFU/ml, 故采血量大阳性率高。 •采血培养应该尽量在使用抗菌药之前进行,在24 h 内采 集2~3 次做血培养(一次静脉采血注入到多个培养瓶中 应视为单份血培养) 。 •对间歇性寒战或发热,应在寒战或体温高峰到来之前 0.51h采集血液,或于寒战或发烧后1h进行。 •标本运送: 采血后应该立即送检,如不能立即送检,需室温 保存或置35 ℃~37 ℃孵箱中,切勿冷藏。
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非发酵菌鼻疽假单胞菌鼻疽假单胞菌(P.Mallei)是鼻疽病的病原菌。

可从患者血液、脓液、痰中分离到。

【临床意义】对马、骡、驴的传染性很强,犬、猫、羊等都可被感染。

可通过擦伤皮肤、直接接触和吸入本菌而感染。

人类感染较少见,但经常与病畜接触的人也可患鼻疽病。

实验室感染也可发生。

产碱假单胞菌【临床意义】为条件致病菌,可引起脓胸、眼部感染、脓肿等恶臭假单胞菌恶臭假单胞菌(P.Putida)为鱼类的一种病原菌,常可从腐败的鱼类中检出,偶尔可从尿路感染患者的尿中及血库存血中分离出来。

非发酵菌非发酵菌(Nonfermenters)大多是条件致病菌。

包括十几个菌属的数十个种别,如假单胞菌属、不动杆菌属、黄杆菌属、产碱杆菌属、莫拉氏菌属等。

由于非发酵菌有很多菌属,每个菌属又有多个种,因此对其必须先进行初步分群,即先进行科、属的鉴别,然后再进行种间鉴别。

腐败假单胞菌腐败假单胞菌(P.Putrefaciens)为腐物寄生菌,分布非常广泛,河水、污水、土壤、牛奶、鸡蛋等均有存在。

可引起奶油、鱼、肉变质并产生H2S。

【临床意义】本菌为条件致病菌。

可引起人类中耳炎、创伤后溃疡、败血症、呼吸道感染,以及糖尿病或体弱患者的皮肤化脓性溃疡。

假单胞菌属假单胞菌属(Rseudomonas)分布很广,水、污水、土壤和空气中均存在。

本属有几十个菌种,临床较常见的有十种左右。

代谢菌种为铜绿色假单胞菌。

人类感染的非发酵菌,假单胞菌占70%~80%。

主要是铜绿色假单胞菌(占55%~65%)。

类鼻疽假单胞菌类鼻疽假单胞菌(P.Pseudomallei)可引起类疽病。

【临床意义】为条件致病菌。

人类接触污染的污水、土壤或通过直接接触(划破皮肤或擦伤)而进入人体,也可从呼吸道、消化道进入人体而感染。

但罕见人与人之间相互传染。

本菌可潜伏体内几年不发病,在多发地区这种隐性感染是很高的。

败血性类鼻疽病如不及时治疗进展迅速,且死亡率很高。

类产碱假单胞菌类产碱假单胞菌(P.Pseudoalcaligenes)与产碱假单胞菌很相似,属于假单胞菌中的产碱群。

【临床意义】可引起肺炎、术后膝关节感染、脑膜炎和败血症。

嗜麦芽假单胞菌嗜麦芽假单胞菌(P.Maltophilia)在自然界分布很广,自来水、河水、污水、牛奶和冻鱼中均可存在,在正常人的咽喉、痰和粪便中可检出。

【临床意义】本菌为条件致病菌,可引起大叶性肺炎、支气管肺炎、吸入性肺炎、心内膜炎、结膜炎、脑膜炎、伤口感染和败血症等。

斯氏假单胞菌斯氏假单胞菌(P.Stutzeri)在水中及土壤中到处可见,在粪便、肥料、人类的呼吸道、泌尿道均可发现。

【临床意义】本菌为条件致病菌。

可引起呼吸道感染、中耳炎、关节炎、尿路感染及败血症。

铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌(P.Aeruginosa)原称绿脓杆菌。

在自然界分布广泛,为土壤中存在的最常见的细菌之一。

各种水、空气、正常人的皮肤、呼吸道和肠道等都有本菌存在。

本菌存在的重要条件是潮湿的环境。

【临床意义】本菌为条件致病菌,是医院内感染的主要病原菌之一。

患代谢性疾病、血液病和恶性肿瘤的患者,以及术后或某些治疗后的患者易感染本菌。

经常引起术后伤口感染,也可引起褥疮、脓肿、化脓性中耳炎等。

本菌引起的感染病灶可导致血行散播,而发生菌血症和败血症。

烧伤后感染了铜绿色假单胞菌可造成死亡。

洋葱假单胞菌洋萄假单胞菌(P.Cepacia)存在于土壤中,因引起洋葱茎腐烂而得名。

【临床意义】在医院环境中常污染自来水、体温表、输液系统。

医院环境及被污染的器械常导致体弱患者感染本菌,常可引起肺炎、心内膜炎、伤口感染、败血症、脓肿和尿道感染等。

荧光假单胞菌荧光假单胞菌(P.Fluorescens)是一种环境污染菌。

对于人类是一种罕见的机会致病菌。

【临床意义】可从伤口、痰、胸水、尿和血液中分离出来,也可从血库存在中分离出。

可在冰箱储存的血液及血液制品中繁殖,而且自溶后释放内毒素。

其内毒素的磷指部分,可导致输血后不可逆的休克。

革兰氏阳性球菌产黑色素类杆菌产黑色素类杆菌(B.melaninogenicus)是人类口腔、大肠、阴道的正常菌群。

【临床意义】本菌很少单独引起感染,常与其它厌氧菌、需氧菌混合感染,而且常是主要致病菌。

在菌血症、胸腔感染和女性生殖系统感染的患者标本中可检出本菌。

肠球菌肠球菌(Enterococcus)是指一组主要存在于人类和动物肠道具有共同生化特征的革兰氏阳性菌。

长期以来,肠球菌归属于链球菌属Lancefield血清分型D群。

近年来,随着核酸杂交等技术的应用,证实肠球菌不同于其它链球菌,应属于一个新的肠球菌属(genus Enterococcus)。

伯杰氏细菌分类学手册9版2卷(Bergey´s Manual of Systemati Bacteriology Vo12.1986),将其与链球菌分开,新设肠球菌属。

【临床意义】肠球菌是人类肠道中的正常菌群,但当进入血液或其他部位,可引起败血症,尿路感染、心内膜炎、脑膜炎和伤口感染等。

脆弱类杆菌群脆弱类杆菌群(Bacteroides Fragilis Group)有5个种:脆弱类杆菌(B.fragilis group)、吉氏类杆菌(B.distasonis)、普通类杆菌(B.vulgatus)、多形类杆菌(B.thetaiotaomicron)、卵圆类杆菌(B.ovatus)。

【临床意义】厌氧菌感染可遍及人体各个部位,在临床感染病例的标本中以脆弱类杆菌分离率最高,在厌氧菌菌血症病例中,本菌的分离率高达50%~90%,阑尾炎病例中占25%~90%,在肺和胸膜感染中占26%,还可引起颅内感染、阴道及盆腔感染等。

肺炎链球菌肺炎链球菌属于链球菌科(Steptoccaceae)链球菌属(Steptococcus),称肺炎链球菌(S.Pneumoniae),旧称肺炎双球菌(Diplococcus pneumoniae)或称肺炎球菌(Pneumococcus)。

【临床意义】肺炎链球菌主要寄居于人类上呼吸道,作为正常菌群存在。

大部分菌株不致病或致病力很弱,部分菌株有致病力,当机体抵抗力下降时才能引起疾病。

主要致病因素是细菌荚膜的侵袭作用。

可引起大叶性肺炎和支气管肺炎,成人脑炎75%是由1、2、3、4、5、7、8、12、14和19等10型引起的。

其中半数以上是1、2、3型所致。

3型肺炎链球菌能产生大量荚膜,毒力强,死亡率较高。

儿童肺炎多为1、6、14和19型引起,其中最常见是是14型。

肺炎后可继发胸膜炎、脓胸、也可引起中耳炎、乳突炎、副鼻窦炎、脑膜炎以及败血症。

革兰氏阴性无芽胞厌氧杆菌革兰氏阴性无芽胞厌氧杆菌(Anaerobic nonsporeforming Gram-negative bacilli)包括类杆菌属(Bacteroides)、梭杆菌属(Fusobacterium)和细毛菌属(Leptotrichia),是人和动物体内的寄生菌。

主要寄生在口腔、上呼吸道、肠道、泌尿道中,对人类致病的类杆菌属中有10个种,梭杆菌属有4个种。

核梭杆菌核梭杆菌(F.nucleatum)是人口咽部和牙龈沟内的寄生菌。

【临床意义】可引起各种软组织感染,口腔及上呼吸道感染。

能凝集人和动物的红血球。

坏死梭杆菌坏死梭杆菌(F.necrophorum)是人和动物的病原菌,亦是上呼吸道和小肠的正常菌群。

【临床意义】本菌是人体厌氧菌感染的病原菌之一,可引起上呼吸道和肠道感染,常可从肝脓肿,肠道肿瘤、副鼻窦炎和术后感染病灶及血液中分离出来。

还可引起牛、羊化脓性感染。

口腔类杆菌口腔类杆菌(B.oralis)是人类口腔正常菌群。

【临床意义】可引起口腔、上呼吸道及女性生殖道感染。

类杆菌属 Bacteroides类杆菌属(Bacteroides)是寄生在人的口腔、上呼吸道、肠道及泌尿生殖道的正常菌群。

链球菌链球菌(Streptoccus)是一类呈链状排列的革兰氏阳性菌。

在自然界分布很广,水、空气、尘埃人及动物健康人的鼻咽部、肠道均可检出。

链球菌种类很多,其中有的致病、有的则是腐物寄生菌。

【临床意义】链球菌引起的疾病极为常见,多由A群链球菌(化脓性链球菌)所致。

致病力最强,可产生多种毒素和毒性酶。

其病理表现可因病原菌的种类,入侵途径和机体反应状态的不同而异。

经皮肤侵入常可引起峰窝组织炎、淋巴结炎、淋巴管炎、丹毒等。

当机体虚弱时,细菌易侵入血流引起败血症。

经呼吸道感染可引起扁桃体炎、咽喉炎、进而扩展为中耳炎、乳突炎以致脑膜炎。

产生红疹毒素的化脓性链球菌,可引起猩红热。

B群链球菌(无乳链球菌)为新生儿败血症和脑膜炎的主要病原菌,而且感染率还在不断增加。

也可引起成人尿路感染、偶致败血症、妇女泌尿生殖道此菌带菌率高达18%~25%,是新生儿感染该菌的主要传染源。

草绿色链球菌或自正常人咽部检出,一般不致病。

此类链球菌可在拔牙或切除扁桃体时,细菌侵入血流,如心脏有病变,细菌停留于损伤部位并开始增殖而引起亚急性细菌性心内膜炎。

也可引起菌血症、脑膜炎及泌尿生殖道感染。

D群链球菌是人、动物肠道中的常居菌,当侵入组织、血流、脑膜、泌尿疲乏可引起疾病。

多引起心内膜炎、伤口感染、胆囊炎、泌尿系感染。

F、H、K、O群链球菌可在人的呼吸道发现。

M群不溶血株可从齿龈粘膜上检出。

R群链球菌或以引起脑膜炎和败血症。

厌氧链球菌、微嗜氧链球菌,常可从子宫标本、盆腔脓肿、深部脓肿、鼻窦、阑尾脓液和血液中检出。

这类细菌在普通培养中多被忽略,需用厌氧方法才能检出。

葡萄球菌葡萄球菌(Staphylococcus)是一种革兰氏阳性球菌,在自然界分布很广,因其排列呈葡萄状故称为葡萄球菌。

【临床意义】金黄色葡萄球菌可产生多种毒素如酶,如溶血素、杀白细胞素、肠毒素、皮肤坏死毒素、凝固酶、溶纤维蛋白酶、透明质酸酶等;这些物质与致病有关,可引起化脓性感染。

除引起毛囊炎、疖肿、蜂窝组织炎等化脓性感染外,还可引起肺炎、骨髓炎、心包炎、肾盂肾炎等多种化脓性疾病。

重症者可发展为败血症,脓毒症和化脓性脑膜炎。

某些葡萄球菌产生剥脱性毒素对新生儿和免疫功能低下的成人可引起剥脱性皮炎。

也是引起细菌性食物中毒的重要致病菌。

以表皮葡萄球菌为主的凝固酶阴性的葡萄球菌,一直被认为是皮肤、粘膜上的正常菌群。

近年来越来越多的文献表明,这些细菌已是医院感染的重要病原菌,而且对多种抗生素耐药。

主要在外科操作或实施插管时发生感染,也可以是血源性感染。

所以,仅以凝固酶试验作为判定判定葡萄球菌致病性的唯一标准,是不恰当的。

可引起中耳炎、脓肿、亚心炎等。

气球菌属气球菌属为革兰氏阳性球菌,呈四个或成对排列,曾称为龙虾四联菌,广布自然界。

无D抗原可与肠球菌鉴别.【临床意义】有时可从尿路感染及心内膜炎的病人血液中分离出来与从龙虾和肉中分离的龙虾加夫基氏菌相似。

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