血型鉴定与交叉配血

输血,这时就需要多个供血者的血液,在配血
时不但受血者和供血者之间要交叉配血,多
个供血者之间也应互相交叉配血,为保证受
血者的安全，要求主侧、次侧及献血员之间
交叉配血均不凝集时，方可输血。

4.在急诊配血时, 对急需情况可采用试管 法配血，在15min内发血。对特急情况应立即 发给O型浓缩红细胞或低凝集价的O型全血。 然后尽快复查血型和配血，如表现有配血禁 忌，应立即通知负责医师及时处理。
1、室温盐水配血法
交 叉 配 血 【原理】天然IgM类血型抗体与对应红细 胞在室温下的盐水介质中出现凝集反应。
通过离心，观察受血者血清与供血者红
细胞（主侧）以及受血者红细胞与供血
者血清（次侧）之间有无凝集的现象，
判断受血者与供血者之间有无ABO血型
不合的现象。
判断配血是否相合※
交 ①ABO同型配血，主、次侧均无溶血及凝 叉 集，血型相合，可以输血；主、次侧任 配 血 何一管发生溶血或凝集，不可输血，应
＋表示凝集，－表示无凝集
对抗血清的要求※
①高度特异，只能与相应的红细胞抗原发
生凝集，无非特异性凝集， ABO
血 抗B血清效价在1:64以上。 型 鉴 ③高亲和力，15秒内出现凝集，其强度 为3分钟时凝块>1mm2。 定
②高效价，抗A血清效价在1:128以上，
④无冷凝集素。
⑤无菌。分离血清后56℃，30min灭活。
清抗体
正定型结果分析※
抗A血清
抗B血清
抗A、B血清
＋
被 检 红 细 胞
＋
—
＋
A 型
正定型结果分析
—
抗A血清
抗B血清
抗A、B血清
＋
被 检 红 细 胞
＋
＋
B 型
正定型结果分析
抗A血清
抗B血清
抗A、B血清
＋
被 检 红 细 胞
— —
—
O 型
注意：正定型时抗A（－）抗B（－）抗A、B 管（＋）,应考虑到是否为亚型。应追踪。

2．发现其他的血型抗体
受、供血者如果
ABO血型相同，但其他血型不同时，在交叉配
血时也可出现凝集，为避免异型血输入后的
溶血反应，在目前许多实验室都不能进行稀
有血型鉴定的情况下，全靠交叉配血发现这
些血型的不同及免疫抗体的存在。

3.当受血者一次输血超过1600～2000m1，
或在48小时内输入5L或更多血时,称为大量
供血者红细胞与受血者血清反应（主侧交叉 配血※）
受血者红细胞与供血者血清反应（次侧交叉 配血※）
献血者
红细胞 血清
受血者
红细胞 血清
交叉配血目的 ①发现ABO血型鉴定的错误。
②发现不规则凝集素。如冷凝集素。
③发现其他血型抗体和一些不规则抗体。
（三）交叉配血方法
1、室温盐水配血法（只能检出IgM型
果可靠、能捡出完全抗体及不完全抗体
等优点。
交叉配血（抗人球蛋白法）
【方法学评价】本法是确定不完全 抗体最可靠的方法※，但操作较 繁琐，需多次洗涤，需要时间常， 试剂较贵，故始终未能成为临床 常规的配血方法。
交叉配血试验的临床意义

1．进一步验证受血者和供血者血型鉴 定是否正确，发现ABO系统的不规则抗体， 以避免血型鉴定错误而导致的输血后的严 重溶血反应。
（ 盐 水 法 ） 注 意 事 项
2．凝胶微柱法
凝胶具有分子筛效应和亲合效应 亲合效应：红细胞抗原与相应抗体结合 ABO
血 分子筛效应：低速离心后，凝集红细胞 型 悬浮在凝胶中，而未被抗体结合的红细 鉴 胞则沉于凝胶底部（管底尖部）。 定 结果观察：
肉眼/血型分析仪
ABO
（ 凝 胶 微 柱 法 ）
交 叉 配 血
交 叉 配 血
（ ） MPT
DC1滴
PS1滴
LISS液 0.6ml
加凝聚胺2滴， 混匀15s
弃去上清 不凝集：试剂无效 1000r/min 离心1min 主 侧 、 次 侧 配 血 管 凝集 离 心 1 分 钟 加解聚液2滴
主侧配血管
1000r/min 离心1min
混匀
PC1滴
4.类B抗原
5.自身免疫性温性抗体
冷凝集
冷凝集素是指冷反应型抗红细胞抗体，这些 自身抗体只能在低温时与红细胞膜相关抗原 结合。疑为存在冷凝集时，正定型采用经37 度生理盐水洗涤的红细胞3次，反定型采用患 者经4度放置1hr后分离的血清，将反应管放 37度水浴5min后观察结果。交叉配血存在冷 凝集现象时，仍然认为交叉配血是相合的， 可以输血。但需提醒临床保温输血。
血型鉴定与交叉配血
医学检验系 陈丽华
一、ABO血型鉴定
盐水凝集法
玻片法 试管法
凝胶微柱法
血型鉴定原理 检测红细胞上存在的血型抗原，以及血清
中存在的血型抗体，依据抗原抗体存在的
情况判断血型。
常规的方法包括正向定型与反向定型
正向定型※：已知抗体特异性的血清
检查红细胞抗原
反向定型※：已知血型红细胞检查血
查方法。
正反定型结果不一致的解决办法
ABO
项
血 ①首先重复试验，如果仍然不符继续下列试 验。 型 鉴 ②重新采集新鲜血液标本，以纠正因污染或 定 样本错误造成的不符合。 （ 盐 水 ③多次洗涤被测红细胞和标准红细胞，除去 法 可能会影响试验结果的血浆中或红细胞保 ） 存试剂中的化学成分。 注 意 事 ④用抗A1、抗A+Baidu Nhomakorabea检测红细胞。
过程中精神不集中所致，因此为杜绝责任
性错误首先应该熟悉操作规程并严格执行。
（二）假 阴 性
1.标准血清不符合要求 2.被检红细胞抗原性减弱
3.红细胞悬液浓度配置不当
4.将溶血反应误认为不凝集
5.血型物质的中和作用
（三）假
2.冷凝集
阳
性
1.红细胞呈缗钱状排列
3.全凝集与多凝集
凝胶上层，而未和抗体结合的红细胞则沉
于凝胶底部（管底尖部）※。
【器材】微量吸样枪，一次性吸头，微柱凝
胶卡专用水平离心机。
【试剂】 特异性凝胶微柱卡
【操作】
ABO
（ 凝 胶 微 柱 法 ）
（1）将被检者红细胞（不用洗涤）配成2％～3％ 生理盐水悬液，向已标记好的特异性凝胶微柱卡 血 的微管反应腔内加50μL.
（ 盐 水 凝 集 法 ）
查找原因。
②异型配血时，主侧无凝集无溶血，次侧
有凝集无溶血，可以输少量血；如主侧、
次侧均不凝集或主侧凝集，不能输血，
需查找原因
交 叉 （1）受血者xxx（X型）血清＋供血者xxx 配 （X型）红细胞 凝集与否及强弱程度 血 （ （2）供血者xxx（X型）血清＋受血者xxx
操作标准化，结果特异、准确可靠，重
血 型 可手工、半自动及全自动操作 鉴 定 不足之处：
复性好、灵敏度高。
需要特殊试剂和离心机 成本较高。
全自动血 型仪
【原理】凝胶具有分子筛效应和亲合效应，
ABO 血 型 鉴 定
（ 凝 胶 微 柱 法 ）
在微株凝胶介质中红细胞抗原与相应抗体
结合，经低速离心，凝集的红细胞悬浮在
血型抗体）
2、聚凝胺法 3、抗人球蛋白法 4、蛋白酶法 5、微柱凝胶法
方法选择原则
①无输血及妊娠史者，只需作盐水配血。※
②有输血史，妇女有原因不明的流产史及新生 儿溶血病者，应用木瓜酶或抗人球蛋白、聚凝 胺介质法。
③有多发性骨髓瘤，进行性结核，肝损伤，输 过右旋糖酐的病人，为避免假阳性，作抗人球 蛋白配血。
【注意事项】
交 1.如果对患者的输血史或妊辰史不明， 叉 必须使用48h内的标本。 配 血 2.不能使用溶血标本。
（ 盐 水 凝 集 法 ）
3.配血后，受血者/供血者的全部标本 须于2～6℃冰箱保存7d以备复查。
交 叉 配 血
（ 盐 水 凝 集 法 ）
【方法学评价】
本法简易、经济、快速，缺点是
仅用于检查ABO血型系统的IgM 血型抗体是否相配，不能检出不 相配的IgG血型抗体。
盐 水 凝 集 法 ）
报告方式
（X型）红细胞 凝集与否及强弱程度 （3）受血者xxx与供血者xxx配血是否相合
DC1滴
PS1滴
主侧配血管
1000r/min 离心1min 观 察 上 层 液 有 无 溶 血
轻摇试管
肉眼观察有无凝集
有凝集
PC1滴
DS1滴
镜检证实 无凝集
次侧配血管
交叉配血盐水介质法操作示意图
1．生理盐水凝集法
原理
ABO ①ABO血型抗体一般是IgM，属于完全
血 抗体 型 ②IgM抗体分子链较长，能克服红细胞表 鉴 面排斥力，同时分子量较大，它能与相 定 应抗原特异性结合，在生理盐水中发生
肉眼可见的凝集现象。
IgM抗体凝集红细胞示意图
IgM在盐水介质中产生凝集
①玻片法：
操作简单，不需要离心，适于大规 模血型普查。 反应时间长，易忽略较弱的凝集而 导致定型错误。不适于反定型。
（ 凝 胶 微 柱 法 ）
1. 离心机选择：一般使用微柱凝胶卡专用 水平离心机。使凝集复合物不偏向一侧， 特别是阴性结果不偏向管底之一侧，以 免造成弱阳性假象。 2. 操作：每种微柱凝胶卡分为反应腔和凝 胶分离柱两部分。向反应腔内要先加红 细胞，后加血清或抗体。※ 3. 离心：为了应用不同离心半径和不同离 心机进行凝胶试验，应通过试验设定每 台离心机的最佳时间和速度。
交叉配血试验的注意事项
1．用于交叉配血的病人（受血者）血液标 本应该是抽取的新鲜血，供血者的标本是
刚从血袋剪下来的原已加热封闭两端小管
的血液。

2．采用试管法作交叉配血试验，最好
不用玻片法。
3．用生理盐水洗涤红细胞去除血浆，预防 纤维凝块的形成。 4．配血管中发生溶血现象，表明有抗原抗 体反应同时还有补体参与，是配血不合的 严重情况，应十分重视。
ABO 血 型 鉴 定
ABO 血 型 鉴 定（玻片法）
抗A血清1滴
加5％红细胞悬 液1滴，混匀 连续转动玻片 1～5min
凝 集
抗B血清1滴 抗A+B血清1滴
无凝集
镜检证实
②试管法：
ABO 血 型 鉴 定
需时间短，适用于急诊定型。 可正反定型。
可发现亚型或较弱抗原抗体反
应，结果判断可靠，为常规检
2、聚凝胺介质配血法（MPT）※
【原理】：①聚凝胺是带有高价阳离子的多聚 季氨盐，溶解后能产生很多正电荷，可以中 和红细胞表面的负电荷，减少细胞间排斥力， 缩小了其间之距离，出现非特异性凝集。 ②低离子强度溶液降低红细胞的Zeta电位，可 进一步增加抗原抗体见的吸引力。 ③枸橼酸盐解聚液可消除聚凝胺的正电荷，使 非特异性凝集消散，但IgM或IgG类血型抗体 与红细胞产生的特异性凝集不会散开。
型 （2）立即水平离心1000r/min, 10min. 鉴 定 （3）观察及判断血型结果①阳性：对照管细胞沉
淀在管底，检测管凝集块在胶上或胶中。 ②阴性：对照管和检测管细胞沉淀均在管底。 ③试验失败：对照管细胞在胶上或 胶中，应重新做试验。
（4）报告方式：同生理盐水法。
注意事项
ABO 血 型 鉴 定
5．盐水配血试验阴性，但有反复输血史或 妊娠史的受血者，应加酶法、抗人球蛋白 法等配血。 6．为确保输血的安全，应输同型血。
三、血型鉴定与交叉配血的异常及其克服 办法
（一）责任性错误
血型鉴定和交叉配血的技术并不复杂，
因配血错误而导致输入不合血液的事故中，
大多数是因为不严格执行操作规程或操作
ABO血型鉴定错误可以引起严重的后
果。
鉴定结果错误因素主要有技术问题及
ABO血型本身的问题。
二、交叉配血
（一）交叉配血的重要性
交叉配血是在输血前必须做的试验。 交叉配血中最重要的是ABO血型配合， 必需ABO血型相同，且交叉配血无凝 集才能输血。
（二）交叉配血一些基本概念
概念：是检查供血者与受血者是否含有不相 合的抗原合抗体成分的试验，主要是检查受 血者血清中有无破坏献血者RBC的抗体。
正定型结果分析
抗A血清
抗B血清
抗A、B血清
＋
被 检 红 细 胞
＋
＋ ＋
AB 型
反定型结果分析※ （被检血清和标准红细胞）
＋A型RBC
被 检 血 清
＋B型RBC
+O型RBC
血型
A型 B型 O型 AB型
－
＋
－
－ － － －
＋ ＋
－
＋
－
注意:被检血清＋O型RBC凝集，应考虑含有不 规则抗体或其他血型抗体。应追踪。
DS1滴
次侧配血管
判断配血是否相合
交叉配血凝聚胺介质法操作示意图
【方法学评价】
交 叉 配 血
（ ） MPT
聚凝胺介质法可加快凝集反应速度，使 原来在盐水介质中不能凝集红细胞的抗
体发生凝集，提高反应灵敏度，能检测
IgM、 IgG等引起溶血反应的几乎所有
规则与不规则抗体，适用于各类输血患
者的配血。故该法具有快速、灵敏、结
正反定型结果不一致的解决办法
⑤如怀疑血清中有抗A1，可用数份A2红细 胞标本进行检验。 ⑥如果试验结果未见凝集，应将反应管至 少在室温和40℃分别放置30min，用显 微镜检查。 ⑦若怀疑是由于抗原减弱造成的正反定型 不符，可进一步做木瓜酶试验、直接抗 球蛋白试验、吸收放散试验等加以鉴别。
ABO 血 型 鉴 定