犬瘟热病毒检测方法研究进展
犬瘟热研究进展
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( vso f Me ia n a a i l g Wa n nMe ia o lg , h , h i2 1 0 , h n ) Di i no d c l d P r s oo y, n a d c l l e Wu u An u , 4 0 0 C ia i a t C e
摘 要 :犬瘟 热是 由犬瘟热 病毒 引起 的一种 高发传 染病 , 宿主 范 围 包括 大部 分食 肉 目动 物 。犬 瘟热 病 毒 可以感 染不 同器 官和组 织 的上 皮细胞 、 间质 细胞 、 经 内分 泌细胞 及 造 血 干 细胞 , 神 引发 全 身型 或神 经 型 的 临床过 程 , 并在 中枢神 经 系统 和淋 巴组 织 中形成 持 续感 染 , 疫抑 制和 脱 髓鞘 性 脑 脊髓 炎是代 表 性 的病 症 , 免
文章 编 号 : 0 75 3 ( O1 ) 8 0 8 一 5 1 0 -0 8 2 O O — 0 3O
犬 瘟 热 ( a iedse e , D) 世 界 范 围 内 C nn i mp r C 是 t
科 麻疹 病毒 属 , 自然 宿 主包 括 大部 分 的食 肉 目动 其 物 Ⅲ 。常规 免疫 接种 在正 常情 况下 是一 种 高度 有 效
[ 7 杨 文 鸽 , 长 湖 , 大 伦 , .葡 聚 糖 及 其 羧 甲基 衍 生 物 对 海 2] 薛 徐 等 湾 扇 贝 免 疫 功 能 的 影 响 [ ] 水 产 学 报 , 0 6 0 2 : 3— J. 2 0 ,3 ( ) 2 6
2 0. 4
Pr g e s o m m u e Fu to f M o l s s o r s n I n nc i n 0 lu c
犬瘟热分子生物学诊断技术研究进展
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犬瘟热分子生物学诊断技术研究进展作者:左楠来源:《现代畜牧科技》 2016年第1期左楠(哈尔滨市动物卫生防疫站,哈尔滨150016)摘要:犬瘟热是目前危害犬、毛皮动物和野生动物最严重的传染病之一。
其临床症状复杂,大多存在混合感染,确诊尤其是早期诊断较为困难。
早期诊断对于犬瘟热的综合防控和患病动物的救治具有重要的作用,近年来分子生物学诊断技术的不断发展,对犬瘟热的诊断具有重要意义。
现对犬瘟热的分子生物学诊断方法等作一综述。
关键词:犬瘟热;早期诊断;分子生物学中图分类号:S858. 292 文献标识码:A 文章编号:2095-9737(2016)01-050-02犬瘟热是由犬瘟热病毒(CDV)引起的犬科、鼬科和浣熊科等多种肉食性动物的一种急性、热性、高度接触性传染病。
犬瘟热最早发现于18世纪后叶,1905年有人发现其病原为一种病毒。
我国于1980年从患病犬体内分离到此病毒。
犬瘟热的临床表现多样,特征性的示病症状很少出现,大多存在混合感染,因此准确、快速、特异性强的早期诊断方法在兽医临床中越来越重要。
1 病原与症状CDV属于副黏病毒科麻疹病毒属,为有囊膜的单股、负链RNA病毒,病毒粒子呈多形性,直径一般在100~300nm之间。
其抵抗力不强,对热、干燥、紫外线和有机溶剂敏感。
犬瘟热的临床症状依所处环境、感染毒株、感染动物年龄和免疫状态的不同而呈现多样性。
病犬主要表现为双相热,呼吸道症状如呼吸道卡他性炎症,神经症状如肌肉痉挛和癫痫等,消化道症状如腹泻、呕吐和脱水等。
病程一般为2周或稍长,发生卡他性肺炎和肠炎时病程可能较长,出现神经症状的病程最长。
2 常规检测与诊断依据临床症状和流行病学特点,可作出初步诊断,但犬瘟热病毒常与其他病毒混合感染,或引起细菌的继发感染,因此犬瘟热的临床症状表现复杂,只有将临床症状与实验室诊断相结合才能进行确诊。
常见的实验室诊断方法有CDV的分离培养及鉴定、电子显微镜直观观察诊断和血清学检测与诊断等。
实验报告犬瘟热诊断技术
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实验报告犬瘟热诊断技术
犬瘟热是一种由犬瘟病毒引起的高度传染性疾病,主要影响犬科动物。
犬瘟热通常通过暴露于感染的犬只、尿液和粪便、淋巴节点以及呼吸道分泌物等途径传播。
早期症状包括发热、咳嗽、流眼泪、鼻涕流等,而后期则可能导致呕吐、腹泻、疲劳和免疫系统功能衰竭等严重后果。
因此,及早诊断犬瘟热对保护犬只的健康至关重要。
目前,常用于犬瘟热诊断的技术主要包括以下几种:
1. 病理学检查:通过对病死犬只进行尸检,观察病变组织的特征,可以确定犬瘟热的诊断。
这种方法可以提供确诊的结果,但需要牺牲动物,且耗时较长。
2. 血清学检测:通过检测犬只的血清中犬瘟病毒的特异性抗体来诊断犬瘟热。
常用的方法包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、补体结合试验(CFT)和微量凝集试验(MAT)等。
这些方法具有高灵敏度和特异性,可以快速有效地检测犬瘟病毒抗体,但无法区分活性感染和被免疫动物。
3. 分子生物学检测:使用聚合酶链反应(PCR)技术可以直接检测犬瘟病毒的核酸,从而诊断犬瘟热。
PCR具有高度灵敏度和特异性,可以在感染早期就能够检测到病毒,且结果的准确性较高。
此外,还可以通过PCR技术检测犬瘟病毒在咽拭子、呼吸道分泌物、尿液等样本中的存在。
综上所述,病理学检查、血清学检测和分子生物学检测是目前常用于犬瘟热诊断的技术。
血清学检测可以用于筛查大规模的犬群,而分子生物学检测则可以提供更加准确的结果,尤其在早期感染的诊断上更加敏感。
此外,对于犬瘟热的诊断还需要综合考虑临床症状、流行病学调查和其他实验结果,以确保准确性。
诊断犬瘟热的及早和准确对于及时采取防控措施、隔离病毒传播和治疗感染动物非常重要。
犬瘟热病毒病原学和诊断技术研究进展
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因组R N A和 核衣 壳蛋 白亚单位组 成的螺 旋状核 衣壳 ,宽 名有相 关专业 学历 的人员 管理非 国家 强制免疫 用生物 制 品 的经营 ,建立相 关制度 、进 出货 台账 和相 关台账 ,其 经营 的非 国家 强制 免疫用 生物制 品的利润 即可 作为 乡镇
山东畜牧兽医
2 0 1 4年第 3 5卷
文 献 综 述
犬瘟热病毒病原学和诊 断技术研 究进展
副 、 礼 ( 山东 省莱阳市畜牧兽医 局 2 6 5 2 0 0 ) 王妍 慧 ( 山东 省莱阳市畜牧兽医站)
中图分类号 :¥ 8 5 2 . 6 5 5 文献标识码:B 文章编号:1 0 0 7 — 1 7 3 3 ( 2 0 1 4 ) 0 8 - 0 0 9 6 - 0 4
复合体 ,这种 复合体 是病 毒基本 的感染 单位 ,是病 毒转 录和 复制所必 需的【 6 】 ;H蛋 白和F 蛋 白在病毒囊 膜上 形成 与病毒 的入侵 和细胞 毒性 直接相 关的 纤突 ,具有吸 附功 能,能让病毒结合 到细胞表 面的受体上【 。 1 _ 3 主要蛋白及其基 因 ( 1 )血凝 素蛋 白( H ) 及其基因 。 H蛋白基 因全长 1 9 4 7 b p ,所有毒株起始密码子A T G均位于
.
明C DV可能存 在不同的血清 型[ 5 】 。 1 . 2 基 因组 结构 C DV为不 分 节 、 非重 叠 的单股 负链 R NA病毒 。病毒基 因组全长 为1 5 6 9 0 b p ,从3 ’ 端 到5 ’ 端依 次 为 3 ’前 导 序 列 ( 3 ’ L e a d e r s e q u e n c e ), 核 衣 壳 ( N u c l e o c a p s i d,N ) 基 因 、 磷 蛋 白( P h o s p h o p r o t e i n,P ) 基 因、 基质 膜 蛋 白( Me mb r ne a p r o t e i n,M1 基 因、 融合 蛋 白
犬瘟热病毒快速检测技术研究进展
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C D V 的技 术手 段 。 国外 学 者 C O F F I N等 [ 5 】 和
F a i r c h i l d等 _ 6 J 建 立 了检 测 C D V 的荧 光 抗 体 技 术 , 在 国外 实验 室广 泛 使用 。在 国 内 , 袁书智等[ 7 ] 制
动 物 多继 发其 它 病原 感 染 , 使 临 床诊 断变 得较 为 困难 。近年 来 许多感 染犬 瘟热 的动物仅 出现轻微 的 呼 吸道 、 消化道症状 , 临床 症 状 具 有 非 典 型化
原 的 检 测 。 目前 国 内外 关 于 犬 瘟 热 病 毒 的 文
R T — P C R方 法 检测 已有 较 多报告 。熊 炜等 [ 2 2 1 建 立 献 了犬 瘟热 R T — P C R快 速诊 断 方法 ,可检 测 粪便 、 综
口鼻液等易于获取的样 品, 为该病 的确诊提供便 述 利 。F r i s k 等[ 2 3 1 根据 C D V N基因不同区域设计 3
主要 为犬 、 狐、 貉 等 经 济 价 值较 高 的 毛 皮 动 物 以 及 野 生 珍稀 保 护 动物 , 因此 对犬 瘟 热 发病 动 物 进
行 有效 治疗 就 显得尤 为 重要 了 。而犬 瘟热 治疗 的
毒 细胞培养物毒力 的测定 , 试验结果客观 、 易于
判 定 。杨 百亮 等[ 8 1 和苏 建青 等【 9 1 贝 0 分 别用抗 犬 瘟热
速、 批量检测等优点 , 对临床检测非常有价值 。该
试 验 方 法 分 为 间接 法 、 夹心法 、 阻 断 法 和 竞 争 法
中善 蠢
等 , 目前 主要 用 抗 体 夹 心 E L I S A方 法检 测 C D V 特异 性抗 原 和 间接 E L I S A方法 检 测 C D V特 异性
我国犬瘟热研究进展
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我国犬瘟热研究进展李建军1,丁巧玲2(1.佛山科学技术学院动物医学系,广东南海528231;2.南京农业大学动物医学院,江苏南京210095)中图分类号:858.292 文献标识码:A 文章编号:052926005(2003)0120034205 犬瘟热(can ine distem p er,CD)是由犬瘟热病毒(can ine distem p er viru s,CDV)引起的一种高度接触性传染病。
分布于全世界,我国也时有发生。
该病的传染性强,发病率高,临床症状多样,容易继发其他细菌、病毒的混合感染和二次感染,死亡率可高达80%[1,4,9]。
患病动物在康复后还易留有麻痹、抽搐、癫痫样发作等后遗症。
近几年来,随着我国军犬、警犬、实验用犬和宠物犬饲养量的大幅度增加,以及异地交流的增多,CD在我国犬中的发病率和致死率均有升高的趋势,而且临床表现也与以往有所不同[15]。
另有研究表明,除犬科动物外,鼬科、浣熊科及大熊猫科等多种动物也可感染发病[2,5,7,10]。
因此, CD是当前对宠物饲养业、经济动物养殖业和动物园观赏业危害最大的疫病[1,9,16]。
笔者就近年来我国CD的研究现状进行综述报道如下。
1 病原学早在1905年,Carre就提出本病的病原是一种病毒。
1951年,D edie首次用组织培养的方法培养出了CDV。
Rockbo rn发现CDV在原代犬肾细胞上能形成合胞体、星状细胞与核内或胞浆内包涵体[1,4]。
在我国于70年代末,华国荫等[5]先后从国外进口的CDV弱毒疫苗中分离到了多株疫苗株。
现已查明, CDV是副粘病毒科、麻疹病毒属中的一个重要成员,并且与该属的麻疹病毒和牛瘟病毒之间有密切的抗原关系与共同特性[1]。
CDV呈圆形或不正形,有时呈长丝状,直径100~300nm不等,大小差异较大。
基因组为单股的负链RNA。
CDV的核衣壳由基因组与蛋白N组成,呈螺旋状盘曲在病毒粒子的中央,外面裹着一层脂质的囊膜,囊膜上密布有纤突[1]。
犬瘟热、犬细小病毒二重实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用
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犬瘟热、犬细小病毒二重实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用犬瘟热(Canine Distemper,CD)和犬细小病毒(Canine Parvovirus,CPV)是近几年来常见的犬类传染病,二者对犬只的健康构成了严重威胁。
能够准确、快速地检测和诊断这两种病毒感染对于犬只的治疗和控制措施至关重要。
因此,本研究针对犬瘟热和犬细小病毒的检测方法进行了研究和建立。
首先,我们收集并准备了一定数量的狗狗样本,包括鼻拭子、咽拭子等。
然后,我们进行了犬瘟热和犬细小病毒的核酸提取并合并提取物,以便于后续的实验检测。
接下来,我们设计了特异性良好的引物和探针,以便在PCR反应中识别和扩增目标病毒的核酸序列。
在选择PCR方法时,我们考虑到了实时荧光定量PCR的优势。
实时荧光定量PCR(Real-time FluorescentQuantitative PCR)不仅可以定量分析目标病毒的核酸水平,还能在PCR反应过程中实时监测扩增曲线,并且具有高灵敏度和特异性。
因此,我们选择了实时荧光定量PCR作为我们的检测方法。
接下来,我们在合适的实验条件下对PCR体系进行了优化,并进行了反应体系中酶的最佳浓度、模板DNA的最佳用量、引物和探针的最佳浓度等因素的优化试验。
通过不断调整和优化,我们建立了比较稳定和可靠的实时荧光定量PCR检测方法。
为了验证我们建立的检测方法的准确性和可靠性,我们选取了已知感染犬细小病毒和犬瘟热的样本进行了实验检测。
结果显示,我们的实时荧光定量PCR方法可以成功地检测到目标病毒的核酸序列,并且与其他常用检测方法的结果相一致。
在进一步的应用中,我们还测试了一些实际临床样本。
结果显示,我们的实时荧光定量PCR方法不仅可以对犬瘟热和犬细小病毒进行可靠的检测,而且具有高灵敏度和特异性。
因此,我们的方法可以应用于疫情监测、疫苗评估和临床诊断等方面。
总结起来,我们成功地建立了一种犬瘟热和犬细小病毒的实时荧光定量PCR检测方法。
犬瘟热病毒分离技术研究进展
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( . s tt o ei l cn m c nm la dPa t, AA , ni 3 9 C ia 1 ntue f p ca Wi E o o i A i as n l sC S J l 1 2 , hn ; I i S l d n i n 1 0
2Jl e a itc n lgc l . t , h n c u 3 2 C ia 3 S h o f oe h oo ya d . i T y n Boe h oo ia in Co L d C a g h n 1 01 2, hn ; . c o l tc n lg n o Bi
摘要 : 由犬瘟热病 毒感 染引发 的犬瘟 热是多种动物 共患的重要传染疾 病 。病毒分 离技术是对该疾病 诊断和病原研究 方面的必 要手段和基础 。目前 , 多种不同动物来源 的原代细胞 、 传代细胞及稳定表达犬瘟热病毒受 体—— 信号淋 巴细胞激活因子 的细胞
系在犬瘟热病毒分离研究 巾均 得到广泛应用 。综 述 当前犬瘟热病 毒分离技术 的研究进展 , 并对不 同分离方法优缺点进行 比较
E vrn na E g e r g i guU i ri c n e n e h ooy Z e j n 0 3 C ia n i me t n i ei a s nv s y f i c d c n lg , h ni g 1 0 , hn ) o l n nJn e toS e a T a 2 2
特 产 研 究
S ei i cn mi Anma adPa t sac p c l l E o o c i l n l erh aW d n Re
犬瘟热诊断方法的研究进展
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2 热最 为 显 著 的特 点 就是 传 染性 极 强 ,病 死 率 较 高 ,而 且 易 受致 病 病 毒感 染 的 动 物范 围有 显 著 的扩 大 趋 势 ,危 害 也越 来 越 强 。 由此 可 见 ,关 于 “ 犬 瘟 热诊 断 方 法 ” 的研 究 与分 析 显得 尤 为
所 需要 的检 测 时间相 对较 短 。 从 上 文 的 论 述 中 ,我 们 可 以看 出 目前 基 于 犬瘟 热 病 毒 检 测 常用 的几 种 方 法 ,可 以说 每 一种 方 法都 有 其 固有 的优 势 和缺 陷 ,
系 ,传 统常 用 的方法 是使 用V e F O 细胞 进行 C D V 病 毒 的分 离与 培养 ,
地 高辛 等 。
2 犬瘟 热 诊断 方法 的研 究进 展叹 息
2 . 1 犬瘟 热病 毒的 分离 培养 与鉴 定 2 . 1 . 1 犬 瘟热 病 毒 的分离 培养 。犬 瘟 热病 毒 ,简 称 C D V,能否 做 好 病毒 的分 离培 养 是 关 系到 能 否及 时 确诊 该 病 最 为根 本 的方 法 ,
而 近些 年 来 ,使 用 犬 恶性 组 织 细胞 增 多症 的组 织 细胞 建 立 的细 胞
犬瘟热检验实验报告
![犬瘟热检验实验报告](https://img.taocdn.com/s3/m/f9b9a4311fb91a37f111f18583d049649a660e09.png)
一、实验目的本实验旨在通过犬瘟热病毒抗体检测技术,对疑似患有犬瘟热的犬进行病原学诊断,为临床诊断提供依据。
二、实验材料1. 试剂:犬瘟热病毒抗体检测试剂盒、酶标仪、离心机、微量移液器、一次性手套、吸头等。
2. 样本:疑似患有犬瘟热的犬血清。
3. 仪器:酶标仪、离心机、微量移液器、恒温箱等。
三、实验方法1. 样本采集:采集疑似患有犬瘟热的犬血清,置于无菌试管中,于-20℃冰箱保存。
2. 样本处理:将样本在室温下解冻,离心去上清液,留取沉淀物备用。
3. 实验操作:(1)加样:取抗体检测盒,按照说明书步骤进行操作,将抗体试剂、酶联试剂、底物等分别加入相应的孔中。
(2)温育:将加好试剂的板放入恒温箱中,温育一段时间。
(3)洗涤:将温育好的板取出,用洗涤液进行洗涤。
(4)加显色剂:将显色剂加入各孔中,温育一段时间。
(5)终止反应:将终止液加入各孔中,终止反应。
(6)测量吸光度:将板放入酶标仪中,测量各孔的吸光度。
4. 结果判定:(1)根据说明书提供的标准曲线,计算样本的抗体滴度。
(2)抗体滴度≥1:100为阳性,抗体滴度<1:100为阴性。
四、实验结果1. 样本信息:(1)犬只品种:柴犬(2)性别:雄性(3)年龄:2岁(4)疑似症状:发热、咳嗽、流涕、呕吐、腹泻等2. 实验结果:(1)抗体滴度:1:400(2)结果判定:阳性五、实验结论根据实验结果,疑似患有犬瘟热的柴犬血清抗体滴度为1:400,判定为犬瘟热阳性。
结合临床症状,可初步诊断为犬瘟热。
六、实验讨论1. 犬瘟热是一种高度传染性的病毒性疾病,对犬类危害极大。
本实验通过犬瘟热病毒抗体检测技术,对疑似患有犬瘟热的犬进行病原学诊断,为临床诊断提供了依据。
2. 实验过程中,严格按照操作规程进行,确保实验结果的准确性。
同时,注意实验操作中的无菌操作,避免交叉污染。
3. 实验结果表明,疑似患有犬瘟热的柴犬血清抗体滴度为1:400,符合犬瘟热抗体检测阳性标准。
结合临床症状,可初步诊断为犬瘟热。
犬瘟热诊断方法研究进展及应用概况
![犬瘟热诊断方法研究进展及应用概况](https://img.taocdn.com/s3/m/9eb3c87027284b73f24250ad.png)
法 。采 样 部位 包 括 皮 肤 、 眼结 膜 、 呼吸 道 、肺 、 胃肠 道、膀胱 刮取 物 、阴道黏膜 或外 周血液 等 。在光 学显微 镜下感 染细胞 中常 可发现 呈红 色或 暗红色 、具 有清晰 的 边界和匀 质 的边缘 的多形 性包 涵体 ,一般呈 圆形或椭 圆 形 ,也有见 到呈镰 刀形而 紧贴 于胞 核上者 ,存 在于核 内
基 因 型均 由C DV野 毒 株 组 成 , 并且 均 与 起源 于 上 世纪 5 0 , - 6 0 年代的弱毒疫苗 株在遗传 关系上存在 较远距离 。近 年来 ,随着 生态环 境改变 和病 毒的进 化 ,C DV自然 感染 的宿主范围正在不断扩大【 4 I ,已经 出现 了人 感染C DV的报 道【 , 】 。I 瞄床上C DV感染动物后 多继 发细菌 、病毒感染,症 状 多变 ,难 以早期 诊断 ,动物 一但 发病 多预后 不 良,因 此预 防及早 期诊断 是防 治本病 的最 佳手段 。因此 ,早 期
中图分类号:¥ 8 5 8 . 2 9 2 文献标识码 :A 文章编号:1 0 0 %1 7 3 3 ( 2 0 1 4 ) 0 2 . 0 0 7 6 . 0 5 C D V病毒 的有原代 培养细 胞和传代 细胞系 。实验室C D V 分 离成 功后 ,可通 过 动物 回归试验 对 该病毒 的毒 力进行 判定 ,最敏感 的实验 动物 是雪 貂 ,接 种后其死 亡率可达
1 . 2 电镜的病毒检测 电镜技 术可 以直观 、准 确 的鉴 别病 毒 ,根据 病毒的
犬瘟热的临床诊断与病理学研究
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犬瘟热的临床诊断与病理学研究犬瘟热是一种由犬瘟热病毒引起的高度接触性传染病,主要感染犬科动物,如犬、狐、狼等,偶尔也会感染猫科动物。
这种疾病具有较强的传染性和较高的死亡率,对犬类的健康构成了严重威胁。
因此,深入研究犬瘟热的临床诊断和病理学特点对于疾病的防控具有重要意义。
一、犬瘟热的病原学犬瘟热病毒属于副黏病毒科麻疹病毒属,呈球形,直径约 150-300 纳米。
病毒的基因组为单股负链 RNA,包含 6 个结构蛋白和 2 个非结构蛋白。
犬瘟热病毒对外界环境的抵抗力较弱,对热、干燥和紫外线敏感,常用的消毒剂如酒精、碘酒等均可使其灭活。
二、犬瘟热的流行病学犬瘟热的传染源主要是患病动物和带毒动物。
病毒通过呼吸道分泌物、尿液、粪便等排出体外,污染环境和物品,健康动物接触到这些污染物后,经呼吸道、消化道或眼结膜等途径感染。
犬瘟热的流行具有明显的季节性,多发生在冬春季节,这可能与气温变化、犬只的免疫力下降以及病毒的存活和传播条件有关。
此外,犬瘟热在幼犬中的发病率和死亡率较高,这与幼犬的免疫系统尚未发育完善、母源抗体水平下降等因素有关。
三、犬瘟热的临床症状犬瘟热的临床症状多样,根据病程的长短和病情的严重程度,可分为以下几种类型:1、双相热型:病初体温升高至 395-41℃,持续 1-3 天,然后体温恢复正常,几天后再次升高,呈现双相热型。
2、呼吸道症状:表现为咳嗽、打喷嚏、流鼻涕、呼吸困难等,严重时可发展为肺炎。
3、消化道症状:出现呕吐、腹泻、食欲不振等,粪便可能带有黏液或血液。
4、神经症状:这是犬瘟热的晚期症状,表现为抽搐、共济失调、转圈、站立不稳等。
神经症状的出现往往提示预后不良。
5、眼部症状:眼睛出现结膜炎、角膜炎,眼分泌物增多,严重时可导致失明。
四、犬瘟热的临床诊断1、临床症状观察:根据上述典型的临床症状,如双相热、呼吸道和消化道症状、神经症状等,结合流行病学资料,对犬瘟热进行初步诊断。
2、实验室检查:病毒分离:采集病犬的血液、脑脊液、眼分泌物、呼吸道分泌物等样本,进行病毒分离培养,但该方法操作复杂,耗时较长,临床应用较少。
犬瘟热病毒检测方法的研究进展
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犬瘟热病毒检测方法的研究进展
宋爽;高旭;王艳秋;金丽兰;陶志
【期刊名称】《吉林畜牧兽医》
【年(卷),期】2016(037)007
【摘要】犬瘟热病毒是犬瘟热的病原体,属副粘病毒科、麻疹病毒属成员,是危害犬类健康最严重的病原之一,给养犬业带来巨大的经济损失,而采取早期诊断和对症治疗是预防犬瘟热的有效措施.本文对近些年国内外有关犬瘟热病毒检测技术的新进展予以了综述,期待为诊断、预防和控制犬瘟热的流行和蔓延提供参考.
【总页数】4页(P18-21)
【作者】宋爽;高旭;王艳秋;金丽兰;陶志
【作者单位】延边大学农学院动物医学系,吉林延吉 133000;延边大学农学院动物医学系,吉林延吉 133000;延边大学农学院动物医学系,吉林延吉 133000;延边大学农学院动物医学系,吉林延吉 133000;延边大学农学院动物医学系,吉林延吉133000
【正文语种】中文
【相关文献】
1.犬瘟热病毒、犬细小病毒二重TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用 [J], 赵雪丽;刘毅;班付国;闫若潜;王华俊;王淑娟;马震原;王东方
2.犬瘟热病毒实时荧光RT-RPA检测方法的建立及应用 [J], 张启龙;傅彩霞;张玮;高晓龙;王林;程敏姮;郑雪莹;刘海莹;周德刚
3.犬瘟热病毒一步法RT-PCR检测方法的建立与应用 [J], 李文佳;陈姗;高旭
4.一种犬瘟热病毒强弱毒株鉴别PCR检测方法的建立和初步应用 [J], 张可;薛姣雄;喻娇;唐青海;曾繁荣;刘雪晴;隆泽桧;侯鑫军
5.犬瘟热病毒检测方法研究进展 [J], 王改丽;呼延含蓉;程荣华;郭衍冰;郝良玉;刘沂霖;李昱洁;姚新华
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犬瘟热病毒检测技术的研究进展
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犬瘟热病毒检测技术的研究进展李忠生;王智群;冯秀娟【摘要】犬瘟热(CDV)在1809年由Jeneer首次报道。
1905年卡尔(Carre)将分离的滤过性致病因子接种动物从而复制出病例,1926年Laidlaw和Duncan 利用完全隔离的犬和易感性高的雪貂进行了人工感染,该试验肯定了本病的病原为病毒。
1980年我国首次分离并获得了犬瘟热病毒。
犬瘟热常引起大批犬、貂、狐等动物发病,死亡率可达30~80%,继发细菌感染是导致死亡率增高的主要原因之一,若并发肺炎其死亡率可高达90%以上。
国内外对CDV进行了大量研究,建立了多种实验室检测方法。
下面我们从病毒分离、免疫学和分子生物学等方面对犬瘟热病毒检测技术进行阐述。
【期刊名称】《中国工作犬业》【年(卷),期】2014(000)003【总页数】5页(P14-18)【作者】李忠生;王智群;冯秀娟【作者单位】公安部南京警犬研究所,210012;南京金盾动物药业有限责任公司,210012;公安部南京警犬研究所,210012【正文语种】中文犬瘟热(CDV)在1809年由Jeneer首次报道。
1905年卡尔(Carre)将分离的滤过性致病因子接种动物从而复制出病例,1926年Laidlaw和Duncan利用完全隔离的犬和易感性高的雪貂进行了人工感染,该试验肯定了本病的病原为病毒。
1980年我国首次分离并获得了犬瘟热病毒。
犬瘟热常引起大批犬、貂、狐等动物发病,死亡率可达30~80%,继发细菌感染是导致死亡率增高的主要原因之一,若并发肺炎其死亡率可高达90%以上。
国内外对CDV进行了大量研究, 建立了多种实验室检测方法。
下面我们从病毒分离、免疫学和分子生物学等方面对犬瘟热病毒检测技术进行阐述。
病毒的分离培养是确诊犬瘟热最根本的诊断方法。
但由于CDV对外界环境的抵抗力弱,致使病毒的分离成功率很低,此外病毒分离成功率还与分离病毒的细胞、动物的抗体水平、病料采样的时间部位、样品处理方法等因素有关。
犬瘟热诊断方法的研究进展
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·195·畜 牧 兽 医农业开发与装备 2017年第2期摘要:犬瘟热是一种世界范围广泛分布的传染病,其主要的致病病毒就是犬瘟热病毒,对皮毛动物养殖业的发展威胁最为严重。
基于这样的现实背景,以“犬瘟热诊断方法”为主要研究对象,展开深入、细致的探讨和分析,希望能为进一步做好犬瘟热的综合诊断提供有力的依据和参考。
关键词:犬瘟热;诊断方法;研究进展1 前言犬瘟热最为显著的特点就是传染性极强,病死率较高,而且易受致病病毒感染的动物范围有显著的扩大趋势,危害也越来越强。
由此可见,关于“犬瘟热诊断方法”的研究与分析显得尤为重要。
2 犬瘟热诊断方法的研究进展叹息2.1 犬瘟热病毒的分离培养与鉴定2.1.1 犬瘟热病毒的分离培养。
犬瘟热病毒,简称CDV,能否做好病毒的分离培养是关系到能否及时确诊该病最为根本的方法,但是分离培养工作量相对较大,而且由于病毒自身对外界环境的抵抗力较低,因此分离的成功率并不是非常高。
通常情况下,经常用于CDV病毒分离的组织细胞主要有两类,即原代细胞和传代细胞系,其中原代细胞培养最为有效的方法就是用幼犬或者是雪貂肺脏部位的巨噬细胞;而对于传代细胞系,传统常用的方法是使用vero细胞进行CDV病毒的分离与培养,而近些年来,使用犬恶性组织细胞增多症的组织细胞建立的细胞系CCT细胞进行CDV病毒的培养也获取了成功。
2.1.2 犬瘟热病毒的鉴定。
在完成了CDV病毒的分离培养之后,就要进行病毒的鉴定,常用的鉴定方法就是电镜检查、动物回归试验、病毒特异性抗原诊断试验以及特异性核酸试验等。
需要注意的是,在进行动物试验的时候,要让雪貂、犬类或者水貂发萨哼临床症状感染的方式有很多种,但最为敏感的就是雪貂,一旦接种,死亡率可以说是100%,因此电镜检查应该说是最为快捷、简便的方法。
但是这种鉴定方法也有缺陷,就是仅仅能够观察到病毒的病态结构,无法完成同科病毒的区别。
2.2 免疫学检测方法常用的免疫学检测方法主要有琼脂扩散实验、SPA协同凝集试验、免疫电子显微镜技术以及免疫荧光技术等。
兽医实验报告
![兽医实验报告](https://img.taocdn.com/s3/m/2302863b1fd9ad51f01dc281e53a580216fc50c0.png)
实验名称:犬瘟热病毒分离与鉴定实验目的:1. 学习病毒分离和培养的基本方法。
2. 掌握犬瘟热病毒的鉴定技术。
3. 提高对犬瘟热病的诊断能力。
实验时间:2023年3月15日实验地点:兽医实验室实验材料:1. 实验动物:犬瘟热病疑似病例犬只2. 实验试剂:犬瘟热病毒分离与鉴定试剂盒、细胞培养液、抗生素、无菌操作器械等3. 实验仪器:显微镜、离心机、细胞培养箱、培养皿等实验方法:1. 病毒样本采集:对疑似病例犬只进行临床检查,采集其鼻腔分泌物、唾液、粪便等样本。
2. 细胞培养:将采集到的样本进行细胞培养,观察细胞病变情况。
3. 病毒分离:将疑似病毒样本接种于细胞培养瓶中,37℃培养48小时,观察细胞病变情况。
4. 病毒鉴定:对分离到的病毒进行鉴定,包括形态学观察、血清学检测、分子生物学检测等。
实验步骤:1. 样本采集:无菌操作采集疑似病例犬只的鼻腔分泌物、唾液、粪便等样本。
2. 细胞培养:将采集到的样本接种于细胞培养瓶中,加入适量细胞培养液,置于37℃细胞培养箱中培养。
3. 病毒分离:- 观察细胞培养瓶中的细胞变化,如细胞变圆、脱落、细胞间出现空隙等。
- 将出现细胞病变的细胞收集,进行病毒分离。
4. 病毒鉴定:- 形态学观察:在显微镜下观察病毒颗粒的形态和大小。
- 血清学检测:使用犬瘟热病毒特异性抗体进行检测,观察是否有特异性反应。
- 分子生物学检测:提取病毒RNA,进行实时荧光定量PCR检测,观察病毒核酸的扩增情况。
实验结果:1. 细胞培养:在细胞培养过程中,观察到疑似病例犬只的细胞出现明显的病变,如细胞变圆、脱落、细胞间出现空隙等。
2. 病毒分离:将出现细胞病变的细胞收集,进行病毒分离,成功分离出病毒。
3. 病毒鉴定:- 形态学观察:在显微镜下观察到病毒颗粒呈球形,大小约为100-200纳米。
- 血清学检测:使用犬瘟热病毒特异性抗体进行检测,观察到特异性反应。
- 分子生物学检测:实时荧光定量PCR检测结果显示病毒核酸呈阳性。
熊猫犬瘟实验报告(3篇)
![熊猫犬瘟实验报告(3篇)](https://img.taocdn.com/s3/m/f2a55f01793e0912a21614791711cc7931b778a3.png)
第1篇一、实验背景犬瘟热是一种高度接触性传染病,由犬瘟热病毒引起,主要影响犬科动物。
近年来,随着野生动物保护意识的提高,有关犬瘟热在其他动物宿主中的研究日益受到关注。
大熊猫作为我国国宝,也是世界自然保护联盟(IUCN)红色名录中的濒危物种,对其健康的威胁不容忽视。
本研究旨在探讨犬瘟热病毒对大熊猫的影响,为预防和控制犬瘟热在大熊猫群体中的传播提供科学依据。
二、实验材料与方法1. 实验动物:选取10只健康大熊猫,年龄在3-5岁之间,体重在80-120公斤之间。
2. 实验试剂:犬瘟热病毒(CDV)疫苗、犬瘟热病毒抗体检测试剂盒、荧光定量PCR试剂盒等。
3. 实验方法:(1)疫苗接种:对10只大熊猫进行犬瘟热疫苗免疫,按照疫苗说明书进行操作。
(2)病毒感染:将犬瘟热病毒感染于部分大熊猫,观察其临床表现和病理变化。
(3)抗体检测:在疫苗接种后和病毒感染后,分别对大熊猫进行犬瘟热抗体检测。
(4)荧光定量PCR检测:在病毒感染后,对大熊猫的血清、组织样本进行荧光定量PCR检测,检测犬瘟热病毒核酸。
三、实验结果1. 犬瘟热疫苗免疫效果:疫苗接种后,10只大熊猫均产生犬瘟热抗体,抗体阳性率为100%。
2. 病毒感染表现:感染犬瘟热病毒的大熊猫出现以下症状:体温升高、食欲不振、精神萎靡、眼鼻分泌物增多、呼吸困难等。
3. 病理变化:感染犬瘟热病毒的大熊猫出现以下病理变化:肺部炎症、胃肠黏膜损伤、肝脏功能异常等。
4. 抗体检测:感染犬瘟热病毒的大熊猫抗体滴度明显下降,说明感染后抗体水平降低。
5. 荧光定量PCR检测:感染犬瘟热病毒的大熊猫血清和组织样本中均检测到犬瘟热病毒核酸。
四、讨论与分析1. 犬瘟热病毒对大熊猫的影响:犬瘟热病毒感染大熊猫后,可引起明显的临床症状和病理变化,严重威胁大熊猫的健康。
2. 犬瘟热疫苗免疫效果:本研究结果表明,犬瘟热疫苗对大熊猫具有良好的免疫效果,可以有效预防犬瘟热病毒感染。
3. 犬瘟热病毒传播途径:犬瘟热病毒可通过空气、接触、病犬分泌物/排泄物等多种途径传播,需加强防控措施。
犬瘟热分子生物学诊断技术研究进展
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农村羊受孕率低的原因卢德山(黑龙江省北安市二井镇畜牧中心,黑龙江北安164002)摘要:近年来,随着养羊业的不断发展,农村养羊受孕率低的问题日益突出,发生原因主要有羊营养缺乏,卫生条件差,患病,配种技术水平较低,精液品质不良等。
笔者现从这几个方面进行阐述,实施相应的防治措施预防羊受孕率低这一问题的发生。
关键词:农村;羊;受孕率低中图分类号:S826.3+5 文献标识码:B文章编号:2095-9737(2016)01-048-01 近几年,随着人们对羊肉需求量的增加,羊养殖规模迅速扩大,养殖量大大增加,羊养殖已经成为某些地区经济发展的支柱产业。
但是,目前羊饲养集约化程度较低,基本上以农村散养粗放的家庭饲养方式为主,小群分散,条件简陋,饲养简单,管理落后,营养水平低下,饲养技术和疾病防治技术差,羊病发病率较高。
随着养羊业的发展,羊数量的剧增,作为羊生产中常见病之一的不孕症发病率升高,还有其他原因引起的羊不孕,不孕羊发病率呈上升发展趋势,如果不孕羊不能及时发现或得不到正确治疗,推迟配种或配不上种,既耽误了产羔,又增加了饲养成本,降低了养殖经济效益,给养羊户造成了很大的经济损失,严重影响了养羊户的积极性。
因此,笔者根据自己多年的生产工作经验,结合羊养殖实际情况,对农村羊养殖受孕率低的发生原因进行分析,供广大养羊户参考,以便实施相应的防治措施。
1 营养缺乏由于农村羊养殖主要是家庭分散经营,小家小户,生产规模小,散养粗放,营养水平差,往往根据自己家的条件进行饲养饲喂,不讲究营养多少或营养是否全面,基本上有什么饲料喂什么饲料,饲料大多以玉米居多,给予的量也很少,以放牧为主,羊吃不饱的时候居多,尤其是配种的夏季,添加的精饲料少之又少,或者是根本就不添加,更谈不上添加多种维生素和微量元素,饲料的质和量都达不到羊的营养需要和生理需要,这样长期的饲料缺乏、饲料单一,致使维生素、微量元素,尤其是蛋白质等营养严重供应不足,羊机体营养长期缺乏造成营养严重不良,卵巢生长发育受到极大影响,卵巢机能受到抑制,卵巢生理功能降低,出现卵巢组织萎缩,机能减退,卵巢缩小,卵泡停止发育,不排卵,有的出现持久黄体,引起羊不发情或发情不完全,出现不孕症,使羊受孕率降低。
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犬瘟热病毒检测方法研究进展
摘要:犬瘟热病毒是犬瘟热的病原体,属于复黏病毒科,是危害犬类健康特
别关键的病源之一,对于养犬业来说会造成巨大的经济损失。
在这样的情况下,
需要充分做好犬瘟热病毒检测工作,同时也要充分明确相关检测方法的研究进展,以此进一步有效做好早期的诊断和治疗工作,这样才能为有效防控犬温热病毒的
危害提供必要的保障。
基于此,本文重点综述犬瘟热病毒检测方法的研究进展等
相关内容。
关键词:犬瘟热病毒;检测方法;研究进展
引言
犬温热是由犬温热病毒而感染的一种病毒类型,同时也是高度接触性的传染病,具有急性、热性的典型特点,对于犬类和犬养殖行业的健康发展都会造成十
分严重的影响。
因此要高度重视犬瘟热病毒的检测工作,进一步提升检测的精准度,这样才能为犬瘟热病毒的有效防控和犬类的治疗干预提供必要的保障。
1病原及流行特点
犬瘟热病毒是一种比较典型的复粘病毒科,呈现出不规则形状或者原形基因
组为复链RNA,这种疾病在一年四季都有可能发生,特别是在春季和冬季更是十
分高发,并没有地区性,通常情况下,每隔三年会流行一次。
若温度,或者湿度
过高的话,或者在犬身体内缺乏微量元素,蛋白质,维生素等等,极有可能到导
致本病爆发,是其中十分重要的诱因。
同时如果犬类出现混合感染或者继发感染
等问题,会使犬的病情有更为加重的情况,甚至可能出现死亡。
2犬瘟热病毒检测方法
2.1免疫学检测方法。
在针对犬瘟热病毒进行检测的过程中,有效应用免疫
学检测方法是其中十分重要的内容。
在免疫学检测技术中主要涉及以下几种类型:首先是酶联免疫吸附试验检测方法,通过这种方法的有效应用,确保病原和抗体
的免疫反应和酶催化反应相结合,进而构建相对应的技术类型,这种方法可以针
对抗体进行有效检测。
与此同时也可以检测抗原。
在检测的过程中更加简单方便,同时有更高的特异性和灵敏度,通常情况下在实际的检测过程中不需要特殊性的
检测仪器,血样的用量相对来说比较少,在判断的过程中更加容易,在现场可以
对其广泛应用。
孙静等专家学者通过建立快速诊断犬温热病毒的检测方法,并且
建立了单克隆抗体杂交瘤细胞株,并建立了与之相对应的酶联免疫吸附试验检测
方法,其结果与具体的检测要求充分吻合。
该检测方法的符合率达到100%,因此
这种方法可以呈现出良好的特异性和灵敏性,在当前的大批量临床样品的检测过
程中,可以得到广泛应用。
其次是免疫胶体金技术。
这项技术是把胶体金作为示
踪标志物,在抗原抗体检测过程中可以呈现出良好的应用优势,是一种比较高效
的免疫标记技术,通过这项技术的有效应用,可以结合实际情况制备相对应的抗体,并且发展成为诊断试纸条。
在当前的兽医临床检测过程中对其广泛应用,并
且对于犬瘟热进行更有效的诊断和应用,体现出良好的诊断效果。
Andj等专家
学者通过免疫交际金技术的有效应用,可以在5分钟之内对于犬瘟热病毒进行检测,并且对于检测样品进行更精准的采集,更加简单方便,与此同时也可以应用
生理盐水稀释眼结膜拭子。
通过这种方法进行检测,可以体现出良好的检测效果,而且整个操作过程中不需要应用特殊的设备,因此在临床实践中可以对其进行广
泛推行。
第三,免疫组化技术。
这项技术主要是用标记的特异性抗体或或者抗原
对于组织内的抗原或者抗体的分布进行组织和细胞与原位检测,该项技术主要是
针对犬瘟热病毒病死之后的犬类进行死后的诊断,因此可以针对具体的感染部位
进行定位明确具体特点,以感染机制和致病机理为基础进行深入研究,进而进行
相对应的免疫应答,以此构建相对应的免疫组化方法。
通过这种检测技术进行有
效应用,可以呈现出良好的检测效果。
刘文等专家学者建立免疫组化方法来定位
检测犬肠组织中的犬瘟热病毒,在病犬小肠结膜上皮组织,张文魁等专家学者利
用免疫组化技术检测犬瘟热病毒的犬类的脑部,肾部肝脏,淋巴结等等,进一步
充分明确扁桃体上犬瘟热病毒分布是最广泛的。
2分子生物学检测技术。
在犬瘟热病毒检测方法中,分子生物学检测技术也
是其中十分重要的内容,在分子生物学检测过程中,所涉及的类型主要包括以下
几点:首先是核酸杂交技术。
这项技术是一种比较经典的分子生物学检测技术,
在实际的应用过程中,呈现出高特异性,高灵敏性的特点,可以应用非放射性核放射性物质标记一致的DNA或RNA短片段,然后结合碱基互补配对原则和RNA序列进行相应的检测,在具体的操作过程中和原位杂交等相关方法。
张永霞等专家学者通过用斑点杂交法对于犬瘟热病毒进行相对应的标记,制作出相对应的核酸探针,对于疑似犬瘟热病毒的鼻液,血液,肝脏等不同组织进行相关的检测,通过相对应的检测结果,进一步表明肝脏部位是检出率最高的部位,这也充分表明斑点杂交技术在犬瘟热病毒的早期诊断过程中有良好的应用效果。
其次聚合酶链式反应。
通过这种技术可以针对体内核酸复制过程进行相对应的模拟,与此同时可以更有效检测病毒的特异性片段,因此在实际的应用过程中呈现出高特异性和灵敏性的特点。
在针对犬瘟热病毒进行检测的过程中,可以呈现出良好的检测效果,武鸣等专家学者把全文热病毒检测基因扩展为扩增片段,并且建立了与之相对应的犬温热数据库,针对疑似犬瘟热病毒的病例进行相对应的检测结果检出的阳性率为100%,同时这也充分表明这种方法在犬瘟热病毒的检测过程中,可以体现出良好的应用价值为相关疾病的诊断提供了必要的依据。
第三,环介导等温扩增技术。
这是一种全新的核酸扩增技术,在等位核酸进行扩张,具有操作简单,方便,特异性更强的特点,同时不需要特殊性的仪器。
胡嘉欣等专家学者通过相对应的犬瘟热病毒基因,以此作为扩增片段进行相对应的扩张和相对应的上述检测结果是一致的,在该技术的应用过程中不需要变性和温性循环,可以省去后续的紫外观察和电泳观察等等,整体操作过程中,有更加良好的经济价值和实用价值,因此可以在基层大范围推广和应用。
3结束语
通过上面的剖析,可以充分看出,在当前集约化养殖越来越迅猛发展的背景之下,犬类流通进步频繁,在这样的情况下导致犬瘟热病毒呈现出不断上升的趋势,极有可能导致权力的健康受到极大危害。
因此,在这样的情况下,需要进一步结合实际情况有效落实相对应的检测方法,要着重针对全新的方法进行不断的探究和优化,进一步结合犬病的具体情况,明确犬瘟热病毒,以相对应的检测结果为基准进行更有效的应对和处理,这样才能体现出良好的诊断和治疗效果为犬类的健康成长提供必要支持。
参考文献:
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[4] 宋大贺,孙晓飞,蒋丹,等. 犬瘟热病毒检测技术的研究进展[J].黑龙江畜牧兽医,2016,(019):52-53.。