水样中苯酚含量的测定
水样中苯酚测定
反相色谱法测定环境水样中苯酚的含量
一．实验目的
1. 熟悉液相色谱仪的基本构造和操作方法
2. 学会利用内标法对物质进行色谱定量分析
二．仪器与试药
仪器：
高效液相色谱仪（日本岛津10AVP型）、溶剂过滤器、样品溶液过滤器、微量进样器
试药：甲苯（分析纯）、苯酚（分析纯）、甲醇
三、色谱条件
色谱柱：C18（250×4.6，5um）
流动相：甲醇-水=70：30 （v/v）
检测器及检测波长：紫外检测器254nm
流速：1.0ml/min
四、实验操作
1. 内标物溶液的配制：准确称取一定量的甲苯，加甲醇溶解后制成0.5 mg/mL的内标溶液。
2．对照品溶液的配制：准确称取苯酚对照品适量，加甲醇溶解后制成0.4 mg/mL的对照品溶液。
3. 调用或创建咖啡因测定方法并运行方法
4. 测定
⑴校正因子的测定：取400uL内标溶液和200uL对照品溶液混合。
待基线平稳后，吸取5μL 进样。
⑵样品测定：取400uL内标溶液和200uL样品溶液混合。
待基线平稳后，吸取5μL进样。
五、数据处理及计算
六、思考题
1.如何判断第一个色谱峰就是苯酚的峰？
2.简述三种定量方法的优缺点。
紫外分光光度法测定水样中的苯酚
0.9 0.8 0.7
a
A
0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 220
A
b
240
260
280
300
320
(nm)
三氯苯酚（a）和苯酚（b）的紫外吸收曲线
a Aa b ' A1a' A2 ' a (k1a k 2 ) ca
k a ca
Aa b ' Aa b ' ca a a k1' k2' k a
注：须满足两个基本条件 • 选定的两个波长下干扰组分具有等吸收点
• 选定的两个波长下待测物的吸光度差值应足够大
特点：
使用时来回拉动吸收池 →移动误差 • 对光源要求高 • 比色池配对
•
图4
单光束分光光度计基本结构示意图
特点：
不用拉动吸收池，可以减 小移动误差 • 对光源要求不高
• •
可以自动扫描吸收光谱
图5 双光束分光光度计结构示意图
特点： •
•
利用吸光度差值定量 消除干扰和吸收池不 匹配引起的误差
消除a的影响测b
a 选 a 的等吸收点1和2 A1a A2
A
a b
A A
b 1
b 2
b (k1b k 2 ) cb
kb cb Aa b Aa b cb b b k1 k2 k b
消去b的影响测a
b 选 b 的等吸收点1' 和2' A1b' A2 '
a b a A2 k2 ca cb b k2
3．两组分吸收光谱完全重叠——混合样品测定
（1）解线性方程组法 （2）等吸收双波长消去法
水中苯酚的测定方法
λ em = 270 /297 nm 处直接测定其荧光强度， 检出限 4. 0 ng / mL ， 0 ～ 0. 85 g / mL ， 为 线性范围为 μ 回收率
［27 ］ 为 98% ～ 101% ， 结果满意。 冯立娟 研究了在 pH = 1 时直接测定苯酚， 检出限为 4. 0 ng / mL， 线
会对淡水水生生物产生 度为 2. 56 mg / L 的条件下， ， 3. 5 mg / L 慢性毒性 是该类化合物对人体产生危 害的限定浓度。0. 3 mg / L 是保证河水不产生人们 所不期望的味道的限定浓度。因此， 苯酚一直是水 质、 食品、 环境等检测的一个重要项目。 目前国内外测定苯酚的标准方法 ， 常见的有分 光光度法和色谱法。 前者是利用 4 － 氨基安替比 需要用三氯甲烷进行浓缩和萃取， 林的衍生作用， 有色溶液不够稳定， 灵敏度不高； 后者还需对水中 苯酚浓缩和萃取， 步骤繁琐。因此许多研究者试图 或建立新的检测方法。 对上述方法进行改进， 目前国内外对苯酚测定的研究报道主要有分 荧光分析法、 化学发光法、 电化学分析方 光光度法、 法、 气相色谱法、 高效液相色谱法等。 1 分光光度法 分光 光 度 法 是 较 常 用 的 方 法 ， 具有原理简
生物传感器由于特异性强简单快速而受到越来越多的研究者的重视38等研究了以麦芽糊精作为酪氨酸酶的激活剂采用nafion117膜抗阴离子干扰聚乙烯亚胺pei作包埋剂以抗阳离子干扰的酪氨酸酶碳糊电极测定炼油废水中苯酚结果满意方法线性范围为2
第 22 卷 第 6 期 2 009 年12 月
污 染 防 治 技 术 POLLUTION CONTROL TECHNOLOGY
化学发光法不需要光源， 避免了光散射而引起 的背景噪声干扰， 灵敏度高， 目前报道不多， 而且发 光体 系 单 一， 多 与 流 动 注 射 技 术 相 结 合。 李 永 ［29 ］ 新 等基于在硫酸介质中， 高锰酸钾与痕量酚之 间反应能产生较强的化学发光， 从而测定了工业废 －6 ， 水中 的 苯 酚 该 法 线 性 范 围 为 8. 0 × 10 ～ 2 ×
高效液相色谱法测定水样中的苯酚
实验三高效液相色谱法测定水样中的苯酚一、实验目的1.1熟悉HPLC仪器的各个部件及熟悉操作方法；1.2掌握应用高效液相色谱法对苯酚的定性、定量分析；1.3掌握水样中苯酚的测定。
二、实验原理HPLC原理高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送（最高输送压力可达4.9´107Pa）;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱（每米塔板数可达几万或几十万）；同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。
特点1．高压：液相色谱法以液体为流动相（称为载液），液体流经色谱柱，受到阻力较大，为了迅速地通过色谱柱，必须对载液施加高压。
一般可达150～350×105Pa。
2. 高速：流动相在柱内的流速较经典色谱快得多，一般可达1～10ml/min。
高效液相色谱法所需的分析时间较之经典液相色谱法少得多，一般少于1h 。
3. 高效：近来研究出许多新型固定相，使分离效率大大提高。
4.高灵敏度：高效液相色谱已广泛采用高灵敏度的检测器，进一步提高了分析的灵敏度。
如荧光检测器灵敏度可达10-11g。
另外，用样量小，一般几个微升。
5.适应范围宽：气相色谱法与高效液相色谱法的比较：气相色谱法虽具有分离能力好，灵敏度高，分析速度快，操作方便等优点，但是受技术条件的限制，沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析。
而高效液相色谱法，只要求试样能制成溶液，而不需要气化，因此不受试样挥发性的限制。
对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大（大于400 以上）的有机物（这些物质几乎占有机物总数的75% ～80% ）原则上都可应用高效液相色谱法来进行分离、分析。
据统计，在已知化合物中，能用气相色谱分析的约占20%，而能用液相色谱分析的约占70～80%。
高效液相色谱仪一般分为四个部分：高压输液系统、进样系统、分离系统和检测系统。
实验一紫外－可见分光光度法测定水中苯酚的含量（3学时）
实验一紫外－可见分光光度法测定水中苯酚的含量（3学时）一、实验目的1. 学习使用UV757CRT紫外可见分光光度计。
2.掌握紫外－可见分光光度法测定水中微量苯酚含量的方法。
二、实验原理紫外－可见吸收光谱属分子吸收光谱法，当分子吸收到外来的辐射能量（光区范围在200-800 nm）时，分子外层价电子发生能级跃迁，进而产生吸收光谱。
紫外光谱具有灵敏度高、准确度好、仪器价格低廉、操作简便等许多优点，主要应用于化合物的定量分析。
其定量分析的主要依据为朗伯－比尔定律A = εbc式中，A---吸光度，ε--化合物的摩尔消光系数（L/(mol cm)），b—比色皿厚度（cm），c—溶液浓度（mol/L）。
根据上述公式，吸光度与溶液浓度呈线性关系，如已知某物质的摩尔吸光系数，就可以根据吸光度值得出待测溶液的摩尔浓度。
三、实验仪器、试剂四、实验步骤1. 打开电源，开机进行自检。
2. 配制苯酚标准溶液a. 精确称取苯酚0.3000 g，放入1 L容量瓶中，加蒸馏水摇匀，定容至刻度；b. 分别精确量取上述标准液2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 ml，分别定容至50 ml，按序编号。
3. 绘制苯酚的标准吸收曲线取上述3(4)号标准液，放置于1 cm的吸收池内(4/5)，以蒸馏水为参比溶液，在190-400 nm波长范围内进行扫描，绘制苯酚的标准吸收曲线，并选取272 nm 附近最大吸收波长为本实验的入射波长。
4. 绘制吸光度-浓度工作曲线分别取上述配制的5组溶液，放置于1 cm的吸收池内(4/5)，以蒸馏水为参比溶液，以上述选定的入射波长为测定波长，测定其吸光度值，并绘制成吸光度-浓度曲线，计算得到回归方程。
5. 待测溶液浓度的测定取待测苯酚溶液，放置于1 cm的吸收池内(4/5)，以蒸馏水为参比溶液，以上述选定的入射波长为测定波长，测定其吸光度值，代入回归方程中，计算待测溶液的克浓度和摩尔浓度(mol/L)；并通过朗伯-比尔公式计算苯酚的摩尔吸光系数。
酚类化合物的测定液相色谱分析法
酚类化合物的测定----液相色谱分析法1 范围1.1 本法规定了液相色谱法测定水中苯酚、4-硝基酚、3-甲基酚、2，4-二氯酚、2，4，6-三氯酚和五氯酚。
1.2 本法适用于生活饮用水、地下水和地表水中苯酚、4-硝基酚、3-甲基酚、2，4-二氯酚、2，4，6-三氯酚和五氯酚的测定。
1.3 本法的最低检测质量浓度：取水样1.0L，固相萃取后溶剂洗脱，定容1.0mL，进样体积40μL，最低检测质量浓度（μg/L）见下表。
最低检测质量浓度酚类苯酚4-硝基酚3-甲基酚2，4-二氯酚2，4，6-三氯酚五氯酚Sp i，μg/L 0.16 0.032 0.15 0.093 0.14 0.072 0.61 0.12 0.56 0.35 0.54 0.272 原理用固相小柱吸附水中酚类化合物，然后用溶剂洗脱，经氮吹气浓缩至一定体积后，用反相高压液相色谱法分析。
在反相色谱柱上以甲醇/（水+乙酸）为流动相把经预处理的酚类化合物分离，用二极阵列检测器或紫外检测器，测定各种酚的峰高或峰面积，以外标法定量。
3 试剂3.1 流动相3.1.1 甲醇：HPLC级，经0.22μm滤膜过滤。
3.1.2 高纯水：经0.22μm滤膜过滤。
3.2 标准物酚类标准储备液各组分浓度（μg/mL）苯酚2004-硝基酚503-甲基酚2002，4-二氯酚2002，4，6-三氯酚200五氯酚2003.3 四氢呋喃：重蒸馏。
3.4 正己烷：重蒸馏。
3.5 硫酸：0.5mol/L。
3.6 冰乙酸。
3.7 无水亚硫酸钠。
4 仪器4.1 高效液相色谱仪：可编程紫外检测器。
4.2 微量注射器：50μL、100μL。
4.3 色谱柱：C18或C8柱。
4.4 化学工作站。
4.5 尖底浓缩瓶：10ml具刻度。
4.6 富集柱。
5 样品5.1 水样采集及贮存方法：样品应贮于棕色玻璃瓶中避光，用硫酸调pH至＜2，冷冻保存，应尽快过柱，检测。
5.2 样品的预处理5.2.1 富集柱的活化：首先用10~15ml甲醇活化，再用30ml纯水活化，然后浸在纯水。
紫外分光光度法测定水中苯酚的含量
92. 92.1 实验目的
(1) 学习紫外分光光度法的基本原理及定量分析方 法。 掌握紫外(2) 掌握紫外-可见分光光谱仪的基本结构和一般操 作。
大 学 通 用 化 学 实 验 技 术
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紫 外 分 光 光 度 法 测 定 水 中 苯 酚 的 含 量
大 学 通 用 化 学 实 验 技 术
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紫 外 分 光 光 度 法 测 定 水 中 苯 酚 的 含 量
ห้องสมุดไป่ตู้
在线答疑： 在线答疑： wyuchemygm@
wxrong5093@
3. 最大吸收波长的测定 移取苯酚标准溶液2 mL于 mL容量瓶中 定容， 容量瓶中， 移取苯酚标准溶液2.00 mL于 25 mL容量瓶中，定容，摇 取适量倒入石英比色皿中，以蒸馏水为参比溶液， 匀，取适量倒入石英比色皿中，以蒸馏水为参比溶液，在波 长 200～ 400 nm范围内进行扫描 ， 得到吸收曲线， 由吸收曲 200 ～ nm 范围内进行扫描， 得到吸收曲线 ， 范围内进行扫描 线确定最大吸收波长（ 线确定最大吸收波长（λmax）。 4. 标准曲线及样品的测定 mL容量瓶中 分别加入0 容量瓶中， mL、 mL、 在 6 个 25 mL 容量瓶中 ， 分别加入 0.50 mL 、 1.00 mL 、 2.00 mL、3.00 mL、4.00 mL、5.00 mL的苯酚标准溶液， 用 mL、 mL、 mL、 mL的苯酚标准溶液， 的苯酚标准溶液 处测定各溶液的吸光度值， 蒸馏水定容。 蒸馏水定容。在λmax处测定各溶液的吸光度值，同时测定含 苯酚水样（调整至合适浓度且溶液澄清）的吸光度值， 苯酚水样（调整至合适浓度且溶液澄清）的吸光度值，由仪 器打印出标准曲线及样品的测定结果。 器打印出标准曲线及样品的测定结果。
紫外分光光度法测定水中总酚的含量
紫外分光光度法测定水中总酚的含量苯酚是工业废水中一种有害物质，如果流入江河，会使水质受到污染，因此在检验饮用水的卫生质量时，需对水中酚含量进行测定。
一、实验目的1．掌握紫外分光光度法测定酚的原理和方法。
2．熟悉紫外分光光度计的基本操作技术。
二、方法原理具有苯环结构的化合物在紫外光区均有较强的特征吸收峰，在苯环上的第一类取代基(致活基团)使吸收更强，而苯酚在270nm处有特征吸收峰，其吸收程度与苯酚的含量成正比，因此可用紫外分光光度法，根据Lambert—Beer定律直接测定水中总酚的含量。
三、仪器与试剂1．紫外分光光度计；2．苯酚标准溶液，250mg/L：准确称0.0250g苯酚于250 mL烧杯中，加去离子水20 mL使之溶解，移入100mL容量瓶，用去离子水稀释至刻度，摇匀。
四、内容与步骤1、标准系列溶液的配置取5支25ml比色管，分别加入1.00，2.00，3.00，4.00，5.00 mL苯酚标准溶液，用去离子水稀释至刻度摇匀待测。
2．吸收曲线的测量取上述标推系列溶液中任一溶液，用1cm石英比色皿，以溶剂空白作参比，在220～350 nm波长范围内，每5nm测量一次吸光度。
3．标准曲线的测量在苯酚的最大吸收波长(λmax)下, 用1cm石英比色皿，以溶剂空白作参比，测量标准系列溶液的吸光度。
4．水样的测定与测量标准系列溶液的相同条件下，测量水样的吸光度五、数据记录与处理1．列表记录不同波长下同一标准溶液的吸光度值，以吸光度为纵坐标，波长为横坐标绘制吸收曲线，找出λmax，计算其 max。
2．列表记录标冶系列溶液与水样的吸光度，以吸光度为纵坐标，标准系列溶液浓度为纵坐标，绘制标推曲线；根据水样的吸光度查找出其相当的标准溶液的浓度并算出水样中苯酚的含量(g／L)。
六、问题与讨论1．紫外分光光度法与可见分光光度法有何异同?部件有何异同?。
苯酚系列实验报告
一、实验目的1. 了解苯酚的物理化学性质。
2. 掌握苯酚的提取和鉴定方法。
3. 熟悉紫外分光光度法测定苯酚含量的原理和操作。
二、实验原理苯酚（C6H5OH）是一种具有特殊芳香味的有机化合物，广泛存在于工业废水和环境中。
苯酚的提取通常采用溶剂萃取法，而鉴定则可通过观察其物理性质和化学反应来实现。
紫外分光光度法是一种测定苯酚含量的常用方法，基于苯酚在特定波长下的吸收特性。
三、实验材料与仪器材料：1. 苯酚标准溶液2. 水样3. 无水乙醇4. 氢氧化钠溶液5. 氢氧化钠固体6. 碘化钾溶液7. 碘单质8. 氯化铁溶液仪器：1. 紫外可见分光光度计2. 分光光度比色皿3. 电子天平4. 移液器5. 烧杯6. 滴定管7. 玻璃棒四、实验步骤1. 苯酚的提取- 取一定量的水样，加入适量的无水乙醇，搅拌均匀。
- 静置分层后，取上层有机相，备用。
2. 苯酚的鉴定- 取少量苯酚标准溶液，加入少量氢氧化钠溶液，观察是否出现沉淀。
- 取少量苯酚标准溶液，加入少量氯化铁溶液，观察是否出现紫色沉淀。
3. 紫外分光光度法测定苯酚含量- 配制一系列苯酚标准溶液，分别测定其在270-295nm波长范围内的吸光度。
- 以吸光度为纵坐标，苯酚浓度为横坐标，绘制标准曲线。
- 取水样，按照上述方法测定其在270-295nm波长范围内的吸光度。
- 根据标准曲线，计算水样中苯酚的含量。
五、实验结果与分析1. 苯酚的提取- 水样与无水乙醇混合后，分层明显，有机相为上层，苯酚主要存在于有机相中。
2. 苯酚的鉴定- 加入氢氧化钠溶液后，苯酚标准溶液中出现白色沉淀，证明苯酚存在。
- 加入氯化铁溶液后，苯酚标准溶液中出现紫色沉淀，进一步证明苯酚的存在。
3. 紫外分光光度法测定苯酚含量- 标准曲线线性良好，相关系数R²=0.999。
- 水样中苯酚含量为XX mg/L。
六、实验讨论1. 实验过程中，苯酚的提取效果受水样中其他有机物的影响较大，可能影响苯酚的提取效率。
实验12 工业废水中苯酚含量的测定
实验12 工业废水中苯酚含量的测定教学目的与要求：1.掌握KBrO3-KBr标准溶液的配制方法；2.掌握溴量法测定苯酚的原理和方法；3.掌握本实验空白实验的实际意义和方法；4.进一步熟练掌握滴定操作；5.培养学生的动手操作能力及创新意识。
教学重点与难点：重点：1.KBrO3-KBr法的原理和方法；2.培养学生的动手操作能力及创新意识。
难点：1.溴量法测定苯酚的原理和方法；2.培养学生的动手操作能力及创新意识。
教学方法与手段：板书，学生操作，现场指导。
学时分配：3学时。
教学内容：苯酚是煤焦油的主要成分之一，是许多高分子材料（酚醛树脂等）、合成染料、医药、农药等方面的主要原料之一。
苯酚的生产和广泛应用，不可避免地造成对环境的污染，已经被列入有机污染物的黑名单，因此，苯酚是常规检测的主要项目之一。
问题1：苯酚对人体有什么危害？侵入途径：吸入、食入、经皮吸收。
健康危害：对皮肤、粘膜有强烈的腐蚀作用，可抑制中枢神经或损害肝、肾功能。
急性中毒：吸入高浓度蒸气可致头痛、头晕、乏力、视物模糊、肺水肿等。
误服引起消化道灼伤，出现烧灼痛，呼出气带酚味，呕吐物或大便可带血液，有胃肠穿孔的可能，可出现休克、肺水肿、肝或肾损害，出现急性肾功能衰竭，可死于呼吸衰竭。
眼接触可致灼伤。
可经灼伤皮肤吸收经一定潜伏期后引起急性肾功能衰竭。
慢性中毒：可引起头痛、头晕、咳嗽、食欲减退、恶心、呕吐，严重者引起蛋白尿。
可致皮炎。
问题2：测定苯酚含量的意义？苯酚具有较强的毒性和致癌作用，她的广泛分布严重威胁人类健康。
长期饮用被苯酚污染的水会引起头晕、贫血以及各种神经系统疾病。
在污水中苯酚的毒性较大，挥发酚的毒性更大。
水中酚含量在0.3mg/L以上时，会引起鱼的逃逸，在含量在1mg/L以上时，会引起鱼类中毒死亡。
因此，准确检测废水中不苯酚的含量具有重要意义。
问题3：测定苯酚含量的方法有哪些？文献报道的测定废水中苯酚含量的方法主要有：1、KBrO3-KBr法:方法简便，操作简单，所用仪器设备简单，反应迅速，但以温度影响，并且测定精度不高。
催化动力学分光光度法检测水样中的痕量苯酚
催化动力学分光光度法检测水样中的痕量苯酚□孙莉莉【摘要】催化动力学分光光度法检测水样中的痕量苯酚具有自身独特的优点。
本文主要论述了实验检测的的实验仪器和试剂，实验步骤，实验结果和各种影响因素。
最后对这种方法做了总结和评论。
【关键词】分光光度法；痕量苯酚；分光光度计【作者单位】孙莉莉，河南省地质矿产勘查开发局第二地质勘查院实验室一、引言催化法就是用催化反应测量物质含量的一种方法，它的基本原理为：以反应物产物的生成速度或者反应物的减少速度来确定催化剂的用量或者浓度。
催化剂的特点是不影响某一化学反应平衡，仅仅改变反应速度，在反应过程中催化剂本身的量不发生任何改变。
由此，我们可以得到这样的结论，即使痕量催化剂也能够不断循环起到加速反应的作用。
在使用痕量催化剂的条件下，只要反应时间足够长，反应物消耗或生成物生成的量都能够满足测量的需要。
这就是催化动力学分析法的极高灵敏度特点的内在原因。
催化动力学分析法的测定方法如分光光度法等都比较普通。
它们比较突出的特点是：一是考虑到了“时间”因素；二是测定对象是被“化学放大”了的物质，而不是催化剂本身。
催化动力学分光光度法的灵敏度一般都能达到μg至ng 之间，部分能够到ng至pg之间的范围，有的甚至能够达到10－14g，超过了大部分结构复杂和价格昂贵的仪器分析法。
依据能否与水蒸气一起蒸出，可以将酚类分为不挥发酚（一）采集与处理功能。
可以对生产过程的各种模拟或数字量进行检测、采样和必要的预处理，并且以一定的形式输出，如打印生产报表，为生产和技术人员提供详细的数据，进行分析和了解生产情况。
（二）管理功能。
将检测到的实时数据、工作人员在运行过程中发出的指令数据进行分析、归纳、整理、以为参考。
（三）监管预警功能。
根据采集的有效数据、报表及预先输入的程序指令等对工况进行分析、对故障进行诊断、并对超出预警范围的工况或突发事件报警。
（四）操控功能。
根据事先输入的指令形成控制输出，直接作用于生产过程。
紫外吸收光谱法测定水中的苯酚
大学学生实验报告开课学院及实验室：化学化工学院室2013年月日学院化学化工学院年级、专业、班姓名学号实验课程名称分析化学实验成绩实验项目名称紫外吸收光谱法测定水中的苯酚指导老师一、实验目的1．学会使用UV1100型紫外分光光度计。
2．学会并掌握紫外吸收光谱曲线的绘制和测量波长的选择以及标准曲线的绘制。
二、实验原理通过紫外分光光度计测定苯酚的紫外吸收光谱图，以确定苯酚的λmax。
在仪器设置的λmax下，用1cm石英比色皿，以蒸馏水作空白对照，测定苯酚标准浓度系列溶液的吸光度值，根据A=εbc，绘制苯酚水溶液的标准工作曲线。
在相同条件下，测得待测苯酚溶液的吸光度值，以确定试样中苯酚的含量。
三、仪器与试剂1．仪器UV1100型紫外分光光度计（附1cm石英皿1套），25mL容量瓶7个，10mL吸量管1支，10mL 移液管1支，洗耳球，烧杯，洗瓶，镜头纸。
2．试剂⑴1g·L-1苯酚标准溶液⑵100mg·L-1苯酚标准溶液⑶苯酚水样。
四、实验步骤1．绘制吸收光谱曲线和选择测量波长⑴用吸量管取5.00mL苯酚标准溶液（100mg·L-1）1份，于25mL容量瓶中，用无酚蒸馏水稀释至刻度，摇匀。
⑵以蒸馏水为参比溶液，在UV1100型紫外分光光度计上，选择波长扫描，波长范围设置225～300nm，获得苯酚的吸收曲线，求得苯酚最大吸收波长λmax。
2．绘制标准曲线用吸量管分别吸取1.50、3.00、4.50、6.00、7.50mL苯酚标准溶液（100mg·L-1），分别放入25mL 容量瓶中，用无酚蒸馏水稀释至刻度线定容后，混匀。
此苯酚标准溶液系列对应的浓度分别为6.0、12.0、18.0、24.0和30.0 mg·L-1。
同样以蒸馏水为参比溶液，在苯酚最大吸收波长λmax处，按浓度从低到高依次测定对应的苯酚标准溶液系列的吸光度值，并记录。
以苯酚标准溶液的含量（mg·L-1）为横坐标，对应的吸光度值为纵坐标绘制标准曲线。
分光光度法测水中总酚
设计性实验方案紫外分光光度法测定水中总酚的含量环科0801周蒙蒙孟岩陈立军紫外分光光度法测定水中总酚的含量周蒙蒙、孟岩、陈立军（吉林化工学院环境与生物工程学院环境科学0801）1、实验目的1.1 掌握紫外分光光度法测定酚的原理和方法。
1.2掌握应用紫外分光光度计进行定量分析的方法和基本操作。
2、实验原理苯酚是工业废水中的一种有害物质，如果流入江河，会使水质受到污染，因此在检测饮用水的卫生质量时，需对水中酚含量进行测定。
苯具有环状共轭体系，由π→π*跃迁在紫外吸收光区产生三个特征吸收带：强度较高的E1带，出现在180nm左右；中等强度的E2带，出现在204nm 左右；强度较弱的B带，出现在255nm。
有机溶剂、苯环上的取代基及其取代位置都可能对最大吸收峰的波长、强度和形状产生影响。
具有苯环结构的化合物在紫外光区均有较强的特征吸收峰，在苯环上的部分取代基（助色团）使吸收增强，而苯酚在270nm处有特征吸收峰，在一定范围内其吸收强度与苯酚的含量成正比，符合Lambert-Beer定律，因此，可用紫外分光光度法直接测定水中总酚的含量。
3、仪器与试剂3.1 仪器与试剂仪器： 752型紫外分光光度计（上海光谱仪器有限公司制造），石英比色皿（1cm）2 个，50mL容量瓶，移液管等。
试剂：苯酚标准溶液250 mg·L -1：准确称取0.0250g苯酚于250mL烧杯，加20mL 去离子水溶解，移入100mL容量瓶，用去离子水定容至刻度，摇匀。
3.2 实验步骤3.2.1标准系列溶液的配制取5只50mL容量瓶，分别加入2.00，4.00，6.00，8.00，10.00mL浓度为250 mg·L -1的苯酚标准溶液，用去离子水稀释至刻度，摇匀。
计算其浓度（mg·L -1）3.2.2 吸收曲线的测定取上述标准系列中的任一溶液，用1cm石英比色皿，以溶剂空白（去离子水）作参比，在220～350nm波长范围内，扫描绘制吸收曲线。
实验二--紫外-可见分光光度法测定水中苯酚含量
实验二紫外-可见分光光度法测定水中苯酚含量苯酚是工业废水中一种有害污染物质，需对水中酚含量控制。
苯酚在270-295nm波长处有特征吸收峰，其吸光度与苯酚的含量成正比，应用Lambert－Beer定律可直接测定水中总酚的含量。
一、实验目的1．学会使用Cary50型紫外-可见分光光度计2．掌握紫外-可见分光光度计的定量分析方法二、原理简介紫外-可见吸收光谱是由分子外层电子能级跃迁产生，同时伴随着分子的振动能级和转动能级的跃迁，因此吸收光谱具有带宽。
紫外-可见吸收光谱的定量分析采用朗伯-比尔定律，被测物质的紫外吸收的峰强与其浓度成正比，即：其中A是吸光度，I、分别为透过样品后光的强度和测试光的强度，为摩尔吸光系数，b为样品厚度。
由于苯酚在酸、碱溶液中吸收波长不一致（见下式），实验选择在碱性中测试，选择测试的波长为288nm左右，取紫外-可见光谱仪波长扫描后的最大吸收波长。
Cary50是瓦里安公司的单光束紫外-可见分光光度计。
仪器原理是光源发出光谱，经单色器分光，然后单色光通过样品池，达到检测器，把光信号转变成电信号，再经过信号放大、模/数转换，数据传输给计算机，由计算机软件处理。
三、仪器与溶液准备1、Cary50型紫外-可见分光光度计2、1cm石英比色皿一套3、25 ml容量瓶5只，100 ml容量瓶1只，10ml移液管二支配置250 mg/L苯酚的标准溶液：准确称取0.0250 g苯酚于250 mL烧杯中，加入去离子水20 mL使之溶解，加入0.1M NaOH 2mL，混合均匀，移入100 mL容量瓶，用去离子水稀释至刻度，摇匀。
取5只25 mL容量瓶，分别加入1.00、2.00、3.00、4.00、5.00 mL苯酚标准溶液，用去离子水稀释至刻度摇匀，作为标准溶液系列。
将溶剂，标准溶液，待测水样依此装入石英比色皿。
按测试程序的提示，依次放入样品室中进行测试。
四、测试过程1、确认样品室内无样品2、开电脑进入Window 系统3、点击进入Cary50 主菜单4、双击Cary-WinUV图标5、在Win-UV 主显示窗口下，双击所选图标“SCAN”以扫描测定吸收曲线：取上述标准系列任一溶液装进1cm石英比色皿至4/5，以装有蒸馏水的1cm石英比色皿作为空白参比，设定在220－350 nm波长范围内扫描，获得波长-吸收曲线，读取最大吸收的波长数据。
4 紫外-可见分光光度法测定水中苯酚含量.doc
4 紫外-可见分光光度法测定水中苯酚含量.doc
紫外-可见分光光度法是常用的检测水源中有机有毒物含量的实验方法，其中也包括
苯酚，也就是苯乙醇。
苯酚是一种有毒物质，在细菌和微生物群落污染物质中也常见，有
可能危害水源的安全。
紫外-可见分光光度法是一种定性和定量测试水源中有毒物质苯酚含量的方法，分析
过程很简单，测定结果也精准。
主要步骤有：
1.取样
首先，从原水源中取等量的水样，经过预处理，将有毒物质苯酚预先固定在容器中就
可以用于测定。
2.准备标准溶液
准备一定浓度的苯酚标准溶液，建立比较体系，通过实验可以分析水样中苯酚的实际
含量。
特别注意，使用前需对标准溶液进行校准，以确保测得的含量是准确的。
采用紫外-可见分光光度仪将标准溶液和水样的Wavelength处的波长浓度记录下来，
使用基本的光度学计算公式可以得出水样中苯酚的实际浓度。
4.通过定性和定量结合判断浓度
最后，比较水样中的苯酚含量与标准溶液的比例，通过定性和定量结合的方式判断水
源中苯酚的浓度，从而确定水源中苯酚是否有超标现象。
紫外-可见分光光度法测定水中苯酚含量，能够更准确地反映水源中苯酚实际浓度，
因此，紫外-可见分光光度法经常被用来对环境水体中有毒物质含量进行监测和分析。
同时，此实验还能提醒实验者注意取样，准备标准溶液等操作过程，在取样时也要格外注意，以获得准确的实验结果。
高效液相色谱法测定水样中的苯酚
实验三高效液相色谱法测定水样中的苯酚一、实验目的1.1熟悉HPLC仪器的各个部件及熟悉操作方法；1.2掌握应用高效液相色谱法对苯酚的定性、定量分析；1.3掌握水样中苯酚的测定。
二、实验原理HPLC原理高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送（最高输送压力可达4.9´107Pa）;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱（每米塔板数可达几万或几十万）；同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。
特点1．高压：液相色谱法以液体为流动相（称为载液），液体流经色谱柱，受到阻力较大，为了迅速地通过色谱柱，必须对载液施加高压。
一般可达150～350×105Pa。
2. 高速：流动相在柱内的流速较经典色谱快得多，一般可达1～10ml/min。
高效液相色谱法所需的分析时间较之经典液相色谱法少得多，一般少于1h 。
3. 高效：近来研究出许多新型固定相，使分离效率大大提高。
4.高灵敏度：高效液相色谱已广泛采用高灵敏度的检测器，进一步提高了分析的灵敏度。
如荧光检测器灵敏度可达10-11g。
另外，用样量小，一般几个微升。
5.适应范围宽：气相色谱法与高效液相色谱法的比较：气相色谱法虽具有分离能力好，灵敏度高，分析速度快，操作方便等优点，但是受技术条件的限制，沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析。
而高效液相色谱法，只要求试样能制成溶液，而不需要气化，因此不受试样挥发性的限制。
对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大（大于400 以上）的有机物（这些物质几乎占有机物总数的75% ～80% ）原则上都可应用高效液相色谱法来进行分离、分析。
据统计，在已知化合物中，能用气相色谱分析的约占20%，而能用液相色谱分析的约占70～80%。
高效液相色谱仪一般分为四个部分：高压输液系统、进样系统、分离系统和检测系统。
高效液相色谱法-紫外线法测定水中的苯酚含量实验模板
实验题目：高效液相色谱法-紫外法测定水中的苯酚含量一、实验原理苯酚是最简单的酚，为无色固体，有特殊气味，显酸性。
苯酚是有机化工工业基本原料，可通过各种途径对环境水体造成污染，对人类、鱼类以及农作物带来严重危害。
根据国家环保部门有关规定，工作场所苯酚的最高允许质量浓度为5×10-6μg/L，饮用水中为2μg/L，地面水中为0.1mg/L。
苯酚的测量方法有多种，如溴化容量法、比色法、高效液相色谱法等。
但前两种方法分析速度较慢、精度较低，高效液相色谱法是近年来发展起来的一种新技术，具有分析速度快、检测灵敏度高、操作简便、样品用量少等特点。
二、仪器与试剂1、仪器名称及型号Agilent 12002、试剂规格及用量苯酚（分析纯），甲醇（色谱纯），二次蒸馏水三、实验步骤1、开机操作（1）打开电脑进入window XP 画面（2）打开Agilent 1200 各模块电源（3）待各模块自检完成后，双击“联机”图标“进入化学工作站”（4）把流动相放入溶剂瓶中（5）数据采集及分析方法编辑2、标准曲线的制备称取纯苯酚600mg 于100.0ml 容量瓶中，用适量甲醇溶解，用甲醇稀释至刻度。
分别吸取该溶液（单位：ml）0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0于50ml的容量瓶中，用甲醇稀释至刻度。
得到标准系列溶液。
分别采用高效液相色谱-紫外法测定标准溶液，记录色谱峰面积，以浓度为横坐标、峰面积为纵坐标绘制标准曲线。
3、样品分析将水样经过过滤（0.45um滤膜）处理后，测定其峰面积值，根据标准曲线进行定量。
4、关机操作（1）关机前先关灯，用相应的溶剂充分冲洗系统（2）退出化学工作站关闭计算机（3）关闭Agilent 1200各模块电源开关四、实验数据记录及其处理（可另附页）1、标准曲线的绘制及数据处理序号进样量峰面积序号进样量峰面积五、实验结果六、问题与讨论。
紫外可见分光光度法测定水中苯酚含量
紫外-可见分光光度法测定水中苯酚含量紫外-可见分光光度法是一种常用的分析方法，可用于测定水中苯酚含量。
以下是该方法的实验步骤和实验结果的解释。
一、实验原理紫外-可见分光光度法是一种基于分子吸收光谱的定量分析方法。
当光通过样品溶液时，样品溶液中的物质会吸收特定波长的光，导致透射光强度降低。
吸收光谱的强度和波长之间的关系可用于确定物质的浓度。
苯酚是一种常见的污染物，在水中含量较高时会对环境和人类健康产生负面影响。
因此，测定水中苯酚含量对于环境保护和水质监测具有重要意义。
在紫外-可见光谱范围内，苯酚具有明显的吸收峰，可用于其定量分析。
二、实验步骤1.试剂与仪器实验所需试剂包括苯酚标准品、纯水、显色剂（如溴酸钾、溴化钾等）。
实验所需仪器包括紫外-可见分光光度计、比色皿（1cm）、容量瓶（25mL）、吸管（1mL、5mL）等。
2.样品准备将待测水样进行过滤，以去除悬浮物和杂质。
取5mL滤后的水样于25mL容量瓶中，加入适量显色剂。
3.标准曲线制作分别取0.0mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL、4.0mL苯酚标准品于25mL容量瓶中，加入适量显色剂。
用纯水定容至刻度，摇匀。
在紫外-可见分光光度计上分别测量各容量瓶中溶液的吸光度，绘制标准曲线。
4.样品测定在紫外-可见分光光度计上测量待测样品溶液的吸光度。
根据标准曲线可得到待测样品中苯酚的浓度。
三、实验结果解释通过对比标准曲线和样品溶液的吸光度，可以确定样品中苯酚的浓度。
根据测定的苯酚浓度，可以进一步计算水中苯酚的含量。
具体计算方法如下：水中苯酚含量（mg/L）= 样品溶液中苯酚浓度（mg/L）× 水样体积（L）通过实验结果解释可知，紫外-可见分光光度法是一种可靠的测定水中苯酚含量的方法。
该方法具有操作简便、灵敏度高、准确度高等优点，适用于水中苯酚含量的监测和分析。
在实际应用中，需要注意控制实验条件，如显色剂种类和浓度、反应温度和时间等，以提高测定结果的准确性和可靠性。
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姓名：陈信志
学号：1142510122
水样中苯酚含量的测定
一、实验目的
1.学会使用分光光度计；
2.学会并掌握吸收光谱曲线的绘制以及标准曲线的绘制。
二、实验原理
4-氨基安替比林（简写4-AAP ）与酚类化合物在pH=10.0±0.2溶液中，在氧化剂铁氰化钾作用下，生成橙红色的吲哚酚安替比林染料。
该染料的的氯仿萃取液在λ=460nm 处测定吸光度值，由标准曲线查出水样中酚类化合物的含量。
三、仪器与试剂
1.分光光度计
2.锥形分液漏斗500ml ，250ml 碘量瓶
3.无酚水（全部试剂均用无酚水配制）
4.三氯甲烷（氯仿）
5.2%（m/v ）4-氨基安替比林溶液
6.8%（m/v ）铁氰化钾溶液
7.缓冲溶液（pH=9.8）
8.苯酚标准储备液
9.溴酸钾—溴化钾标准参考溶液 10.0.1000mol/L 硫代硫酸钠标准溶液 11.硫酸铜溶液 12.含苯酚水样
13.浓盐酸，碘化钾，1%淀粉溶液
四、实验步骤
1.苯酚标准储备液的标定
吸取10.00ml 苯酚标准储备液于250ml 碘量瓶中，加水稀释到100ml ，加10.00ml 0.1mol/L 溴酸钾—溴化钾溶液。
立即加入5ml 浓盐酸，盖上塞，混匀，在暗处放置10min 。
加入1g 碘化钾，盖上塞，混匀，暗处放置5min 。
用0.1000mol/L 硫代硫酸钠标准溶液滴定至淡黄色，加入1ml 1%淀粉溶液，继续滴定至蓝色刚好退去。
同时以无酚水作空白试验，分别记录硫代硫酸钠标准溶液用量（V 1，V 0）。
计算：苯酚（mg/L ）=
储备液
）（V 68
.15C V -V 322O S Na 10⨯⨯1000
2.苯酚标准使用液的配制
吸取苯酚储备液10.00ml ，用水稀释至1000ml ，再吸取此溶液10.00ml ，用水稀释至100ml ，则得苯酚标准使用液1.00μg/ml 。
3.标准曲线绘制
（1）吸取苯酚标准使用液0.0 ，0.50 ，1.00 ， 3.00 ，5.00 ，7.00ml 分别放入已盛有100ml 水的6个500ml 分液漏斗中，用水稀释至250ml 。
加2.0ml 缓冲溶液，混匀。
加1.50ml 4-氨基安替比林溶液，混匀。
再加1.50ml 铁氰化钾溶液，混匀。
放置10min 。
（2）准确加入10.0ml 氯仿，加塞，萃取2min ，静置分层。
放出氯仿层，弃去最初滤出的数滴萃取液后，直接放入2cm 比色皿中，在460nm 处以“空白”调零，测定
吸光度。
以吸光度值为纵坐标，以对应的苯酚含量为横坐标绘制标准曲线。
4.水样的测定
取水样50.0ml用水稀释至250ml，用上述操作测量其吸光度，在标准曲线上查出水样中的苯酚含量。
五、实验数据处理
实验编号 1 2 3 4 5 6
苯酚标准液
（ml）
0 0.50 1.00 3.00 5.00 7.00
标准液苯酚
含量（μg）
0 0.50 1.00 3.00 5.00 7.00
吸光度0 0.048 0.096 0.298 0.500 0.660
水样吸光度0.32
由此可得出水样中苯酚含量（mg/L）=
5009591 .0/
00325
.0-
32
.0）
（
=0.066 mg/L。