单因素实验优秀论文设计实用模板

毕业论文（设计）

题目竹叶中多糖的提取方法研究

指导老师汪洪

专业班级食品营养与检测112 姓名戴晓鹏

学号 20117100203

2014年5月28日

摘要：本研究以竹叶为研究对象，通过单因素试验和正交试验观察了温度、时间、固液比、提取次数对多糖提取率的影响，比较了水提、超声波提取和微波提取三种提取方法对竹叶多糖得率的影响。结果表明，水提最佳浸提参数：温度80℃，时间90min，固液比1:25，浸提次数3次。超声波提取最佳浸提参数为：温度70℃，时间20min，固液比1:20，浸提次数3次。微波提取最佳浸提参数为：微波功率500W，固液比1:15，时间2min，浸提次数3次。最佳提取工艺方法是超声波提取，条件是温度70℃，时间20min，固液比1:20，浸提3次。

关键词：水提；超声波；微波；沉淀；提取次数

目录

引言 (1)

1材料与仪器 (2)

1.1实验材料 (2)

1.2实验试剂 (2)

1.3实验仪器 (2)

2 实验方法 (3)

2.1竹叶多糖提取工艺流程 (3)

2.2样品中多糖含量的测定 (3)

2.3浸提条件对多糖提取效果的影响 (4)

2.3.1单因素试验 (4)

2.3.2浸提工艺正交试验 (4)

2.3.3不同浸提方法的比较研究 (5)

2.4分析方法 (5)

3 结果与分析 (5)

3.1 单因素试验结果 (5)

3.1.1温度对多糖得率的影响 (5)

3.1.2时间对多糖得率的影响 (6)

3.1.3固液比对多糖得率的影响 (6)

3.1.4提取次数对多糖得率的影响 (7)

3.1.5乙醇浓度对多糖得率的影响 (8)

3.2正交试验 (9)

3.2.1水提工艺正交试验效果 (9)

3.2.2超声波提取工艺正交试验结果 (10)

3.2.3微波提取工艺正交试验效果 (11)

3.3竹叶多糖不同提取方法的比较效果 (12)

结论 (12)

参考文献 (13)

引言

多糖又称多聚糖(polysaccharide)，由单糖聚合而成，是聚合度大于10的极多性复杂大分子，分子量一般为数万，数十万到数百万，也有报道甚至达上千万,是生物体内普遍存在的一大类生物大分子[1]。多糖按其来源不同，可分为真菌多糖、植物多糖、动物多糖、藻类地衣多糖、细菌多糖等5大类。现代研究表明多糖具有促进机体免疫力、抗菌、抗病毒、抗寄生虫、抗肿瘤、抗辐射、抗衰老、抗炎、降低血脂以及改善动物生产性能等一系列作用，其中多糖的主要功能是免疫调节，因此又叫免疫活性多糖[2]。20世纪90年代后，多糖及其复合物的分离纯化、组分测定和结构分析有了长足进步，同时由于细胞生物学和分子生物学的发展，研究发现了糖类化合物特别是糖复合物上的糖链参与了各种生命现象的调节，如细胞识别、粘连与融合、信号传达、免疫与应答、细胞转化和分化等都离不开糖链的参与[3]。由于糖复合物的种种功效，其研究也成为生命科学研究领域的新热点,具有重要的开发潜力和广阔的开发前景。

竹子是禾本科( Gram ineae ) 竹亚科(Bambusoideae)多年生常绿植物, 有着复杂的次生代谢。因竹叶含有许多对人体具有重要作用的活性物质, 所以竹叶在中国具有悠久的食用和药用历史, 《本草求真》、《本草逢原》等古代医学著作均有大量记载。据记载, 竹叶性淡、微涩、寒, 味甘、苦, 具有清热利尿, 明目解毒及止血的功能。主治烦热口渴, 小儿发热, 小儿疳积, 热病不眠, 口舌生疮, 目赤肿痛, 疥癣, 疮毒, 咽喉炎, 外伤出血等症[4]。20 世纪80 年代, 就有从竹叶中提取食品防腐剂、杀菌剂和叶绿素等研究报道。近年来有学者在竹叶提取物中又发现了其他对人体有益的活性物质, 包括黄酮类化合物、酚酸类化合物、生物碱、生物活性多糖、氨基酸肽类、蒽醌类、萜类内酯等 , 人们对竹叶提取物中黄酮类化合物的存在及其生物活性、生物活性多糖等有效成分比较关注, 了解竹叶提取物的有效成分及其应用现状对合理利用与开发竹产业具有重要意义[5]。多糖具有多种生物活性,某些多糖不但具有抗癌、抗病毒、抗衰老等作用,还是理想的免疫增强剂。因此,关于多糖的研究具有十分重要的意义。但是竹叶中的多糖的提取受很多因素的影响，本文就是根据温度、时间、固液比对多糖的提取率影响做了一些研究。

1材料与仪器

1.1实验材料

样品为3-5片毛竹（采于台州天台），分别从毛竹冠的上、中、下部采集，混合后洗净，低温烘干，粉碎后贮于磨口瓶中备用。

1.2实验试剂

95%乙醇（工业酒精），乙醚、丙酮、苯酚、浓硫酸等均为分析纯试剂，购于公司。水为蒸馏水。

1.3实验仪器

磁力搅拌器（上海维菱科学仪器有限公司）；

分光光度计（752N上海精密科学仪器有限公司）；

分析天平（SPS202F梅特勒-托利多称重设备系统有限公司）；

冷冻干燥仪（1-2LD德国ALPHA公司）；

超声波清洗器（KQ-500DA昆山市超声仪器有限公司）；

粉碎机（河北齐家务科仪厂）；

旋转蒸发仪（RE-52AA上海亚荣生化仪器厂）；

微波炉（WP800格兰仕）；

电热恒温鼓风干燥箱 (DHG一9246A上海精宏试验设备有限公司)；

高速离心机(DL-5型上海安亭科学仪器厂)；

高效外循环浓缩设备（SJN，天津隆业设备厂）；

2 实验方法

2.1竹叶多糖提取工艺流程

图2.1竹叶多糖提取工艺流程

2.2样品中多糖含量的测定

准确称取竹叶磨碎样5.0 g加100 mL蒸馏水提取，提取液减压浓缩到10 mL，加4倍于浓缩液体积的95％乙醇沉淀12～24 h，4000 r/min离心，取沉淀，定容到250 mL，取0.5mL用硫酸---苯酚法测定多糖含量，按公式计算多糖得率。

多糖得率(％)=C×V/W×100％

c：根据吸光度值由回归方程计算的多糖浓度值

v：多糖溶液体积

w：竹叶样品千重.