一起由侵袭性大肠埃希菌引起的食物中毒
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一起由侵袭性大肠埃希菌引起的食物中毒
2007年8月17日某单位食堂发生一起食物中毒事件,午饭后出现集体食物中毒症状。其中5例病重病人送医院住院治疗,取5例肛拭子培养进行微生物检查鉴定,现将结果报道如下。
1 材料和方法
用法国梅里埃鉴定系统和APl20E细菌生化试剂鉴定条。大肠埃希菌O、K 多价血清以及志贺氏多价凝集血清采用宁波天润公司产品,实验方法参照GB/74789-2003,GBl7012-1997,GBl5984-1996,WT/S9-1996m中的有关规定和依据进行。
2 临床资料
5例病人均为男性,年龄30~40岁。就餐4小时后出现头痛、头晕、恶心、呕吐、腹泻等症状,腹泻物为水样便。入院后取5例病人肛拭子进行微生物学检查。
3 结果
3.1 微生物学检验:取5例病人肛拭子上的标本分别接种在1%营养肉汤、EC肉汤、GN增菌液、7.5%NaCI肉汤、碱性蛋白胨水、氯化钠结晶紫增菌液增菌,37℃温箱培养6h,碱性蛋白胨水未见混浊,表面也无菌膜形成,涂片未找到弧菌,排除弧菌。将出现浑浊的培养管用接种环接种SS平板,放37℃温箱中培养,18~24h,培养后在各选择性子板上观察可疑菌落。在SS平板上可见不发酵乳糖,不产生H2S。菌落半透明,边缘整齐,凸起,中等大小的优势菌,革兰氏染色为革兰氏阴性的杆菌,氧化酶阴性,挑取些菌落接种KIA、普通营养琼脂平板。
3.2 生化反应结果:取普通营养琼脂平板上的上述优势菌落接种APl20E 生化鉴定条,(374±1)℃培养,18~24h,TSI为K/A,发酵葡萄糖、甘露醇等多种糖类,不发酵乳糖。生化编码为5144552,id=99.9%,T=1.0,鉴定结果为大肠埃希菌。具体生化反应见表1。
3.3 血清学试验:为进一步鉴别诊断,采用宁波天润公司的肠道致病性大肠埃希菌诊断血清。用肠道致病性大肠埃希菌0、K多价凝集血清做多次重复试验,结果是O112和K95发生凝集。同时还用志贺菌属血清作凝集试验,发现志贺菌属多价血清凝集,痢疾志贺菌5~8型凝集。根据生化反应及血清学凝集,试验确诊引起5例腹泻病人的病原体为侵袭性大肠埃希菌O112:k66。
4 讨论
侵袭性大肠杆菌(IEC)是一种肠道侵袭性细菌,它侵入肠黏膜上皮细胞,在细胞内繁殖引起细胞变性,使上皮出现损伤,导致黏膜固有层发生炎症、溃疡、出血,临床表现为细菌性痢疾症状,所以当初称之为志贺痢疾样大肠杆菌{ShigelloidE,eoli)。该菌株于1967年被Sakaiaki首先确认。O124血清型曾引起英国学校学生急性腹泻和医院成人腹泻的爆发流行,以后在匈牙利、美国等地也曾引起流行。]984年9月,北京首次发现肠侵袭性大肠杆菌EIEC新的血清型引起食物中毒,填补我国这方面的空白。近年来,我国部分地区偶有报道。西部地区至今未见此类报道。1999年,傅宜方等从市售卤鹅和花生芝麻包中检出EIEC。这次在5例病人肛拭子中均检出EIEC,提示这次由于食人被EIEC污染的食物引起的食物中毒。填补了重庆西部的空白。
肠道致病性大肠埃希菌为5个型,即致病性大肠埃希菌(EPEC)、侵袭性大肠埃希菌(IEC)、产肠毒性大肠埃希菌(ETEC)、肠出血性大肠埃希菌(EHEC)、聚集性大肠埃希菌(ESIEC)。Silva等报道97株EIEC中,30株为非发酵乳糖,41株为迟缓发酵乳糖,26株为发酵乳糖,本组分离出5株EIEC除均不发酵乳糖外,其于99.9%的生化反应符合大肠埃希菌的特征,因此不能仅依靠发酵或不
发酵乳糖来判断EIEC,必须结合进一步的血清学凝集试验来鉴别。
大肠埃希菌抗原主要有O抗原和H抗原,相当部分菌株还存在K抗原。至今EIEC已检出O121、0124、O144、O28ac、O11ac、O29,O143、O152、O164和O173等12个血清型。其中O124血清型与痢疾志贺菌3型、O112ac秘痢疾志贺菌2型、O136与鲍氏志贺菌1型、O164与痢疾志贺菌3型间显示一种ab-ae 型的相互关联,O167与鲍氏志贺菌组的O抗原相关,其余血清型与志贺菌属间未见重要的抗原成交叉,这种抗原交叉现象可用两者密切的遗传同源性来说明。故将本次检出的侵袭性大肠埃希菌O112:K66型与志贺菌诊断血清进行凝集试验,结果与志贺菌属4种多价血清,痢疾志贺菌5~8型多价血清出现凝集现象,由于此菌的生化反应与志贺菌属不完全符合,所以排除志贺菌属的可能。
EIEC具有编码侵袭性基因的大质粒,与志贺菌编码侵袭性基因的大质粒高度同源。因而腹泻病人临床表现上类似痢疾症状。据相关报道和资料显示间,侵袭力的检测已无必要作为EIEC检验的必检项目和鉴定要求了,在新的GB/T4789-2003中已不再将其列入检验项目,故本组中的检验过程中未做侵袭力的检测。本组多人食人被EIEC污染的食物,出现多人集体不同程度的腹泻、呕吐,又从5例人院病人肛拭子中均检测出EIEC。
为减少或避免细菌性食物中毒的发生。只有控制、减少病原菌生长、繁殖的机会。由于7、8月份是高温、潮湿的气候,适于病原菌大量生长繁殖,据有关食物中毒的报道,当条件致病数量>105/g可引起食物中毒。我们认为食品卫生监督部门应加大对饭店的监督管理力度,加强对饭店工作人员进行食品卫生知识的培训,食品在加工过程中要严防生、熟交叉污染;食物要新鲜,隔餐食品要放冰箱内保存,吃前要加热处理才能食用;从业人员要定期进行健康体检,体检合格后才能上岗,把好病从口入关。