蔬菜中硫代葡萄糖苷的比较分析
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蔬菜中硫代葡萄糖苷的比较分析
硫代葡萄糖苷,是广泛存在于十字花科植物中的含硫次级代谢产物,到目前已发现有近120种。硫代葡萄糖苷在芥子酶或胃肠道中细菌酶的催化作用下,会发生降解并生成多种降解产物。硫代葡萄糖苷和基降解产物都具有活跃的生物、生化特性,能在食品中赋予产品特殊风味,同时,它还是化学保护剂,能防止多种癌症的发生。我国常见的十字花科蔬菜种类包括:白菜类、甘蓝类、芥菜类和萝卜类四大类。虽然部分种类的硫代葡萄糖含量已有过报道,但较系统地比较十字花科蔬菜各个种类间的硫代葡萄糖含量还未做过研究。本试验选取白菜类、甘蓝类、芥菜类和萝卜类12个种类,简单地比较其硫代葡萄糖含量的差异
一. 仪器与材料
1.仪器
722分光光度计、恒温水浴锅、电炉、刻度比色管、容量瓶
漏斗、研钵、温度计、砧板、菜刀
2.实验材料
(1)3,5-二硝基水杨酸、酒石酸钾钠、氢氧化钠、
苯酚、无水葡萄糖、氟化钠、醋酸铅、硫酸钠。
(2)大头菜、油菜、白萝卜
二.实验方法
1.葡萄糖标准曲线的绘制
取6支10mL刻度试管,依次加入葡萄糖标准溶液0、0.1、0.2、0.3、
0.4、0.5mL,用蒸馏水补足至1mL,加入3,5-二硝基水杨酸溶液3mL混
匀,于沸水浴中保温10min(使其完全反应)后取出,冷却至室温后定容至10.0mL,于530nm处测吸光度值,以葡萄糖量为横坐标,以吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
2.样品酶解
选取大头菜表皮、中间、中心部位,油菜的根、茎、叶部位,萝卜的表皮、中间、中心部位,准确称取研磨每种样品0.500g两份,分别置于两支25mL刻度试管中,各加氟化钠0.1g。在一支试管中加沸水20mL,立即加热至沸并保持10min。在另一支试管中则加入35~38度蒸馏水20mL,置37度水浴中保温酶解1小时,使GS在芥子酶作用下水解。完成酶解后加热至沸并保持10min。
3. 硫代葡萄糖苷总量的测定
在两支试管中分别加入6滴中性醋酸铅,以沉淀其中的蛋白质及色素类物质,过量的醋酸铅应用饱和的硫酸钠溶液消除。最后,加蒸馏水定容至25mL,用滤纸过滤至试管中。取滤液各0.5,按葡萄糖标准曲线绘制方法,分别测定其吸光度
三.实验数据分析
1.绘制标准曲线
2.数据整理
表1.样品吸光度
样品
吸光度A值
灭酶管酶解管
油菜根0.062 0.185 油菜茎0.211 0.521 油菜叶0.014 0.303 白萝卜根0.313 0.405 白萝卜皮0.018 0.288 白萝卜心0.300 0.410 大头菜表皮0.313 0.405 大头菜中部0.133 0.242 大头菜心0.038 0.137
表2.样品吸光度对应质量
样品
灭酶管吸光度
对应质量m
1
(mg)
酶解管吸光度度对应质量m
2
(mg)
油菜根0.057 0.121
油菜茎0.135 0.293
油菜叶0.034 0.182 白萝卜根0.187 0.234 白萝卜皮0.036 0.174 白萝卜心0.180 0.236 大头菜表皮0.186 0.234 大头菜中部0.095 0.150 大头菜心0.046 0.097
3.计算
GS=(m
1-m
2
)×50×2.207/m×100%
式中: m
1
—灭酶管从标准曲线上查得的相应葡萄糖量,mg
m
2
—酶解管从标准曲线上查得的相应葡萄糖量,mg m—样品质量,mg
2.207——是硫葡萄糖转化为硫葡萄糖苷的系数
将表2数据代入上式得出结果如下表(其中m=500mg)
表3.样品中GS总量
样品GS总量(%)
样品 1.41
油菜根 3.49
油菜茎 3.27
油菜叶 1.04
白萝卜根 3.05
白萝卜皮 1.24
白萝卜心 1.06
大头菜表皮 1.99
大头菜中部 1.13
四.结果与讨论
1.误差分析
(1)硫代葡萄糖苷含量的测定
测定结果中,有的测定值不合理。可能是在样品研磨中并转移至比色瓶过程中,由于研磨及在空气中停留时间过长,还有研磨时产
生的热,使芥子酶作用于植物体,即灭酶处理的样品在灭酶前有部
分葡萄糖苷已被酶解,缩小灭酶前后的差值及人为的偶然误差引起。
(2)标准曲线的制作
绘制的标准曲线不过原点,可能是由于测量时参比溶液的配制不准确,引入了少量影响光吸收物质。
2.结果
如表3所示,白萝卜皮、油菜茎中硫代葡萄糖苷含量高;红心萝卜、油菜叶中硫代葡萄糖苷含量也较高;大头菜中的硫代葡萄糖苷含量最
少。而且同一蔬菜各部位分布差异大,其中在茎部含量较多,叶部较
少,如油菜。
由此可知不同的栽培种,不同的生理阶段,不同的组织部位,及不同的生长条件等都会使植物中含有的硫代葡萄糖苷含量和成分有
所不同。
五.参考文献
郭进宝;天然药物配合物的研究进展[J];中医研究;2005年04期