免疫组化技术-2013-1
前列腺疾病的免疫组化诊断
前列腺疾病的免疫组化诊断余英豪;李慧明【期刊名称】《临床与实验病理学杂志》【年(卷),期】2014(000)012【总页数】4页(P1329-1332)【关键词】前列腺疾病;病理;诊断;免疫组织化学【作者】余英豪;李慧明【作者单位】南京军区福州总医院病理科，福州 350025;南京军区福州总医院病理科，福州 350025【正文语种】中文【中图分类】R737.25前列腺疾病的诊断在很大程度上依赖穿刺标本的病理学检查，而免疫组化染色在其病理辅助诊断中占有重要地位，病理医师对免疫组化的依赖性很高。
近年来前列腺肿瘤的生物学标志物不断涌现，如何选择合适标志物、合理应用鸡尾酒抗体(双标、三标)以及应用免疫组化检查解决前列腺疾病诊断中的难题，是日常病理工作经常遇到的问题，本文现对这些问题逐一进行讨论。
前列腺疾病诊断中，需选用的免疫组化标志物包括上皮标志物、基底细胞标志物以及在前列腺腺癌中过表达的标志物。
1.1 前列腺上皮标志物前列腺上皮标志物主要有前列腺特异性抗原(prostate specific antigen, PSA)、前列腺特异性膜抗原(prostate specific membraneantigen, PSMA)、前列腺特异性酸性磷酸酶(prostate specific acid phosphatase, PSAP)和P501s(prostein)，这些标志物作用相似，均可表达于前列腺良性和肿瘤性上皮细胞。
PSA虽应用最为广泛，但其在高级别前列腺癌中的反应性不够稳定；PSMA特异性较高，从良性上皮→高级别上皮内瘤变(prostatic intraepith elial neoplasia, PIN)→高级别前列腺癌，阳性细胞逐渐增加，染色也趋于加深；PSAP特异性较低，但能维持前列腺癌放疗后的免疫反应性；P501s是位于高尔基体中的一种跨膜蛋白，对前列腺的特异性很高。
免疫组化染色显示特征性的顶端核周颗粒状染色。
结直肠癌中S100A4的表达及意义
结直肠癌中S100A4的表达及意义任延松;王博;顾页;王倩;林洁【摘要】目的探讨S100A4在结直肠癌组织及细胞系中的表达,并分析其与结直肠癌临床病理特征的相关性.方法采用免疫组化法检测65例结直肠癌及对应癌旁正常结直肠组织中S100A4蛋白的表达;分别采用RT-PCR法和Western blot法检测S100A4 mRNA和蛋白在7个人类结直肠癌细胞系中的表达.结果 RT-PCR及Western blot检测结果显示S100A4在多数结直肠癌细胞中均有表达.免疫组化检测结果显示S100A4阳性表达主要定位于结直肠癌细胞质内,结直肠癌组织中S100A4蛋白阳性率高于癌旁正常结直肠组织(P＜0.0001).S100A4蛋白表达与结直肠癌患者年龄、性别有关,高龄组阳性率高于低龄组(P=0.026),男性组S100A4蛋白阳性率高于女性组(P-0.038),其表达与肿瘤部位、分化程度、淋巴结转移均无相关性(P＞0.05).结论 S100A4在多数结直肠癌细胞中均有表达,在癌组织中的表达高于癌旁组织,S100A4蛋白表达与结直肠癌患者年龄、性别有关,可能为结直肠癌患者的个性化诊断及治疗提供指导.【期刊名称】《临床与实验病理学杂志》【年(卷),期】2016(032)010【总页数】5页(P1084-1088)【关键词】结直肠肿瘤;S100A4;RT-PCR;Western blot;免疫组织化学【作者】任延松;王博;顾页;王倩;林洁【作者单位】南方医科大学基础医学院病理学系/南方医科大学南方医院病理科,广州510515;南方医科大学基础医学院病理学系/南方医科大学南方医院病理科,广州510515;南方医科大学基础医学院病理学系/南方医科大学南方医院病理科,广州510515;南方医科大学基础医学院病理学系/南方医科大学南方医院病理科,广州510515;南方医科大学基础医学院病理学系/南方医科大学南方医院病理科,广州510515【正文语种】中文【中图分类】R735.3结直肠癌是常见的消化系统恶性肿瘤，在国内其发病率和病死率分别居第3位和第5位[1,2]。
RORγt、Foxp3 在子宫内膜异位症组织中的表达及意义
RORγt、Foxp3 在子宫内膜异位症组织中的表达及意义吴晶晶;陈雄;黄娟;梁小妍;席晓薇【摘要】目的探讨卵巢子宫内膜异位囊肿组织中RORγt、Foxp3的表达规律,分析Th17、Treg细胞与子宫内膜异位症的关系. 方法选取病理学检查确诊的卵巢子宫内膜异位囊肿患者40例和单纯因子宫肌瘤而行子宫切除手术患者38例,选取囊肿的囊壁组织和正常在位子宫内膜组织0.5 cm ×0.5 cm,常规石蜡包埋备用,采用免疫组织化学技术检测卵巢子宫内膜异位囊肿组织及正常子宫内膜组织中RORγt、Foxp3蛋白表达. 结果RORγt、Foxp3蛋白在卵巢子宫内膜异位症病灶组织中的表达均显著高于正常子宫内膜组织(P均<0.05);RORγt、Foxp3蛋白在卵巢子宫内膜异位病灶组织与正常子宫内膜组织中表达均有关联(r分别为0.746和0.545,P均<0.05). 结论组织局部微环境中Th17/Treg比例失衡可能是导致子宫内膜异位症产生的原因之一.【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2015(055)041【总页数】2页(P77-78)【关键词】子宫内膜异位症;孤独核受体;叉头状转录因子;辅助性T细胞17;调节性T细胞【作者】吴晶晶;陈雄;黄娟;梁小妍;席晓薇【作者单位】上海交通大学附属第一人民医院,上海200080;上海交通大学附属第一人民医院宝山分院;上海交通大学附属第一人民医院宝山分院;上海交通大学附属第一人民医院宝山分院;上海交通大学附属第一人民医院宝山分院;上海交通大学附属第一人民医院,上海200080【正文语种】中文【中图分类】R711.71通信作者：席晓薇子宫内膜异位症(EMs)具有类似恶性肿瘤的一些特性，如具有侵袭、局部或远处转移、浸润并损伤其他组织的能力[1]，其发生可能与免疫异常有着密切关系[2]。
辅助性T细胞17(Th17)、调节性T细胞(Treg)被认为是参与EMs发生发展的重要免疫细胞成员[3]，其中孤独核受体(RORγt)为Th17所特有的转录因子[4]，叉头状转录因子(Foxp3)为Treg细胞的特异性核转录因子。
《软组织肿瘤病理诊断免疫组化指标选择专家共识》要点
《软组织肿瘤病理诊断免疫组化指标选择专家共识》要点软组织肿瘤是外科病理学中一类病种最多，也最为复杂的肿瘤。
WHO(2013）软组织肿瘤病理新分类包括12大类。
各类肿瘤又包含很多种疾病类型，并根据生物学行为的不同，分为良性、中间性和恶性。
与其他类型的肿瘤相似，软组织肿瘤的病理诊断也需与临床、病理相结合。
除部分肿瘤可根据临床特点和镜下形态直接做出诊断外，大多数软组织肿瘤需加做免疫组化标记。
1 免疫组化在软组织肿瘤病理诊断中的应用及注意事项免疫组化不仅在软组织肿瘤的诊断和鉴别诊断中起非常重要的作用，而且在指导靶向治疗或预测肿瘤的生物学行为等方面也有广阔的应用前景。
但要强调的是，免疫组化只是一种辅助性手段，有其自身的局限性，并不能代替传统的组织学检查，后者才是病理学诊断的基础。
免疫组化检测必须以病理组织学形态为基础，选择免疫组化检测指标时应注意以下几个问题：⑴熟悉常用抗体的反应谱和适用条件，首选敏感和特异性较高的抗体类型，特别是公认的抗体型号，并合理配伍，力争采用尽可能少的抗体取得最好的检测结果。
⑵免疫组化检测过程需注重质量控制，尽可能做到标准化，使染色切片背景清晰，标记定位准确。
⑶推荐设置阳性对照，尤其是一些与靶向治疗密切相关的标志物，如CD117等，以确保免疫组化标记结果的可信性。
⑷对标记结果要注意辩证分析，因有相当一部分抗体在一些不同类型的肿瘤之间存在交叉反应或有异常表达，如S-100蛋白在滑膜肉瘤中的阳性率也可高达38％，因此不能仅根据S-100蛋白标记阳性简单地将梭形细胞肉瘤诊断为恶性周围神经鞘膜瘤。
CD31不仅表达于血管肉瘤，也可表达于组织细胞肿瘤。
另外，HMB45是恶性黑色素瘤、软组织透明细胞肉瘤和血管周上皮样细胞分化的肿瘤（PE-Coma）的标志物，但最近有文献报道部分子宫平滑肌肉瘤和子宫内膜间质肉瘤也可表达HMB-45。
⑸软组织肿瘤中存在一些异常表达的情况，如标记上皮细胞的角蛋白，也可在假肉瘤样肌纤维母细胞性增生、胚胎性或腺泡状横纹肌肉瘤和骨外尤因肉瘤等一些不具有上皮样分化的软组织肿瘤中表达。
影响免疫组织化学染色质量的因素分析
影响免疫组织化学染色质量的因素分析摘要：目的探究影响免疫组织化学染色质量的因素并进行分析。
方法从不同的方面对影响免疫组化学的染色质量的因素进行分析，分别包括组织固定、切片、烤片、抗原修复和免疫组化染色等五个方面，该研究主要对不同的固定剂对染色质量的对比进行详尽的分析，对其他的四个方面进行简明的比较和分析。
结果Bouin液对SS和GAS的抗原性的保存较好，结果显示Bouin液保存的阳性细胞的平均数明显高于10%甲醛保存的阳性细胞数，两组比较有显著的差异，比较具有统计学的意义（P<0.05）；选择合格免疫组化试剂和染色方法，并设立实验对照样，采取严格实验操作，对该方法至关重要。
结论选择合格和恰当的免疫组化试剂和合适的染色方法，并设立实验对照样，采取严格实验操作，才会得到合格的免疫组化的染色结果，才能是该方法更加可靠和精确。
关键词：免疫组织化；染色质量；因素分析免疫组织花化学简称为免疫组化，是一种常用作的病理诊断的主要辅助手段，该技术是一种染色技术，受到越来越多的病理学的工作者的欢迎[1]。
近年来，伴随着越来越多的新技术和新抗体的被发明，免疫组织化学的技术在病床病理的诊断中的应用更加的广泛，得到了很大程度上的推广。
该方法为肿瘤性质的判断、临床病理的诊断以及预后的检测等都提供了非常重要的根据[2]。
但是该方法还存在一些不稳定的因素，这些不稳定因素使得免疫组化的质量浮动比较大，是免疫组化工作者面临的主要问题。
如何在实际的工作中消除和避免这些因素对免疫组化产生影响，已经成为了众多的工作者亟待解决的问题，该研究对免疫组化中对染色质量有影响的因素进行了分析并进行报道。
1 不同的组织固定对免疫组化染色效果的影响组织的固定是对免疫组化染色质量影响最为显著的因素。
为了使得离体的组织的抗原性得到较好的保存，一般要求将离体的组织在15min之内将其固定好。
1.1方法样本选取大鼠的胃窦组织，固定液分别选取Bouin液和10%的甲醛溶液，用图像分析技术和免疫组化方法对大鼠的胃黏膜的胃泌素和生长抑制素的表达进行检测，并对结果进行分析对比。
乳腺癌her2基因检测金标准
乳腺癌her2基因检测金标准
乳腺癌HER2基因检测的金标准是通过免疫组化（IHC）和原位杂
交（ISH）技术对HER2基因进行检测。
目前，国际上广泛使用的HER2检测指南是由美国凯投格兰癌症
中心（CAP）和美国临床肿瘤学会（ASCO）于2013年联合发布的指南，该指南包括以下评估准则：
1. 免疫组化（IHC）：通过对HER2蛋白表达程度的评估来判断HER2基因状态。
IHC分为4个级别：
- 0级：无HER2蛋白表达；
- 1级：极低水平的HER2蛋白表达；
- 2级：中度水平的HER2蛋白表达；
- 3级：高水平的HER2蛋白表达。
2. 原位杂交（ISH）：通过对HER2基因扩增状态的评估来判断HER2基因状态。
ISH主要有两种方法：
- 荧光原位杂交（FISH）：利用荧光标记的DNA探针检测HER2基
因扩增。
- 链式原位杂交（CISH）：利用酶标标记的DNA探针检测HER2基
因扩增。
一般情况下，IHC 3+或者ISH阳性是乳腺癌HER2基因异常的判
断标准。
如果IHC 2+，则需要进行ISH检测来进一步确定HER2基因状态。
需要说明的是，HER2基因检测的金标准可能会因不同的国家或地区而有所差异，因此在具体的临床实践中，可根据当地的指南和准则
来确定HER2基因异常的判断标准。
全自动免疫组化仪在EBER原位杂交中的应用体会
全自动免疫组化仪在EBER原位杂交中的应用体会陈永钦;郑宇辉;杨映红【期刊名称】《临床与实验病理学杂志》【年(卷),期】2015(031)012【总页数】2页(P1428-1429)【关键词】全自动免疫组化仪;原位杂交;EBER【作者】陈永钦;郑宇辉;杨映红【作者单位】福建医科大学附属协和医院病理科,福州350001;福建医科大学附属协和医院病理科,福州350001;福建医科大学附属协和医院病理科,福州350001【正文语种】中文【中图分类】R-331临床上普遍采用免疫组化法来检测EB病毒，但免疫组化检测操作步骤繁琐，易受环境及人为因素的影响且结果不稳定等。
随着科学技术的发展，各大中型医院病理科的仪器设备自动化程度越来越高，并且伴随医院规模的扩大，病理工作量不断增长，传统的手工操作已经逐步被全自动化仪器取代。
目前全自动免疫组化仪主要应用于常规免疫组化工作，而原位杂交方面的应用尚未普及。
福建医科大学附属协和医院病理科自2013年引进BenchMark全自动免疫组化仪，并进行EBER原位杂交检测，工作中取得了良好的效果，现将应用体会介绍如下。
1.1 仪器与设备 BenchMark ULTRA全自动免疫组化仪(美国Ventana公司)。
1.2 试剂 Ventana公司的EZ(脱蜡清洗缓冲液)、LCS(封盖清洗缓冲液)、ReactionBuffer(清洗缓冲液)、CC2(细胞前处理清洗缓冲液)、ISH-Protease3(清洗用蛋白酶)、INFORM EBER Probe(探针)、iVIEW Blue Detection(蓝染试剂)、ISH Red Counterstain(复染试剂)。
1.3 方法首先编辑程序并保存:Deparaffinization(脱蜡)→CellConditioning(Mild)(细胞前处理)→Ventana Protease(ISH-Protease3，Incubation Time:20 min)(蛋白酶)→Inform EBER(EBER探针)→Counterstain(Red StainⅡ，Incubation Time:4 min)(红染)。
全自动免疫组化仪免疫组化方案
BenchMark XT IHC/ISH Staining 精品文 个人人认证 机构合作 Module
文VIP个人人中心心医科大学第一附属医院免疫组化方案
troy410 上传于 2015-12-14
Protocol No
1
|
计划/解决方案
Ventana Medical Systems, Inc., 1910 Innovation Park Drive Tucson, Arizona USA 解决方案
Protocol Name
| |
Creation Date
11/01/2011
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Paraffin [Selected] Deparaffinization [Selected] Cell Conditioning [Selected] Conditioner #1 [Selected] Mild CC1 [Selected] Standard CC1 [Selected] Ab Incubation Temperatures [Selected] 37 C Ab Inc. [Selected] Antibody [Selected] Apply One Drop of [HER-2/neu (4B5)] ( Antibody ), and Incubate for [0 Hr 32 Min] Counterstain [Selected] Apply One Drop of [HEMATOXYLIN II] ( Counterstain ), Apply Coverslip, and Incubate for [4 Minutes] Post Counterstain [Selected] Apply One Drop of [BLUING REAGENT] ( Post Counterstain ), Apply Coverslip, and Incubate for [4 Minutes] 2 hbnk 07/28/2012
免疫组织化学抗体试剂及检测试剂盒注册申报资料的基本要求
免疫组织化学抗体试剂及检测试剂盒注册申报资料的基本要求2013-01-04 01:48免疫组织化学抗体试剂及检测试剂是指一类利用免疫学原理结合酶催化底物显色的化学方法，检测组织标本中抗原的检测试剂。
此类试剂为待测抗原特异性单克隆或多克隆抗体，或抗体与显色系统、对照试剂、质控片及其它辅助试剂一同包装成试剂盒形式的检测试剂盒。
该类产品检测项目繁多，应用广泛，检测过程为多步骤检测，影响因素多，在临床上主要用于检测细胞的特异性抗原以确定细胞的表型。
该类产品的预期用途与诊断、鉴别诊断、预后判断、指导用药相关，按照三类体外诊断试剂管理。
基于该类产品临床应用的重要性及特殊性，根据目前注册申报工作的需要、依据《体外诊断试剂注册管理办法（试行）》、《体外诊断试剂临床研究技术指导原则》以及《体外诊断试剂说明书编写指导原则》的相关规定，结合临床及病理检测中的应用实践、临床病理专家和生产企业的建议，现对免疫组织化学抗体试剂及检测试剂盒注册申报资料提出以下基本要求（对于本要求未提及的部分，申请人均应依据相关法规要求提交注册申报资料）。
本《要求》是在目前科学技术认识水平及现阶段免疫组化类产品技术审评基础上形成的，审评人员会密切关注相关技术的最新进展，随着认识的提高将适时调整。
由于该类产品种类繁多，《基本要求》不能涵盖所有该类产品的特殊情况，如某些要求不适用，申请人也可采用其他方式证明产品的技术性能，建议申请人对此进行详细说明，并提交相应的性能验证资料。
依据免疫组化不同标志物的临床应用情况，将其分为二个大类：A类：Her2/Neu、ER、PR、ALK、CD117、c-met、CD20、EGFR等与临床治疗、用药密切相关的标志物；其他全新标记物，具有新的临床意义。
B类：临床使用多个指标综合诊治的标志物之一，与辅助诊断、鉴别诊断、病情监测、预后相关标志物：如：Ki67、CK5/6等。
一、产品说明书1. 【产品名称】：单独的第一抗体试剂通用名称建议采取以下命名方式：待测抗原特异性抗体+试剂（免疫组织化学法）。
FAP-1在肝细胞肝癌中的表达及临床意义
FAP-1在肝细胞肝癌中的表达及临床意义黄治国;黄拼搏;何传超;肖治宇【摘要】目的探讨Fas相关磷酸酯酶-1(Fas-associated phosphatase 1,FAP-1) 在肝细胞肝癌(HCC)中的表达水平及其与临床意义.方法应用免疫组化SP技术,检测66例肝细胞肝癌组织中FAP-1的表达水平,分析其与肝细胞肝癌临床病理特征之间的关系.结果66例肝细胞肝癌组织中FAP-1的表达水平与HCC的TNM分期、肿瘤数目及肿瘤复发具有相关性(P＜0.05).生存分析显示,FAP-1低表达组患者生存期明显优于FAP-1高表达组.多因素回归性分析显示FAP-1表达水平、脉管侵犯、肿瘤大小和TNM分期是影响肝细胞肝癌患者预后的独立危险因素.结论 FAP-1在肝细胞肝癌细胞中表达影响肝癌细胞的病理变化进而影响肝癌患者预后.【期刊名称】《岭南现代临床外科》【年(卷),期】2013(013)002【总页数】4页(P91-94)【关键词】FAP-1;肝细胞肝癌;预后【作者】黄治国;黄拼搏;何传超;肖治宇【作者单位】510120,广州,中山大学孙逸仙纪念医院肝胆胰外科【正文语种】中文【中图分类】R735.7虽然目前肝细胞肝癌（hepatocelluar carcinoma，HCC）的诊断及治疗水平有了明显的提高，但是肝癌的发病率和死亡率仍然是医学领域面临的一个重大问题［1］。
肝癌目前在消化系统恶性肿瘤发病率中排名第五、死亡率排名第三［2］，对其进行深入的探索和研究具有重要的临床意义。
Fas相关磷酸酯酶－1（Fas-associated phosphatase 1，FAP-1），一种酪氨酸激酶，可以阻滞Fas受体介导的凋亡。
通过与Fas受体的功能域结合，FAP-1可以阻滞Fas通路的激活［3］。
FAP-1对Fas介导凋亡通路的阻滞潜能及两者的相关性在很多肿瘤细胞系中得到了证实，包括结肠癌、胰腺癌以及血液系统肿瘤［4－7］，但是FAP-1与肝癌的相关性目前还不明确。
VEGF和MMP-9检测对非小细胞肺癌患者疗效和预后评估的价值
VEGF和MMP-9检测对非小细胞肺癌患者疗效和预后评估的价值梁乃超【期刊名称】《检验医学与临床》【年(卷),期】2016(013)017【摘要】目的：探讨非小细胞肺癌患者血管内皮生长因子（VEGF）和基质金属蛋白酶（MMP）‐9检测对其疗效和预后评估的价值。
方法将2013年1月至2015年2月该院收治的非小细胞肺癌患者77例，肺部良性病变患者77例纳入该研究。
采用S P免疫组化技术和实时荧光定量PCR对上述患者的肺癌组织、癌旁正常肺组织或肺良性病变组织进行VEGF和MMP‐9的检测。
对VEGF、MMP‐9的表达水平、阳性率与病变转移等指标进行观察比较。
结果MMP‐9主要表达在细胞质中，非小细胞肺癌组织的M M P‐9蛋白阳性率为70．13％，癌旁正常肺组织的阳性率为22．08％，肺部良性病变组织的阳性率为5．19％。
V EG F在非小细胞肺癌组织中的阳性率为72．73％，癌旁正常肺组织的阳性率为38．96％，肺部良性病变组织的阳性率为22．08％。
V EG F、MMP‐9在非小细胞肺癌组织中的表达水平显著高于癌旁正常肺组织、肺部良性病变组织中的表达水平（P＜0．05）。
VEGF、MMP‐9与肿瘤组织的转移、分期、分化，具有相关性（P＜0．05）。
结论MMP‐9、VEGF都参与了非小细胞癌发生、发展过程， MMP2、VEGF在其中可能起到协同促进作用，MMP‐9、VEGF联合分析可能更有助于小细胞肺癌患者预后的评估。
【总页数】3页(P2529-2530,2531)【作者】梁乃超【作者单位】河北省承德市丰宁满族自治县医院外一科 068350【正文语种】中文【相关文献】1.CEA、CYFRA21-1和CA125联合检测对非小细胞肺癌患者预后水平的评估价值[J], 王秋波;施雪峰;李巍;惠超2.VEGF、MMP-9、PPAR-γ与临床生化指标联合\r检测对DN预后的评估价值[J], 时美红;王菲3.血清CA125、Cyfra21-1和VEGF水平在非小细胞肺癌患者放化疗敏感性和预后评估中的应用价值 [J], 杨颖;夏曙;何肇晴;汪锐;陈丹4.贝伐珠单抗综合治疗Ⅲ期非小细胞肺癌患者的疗效及其对VEGF、MMP-9及COX-2表达的影响 [J], 王磊;魏南5.血清miRNA-1296联合表皮生长因子受体检测对非小细胞肺癌患者预后评估价值的分析 [J], 兰超;曹雷;刘娜因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
缺氧在小鼠肺间质肌成纤维细胞化过程中的作用及黄芩苷的保护机制
DOI：10.13558/ki.issn1672-3686.2021.005.003基金项目：台州市科学技术局（1701KY52）作者单位：318050浙江台州，浙江省台州医院、台州恩泽医疗中心（集团）恩泽医院呼吸与危重症学科（颜双泉、黄晶、林玲、吕冬青），儿科（陈璐）；温州医科大学附属第一医院呼吸与危重症学科（陈马云）·论著·缺氧在小鼠肺间质肌成纤维细胞化过程中的作用及黄芩苷的保护机制颜双泉陈璐黄晶林玲陈马云吕冬青[摘要]目的研究缺氧在小鼠肺间质肌成纤维细胞化进程中的作用及可能机制，同时评价黄芩苷的保护作用。
方法选择6周龄清洁级别小鼠共30只，随机分成三组，分别为常氧组、低氧组、低氧+黄芩苷组。
低氧组和低氧+黄芩苷组每天均需进入11%氧浓度低氧氧舱8h，每周入舱6d。
4周后取小鼠肺组织，通过免疫组化技术分析三组小鼠肺间质胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ及α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达的差异，通过Western blot技术检测肺组织中α-SMA表达差异。
结果三组间小鼠肺间质胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ、α-SMA以及肺组织α-SMA的表达量比较，差异均有统计学意义（F分别=75.04、15.10、29.71、264.48，P均＜0.05）。
低氧组小鼠肺间质胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ、α-SMA以及肺组织α-SMA表达量均明显高于常氧组（t分别=11.74、4.69、7.67、22.04，P均＜0.05），低氧+黄芩苷组干预后小鼠肺间质胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ、α-SMA以及肺组织α-SMA的表达量均明显低于低氧组，差异均有统计学意义（t分别=5.12、3.02、4.51、13.40，P均＜0.05）。
结论缺氧导致肺间质肌成纤维细胞化进程相关的胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ、α-SMA指标明显上调，提示缺氧参与这一进程。
黄芩苷干预后这些指标明显下调，提示具有保护性作用。
[关键词]缺氧；肺间质纤维化；肌成纤维细胞化；黄芩苷The role of hypoxia in myofiroblast transition of lung interstitial and the protective mechanism of baicalin YAN Shuangquan，CHEN Lu，HUANG Jing，et al.Department of Respiratory and Critical Care，Taizhou Hospital of Zhejiang Province，Enze Hospital，Taizhou Enze Medical Center（Group），Taizhou318050，China.[Abstract]Objective To study the role and possible mechanism of hypoxia in the process of myofibroblast transdiffer-entiation of lung interstitium in mice and evaluate the protective effect of baicalin.Methods A total of30clean grade mice with6-week-old were randomly divided into three groups，namely the normoxia group，the hypoxia group，and the hypoxia+baicalin group.The hypoxia group and the hypoxia+baicalin group received11%oxygen concentration hypoxic chamber for8hours every day，6days a week.Four weeks later，immunohistochemistry was used to detect the expressions of collagenⅠ，collagenⅢandα-SMA in lung interstitium of mice among three group，and western blot was used to de-tect the difference inα-SMA expression in lung tissues.Results The expression levels of collagenⅠ，collagenⅢ，α-SMA in lung interstitium of mice andα-SMA in lung tissue were significantly different among the three groups（F=75.04，15.10，29.71，264.48，P＜0.05）.The expression levels of collagenⅠ，collagenⅢ，α-SMA in lung interstitium of mice andα-SMA in lung in hypoxic group were significantly higher than those in normoxic group（t=11.74，4.69，7.67，22.04，P＜0.05）.The expression levels of collagenⅠ，collagenⅢ，α-SMA in lung interstitium of mice andα-SMA in lung after baicalin intervention in the hypoxia+baicalin group were significantly lower than those in hypoxia group（t=5.12，3.02，4.51，13.40，P＜0.05）.Conclusion Hypoxia significantly up-regulates the levels of collagenⅠ,collagenⅢ,α-SMArelated to the process of myofibroblasts in the lunginterstitium.But these indexes significantly down-regulate after baicalin intervention，suggesting a pro-tective effect.[Key words]hypoxia；pulmonary interstitial fi-brosis；fibroblast-to-myofiroblast transition；ba-icalin肺间质纤维化是一种严重的、进行性加重的肺部慢性疾病。
步宏《病理学》（第9版）配套题库【考研真题精选＋章节题库】
目 录第一部分 考研真题精选一、A型题二、B型题三、X型题（多项选择题）四、名词解释五、简答题六、论述题第二部分 章节题库第1章 细胞和组织的适应与损伤第2章 损伤的修复第3章 局部血液循环障碍第4章 炎 症第5章 免疫性疾病第6章 肿 瘤第7章 环境和营养性疾病第8章 遗传性疾病和儿童疾病第9章 心血管系统疾病第10章 呼吸系统疾病第11章 消化系统疾病第12章 淋巴造血系统疾病第13章 泌尿系统疾病第14章 生殖系统和乳腺疾病第15章 内分泌系统疾病第16章 神经系统疾病第17章 感染性疾病第18章 疾病的病理学诊断和研究方法第一部分 考研真题精选一、A型题1肾细胞癌最常见的组织学类型是（ ）。
[西医综合2019研]A．透明细胞性肾细胞癌B．嫌色性肾细胞癌C．乳头状肾细胞癌D．未分化性肾细胞癌【答案】A【解析】肾细胞癌的组织学类型分为透明细胞癌（占70%～80%）、乳头状癌（占10%～15%）、嫌色细胞癌（约占5%）、集合管癌（比例不到1%）、未分类肾癌（约3%～5%）。
2下列组织中，不会发生化生的是（ ）。
[西医综合2018研]A．肾盂黏膜上皮B．宫颈柱状上皮C．结缔组织D．神经纤维【答案】D化生是指一种分化成熟的细胞或组织被另一种分化成熟的细胞或组织取替的过程。
【解析】主要发生在上皮组织（鳞状上皮、移行上皮、腺上皮）和间叶组织（结缔组织、脂肪、肌肉、骨、软骨等）。
D项，神经组织不属于上皮组织和间叶组织，故不会发生化生。
3下列淋巴瘤中，预后最好的是（ ）。
[西医综合2016研]A．伯基特淋巴瘤B．弥漫性大B细胞淋巴瘤C．滤泡性淋巴瘤D．霍奇金淋巴瘤结节硬化型【答案】DAB两项，伯基特型淋巴瘤和弥漫大B细胞淋巴瘤属于侵袭性肿瘤，恶性度高，预后【解析】不好。
C项，滤泡型淋巴瘤属于惰性淋巴瘤，预后很好。
D项，霍奇金结节硬化型的EB病毒感染率低，预后较好，相对于滤泡型淋巴瘤的预后更好。
4肉眼观察诊断心脏萎缩的最主要依据是（ ）。
神经元常见标记物及其应用
神经元常见标记物及其应用李雪;李峰【摘要】常见的神经元标记物可分为非特异性和相对特异性两大类,分别有神经元核蛋白、Ⅲ型β-微管蛋白、微管相关蛋白2、Tau蛋白、神经丝、突触相关标记物等;胆碱能、儿茶酚胺能、5-羟色胺能、GABA能神经元标记物等.神经元标记物不仅用于基础研究中神经元的确认鉴定,如神经元的发育、分化研究,在临床中还可用于神经退行性病变、精神病、神经肿瘤等疾病的诊断研究.【期刊名称】《继续医学教育》【年(卷),期】2018(032)005【总页数】3页(P133-135)【关键词】神经元;标记物;应用【作者】李雪;李峰【作者单位】首都医科大学基础医学院神经生物学系,北京100069;首都医科大学基础医学院神经生物学系,北京100069【正文语种】中文【中图分类】R338神经元是构成神经系统结构和功能的基本单位，利用神经元的特异性标记物，研究者能识别其特定基因、蛋白的表达特性，结合细胞形态特征，对神经元的类型、功能及在某些疾病中的异常表现有深入认识。
在此我们对一些常用神经元标记物的特性和应用进行归纳总结以资大家在今后科研中应用。
神经元分为胞体和轴突。
根据轴突末梢释放神经递质的不同，可分为胆碱能神经元、去甲肾上腺素能神经元、多巴胺能神经元、5-羟色胺能神经元和γ-氨基丁酸能神经元等。
神经元标记物可按照神经元结构和功能分为非特异性标记物和相对特异性标记物，利用这些特点可大致区分神经元的类型。
1 神经元非特异性标记1.1 神经元核蛋白（Neuronal nuclear protein，NeuN）NeuN是一种可溶性核蛋白，来源于Fox-1基因家族，转录后mRNA经可变剪接形成四种亚基，翻译后含有374个氨基酸，分子量多为46～48 kD，在体内外均可与成熟神经元DNA结合。
NeuN的表达与神经元分化相关，也是神经元形态的调节因子。
作为中枢及周围神经系统神经元分化的常用标志物之一，NeuN具有以下特点：1）主要存在于神经元中；2）识别分裂后的神经元；3）目前少有位于细胞核的标记物；4）在神经系统病理诊断中，可用来确认分化的神经元肿瘤，如神经细胞瘤、胶质细胞瘤、成神经管细胞瘤[1]。
TNF-α免疫组化说明书
Datasheet
GeneTex, Inc : Toll Free 1-877-GeneTex (1-877-436-3839) Fax:1-949-309-2888 info@ GeneTex International Corporation : Tel:886-3-6208988 Fax:886-3-6208989 infoasia@ Date : 2013/10/25
Catalog Number Product Name Full Name Synonyms
GTX116059 TNF alpha antibody tumor necrosis factor
Package:25 μl,100 μl
DIF antibody, TNF-alpha antibody, TNFA antibody, TNFSF2 antibody, TNF antibody, TNF, monocyte-derived antibody, TNF, macrophage-derived antibody, APC1 protein antibody, cachectin antibody, tumor necrosis factor antibody, tumor necrosis factor-alpha antibody, tumor necrosis factor alpha antibody, TNF-a antibody, tumor necrosis factor ligand superfamily member 2 antibody, TNF superfamily, member 2 antibody Rabbit Polyclonal antibody to TNF alpha (tumor necrosis factor) This gene encodes a multifunctional proinflammatory cytokine that belongs to the tumor necrosis factor (TNF) superfamily. This cytokine is mainly secreted by macrophages. It can bind to, and thus functions through its receptors TNFRSF1A/TNFR1 and TNFRSF1B/TNFBR. This cytokine is involved in the regulation of a wide spectrum of biological processes including cell proliferation, differentiation, apoptosis, lipid metabolism, and coagulation. This cytokine has been implicated in a variety of diseases, including autoimmune diseases, insulin resistance, and cancer. Knockout studies in mice also suggested the neuroprotective function of this cytokine. [provided by RefSeq] Rabbit Polyclonal Synthetic peptide corresponding to a region within amino acids 129 and 222 of TNF alpha (Uniprot ID#P01375) Human Human, Mouse Dog, Cat, Pig, Sheep, Rhesus Monkey, Chimpanzee, Bovine, Guinea pig Dog (93%), Cat (100%), Pig (100%), Sheep (93%), Rhesus Monkey (100%), Chimpanzee (100%), Bovine (93%), Guinea pig (86%) ICC/IF, IHC-P Suggested dilution ICC/IF IHC (Formalin-fixed paraffin-embedded sections) Not tested in other applications. *Optimal dilutions/concentrations should be determined by the researcher. 1:100-1:1000* 1:100-1:1000* Protocol Reference
免疫组织化学方法应用于肺癌病理诊断中的效果
免疫组织化学方法应用于肺癌病理诊断中的效果摘要】应用免疫组织化学方法,观察甲状腺转录因子（NASPINA）；小细胞肺癌标记抗体（TTF-1），神经内分泌标记物（SOX-2）,鳞癌标记抗体（P63）,小细胞肺癌标记抗（SCLC）,神经内分泌标记物抗体（MAP-2）等抗体在肺癌中的表达。
可以发现免疫组织化学方法可以肺癌病理诊断中具有重要的意义。
【关键词】免疫组织化学；肺肿瘤；病理学临床【中图分类号】 R2 【文献标号】 A 【文章编号】 2095-7165(2015)16-0174-01对肺癌的产生原因、发展情况以及病情趋势情况进行正确诊断，是预防和治疗肺癌的主要方式[1]。
目前免疫组织化学方法在准确在临床病理诊断中广泛应用后，在诊断中使用状腺转录因子(NASPINA)；小细胞肺癌标记抗体(TTF-1)，神经内分泌标记物(SOX-2),鳞癌标记抗体(P63),小细胞肺癌标记抗(SCLC),神经内分泌标记物抗体(MAP-2)等抗体在肺癌中的表达，可以有效检测出肺癌的情况。
本文分析免疫组织化学方法应用于肺癌病理诊断中的效果，现分析如下。
1 资料与方法1.1 一般资料按照国际对肺肿瘤情况的进行选取从2012~2015年的医院收治的肺癌患者，其中包括细支气管肺泡癌10例、肺腺癌18例以及大细胞肺癌23例。
为了获得准确的研究结果，从中选择比较典型的60例，然后切除部分癌细胞组织做成蜡块1~3块，接着继续切成6~8张，为接下来的研究做免疫组化染色[2]。
1.2 免疫组化染色抗体选用：甲状腺转录因子(NASPINA)；小细胞肺癌标记抗体(TTF-1)，神经内分泌标记物(SOX-2),鳞癌标记抗体(P63),小细胞肺癌标记抗(SCLC),神经内分泌标记物抗体(MAP-2)等抗体，在进行研究时使用S-P法，每次染色均设置阳性对照，可以对肺癌进行有效诊断，从而探究肺癌的具体情况，帮助医生进行对症治疗，从而可以有效缓解患者的病情，提高患者治愈的几率[3]。
MMP2过表达在子宫内膜腺癌的临床意义
MMP2过表达在子宫内膜腺癌的临床意义李姝君;沈湘;杨志雄;吴爱兵;唐志;黎明春;令映霞【摘要】Objective To explore the expression of MMP2 and its correlation with the clinical features and prognosis of endometrial adenocarcinoma. Methods We collected paraffin- embedded samples from 81 patients with endometrial adenocarcinoma aged 32 to 80 years to examine the expression of MMP2 using immunohistochemistry. The correlation of MMP2 expression with the clinical characteristics and prognosis of the patients was analyzed. Results MMP2 protein was expressed in the cytoplasm of the tumor cells. MMP2 over-expression was negatively correlated with tumor differentiation (P=0.015) and prognosis (P=0.041) of endometrial adenocarcinoma. Conclusion MMP2 over-expression is a potential malignant biomarker in endometrial adenocarcinoma.%目的：探讨MMP2表达与子宫内膜腺癌临床参数和预后之间相关性。
2013年浙江省自然科学基金重点(重大)、杰青项目结题验收报告
/h/01/news_view.aspx?appid=GUD21DFE1633AD36F378F023*******BF6 42013年浙江省自然科学基金重点（重大）、杰青项目结题验收情况总结2013年6月17日-20日，省自然科学基金办对各学科本年度拟结题的重点（重大）和杰青项目（以下简称重点杰青项目）开展了结题验收工作，总体情况如下：一、概况（一）结题验收会安排本次结题验收会共分27个场次，邀请了81位省内同行专家，对153项2012年底和2013年6月拟结题的重点杰青项目进行了集中会议验收。
结题验收会召开前，省自然科学基金办于2013年2月4日发布的《浙江省自然科学基金委员会办公室关于开展2013年度在研项目年度进展报告填报和拟结题项目结题验收工作的通知》中对结题验收会进行了预通知，随后又提前1个月将《验收安排表》（规定了汇报的时间、地点和具体要求等）发送给各有关依托单位管理员，要求各管理员通知到每位项目负责人，且通过科技通短信通知了所有项目负责人并逐一要求回复确认。
（二）项目负责人到场情况在全部153个项目中，除10人因为出国等原因请假，由项目组成员代为汇报外，其他均为项目负责人本人到场汇报。
（三）验收方式本年度重点杰青项目结题验收每场邀请了3位同行专家进行答辩评审，并采用了全新的《浙江省自然科学基金项目结题验收专家意见表》，分别从“研究内容与预期成果指标完成情况”、“学术创新与学科或团队建设贡献”、“项目绩效”、“经费使用情况”（分数所占比例分别为30%、15%、40%、15%）等四个方面，请专家对项目进行客观评价。
二、项目分布本次结题验收的重点杰青项目分布在全部8大学科，其中：数理科学10项，化学科学20项，生命科学38项，地球科学3项，材料与工程科学25项，信息科学23项，管理科学3项，医学科学31项。
详见下图：三、验收结果从总体看，今年结题项目的完成质量较好，仅3个项目未能通过验收，结题通过率为98%，其中专家评分平均分在90分以上的项目有81项，占52.94%。
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❖ 碱性磷酸酶（AP） ▪ alkaline phosphatase（AP） ▪ 溴氯羟吲哚磷酸盐（BCIP）
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过氧化物酶-抗过氧化物酶（PAP）法
P AP PAP复合物
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抗体选择
❖ 第一抗体 ▪ 识别抗原
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非特异性显色
❖主要原因 ▪ 内源性酶 ▪ 内源性生物素 ▪ 抗体特异性不强 ▪ 漂洗不充分 ▪ 基质制作
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非特异性背景显色
❖ 预先处理 ▪ 加底物消耗 ▪ 正常血清封闭
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EnVision
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授课提纲
❖ 基质标本的制作 ❖ 荧光免疫组化技术 ❖ 酶免疫组化技术
Hale Waihona Puke ❖ 相关问题与解决方案精选ppt
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识别抗体（第一）选择
❖ 单克隆抗体（McAb） ▪ 特异性强 ▪ 敏感性差
❖ 多克隆抗体（McAb） ▪ 特异性差 ▪ 敏感性强
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识别（第一）抗体选择
糖基化
构象
碳水化合物
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40
第二抗体选择
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41
选择显色系统
❖ 荧光免疫组化
❖ 酶免疫组化
▪ PAP
？
▪ APAAP
▪ ABC
▪ LAB
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封闭非特异性结合
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43
特异性显色
❖ 具备 ▪ 特定部位显色 • 特定组织、特定细胞、特定结构 ▪ 不均一显色
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固定与保存
❖ 固定剂 ▪ 蛋白类
• 乙醇或甲醇
▪ 微生物类
• 丙酮、三氯化碳 ▪ 多糖类
• 10%福尔马林
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11
抗原修复
❖ 目的： ▪ 充分暴露抗原表位，利于抗体识别。
❖ 方法： ▪ 酶（无花果蛋白酶，胰蛋白酶）消化法；
▪ 盐酸水解 ▪ 微波处理 ▪ 煮沸法
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授课提纲
❖ 基质标本的制作
免疫组织化学染色技术
李会强 医学检验学院
1 Email:lihuiqiang1965@163.co精m选ppt
组织化学染色技术
❖ Histochemistry Technique ❖ 观察对象
▪ 组织、细胞 ❖ 使用工具
▪ 普通显微镜 ▪ 荧光显微镜
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形 态 与 结 构
2
苏木素
曙红
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荧光显微镜（落射式）
❖关键 ▪ 汞灯光源 ▪ 激发滤片 ▪ 暗场聚光镜 ▪ 吸收滤片
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22
荧光显微镜（落射式）
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23
荧光显微镜（落射式）
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授课提纲
❖ 基质标本的制作 ❖ 荧光免疫组化技术
❖ 酶免疫组化技术
❖ 相关问题与解决方案
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25
主要类型
❖ 第二抗体（桥联抗体） ▪ 能同时与第一、第三抗体结合
❖ 第三抗体 ▪ 抗酶抗体 ▪ 与第一抗体同源
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兔PAP
P
PP
A
A 鼠APAAP A
GAR IgG
GAM. IgG
兔抗κ
鼠抗λ
Ag
κ
λ
图 双酶双底物(复合物法)双重酶标染色原理
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实例：淋巴瘤轻链双重染色法
❖ 一抗
▪ 兔抗κ ▪ 鼠抗λ
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18
间接法
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实例：检测抗核抗体
❖ 检测原理 ▪ 已知抗原 • 肝细胞/HEp-2 ▪ 待检抗体 ▪ 第二抗体 • 荧光标记兔抗人Ig
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实例：检测病原体（病毒、细菌）
❖检测原理 ▪ 待检病毒（抗原） ▪ 已知抗体 •单抗或多抗 ▪ 第二抗体 •荧光标记羊抗鼠（或兔）Ig
❖ 荧光免疫组化技术
❖ 酶免疫组化技术 ❖ 相关问题与解决方案
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13
标记物
❖ 荧光素 ▪ 异硫氰酸荧光素（FITC） ▪ 四乙基罗丹明（RB200） ▪ 藻红蛋白（PE） ▪ 藻红蛋白花青苷（PE-Cy5）
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技术类型
❖ 直接染色法 ▪ 荧光素直接标记在特异性抗体（Ab1)
❖ 间接染色法 ▪ 荧光素标记第二抗体（Ab2) ▪ 第二抗体针对第一抗体种属特异性的表 位（如羊抗鼠Ig或羊抗人Ig）
❖ 二抗
▪ 羊抗兔 ▪ 羊抗鼠
❖ 显色系统 ▪ PAP ▪ APAAP
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亲和素-生物素-过氧化物酶复合体（ABC）
❖ 生物素（Biotin） ❖ 亲和素（Avidin） ❖ 生物素标记抗体（B-Ab） ❖ 生物素标记过氧化物酶（B-P）
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亲和素-生物素-过氧化物酶复合体（ABC）
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直接法
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实例：细胞鉴定
❖ 免疫细胞及其亚群（流式细胞术） ▪ T细胞 • CD3+
• CD4+ • CD8+
▪ B细胞 ▪ NK细胞
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免疫细胞分类与计数
Helper T cell
R1
T cell / B cell
Suppressor T cell
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❖ 酶标记抗体
▪ 同荧光免疫组化
❖ 非酶标记抗体
▪ 酶-抗酶系统 ▪ 生物素-链霉亲和素系统
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技术特点
❖以酶作为抗原，制备抗酶抗体； ❖酶（抗原）与抗酶（抗体）结合制备酶-抗
酶复合物； ❖通过桥联抗体与识别系统（待检抗原-特异
性抗体）连接；
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酶桥法
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常用酶和相应底物
❖ 细胞标本 ▪ 体外培养细胞（单层细胞、悬浮细胞） ▪ 体液细胞（涂片）
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9
固定与保存
❖ 固定的目的
▪ 防止细胞自溶，保持细胞形态与机构； ▪ 保存组织细胞抗原性； ▪ 防止标本脱落； ▪ 防止滋生微生物，预防组织腐败 ❖ 标本固定以不损伤细胞形态、不损伤抗原特异性 为基本原则
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特定蛋白（抗原）
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5
（透膜）
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6
授课提纲
❖ 基质标本的制作 ❖ 荧光免疫组化技术 ❖ 酶免疫组化技术 ❖ 相关问题与解决方案
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7
授课提纲
❖ 基质标本的制作
❖ 荧光免疫组化技术 ❖ 酶免疫组化技术 ❖ 相关问题与解决方案
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标本类型
❖ 组织标本 ▪ 冰冻切片 ▪ 石蜡切片
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免疫组织化学染色技术
❖ Immunohistochemistry Technique ▪ 指用标记的特异性抗体在组织细胞原位 通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反 应，对相应抗原（目的蛋白）进行定性、 定位、定量测定的一项免疫检测方法。
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Immunohistochemistry Technique