丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定试剂盒(IFCC法)产品技术要求mairui
丙氨酸氨基转移酶测定试剂盒(丙氨酸底物法)产品技术要求lepu
丙氨酸氨基转移酶测定试剂盒（丙氨酸底物法）适用范围：用于体外定量测定人血清中丙氨酸氨基转移酶的活性。
1.1 规格试剂1:3×60 mL，试剂2:1×45 mL；试剂1:1×60 mL，试剂2:1×20 mL；试剂1:1×60 mL，试剂2:1×12 mL；试剂1:4×60 mL，试剂2:4×15 mL；试剂1:2×40 mL，试剂2:2×10 mL；试剂1:3×28 mL，试剂2:3×7 mL；试剂1: 1×4L，试剂2: 1×1L；试剂1: 2×4L，试剂2: 1×2L。
1.2 主要组成成分试剂1主要组分：试剂2主要组分：2.1 净含量应不低于试剂瓶标示装量。
2.2 外观试剂1：无色或淡黄色透明溶液；试剂2：无色或淡黄色透明溶液。
外包装完好、无破损，标签完好、字迹清晰。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度应不小于1.0（波长340nm，光径1cm）。
2.3.2 试剂空白吸光度变化率试剂空白吸光度变化率（△A/min）应不大于0.004。
2.4 分析灵敏度测试100U/L的被测物时，吸光度变化率（ΔA/min）应不低于0.0025。
2.5 准确度用参考物质(GBW09177)定值的血清测定，实测值与标示值的偏差不超过±12.0％。
2.6 重复性批内变异系数（CV）应不大于5%。
2.7 线性2.7.1在[0.5，800]U/L区间内，线性相关系数r应不低于0.9900；2.7.2[0.5，96）U/L区间内，线性绝对偏差应不超过±11.52U/L；[96，800]U/L 区间内，线性相对偏差应不超过±12%。
2.8 批间差批间差应不大于10％。
2.9 稳定性取在2℃～8℃条件下贮存达到12个月后的试剂进行检测，检测结果应符合2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7的要求。
丙氨酸氨基转移酶IFCC法检测试剂中加入 5’
【摘要】目的评价在试剂中加有5’-磷酸吡哆醛的丙氨酸氨基转移酶(alt)试剂。
方法利用日立u-3310紫外分光光度计、温度控制仪和磁力搅拌仪，于37℃，340nm波长，速率法，使用加5’-磷酸吡哆醛和未加5’-磷酸吡哆醛alt试剂，测试临床标本，观察两种alt试剂的检测结果相关性。
结果加5’-磷酸吡哆醛和未加5’-磷酸吡哆醛的alt试剂测试临床标本结果比较，回归方程为y=0.8629x-2.4019,r2=0.9602。
结论加5’-磷酸吡哆醛alt试剂与未加5’-磷酸吡哆醛alt试剂有较好的相关性，且加有5’-磷酸吡哆醛alt试剂测试结果比未加5’-磷酸吡哆醛alt试剂测试结果约高14%。
【关键词】丙氨酸氨基转移酶;5’-磷酸吡哆醛;相关性吡哆醇、吡哆醛和吡哆胺是维生素b6的三种形式，它们在体内可以互相转化。
维生素 b6在体内经磷酸化作用转变为相应的磷酸酯，即维生素b6的辅酶形式：磷酸吡哆醛、磷酸吡哆胺，它们之间也可以相互转变，均为活性型。
作为转氨基的辅酶，磷酸吡哆醛和磷酸吡哆胺在氨基酸代谢中非常重要，是氨基酸代谢中的转氨酶及脱羧酶的辅酶，通过两者互变起着传递氨基的作用。
血清中的alt必须在酶和辅酶同时存在时才表现出最大活力，磷酸吡哆醛为其辅酶，在反应中起到传递氨基作用，测定alt时，加入磷酸吡哆醛可提高酶的活性。
本文将讨论在测定血清中丙氨酸氨基转移酶时，在检测试剂中加入5’-磷酸吡哆醛和不加5’-磷酸吡哆醛时两种检测结果的关系。
1 材料与方法1.1 仪器日立u-3310紫外分光光度计，日立温度控制仪，日立磁力搅拌仪。
日立7180全自动生化分析仪。
1.2 试剂按照ifcc配置的丙氨酸氨基转移酶基础试剂，然后再配置下述两种不同配方试剂。
配方一(后面标示为alt1)：取适量基础试剂，按照ifcc推荐方法要求，在反应液中加入5’-磷酸吡哆醛溶液。
配方二(后面标示为alt2)：取与配方一相等量的基础试剂，用亚沸水代替5’-磷酸吡哆醛溶液，即在反应液中加入等量的亚沸水。
丙氨酸氨基转移酶ALT
丙氨酸氨基转移酶ALT(GPT紫外乳酸脱氢酶法作业指导书1、前言试验名称：丙氨酸氨基转移酶测定，英文名称：ALT，方法：紫外-乳酸脱氢酶法。
本文件适用于安阳鼎城糖尿病医院检验科生化实验室，目的是指导工作人员正确的在科华KHB450全自动生化分析仪上测定血清、血浆样本中的丙氨酸氨基转移酶活力，以保证测定结果的准确可靠。
本试验用体外定量测定人血清或血浆样本中丙氨酸氨基转移酶的活力。
丙氨酸氨基转移酶在肝脏中有较高的浓度，而在肾、心、骨骼肌、胰、脾、肺脏中则含量较少，ALT升高通常是由某些与肝脏有关的疾病引起的，这些疾病包括：肝硬化、肝癌、病毒性或中毒性肝炎和阻塞性黄疸。
在急性病毒性或中毒性肝炎时，ALT明显高于AST，而对于绝大多数的慢性肝炎病人ALT则低于AST，ALT升高也见于广泛损伤和肌肉疾病、伴有休克的循环衰竭、缺氧、心肌梗塞和溶血性疾病。
2、测定原理本试验测定原理以IFCC推荐的方法为基础，实验分两步进行测定原理如下：a、样本中的ALT催化丙氨酸氨基转换至α-氧代戊二酸，生成丙柄酸和L-谷氨酸。
b、枘柄酸被试剂中的乳酸脱氢酶（LDH）还原为L-乳酸，同时NADH被氧化为NAD+，从而合340nm处的光吸收值下降，通过监测340nm处光吸收值下降的速率，可以测定ALT的活力。
L-丙氨酸+α-氧代戊二酸ALT丙酮酸+L-谷氨酸LDH L-乳酸+ NAD+丙酮酸+NADH3、试剂试剂生产商：长海科华生物工程股份有限公司。
剂型：液体双试剂。
包装量：R1：4*40ml R2：4*20ml注册号：沪食药监械（准）字2010第2400056号。
生产许可证号：沪药管械生产许20030916号。
基本成份：试剂1：L-丙氨酸600mmol/l乳酸脱氢酶﹥1820u/lNADH0.26mmol/lTris缓冲液80mmol/l试剂2：Tris缓冲液80mmol/lα-氧代戊二酸36mmol/lEDTA 5.0mmol/l储存条件和有效期：试剂避光储存于2―8℃可稳定12个月。
血清丙氨酸氨基转移酶测定
血清丙氨酸氨基转移酶测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。
2 实验原理本试剂以国际临床化学会(IFCC)推荐方法为基础，所采用的反应原理与反应式如下。
⑴样本中的丙氨酸氨基转移酶（ALT）催化丙氨酸的氨基转换至α-氧代戊二酸，生成丙酮酸和L谷氨酸。
⑵丙酮酸被试剂中的乳酸脱氢酶（LDH）还原为L-乳酸的同时还原型辅酶I（NADH+ H+）被氧化为辅酶I（NAD+），而使波长340nm处的吸光度值下降。
通过对波长340nm处吸光度值的下降速率进行监测，即可测得样本中丙氨酸氨基转移酶（ALT）的活性。
(3)样本中内源性丙酮酸的干扰，可由试剂中的乳酸脱氢酶（LDH）在测定的延迟时间内快速、完全地消除，不会对测定产生干扰。
ALTL-丙氨酸 + -酮戊二酸丙酮酸 + L-谷LDH（乳酸脱氢酶）氨酸丙酮酸+ NADH + H+L-乳酸 + NAD+ + H2O3 标本3.1病人准备：12小时禁食。
3.2 类型：血清。
3.3. 标本存放：3天内的活性损失：2～8℃保存：<10%；15～25℃保存：<17%；标本稳定性：-20℃保存至少可稳定4周。
3.4 标本运输：常温条件下保存运输。
3.5 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。
4 实验材料4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司ALT试剂盒（沪食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）4.1.1 试剂组成试剂1 L丙氨酸 600mmol/L 乳酸脱氢酶＞1820U/L（R1）：NADH 0.26mmol/LTris缓冲液 80mmol/L试剂2（R2）：Tris缓冲液80mmol/L α氧代戊二酸36mmol/LEDTA 5.0mmol/4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
4.1.3 试剂稳定性与贮存：在2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂盒自生产之日起有效期为12个月。
4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
BS-300试剂规格 - 迈瑞
液体双剂型
120ml(3*30;1*30)
总胆汁酸(TBA)测定试剂盒
(第5代)循环酶法
液体双剂型
60ml(1*45;1*15)
总胆固醇(TC)测定试剂盒
氧化酶法
液体单剂型
300ml(6*50)
甘油三酯(TG)测定试剂盒
氧化酶法
液体单剂型
Glu-G:氧化酶法
液体单剂型
300ml(6*50)
葡萄糖(Glu)测定试剂盒
Glu-H:己糖激酶法
液体双剂型
300ml(4*50;2*50)
高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)测定试剂盒
直接法（不受干扰物质影响）
液体双剂型
120ml(3*30;1*30)
低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)测定试剂盒
300ml(6*50)
总蛋白(TP)测定试剂盒
双缩脲法
液体单剂型
300ml(6*50)
尿酸(UA)测定试剂盒
氧化酶法
液体单剂型
300ml(6*50)
尿素(UREA)测定试剂盒
紫外-谷氨酸脱氢酶法
液体双剂型
250ml(4*50;2*25)
无
机
离
子
类
钙(Ca)测定试剂盒
液体双剂型
60ml(1*45;1*15)
免疫球蛋白A(IgA)测定试剂盒
免疫透射比浊法（无需样品预稀释）
液体双剂型
60ml(1*40;1*20)
免疫球蛋白G(IgG)测定试剂盒
免疫透射比浊法（无需样品预稀释）
液体双剂型
血清丙氨酸氨基转移酶测定
血清丙氨酸氨基转移酶测定1.实验原理国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外连续监测法。
ALTL-丙氨酸+ -酮戊二酸丙酮LDH（乳酸脱氢酶）酸+ L-谷氨酸丙酮酸+ NADH + H+L-乳酸+ NAD++ H2O 上述偶联反应中，NADH的氧化速率与`样品中ALT的活力成正比,在340nm处NADH呈现特性吸收峰，而NAD+则没有。
因此，可在340nm监测吸光度的下降速率（-△A/min）,计算出ALT的活性单位。
2. 标本：2.1 病人准备：12小时禁食。
2.2 类型：血清，肝素或EDTA血浆。
3. 标本存放：3天内的活性损失：2～8℃保存：<10%；15～25℃保存：<17%；标本稳定性：-20℃保存至少可稳定4周。
4. 标本运输：常温条件下保存运输。
5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。
6. 实验材料6.1 试剂欧泰克ALT测定试剂盒6.1.1 试剂组成Tris缓冲液pH 7.4 80mmol/LL-丙氨酸800mmol/LLDH（乳酸脱氢酶）≥1200U/La-酮戊二酸18mmol/LNADH 0.18mmol/L6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
6.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。
不可入口！避免接触皮肤及粘膜。
应采取必要的预防措施使用试剂。
6.2 校准品：使用罗氏公司提供的校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。
6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。
7. 仪器：日立7060生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数：参见生化检验日立7060生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2 仪器操作步骤：参见生化检验日立7060生化分析仪操作规程.SOP文件9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
ALT丙氨酸氨基转移酶检测试剂盒(速率法)产品说明书
丙氨酸氨基转移酶检测试剂盒（速率法）说明书[产品名称] 通用名称: 丙氨酸氨基转移酶检测试剂盒（速率法）英文名称:L-Alanine Aminotransferase Assay Kit（ALT）[包装规格]2×200Tests；2×400Tests；R1:4×60ml、R2:4×15ml；R1:4×80ml、R2:4×20 ml；R1:4×120ml、R2:2×60ml；R1:8×40ml、R2:2×40ml；R1:4×50ml、R2:2×25 ml；R1:2×40ml、R2:2×10ml；R1:4×50ml、R2:4×25ml。
[预期用途] 用于体外定量检测人血清中的丙氨酸氨基转移酶的活力。
[检验原理]ALTL-丙氨酸 +α-酮戊二酸丙酮酸+ L-谷氨酸LDH丙酮酸 + NADH + H+ L-乳酸 + NAD+ + H2O[主要组成成份]由试剂R1和试剂R2组成。
试剂R1：三羟甲基氨基甲烷（Tris）缓冲液、乳酸脱氢酶（LDH）、L-丙氨酸、α-酮戊二酸；试剂R2：三羟甲基氨基甲烷（Tris）缓冲液、还原型辅酶（NADH）。
[储存条件及有效期] 试剂在2℃～8℃无腐蚀性气体中避光储存，若无污染，可稳定至失效期。
有效期12个月。
开瓶后2℃～8℃可稳定30天。
备注：生产日期及失效日期见外盒或瓶标签。
[适用仪器]日立7170、奥林巴斯AU640、贝克曼LX-20全自动生化分析仪。
[样本要求]使用新鲜的无溶血血清，血清不宜反复冻融，以免影响酶活性。
[检验方法]（1）双试剂无需配制，直接使用。
（2）试验条件：样本（S）：15 µl试剂1(R1) ：200 µl 试剂2（R2）：50 µl温度：37 ℃测定类型：速率法主波长：340 nm 副波长：405 nm 反应方向：下降方法：先将样本与R1混合，37 ℃5分钟后加入R2试剂，然后测定加入R2后2分钟至4分钟之△A/min 。
生化试剂sop
丙氨酸氨基转移酶测定试剂（ALT）（酶法）1. 检测原理本试剂采用国际临床化学联合会（IFCC）推荐方法：丙氨酸+α-酮戊二酸−−→−ALT丙酮酸+L-谷氨酸丙酮酸+NADH+H+−−→−LDH L-乳酸+NAD++H2ONADH氧化成NAD+引起340nm处吸光度的下降，下降速率与样品中ALT活性成正比。
2．标本采集与处理2.1 受检者的准备：病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。
应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.2 静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
2.3 抗凝剂：血浆使用肝素或EDTA（1mg/mL）作为抗凝剂2.4 标本的处理和储存：1血标本室温放置30min～45min后离心分离血清，置洁净试管加盖低温保存。
2标本在2-8℃可稳定3天，避免溶血。
3．试剂3.1 试剂及配套品：3.1.1试剂：本科使用重庆中元生物技术有限公司ALT试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：试剂R1：Tris缓冲液NADH 100mmol/L 0.3mmol/L试剂R2：Tris缓冲液100mmol/Lα-酮戊二酸85mmol/LL-丙氨酸 800mmol/LLDH ≥8.5kU/L不同批号试剂盒中各组份不能互换。
3.1.2配套品：无配套品。
3.2 试剂的稳定性：1.原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。
试剂的有效期为12个月。
2.试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天4：校准4.1校准血清：朗道复合校准品4.2校准方式：使用去离子水与校准血清两点定标。
迈瑞生化项目SOP文件
丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定方法操作规程【产品名称】通用名称：丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定试剂盒（IFCC法）【预期用途】该试剂盒采用IFCC法，用于体外定量测定人血清或肝素血浆中丙氨酸氨基转移酶的活力。
【检验原理】在ALT催化下，从丙氨酸转移到2个氨基到α-酮戊二酸上，生成产物谷氨酸和丙酮酸。
后者通过乳酸脱氢酶催化下转变成乳酸，在340nm波长条件下检测到NADH吸光度下降速率，与ALT的活力成比例。
L-丙氨酸+α-酮戊二酸丙酮酸+ L-谷氨酸丙酮酸+NADH+H+L-乳酸+NAD++H2O【主要组成成份】R1：Tris缓冲液150mmol/LL-丙氨酸750 mmol/L乳酸脱氢酶（LDH） 1200U/LNADH 0.4mmol/LR2：α-酮戊二酸90mmol/LNADH 0.9mmol/L*不同批号试剂盒各组分请勿混用。
【储存条件与有效期】未开启的试剂盒在2℃~8℃保存有效期为一年。
试剂开瓶后应避光保存，在2℃~8℃可稳定28天。
试剂不可冰冻。
【适用仪器】迈瑞BS系列全自动生化分析仪、日立7180型全自动生化分析仪、日立7060型全自动生化分析仪、日立7600P自动生化分析仪、奥林巴斯AU400型全自动生化分析仪、奥林巴斯AU2700型全自动生化分析仪、贝克曼库尔特AU680型全自动生化分析仪。
若需自动生化分析仪应用参数，请随时和公司联系。
建议用户在不同仪器上使用本产品时，根据实验室情况进行验证。
【样本要求】新鲜血清或肝素血浆样本，采集后及时测定，应避免污染。
【检验方法】试剂准备R1：即用液体试剂R2：即用液体试剂测定条件波长340nm温度37℃分析类型动力学法反应方向下降反应操作步骤* ΔA/min=ΔA/min样本管—ΔA/min空白管* 试剂和样本量可根据不同生化分析仪要求按比例适当增减。
校准校准品类型S1：生理盐水S2：迈瑞配套校准品推荐进行2点线性校准校准周期和要求（包括但不限于以下情况）更换试剂批号时仪器关键零部件更换时室内质控失效时质控每批样品检测时，建议使用迈瑞公司提供的配套质控品进行内部质量控制。
丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定试剂盒(丙氨酸底物法)产品技术要求derui
丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定试剂盒（丙氨酸底物法）
2、性能指标
2.1外观和性状
外观和性状应符合表2要求。
表2 试剂盒内各组分的外观性状
2.2试剂空白
2.2.1试剂空白吸光度
试剂以蒸馏水为空白时，波长 340nm，光径 1.0 cm，温度 37℃，吸光度≥
1.0。
2.2.2试剂空白吸光度变化率
试剂以蒸馏水为空白时，波长 340nm，光径 1.0 cm，温度 37℃，吸光度变化率≤0.004。
2.3分析灵敏度
试剂盒测试130 U/L被测物时，吸光度变化率≥0.015。
2.4线性范围
2.4.1试剂盒在10 ~1000 U/L区间（范围）内，其回归系数r≥0.990。
2.4.2相对偏差或绝对偏差应符合表 3 要求。
表3 相对偏差或绝对偏差
2.5精密度
2.5.1试剂盒批内精密度 CV 值应≤4.0%。
2.5.2试剂盒批间相对极差（R）应≤5.0%。
2.6准确度
1
相对偏差（Bias%）应在参考物质靶值±10%以内。
2.7液体装量
试剂盒不同规格的净含量应不少于其标示量。
2。
丙氨酸氨基转移酶检测试剂条干化学法说明书
丙氨酸氨基转移酶检测试剂条（干化学法）说明书【产品名称】通用名称：丙氨酸氨基转移酶检测试剂条（干化学法）英文名称：ALT Test Strip（Dry Chemistry Method）【包装规格】50人份/筒【预期用途】ALT是一种与氨基酸代谢有关的酶，广泛存在于正常人体组织、器官内，其主要来源是肝脏，并且主要和肝脏疾病密切相关。
ALT的升高往往指示心肌梗塞、肝病、肌营养失调和其它内脏损伤。
血液中ALT的升高对于肝病是一种非常灵敏的指标，并且与其它的疾病相关。
自从1955年以来有许多方法用于检测ALT，最主要的为：紫外法和比色法。
丙氨酸氨基转移酶检测试剂条（干化学法）是一种无需分光光度计和比色仪的快速检测试剂条，使用非常简单，而准确度达到临床可接受的准确性要求。
用于定性检测人全血/血浆/血清中的丙氨酸氨基转移酶（ALT）、或称为谷丙转氨酶（SGPT或者GPT）。
【检验原理】丙氨酸氨基转移酶检测试剂条（干化学法）包含固定在塑料片上用于分离全血的膜和一个特别的ALT多层复合反应膜。
当检测含有ALT的全血品时，血浆就会被从全血中分离出来并渗透到反应膜上；对于血浆和血清样本则也可以直接加样到反应孔上。
依据样本中的不同ALT浓度，反应孔就会很快变成浅蓝至深蓝色。
本试剂条被设计成通过将试剂条上最终颜色与比色卡对比，能半定量地检测出所测样品中转氨酶之含量，从而确定结果阴阳性。
【主要组成成份】蛋白质稳定剂、过氧化物酶、缓冲溶解、指示剂、表面活性剂、ALT氧化酶、其它活性物质。
【储存条件及有效期】l应置于2-8℃、避光干燥处密闭冷藏保存；l不得冷冻或置于25℃以上保存；l有效期：18个月；l过期的试剂条不可再使用。
【样本要求】本试剂条最适宜的检测样本为采自指尖或耳垂等末梢的新鲜全血作为检测样本。
采用静脉血时，应用新鲜的全血，可使用枸橼酸盐、肝素和乙二胺四乙酸盐等抗凝剂。
不得使用含氟防腐剂。
室温保存的样本应在8小时内进行检测；于2-8℃保存之样品，应在48小时内进行检测。
人丙氨酸氨基转移酶(ALT)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
人丙氨酸氨基转移酶（ALT）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用检测范围：0.78mIU/ml-50mIU/ml最低检测限：0.195mIU/ml特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的人ALT，且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期：6个月预期应用：ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中ALT含量。
说明1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。
2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗ALT抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗ALT抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的ALT呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板（Assay plate）：一块（96孔）。
2.标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3.样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4.生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液（HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6.生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）7.辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）8.底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9.浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
检验科生化项目SOP文件(迈瑞)
丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定方法操作规程【产品名称】通用名称：丙氨酸氨基转移酶（ALT）测定试剂盒（IFCC法）【预期用途】该试剂盒采用IFCC法，用于体外定量测定人血清或肝素血浆中丙氨酸氨基转移酶的活力。
【检验原理】在ALT催化下，从丙氨酸转移到2个氨基到α-酮戊二酸上，生成产物谷氨酸和丙酮酸。
后者通过乳酸脱氢酶催化下转变成乳酸，在340nm波长条件下检测到NADH吸光度下降速率，与ALT的活力成比例。
L-丙氨酸+α-酮戊二酸丙酮酸+ L-谷氨酸丙酮酸+NADH+H+L-乳酸+NAD++H2O【主要组成成份】R1：Tris缓冲液150mmol/LL-丙氨酸750 mmol/L乳酸脱氢酶（LDH） 1200U/LNADH 0.4mmol/LR2：α-酮戊二酸90mmol/LNADH 0.9mmol/L*不同批号试剂盒各组分请勿混用。
【储存条件与有效期】未开启的试剂盒在2℃~8℃保存有效期为一年。
试剂开瓶后应避光保存，在2℃~8℃可稳定28天。
试剂不可冰冻。
【适用仪器】迈瑞BS系列全自动生化分析仪、日立7180型全自动生化分析仪、日立7060型全自动生化分析仪、日立7600P自动生化分析仪、奥林巴斯AU400型全自动生化分析仪、奥林巴斯AU2700型全自动生化分析仪、贝克曼库尔特AU680型全自动生化分析仪。
若需自动生化分析仪应用参数，请随时和公司联系。
建议用户在不同仪器上使用本产品时，根据实验室情况进行验证。
【样本要求】新鲜血清或肝素血浆样本，采集后及时测定，应避免污染。
【检验方法】试剂准备R1：即用液体试剂R2：即用液体试剂测定条件波长340nm温度37℃分析类型动力学法反应方向下降反应操作步骤* ΔA/min=ΔA/min样本管—ΔA/min空白管* 试剂和样本量可根据不同生化分析仪要求按比例适当增减。
校准校准品类型S1：生理盐水S2：迈瑞配套校准品推荐进行2点线性校准校准周期和要求（包括但不限于以下情况）更换试剂批号时仪器关键零部件更换时室内质控失效时质控每批样品检测时，建议使用迈瑞公司提供的配套质控品进行内部质量控制。
丙氨酸氨基转移酶(ALT)检测(赖氏法)规程
丙氨酸氨基转移酶（ALT）检测（赖氏法）规程原理本法系依据丙氨酸氨基转移酶（Alaurine Transaminase 缩写为ALT）与由丙氨酸及α-酮戊二酸组成的底物缓冲液产生丙酮酸及谷氨酸。
丙酮酸与2，4-二硝基苯肼作用，生成丙酮酸2，4-二硝基苯腙，在碱性溶液中显红棕色。
通过比色测定可以了解血浆中丙氨酸氨基转移酶的活力。
试剂（1）0.1mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.4）准确称取磷酸氢二钠二水合物15.04g、磷酸二氢钾1.09g溶于实验用水中，补加实验用水至500ml。
然后用1mol/L HCl溶液或1mol/L NaOH溶液调整pH至7.4，密封保存。
（2）底物缓冲液（200mmol/L DL-丙氨酸；2mmol/Lα-酮戊二酸）精确称取DL-丙氨酸1.79g 和α-酮戊二酸29.2mg，用0.1mol/L磷酸盐缓冲液溶解并稀释至100ml，用1mol/L氢氧化钠（约0.5ml）调节pH值至7.4，密封保存。
（3）1mmol/L2，4-二硝基苯肼溶液称取2，4-二硝基苯肼19.8mg，用1mol/L浓度的盐酸溶液溶解，并稀释至100ml。
（4）0.4mol/L氢氧化钠溶液称取氢氧化钠16.0g，用实验用水溶解至1000ml。
（5）2mol/L氢氧化钠溶液称取氢氧化钠80g，用实验用水溶解至1000ml。
（6）2mmol/L丙酮酸标准液精确称取丙酮酸钠22.0mg，置于100ml称量瓶中，加0.05mol/L 的硫酸溶液溶解，然后移入100ml容量瓶中，再用0.05mol/L的硫酸溶液洗涤称量瓶三次，将洗涤液并入容量瓶中，补加0.05mol/L的硫酸溶液至容量瓶刻度，摇匀。
（7）1mmol/L丙酮酸标准液取2mmol/L丙酮酸标准液用0.05mol/L的硫酸溶液作1:1稀释测定法（1）试管法(单点定量)样品酶活力按下式计算样品酶活力（单位）＝样品管吸光度值÷标准管吸光度值×标准的单位（2）试管法(标准曲线)试验前将除氢氧化钠外检测试剂预热至37℃后使用。
ALT测定
丙氨酸氨基转移酶ALT操作规程用途本试剂采用IFCC推荐方法配制，用于体外测定人血清或血浆中丙氨酸氨基转移酶活力。
临床意义ALT在肝脏中有较高的浓度，而在肾、心、骨胳肌、胰、脾、肺脏中则含量较少。
通常ALT的升高由某些与肝脏有关的疾病引起，包括: 肝硬化、肝癌、病毒性或中毒性肝炎和阻塞性黄疸。
ALT升高也见于广泛损伤和肌肉疾病，伴有休克、氧不足的循环衰竭，心肌梗塞和溶血性疾病。
方法学原理ALTL-丙氨酸+α-酮戊二酸→丙酮酸+ L-谷氨酸LDH丙酮酸+ NADH+ H+→L-乳酸+ NAD+上述偶联反应中,还原性辅酶Ⅰ(NADH) 的氧化速率与标本的ALT活性成正比。
NADH在340nm 有特异吸收，因而可监测NADH吸光度的下降来计算ALT活力。
试剂组成试剂1（R1）试剂2（R2）Tris缓冲液80mM NADH 0.18mML-丙氨酸500mM α-酮戊二酸15mMLDH ≥2000U/L试剂贮存及稳定性试剂自生产日期起2—8℃避光存放可稳定12个月；R1、R2按4:1比例混为工作液2—8℃避光可稳定4周。
标本要求不溶血的血清或肝素抗凝血浆。
标本在4℃以下至少可稳定7天，－20℃保存2个月内稳定。
测定方法1. 试剂准备若双试剂检测，该试剂盒可直接使用，无需配制；若单试剂操作，将试剂1与试剂2按4:1比例混合即可。
2. 基本参数测定模式速率法样品量40ul延迟时间60秒试剂量 1.0ml测定时间60秒主波长340nm温度37℃副波长405nm光径1cm F值41273. 测定a. 手工、半自动及单一试剂的全自动测定按需要量将R1、R2以4:1比例配制工作液，平衡至测定温度。
混匀，延迟时间60秒，测定时间60秒，测定△A/分。
b. 双试剂全自动生化仪测定混匀，延迟时间60秒，测定时间60秒，测定△A/分。
4. 结果计算ALT (U/L)=△A/分×FV tF=——————×103V s×ε×LV t = 反应液总体积（ul）V s = 样本体积（ul）L = 比色杯光径（cm）ε= NADH在340nm处的毫摩尔吸光系数，为6.22ALT（U/L）=△A/分×4127 (双试剂，光径1cm)ALT（U/L）=△A/分×4127 (单试剂，光径1cm)试剂性能1. 线性范围：0-1200U/L若测定值大于1200U/L，用生理盐水稀释重测。
丙氨酸氨基转移酶ALT测定方法概述ALT测定谷氨酸酶电极法
该法的缺陷是存在内源性丙酮酸和GLDH的干扰，采用双试剂底物 启动模式可以消除部分干扰，延长延滞期也可以消除部分干扰，但关 键还是要求用高纯度的试剂(不含杂酶)和无氨蒸馏水。
IFCC推荐法建议试剂中添加5’一磷酸毗哆醛，这与我国推荐方 法不同。添加5 磷酸毗哆醛的目的是使脱辅基的酶恢复酶活性，对肿 瘤化疗病人和肾病病人(有一部分脱辅基的酶)来说，与不含有辅酶的 试剂相比测得结果有明显差别。‘
逆向反应法： 优点： NADH用量少，试剂成本低，反应
速率快，灵敏度高。 缺点：丙酮酸和NADH的稳定性差；过量丙
酮酸对LD的抑制作用大。
AST
L-天冬氨酸 ＋ α-酮戊二酸
草酰乙酸 ＋ L-谷氨酸
草酰乙酸 ＋ NADH ＋ H+ MD
L-苹果酸 ＋ NAD+
该方法也是属于酶偶联法，以苹果酸脱氢酶(MD)作指示酶， 连续监测 NADH在340 nm的吸光度下降速度来计算酶活性。 该法是我国检验学会的推荐方法。
(三)方法学评价
AST测定方法及评价基本与ALT相同。 IFCC推荐法用MD作指示酶，由于产物草酰乙酸不稳定， 易转变为丙酮酸，故试剂中加人LD，实质是两个指示酶， 但通常将LD作为辅助助酶。 该法预孵育期较长，达90s，目的是在预孵育期将内源性 的丙酮酸转化为乳酸，减少内源性丙酮酸的干扰。
CK pH6.5
磷酸肌酸 ＋ ADP
肌酸 ＋ ATP
ATP ＋ 葡萄糖 HK 6-磷酸葡萄糖 ＋ ADP
G-6-PD
6-磷酸葡萄糖＋NADP+
6-磷酸葡萄糖酸＋NADPH ＋ H+
(三)方法学坪价
酶偶联连续监测法反应速率快，不需做血清空白，故在 临床广泛使用。该法测定中的影响因素如下:
Piccolo脂类6项检测试剂盘说明书
脂类6项检测试剂盘【产品名称】通用名称：脂类6项检测试剂盘商品名称：Piccolo英文名称：Lipid Panel Plus Reagent Disc【包装规格】10盘/盒【预期用途】与Piccolo血液化学分析仪或Piccolo Xpress 化学分析仪一起使用的Piccolo®脂类6项检测试剂盘预期用于体外定量测定肝素化全血、肝素化血浆或血清中的总胆固醇(CHOL)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL)、甘油三酯(TRIG)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和葡萄糖(GLU)的水平。
根据CHOL、HDL和TRIG的测定结果，分析仪能够计算出低密度脂蛋白胆固醇(LDL)、极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL)，以及总胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇的比率（TC/H）。
根据《临床实验室改进修正案》（CLIA）第88条规定，在本检测盘上进行的检测可以豁免。
如果实验室修改了检测系统的使用说明，则这些检测将被认为具有高度复杂性，必须应符合所有CLIA要求。
对于CLIA豁免的实验室，只能对肝素锂全血进行检测。
如果用于具有中度复杂性的实验室检测，可以采用肝素锂化全血、肝素锂化血浆，或血清。
要进行CLIA豁免测试，必须先获得CLIA豁免证书。
豁免证书可以通过医疗保险和医疗服务中心（CMS）获取。
如须获得帮助，请联系Abaxis技术服务部，电话：(800) 822-2947。
检测概述及说明临床意义血脂及脂蛋白的测定对于确定个体是否有存在进行性发展为心血管疾病(CVD)的风险特征，及对其干预治疗的监测尤其重要。
美国国家胆固醇教育计划已提供了测定方面的共识性指南及分界点阐述的内容。
循环脂质体由脂蛋白携带。
LDL分数，为导致动脉粥样硬化的主要脂蛋白数据，最终已证明治疗有效，其携带血液中大部分循环胆固醇。
多年持续对血清总胆固醇的测量以确定脂蛋白的总量，并将其作为CVD风险评估的简便方法。
然而，部分胆固醇是由HDL颗料携带的，其具有抗动脉粥样硬化或逆转进行性发展为CVD风险的作用。
ALT检测操作规程
ALT检测操作规程ALT（丙氨酸氨基转移酶）是一种存在于细胞质中的酶，广泛分布于人体包括肝脏、心脏、肾脏等组织中。
ALT是肝脏功能的重要指标之一，通过测量血液中ALT的活性，可以评估肝脏功能的健康程度。
本文将介绍ALT（丙氨酸氨基转移酶）检测操作规程（速率法）。
一、实验器材和试剂准备1.乙醚：用于准备昏迷鼠模型；2.丙酮：用于制备丙酮胺溶液；3.氯化二乙酸：用于制备氯化二乙酰胺试剂；4.丙酮胺：用于制备丙酮胺溶液；5.磷酸氢二钾溶液：用于制备缓冲液；6.氧化丙酮胺：用于制备氧化丙酮胺试剂；7.pH7.0缓冲液：用于制备反应体系；8.4-氨基硫代洪美酸：用于停止反应；9.甲醛：用于制备甲醛溶液；10.维生素C溶液：用于制备维生素C溶液；11.肝组织磷酸化酰胺：用于制备肝组织提取液；12.酶提取液：用于提取ALT酶。
二、实验步骤1.制备ALT酶提取物：（1）取新鲜动物（小鼠）肝脏组织15g，加入磷酸缓冲液5倍的体积；（2）放入冷冻机中，-20℃下保存12h；（3）取出，加入万能匀浆器中，对肝脏组织进行研磨；（4）将研磨后的肝脏组织加入毛细管离心管中，进行离心，1800r/min 离心10 min；（5）将提取液转入新的毛细管离心管中，再次离心，3000r/min 离心10 min；（6）将上清液收集至离心管中，取出备用。
2.制备标准曲线：（1）取6个试管，分别标记为A、B、C、D、E、F，一个空白试管用作对照；（2）分别加入0.1ml、0.2ml、0.3ml、0.4ml、0.5ml、0.6ml的ALT 酶提取液；（3）加入pH 7.0缓冲液，使总体积为2.0ml；（4）每个试管中加入0.2ml的氧化丙酮胺试剂；（5）按顺序加入2ml、0.2ml、2ml的维生素C溶液、氧化丙酮胺试剂和ALT提取液；（6）加入4-氨基硫代洪美酸停止反应，并立即搅拌均匀；（7）用甲醛溶液处理样品；（8）分别在0.1、0.2、0.3、0.4及0.5的浓度范围内，测定样品的吸光度。
丙氨酸氨基转移酶试剂盒(丙氨酸底物法)
丙氨酸氨基转移酶试剂盒（丙氨酸底物法）标准化操作规程1 目的规范实验室操作，保证检验工作顺利有效进行特制定此规程。
2 授权操作人经培训且考核通过的实验室检验人员。
3 适用范围：本试剂适用于体外定量检测人血清或血浆中丙氨酸氨基转移酶（ALT）的活力。
4 检验方法本试剂反应原理采用国际临床化学联合会（IFCC）推荐的方法。
5 检验原理在丙氨酸氨基转移酶的作用下，L-丙氨酸与α-酮戊二酸反应，生成丙酮酸和L-谷氨酸。
丙酮酸被试剂中的乳酸脱氢酶（LDH）还原为L-乳酸，同时NADH 被氧化为NAD＋，使340nm处的光吸收值下降，通过监测340nm处光吸收值下降的速率，可以测定丙氨酸氨基转移酶活力。
样品中内源性丙酮酸的干扰可由试剂中LDH在反应延迟时间内消除，不会干扰测定。
ALTL-丙氨酸+α-酮戊二酸丙酮酸+L-谷氨酸LDH丙酮酸+NADH L-乳酸+NAD+6 检验标本要求6.1 样本为血清。
6.2 不得使用溶血或被污染的样本。
6.3 样本在2℃~8℃条件下可保存7天、室温条件下可保存1天。
7 试剂及配套品7.1试剂来源长春迪瑞医疗科技股份有限公司丙氨酸氨基转移酶试剂盒7.2试剂组成7.3试剂的稳定性与贮存：7.3.1 试剂在2℃~8℃条件下，干燥、避光、密封贮存，有效期为18个月。
7.3.2 试剂开封后在2℃~8℃条件下可稳定30天，试剂不可冷冻。
7.3.3 反应液在2℃~8℃可稳定30天。
7.4试剂的变质指示：若试剂混浊，或在340 nm处试剂空白吸光度值低于1.000A 时，不能使用。
8 实验仪器及性能指标8.1实验仪器迪瑞CS系列全自动生化分析仪8.2试剂性能指标8.2.1 空白吸光度：A≥1.000。
8.2.2 空白吸光度变化率：︱△A︱/min≤0.002/min。
8.2.3 分析灵敏度：测试1U/L被测物时，吸光度变化率（△A/min）＜-0.0001。
8.2.4 线性范围：4U/L～1000U/L；线性相关系数r≥0.9900；[4，200]U/L范围内，线性绝对偏差应不超过±40U/L；（200，1000]范围内，线性相对偏差不超过±15％。
波音特生物科技(南京)有限公司 血清丙氨酸氨基转移酶检测试剂盒(ALT)使用说明书（酶学速率法）
酶学速率法波音特生物科技（南京）有限公司PO IN TE BIO TEC H(N ANJ ING ) C O., LTD.血清丙氨酸氨基转移酶检测试剂盒(ALT)使用说明书（酶学速率法）【产品名称】通用名称：血 清 丙 氨 酸 氨 基 转 移 酶 检 测 试 剂 盒) 英文名称： The Serum ALT Reagent Kit 【包装规格】 型号 规格通用型 240ml （R1:4×48ml + R2:1×48ml ） 通用型 255ml （R1:3×68ml + R2: 3×17ml ） 通用型360ml （R1:3×96ml + R2:3×24ml ）【预期用途】本试剂盒用于测定人血清或血浆中ALT 的含量。
【检验原理】OH NAD L H NADH L L LDH ALT2+− → +− → −−++乳酸＋丙酮酸＋谷氨酸丙酮酸＋酮戊二酸丙酮酸＋α上述偶联反应中，还原性辅酶Ⅰ(NADH)的氧化速度与标本ALT 活性成正比。
NADH 在340nm 处有特异性吸收率，因而可通过监测NADH 吸光度的下降速率来计算出ALT 的活力。
【主要组成成份】 试 剂成 份 含 量 Tris 缓冲液60mmol/L NADH 0.18mmol/L L-丙氨酸 500mmol/L R 1LDH 600U/L a-酮戊二酸15mmol/L 丙氨酸 500mmol/L R 2稳定剂和防腐剂【储存条件及有效期】本试剂盒在2~8℃避光保存，防止冷冻，可稳定12个月； 开启后在2~8℃避光保存可稳定30天。
【适用仪器】本试剂通用型适用于日立7170/7180/7080/7600 /7060/7150 /7 020;奥林巴斯AU400/640/7200/5400; Abbott Aeroset 2000/C 8000;SHIMADZU CL7200/7300/8000；东芝40FR/120FR/200FR;迈瑞BS-300；利霸；Beckman CX/LX;DADE Behring AR/RxL/X –Pand 。
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2性能指标
2.1外观
试剂应为清澈透明的液体，无沉淀、悬浮物和絮状物。
2.2净含量
液体试剂的净含量应不少于标示值。
2.3试剂空白吸光度
2.3.1试剂空白吸光度
试剂以水为空白在37 ℃ ± 1 ℃，340 nm 波长条件下，吸光度应大于0.5A。
2.3.2试剂空白吸光度变化率
试剂以水为空白在37 ℃±1 ℃，340 nm 波长条件下，吸光度变化率应小于0.0010 A/min。
2.4分析灵敏度
当样本浓度为30 U/L 时，吸光度变化应不小于0.005A/min。
2.5线性范围
试剂盒在（4~1000）U/L 范围内：
a)线性相关系数r 应不小于0.9900；
b)当样本浓度不大于120 U/L 时，线性绝对偏差应不大于±12.0 U/L；当样本浓度大于120 U/L 时，线性相对偏差应不大于±10.0%。
2.6测量精密度
2.6.1重复性
变异系数：CV 应不大于 3.5％。
2.6.2批间差
相对偏差：R 应不大于 5.0％。
2.7准确度
测定校准品，测定结果与靶值的相对偏差应不大于±10.0%。
2.8分析特异性
血红蛋白浓度在500 mg/dL 内、抗坏血酸浓度在30 mg/dL 内、内源性酯浓度在500 mg/dL 内、胆红素浓度在40 mg/dL 内，对试剂检测结果的偏差影响应在±10%以内。
1。