土壤速效磷的测定

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实验的目的意义
测定土壤速效磷的含量，可为合理分配和施用磷 肥提供理论依据。（施肥！） *说明：应用不同的测定方法在同一土壤上可以得到 不同的速效磷含量。在测定土壤速效磷时，应特别 注意所采用的测定方法。在中性土壤和石灰性土壤
，一般采用碳酸氢钠或碳酸铵来提取。
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测试原理
采用NaHCO3浸提-钼锑抗比色法测定土壤速效磷。
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思考题
1.为什么在报告土壤速效磷的测定结果时必须同时 说明所采用的测定方法？ 2. 用本方法测定 土壤速效磷在操作过程中要注意 什么？
3. 利用测定结果判定土壤磷素丰缺水平。
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磷系列标准液 ρ/（mg/L） 吸光度A
0.0 0.000
0.1 0.050
0.2 0.112
0.3 0.163
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讲课人：史培华 系别：农艺系
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本节内容：
土壤中磷的形态 实验的目的意义 实验的测试原理
仪器、材料与试剂
操作步骤及注意事项 结果计算方法
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土壤中磷的形态
有机态磷：磷脂、植素、核酸、核蛋白
土壤中的磷 （P 69-70）
（ 水溶性磷：磷酸钾、磷酸钠 速 有 效效 磷磷 无机态磷 弱酸性磷：磷酸氢钙 ） 难溶性磷 表1 土壤中磷的形态
4. 钼锑抗混合显色剂
称取1.50g抗坏血酸（左旋，旋光度+12～+22，分析纯）溶 于100ml钼锑抗贮存液中，混匀。此试剂有效期为24h，宜用前 配制，随配随用。
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实验试剂
5. 磷标准液
准确称取在 105℃ 烘箱中烘干 2h 的分析纯 KH2PO40.2195g ， 溶于 400ml蒸馏水中。加浓硫酸 5ml，转入 1000ml容量瓶中，加 蒸馏水定容至刻度，摇匀，此溶液为 50mg/L磷标准液，此溶液 不易久贮。
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测定方法
1. 称取通过20号筛的风干土样5克（精确到0.01克）置于250毫升 三角瓶中，加100ml 0.5mol/L NaHCO3溶液，再加一小角勺无磷 活性炭，塞紧瓶塞，在振荡器上震荡30分钟，立即用干燥漏斗和 无磷滤纸过滤，滤液承接于250毫升三角瓶中。 2. 吸取滤液10ml（含磷量高时取2.5~5毫升，同时应补加0.5mol/L NaHCO3至10毫升）于50ml容量瓶中，加7.5N硫酸钼锑抗混合显 色剂5ml，利用其中多余的硫酸来中和NaHCO3, 充分摇匀，等 CO2充分排出后加水定容至刻度，再充分摇匀（最后的硫酸浓度 为0.65N）。 3. 30分钟后用72型分光光度计比色（波长660微米），比色时须 同时做空白测定。 4. 磷标准曲线绘制：分别吸取5ppm磷标准溶液0、1、2、3、4、 5毫升于50毫升容量瓶中，每一容量瓶即为0、0.1、0.2、0.3、0.4 、0.5ppm磷，再逐个分别加入0.5mol/L NaHCO3 10ml和7.5N硫酸 —钼锑抗混合显色剂5ml，然后同待测液一样进行比色，在坐标 纸上以P mg/L为横坐标，吸光值为纵坐标绘制成标准曲线。
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结果计算
土壤速效磷
式中：
显色液P含量—从工作曲线查得的显色液P浓度，mg.L-1 显色液体积—本实验为50(ml)
P(mg.kg-1)
=
显色液P含量×显色液体积×分取倍数
风干土样质量
分取倍数—浸提总体积(ml)/吸取滤液体积(ml)，本实验为50/10=5
风干土样质量，g
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2. 无磷活性炭
将会活性炭先用1：1（V/V）的盐酸浸泡过夜，在布氏漏斗上 抽滤，用蒸馏水冲洗多次至无Cl-为止，在用0.5mol/L NaHCO3溶 液浸泡过夜，在布氏漏斗上抽滤，用蒸馏水洗尽 NaHCO3，检查 至无磷为止，烘干备用。
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实验试剂
3. 7.5mol/L硫酸钼锑抗贮存液
在 1000ml 烧杯中加入 400ml 蒸馏水，将烧杯浸在冷水中， 然后缓慢注入 208.3ml 浓硫酸（分析纯），并不断搅拌，冷却 至室温。另称取分析纯钼酸铵20g溶于60℃的150ml蒸馏水中， 冷却。再将硫酸溶液慢慢倒入钼酸铵溶液中，不断搅拌，最后 加入 1000ml0.5% 酒石酸锑钾溶液，用蒸馏水稀释至 1000ml ， 摇匀，贮存于棕色试剂瓶中，避光保存。
0.4 0.234
0.5 0.295
结果评价
土壤速效磷含量(mg.kg-1) 土壤供磷水平 < 10 低 10~20 中等 >20 高
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注意事项：
1. 活性炭一定要洗至无磷无氯反应，否则不能 使用。 2.加入显色剂后会产生气泡，易使液体溢出，造 成测定误差。须小心慢慢加入，同时充分摇动 ，等气体排出后再定容。否则气体影响比色结 果。 3. 显色温度对结果影响较大，要求的20－25℃ 条件下进行。
石灰性土壤中的速效磷，多以磷酸一钙和磷酸二钙 的状态存在，可用0.5mol/L的NaHCO3提取到溶液 中；用浸提出来的溶液（含磷）用钼锑抗混合显色 剂在常温下进行还原成为磷钼蓝，蓝色深浅在一定 浓度范围内与磷的含量成正比，因此，可用比色法 测定其含量。
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仪器和材料
分光光度计、振荡机、或光电比色计、天平（0.01g） 、三角瓶（250ml）、容量瓶（50ml）、漏斗、无磷滤 纸、移液管（10ml）。
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分光光度计
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振荡机
往复式
回旋式
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过滤
滤纸的叠百度文库 玻璃棒引流
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实验试剂
1. 0.5mol/L的NaHCO3（pH8.5）浸提液
称 取 化 学 纯 NaHCO3 42.0g 溶 于 800ml 蒸 馏 水 中 ， 以 4mol/L NaOH 溶液调节 pH 至 8.5 （用 pH 计测定），然后稀释至 1000ml ，保存在试剂瓶中。如果贮存期超过 1 个月，是用时应重 新调整pH。