手性药物的拆分高效液相色谱HPLC

OH
H OH
O O
OH n
H3C
+
H3C
NCO
CH 3
OCONH O
CH 3
O
H
OCONH
H3C
NHOCO
n CH3
CH 3
CH 3
1.2 淀粉类手性固定相
? 最基本的有如下 4种。
OCOR
OCONH
R O
O
H
OCONH
NHOCO
n
R
R
直链淀粉
OCOR
O
OH
H
OCOR
n
O
OCOR
O
HFra Baidu bibliotek
OCOR
直链淀粉
O O Si(CH2)nNH2+R*COOH
O O O Si(CH2)nNH2+R*HNCO O
O O Si(CH2)nNHCOR*
O O O Si(CH2)nNHCONHR O
连接到硅胶表面的手性有机物在手性中心附近至少含有一种下列 的功能团： （1）酸性或碱性的芳香基团，在手性识别过程中能发生电荷转移
(1)
(OH)2
H3C
SO2Cl
(OTs) 2
(2)
SiO2 O
n(NHR)
H2NR
SiO2 O
β-CD固定相改性过程
n(OTs)
1.5 刷型手性固定相
? 刷型手性固定相（ CSP）是通过链烃基将手性有机 小分子链接到硅胶载体上制得，又叫 Pirkle型手性固 定相。
? 刷型手性固定相的合成主要有两种途径，即含端羧 基或异氰酸酯基的手性基团的化合物与氨基键合硅 胶进行缩合反应，分别形成含酰胺型或脲型结构的 手性固定相：
CH2CH2CH2NHCOCH2CH2COOH
+
SiO2
O O Si O
CH2CH2CH2NHCOCH2CH2CONHCH2CH2NH
? 3.碳氧键连接 醚基键合相与环糊精反应，：
O
SiO2
O
HO
O Si
(CH2)3oCH 2CHCH 2
+
O
SiO 2
O O Si O
CH 2CH2CH2OCH 2CHOHCH 2O
1.1纤维素衍生物手性固定相
? 1.纤维素-三（苯甲酸酯）（ CTB）固定相 ? 由微晶纤维素和苯甲酰氯反应：
OH
O
+
O
H
OH
OH
n
COCl
OCO
H
OCO
O
O OCO
n
将得到的纤维素-（三苯甲酸酯）涂敷在氨丙基硅烷化硅胶上， 便得到CTB固定相
? 2.纤维素-三（苯基氨基甲酸酯）（ CTPC）
? 由微晶纤维素与异氰酸苯酯反应，将得到的纤维 素-三（苯基氨基甲酸酯）涂敷在氨基键合的硅胶 上，便得到 CTPC手性固定相 :
相互作用； （2）能形成氢键的原子或基团； （3）能发生偶极-偶极叠合相互作用的极性键或基团； （4）能提供立体排斥，范德华相互作用构型控制的非极性基团。
? 交互作用原理是对“刷型”手性固定相设计有重要指导意义 的原则，即如果一个固定性的化合物A的对映体之一能对另 一化合物B的对映体进行拆分的话，那么反之亦然。
CD及衍生化CD化学键合手性固定相键合方式：
? 1.胺键连接 氨丙基硅胶键合相与环糊精反应：
SiO2
O O Si
+ CH2CH2CH2NH2
HO
O
SiO2
O O Si O
CH2CH2CH2NH
? 2.酰胺键连接 羧基化的氨丙基硅胶键合相与乙二胺 环糊精反应：
SiO2
O O Si O
HNH2CH2CNH2
OH
O
+
O
H
OH
OH
n
NCO
OCONH
H
NHOCO
O
O OCONH
n
? 3.纤维素-三（3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯）（CDMPC）
? 商品名为手性OD柱，具有极高的光学拆分能力，是广泛使用的 手性固定相之一。以微晶纤维素与3，5-二甲基苯基异氰酸酯反 应，将生成的纤维素-三（3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯）以 15%的量涂敷在氨丙基硅胶上，制得CDMPC-CSP：
1.R=H ，直链淀粉 -三（苯基氨基甲酸酯） 2.R=3 ，5-（CH3）2，直链淀粉 -三（3，5，-二甲基苯基氨基甲酸酯） 3.R=C 6H5，直链淀粉 -三（苯基甲酸酯） 4.R=3 ，5-（CH3）C6H5NH，直链淀粉 ——三（3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯）
? 淀粉手性固定相的制备方法与纤维素手性固定相相似，首先 用淀粉与相应的有机化合物，如苯甲酰氯，苯基异氰酸酯等 反应，得到淀粉衍生物，再将这种衍生物涂敷在氨丙基键合 硅胶上，便可以得到淀粉类手性固定相。
这种键合方式不含氮键，固定相的稳定性好。
1.4 多模式环糊精固定相
? 环糊精衍生化固定相既可以用于反相分离又可以用于正相分 离，因而称为多模式手性固定相。手性识别作用既有包容络 合，又有π-π电荷转移，氢键和立体排斥相互作用等多种作 用，应用范围广泛。
? 制备过程有四个步骤：
? （1）硅胶上键合N-（2-氨乙基-3-氨丙基）基团 ? （2）用对甲苯磺酰氯专一性的磺化环糊精的羟基 ? （ 3）2-氨乙基-3-氨丙基键合硅胶与甲苯磺酰氯-β-环糊精反应；通
1.3 环糊精手性固定相
OH
HO O OHOHO
OHO OH O
HO
OH
O OH
O
OH O
HO
OH
O OH
O OH
O
OHO OH O OH
HO
?-CD环状构型（俯视图）
环糊精包封药物的立体结构
环糊精分子中每个葡萄糖单元含有5个手性碳原子，如β-CD含有 35个手性碳原子，同时与各种有机分子形成包容配合物，分子 整体上具有光学活性和立体识别能力，是一种理想的手性选择剂
Dalgliesh 三点相互作用
a
b
Y d
c (S)-选择剂
A
D
X
B
C （R)-对映体
a
b
Y d
c (S)-选择剂
三点相互作用模型
A
D
XB
C （R)-对映体
排斥作用通常为立体排斥，偶极-偶极排斥 键合作用包括氢键，静电，偶极-偶极吸引，电荷转移和疏水作用
根据固定相的不同,与对映体之间存在以下几 种作用
? （1）过渡金属离子的手性配位作用 ? （2）π-π电荷转印相互作用 ? （3）包结络合作用 ? （4）氢键相互作用 ? （5）立体契合作用
1 手性固定相
? 第一类包括低聚糖，多糖及其衍生物，聚丙烯酰胺， 聚丙烯酸酯等
? a，纯有机聚合物 ? b，聚合物涂覆在无机载体上 ? c，接枝聚合物
? 第二类是把光学活性分子通过离子键或共价键连接 到硅胶载体表面，应用的光学活性物质有氨基酸衍 生物，冠醚，金鸡纳生物碱，糖类，胺类，酒石酸 衍生物，环糊精和联二萘酚等
过N-（2-氨乙基-3-氨丙基）键合硅胶上的氨基与环糊精上的甲苯磺 酰基之间发生反应，把环糊精链接到硅胶上 ? （4）环糊精上未反应的甲苯磺酰基与各种改性剂进一步反应，得到 改性的环糊精键合固定相
SiO2
OH
(CH3O)3Si(CH2)3NH(CH2)2NH2 SiO2
O Si(CH2)3NH(CH2)2NH2