M蛋白的鉴定及实验分析

合集下载

免疫固定电泳技术在鉴定M蛋白上的应用

免疫固定电泳技术在鉴定M蛋白上的应用
陈慧丹;王友基
【期刊名称】《实验与检验医学》
【年(卷),期】2013(000)006
【摘要】目的：探讨免疫固定电泳技术在鉴定M蛋白上的应用。

方法对48例M 蛋白血症患者进行琼脂糖凝胶免疫固定电泳(IFE)和免疫球蛋白定量检测。

结果在48例患者中有47例IFE检出M蛋白，M蛋白分型为IgGκ型14例,IgGλ型10例,IgAκ型3例,IgAλ型5例, IgMκ型3例,IgMλ型2例,单纯κ型1例，单纯λ型9例；免疫球蛋白定量仅有33例异常。

结论 IFE法灵敏度高，对MM的诊断和分型有重要意义。

【总页数】2页(P592-593)
【作者】陈慧丹;王友基
【作者单位】福建省立医院检验科，福建医科大学省立临床学院，福建福州350001;福建省立医院检验科，福建医科大学省立临床学院，福建福州 350001【正文语种】中文
【中图分类】R551.3;R733.3;R446.11+2
【相关文献】
1.免疫固定电泳技术在M蛋白免疫分型中的应用 [J], 刘金英;翟玉华;孙卫红
2.免疫固定电泳技术在鉴定多发性骨髓瘤M蛋白中的应用 [J], 陈慧丹;陈发林;林凤娇
3.免疫固定电泳检查在M蛋白分型鉴定中的应用 [J], 崔凡
4.免疫固定电泳在血清M蛋白鉴定中的应用 [J], 甘勇;汪玄;高学慧;叶阿里1
5.免疫固定电泳技术在鉴定多发性骨髓瘤M蛋白上的应用 [J], 周晖;王丁
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

智能识别鉴定M蛋白分型

６７６２国际检验医学杂志２０２０年１１月第４１卷第２１期㊀I n t J L a bM e d,N o v e m b e r２０２０,V o l．４１,N o．２１论㊀㊀著智能识别鉴定M蛋白分型王仁浩１,谢㊀婧２,管仲斌１,谢松业１ә(１．上海兰卫医学检验所股份有限公司医学检验科,上海２００３３５;２．澳大利亚阿德莱德大学,澳大利亚南澳大利亚州阿德莱德５００５)㊀㊀摘㊀要:目的㊀计算机能做到与医学检验专家一样,智能快速准确地识别M蛋白的成分并鉴定出是哪一类型的M蛋白病.方法㊀采集免疫固定电泳后的样本图片,经电脑扫描后转换形成一维数据,为了便于智能化鉴定M蛋白成分,先在其中血清蛋白电泳中找到M蛋白带,再根据其他５个不同组分的图像信息进行综合匹配处理.为了便于参数传递,将电泳峰值数据标准化纠正,以免不同因素引起偏差干扰.结果㊀如果待测患者的峰值(除清蛋白)比相应正常质控品峰值大,且峰高与峰宽之比大于４ʒ１即找到M蛋白带,根据是否有M蛋白带和健康人的免疫固定电泳６组的一维数据的峰高与峰宽的阈值范围来判断患者血清免疫固定电泳某组分峰值特征是否有意义,即患有M蛋白血症.结论㊀采用计算机编程可对免疫固定电泳图谱中血清蛋白电泳及各组分实现自动识别㊁分类㊁综合分析,给出正确鉴别结果,与传统方法比较无差异,可为临床医生鉴別诊断提供科学依据.关键词:智能;㊀M蛋白分型;㊀免疫固定电泳D O I:１０．３９６９/j．i s s n．１６７３Ｇ４１３０．２０２０．２１．０２７中图法分类号:R７３３．３;R７３０．４５文章编号:１６７３Ｇ４１３０(２０２０)２１Ｇ２６７６Ｇ０５文献标识码:AI n t e l l i g e n t r e c o g n i t i o na n d i d e n t i f i c a t i o no fM p r o t e i n t y p i n gWA N GR e n h a o１,X I EJ i n g２,G U A N Z h o n g b i n１,X I ES o n g y e１ә(１．D e p a r t m e n t o f M e d i c a lL a b o r a t o r y,S h a n g h a iL a b w a y C l i n i c a lL a b o r a t o r y C o．,L t d．,S h a n g h a i２００３３５,C h i n a;２．U n i v e r s i t y o f A d e l a i d e,A d e l a i d e,S o u t hA u s t r a l i a５００５,A u s t r a l i a)A b s t r a c t:O b j e c t i v e㊀A s t h e s a m ew i t hm e d i c a l l a b o r a t o r y e x p e r t s,c o m p u t e r s c a n a l s o r e c o g n i z e t h e c o m p o n e n t s o fM p r o t e i n q u i c k l y a n d a c c u r a t e l y,a n d i d e n t i f y w h i c h t y p e o fM p r o t e i nh a d c a u s e dd i s e a s e．M e t h o d s㊀T h e s a m p l e p i c t u r e s o f i mm u n o f i x a t i o ne l e c t r o p h o r e s i sw e r e s c a n n e d a n d t r a n s f o r m e d i n t oo n eＧd i m e n s i o n a l d a t a．I no r d e r t o f a c i l i t a t e t h e i n t e l l i g e n t i d e n t i f i c a t i o no fM p r o t e i n c o m p o n e n t s,t h e b a n do fM p r o t e i n i n t h e s e r u m p r o t e i n e l e c t r o p h o r e s i sw a s f o u n do u t f i r s t,a n d t h e n c o m p r e h e n s i v em a t c h i n gp r o c e s s i n g b a s e d o n t h e i m a g e i n f o r m aＧt i o no f t h e５d i f f e r e n tc o m p o n e n t s f r o mt h e M p r o t e i n w a s p e r f o r m e d．I no r d e rt of a c i l i t a t et h e p a r a m e t e r t r a n s f e r,t h e e l e c t r o p h o r e t i c p e a kd a t aw e r es t a n d a r d i z e da n dc o r r e c t e dt oa v o i dt h e i n t e r f e r e n c eo fd i f f e r e n t f a c t o r s．R e s u l t s㊀I f t h e p e a k(e x c e p t a l b u m i n)o f t h e p a t i e n t u n d e r t e s tw a s l a r g e r t h a n t h e p e a ko f t h e c o r r eＧs p o n d i n g n o r m a l q u a l i t y c o n t r o l,a n d t h e r a t i oo f t h e p e a kh e i g h t t o t h e p e a kw i d t hw a s g r e a t e r t h a n４ʒ１,i t w a s i n d i c a t e t h a t t h eM p r o t e i nb a n dw a s f o u n d o u t．A c c o r d i n g t o t h e t h r e s h o l d r a n g e o f p e a kh e i g h t a n d p e a k w i d t ho f６g r o u p s o f o n eＧd i m e n s i o n a l d a t a o fM p r o t e i n a n d i mm u n o f i x a t i o n e l e c t r o p h o r e s i s o f h e a l t h y p e o p l e, i t c o u l d b e j u d g e dw h e t h e r t h e p e a k c h a r a c t e r i s t i c s o f a c o m p o n e n t i n s e r u mi mm u n o f i x a t i o n e l e c t r o p h o r e s i s o f p a t i e n t sw e r em e a n i n g f u l,t h a t i f t h e y h a dM p r o t e i n．C o n c l u s i o n㊀T h e c o r r e c t i d e n t i f i c a t i o n r e s u l t s c a n b e p r oＧv i d e db y c o m p u t e r p r o g r a mm i n g t h r o u g ha u t o m a t i c a l l y i d e n t i f y i n g,c l a s s i f y i n g a n d c o m p r e h e n s i v e l y a n a l y z i n g t h e s e r u m p r o t e i n e l e c t r o p h o r e s i sm a p s．T h e r e i s n o s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e c o m p a r e dw i t h t h e t r a d i t i o n a lm e t hＧo d．T h eb a s e f o r c l i n i c a l d i f f e r e n t i a l d i a g n o s i s c a na l s ob e p r o v i d e db y t h i sm e t h o d．K e y w o r d s:i n t e l l i g e n t;㊀M p r o t e i n;㊀t y p i n g;㊀i mm u n o f i x a t i o ne l e c t r o p h o r e s i s㊀㊀M蛋白分型种类多,诊断方法除流式细胞外[１Ｇ２],血清蛋白电泳及免疫学方法已成为确诊M蛋白血症作者简介:王仁浩,男,主管技师,主要从事临床免疫和生化方法学研究.㊀ә㊀通信作者,EＧm a i l:１３６７１６９２７３９＠１３９．c o m.本文引用格式:王仁浩,谢婧,管仲斌,等．智能识别鉴定M蛋白分型[J]．国际检验医学杂志,２０２０,４１(２１):２６７６Ｇ２６７９．的重要手段[３Ｇ４],其中血清免疫固定电泳对多发性骨髓癌(MM)患者血清中的单克隆免疫球蛋白(I g)进行分型鉴定具有高特异性和高灵敏性[５].虽然免疫固定电泳图谱简单,但在目前临床医学检验中对M蛋白的分型㊁判断㊁识别均是通过人工肉眼观察,易产生主观判断误差及漏判.本文釆用计算机智能鉴定免疫固定电泳M蛋白成分主要的思考方法是先找到M 蛋白带,再根据其他５个不同组分的图像信息进行综合匹配处理.根据健康人的免疫固定电泳６组的一维数据的峰高与峰宽的阈值范围来判断患者血清免疫固定电泳某组分峰值特征是否有意义,即患有M 蛋白血症.最后,鉴别出不同类型的M蛋白,并给出结果.这样大大提高了M蛋白血症的筛查效率,减少了人为误差,为临床诊治和预后提供了科学依据.１㊀资料与方法１．１㊀一般资料㊀标本采集:１５例免疫固定电泳(书)示范图片[６],３５例M蛋白血症标本中包括２０例不同类型M蛋白血症患者和１５例健康人.标本由上海交通大学附属第一人民医院实验室提供.１．２㊀仪器与试剂㊀(１)试剂:美国H e l e n a公司提供,试剂批号:３４１５和３４１６和３４１７;(２)仪器设备:全自动快速电泳分析仪由美国H e l e n a公司提供,为S P I F E３０００型或S P I F E４０００型;(３)参数设置和操作步骤:详见R E P电泳仪操作规程;(４)扫描仪:C a n o n K EW３６８２３.１．３㊀方法１．３．１㊀免疫固定电泳测定㊀方法学原理:免疫固定电泳将血清或其他标本在琼脂(醋酸纤维素)平板上做区带电泳,然后在其上加入已知相应单价抗血清,当抗体与其区带中的单克隆I g结合后,便形成抗原抗体复合物沉淀(固定)下来.通过漂洗和染色,呈现浓而狭窄的着色区带,即可判断单克隆I g的轻链和重链类型.一般免疫固定电泳鉴定M蛋白成分主要由６个组分组成:(１)蛋白电泳;(２)I g G;(３)I g A;(４) I g M;(５)免疫球蛋白κ链;(６)免疫球蛋白λ链.第１组分为总的血清蛋白成分,第２~４组分为重链 (其实免疫球蛋白是由２条重链和２条轻链组成),第５~６组分为轻链,共由６个组分的电泳带组成.健康人免疫固定电泳中的蛋白电泳只出现清蛋白等５种蛋白成分,不出现M蛋白成分区带,且I g G㊁I g A㊁I g M 及κ链和λ链电泳带颜色较浅,扫描后一般峰宽大于峰高.采用不同的颜色把３幅峰形电泳图合并为一张电泳图,便于直观显示给医生,为诊断疾病提供合理的依据.１．３．２㊀设计思路㊀首先,把６幅图像经过扫描转换成数据信息.其次,将二维数据转换成一维数据,为了便于智能化鉴定M蛋白成分,采用不同的颜色把６幅电泳图数据信息绘制成一张电泳图,先在其中血清蛋白电泳中找到M蛋白带,再根据其他５个不同组分的图像信息进行综合匹配处理.为了便于参数传递,根据健康人的免疫固定电泳６组的一维数据的峰高与峰宽阈值范围来判断患者血清免疫固定电泳某组分峰值特征是否有意义,即是否患有M蛋白血症.最后鉴别出不同类型的M蛋白,并给出结果.免疫固定电泳智能化鉴定M蛋白成分的电泳流程见图１.智能化鉴定免疫固定电泳M蛋白成分电泳特点,(１)正常:若蛋白电泳没有找到M蛋白带,而且重链和轻链峰值特征全部无意义输出正常;(２)正常?建议复做:仅仅蛋白电泳峰值有意义其余峰值无意义输出正常?建议复做 ;(３)游离κ㊁λ型轻链病:若蛋白电泳出现M蛋白,重链峰值特征无意义且κ和λ型轻链同时有特征性意义时输出游离κ㊁λ型轻链病;(４)游离κ型合并κ型I g A单克隆免疫球蛋白病:当κ或λ有２个有意义峰值a和b时,若I g A有一个有意义的峰值c,a与c横坐标相同,b与c坐标不同,则输出游离κ型合并κ型I g A单克隆免疫球蛋白病;(５)游离κ型轻链病:若κ或λ有特征意义峰值,并且重链峰值全部无特征意义,则输出游离κ型轻链病 ;(６)κ型I g A单克隆免疫球蛋白病:若蛋白电泳出现M蛋白带,κ或λ峰值有价值,同时存在有价值的I g A或I g M 或I g G,并且前一组峰值横坐标与后一组峰值横坐标相符,则输出κ型I g A单克隆免疫球蛋白病;(７)κ型I g A单克隆免疫球蛋白病(?):若蛋白电泳出现M蛋白带,κ或λ有价值峰值,同时存在有价值的I g A或I g M或I g G,但前一组峰值横坐标与后一组峰值横坐标不相符,则输出κ型I g A单克隆免疫球蛋白病(?); (８)多克隆病:κ或λ有价值,同时I g A或I g M或I g G 为有价值宽峰(波高＞１００同时波宽＞波高),其中峰值有意义指峰高大于峰宽４ʒ１.重链指I g G㊁I g A㊁I g M,轻链指κ型㊁λ型.１．３．３㊀实验过程㊀(１)利用按键精灵电脑软件把５０幅免疫固定电泳图片按图中不同深浅的蓝色条带转化为数据信息,再将二维数据转化为一维数据.根据M蛋白与蛋白电泳对应的位置㊁区带深浅㊁宽窄的不同即峰值数据的位置和大小及左右峰谷的长度,确立峰高度与峰宽度的比例范围,血清M蛋白在蛋白电泳中可在α２至γ区形成浓度高的区带,扫描图中可见基底较窄,高而尖锐的峰,在γ区蛋白峰高大于峰宽,在β区和α２区也是如此,以此参数来判断M蛋白的真伪,大大减少了肉眼判断的误差,见图２.７７６２国际检验医学杂志２０２０年１１月第４１卷第２１期㊀I n t J L a bM e d,N o v e m b e r２０２０,V o l．４１,N o．２１１．４㊀统计学处理㊀采用S P S S １９．０统计软件进行数据分析处理.智能和传统两种方法鉴定M 蛋白成分的差异采用χ２检验进行比较,以P ＜０．０５为差异有统计学意义.图１㊀㊀智能化鉴定M蛋白带流程图㊀㊀注:基线与I gM 重合.图２㊀㊀免疫固定电泳λ型I gG 单克隆免疫球蛋白病２㊀结㊀㊀果２．１㊀把图片生成的数据用自编软件的程序转化为直观的一个峰值图谱,储存在E x c e l 文档中.２．２㊀按免疫固定电泳的区带位置染色的深浅和峰高与峰宽的比例关系,采用计算机语言编程,智能化鉴定免疫固定电泳M 蛋白成分,最后鉴别出不同类型的M 蛋白,并做出结果.２．２．１㊀采用免疫固定电泳法用S P I F E ３０００或４０００型全自动电泳仪获得血清标本的６张凝胶电泳图.２．２．２㊀扫描６张电泳图片,输入计算机.２．２．３㊀用按键精灵软件,将６张电泳图片扫描转换成一维数据储存在E x c e l 文档里.２．２．４㊀用自编软件打开步骤C 获得的E x c e l 文档数据,软件可以从中获得免疫固定电泳中蛋白电泳(D Y )㊁I g G ㊁I g A ㊁I gM ㊁κ型㊁λ型数据.获得各条线的参数,包括:峰值坐标㊁左波谷坐标㊁右波谷坐标㊁波宽是否大于波高峰值㊁各线峰值;然后根据患者蛋白电泳中ɑ至λ区域的峰值与标准峰值(健康人)同区域的数据比较大小.如果患者输出的峰值比标准峰值大,则这条线的峰还要进一步判断是否有价值,也就是根据左波谷坐标至右波谷坐标的峰宽是否大于峰高,如果峰高大于峰宽,判断为有价值(含M 蛋白带),然后进一步按流程鉴定为哪一类型的M 蛋白.２．２．５㊀输出鉴别结果㊀根据判断M 蛋白带的理论依据寻找属于哪一类单克隆免疫球蛋白病,并打印报告,包括κ和λ链的比值.κ和λ链的比值在采用传统免疫固定电泳方法肉眼判断时是无法辨别的,因为肉眼不能判断颜色的深浅确切值,而软件采取的是按键精灵的捕色软件,它可以测出κ和λ链的颜色深浅具体值,然而κ和λ链的比值在诊断多发性骨髓瘤是很有价值的.这个结果和免疫散射比浊法测定κ和λ链的比值具有良好相关性(n ＝３８,r ＝０．８８９),经统计κ和λ链比值,健康人参考值为１．１６ʃ０．２(n ＝３２),所有M 蛋白血症患者中κ型患者κ和λ的比值明显大于１．３６,而λ型患者κ和λ的比值明显小于０．９６,这个软件可以同时测定κ和λ链,减少了患者再次测定κ和λ链所带来的麻烦.本文提供一种利用鉴定免疫固定电泳M 蛋白成分的系统,该系统包括以下设备:A 步骤的设备为S P I F E ３０００或４０００型全自动电泳仪,获得血清标本的６张凝胶电泳图;B 步骤的设备为扫描仪:C a n o n K E W ３６８２３,扫描６张电泳图片,输入计算机;C 步骤的设备为计算机用按键精灵软件,将６张电泳图片扫描转换成一维数据储存在E x c e l 文档中;D 步骤的设备为自编软件安装计算机,它可以直接打开步骤C 获得的E x c e l 文档数据,然后进一步按流程鉴定为哪一种类型的M 蛋白并输出鉴别结果及图像.见图３~５.图３㊀㊀κ型I gM 单克隆免疫球蛋白病２．３㊀实验的临床应用㊀由作者和临床免疫专家[６]选８７６２国际检验医学杂志２０２０年１１月第４１卷第２１期㊀I n t J L a bM e d ,N o v e m b e r ２０２０,V o l ．４１,N o ．２１出５０幅免疫固定电泳图像包含血清蛋白电泳图像.选择原则是既满足于常规检查的M 蛋白类型,又包括很少见的类型和书图谱上的特例图像,经扫描成图片后,用按键精灵电脑软件把图片转化为数据.采用计算机编程智能化鉴定免疫固定电泳M 蛋白成分,通过对５０幅免疫固定电泳图像和血清蛋白电泳图像的数据分析,评价自动扫描㊁鉴定的整体性能.图４㊀㊀游离λ型单克隆免疫球蛋白病图５㊀㊀κ、λ型I gG 单克隆免疫球蛋白病２．３．１㊀实验结果分析㊀采用联想电脑M ７１５０,C P U ２５６M 内存,完成资料标本５０幅扫描㊁分析及鉴定,M 蛋白区带３５,正确识别３３(９４．３％),其中M 蛋白I g G 区带κ型１０,正确识别１０(１００％),λ型５,正确识别５(１００％),κ㊁λ混合型２,正确识别２(１００％);M 蛋白I gA 区带κ型３,正确识别３(１００％),λ型＋游离λ型１,正确识别１(１００％);M 蛋白I gM 区带κ型３,正确识别３(１００％),λ型１,正确识别１(１００％),κ㊁λ混合型１,正确识别１(１００％),混合型λ型I g M ＋κ型I g G１,正确识别１(１００％),游离κ区带１,正确识别１(１００％),游离λ区带７,正确识别７(１００％).正常人区带１５,正确识别１５(１００％).２．３．２㊀性能验证㊀智能和传统两种方法鉴定M 蛋白成分差异无统计学意义(P ＞０．０５).智能化鉴定M 蛋白成分方法的正确度为９６．０％,灵敏度为９４．３％,特异度为１００．０％,假阴性率(漏诊率)为４．０％,假阳性率(误诊率)为０．０％,阴性似然比为６,K a p p a 值为０．９０８,阳性预测值为１００．０％,阴性预测值为８８．０％.３㊀讨㊀㊀论㊀㊀M 蛋白血症是一种浆细胞异常增生的恶性肿瘤,浸润骨髓和软组织产生M 球蛋白及多肽,引起骨骼破坏㊁肾脏病变和贫血,但该病起病缓慢,无症状期长短不定,短至几个月长达十余年,由于症状多样化及个体差异,出现的临床表现繁多和复杂,初发病常常不被发现而多被误诊.亚州人MM 发病率为０．５/１０００００~１．０/１０００００[７],７０岁以上的老年人发生率为３％,通过骨髓涂片㊁组织活检㊁X 线片来诊断外,其他血清蛋白电泳及免疫学方法已成为确诊MM 的重要手段,其中血清免疫固定电泳是对MM 患者血清中的单克隆免疫球蛋白进行分型鉴定,具有高特异度和高灵敏度,也可以识别M 蛋白双克隆[８].目前缺乏标准化鉴别分型方法,临床医学检验中对M 蛋白的分型㊁判断㊁识别都是人工肉眼观察,易产生主观判断误差及漏判.应用计算机模式识别技术,能做到与医学检验专家一样,智能快速㊁准确地识别细胞[９]和D N A 凝胶电泳分子量测量[１０],但未见智能鉴定M 蛋白的成分.本系统应用电脑扫描模式识别技术,采用可对血清蛋白电泳和免疫固定电泳图谱实现自动识别㊁分类㊁综合分析给出正确鉴别结果,该方法可以同时计算出κ和λ链,因为肉眼不能判断颜色的确切深浅值,然而κ和λ链的比值诊断MM 是很有价值的[１１Ｇ１２].这个软件可以同时测定κ和λ链比值,减少了患者再次测定κ和λ链所带来的麻烦.通过对５０幅免疫固定电泳图像的数据分析,虽然合并游离轻链判断有漏检,但评价自动扫描整体性能的鉴定及临床应用准确度达９６％,K a p p a 值达０．９０８,与传统方法比较差异无统计学意义(P ＞０．０５).４㊀结㊀㊀论㊀㊀计算机能做到与医学检验专家一样,智能快速㊁准确地识别M 蛋白的成分,并鉴定出是哪一种类型的M 蛋白病,提高了检查效率,减少了人为误差,给临床实验室带来了极大的方便,也为临床医生鉴別诊治和预后提供了科学依据.参考文献[１]程薇,李玉龙,黄洲风,等．血清免疫固定电泳分型结合流式细胞术免疫表型分析在诊断多发性骨髓瘤中的作用[J ]．广东医学,２０１８,３９(２):２６５Ｇ２６７．(下转第２６８８页)９７６２国际检验医学杂志２０２０年１１月第４１卷第２１期㊀I n t J L a bM e d ,N o v e m b e r ２０２０,V o l ．４１,N o ．２１[１８]韩冰,吴翠萍,赵芯,等．数字P C R和荧光定量P C R诊断急性期布鲁菌病的灵敏度比较初步研究[J]．传染病信息,２０１９,３２(４):３１２Ｇ３１６．[１９]宋能,谭杨,罗凤玲,等．微滴数字P C R定量检测全血样品中结核分枝杆菌特异C F P１０基因[J]．中国生化药物杂志,２０１６,３６(２):１０Ｇ１５．[２０]徐万洲,李娟,何晓云,等．血清２０１９新型冠状病毒I g M 和I g G抗体联合检测在新型冠状病毒感染中的诊断价值[J]．中华检验医学杂志,２０２０,４３(３):２３０Ｇ２３３．[２１]MU D,Y A NL,T A N G H,e t a l．As e n s i t i v e a n da c c u r a t e q u a n t i f i c a t i o nm e t h o d f o r t h ed e t e c t i o no fh e p a t i t i sBv iＧr u s c o v a l e n t l y c l o s e d c i r c u l a rD N Ab y t h e a p p l i c a t i o n o f ad r o p le td i g i t a l p o l y m e r a s e c h a i n r e a c t i o n a m p l if i c a t i o n s y s t e m[J]．B i o t e c h n o l L e t t,２０１５,３７(１０):２０６３Ｇ２０７３．[２２]A B A C H I N E,C O N V E R SS,F A L Q U ES,e t a l．C o m p a r iＧs o n o fr e v e r s eＧt r a n s c r i p t a s e q P C R a n d d r o p l e t d ig i t a l P C Rf o rth e q u a n ti f i c a t i o no fd e n g u ev i r u sn u c l e i ca c i d [J]．B i o l o g i c a l s,２０１８,５２(１):４９Ｇ５４．[２３]李晓燕,朱丛中,郭丽茹,等．嵌合人偏肺病毒(h M P V)表位的重组流感病毒免疫保护效果[J]．中华微生物学和免疫学杂志,２０２０,４０(１):１１Ｇ１８．[２４]W E E R A K O O N K G,G O R D O NC A,W I L L I AM SG M, e t a l．D r o p l e td i g i t a lP C Rd i a g n o s i so fh u m a ns c h i s t o s oＧm i a s i s:p a r a s i t e c e l lＧf r e eD N Ad e t e c t i o n i nd i v e r s e c l i n i c a l s a m p l e s[J]．J I n f e c tD i s,２０１７,２１６(１２):１６１１Ｇ１６２２．[２５]J E A N N O TE,B E C E T T EV,C AM P I T E L L IM,e t a l．C i rＧc u l a t i n g h u m a n p a p i l l o m a v i r u sD N Ad e t e c t e du s i n g d r o pＧl e td i g i t a lP C Ri nt h es e r u m o f p a t i e n t sd i a g n o s e d w i t h e a r l y s t a g e h u m a n p a p i l l o m a v i r u sＧa s s o c i a t e d i n v a s i v e c a rＧc i n o m a[J]．JP a t h o l C l i nR e s,２０１６,２(４):２０１Ｇ２０９[２６]U S H I O R,Y AMAMO T O M,N A K A S H I MA K,e ta l．D i g i t a l P C Ra s s a y d e t e c t i o n o f c i r c u l a t i n g m y c o b a c t e r i u mt u b e r c u l o s i sD N A i n p u l m o n a r y t u b e r c u l o s i s p a t i e n t p l a sＧm a[J]．T u b e r c u l o s i s,２０１６,９９:４７Ｇ５３．[２７]席晓霞．初生婴儿肠道菌群与母体各部位菌群相关性研究[D]．呼和浩特:内蒙古农业大学,２０１７．[２８]郑璐．微液滴数字P C R技术和非分子诊断方法对非中性粒细胞缺乏宿主肺曲霉菌病的临床应用价值研究[D]．北京:北京协和医学院,２０１９．[２９]WU XL,L I N H,C H E NSJ,e t a l．D e v e l o p m e n t a n da pＧp l i c a t i o no far e v e r s et r a n s c r i p t a s ed r o p l e td i g i t a lP C R(R TＧd d P C R)f o r s e n s i t i v e a n d r a p i d d e t e c t i o n o f J a p a n e s e e n c e p h a l i t i s v i r u s[J]．JV i r o lM e t h o d s,２０１７,２４８(１):１６６Ｇ１７１．[３０]P H O L W A T S,S T R O U PS,F O O N G L A D D AS,e t a l．D i g i t a l P C Rt o d e t e c t a n d q u a n t i f y h e t e r o r e s i s t a n c e i nd r u g r e s i s t a n t m y c o b a c t e r i u m t u b e r c u l o s i s[J]．P L o S O n e,２０１７,８(２): e５７２３８．[３１]WHA L E A S,B U S H E L L C A,G R A N T P R,e t a l．D eＧt e c t i o no f r a r ed r u g r e s i s t a n c e m u t a t i o n sb y d i g i t a lP C R i nah u m a ni n f l u e n z aav i r u s m o d e ls y s t e m a n dc l i n i c a l s a m p l e s[J]．JC l i n M i c r o b i o l,２０１６,５４(２):３９２Ｇ４００．[３２]D O B N I KD,D E M S A RT,HU B E R I,e t a l．I n t e rＧl a b o r a t oＧr y a n a l y s i s o f s e l e c t e d g e n e t i c a l l y m o d i f i e d p l a n t r e f e r e n c e m a t e r i a l s w i t h d i g i t a l P C R[J]．A n a l l B i o a n a l C h e m,２０１８,４１０(１):２１１Ｇ２２１．[３３]K L I N E M C,HO L D E N M J,S C O T T C,e t a l．S t a n d a r d r e f e r e n c em a t e r i a l２３６６f o rm e a s u r e m e n t o f h u m a nc y t oＧm e g a l o v i r u sD N A[J]．J M o lD i a g n,２０１３,１５(２):１７７Ｇ１８５．(收稿日期:２０２０Ｇ０２Ｇ０２㊀修回日期:２０２０Ｇ０６Ｇ１０)(上接第２６７９页)[２]唐洁,梁效功,薛丽,等．多参数流式细胞术在多发性骨髓瘤早期诊断中的应用价值[J]．中国卫生检验杂志,２０１６,２６(２):２３６Ｇ２３９．[３]郭晓聪,徐晓娅,刘伟平．血清蛋白电泳和免疫固定电泳对多发性骨髓瘤的诊断价值[J]．实用医药杂志,２０１９,３６(５):４２７Ｇ４２９．[４]毕德成．免疫球蛋白定量和免疫固定电泳对多发性骨髓瘤的临床诊断价值研究[J]．中外女性健康研究,２０１７,２５(１２):５５Ｇ５６．[５]陈云峰,葛亮,沈建江．免疫固定电泳及免疫球蛋白定量在多发性骨髓瘤诊断和分型中的应用[J]．中国实验诊断学,２０１６,２０(１１):８８１Ｇ８８３．[６]宋鉴清．电泳技术临床应用电泳图谱[M]．沈阳:辽宁科学技术出版社,２００６:８５Ｇ９１．[７]L E EJH,Y O O NSS,S UH C,e t a l．M u l t i p l em y e l o m a i n k o r e a:p a s t,p r e s e n t,a n d f u t u r e p e r s p e c t i v e s．e x p e r i e n c eo f t h ek o r e a nm u l t i p l em y e l o m aw o r k i n gp a r t y[J]．I n t JH eＧm a t o l,２０１０,９２(１):５２Ｇ５７．[８]杨强,侯健,陈文明,等．双克隆免疫球蛋白多发性骨髓瘤六例报告并文献复习[J]．中华血液学杂志,２０１６,３７(７):６１４Ｇ６１６．[９]MA N N A A C,N A N N I C L,L UM I N I D A,e t a l．A r t i f i c i a l i n t e l l i g e n c e t e c h n i q u e sf o re m b r y oa n do o c y t ec l a s s i f i c aＧt i o n[J]．R e p r o dB i o m e dO n l i n e,２０１３,２６(１):４２Ｇ４９．[１０]T A Y L O RD,P OW E R SD．T e a c h i n g a r t i f i c i a l i n t e l l i g e n c e t o r e a de l e c t r o p h e r o g r a m s[J]．F o r e n s i cS c iL n tG e n e t,２０１６,２５:１０Ｇ１８．[１１]唐江涛,李立新,冯伟华,等．免疫固定电泳和血轻链比值诊断以肾脏损伤为首发症状的多发性骨髓瘤的价值[J]．四川大学学报(医学版),２０１６,４７(４):５５１Ｇ５５５．[１２]吴颖涛,邹琳,黄前川,等．血清游离轻链及其比值在轻链型多发性骨髓瘤中的应用价值[J]．华南国防医学杂志,２０１９,３３(７):４５８Ｇ４６１．(收稿日期:２０２０Ｇ０２Ｇ１１㊀修回日期:２０２０Ｇ０６Ｇ１７)８８６２国际检验医学杂志２０２０年１１月第４１卷第２１期㊀I n t J L a bM e d,N o v e m b e r２０２０,V o l．４１,N o．２１。

血清蛋白电泳筛查M蛋白早期临床诊断价值

血清蛋白电泳筛查M蛋白早期临床诊断价值目的血清蛋白电泳联合血清免疫固定电泳对单克隆免疫球蛋白症诊断的价值。

方法选取对98例M蛋白阳性患者的血液标本，进行血清蛋白电泳及血清免疫固定电泳检测。

结果与血清蛋白电泳阳性率（87.25%）相比较，血清免疫固定电泳阳性率（100%）明显增高，P＜005。

结论血清蛋白电泳作为临床筛查，进一步测定血清免疫固定蛋白电泳可提高M蛋白阳性疾病的诊断；血清免疫固定蛋白电泳对M蛋白相关疾病的诊断更具有诊断价值。

标签：免疫球蛋白症M蛋白；血清蛋白电泳；免疫固定电泳M蛋白是浆细胞或 B 淋巴细胞单克隆大量增殖时所产生的一种异常的免疫球蛋白。

M 蛋白阳性是诊断B淋巴细胞或浆细胞增殖性疾病的重要指标，但M蛋白阳性患者大多缺乏特异性的症状及体征。

在临床上容易漏诊或误诊。

应用血清蛋白电泳可对M蛋白阳性疾病进行初步筛选，而应用免疫固定电泳可以对M蛋白阳性疾病进行较明确的判断，免疫固定电泳有较高的特异性和灵敏度，诊断准确率高，并可直接进行分型确认。

M蛋白血症可见于多种疾病，各科医生均有必要提高对M蛋白血症的认识。

尤其对于血清蛋白电泳出M蛋白的非MM患者应进行全面检查并应密切随访。

本文通过对98例M蛋白阳性患者的血清蛋白电泳以及免疫固定电泳检测结果进行分析，探讨它们在临床的诊断和治疗中的意义，现将结果报告如下：材料与方法一、标本来源收集在2016年8月至2018年3月我院住院部及门诊送检的血清标本检出M蛋白阳性患者98例。

二、仪器与试剂血清蛋白电泳、免疫固定电泳均采用法国SIBIA 公司CAPILLARYS-2 型全自动毛细管电泳分析仪，试剂、抗体均为原装配套。

三、实验方法按操作规程采用电泳分析仪自动完成血清蛋白电泳和血清免疫电泳得到血清蛋白电泳图谱和5个血清免疫电泳图谱。

四、统计学处理所有数据均采用spss17.0 软件对血清蛋白电泳和血清免疫固定电泳的临床诊断的敏感性进行统计分析。

采用卡方检验。

M蛋白的检测与鉴定(参考资料)

M蛋白的检测与鉴定一、M蛋白的基础知识M蛋白是浆细胞或B 淋巴细胞单克隆大量增殖时所产生的一种异常免疫球蛋白，其氨基酸组成及排列顺序十分均一，空间构象、电泳特征也完全相同，本质为免疫球蛋白或其片段（轻链、重链等）。

由于它产生于单一克隆（monoclone），又常出现于多发性骨髓瘤（multiple myeloma）、巨球蛋白血症（macroglobulinemia）、恶性淋巴瘤（malignantlym phoma）病人的血或尿中，故称M 蛋白。

这些M 蛋白大多无抗体活性，所以又称为副蛋白（paraprotein）。

M 蛋白血症可分为恶性与意义不明的两大类。

恶性M 蛋白血症多见于多发性骨髓瘤（包括轻链病）、巨球蛋白血症、重链病、7SIg M 病（Solomen －Konkel 病）、半分子病及不完全骨髓瘤蛋白病（C 端基因缺陷）等。

意义不明的M 蛋白血症（monoclonal gammopathyof undetermined significance ，M G US）又分为两种，一种是与其他恶性肿瘤（如恶性淋巴瘤）伴发者，另一种即所谓良性M 蛋白血症。

M 蛋白的检测方法主要有琼脂或琼脂糖电泳、免疫电泳、免疫固定电泳、选择免疫电泳等。

二、M蛋白的鉴定1．多发性骨髓瘤与巨球蛋白血症时的M 蛋白检测和鉴定（1）血清总蛋白定量。

90％的患者血清总蛋白含量升高（70％的患者＞100g／L），约10％的患者正常或甚至偏低（如轻链病时）。

（2）血清蛋白醋纤膜或琼脂糖电泳。

M 蛋白在电泳时出现典型的单株峰（亦称M 区带），特点是区带窄而浓，扫描时呈现尖高峰，在γ区高比宽≥2，在β区≥1。

此M 区带可因Ig的不同而出现在在γ～α2的任何区域。

M蛋白增殖的另一特点是其他各区带明显减少，显示图像较简单。

有时有的患者血中M蛋白并不高，这是由突变细胞的Ig分泌能力决定的。

这种病人的血清在电泳时M峰可不明显，易被其他蛋白掩盖，需采用稀释血清成应用其他敏感方法如免疫固定电泳来检测。

M蛋白参考值

M蛋白参考值的意义与检验方法M蛋白是指人类机体内一种名为Myeloma Protein的蛋白质，通常是由浆细胞癌引起的一种异常免疫球蛋白。

测定M蛋白的值，可以在很大程度上帮助医生进行诊断和治疗方案的制定。

下面，我们将从的意义及检验方法两个方面展开阐述。

一、的意义M蛋白的参考值是适用于临床医学中对于人类机体内M蛋白浓度的正常范围。

一般来说，的测定主要用于白血病、淋巴瘤等血液肿瘤的诊断，以及多发性骨髓瘤和其他类似疾病的监测。

在很多情况下，M蛋白对于诊断肿瘤和血液疾病的种类，以及判断疾病程度等方面起着关键作用。

对于白血病和淋巴瘤等血液肿瘤的诊断来说，M蛋白的检测可以帮助医生进行初步筛查，具有早期诊断的重要作用，同时还可以辅助医生制定更精准的治疗方案。

另外，对于多发性骨髓瘤等疾病的患者来说，M蛋白的参考值还可以帮助医生进行疾病的监测。

这种疾病通常会导致机体内M蛋白浓度超过常规的范围，因此通过长期的M蛋白检测，可以帮助医生了解患者的病情，及时制定治疗方案。

二、M蛋白的检验方法常规的M蛋白测定分为三种常见的方法，分别是免疫电泳、Immuno Turbidimetric Assay和Fluorescence In SituHybridization(FISH)技术。

1、免疫电泳免疫电泳指利用电场将蛋白质分离为不同的条带，从而测定M蛋白的浓度。

这种方法具有灵敏度和准确性高，分析结果精确等优点，但是需要复杂的实验操作和高端仪器支持，因此在日常检测过程中可以采用其他更为简便的方法。

2、Immuno Turbidimetric AssayImmuno Turbidimetric Assay是一种常用的M蛋白检测方法。

它可以在短时间内完成样本的分析，实验操作较简单，在实际检测过程中普及率较高。

该方法主要通过免疫反应将M蛋白识别并进行测定。

虽然灵敏度不及免疫电泳，但已经能够满足大多数临床检测的要求。

3、FISH技术FISH技术是指采用荧光染色技术对测定的细胞进行染色，并通过显微镜进行显示。

抗猪传染性胃肠炎M蛋白单克隆抗体的制备及部分特性鉴定

得３株抗ＴＶＭ蛋白的杂交瘤细胞系１、３２Ａ，染色体平均记数为８ＧＥＢ３Ｃ、４５９对、９２对、９细胞培养上清的效价分别为１０、１１０、１０，腹水效价分别为２×１４ ×１５Ｂ、３２Ａ／００／００／００４４０、２０、
维普资讯
第２９卷第１期１
２０年１月０７１
中国预防兽
医学报
Ｖｏ．９．．１１２Ｎｏ１
ＮＯＶ．２００７
ＣｈｎｓｏｒａｆＰｅｅｔｅＶｅｅｎｒｅｉｉｅｉｅｅＪｕｎｌｒｖｎｉｔｒａｙＭｄｃｎｏｖｉ
ｍｅｈｄＴｈｅｙｒｄｍａｓｒｓａａｎｔＴＧＥＭＰｄｓｇａｅｓ１，３，Ａ５ｒｓｅｔｅｙｗｅｅｏｍｉｅ．ｅｅＭｃｒｔｏ．ｒｅｈｂｉｏｅｅｇｉｓｉＶｅｉｎｔｄａＢ３Ｃ２４ｅｐｃｉｌ，ｒｂｎｄＴｈｓＡｂｗｅｅｖｈｇｌｐｃｆｏＴＧＥｂｎｉｃＩＡｕｉｎｔｒａｔｗｉＥＤＶ．ＰＶｎｒＴｅＭｃｒｓｄｆｒＩＮｏｄｔｃｉｈｙｓｅｉｃｔｉＶｙｉｄｒｔＥＬＳｂｔｄｄ ’ ｅｃｔＰｅｈＲａｄＰｖ．ｈＡｂｗｅｅｕｅｏＦｔｅｅｔＴＧＥ．ＢＲＳｃｌｎｅｔｄｗｉＧＥｓｏｄｓｒｎｌｅｌｗｎｒｅｕｒｓｅｔｉｙｏｌｓａｄｃｌｍｅｒｎｓＶＩｅｌｉｆｃｅｔＴｓｈＶｈｗｅｔｏｇｙｙｌｏａｄｇｅｎｆｏｅｃｎｎｃｔｐａｍｎｅｌｌｍｂａｅ．ＭｃＡｂｒｐｒｄｉｈｓｗｏｋｍａｒｖｄａｕｂｅｔｏｓｆｒａｃｒｔｎａｉｉｇｏｉｆＴＧＥｅｏｔｔｉｒｙｐｏｉｅｖｌａｌｌｃｕａｅａｄｒｐｄｄａｅｎｏｏｎｓｓｏＶ．

M蛋白的鉴别诊断

Spectrum of plasma cell dyscrasia ASH educational program 2012
POEMS 综合征
浆细胞病的转化
WM
IgM
Anemia Renal insufficiency
Amyloidosis Hyperviscosity
PC克隆演变
活动性MM诊断标准 (WHO)
随访24个月，高血压，肾衰，呼衰
无症状性或冒烟型骨髓瘤 (Smoldering Myeloma, SMM)的诊断
标准(WHO)
• 血清M蛋白≥30g/L 和/或 • 骨髓克隆性浆细胞≥10% • 无相关器官或组织损伤，无症状
MGUS，SMM和MM的鉴别
骨髓浆细胞
MGUS
SMM
MM
<10% 形态正常 >10% 克隆性浆 >10% 幼稚浆细
MM皮肤表现－坏疽性脓皮病
F61, 发现M蛋白5年，皮肤破溃 2.5年
合并高血压，糖尿病 2009年:IgAλ+, IgA 20.1g/L 2011年：皮肤破溃，活检提示坏
疽性脓皮病 BM：10.5%为成熟浆细胞，偶见
双核浆细胞。无CRAB M蛋白稳定无治疗应用Thal＋Dex后皮损好转
CD20(++),AE1/AE3(-), MPO(-), 网织(+) • LN病理:NHL(B细胞型),CD43(+),CD3(+), CD79a
(+),CD20(++)。
IgM(g/L) COMP CHOP±R
60
50
40
30
20
10 观察
0
R为基础
从IgM升高－死亡：OS 16年升高9年后开始治疗

M蛋白检测在MM诊治中的思考

M蛋白检测在多发性骨髓瘤诊治中的思考王金英多发性骨髓瘤(multiplemyeloma，MM)是以单克隆浆细胞异常增生并分泌大量单克隆免疫球蛋白为特征的一种恶性肿瘤性疾病，这种大量单克隆免疫球蛋白就是M蛋白。

M蛋白的本质是无功能的免疫球蛋白或免疫球蛋白的片段。

它是MM的主要特征之一，也是MM重要的肿瘤标志物。

MM好发于中老年人，近年来发病率有逐年上升的趋势，且发病年龄呈现年轻化趋势[1]。

M蛋白的检测对于MM的诊断具有重要的意义。

而实验室常规检验项目缺乏特异性，不能有效地检测出M蛋白，导致MM漏诊或误诊率较高[2]。

目前M蛋白检测主要有以下检测方法，现将常见检测方法的特点和意义汇总如下：1．血清蛋白电泳（SPE）1.1血清蛋白电泳的原理由于蛋白质具有两性解离性质，在不同PH值的缓冲液中可以带负电荷或正电荷，在电场中向阳极或阴极运动，称为电泳（electrophoresis）。

由于其等电点不同，分子大小、形状和荷质比的不同，使不同蛋白质分子具有不同的电泳迁移率，在一定的支持介质中可借以分离各种蛋白质。

电泳后由正极到负极可分为，白蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白和γ-球蛋白五个区带。

血清蛋白电泳可以初步了解血清蛋白中主要组分的是否正常，是否存在可疑M蛋白。

通过血清蛋白电泳还可以反映肝脏疾病、肾脏疾病以及风湿免疫系统疾病等的病变情况。

1.2血清蛋白电泳常用的两种方法目前临床实验室应用最多的血清蛋白电泳的方法主要有两种：毛细管电泳法和琼脂糖凝胶电泳法。

两种方法各有优缺点。

毛细管电泳法自动化程度比较高，可以和常规生化检测项目组合，出报告时间短，适合大批量人群的筛查。

琼脂糖凝胶电泳相对于毛细管电泳法来说，相对耗时费力，但是琼脂糖凝胶法有实物图谱，条带的识别度较好，对于浓度不高的M蛋白有明显的优势。

M蛋白检测以琼脂糖凝胶电泳应用最为普遍。

1.3血清蛋白电泳检测M蛋白的特点血清蛋白电泳是唯一的可以对M蛋白定量实验，这种定量是利用专门软件人为手工描记出M蛋白的百分比，其结果是近似结果；其结果的判断和定量都有赖于检测人员具有一定的经验，同时具有某种程度的主观性；血清蛋白电泳对于M蛋白检测阳性率大约为80%左右；同时灵敏度较高的检测区域主要在γ球蛋白区域和β球蛋白区域的一部分。

M蛋白实验室检测及临床应用

完整的单克隆免疫球蛋白血清蛋白电泳
血清免疫固定电泳
单克隆游离轻链尿免疫固定电泳血清游离轻链
初筛
血清蛋白电泳
血清蛋白电泳原理
毛细管血清蛋白区带电泳
炎症肝病肾病浆细胞病
毛细管血清蛋白电泳图谱
M蛋白的筛查
• 血清蛋白电泳是筛查M蛋白的最佳方法
在区出现异常峰（M蛋白？）
正常血清
单克隆 Ig
高浓度M蛋白
微量的M蛋白
M蛋白出现在β1区
M蛋白出现在β2区
IgA*
多个M蛋白
中华检验医学杂志, 2013, 36:1150-1153
单克隆球蛋白血症发生率
• 22193 例标本筛查 • 354 例血清蛋白电泳异常（1.6%） • 206 例免疫固定电泳阳性（0.92%）
研究结果
序号
renal significance, MGRS ）* • 华氏巨球蛋白血症（Waldenstrom Macroglobulinemia, WM/LPL） • 原发性淀粉样变性（Primary Amyloidosis, pAL） • 轻链沉积病（Light Chain Deposition Disease, LCDD） • 重链病（ Heavy Chain Disease, HCD ） • 部分B细胞淋巴瘤（CLL/SLL；DLBCL） • ……
Bone lesions
M蛋白-重要线索
M蛋白
骨髓克隆性浆细胞 /浆细胞瘤
M蛋白筛查是关键
有症状MM
√
≥ 10%
ROTI √
无症状MM (冒烟型,SMM)
√
10-60%
意义未明M蛋白病
MGUS
√
< 10%

在骨髓瘤,血清中m蛋白的诊断标准

骨髓瘤是一种恶性肿瘤，它源自骨髓中的浆细胞并引起异常的免疫球蛋白的产生。

血清中的m蛋白是骨髓瘤的一个重要诊断标志，其浓度和特征可以帮助医生确定骨髓瘤的诊断和治疗方案。

本文将对血清中m蛋白的诊断标准进行详细介绍，帮助读者更深入地了解骨髓瘤的诊断过程和标准，为临床实践提供参考。

1. 血清中m蛋白的作用血清中m蛋白，也称为单克隆免疫球蛋白，是由浆细胞恶性增殖造成的，它是一种异常的免疫球蛋白，通常无法起到免疫功能，但却会对机体造成危害。

在骨髓瘤的诊断中，血清中m蛋白的浓度和特征可以帮助医生确定病情的严重程度和治疗方案。

2. 血清中m蛋白的检测方法对于骨髓瘤患者，血清中m蛋白的检测是非常重要的。

常见的检测方法包括蛋白电泳、免疫固定电泳和免疫荧光法等。

通过这些方法，可以确定血清中m蛋白的类型和浓度，以及其与其他蛋白的比例，为骨髓瘤的诊断提供重要依据。

3. 血清中m蛋白的诊断标准在骨髓瘤的诊断中，血清中m蛋白的浓度和特征是非常重要的。

通常情况下，根据血清中m蛋白的特征，可以将骨髓瘤分为IgG型、IgA型、IgM型、轻链型和非分泌型等。

根据其浓度和变化趋势，可以帮助医生确定病情的严重程度和治疗方案。

一般来说，诊断骨髓瘤需要满足以下条件：a. 血清中m蛋白浓度持续增高，或存在明显的蛋白电泳异常带。

b. 骨髓穿刺或骨髓活检显示存在异常浆细胞增殖。

c. 存在骨骼破坏、高钙血症、肾功能不全等伴发症状。

4. 血清中m蛋白的治疗监测血清中m蛋白的浓度和特征可以作为骨髓瘤治疗效果的监测指标。

在治疗过程中，医生可以通过定期检测血清中m蛋白的浓度和特征，来评估患者的病情变化和治疗效果。

通常情况下，对于骨髓瘤的治疗监测，需要满足以下条件：a. 血清中m蛋白浓度和特征能够稳定在正常范围内。

b. 骨髓活检显示异常浆细胞数量明显减少或消失。

c. 患者的临床症状得到明显改善。

通过以上的介绍，我们可以看到血清中m蛋白在骨髓瘤的诊断和治疗过程中起到了非常重要的作用。

M蛋白鉴定的常用程序

M蛋白鉴定的常用程序
孙卫红;翟玉华;刘金英
【期刊名称】《中国血液流变学杂志》
【年(卷),期】2006(016)003
【摘要】“M”蛋白足单克隆免疫球蛋白的缩写．也称“副蛋白”．是由B淋巴细胞或浆细胞大最增殖产生的具有相同结构。

和氨基酸序列的分子或片段。

临床上常见于骨髓瘤（MM）、原发性巨球蛋白血症（MM）、意义末明的单克隆阿种球蛋白血症（MGUS）等。

【总页数】2页(P345,380)
【作者】孙卫红;翟玉华;刘金英
【作者单位】首都医科大学附属朝阳医院检验科,北京,100020;首都医科大学附属朝阳医院检验科,北京,100020;首都医科大学附属朝阳医院检验科,北京,100020【正文语种】中文
【中图分类】R446.11
【相关文献】
1.完善司法鉴定程序推进鉴定体制改革——《司法鉴定程序通则》评析 [J], 陈邦达;包建明
2.《司法鉴定程序通则》中应关注的几个问题——浅谈《司法鉴定程序通则》在司法会计鉴定中的作用 [J], 滕晓春
3.《司法鉴定程序通则》中应关注的几个问题——浅谈《司法鉴定程序通则》在司法会计鉴定中的作用 [J], 滕晓春
4.规范司法鉴定程序,完善司法鉴定制度——浅析《司法鉴定程序通则》制定及其相关内容 [J], 李禹
5.规范司法鉴定程序完善司法鉴定制度——《司法鉴定程序通则》解读 [J], 李禹因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白在重组牛痘病毒中的表达与鉴定

一
步探讨ＰＲＳＭ蛋白免疫原性提供了基础数据，也为ＰＳ重组活载体疫苗的研究奠定了基础。ＲＶＲＲ
关蛋白；重组牛痘病毒
中图分类号：￥５．５８２６文献标识码：Ａ文章编号：１０．５９２１）００４．６０８０８（００１．７１０
３ＣｈｎｓｉｌｓａｅＰｅｅｔｎａｄＣｎｒｌｎｅｓＢｉｎ０１５Ｃｉａ．ｉｅｅＡｎｍａｅｓｒｖｎｉｎｏｔｔｒ，ｅｉｇ１０２，ｈｎ）ＤｉｏｏＣｅｊ
ｚＮｉｕＴＡＹｅ，Ｉｎ，ＮＧＱｎ，ｕｉｇｙａｓＮＱｉｇｇＬｕＮｉｏｇ，ＨＡＧＷｅｊｎ，ＩＮＬＮＹａｗＡｕｘＱｎ —ｕｎ，ｕｎ —ｅ，Ｉ — ｎ－ｈＹＡａＴＡＺｉｕＢｈ—ａＴＧＧａｇｚｉＬｎｊｇ，ｕＤｏｇｌＮＧＴｏ，ＩＮｈ－ｎ，ｕＺｉｏ，ＯＮｕｎ —ｈ，ＩｊｇＷｅ－ｎ３ｗｎ — ｉｉａ
２ｈｎｈｉＶｅｅｎｒｓａｃｎｔｕｅＣｈｉｅｅＡｃｄｍｙｏｒｉｕｔｒｌＳｃｅｃｓｈｎｈｉ２０４１ＣｈｎＳａｇａｔｒａＲｅｅｒｈＩｓｉｔ，ｉｙｔｎｓａｅｆＡｇｃｌａｉｎｅ，Ｓａｇａ０２，ｉａ；ｕ
Ｃｏｓｒｃｉｎｏｅｏｂｎｎａｃｎａｖｒｓｅｐｅｓｎｎｔｕｔｆｒｃｍｉａｔｖｃｉｉｉｘｒｓｉｇｏｕ

M蛋白的鉴定及实验分析

疗动物实验已获成功。综上所述：目前在治疗高血压时尽管存在许多问题，是但只有我们有信心和决心，随着上述策略的实施、药物的应用，人类攻克、战胜、征服高血压必将指日可待。
参考文献：［］屈引贤，小丽，商智．１赵邓氯沙坦治疗高血压并发左室肥厚５７例疗效观察［］陕西医学杂志，０５９Ｊ．２０：．［］王晓燕．沙坦对原发性高血压伴左心室肥厚的逆转作用［］２氯Ｊ．中华现代内科学杂志，０６，：．２０３７（稿日期：０７０－９收２０－０）６
维普资讯
实用医技杂志２００７年９月第１４卷第２７期（刊）ＪＭＴ，ｅｔｍｂｒ０７，ｏ．４，ｏ２ＩｕｄＥｅｙＴｎＤｙ）旬ＰＳｐｅｅ．２０Ｖ１１Ｎ８
因此，应用ＡＩＴＩ受体拈抗剂具有明显的肾脏保护效应，特别是对糖尿病性肾病的恶化有逆转作用。抑制Ａ可使肾小ＴＩＩ球出球小动脉松弛，降低肾小球毛细血管压力，减低蛋白尿而延缓肾脏病进展。在没有蛋白尿的高血压患者中，服用氯沙坦后新发生蛋白尿患者仅为阿替洛尔组的一半，也证实氯沙坦延缓了肾脏病变的发展。所以说，氯沙坦除了具有降压的作用外，还有明显保护靶器官作用。这也正符合抗高血压治疗的最终公共卫生目标：降低心脑血管疾病和肾脏疾病的发病率和病死率。３４发病机制高血压病的发病机制与基因有关，．因此基因治疗是治愈高血压病的根本性措施。现在高血压病的基因治

运用血清法综合诊断M蛋白的重要性及相关思考

卢伟，李畅，王淇泓。，耿红莲
（１．中国人民解放军第１６１医院检验科，湖北武汉４３００１０；２．第二军医大学长征医院实验诊断科，上海２００００３）摘要：目的通过对Ｍ蛋白阳性患者血清免疫球蛋白ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ及、轻链定量测定、血清蛋白电泳（ＳＰＥ）
Ｃｈａｎｇ，ＷｒＡ～ＧＱｉ — ｈｏｎｇ，ｅｔａ１．（１．ｔｈｅｃｌｉｎｉｃａｌｌａｂｏｒａｔｏｒｙｉｎｔｈｅ１６１ｓｔＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＰＬＡ，Ｈ“ＢｅｉＷｕＨａｎ，４３００１０，Ｃｈｉｎａ；２．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＬａｂｏｒａｔｏｒｙＤｉａｇｎｏｓｉｓ，ＣｈａｎｇｚｈｅｎｇＨｏｓｐｉｔａｌ，ＳｅｃｏｎｄＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇ
例（７６）；出现Ｍ蛋白双峰的有２７例（２）；未出现Ｍ蛋白峰的有２７３例（２２）。在未出现Ｍ蛋白峰的２７３例患者中，ＩｇＡ型１０２例，ＩｇＧ型４４例，ＩｇＭ型３例，游离轻链型４１例，游离轻链型５５例，ＩｇＤ型２８例。Ｍ蛋白类型：ＩｇＧ型６４４例（５１．８）；ＩｇＡ型２８８例（２３．２）；ＩｇＭ型８５例（６．８）；轻链型１３１例（１０．５）；ＩｇＤ型６９例（５．５）；双克隆型２７例（２．２）。游离轻链型的在正常范围（２．６９士１．８１），相比正常对照组升高无显著性差异（Ｐ＞Ｏ．０５），但Ｋ／相比升高有极显著性差异（Ｐ＜Ｏ．００１），ｌｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、降低有极显著性差异（Ｐ＜Ｏ．００１）；ＩｇＧＫ、ＩｇＣｘ、Ｉｇ、ＩｇＡＸ、ＩｇＭ、ＩｇＭｋ、游离轻链型的数据具有统计学意义。结论血清ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ及Ｊｃ、轻链定量测定、ＳＰＥ和ＩＦＥ在诊断

M蛋白检测-血清蛋白电泳及免疫固定电泳

M蛋白检测-血清蛋白电泳及免疫固定电泳
血清蛋白电泳可以根据血清中所有蛋白质的电荷性质和分子量的不同进行分离的技术，目前临床上的主要应用是筛查Ｍ蛋白（单克隆免疫球蛋白），正常血清的图谱如下：
M蛋白是浆细胞异常增殖产生的一种单克隆的异常的免疫球蛋白，由于其电荷性质和分子量都是完全一样，因此在血清蛋白电泳图谱的位置是同一个，导致在正常图谱中有一个异常的蛋白峰，如下图：
这种异常的M蛋白多出现在图谱的γ区，也可出现在α2区和β1 和β2，有时可出现在区与区之间的连接处！
一旦出现M蛋白，提示受试者血清中有异常的单克隆免疫球蛋白，即浆细胞出现了异常的增殖（可以是良性的，更多的是恶性），进一步需要免疫固定电泳进行M蛋白的类型鉴定（免疫球蛋白的类型），如下图：
血清蛋白电泳的检测方法有琼脂糖电泳和毛细管电泳，这两个方法学的差异是毛细管电泳的敏感性略高于琼脂糖电泳，且完全实现了自动化检测，避免了手工操作和蛋白染脱色的程序；
免疫固定电泳的检查方法亦包括琼脂糖电泳和毛细管电泳，两者的敏感性相似，琼脂糖电泳的历史比较悠久，多是指南推荐的检测方法，但毛细管电泳的免疫固定电泳对于高免疫球蛋白血症背景下的M 蛋白的类型检测更有优势。

《载脂蛋白M定点诱变及其生物学功能检测》

《载脂蛋白M定点诱变及其生物学功能检测》一、引言载脂蛋白M（ApoM）是近年来备受关注的一种血浆蛋白，其在脂质代谢、动脉粥样硬化等心血管疾病中发挥着重要作用。

近年来，随着分子生物学技术的飞速发展，人们对ApoM的结构和功能有了更深入的了解。

为了进一步揭示ApoM的生物学功能及其在疾病发生发展中的作用机制，本文采用定点诱变技术对ApoM进行基因改造，并对其生物学功能进行检测。

二、材料与方法1. 材料本实验所使用的材料包括ApoM基因、基因表达载体、突变引物等。

其中，ApoM基因从人体cDNA文库中获取，并经PCR 扩增得到纯化后的基因片段。

2. 方法（1）定点诱变技术：利用PCR技术和特定引物对ApoM基因进行定点诱变，获得不同突变位点的ApoM基因。

（2）基因表达与纯化：将突变后的ApoM基因克隆至表达载体中，并转化至大肠杆菌中进行表达。

表达后的蛋白经过纯化、浓缩等处理，得到纯度较高的ApoM蛋白。

（3）生物学功能检测：通过细胞实验、动物实验等方法检测ApoM蛋白的生物学功能。

三、实验结果1. 定点诱变结果本实验通过PCR技术成功地对ApoM基因进行了定点诱变，获得了不同突变位点的ApoM基因。

突变位点包括关键氨基酸的替换、插入或删除等。

2. 基因表达与纯化结果将突变后的ApoM基因克隆至表达载体中，转化至大肠杆菌中进行表达。

经过纯化、浓缩等处理，得到了纯度较高的ApoM 蛋白。

通过SDS-PAGE和Western Blot等方法检测，证实了蛋白的纯度和特异性。

3. 生物学功能检测结果（1）细胞实验：通过细胞实验检测了ApoM蛋白对细胞生长、分化和凋亡等生物学过程的影响。

结果显示，不同突变位点的ApoM蛋白对细胞的影响存在差异，部分突变体具有促进细胞生长的作用，而另一些则具有抑制细胞生长的作用。

（2）动物实验：通过动物实验进一步检测了ApoM蛋白在动物体内的生物学功能。

结果显示，注射不同突变位点的ApoM 蛋白后，动物表现出不同的生理反应和病理变化。