第3章抗体的人工制备

单克隆抗体
单克隆抗体和普通抗体的比较
•第3节基因工程抗体 第 节基因工程抗体
•基因工程抗体（genetically engineering 基因工程抗体（ 基因工程抗体 antibodies）：第三代抗体，对Ig基因结构 ）：第三代抗体 ）：第三代抗体， 基因结构 与功能的了解与DNA重组技术相结合，根 重组技术相结合， 与功能的了解与 重组技术相结合 据研究者的意图在基因水平对Ig分子进行切 据研究者的意图在基因水平对 分子进行切 拼接或修饰， 割、拼接或修饰，甚至是人工全合后导入受 体细胞表达，产生新型抗体。 体细胞表达，产生新型抗体。
四、Ig相关分子
将抗体的部分片段连接到一些有治 疗作用的毒素或药物上，取代Fc片 段，可直接发挥毒素或药物的治疗 作用，起“生物导弹”作用。 例如：CD4免疫黏附素治疗AIDS。
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五、噬菌体抗体
噬菌体抗体（phage antibody）是 将一直特异性抗体分子的所有V区 基因在噬菌体中构成基因库，用噬 菌体感染细菌，模拟免疫选择过程， 具有相应特异性重链和轻链可变区 即可在噬菌体表面呈现出来。这种 技术成为噬菌体表面展示技术 （phage display technology）
为进一步减少鼠源蛋白在嵌合抗体中 的含量，将鼠抗体超变区基因嵌入人 抗体Fab骨架区的编码基因中，在将 此基因片段与人Ig恒定区基因相连， 然后转染杂交瘤细胞，使之表达V区 抗体，即为重构抗体（reshaping antibody）
三、单链抗体
单链抗体（single—chain antibody）又 称Fv分子。由VL区氨基酸序列VH区氨 基酸序列经肽连接物（linker）连接而成。 肽连接物还可以将药物、毒素或同位素 与单链抗体相连。这种抗体分子小，免 疫原性低；在血清中清除快；无FC片段， 避免非特异性杀伤；能进入实体瘤周围 的微循环等。
第4节 催化抗体
一、概念 催化抗体（ 催化抗体（catalytic antibody）也称抗体 ） ），是具有催化活性的免疫球 酶（abzyme），是具有催化活性的免疫球 ）， 蛋白， 蛋白，兼有抗体的高度选择性和酶的高效催 化性。 化性。 二、催化抗体的制备。
第3章 抗体的人工制备 (artificial antibody)
河南科技学院动物科学系
第1节 多克隆抗体
一、多克隆抗体概念 （polyclonal 多克隆抗体概念 antibodies,PcAb）：第一代抗体，是指由多 ）：第一代抗体 ）：第一代抗体， 克隆B细胞群产生的 细胞群产生的、 克隆 细胞群产生的、针对多种抗原决定簇的 混合抗体。 混合抗体。 将抗原物质经不同途径注入动物体内,经数次免 疫后采取动物血液,分离血清,由此获得的抗血 清即为多克隆抗体。 二、基本过程 抗原制备→动物免疫→血清效价测定→血清分 离与保存→多抗纯化与标记。.
第2节 单克隆抗体 一、单克隆抗体（monoclonal 单克隆抗体（
antibodies,McAb）：第二代抗体，单 ）：第二代抗体， ）：第二代抗体 克隆抗体：是指由一个B杂交瘤细胞活化 杂交瘤细胞活化、 克隆抗体：是指由一个 杂交瘤细胞活化、 增殖、分化产生的子代细胞克隆分泌的、 增殖、分化产生的子代细胞克隆分泌的、 针对一个抗原决定簇的抗体。 针对一个抗原决定簇的抗体。1975年， 年 由Kohler和Milstein建立单克隆抗体技 和 建立单克隆抗体技 术。
单 克 隆 抗 体 和 多 克 隆 抗 体 产 生 区 别 示 意 图
脾 B 细 胞
骨髓瘤小鼠 取腹水
抗原
骨髓瘤细胞 + PEG, 融合 杂交瘤细胞
Ab1 Ab2 Ab3 Ab4
抗血清
HAT培养， 培养， 培养 稀释
Ab3 Ab1 Ab2 Ab4 Ab1 Ab3 Ab4
普通抗血清.多克隆抗体 普通抗血清 多克隆抗体
一、嵌合抗体
嵌合抗体 （chimeric antibody)是指同一 抗体分子中含有不同种属来源抗体片段 的看体，又称杂种抗体．主要有“鼠－ 人类型。”Fab或Ｆ（ab）2来源于鼠类， Fc来源于人类。这种杂交瘤细胞分泌的 抗体特异性和亲和力与原杂交瘤细胞相 同，但减少了鼠源性成分。
二、重构抗体
六、全套抗体基因库
将全套抗体基因库中VH基因与有限数目 基因排列 将全套抗体基因库中 基因与有限数目VL基因排列 基因与有限数目 组合构建Ig，这种抗体基因库称为全套抗体基因库。 组合构建 ，这种抗体基因库称为全套抗体基因库。 这种方法用于催化抗体的筛选时，不致丢失。 这种方法用于催化抗体的筛选时，不致丢失。