胡萝卜组织培养论文

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胡萝卜的植物组织培养王晶

胡萝卜的植物组织培养摘要：植物组织培养作为一个生物技术中最核心、最基础的技术。

20世纪50年代末期胡萝卜第一次成功的通过组织培养得到完整的胡萝卜试管植株。

半个世纪后依然很有研究价值。

本文对胡萝卜的组织培养的简史、基本概念、基本操作、应用和前景进行了简单的介绍。

关键词：愈伤组织、细胞全能性、脱分化、再分化、快繁、培养基、分生组织、消毒Key words：callus、cellulartotipotency、dedifferentiation、redifferentiation、rapidpropagation、medium、meristem、sterilization1胡萝卜的生态习性和种类生态习性伞形科(Apiaceae)草本植物；学名为Daucus carota，通常为一年生，根可食胡萝卜为半耐寒性蔬菜，发芽适宜温度为20?25℃，生长适宜温度为昼18-23℃，夜温13-18℃，温度过高、过低均对生长不利。

胡萝卜根系发达若生长前期水分过多，地上部分生长过旺，会影响肉质根膨大生长；若生长后期水分不足，则直根不能充分膨大，致使产量降低。

种类胡萝卜的品种很多，按色泽可分为红、黄、白、紫等数种，我国栽培最多的是红、黄两种。

按形状可分为圆锥形和圆柱形。

2胡萝卜的市场效益分析一种十分重要的蔬菜植物。

由于其营养价值高,及其适于生食、加工、烹调等多种用途,在世界范围内广泛栽培。

中国是农业大国,胡萝卜作为蔬菜作物在人们生活中起着重要的作用。

有治疗夜盲症、保护呼吸道和促进儿童生长等功能。

此外还含较多的钙、磷、铁等矿物质。

生食或熟食均可。

还可腌制、酱渍、制干或作饲料。

经济实惠价格低廉。

3胡萝卜的根部组织培养早在20世纪初，许多科学家将胡萝卜植物细胞和组织作离体培养，为植物组织培养技术的发展奠定了基础。

美国科学家斯蒂瓦特从40年代开始，用悬浮法培养野生胡萝卜的韧皮细胞，通过十多年的艰苦探索，终于培育出根、芽齐全的小植株，首次证实了植物细胞的全能性。

胡萝卜愈伤组织诱导培养实验

云南大学生命科学学院本科教学实验教学中心细胞工程实验实验报告胡萝卜愈伤组织诱导培养实验摘要：以胡萝卜为实验材料，利用直根形成层为外植体诱导出愈伤组织，探讨了不同激素比例对胡萝卜愈伤组织诱导的影响，然后在诱导后的愈伤组织多次继代培养获得生长旺盛的分化组织，接着进行再分化，在胡萝卜培养过程中掌握诱导培养技术还有细胞培养所要求的无菌技术。

关键字：胡萝卜；愈伤组织；继代培养；再分化；组织培养胡萝卜(Daucus carota L)为伞形科两年生草本植物，因其营养丰富、又具药用价值，且耐运输、易栽培、病虫害少和耐贮藏，而成为人们常食蔬菜。

同时又作为生物技术研究的理想材料，因此建立一个高效的、实用的组织培养快速繁殖体系则是研究植物遗传转化的基础。

本文对胡萝卜愈伤组织诱导的最佳培养基进行探讨，研究了激素对胡萝卜愈伤组织诱导的影响，为其高效生产次生代谢产物α-胡萝卜素、β-胡萝卜素以及将来组织培养的工厂化和分子生物学研究打下基础【1】。

1.材料和方法1.1材料来源：胡萝卜根，长10~20cm，直径1cm以上。

1.2方法：1.2.1愈伤组织的诱导培养（1）培养基的配制：MS +2，4-D 2mg/L + KT 0.5mg/L+3%（30g/L）白砂糖+0.95%（9.5g/L）琼脂，pH5.8（2）胡萝卜的选材、修剪和清洗：选择新鲜较粗的萝卜，先用自来水冲洗，再2％洗涤剂浸泡20分钟，清水冲洗（注意材料损伤）（3）对材料进行灭菌：在超净工作台上用75％乙醇30-60s；0.1%升汞8-10分钟; 无菌水冲洗3-5次；（4）无菌修剪：用解剖刀进一步去除两端1cm，将中断切成0.5cm厚的薄圆片，然后再切去外壁2—3mm厚的皮，选取中间的部分移至无菌的部分，用刀通过形成层切成1cm2的小块；（5）接种：无菌操作将处理好的材料接种于培养基上，2-3个材料/瓶（6）培养及观察记录：25 ℃，光照培养，定期观察污染情况，生长状况1.2.2继代培养从培养瓶中取出愈伤组织，置于无菌培养皿内，用解剖刀将愈伤组织坏死部分剔除并将愈伤组织切成黄豆大小颗粒，放在无激素的新鲜培养基表面，用镊子轻轻压实，每个培养瓶接种2~3个切块。

胡萝卜愈伤组织培养论文

胡萝卜愈伤组织的诱导摘要:植物组织培养的基础是利用细胞的全能性即指已经分化了的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能，植物组织培养不仅能使处于分生状态的细胞继续保持分生能力,同时也可以使成熟组织中的细胞恢复分裂能力。

了解胡萝卜的植物组织培养的基本概念、基本原理和操作方法知道分化的植物细胞仍具有形成完整植株所需要的全部基因。

胡萝卜的植物组织培养主要研究不同的植物生长调节剂(2,4-D、6-BA)对胡萝卜脱分化形成愈伤组织速度的影响。

实验表明在母液中加入6-BA(0.5mg/L)+ 2,4-D(1.0mg/L)的不如单独加入2,4-D(2.2 mg/L)形成愈伤组织的速度快,效果好。

关键词：胡萝卜；分化；愈伤组织；诱导一、引言植物组织培养新技术在快繁脱毒、育种、种质资源保存、次生代谢物提取、基因转化等方面有着良好的前景以及研究热点。

在植物育种上的应用：单倍体育种，离体胚培养和体外受精，细胞融合，基因转化，培养细胞突变体、在植物脱毒和快速繁殖上、在人工种子和种质保存方面、在提取植物次生产物生产上、在植物免疫方面的皆能有其应用。

在组织培养过程中，常会遇到一些问题使实验无法进行下去，甚至导致整个实验的失败，给科研和生产造成损失。

如培养过程中的污染，褐变和玻璃化是组织培养中公认的三大难题。

胡萝卜营养价值高,及其适于生食、加工、烹调等多种用途,在世界范围内广泛栽培。

从20世纪初到近几年，胡萝卜一直是科研人员的主要研究对象。

20世纪50年代末Saward等人从胡萝卜根的韧皮部取下一块组织，并将它置于液体培养基中进行培养，使它分化出愈伤组织，然后把从愈伤组织所得到的胚状体转移到固体培养基上继续培养，获得了完整的胡萝卜试管植株。

同一基因型的不同外植体其愈伤组织的发生能力有明显差异，这与不同外植体的分化程度和脱分化能力不同有关。

近年来的研究表明，以胡萝卜下胚轴为外植体出愈率要高于子叶和贮藏根。

培养方法:1、非试管微组织快繁非试管微组织快繁技术是将外植体（一般要求带一叶一芽）放置在室内外普通沙子培养基上进行培养，利用植物腋芽自然倍增达到快速繁殖的目的。

胡萝卜组织培养

这一次组织培养的是胡萝卜纵切面的形成层
·
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实验仪器与材料
What we hope to achieve in the short and long run
胡萝卜(市场购买)、超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、小刀、培养皿、解剖刀、镊子。外植体培养基：MS+1.5mg／L 2，4一D+1．0mg／L KT的固体培养基。 KT分为0.5;1.0;1.5;2.0; 2.5mg/L ph为6左右愈伤组织培养基：MS+0．3mg／L 2．4 一D + 3％蔗糖的液体培养基(pH5．8)中。生芽培养基：MS固体培养基。生根培养基： MS+2mg ／L NAA的固体培养基。
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实验过程
What we hope to achieve in the short and long run
外植体消毒
切出外植体（形成层）
外植体培养
生根培养
生芽培养
愈伤组织培养
愈伤组织获取
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示例
What we hope to achieve in the short and long run
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注意事项
What we hope to achieve in the short and long run
①切取外植体时尽量取胡萝卜的形成层进行接种，形成层相对木质部和韧部较容易诱导出愈伤组织。 ② 实验过程中所需要用到的实验用具以及固体液体培养基都要经过严格的灭菌，防止实验污染导致实验失败。
2015
The autumn
胡萝卜的植物组织培养
For concept, process, principle, result

胡萝卜愈伤组织培养试验及改进

ＢＡ用浓盐酸溶解后加蒸馏水定容。２．３．２诱导培养基配制和灭菌ＭＳ基础培养基＋０．１ｍｇ６－ＢＡ＋２ｍｇ２，４一Ｄ
须经过严格的灭菌，在灭菌的时候要特别注意必需等到烧热的实验仪器冷却后再接触材料，否则会把材料“ 烫伤” ，所有的转移材料的操作必须在无菌操作台上进行。２．接种时，动作要轻，力度适中。不要把接种的切块压人培养基里面，以致破坏培养基。同时要注意接种时瓶口应倾斜４５度并在酒精灯火焰附近，以免手、镊子上的赃物容易掉
Ｎａ２Ｓ２Ｏ３、１ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ、２ｍｇ／Ｌ２，４一Ｄ溶液，ｌｎｇｉ／Ｌ６一ＢＡ溶液、０．５ｍ￣ｍｌＮＡＡ溶液、１５％盐酸、３％次氯酸钠、无水乙醇、０．１％升汞、蒸馏水。
２．３胡箩卜组织培养实验准备工作２．３．１母液配制ＭＳ母液培养基配制：去植物组织培养ＭＳ固体培养基并加蒸馏水稀释配置母液植物激素配置：２，４－Ｄ：２ｍｇ／Ｌ、６一ＢＡ：ｌｍｇ／Ｌ注：２，４一Ｄ和ＮＡＡ可先用酒精溶解在加蒸馏水定容，６一
光条件下培养。注意事项：１．所有的组织培养实验操作都必须在无菌条件下进行，所以我们必须时时注意实验材料的无菌和消毒，实验用具必
新鲜的胡箩卜茎段，超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、电子天平、电热炉、恒温箱，ｐＨ值测试器、紫光灯、镊子、烧杯、量筒、三角瓶、培养皿、滤纸、吸水纸、封口膜、ＭＳ固体培养基、

胡萝卜组织培养

. 研究背景1.1 胡萝卜胡萝卜(Daucus carota L．)为伞形科植物，是世界上最重要的蔬菜作物之一，占蔬菜生产总量的3％，达13．5百万吨(Hole，1996)。

胡萝卜块根营养丰富，约含有88％的水、6％～8％糖、1％～2％植物纤维，0．7％～1．2％蛋白质、1％灰份及0～3％脂肪[1] 。

由于其富含维生素A前体类胡萝b素和植物纤维，因而是一种重要的营养保健品。

其适于生食、加工、烹调等多种用途。

中国是农业大国，胡萝卜作为蔬菜作物在人们生活中起着重要的作用。

因此继续深入研究胡萝卜细胞培养还是很有必要的。

1.2 组织培养植物组织培养是在含有营养物质及植物生长物质的培养基中，培养离体植物组织（器官或细胞）并诱导使其长成完整植株的技术[2]。

其理论基础是植物细胞具有全能性，即一个完整的植物细胞拥有形成一个完整植株所必需的全部遗传信息，具有发育成完整植株的潜能，在适宜的条件下能够发育成一个完整的植株。

进行离体培养时，植物的组织或器官通过脱分化形成愈伤组织。

胡萝卜价格比较便宜，材料易得，而且在组织培养方面容易诱导发生，我们可以通过这个实验熟悉植物组培。

2. 材料与方法2.1 材料培养皿、锥形瓶、无菌纸、镊子、解剖刀、烧杯、量筒、玻璃棒、酒精灯、无菌操作台、高压灭菌锅、微波炉、PH试纸。

MS培养基、2,4-D、6-BA、活性炭、无菌水、蔗糖、琼脂粉、75%酒精、1% (体积比)浓度的次氯酸钙溶液、胡萝卜块根（2012-2-21-怡购，2012-2-24-水果摊，2012-3-13-水果摊，2012-3-21-珠影，2012-3-29-荣一）2.2 方法2.2.1 MS培养基的配制200ml◆用大烧杯取无菌水100-120ml◆依次用移液管量取加入母液：20ml大量（10x）、2ml微量（100x）、2ml铁盐（100x）、4ml有机（50x）、2mg/L2,4-D。

◆称取6g蔗糖加入，搅拌直至全部溶解。

芸苔素内酯在胡萝卜组培快繁中的应用

芸苔素内酯在胡萝卜组培快繁中的应用唐汇东,周浩林,王旭辉,易桂烽（长沙医学院生物技术系，湖南长沙410000）摘要：芸苔素内酯是新发现的一种天然植物激素。

本文对不同浓度芸苔素内酯对胡萝卜组培苗诱导率、出芽率、平均芽长、生根率、平均根数、平均根长的影响进行研究，得出芸苔素内酯对胡萝卜组培快繁最佳浓度范围。

通过不同激素混合作用对比，得出影响胡萝卜组培快繁的最佳激素组合。

关键词：芸苔素内酯；植物激素；组织培养中图分类号：S533文献标识码：A文章编号：1005-7897（2021）04-0007-021970年美国农业部科学家J.W.Mitchell等从油菜籽中提取出一种对植物根茎伸长和细胞分裂有超强促进作用的物质，这种物质被定名为芸苔素（Brassins）。

1970年至今发现了大约80种天然芸苔素内酯类化合物，其被合称为油菜素甾醇类物质（Brassinosteroid，BR），1998年国际上正式确认芸苔素内酯为第六类植物激素[1]。

芸苔素内酯用途广泛，具有治疗黄叶病、促进根芽生长、壮根、促进果实成熟、提高作物产量、减轻病虫害、提高植物抗干旱能力、提高植物御寒能力。

对因农药、病虫影响、干旱高寒等原因造成的根腐烂、幼苗枯萎、倒伏现象急救效果显著，施用24h内明显见效，可以使植物迅速恢复生机。

适用各类经济作物，蔬菜和水果等。

本试验研究芸苔素内酯对胡萝卜组织培养快速繁殖的影响，并与其他植物激素进行比较[3]。

1材料和方法1.1材料胡萝卜采自商场常见胡萝卜品种，现场剥皮洗净切取1cm 厚片段备用。

全营养的MS培养基加水稀释高压蒸汽灭菌备用。

6-苄氨基嘌呤（6-BA）、芸苔素内酯（BR）、α-萘乙酸（NAA）、采自九鼎化学生产高纯标准品（纯度>95%）。

1.2消毒采用多次消毒法消毒外植体[4]。

将已切的胡萝卜先用70%乙醇浸泡3min，用吸水纸擦干，再用酒精灯消毒外植体15s；接着用20%次氯酸钠溶液浸泡10min，接着用酒精灯消毒外植体15s，再用超纯水冲洗5次，吸干，切去周围组织，留下形成层，外植体大小5~8mm3。

实验2-4胡萝卜愈伤组织的继代培养

及时继代
愈伤组织在培养过程中会逐渐老化，为保证实验的准确性，应及时进行继代培养。
03
实验结果与分析
实验结果
实验观察记录
在继代培养过程中，胡萝卜愈伤组织表现出良好的生长状态，细胞分裂活跃，质地松软，颜色鲜艳。
显微镜观察
通过显微镜观察，发现细胞分裂旺盛，细胞排列紧密，呈现出典型的愈伤组织结构。
在未来的实验中，我们可以尝试优化培养条件，如温度、光照、湿度等，以提高愈伤组织的生长速度和质量。
此外，我们还可以进一步研究愈伤组织在继代培养过程中的基因表达和分子机制，为植物组织培养和基因工程领域的发展做出贡献。
我们可以通过添加植物激素或其他生长因子来调节愈伤组织的生长和分化，以实现更好的实验效果。
2. 制备培养基
按照MS培养基配方，添加适量的植物生长调节剂和糖，搅拌均匀后倒入培养容器中，待培养基凝固。
3. 接种外植体
将准备好的外植体放置在培养基上，确保外植体与培养基接触良好。
4. 培养条件
将培养容器放置在恒温、恒湿、无菌的环境中，保持适宜的温度和光照条件。
5. 继代培养
经过一段时间的培养后，观察愈伤组织的生长情况，当愈伤组织长满培养基时，将其切割成小块，重新接种到新的培养基上，进行继代培养。
薄壁细胞团。
通过将愈伤组织进行继代培养，可以保持其生长和分化能力，并对其进行遗传转化、次生代谢产
物生产等方面的研究。
实验采用的培养基通常含有植物生长调节剂、无机盐、维生素等成分，以促进愈伤组织的生长和
分化。
实验背景
植物细胞培养技术是近年来发展迅速的生物技术领域之一，在农业生产、生物医药、工业生产等方面具有广泛的应用前景。

胡萝卜组织培养系统实验

云南大学生命科学实验教学中心实验报告课程名称：细胞工程实验院系：生命科学学院年级专业：2013级生物技术（国家生命科学与技术姓名：杨梦梅选课号：2015107066学号：20131070156座号：A2开课日期：2015.09 学期：2015秋季学期任课教师：吕琦、牛芸云南大学生命科学实验教学中心制胡萝卜愈伤组织的诱导、继代及细胞悬浮培养研究第一作者：杨梦梅同组实验者：赵姗( 云南大学生命科学学院,昆明650504)摘要: 以胡萝卜肉质根为外植体诱导出愈伤组织, 并建立细胞悬浮系. 实验结果表明: 胡萝卜肉质根是诱导愈伤组织和进行细胞悬浮培养的可行外植体; 诱导致密型愈伤组织的最佳激素浓度配比是 0.5 mg/ L 2, 4- D+ 0.4 mg/ L KT;继代培养 1代~ 2时,可得到高活性的悬浮细胞系；细胞悬浮培养细胞经过 14 天达到高峰期（生长平台）。

关键词: 胡萝卜; 组织培养; 细胞悬浮培养; 致密型愈伤组织;The study about inducement, subculture and suspension celllines of Carrots’ callusAbstract: Carrots’ flesh roots can induce callus as explants, and then it establishes suspension cell lines. The experimental results show that: Carrot s’flesh roots really can induce callus and then make suspension cell lines. In order to induce high density callus, the best hormone ratio is 0.5 mg/ L 2, 4- D+ 0.4 mg/ L KT. Subculturing the cell line for 1 to 2 times, we can obtain the suspension cell line with high activity. After 2 weeks, the cell line reaches to the peak of growth.Keywords: Carrot; tissue culture experiments; suspension cell; callus in high density胡萝卜( Daucus carota L . ) , 属于十字花科植物, 是一种十分重要的蔬菜作物, 由于胡萝卜肉质根营养丰富，约含有88％的水、6％～8％糖、1％～2％植物纤维，0．7％～1．2％蛋白质、1％灰份及0～3％脂肪，及其适于生食、加工、烹调等多种用途, 在世界范围内广泛栽培。

浅谈植物组织培养及其应用---论文

浅谈植物组织培养及其应用目前，生物技术正在世界突飞猛进地发展,而且在医学、农业、食品工业、能源工业、环境保护各个领域显示出极大的生产潜力。

作为生物技术有力手段的组织培养，也日益受到重视，组织培养在农林作物的脱毒快繁、突变诱发、细胞工程和基因工程等方面都可以发挥作用.当前人类正面临淡水资源短缺的困难，同时土地沙荒化、盐渍化也对人类造成威胁.我国是属于淡水资源缺乏的国家,除积极进行节用水,在农业上选育耐旱作物品种以及提高农作物的抗旱性之外，应用细胞工程技术快速繁殖固沙植物,筛选抗旱和抗盐的细胞突变体，以至利用基因工程方法将抗旱基因引入到禾谷类作物中，最终将会对干旱、半干旱及滩涂地区的开发利用产生极大影响.可喜的是,目前科学家们已做出积极努力，在渗透调节基因工程方面取得了有意义的进展。

总之，生物技术的应用将对我国农林生产带来革命性的变化,本节所讲的组织培养的基本原理及其应用,希望能引起读者广泛的兴趣，以便为不久的将来应用生物技术在解决我国旱区的实际问题上，能有所启迪。

一、植物组织培养中的细胞分化与器官建（一）植物细胞的全能性植物细胞的全能性即是每个植物的本细胞或性细胞都具有该植物的全套遗传基因,因此在一定培养条件下每个细胞都可发育成一个与母体一样的植株。

这个概念虽然在本世纪初已经提出,但在当时的技术条件下,在实践上并没做到,经过几十年来组织培养技术的不断改进，目前细胞的全能性不但在理论上完全被证实，而且为组织培养在实践上的应用奠定了基础。

植物细胞要表现出全能性，须经过几个步骤：成熟细胞→分生细胞→胚状体→完整植株。

成熟细胞→愈伤组织→出根出芽→完整植株。

脱分化也就是已经分化定型的细胞，经过诱导成为重新恢复了分裂能力（也就是成为分生状态）细胞的过程。

不但植物体细胞可以表现全能性，花粉在培养条件下也可能进行脱分化，通过愈伤组织或胚状体发育成单倍体植株.植物细胞为什么表现出全能性呢？就要从动物与植物细胞的区别说起。

胡萝卜的愈伤组织培养论文

胡萝卜的愈伤组织培养摘要本试验以胡萝卜的形成层组织为试验材料，材料经消毒灭菌，无菌接种在附加植物激素1.0mg/L 2,4-D的MS诱导培养基的三角瓶中,培养温度28-30℃，避光培养30天左右，即可诱导产生胡萝卜的愈伤组织。

关键词：胡萝卜组织培养愈伤组织ABSTRACTIn this experiment, we use carrot’s formation layer as materials. After disinfection and sterilization, the materials are inoculated in MS induction medium with additional plant hormones 1.0mg / L 2,4-D. Culture the materials with temperature of 28-30 ℃and about 30 days in dark, then carrot callus can be induced.Key words:carrot tissue culture callus前言在无菌条件下，将植物器官或组织（如芽、茎尖、根尖或花药）的一部分切下来，放在适当的人工培养基上进行培养，这些器官或组织就会进行细胞分裂，形成新的组织。

不过这种组织没有发生分化，只是一团薄壁细胞，叫做愈伤组织。

再适合的光照、温度和一定的营养物质与激素等条件下，愈伤组织便开始分化，产生出植物的各种器官和组织，进而发育成一棵完整的植株。

愈伤组织（callus）原指植物体的局部受到创伤刺激后，在伤口表面新生的组织。

它由活的薄壁细胞组成，可起源于植物体任何器官内各种组织的活细胞。

在植物体的创伤部分，愈伤组织可帮助伤口愈合；在嫁接中，可促使砧木与接穗愈合，并由新生的维管组织使砧木和接穗沟通；在扦插中，从伤口愈伤组织可分化出不定根或不定芽，迸而形成完整植株。

胡萝卜愈伤组织的培养

胡萝卜愈伤组织的培养摘要：实验中的胡萝卜的组织培养实验成功率比较低，主要体现在污染率较高和出芽率低上，在长期的实验中，有些胡萝卜的愈伤组织基本分化不出芽。

针对这一问题我们反复实验。

通过把培养出来的胡萝卜的愈伤组织进行悬浮培养后，再转接到固体培养基上，从而使得胡萝卜愈伤组织更容易分化出芽来。

并使整个过程控制在无菌条件下，现就胡萝卜组织培养的整个实验过程控制作一详细介绍。

关键词：胡萝卜；组织培养；无菌控制1.实验流程（1）实验总流程：MS母液培养基的配置→胡萝卜愈伤组织诱导培养培养基的配制→胡萝卜愈伤组织诱导→胡萝卜愈伤组织的继代培养→观察记录（2）无菌操作流程：实验员消毒→实验室、无菌台灭菌→实验器材的灭菌→无菌接种→消毒→实验台卫生（3）胡萝卜愈伤组织诱导培养流程：胡萝卜愈伤组织诱导培养基的配置→胡萝卜愈伤组织诱导培养培养基的分装→胡萝卜愈伤组织诱导培养培养基灭菌→取材及材料的消毒灭菌→接种与培养（4）胡萝卜愈伤组织的继代培养流程：器械及实验者的消毒灭菌→剥离愈伤组织诱导培养所得的愈伤组织→胡萝卜愈伤组织接种2.实验仪器及材料胡萝卜(市场购买)、超净工作台、光照培养架、高压蒸汽灭菌锅、恒温振荡器、打孔器、小刀、培养皿、解剖刀、镊子、植物组培试剂盒。

3.实验方法与步骤3.1胡萝卜愈伤组织的诱导①外植体消毒用清水洗干净胡萝卜直根，用小刀给其削去表皮，并切成小段放入烧杯中。

先用70%酒精对胡萝卜直根消毒5min，用无菌吸水纸吸干，再用10%的次氯酸钠溶液消毒10min（或用0.1%的升汞消毒10min,接着用无菌水漂洗一遍，再用无菌水浸泡30min），放入无菌水中漂洗2~3次，用无菌吸水纸吸干待用。

②外植体接种。

把消毒好的胡萝卜直根放入无菌培养皿中，用消毒好的小刀沿截面将其横切成厚度1mm左右的小圆片，然后将小圆片的韧皮部和木质部切去，留下形成层，再将形成层切成大约长5mm、宽5mm、高1mm的小长块(如图1a)。

培育胡萝卜实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解植物组织培养的基本原理和操作技术。

2. 掌握胡萝卜愈伤组织的诱导、继代增殖和细胞悬浮培养的方法。

3. 熟悉胡萝卜体细胞胚胎发生培养过程。

二、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜胡萝卜肉质根、MS培养基、植物激素、无菌水、75%酒精、无菌滤纸等。

2. 实验仪器：超净工作台、高压蒸汽灭菌器、电子天平、显微镜、移液枪、培养皿、培养箱等。

三、实验方法1. 胡萝卜愈伤组织的诱导- 将新鲜胡萝卜肉质根洗净，切成小块，用75%酒精消毒30秒，无菌水冲洗3次。

- 将消毒后的胡萝卜小块接种于诱导培养基（MS培养基+2,4-D 1mg/L+6-BA1mg/L）中，在无菌条件下进行培养。

- 观察胡萝卜小块的愈伤组织形成情况。

2. 胡萝卜愈伤组织的继代增殖- 将诱导出的愈伤组织切割成小块，接种于继代培养基（MS培养基+2,4-D0.5mg/L+6-BA 0.5mg/L）中。

- 在无菌条件下进行培养，观察愈伤组织的增殖情况。

3. 胡萝卜细胞悬浮培养- 将继代增殖后的愈伤组织用无菌水冲洗，剪碎，加入适量MS培养基和植物激素（2,4-D 0.1mg/L+6-BA 0.1mg/L）。

- 在无菌条件下进行搅拌，使愈伤组织细胞悬浮。

- 将悬浮细胞接种于细胞悬浮培养基（MS培养基+2,4-D 0.1mg/L+6-BA0.1mg/L）中，在无菌条件下进行培养。

- 观察细胞悬浮培养的生长情况。

4. 胡萝卜体细胞胚胎发生培养- 将细胞悬浮培养得到的愈伤组织细胞，用无菌水冲洗，剪碎，加入适量MS培养基和植物激素（NAA 0.1mg/L+KT 0.1mg/L）。

- 在无菌条件下进行搅拌，使愈伤组织细胞悬浮。

- 将悬浮细胞接种于体细胞胚胎发生培养基（MS培养基+NAA 0.1mg/L+KT0.1mg/L）中，在无菌条件下进行培养。

- 观察体细胞胚胎发生培养的生长情况。

四、实验结果与分析1. 胡萝卜愈伤组织的诱导- 经过诱导培养，胡萝卜小块表面逐渐出现愈伤组织，愈伤组织呈白色、半透明状，质地较软。

胡萝卜研究

摘要:本文通过对胡萝卜遗传资源、遗传育种、生殖生物学、品质育种等方面的论述，在总结前人的研究结果和我们研究实践的基础上，对胡萝卜遗传育种工作进行了初步探讨。

关键词:胡萝卜;遗传育种胡萝卜是一种高产蔬菜作物。

因其产量高、富含胡萝卜素等多种营养成分，特别是较高p一胡萝卜素的存在，使其具有营养和保健双重功能，对抗癌和防治夜盲症有良好的作用，享有“小人参”的美誉，所以被世界各地广泛种植。

据联合国粮农组织2001年的统计，我国胡萝卜的种植面积从1994年的162万亩(约108 khm2)增加到目前的431万亩(约290khmz),世界一总收获面积的近1/3，排名第一位，胡萝卜已成为我国鲜食、加工和出口的重要蔬菜，也是世界胡萝卜的土要产区。

发达国家(美、日、俄罗斯、荷兰等)的胡萝卜育种旱己开始，今天几乎所有发达国家都在进行胡萝卜育种和相关研究工作，而且由单纯的系统选育转向以杂交育种为主。

研究手段先进，同功酶位点( Westphal等1991)及RFLP和RAPD标记(Schulz等1994)也应用于胡萝卜的遗传分析。

在胡萝卜育种过程中，为防止近交衰退和缩短选育时间及其难度，组织培养也发展很快。

我国的研究I.作起步很晚，1962年江苏省农科院吴光远在美国品种Imperator(老魁)留种田中发现了褐药型雄性不育株，分别采收自然授粉种子，从1963年起，将不育株和可育株隔离杂交，共获得6个雄性不育系[fZl，但未见进一步的报道。

80年代初，山东莱阳农技中心、江苏扬州农科所、中国农科院蔬菜所等对胡萝卜的研究做了部分工作，但由于种原因一直未见杂交种推出。

90年代末期，北京蔬菜研究中心、中国农科院蔬菜花卉所、内蒙古农科院蔬菜所先后推出几个杂交种应用于生产。

其中利用的不育系均是通过回交转育国外引进的瓣化型不育材料而育成的，目前还没有我国自己育成的不育系间世。

但司家钢等利用原生质体非对称融合己获得胡萝卜种内胞质杂种本文通过总结前人的研究结果和我们的研究实践，对胡萝卜遗传育种工作进行了探讨.1遗传资源 Dauc二属含22个种，主要分布在欧洲和地中海地区，在世界其它地区也发现一些种，而Daucuscarota包括栽培胡萝卜现已描述了15个以上亚种。

胡萝卜幼苗根、茎、叶组织培养再生植株

胡萝卜幼苗根、茎、叶组织培养再生植株张唯;王伟;续晨;贲爱玲;张君艳;蔡小宁【摘要】[ Objective]J The aim was to study plant regeneration of carrot. [ Method] The root, stem and leaf of two month old seedlings were taken as explants. Effect of different medium and different explants on callus induction and callus differentiation was analyzed. [ Result] The three explants could induce callus. The stem as explants was the best for callus quality, its rate of callus induction and differentiation rate were the highest. [Conclusion] The callus induction and regeneration system of carrot seedlings was established, which lays foundation for the future experiments.%[目的]研究胡萝卜幼苗的组织培养再生技术.[方法]以培养约2个月的胡萝卜幼苗为材料,分别取幼苗的根、茎、叶为外植体,研究不同培养基、不同外植体对愈伤组织诱导的影响,以及培养基对愈伤组织分化的影响.[结果]根、茎、叶为外植体均能产生愈伤组织,但以茎为外植体诱导的愈伤组织质量最佳,其愈伤组织的诱导率和分化率均为最高.[结论]建立了胡萝卜试管培养幼苗的愈伤组织诱导和再生植株体系,为今后的试验打下了基础.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2012(000)012【总页数】2页(P7013-7014)【关键词】胡萝卜;幼苗;组织培养;再生植株【作者】张唯;王伟;续晨;贲爱玲;张君艳;蔡小宁【作者单位】南京晓庄学院,江苏南京211171;南京晓庄学院,江苏南京211171;南京晓庄学院,江苏南京211171;南京晓庄学院,江苏南京211171;南京晓庄学院,江苏南京211171;南京晓庄学院,江苏南京211171【正文语种】中文【中图分类】S631.2胡萝卜为伞形科二年生草本植物，是世界上最重要的蔬菜之一，栽种面积非常广泛。

【实验】胡萝卜的组织培养

实验操作 1、提取胡萝卜素的实验流程
胡萝卜
粉碎
干燥
萃取
胡萝卜素
浓缩
过滤
2、胡萝卜素提取过程
原料颗粒小，水分少，萃取效果好
胡萝粉干卜碎燥
①原料加工：取500g新鲜胡萝卜，清洗，沥干、粉碎、烘干。 ②原料装填：将胡萝卜粉与200mL石油醚装入蒸馏瓶。
注意：
烘干胡萝卜时，要注意控制温度若温度过高、时间过长，胡萝卜素可能会分解。
含水量、萃取温度、时间等原料颗粒小、水分少、萃取温度高、时间长。
效果好
如何设计提取装置呢？
【合作探究三】
冷凝阅读管教材P78【资料三】，思考下列问题。 1.加热的作用是什么？能否明火加热？为什么？ 2.如何防止加热时有机溶剂挥发？ 3.萃取液的浓缩可直接用蒸馏装置，水浴蒸锅发出去的是萃取剂还是胡萝卜素？ 4.总结提取胡萝卜素的实验流程。
②常用于食品色素；
③使癌变细胞恢复成正常细胞。
3. 理化性质
1. 橘黄色结晶 2. 不溶于水、微溶于乙醇、易溶于
石油醚等有机溶剂 3. 可氧化成两分子维生素A
4. 天然β－胡萝卜素的提取
工业方法：植物中提取岩藻中获得利用微生物的发酵生产
实验室提取方法：萃取法
【合作探究二】
阅读教材P78【资料一】和【资料二】，思考下列问题。
___需__要_____（填“需要”或“不需要”）将鲜活的岩藻干燥。（3）现有乙醇和乙酸乙酯两种溶剂，应选用其中的_乙__酸__乙__酯___
作为胡萝卜素的萃取剂，不选用另外一种的理由是_________ 萃取胡萝卜素的有机溶剂应不与水混溶，而乙醇是水溶性有机溶剂。
对接高考
（ 2008生物──选修1生物技术实践）

胡萝卜组织培养论文

植物组织培养论文摘要：在胡萝卜组培试验，用胡萝卜做外植体，在培养基上接种诱导形成愈伤组织，由于接种时对外植体消毒不彻底，接种操作不规范，导致培养基全部污染，实验失败胡萝卜胡萝卜（Daucus carrot），又称甘荀，是伞形科胡萝卜属二年生草本植物。

以肉质根作蔬菜食用。

原产亚洲西南部，阿富汗为最早演化中心，栽培历史在2000年以上。

名为Daucus carota，通常为一年生，根可食。

常见品种中，根呈球状或锥状，橘黄色、白色、黄色或紫色。

原产阿富汗及邻近国家。

野胡萝卜已成为分布于欧洲、美国和其他温带国家的杂草。

地中海地区早在西元前就已栽培胡萝卜，在中国和西北欧不迟于14世纪，现栽培于整个温带地区。

组织培养发展简史Haberlandt(1902)首次提出细胞培养的概念，也是第一个用人工培养基对分离的植物细胞进行培养的人。

与rechinger不同，Haberlandt相信切块大小不会影响细胞增殖，但由于Haberlandt使用的培养液成分简单，培养的细胞是高度分化的细胞，又没采取消毒技术，所以实验失败，培养的细胞虽然存活了几个月但没能分裂。

Haberlandt 转而对损伤修复发生兴趣，提出激素作用的概念（leptohormone)，与维管组织特别是韧皮部有关；另一类是创伤激素(woundhomone)，与细胞损伤有关，为后来激素理论的建立和在组织培养中的广泛应用奠定了基础。

但自Haberlandt的实验之后直到1934年White培养番茄离体根尖的成功，其间的30多年里，植物组织培养技术几乎没有什么进展。

分析其原因，主要就是培养基的成分和实验所选取的材料不够合适。

20世纪60年代，在植物组织培养方面的另外两项成就就是划分小孢子培养和原生质体培养的成功。

Guha和Maheshwari（1966，1967），Rourgin和Nitsch（1967）先后利用烟草和胡萝卜的小孢子培养获得单倍体植株，并成功地实现了染色体的加倍，使这种同源二倍体植株在5个月内收获到种子。

胡萝卜组织培养

胡萝卜组织培养
莫德馨;郭玉华;孙静;耿慧莉
【期刊名称】《教学仪器与实验》
【年(卷),期】2010(026)007
【摘要】详细介绍了胡萝卜组织培养从外植体到长出新苗的整个过程,通过改进实验方法解决了胡萝卜愈伤组织很难分化出芽的难题.
【总页数】2页(P42-43)
【作者】莫德馨;郭玉华;孙静;耿慧莉
【作者单位】北京川布兰生物技术开发有限公司,100094;黑龙江省教育学
院,150080;北京川布兰生物技术开发有限公司,100094;北京川布兰生物技术开发有限公司,100094
【正文语种】中文
【相关文献】
1.胡萝卜幼苗根、茎、叶组织培养再生植株 [J], 张唯;王伟;续晨;贲爱玲;张君艳;蔡小宁
2.高β-胡萝卜素甘薯品种的组织培养技术研究 [J], 郝玉华
3.胡萝卜愈伤组织培养试验及改进 [J], 罗文俊;
4.胡萝卜愈伤组织培养试验及改进 [J], 罗文俊
5.“胡萝卜的组织培养”消毒方法的优化 [J], 谭洁敏;黄胜琴;许德成
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胡萝卜的组织培养实施方案——暨对学生课外活动指导和评价的建议

胡萝卜的组织培养实施方案——暨对学生课外活动指导和评价的建议李凯【摘要】通过对现行高中生物教材<生物技术实践>(选修1)的研究,笔者认为生物课外活动小组是生物学教学的好帮手,它不仅能丰富学生的知识、锻炼学生的实验技能,而且还能提高学生学习生物学的兴趣.另外,评价是教学过程中不可缺少的环节,是教师了解教学过程,调控教学行为的重要手段.对以上两方面的问题进行研究,提出一些建议,供教师参考.【期刊名称】《林区教学》【年(卷),期】2010(000)011【总页数】3页(P99-101)【关键词】方案;指导;评价;建议【作者】李凯【作者单位】吉林省通榆县第一中学,吉林,通榆,137200【正文语种】中文【中图分类】G633.91众所周知,植物的组织培养技术可以实现优良品种的快速繁殖,可以实现花卉的连续生产等等。

组织培养技术相对于高中生来说,技术操作难度不是很大,而且通过这项技术的学习,还会带给我们丰富的体验和宝贵的启迪。

据笔者了解北京四中植物组织培养选修课开课已经有 20年了,同学们从课外活动中有很大的收获,学习的兴趣也非常浓厚了。

这种课外辅助教学如果真能够普及开来,给学生更多的可自我支配的时间去从事自己感兴趣的课外兴趣小组实践活动,那么对于今后学生的各方面能力的培养都是不无裨益的。

由于市面上的胡萝卜价格比较便宜,材料易得,而且在组织培养方面容易诱导发生,所以不妨做一个胡萝卜的组织培养课外活动实施的方案。

另外,在学生进行课外活动时,要对学生活动的过程进行评价。

简单来说就是一方面关注学生实验的过程,另一方面还要重视非预期的结果。

基于以上原因,对本课题做如下设计。

在高中生物教材《分子与细胞》(必修 1)中就提到过,“细胞的全能性(totipotency)是指已经分化的细胞,仍然具有发育成完整个体的潜能。

”应用这个理论,将成熟胡萝卜直根的部分组织培养成完整胡萝卜植株。

无菌器材:(1)20套培养皿,分组,每个培养皿里装有浅层的灭菌MS培养基①,1000ml无菌水;(2)20张吸水纸(200mm×200mm),及用来操作的大培养皿 (直径 90mm),烧杯;(3)10个培养瓶 (高 150mm,直径 8mm);(4)2把镊子和 3把解剖刀;(5)无菌操作室或无菌操作台。