长寿花组培快繁实验设计

潍坊市职业学院项目课程

实验设计

项目名称：

植物的组培快繁

实训地点：

学院组培中心

实验设计者：

王珏（0903199）

09级园林工程系生物技术及应用专业

设计时间：

2010年12月26日—2011年7月9日指导教师：

丁雪珍

一实验名称：

长寿花的组培快繁

二实验目的：

1、通过对长寿花进行组培快繁从而进一步了解植物组培快繁的原理；

2、熟悉并掌握植物组配快繁的工艺流程；

3、更熟练的掌握组培快繁的多项技术；

4、对植物的组织培养的方法及有关知识拥有更深的了解；

三实验原理

植物的组织培养是指在无菌条件下，将植物的离体器官、组织、细胞以及原生质体，应用人工培养基，创造适宜的培养条件，使其长成完整小植株的过程。

植物的组织培养也就是根据植物细胞的全能性（每个具有完整细胞核的细胞都具有该植物的全部遗传信息和产生完整植物体的能力）利用外植体（从植物体上切取下的根、茎、叶、花、果实、种子、器官以及各种组织和细胞）进行了转接、继代培养以及驯化的过程，虽然此过程投资少、成本低而且历时短但是植物组织培养拥有很多优点。如：

1、研究材料单一，无性系遗传信息相同；进而保证了遗传性状的一致性，避免了误差，实验材料的纯度高，可以减少实验的重复而不影响实验的精度。

2、经济方便，效率高；进行实验时投资少、成本低但是利润高从而节约了人力和物力。

3、培养条件了可控，可周年实验或生产；避免了由于节气带来的影响。

4、生长快，周期短，重复性强；

5、管理方便，利于自动化控制；通过仪器来提供试管苗的培养环境，大大节省了人力、物力及土地，也有利于工厂化生产。

本次实训以植物花月为对象用其幼叶作外植体进行组织培养（无菌短枝型），来领悟植物组织培养的原理。

四实验仪器及其他用具

1、玻璃器具

玻璃棒；烧杯；量筒；三角瓶；试剂瓶；胶头滴管；果酱瓶；酒精灯；漏斗；

2、所需的实验仪器

酒精灯；电子天平；磁力搅拌器；冰箱；超净工作台；接种器具消毒器；立式高压蒸汽灭菌锅；电炉；培养架；空调；

3、实验药剂

蒸馏水；葡萄糖；琼脂粉；MS母液（大量元素、微量元素、铁盐、维生素）；6-BA；2,4-D；IBA；IAAF；活性炭；95%酒精；氯化汞溶液；洗洁精；高锰酸钾；

4、其他用具

纱布；喷壶；搁置架；打火机；弯刀剪；麻线；牛皮纸；封口膜；剪刀；试管刷；洗耳球；引流器；PH试纸；周转箱；胶皮手套；秒表；废空箱子；马铃薯；刀；案板；铁架台；铝锅；麦麸；穴盘等

五设计方案

1、实验研究对象

植物长寿花

拉丁名：winter pot kalanchoe

科属：景天科，蔷薇属

别名：寿星花

原产地：东非马达加斯加岛

长寿花（Kalanchoe blossfeldiana cv tom Thumb）

别名寿星花、假川莲、圣诞伽

1.1植物简介

长寿花是一种多肉植物，由肥大、光亮的叶片形成的低矮株丛终年翠绿。春、夏、秋三季栽植于露地作镶边材料，12月至翌年4月开出鲜艳夺目的花朵。每一花枝上可多达数十朵花，花期长达4个多月，长寿花之名由此而来。长寿花是元旦和春节期间馈赠亲友和长辈的理想盆花。

长寿花为多肉植物，性喜较暖和气温，生长适宜温度以白天不超过30度，晚间温度不低于18度为宜。温度太高，太低会影响其正常生长。长寿花以扦插繁殖为主，温度在20~25度最适合其发根。长寿花适合排水好的土壤，以泥炭为主加上蛭石、珍珠岩的人工培养土最佳。培养土的ph值最好为5.8~6.2。长寿花对于水的需求量较低，中午前浇水完毕，入夜之前叶片一定要保持干燥。短日照植物，处理后至少6周后才会开花。短日照处理时最少每天要有14小时黑夜。一般而言，每年10月1日至第二年3月1日为自然短日期。种在较大花盆中的，生长初期要给予长日照处理，让植物达到一定大小后能给予短日照处理，使其开花。要不然，植株可能会偏小。

1.2生长习性

长寿花原产非洲。喜温暖稍湿润和阳光充足环境。不耐寒，生长适温度为15～25℃，夏季高温超过30℃，则生长受阻，冬季室内温度需12～15℃。低于5℃，叶片发红，花期推迟。冬春开花期如室温超过24℃，会抑制开花，如温度在15℃左右，长寿花开花不断。

长寿花耐干旱，对土壤要求不严，以肥沃的砂壤土为好。长寿花为短日照植物，对光周期反应比较敏感。生长发育好的植株，给予短日照（每天光照8～9小时）处理3～4周即可出现花蕾开花。

1.3繁殖方法

在5～6月或9～10月进行效果最好。选择稍成熟的肉质茎，剪取5～6厘米长，插于沙床中，浇水后用薄膜盖上，室温在15～20℃，插后15～18天生根，30天能盆栽。常用10厘米盆。如种苗不多时，可用叶片扦插。将健壮充实的叶片从叶柄处剪下，待切口稍干燥后斜插或平放沙床上，保持湿度，约10～15天，可从叶片基部生根，并长出新植株。

1.4光照与温度

长寿花为短日照植物，对光照要求不严，全日照、半日照和散射光照条件下均能生长良好。适宜生长温度15-25℃。夏季炎热时要注意通风、遮荫，避免强阳光直射。冬季入温室或放室内向阳处，温度保持10℃以上，最低温度不能低于5℃，温度低时叶片容易发红。生

长发育良好的植株经过短日照处理（每天光照8—9小时，其

余时间遮光处理，20 - 30天即可形成花蕾）。

浇水与施肥

长寿花为肉质植物，体内含水分多，比较耐干旱。生长期

不可浇水过多，每2-3天浇1次水，盆土以湿润偏于为好。如

果盆土过温，易引起根腐烂。浇水掌握“见干见湿、浇则浇透”

的原则。冬季应减少浇水，停止施肥。生长期每月施1、2次

富含磷的稀薄液肥，施肥在春、秋生长旺季和开花后进行。

2、外植体的选择与处理

1）选择长势、大小、颜色相近，饱满的6片嫩叶和6

个带有芽体或顶芽的茎段。

2）在进行外植体消毒灭菌的过程中所需的试剂有：

两个果酱瓶两的无菌水；0.1%氯化汞溶液100mL；75%的酒精；

3）所需的玻璃仪器为：

两个果酱瓶；两个三角瓶（盛装试剂）；三个空三角瓶（盛装外植体）；一个空瓶子（用以盛废液）；

3、外植体的启动培养

分别利用0.5mg/L、1mg/L、2mg/L的 MS+IBA和1mg/L、2mg/L、3mg/L的MS+6-BA固体培养基进行启动培养。所需的用品为：三角瓶12个；MS母液500ml；;

4、继代增值培养

分别利用0mg/L、0.1mg/L、0.2mg/L的 MS+IBA和1mg/L、2mg/L、3mg/L的MS+6-BA固体培养基进行启动培养。所需的用品为：三角瓶12个；MS母液500ml；

5、生根诱导

分别配置200ml的1/2MS+IBA、1/2MS+0.1%-0.2%的活性炭和1/2MS+0.1%-0.2%的活性炭+IBA0.2mg/L固体培养基，在此过程中要用到葡萄糖12g；琼脂4.5g；三角瓶12个；1/2MS母液600ml；

注：

以上三个步骤总需三角瓶44个；果酱瓶3个；封口膜88张；麻线44条；其他实验用具看具体实训状况。

在外植体启动培养、继代转接和生根诱导时每一个外植体对应一个固体培养基。

6、幼苗的驯化移栽

当试管苗长到3-4cm时，洗去幼苗根部的培养基后转移到基质中培养。

我将选择麦麸为基质，以16X8规格的穴盘为栽培场所；在插入幼苗前用0.5%的高锰酸钾进行基质的灭菌。

注：

在外植体启动培养时继代转接以及生根诱导时将瓶苗置于温度为25度左右、湿度在70%-80%之间的环境下培养，并定时观察瓶苗的污染率以及成活率。

在移栽瓶苗后定时观察幼苗的长势、基质中水分含量及幼苗的成活率。

六、具体实施步骤