饲料学课件实验三、四 饲料粗蛋白质测定
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实验三、(1)饲料粗蛋白质测定(消化)
一、原 理
RCHCOOH+
H2SO4
无水Na2SO4
CuSO4 ∆
来自百度文库
(NH4)2SO4
+SO2↑+CO2↑+H2O
NH2
(NH4)2SO4+ NaOH(饱和) ∆ NH3↑+ Na2SO4+ H2O
NH3↑+ H3BO3
(NH4)2B4O7
(NH4)2B4O7 + HCl (标准) 指示剂 NH4Cl + H3BO3
5. 通入蒸气蒸馏，此时反应室液体应呈棕褐色(否则需 补加碱液)；待硼酸溶液变蓝后再继续蒸馏4~5min， 然后使冷凝管末端离开液面，再蒸馏1min，并用少量 蒸馏水冲洗冷凝管末端。
6. 蒸馏结束，排净反应废液，洗净蒸馏室，开始新的蒸 馏过程。
7. 滴 定：蒸馏后的硼酸吸收液立即用0.01M盐酸 标准溶液进行滴定，当溶液由蓝色变为灰白色 或灰红色时即为滴定终点。
蓝色
灰白或灰红色
4)试样分解液制备：待试样消煮液稍冷却，慢 慢加入蒸馏水25-30ml、混匀，无损地转移至 200或250ml容量瓶中、混匀(勿倒置混)；
5) 待试样液冷却后，加蒸馏水至容量瓶刻度， 充分混匀，即为试样分解液。
实验四、饲料粗蛋白质测定(蒸馏)
1. 凯氏蒸馏仪安装、调试：气密性检查、清洗；蒸汽 发生瓶的蒸馏水中应加入甲基红指示剂数滴和硫酸 数滴，并保持此液为红色；
2. 取2%硼酸溶液20ml放入三角烧瓶，加入混合指示 剂1滴(显淡紫红色)，接至蒸馏仪的冷凝管末端，并 打开蒸气旁路开关；
3. 准确吸取试样分解液10~20ml(视含N量而定)，加入 蒸馏仪反应室中，并用少量蒸馏水冲洗加样口；
4. 先关闭加样口，加入饱和NaOH溶液5~10ml；小心打 开加样口使之流入反应室中，立即关闭加样口，再用 少量蒸馏水冲洗加样口；关好加样口防止漏气；
8. 结果计算：
粗蛋白质(%) = (V2－V1 )×N×0.014×6.25 ×100 W×V’/V
一、原 理
RCHCOOH+
H2SO4
无水Na2SO4
CuSO4 ∆
来自百度文库
(NH4)2SO4
+SO2↑+CO2↑+H2O
NH2
(NH4)2SO4+ NaOH(饱和) ∆ NH3↑+ Na2SO4+ H2O
NH3↑+ H3BO3
(NH4)2B4O7
(NH4)2B4O7 + HCl (标准) 指示剂 NH4Cl + H3BO3
5. 通入蒸气蒸馏，此时反应室液体应呈棕褐色(否则需 补加碱液)；待硼酸溶液变蓝后再继续蒸馏4~5min， 然后使冷凝管末端离开液面，再蒸馏1min，并用少量 蒸馏水冲洗冷凝管末端。
6. 蒸馏结束，排净反应废液，洗净蒸馏室，开始新的蒸 馏过程。
7. 滴 定：蒸馏后的硼酸吸收液立即用0.01M盐酸 标准溶液进行滴定，当溶液由蓝色变为灰白色 或灰红色时即为滴定终点。
蓝色
灰白或灰红色
4)试样分解液制备：待试样消煮液稍冷却，慢 慢加入蒸馏水25-30ml、混匀，无损地转移至 200或250ml容量瓶中、混匀(勿倒置混)；
5) 待试样液冷却后，加蒸馏水至容量瓶刻度， 充分混匀，即为试样分解液。
实验四、饲料粗蛋白质测定(蒸馏)
1. 凯氏蒸馏仪安装、调试：气密性检查、清洗；蒸汽 发生瓶的蒸馏水中应加入甲基红指示剂数滴和硫酸 数滴，并保持此液为红色；
2. 取2%硼酸溶液20ml放入三角烧瓶，加入混合指示 剂1滴(显淡紫红色)，接至蒸馏仪的冷凝管末端，并 打开蒸气旁路开关；
3. 准确吸取试样分解液10~20ml(视含N量而定)，加入 蒸馏仪反应室中，并用少量蒸馏水冲洗加样口；
4. 先关闭加样口，加入饱和NaOH溶液5~10ml；小心打 开加样口使之流入反应室中，立即关闭加样口，再用 少量蒸馏水冲洗加样口；关好加样口防止漏气；
8. 结果计算：
粗蛋白质(%) = (V2－V1 )×N×0.014×6.25 ×100 W×V’/V