任务六：植物组培快繁工厂化生产技术
植物组培苗工厂化生产与管理(自制)
0.5~10µL 5~20µL 20~200µL 100~1000µL 1~5mL 2~10mL 20L/h 360L 220v/(250˚CŦ1˚C) 150L，0˚C~99˚C 50L 双人单面
价格表 数量
2 1 4 1 3 2 3 2套
1 1 2 2 2 8
20 16单价/元 金额/万元
2500
15
3.75
锅炉房
30
800
2.4
仓库
100
800
8
快繁车间主要设施和仪器 价格表
名称
规格
数量
成像显微镜
分辨率2048*1536，具有 314万像素
1
离心机 3000~10000r/min
1
解剖镜 40倍
1
电泳设备
1
酶标定仪 96孔微机控制
1
洗瓶机 1500瓶/h
1
洗衣机
1
干燥架
2
医用手术车
以上各项成本累计，每株组培出瓶幼苗的成本为0.52~0.60元。 目前，组培苗多以移栽后的成苗作为商品苗出售，每瓶苗的有效 苗率为95%，移栽成活率和移栽后成苗商品合格率均为95%，则 100万株瓶苗通过移栽所得合格苗为812250株，实际上每株苗成 本0.85~0.90元。
若以每株定价2.5元出售，年可盈利： 812250*2.5-689684.86=1340940.14元
名称
面积/m²
单价/（元/m²）
金额/万元
洗涤室
30
2500
7.5
药品贮藏室
20
2500
5
药品配制室
20
2500
5
组织培养课程简介及课程标准
《组织培养》课程简介一、课程信息（1）课程名称：组织培养（2）参考学时：72学时（3）参考学分：4学分（4）开课学期：第3学期二、教学目标1、知识目标：（1）熟悉植物组织培养的含义；了解植物组织培养的发展史；（2）熟悉各种培养基的功能、作用、成分及其特点。
（3）学习常用的无菌操作技术；能够掌握消毒灭菌的基本步骤。
（4）学习各种外植体的处理方法和操作流程，能够对各种外植体实施合理灭菌。
（5）掌握试管苗的驯化移栽操作流程（6）掌握移栽试管苗的科学管理方法及提高移栽成活率的各种措施（7）掌握工厂化生产中出现的污染、褐化、玻璃化问题发生原因及处理措施；（8）了解工厂化生产的各类设施及设备；学习生产计划的制定和经营管理方法；（9）学习工厂化生产的工艺流程、组培生产的成本核算和效益分析。
（10）学习组织培养脱毒的方法及培养流程。
2、能力目标：（1）能够理解细胞全能性在组织培养中所起的作用；（2）能掌握实训验、室的布局与组成以及相应的设备；能合理设计组培实训验、室；（3）能够正确使用组培实训验、室的各种仪器及设备。
（4）会药品的称量技术及溶解程序；能够正确溶解各种药品并配制成母液。
（5）掌握灭菌方法；能够配制固体培养基并灭菌。
（6）能对不同的外植体进行恰当取材及处理。
（7）学会试管苗的驯化，能够掌握试管苗的驯化基本步骤。
（8）会处理各种外植体培养中出现的问题，能够对外植体的褐变及玻璃化采取相应的处理方案。
（9）能掌握组培苗的生态环境与温室环境的差异并能严格按照操作流程进行科学管理。
（10）能按照工厂化生产流程、技术环节进行组培生产、成本核算、效益分析；（11）能对马铃薯、草莓等材料实施脱毒培养。
3、素质目标掌握组织培养的基本理论、实用规划设计与操作技术技巧、个体植物组织培养途径与方法，将职业道德和能力的培养紧密结合起来，养成职业应遵循的思想和行为规范。
在课程目标实施过程中养成敬业、诚信、合作、交流、生存、发展等基本素质。
植物组培苗工厂化生产与管理(自制)
8.炼苗移栽车间 主要是进行组培苗清洗、整理、炼苗、移栽和培育的地方， 要求清洁，最好配有恒温恒湿控制设备、喷雾器、光照调节 装置等。主要设备有基质灭菌机、基质搅拌机、装盘机、育 苗盘、育苗筒、种植钵等。 9.苗圃 可分为原种圃、品种栽培示范圃、繁殖圃。 原种圃主要是保存引进或选育的优良资源、 品种栽培示范圃主要是展示本工厂生产的各种组培苗的成年 植株，展示其优良的性状和生产习性。 繁殖圃主要繁殖不同规格的商品苗。
3.药品配制车间 主要用于配制各种母液及其他液体，面积应为15~20m2，车 间内应设置1~2个实验台，台面应使用防腐蚀台面，且牢固， 平稳。主要放置磁力搅拌器、电子天平、玻璃器皿柜等。实 验台下方存放称量药品用的药匙、硫酸纸、毛刷、吸水纸、 玻璃棒等物品。在屋内一角安装通风橱，一排放有毒、有害 气体。 4.培养基制作车间 主要用于培养基的配制、灭菌和存放。制作间面积为 80~100m2，空间要宽敞透亮，设备摆放合理。制作室里应有 大型实验台及高压灭菌锅、电热干燥箱、液化煤气炉、电炉、 移液架、培养基罐装器、微量可调移液器、酸度计、蒸馏水 器、恒温培养箱、冷藏柜等设备。
4、组培工厂设计设想
1、试管苗增值率的估算
组培苗增值率计算： y=mXn （y年繁殖数，m瓶内母株苗数，x每个培养周期 增值的倍数，n全年可增殖的周期次数） 蝴蝶兰每一个月为一个繁殖周期，每年繁殖10次，每次 增殖3倍，若年产100万株，则根据公式m=y/xn可得m=17株 所以17株无菌蝴蝶兰苗经过一年繁殖即可得到一百万株。 但实际生产过程中应考虑污染率、不合格苗率以及成活率等 因素。 因此需增加一倍的保险系数，实际生产过程中需要35个 原种无菌苗。
2.试管苗移栽的设施设备 主要有装盘机，育苗盘，育苗筒，电热温床，基质搅拌机，喷药消 毒机，各种肥料，以及活性炭，蛭石和珍珠岩等移栽基质。
利用组培快繁技术大规模生产文心兰种苗
时注意防治病虫害 ，保持通风透光 。管理４ 个月以后 ～６
就可以出圃移栽 。圜 参考文献
【 陈心 启， 占和 ， 波． １ 】 吉 罗毅 中国野 生兰科植物彩 色图谱 ［ ． 京 Ｍ】 北 ７ ２
的侧芽消毒后成活率会 比较高。对于花梗 ，一般是在花
梗长至２ ３ ｃ ０～ ０ ｍ，花苞还没有形成 时采集 。采芽时 ， 用消毒后的手术刀将侧芽从基部切下 ，在母株切 的伤 口
和３ ％香蕉泥 的培养基 中，５ ｄ ０后会发现在小芽 的底部长 出圆球茎 。再将其小芽的顶端除去 ，与圆球茎一起转入
滴 的吐 温 。
现将 文心兰组织培养的规模化生产分为外植体的采取 、
消毒 ，圆球茎的诱导 、分化 ，壮苗培养 ，小苗的生根培
养 ，以及各 阶段 （ 增殖 、壮苗、生根 、驯化４ 阶段 ） 个 苗株的光照和温度的控制进行论述 。各 阶段见 图１ 。 １外植体采集 文 心 兰组 织 培 养 的外 植 体材 料 主 要是 侧 芽 与花 芽 。侧芽的采集在３ 月 比较合适 ，花芽采取 的时间主 —５ 要是４ 月 和１—１月 。该 阶段是海南文心兰侧芽和花 —６ ０ ２
采集的侧芽要选 自健康优 良母株 ，选取侧芽 的标准
为长７ ｃ ～８ ｍ，叶鞘未张开 ，侧芽健壮无病虫 害。这样
３ ｄ ，观察到有小芽长出时 ，将其转入 １ ＭＳ ． ｇ ０后 ／ ＋２ ｍ ／ ２ ０ Ｌ６ Ｂ － Ａ＋０２ ｇ Ａ ．ｍ ／ Ｎ Ａ＋２ Ｌ ％蔗糖 ，附加物为 １％椰乳 ０
Ｃｈｉ Ｔ ｒ ｎａ ｏｐｉ ａ Ａ ｇ ｉ ｕｌｕｒ ｃｌ ｒｃ ｔ ｅ
任务六植物组培快繁工厂化生产技术
任务六植物组培快繁工厂化生产技术引言随着现代农业的发展，人类对植物的快速繁殖和大规模生产有着日益增长的需求。
植物组培快繁工厂化生产技术应运而生，能够在短时间内大量繁殖出经济植物。
本文将介绍植物组培快繁工厂化生产技术的原理、步骤以及应用前景。
原理植物组培快繁工厂化生产技术以植物的组织培养为基础，通过外植体分离、无菌培养、激素诱导和再生调控等步骤，实现对植物的大规模繁殖。
具体原理如下：1.外植体分离：从模式植物中选择优质的外植体，如茎尖、叶片、花芽等，并将其分离出来。
2.无菌培养：将分离出来的外植体进行无菌处理，以避免细菌、真菌等外界微生物的污染。
3.激素诱导：给予适当的培养基和激素，通过调控激素浓度和比例，促使外植体细胞不定分化和再生。
4.再生调控：通过光照、温度、培养基成分等条件的调控，促使植物的再生和定植。
步骤植物组培快繁工厂化生产技术的步骤如下：1.外植体选取：从模式植物中选择适合组培快繁的外植体，如茎尖、叶片或花芽等。
外植体的选择影响着后续步骤中细胞再生的效率和质量。
2.外植体表面消毒：将选取的外植体进行外表面消毒处理，以防止外界微生物的污染。
3.外植体分离：将外表面消毒处理后的外植体进行分离，通常使用手术刀或镊子等工具进行操作。
4.无菌培养：将分离出来的外植体放置在无菌培养基上，培养基含有适当的营养物质和激素，以促进细胞再生。
5.细胞再生调控：通过调节培养基中激素的浓度和比例，调节适宜的光照和温度，以及合理的培养时间，控制外植体细胞的再生。
6.萌发定植：当外植体细胞再生成植株之后，将其移植到含有适当营养物质的营养基中，继续生长和发育。
应用前景植物组培快繁工厂化生产技术在现代农业中有着广阔的应用前景。
以下是几个典型的应用领域：1.稀有药材的大规模生产：植物组培快繁工厂化生产技术能够快速繁殖稀有药材，提高其产量，满足市场需求。
2.空间植物生产：植物组培快繁工厂化生产技术可以在太空站等特殊环境中进行，为宇航员提供新鲜的食物和氧气。
植物组织培养有什么应用[详细讲解]
![植物组织培养有什么应用[详细讲解]](https://img.taocdn.com/s3/m/abfe2ccd51e2524de518964bcf84b9d528ea2ca9.png)
植物组织培养有什么应用一、农业上的应用1. 快速繁殖种苗(rapid propagation)用组织培养的方法进行快速繁殖是生产上最有潜力的应用，包括花卉观赏植物、蔬菜、果树、大田作物及其他经济作物。
快繁技术不受季节等条件的限制，生长周期短，而且能使不能或很难繁殖的植物进行增殖。
快速繁殖可用下列手段进行：⑴通过茎尖、茎段、鳞茎盘等产生大量腋芽；⑵通过根、叶等器官直接诱导产生不定芽；⑶通过愈伤组织培养诱导产生不定芽。
试管快速繁殖应用在下列生产或研究中：(1)繁殖杂交育种中得到的少量杂交种，以及保存自交系、不育系等。
(2)繁殖脱毒培养得到的少量无病毒苗。
(3)繁殖生产上急需的或种源较少的种苗。
由于组织培养周期短，增殖率高及能全年生产等特点，加上培养材料和试管苗的小型化，这就可使有限的空间培养出大量的植物，在短期内培养出大量的幼苗。
2.无病毒苗(virus free)的培养植物在生长过程中几乎都要遭受到病毒病不同程度的危害，有的种类甚至同时受到数种病毒病的危害，尤其是很多园艺植物靠无性方法来增殖，若蒙受病毒病，代代相传，越染越重，甚至会造成极严重的后果。
自从Morel l952年发现采用微茎尖培养方法可得到无病毒苗后，微茎尖培养就成为解决病毒病危害的重要途径之一。
若再与热处理相结合，则可提高脱毒培养的效果。
对于木本植物，茎尖培养得到的植株难以发根生长，则可采用茎尖微体嫁接的方法来培育无病毒苗。
组织培养无病毒苗的方法已在很多作物的常规生产上得到应用。
如马铃薯，甘薯，草莓，苹果，香石竹，菊花等。
而且已有不少地区建立了无病毒苗的生产中心，这对于无病毒苗的培养、鉴定、繁殖、保存、利用和研究，形成了一个规范的系统程序，从而达到了保持园艺植物的优良种性和经济性状的目的。
3. 在育种上的应用(breeding)植物组培技术为育种提供了许多手段和方法，使育种工作在新的条件下更有效的进行。
⑴倍性育种，缩短育种年限，杂种优势明显。
甜叶菊组培快繁与工厂化育苗技术
21BIOTECHWORLD 生物技术世界甜叶菊(Stevia rebaudiana.Bertoni),又名甜菊、甜草、甜茶,是菊科类草本植物,是纯天然含高糖甙的制糖原料。
原产巴拉圭和巴西。
以甜叶菊干叶为原料,提取精制甜叶菊糖甙,系纯天然、高甜度、低热能甜味剂,其甜度约为蔗糖的300－400倍,热量却为蔗糖的1/300,近年来,广泛用于饮料、食品、医药和日用化工等用糖行业中,可以防治糖尿病、肥胖症、高血压、小儿龋齿等疾病。
因甜叶菊种子结实率低,种子小、极易丧失活力,发芽率低,遗传性状不稳定,从而使甜叶菊优良品种推广受到限制。
采用组培方法可保持优良品种的性状,使优良品种快速进入市场。
据此,2010年笔者对甜叶菊优良母株进行了组培快繁并工厂化育苗200多万株。
1 材料与方法1.1 材料采用优良品种“菊隆5号”甜叶菊植株为材料,其特征总甙含量高,其中的RA含量也高,甜叶菊干鲜比1:3,一般干叶两茬亩产量250-300公斤。
材料由江西省菊隆高科技实业有限公司提供。
1.2 外植体灭菌将外植体剪成1.2－1.5cm长的茎段,再放低浓度的洗洁精水浸泡3－5分钟,用流水冲洗1－2个小时后放置于超净工作台上进行消毒处理。
外植体的消毒采用75%酒精10秒钟,再在0.1%的升汞溶液再浸泡10分钟,无菌水冲洗4－5次。
将单芽茎段接种于诱导培养基,每瓶接种一个茎段。
诱导培养基①MS+6BA1.0mg/L+NAA0.2～0.5mg/L;②MS+6BA1.2mg/L+NAA0.2～0.5mg/L;③MS+6BA1.5mg/L +NAA0.2～0.5mg/L,以筛选出最佳的激素配比。
培养基加蔗糖30g/L,卡拉胶6.8g/L,PH值5.8。
每处理接种50瓶,3次重复,将接种瓶放入培养室培养,培养温度24－28℃,光照时间14h/d,光照强度2000－3000lx。
1.3 继代增殖培养将侧芽诱导获得的2－6cm长的无菌苗切成2cm长带2－3片叶的茎段,接种到增殖培养基中,增殖培养基以MS为基本培养基,添加激素组合6－BA(0.6、0.8、1.0 mg/L)、(NAA0.1、0.2 mg/L)的增殖培养基,共6个处理:①MS+6BA0.6mg/L+NAA0.1mg/L;②MS+6BA0.6mg/L+NAA0.2mg/L;③MS+6BA0.8mg/L+NAA0.1mg/L;④MS+6BA0.8mg/L+NAA0.2mg/L;⑤MS+6BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L;⑥MS+6BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L。
特色中药材品种选育及工厂化组培快繁生产方案
特色中药材品种选育及工厂化组培快繁生产方案特色中药材品种选育及工厂化组培快繁生产方案中草药作为我国传统医学的重要组成部分，在中医药领域一直有着重要的地位。
为了满足不断增长的中草药需求，并保护野生中草药资源，选育适应工厂化生产的中草药品种，并利用组培技术进行快速繁殖是非常关键的。
本文将探讨特色中药材品种选育及工厂化组培快繁生产方案。
特色中药材的品种选育是中草药生产的关键环节。
在传统条件下，选育新品种十分耗时费力，通常需要几十年的时间。
而现代生物技术手段的应用使得中草药的品种选育大大加快。
通过高通量测序技术，可以在短时间内对中草药材的基因组进行测序，从而挑选出优质种质资源并进行后续的遗传改良。
此外，通过传统的杂交育种方法，也可以将优异的基因导入到中草药材中，使其具备更好的抗病虫害能力、生长速度和产量。
对于已选育好的中草药品种，为了满足大规模工厂化生产的需求，需要将其快速繁殖。
组培技术是一种非常有效的快速繁殖手段。
组培技术利用植物组织的发育和再生能力，在无菌条件下培养植物细胞、组织、器官，促使其进行快速增殖和再生。
主要通过外植体的选择和培养基的优化来实现。
外植体的选择需要根据中草药材的生长特性和再生能力，选择适合的外植体材料。
培养基的优化则是针对不同的中草药材种类和要求，调整培养基的成分和激素浓度，以促进细胞分裂和再生。
通过组织培养的方式，可以在短时间内获得大量的无菌苗，从而实现中草药的快速繁殖。
在实际的工厂化组培快繁生产中，还需要注意以下几点。
首先，必须建立完善的无菌培养体系，保证外植体的无菌性。
其次，要选择合适的生长条件，包括温度、光照、湿度等，促进植株的生长和再生。
另外，对于特定的中草药材，还需要考虑其生长周期和生长习性，在培养过程中进行合理调整和管理，以提高快繁的成功率和产量。
总之，特色中药材品种选育及工厂化组培快繁生产方案是中草药产业持续发展的关键环节。
通过应用生物技术手段，可以快速选育出合适的中草药品种，并通过组培技术实现快速繁殖。
亚龙组培分享蝴蝶兰组培工厂化生产流程及注意事项
蝴蝶兰组培工厂化生产流程及注意事项蝴蝶兰原产于亚热带雨林地区，是附生性兰花，其气生根发达，生长过程中吸收空气中的养分，并促进光合作用，蝴蝶兰在种植过程中，需要通过人工授粉才能结出果实，所以人工授粉工作量大，不易于大量生产。
从而利用植物组培快繁技术，进行蝴蝶兰的组培苗生产，下面让我们来看下蝴蝶兰组培快繁流程及注意事项。
一、培养基的研究和配制1．在蝴蝶兰的组织培养中，培养基的种类与成分是决定组培成功与否的关键因素之一。
蝴蝶兰不同品种、不同培养材料或不同的生长阶段对培养基的要求都不同，因此，培养基的研究和选择是一个非常关键的基础性工作，也是蝴蝶兰组培生产中的关键环节之一。
2．在培养基的配制过程中，要保证所使用的各种试剂或原材料的稳定性（如不使用过期的试剂，不使用变质的椰子汁、香蕉等原材料）。
3．在培养基的配制过程中，要保证各种称量的准确性。
二、外植体的取材与消毒处理1．外植体的取材选择除培养基成分外，决定蝴蝶兰组培成败的另一个重要因素就是外植体的来源。
虽然从理论上讲，植物细胞都具有全能性，能够再生新植株，因此任何器官、任何组织，都可以作为外植体。
但实际上，蝴蝶兰的不同器官之间的分化能力有巨大差别，因此选择合适的外植体就显得尤为重要。
①蝴蝶兰的组培外植体主要有叶片、花梗腋芽、花梗节间、茎尖、根尖等，其中花梗腋芽是蝴蝶兰组培的最佳外植体，也是目前利用最广泛的。
②在选择外植体时，应先选择生长健壮、无病虫害、不变异的母株。
③在采取外植体前，对母株进行采前预处理（在采前5-7天，用杀菌剂喷洒母株），可有效预防和降低内源性污染，提高诱导的成功率。
④外植体的最佳成熟度：叶片：叶龄3-5天花梗腋芽：第一朵花现蕾时茎尖或根尖：无菌苗或株龄40天内的植株2.外植体的消毒无菌的外植体材料是蝴蝶兰组培成功的重要前提和根本保证，而消毒是获得无菌外植体的有效方法，它通过一些表面消毒剂来杀死外植体表面的微生物，又尽可能保持外植体的生命力。
马铃薯组培苗工厂化高效快繁规程
马铃薯组培苗工厂化高效快繁技术马铃薯组培苗工厂化高效快繁技术摘要：本文介绍了我系在脱毒马铃薯快繁上的生产技术，较常规马铃薯快繁技术有所改进，本文就马铃薯从培养基制作、接种技术到温光湿控制到瓶装苗及其污染控制、消毒灭菌和日常管理等方面介绍了马铃薯脱毒苗快繁生产管理技术要点和应注意的问题，以求达到工厂化高效快繁目的。
关键词：马铃薯，组培苗，高效，快繁，工厂化生产江苏农林职业技术学院农艺系王宇二0一一年七月十五日目录一、前言 (2)二、组培实验室的合理设计 (3)（一）组培实验室组成 (6)（二）设计具体原则 (8)（三）我系组培室平面简图 (8)三、实验室设备配制 (3)（一）通用器械 (6)（二）各种盛具 (8)（三）计量器械 (6)（四）灭菌器械 (8)（五）接种器械 (6)（六）培养器械 (8)（七）其它设备 (6)四、培养基的制作 (3)（一）培养基成分 (6)（三）培养基的配制 (8)五、接种操作 (8)（一）准备工作 (3)（二）接种步骤 (4)（三）记录与打扫 (4)六、培养条件管理 (9)（一）培养条件 (9)（二）继代次数及繁殖速率 (9)七、日常管理 (9)（一）污染防治 (4)（二）定期检查 (10)八、常见问题及解决措施 (9)（一）培养基配制中常见问题 (3)（二）组培苗污染原因及解决措施 (4)（三）组培苗常见问题 (4)马铃薯组培苗工厂化高效快繁技术一、前言马铃薯是无性繁殖的，以前主要以营养器官薯块播种，极易感染病菌，种薯年年退化，种薯“退化”主要是由病毒引起的，通过茎尖分生组织培养及后期的良繁体系能够获得“无病毒”的“复壮”健康种薯。
我国从上世纪70年代初开始研究推广这一技术，现已作为一种成熟技术被广泛应用，实践证明用高质量的脱毒种薯可使产量增加30%-50%，我国近两年已加大生产和推广脱毒薯力度，无毒种薯已渐渐在主产区普及，推广种植面积达66．67万hm2，每年增效2．5亿元以上。
组培苗工厂化生产与管理
教学目的：掌握组织培养技术在植物组培苗工厂化生产中的应用，了解植物组培苗生产工厂的设计与生产工艺流程，学习生产成本核算、效益分析以及提高经济效益措施，使学生掌握植物组培苗工厂化生产基本技术，熟悉生产各环节的管理措施。
职业技能教学点：具备一定组培工厂管理基础，并有工艺流程设计的基本能力，能够进行基本的成本核算。
教学时间：2学时教学重点：植物组培苗生产计划的制定和实施，植物组培苗生产工厂成本核算、效益分析。
教学难点：植物组培苗生产工厂成本核算、效益分析。
教学内容：第一节植物组织培养工厂化生产一、商品化生产规模及工艺流程（一）试管苗生产规模的确定商业化生产规模的确定应以市场需求为标准，否则试管苗难以销售，造成经济损失。
外植体的入瓶；器官形成及增殖；试管小植株出瓶等试管苗生产过程均是在无菌条件下进行的，因此，试管苗生产规模是以无菌工作台的数量来衡量的。
一般一个单人无菌工作台可年生产10万～15万株苗，一个1.2m×0.6m×2.0m的6层培养架可年繁殖1.5万～2万株试管苗。
年产100万株的组培苗生产工厂，需8～10个无菌工作台，培养架40～50个。
一个超净工作台的面积一般为7～8m2，两个则为10～12 m2，一个培养架的面积（1.2 m2×0.6 m2×2.0 m2）。
年生产量达100万株的试管苗工厂，接种室面积应为40～50m2，培养室面积则为100～120m2。
培养容器的数量取决于生产规模，一个6层培养架(1．2mX0．6mX2．Om)可放置900个左右三角瓶，还需增加10％～15％的周转用培养容器。
例：矮牵牛扩繁中每天有4人接种，每人每天按接种300瓶计算，则每个工作日需要1200瓶，按一个月为一个增殖周期，按每个月有25个工作日，则存架增殖数为：25×1200=30000瓶。
(二)商业化实验室的设计根据生产规模和组织培养的生产程序，实验室应尽量布局合理，使生产程序能连续、有效地进行。
植物无糖组培快繁技术
探索无糖组培快繁技术在更多植物种类和应用领域中的潜 力，如濒危植物保护、种质资源保存、药用植物繁育等， 促进其在实践中的广泛应用。
THANKS
感谢观看
快速扩繁
无糖组培技术可以在短时 间内扩繁出大量的优质果 树和林木苗木，提高造林 和栽培的效率。
农作物脱毒苗的繁育与应用
脱毒苗生产
利用无糖组培技术，可以生产出 无病毒、无病原菌的农作物脱毒 苗，提高农作物的产量和品质。
病虫害防治
农作物脱毒苗具有较强的抗病抗 虫能力，可以有效减少农药的使 用量和频率，降低对环境的负面
技术原理与基本流程
基本流程 1. 选择适宜的外植体（如种子、幼苗、叶片等），进行消毒处理。
2. 将外植体接种到无糖培养基上，添加适量的激素和营养物质。
技术原理与基本流程
3. 在恒温、光照充足的培养室 内进行培养，定期观察并记录生
长情况。
4. 当植株生长至一定大小时， 进行炼苗处理，提高其适应外部
不受范围
技术优点与应用范围
农业生产
用于繁殖优良作物品种，提高农业生产效率 。
医药产业
用于繁殖药用植物，提取药物成分。
园林绿化
繁殖花卉、树木等观赏植物，丰富城市绿化 。
科研实验
用于植物生理、生化、遗传等方面的研究。
技术原理与基本流程
• 技术原理：植物无糖组培快繁技术基于植物细胞的全能性，即 植物细胞具有发育成完整植株的潜能。通过提供适宜的培养条 件和激素配比，可以诱导植物细胞或组织进行分裂、生长和分 化，最终形成完整的植株。
保持品种特性
无糖组培技术可以确保观赏植物幼 苗保持原品种的优良特性，提高观 赏价值。
果树与林木的优质苗木繁育
植物无糖组培快繁技术
光照、温度等环境因素对快繁效果的影响及解决方案
光照、温度等环境因素对植物无糖组培快繁效果的影响
光照强度、光照周期、温度等环境因素对植物无糖组培快繁效果具有重要影响。
解决方案
针对不同植物种类和生长阶段，调整光照强度、光照周期、温度等环境因素，以获得最 佳的快繁效果。
病虫害防治及生物安全性问题解决方案
植物材料的保存与运
保存
将植物材料放置在适宜的温度、湿度 和光照条件下保存，定期检查其生长 状况。
运输
在运输过程中，要保证植物材料的包 装完整、防止污染和失水，确保其生 命活动正常。
04
无糖组培快繁技术的操作流程
接种前的准备与消毒工作
01
02
03
设备与器材准备
准备好接种用的培养皿、 培养基、接种工具、酒精 灯等。
THANKS
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将配制好的培养基分装到组培瓶 或其他容器中，以备接种使用。
培养基的优化策略与实例
根据植物种类和生长阶段调整激素比例和种类。
输标02入题
根据培养条件和目的添加其他添加物，如活性炭、抗 生素等。
01
03
实例：以某种植物为例，通过实验比较了不同激素配 比和种类对植物生长和繁殖的影响，最终确定了最佳
的激素配方和添加物种类与浓度。
消毒工作
对接种环境进行消毒，包 括空气、台面、手等，确 保无菌操作。
培养基制备
根据植物种类和生长需求 ，制备适合的培养基。
接种操作的方法与技巧
灭菌操作
用酒精棉对手部进行消 毒，再使用紫外灯对接
种环境进行灭菌。
切割与消毒
用消毒过的刀片将植物 材料切割成适合的大小 ，再放入消毒液中浸泡
消毒。
第二章 植物组织培养快速繁殖
第二章：植物组培培养快速繁殖目的要求：1.掌握组织培养实验室的设计；掌握组织培养常用的实验仪器设备及其使用方法；2.掌握培养基的种类、特点；掌握基本培养基的配方；一般掌握培养基的组成成分和适宜的剂量；掌握培养基母液和常用培养基的配制方法和步骤；熟练掌握培养基的灭菌方法；一般掌握培养基的筛选办法。
3.了解组培快繁的类型，重点掌握无菌培养物的建立。
4.掌握植物组培快繁中常见问题的解决措施。
教学重点、难点：基本培养基的配方；培养基母液和常用培养基的配制方法和步骤；培养基的灭菌方法；培养基的筛选办法。
第一节植物组培快繁的工厂化生产设施在进行植物组织培养工作之前，首先应对工作中需要哪些最基本的设备条件有个全面的了解，以便因地制宜地利用现有房屋，或新建、改建实验室。
实验室的大小取决于工作的目的和规模。
以工厂化生产为目的，实验室规模太小，则会限制生产，影响效率。
在设计组织培养实验室时，应按组织培养程序来设计，避免某些环节倒排，引起日后工作混乱。
植物组织培养是在严格无菌的条件下进行的。
要做到无菌的条件，首先需要一定的设备、器材和用具。
一个标准的组织培养实验室应当包括：普通实验室（洗涤室、培养基配制室）、无菌接种室、恒温培养室、观察培养情况并作记录的细胞学实验室等。
在实际中可结合可行条件，合并一部分。
实验室的大小和设置可根据自己的工作性质和规模自行设计，其中最主要的是无菌操作室和恒温培养室。
一、植物组培快繁场地设计（一）组培快繁场地的选择无菌环境，周围安静、无污染，阳光充足，无高大建筑物遮挡，交通便利。
（二）组织快繁厂房的设计1.药品贮藏间面积10~15m2，需终年保持相对较低的温度和较好的通风干燥条件，同时需要遮光。
2.药品配制间面积15m2左右，需抗盐酸、牢固、平稳，具有较好抗震性的试验台。
3.玻璃器皿洗涤间（cleaning room）面积20m2左右，本室主要用于组织培养所需玻璃器皿等仪器的清洗、干燥和贮存。
植物组织培养技术：3-任务三 植物组培快繁技术
已离体培养植株 （试管苗）
❖ 多数情况下，应尽量使用温室或人工气候室控制 培养的植物材料作为外植体来源，减少培养过程 中的微生物感染概率。同时，生长在控制条件下 的植物可以保持培养料间的一致性，提高实验的 可重复性，也便于培养技术的规范。
❖ 某些多年生植物或特殊材料，必须取自自然生长 的植物，就需要尽可能避免使用那些生长过于潮 湿和不洁净环境中的植物。对于培养过程中可能 出现内生菌污染的材料，应尽量取生长旺盛期的 生长点部位作为起始培养的材料。
任务四、植物脱毒技术
植物病毒对园艺植物的危害；脱毒技术； 脱毒苗鉴定；脱毒苗的保存和繁殖。
任务五、常见园艺植物的脱 毒与快速繁殖
马铃薯、苹果、草莓、兰花的脱毒快繁。
主要内容
1. 外植体选择与处理 2. 外植体培养 3. 试管苗驯化移栽 4. 快繁过程中出现的问题及解决办法
回顾知识点： ❖ 什么是外植体？
因此，外植体的采集尽量选用植物体最幼态的组织。
2、材料取材
(4)外植体的大小： 外植体越大，污染率越高，但也不能过小，越小成活率越 低。在通常情况下，叶片、花瓣等的面积约为5mm²，茎段 为0.5cm²，除非是用于去除病毒，否则不宜将外植体切得
过小。
一、外植体选择与处理
（二）外植体处理
1、外植体预处理 首先，将采来的植物材料除去不用的部分，将需要的部分仔细洗干 净，如用刷子刷洗。 把材料切割成适当大小，以能放入灭菌容器为宜。 置于自来水下流水冲洗几分钟至数小时，冲洗时间视材料清洁轻度 为宜。细小的材料，可装入纱布袋内冲洗。洗时可加入洗衣粉清洗， 然后用自来水清洗洗衣粉水。目的是去除轻度附着在植物表面的污 物，除去脂质性的物质，便于灭菌液的直接接触。最理想的清洗物 质是表面活性物质——吐温。
植物组培快繁程序
如：①红光促进杨树愈伤组织的生长，蓝光阻碍其生长。
3）光照时间
根据植物生物学特性决定； 光照长短对试管内花的形成是个重要影响因素，一般给予周期性光照比较好。多数植物8-10小时黑暗为宜。光周期长短因植物种类而异。在胡萝卜组织培养中随着日照长度的增加，而促进生长。
大多数植物23-32℃，一般控制在25±2ºC。低于15C或高于35C，对生长都是不利的。 植株种类及外植体的不同，其最适温度也是不同的。如百合20℃；月季25－27℃；番茄28℃。
操作期间双手和台面常用70%酒精或消毒剂擦拭。超净工作台使用前必须用紫外灯照射杀菌，然后开启风机。
2、表面灭菌
接种用工具（解剖刀、剪刀、镊子）可放入70-75%酒精中，使用时需火焰灼烧灭菌，冷却后使用。
外植体放入超净工作台内，置70-75%酒精中5-60 秒，0.1％氯化汞6-10分钟，或10%的漂白粉上清液中10-15分钟，然后用无菌水冲洗3-5次。灭菌时需进行搅动。
继代培养
生根培养
3、培养步骤
（1）初代培养
目 的：获得无菌材料和无性繁殖系。 无性繁殖系：是指由一个外植体继代增殖，繁殖出的具有相同遗传物质的植株群体。包括：芽丛、不定芽、胚状体、原球茎等。
培养基：诱导或分化培养基。 培养基中CTK多，IAA少。
类 型（根据发育方向）： 丛生芽增殖型 器官发生型 胚状体发生型 原球茎发生型
根、芽
01.
胚状体
01.
根、芽
01.
愈伤组织
01.
芽
01.
根
01.
芽
01.
外 植 体
01.
试 管 苗
01.
01.
原球茎
01.
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学习情境
情景一：工厂化生产中常见问题的处理 子情境一：植物组培快繁中褐变问题 及处理 子情景二：植物组培快繁中玻璃化现 象及处理 情境二：工厂化生产技术 子情景一：工厂化生产的主要设施和 设备 子情境二：工厂化生产的工艺流程
子情境一：植物组培快繁中褐变 问题及处理
Leabharlann 一、褐变的原因 1、植物品种 由于多酚氧化酶活性上的差异 ，不同品 种间的褐变现象是不同的。 2、生理状态 由于外植体的生理状态不同，所以在接种 后褐变程度也有所不同。 3、培养基成分 浓度过高的无机盐会使某些观赏植物的 褐变程度增加，此外，细胞分裂素的水平过高也会刺激 某些外植体的多酚氧化酶的活性，从而使褐变现象加深 。 4、培养条件不当 如果光照过强、温度过高、培养时 间过长等，均可使多酚氧化酶的活性提高，从而加速被 培养的外植体的褐变程度。
子情境二：工厂化生产的工艺流 程 月份如下表所示 前一年 1～9 月 ： 1～12 月 2～6 月 4～10 月
接种车间 消毒材料 优 良 稀 缺 单 株 或 插 条 培养车间 试管苗 30d 30d 扩 大 繁 殖 试管苗 简易快繁苗 沙培苗 移栽车间 光培炼苗 育苗基地
茎尖 茎段
单芽
沙培炼苗 温室营养袋苗 大 田 苗 圃
三、经营管理措施
（一）、机构设置与部门岗位职责 要合理设置组培苗木工厂化生产的组织 机 构，健全管理机制，明确各部门岗位职责 。 （二）、生产计划制定与组织实施 通过市场调查与分析预测，结合自身生 产条件和能力，科学制定生产计划，并 有效组织实施，使生产目标制定合理，
（三）、人员管理 人员管理号，生产效率、产品质量就有 了保障，经济效益也会随之提高。 （四）、生产过程管理 组培苗木工厂化生产工艺流程比较发杂 ，涉及许多方面的工作，通过制定合理 的规章制度，实施科学化、规范化、标 准化的管理，才能使生产按计划有条不 紊的进行，保证产品质量，避免人为损 失。
二、防止褐变的措施
1、选择合适的外植体 一般来说，最好选择生 长处于旺盛的外植体，这样可以使褐变现象明 显减轻。 2、合适的培养条件 无机盐成分、植物生长物 质水平、适宜温度、及时继代培养均可以减轻 材料的褐变现象。 3、使用抗氧化剂 在培养基中，使用半胱氨酸 、抗坏血酸等抗氧化剂能够较为有效地避免或 减轻很多外植体的褐变现象。另外使用0．1％ -0．5％的活性炭对防止褐变也有较为明显的 效果。 4、连续转移 对容易褐变的材料可间隔12-24h 的培养后，再转移到新的培养基上，这样经过
子情景一：工厂化生产的主要设 施和设备
植物组织培养苗的工厂化生产设施和设备应根 据生产技术的要求、生产规模的大小等来设置 。组培苗生产过程的每一个环节，按工厂化生 产概念应称为“某某生产”，承担该项生产任 务机构称为“某某车间”，如培养基的配制应 称为“培养基生产”，进行培养基配制的实验 室称为“培养基生产车间”。根据组培苗生产 要求，一个规范化的组培苗工厂的生产车间应 包括组培车间（包括预处理室、灭菌室、试剂 室、培养基配制室、无菌接种室、试管苗培养 室）、试管苗移栽车间和大田圃苗培育车间等 。
子情景二：植物组培快繁中玻璃 化现象及处理
一、 玻璃化的概念 玻璃化是一种生理病害 ，包括茎叶透明 状、海绿色、水浸状等现象，出现玻璃 化的茎叶表面完全无蜡质，导致细胞丧 失持氺能力，细胞内水分大量外渗，增 加了植株水分的散发和蒸腾，极其容易 引起植株死亡，而且不能移栽成活。
二、玻璃苗的特征
3、生产计划制定需考虑的问题 （1）对各种植物的增殖率应作出切合实 际的估算 。 （2）生产全过程配套的技术储备 （3）要掌握或熟悉各种组培苗的定制时 间和生长环节 （4）要掌握组培苗可能产生的后期效应
二、生产成本核算与效益分析
（一）成本核算 组培苗工厂化生产是商业行为，只有生 产出质优价廉的试管苗，才能在市场竞 争中获胜，才能获得较好的经济效益。 组织育苗的成本核算比较发杂，既有工 业生产的特点，也有农业生产的特点。 一般做法是认真记录年产一定数量组培 苗的各项支出
（五）、产品管理 每一种组培苗的产品均建立完整的档案 ，便于查询，以确保产品质量和售后跟 踪服务。 （六）、销售管理 确定合理的销售范围，选择合适的销售 渠道与销售方式，做好销售统计、售后 服务和跟踪调查工作。
思考题：
1、如何制定生产计划？ 2、结合本校组培实验室或某组培育苗工厂 的生产实际，请你大致估算组培苗的生产 成本与经济效益，并提出切实可行的提高 经济效益的措施。 3、人们常说“从管理要效益”，请你结合 实际， 谈谈如何做好组培育苗工厂的经营管理工作。
（二）提高组培经济效益的措施 1、降低生产成本 降低污染率；提高接种 人 员的操作水平和生产效率；减少设备投资 ； 降低能耗；实施简化组培；适度规模生 产；加强横向联合。
①
② ③
④
2、组培苗增殖 培育珍惜、名特优植物和脱毒种苗，抢 占市场 培育有自主产权的组培苗 销售筛盘苗和营养钵苗 利用驯化成活后的组培苗分株、扦插增 殖苗木
四、玻璃化的预防措施
1、适当控制培养基中无机营养成分，减少培 养基中的氮素含量 2、适当提高培养基中蔗糖和琼脂的浓度 3、适当降低细胞分裂素和赤霉素的浓度 4、增加自然光照，控制光照时间 5、控制好温度 6、改善培养器皿的通风 增加容器通风，降低 瓶内湿度以及乙烯含量，改善气体交换状况 7、在培养集中添加其他物质
诱导丛生芽、诱导愈伤组织 中间繁殖体快速繁殖
移栽成功地（成活率 85％以上）
组培苗工厂化生产技术流程
茎 尖 培 养
增 殖 继 代
生 根
驯 化 移 栽
包 装
在此图中，快繁和脱毒使用相同的程序
腋芽萌发途径
炼 苗
草莓试管苗直接移栽到穴盘中
经过精心管理， 获得三叶一心可以田 间定植的草莓原种苗
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园艺植物快繁与脱毒技术
任务六、植物组培快繁工厂化生 产技术
学习目标：学习生产计划的制定和经营管理方 法、工厂化生产的工艺流程，掌握各种常见植 物快繁问题发生原因及处理措施。 能力要求：能根据生产需要解决成产中出现的 问题，能按照工厂化生产工艺流程、技术环节 进行组培生产并进行成本核算、效益分析。 学习内容：学习组培过程中易发生的污染、褐 化、玻璃化问题发生原因及处理措施；学习生 产计划的制订和经营管理方法、工厂化生产的 工艺流程、组培生产的成本核算和效益分析。
1、过度含水化 2、叶片肿胀 3、透明或半透明或水渍状 4、失绿，脆弱易碎 5、组织分化能力低 6、移栽难以成活
三、玻璃化现象产生的原因
1、玻璃化苗是在试管内控制条件下，人 工提供的培养基和培养条件不完全符合 培养物固有的要求的结果。 2、外部环境条件有可能照成玻璃化苗。 3、试管苗的适应性差。
包
装
子情境三：工厂化生产经营管 理
一、生产计划的制定 1、制定原则：一般是根据市场需求状况与趋势 、自身生产条件与规模实力，先确定全年的 销售目标，然后综合考虑组培苗生产过程中 各个环节的耗损，制定出相应的生产计划。 2、制定的依据 ：根据市场调研结论，通过组培 苗的市场调查、分析预测，进而得出科学的 结论，并以此结论为指导制定出组培苗的生 产计划 ，并订单按照订货数量组织生产， 按期交货
组培苗生产车间
预 处 理 室
灭 菌 室
试 剂 室
灭 菌 室
接 种 室
培 养 室
试 管 苗 移 栽 车 间
大 田 圃 苗 培 育 车 间
组培
接种室
培养室
一、组织培养、离体快速繁殖的 主要设备和设备
序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 名称 预处理室 试剂室 培养基配制室 灭菌室 接种室 培养室 观察检测室 温室 塑料大棚 防虫网 仓库房 其他 面积/m2 30 40 60 40 60 200 20 1000 1300 2500 100 — 单价（元/m2） 1400 1400 1400 1800 1800 1800 1400 300 100 15 800 — 金额/万元 4.2 5.6 8.4 7.2 10.8 36.0 2.8 30.0 13.0 3.75 8.0 8.0
二、保护地栽培的主要设施和 设备
1、保护地栽培设施 包括温室、塑料大棚、防虫网 棚、防雨网棚和遮阳网棚等。 2、试管苗栽培设备 （1）试管苗移栽基质处理设备 搅拌机、装盘机、传 输系统和喷药消毒器械。 （2）试管苗移栽繁育设备 按用途可将试管苗移栽设 备分为育苗容器、移栽繁殖器械、防护用具、控温控 湿设备及传输装置。主要包括营养体、育苗筒、育苗 盘、育苗穴盘、育苗床、穴盘播种机、嫁接与扦插器 械、压膜线、棚膜卡槽、遮阳网、短日照遮光膜、追 肥枪、小拱棚杆、地温加热线、温度控制器、增湿器 、喷雾器、浇灌设备及单轨传递系统等。
无菌试管苗 脱毒试管苗
病毒鉴定
商品试管
商品苗
葡萄试管苗工厂化生产工艺流 程图
茎尖 茎段、花蕾、侧芽 洗衣粉液 0.1％升汞溶液 表面消毒 接种诱导培养基 洗衣粉液 0.1％升汞溶液 表面消毒 接种诱导培养基
茎尖生长 病毒检测鉴定 中间繁殖体为一个繁殖周期 培养无根小植株 完整小植株 炼苗 20-25d