实验五、血清总脂测定-香草醛法
生物化学实验指导
第一部分生物化学与分子生物学概论本部分的内容为生物化学实验中所涉及的主要原理。
介绍如何正确记录实验过程及书写实验报告的一般规则，是训练学生进行正规实验寻林的重要内容。
普通实验技术包括玻璃仪器的洗涤，洗液的配制，吸量管的使用、混匀的方法以及过滤、离心等一般实验室技术。
实验样品的制备着重讨论在生物化学实验中，血液、尿液样品及组织材料的采集和处理，匀浆制备和组织浸出液制备。
离心分离技术、电泳原理、分光分析、层析分离技术，重点讨论这些重要技术的原理，内容则尽可能简洁扼要，作为具体实验内容的参考。
一.实验记录和实验报告的书写实验是在理论指导下的科学实践，目的在于经过实践掌握科学观察的基本方法和技能，培养学生科学思维、分析判断和解决实际问题的能力。
也是培养探求真知、尊重科学事实和真理的学风，培养科学态度的重要环节。
（一）实验记录记录实验中观察到的现象、结果和数据，及时地记录在激烈路本上。
原始数据必须准确简练、详尽、清楚。
记录时不能夹杂主观因素，在定量实验中观测的数据，如称量物的重量、滴定管的读数、光密度值等，都应设计一定的表格，依据仪器的精确度记录有效数字。
完整的实验记录包括实验日期、实验题目、目的、操作、结果。
（二）实验报告实验结束后，应及时整理和总结实验结果及记录，按照下列顺序写出实验报告：1.实验名称（The title of experiment ）：2.目的（Objective）：3.原理（Principle）：最好使用简式。
4.操作步骤（Operational procedure）：5.实验记录6.计算与结果（Calculation and Results）：7.讨论（Discussion）：对实验方法，实验结果和异常现象进行探讨和评论，以及对于实验设计的认识、体会和建议。
二、普通实验技术（一）玻璃仪器的洗涤与清洁玻璃仪器的洗涤与清洁直接影响实验结果的准确性，因此玻璃仪器的洗涤工作是很重要的。
1.新购置玻璃仪器的清洗新购置来的玻璃仪器表面附着有游离碱质，应先用肥皂水洗刷后再用流水冲洗，浸泡于I－2％HCl中过夜，取出后再用流水冲洗，最后用蒸馏水冲洗2－3次，在干燥箱中烤干或自然晾干，备用。
血清胆固醇的定量测定
六、计算
100ml血清中胆固醇的质量（mg） A 1C 0 m= ÷0.04×100 A0
注意事项：
1、颜色反应与加磷硫铁试剂混合时的产热 程度有关，因此，所用试管口径和厚度要 一致；加磷硫铁试剂必须与乙醇分成两层， 然后混合，不能边加边摇，否则显色不完 全；磷硫铁试剂要加一管混合一管，混合 的手法、程度也要一致；混合时试管发热， 注意勿使试管内液体溅出，以免损伤衣服、 皮肤和眼睛。
管号/试剂 无水乙醇 胆固醇标准液
乙醇抽提液 磷硫铁试剂 A560
空白管 1.0ml
标准管
测定管
1.0ml
1.0ml 1.0ml 1.0ml 1.0ml
注：磷硫铁试剂须沿管壁缓缓加入，
与乙醇液分成两层，立即迅速振 摇20次，放置10分钟（冷却至室
温）后，于560nm进行比色，以
空白管调零读取各管吸光度。
移液枪的养护及注意事项
1.当移液器吸嘴有液体时切勿将移液器水 平或倒置放置，以防液体流入活塞室腐蚀 移液器活塞。 2.移液器使用完毕后，把移液器量程调至 最大值，且将移液器垂直放置在移液器架 上。 3.如液体不小心进入活塞室应及时清除污 染物。
4.平时检查是否漏液的方法：吸液后在液 体中停1- -3 秒观察吸头内液面是否下降； 如果液面下降首先检查吸头是否有问题， 如有问题更换吸头，更换吸头后液面仍下 降说明活塞组件有问题，应找专业维修人 员修理。
2、所用试管和比色杯均须干燥，浓硫 酸的质量很重要，放置日久，往往因 为吸收水分，而使颜色反应降低。 3、空白管应接近无色，如带橙黄色， 表示乙醇不纯，应用去醛处理。
移液枪的使用
吸嘴的安装
散装吸嘴安装
盒装吸嘴安装
注意事项
血清总胆固醇测定
/100毫升。
血液中胆固醇含量过高，表示胆固醇代谢 可能发生障碍。冠状动脉粥样硬化患者的血 清胆固醇含量往往偏高。因此临床化验上测
定血清胆固醇含量将有助于诊断某些疾病。
人体胆固醇来自食物及体内合成两个途径。 1. 2/3由肝脏制造出
2.其余的1/3来自食物，尤以肥肉﹑内脏、
蛋黄含量较高。
机体的胆固醇以两种形式存在:
（三）实验反应原理
胆固醇及其酯在硫酸作用下与邻苯二甲
醛产生紫红色物质，此物质在550nm波长处有
最大吸收。因此，可用比色法作总胆固醇的
定量测定。
胆固醇含量在400mg/100mL以内时，与光
吸收值呈良好线性关系。
三、实验步骤 1、制作标准曲线
2、样品测定,人血清(已经稀释，直接使用)
四、注意事项
高密度脂蛋白扮演清道夫角色，它将周边组织 多余的胆固醇送回肝脏，排出体外，达到抗血管硬 化的目的。它还有维护血管内皮细胞功能，及保护 血管免于血栓的形成。高密度脂蛋白增加，动脉壁 被胆固醇囤积的机会就减少。因此它是“好的胆固 醇”。
（二）血液 组成：血细胞（有形体） 血浆（包含血清及纤维蛋白原） 血浆是血液的重要组成分，呈淡黄色液体， 水分占90～92％，溶质以血浆蛋白为主 。 血浆总胆固醇的1/3以游离形式存在，2/3为 与脂肪酸结合之胆固醇酯。
实验五
人血清总胆固醇的测定 ----化学比色法
一、实验目的
1.了解胆固醇 2.学习胆固醇测定的原理和方法
二、实验原理
（一） 胆固醇cholesterol
是一种环戊烷多氢菲的衍生物。早在18世 纪人们已从胆石中发现了胆固醇，它广泛存在 于动物体内，尤以脑及神经组织中最为丰富， 在肾、脾、皮肤、肝和胆汁中含量也高。其溶 解性与脂肪类似，不溶于水，易溶于乙醚、氯
血胆固醇实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的本次实验旨在通过血液检测，了解受试者的血胆固醇水平，分析其胆固醇组成，并探讨血胆固醇水平与个体健康状况之间的关系。
二、实验原理胆固醇是人体内一种重要的脂质，分为高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）两种。
HDL-C被称作“好胆固醇”，对心血管有保护作用；而LDL-C被称作“坏胆固醇”，长期偏高会增加心血管疾病的风险。
本次实验采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定受试者的血胆固醇水平。
三、实验材料1. 试剂：胆固醇测定试剂盒（ELISA法）、标准品、酶联反应板、洗涤液、底物、终止液、显色剂等。
2. 仪器：酶标仪、移液器、微量加样器、振荡器等。
3. 样品：受试者空腹静脉血。
四、实验方法1. 样品处理：将受试者空腹静脉血采集后，按照试剂盒说明书要求，分离血清。
2. 标准曲线绘制：将标准品按照试剂盒说明书要求，依次加入酶联反应板孔中，加入底物，避光反应一定时间后，加入终止液，在酶标仪上测定吸光度（OD值），以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘制标准曲线。
3. 样品测定：将受试者血清按照试剂盒说明书要求，依次加入酶联反应板孔中，加入底物，避光反应一定时间后，加入终止液，在酶标仪上测定OD值。
4. 结果计算：根据标准曲线，计算受试者的血胆固醇水平。
五、实验结果1. 标准曲线：以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘制标准曲线，线性回归方程为：Y=0.065X-0.013，相关系数R²=0.998。
2. 受试者血胆固醇水平：受试者A的血胆固醇水平为5.2mmol/L，其中HDL-C为1.5mmol/L，LDL-C为3.7mmol/L；受试者B的血胆固醇水平为6.8mmol/L，其中HDL-C为1.8mmol/L，LDL-C为5.0mmol/L。
六、分析与讨论1. 实验结果显示，受试者A的血胆固醇水平为5.2mmol/L，属于正常范围；受试者B的血胆固醇水平为6.8mmol/L，属于偏高范围。
动物生物化学实验教程正式
动物生物化学实验教程正式实验一血清蛋白质含量测定牛血清蛋白：BSA。
血浆：指血液的液体成分，淡黄色（因含胆红素）。
含白蛋白、球蛋白、纤维蛋白原。
血液经抗凝处理、离心沉淀后，获得的液体部分。
血清：血液凝固后，释出的液体。
不含纤维蛋白原及游离钙离子。
蛋白质定量分析是动物生物化学和其他生命科学研究中经常用到的实验项目。
蛋白质是生物体内最为重要的生物大分子之一，其种类繁多、结构多样、功能各异，而且分子量相差很大，所以很难建立一个理想而通用的蛋白质定量分析方法。
目前测定蛋白质含量的方法很多，常用的测定方法有Folin—酚法（Lowry法）、紫外吸收法、凯氏定氮法、考马斯亮蓝染料结合法等，每种方法在实践中都有其优点和局限性。
本实验采用考马斯亮蓝染料结合法（Bradford法）。
(灵敏度最高)一、实验目的1．掌握分光光度法测定的原理，分光光度计的结构和基本操作要点（光源-单色器-样品室-检测器-显示器）2．掌握考马斯亮蓝染料结合法测定蛋白质含量的原理和操作方法3．掌握微量移液器的使用方法4．了解蛋白质含量测定中标准曲线的制作方法二、实验原理染料考马斯亮蓝G-250（R250，结合后可以解离）在游离状态下呈红色，最大吸收峰为465nm。
它能与蛋白质的疏水微区结合，形成蓝色复合物，该复合物的最大吸收峰为595nm，在一定浓度范围内（为什么在一定范围内），其吸光度值与蛋白质含量成正比，故可用于蛋白质含量的测定。
三、实验操作步骤表1-1考马斯亮蓝染料结合法测定蛋白质含量试管号稀释的血清样品（mL）0.9%NaCl溶液（mL）考马斯亮蓝G-250溶液（mL）空白管-0.15样品管0.1-5室温静置5min，于波长595nm处，以空白管调“0”，测定样品管的吸光度值，查标准曲线，吸光度测定值所对应的蛋白质浓度就是稀释样品的蛋白质含量，然后乘以血清的稀释倍数（10倍），可得血清中蛋白质的含量。
四、实验试剂1．考马斯亮蓝G-250溶液（0.01%）：称取考马斯亮蓝G-250100mg，溶于50mL95%乙醇中，再加入100mL85%(W/V)浓磷酸，然后用蒸馏水定容至1000mL，置棕色瓶过夜（如有不容物，可用二层滤纸过滤）。
总酯的测定及方法
总酯的测定及方法（指示剂法）1.原理：用碱中和样品中的游离酸，在准确加入一定量的碱，加热回流使酯类皂化。
通过消耗碱的量计算出总酯的含量。
2.仪器与设备：2.1.全玻璃蒸馏器：500mL2.2全玻璃回流装置：回流瓶1000mL、250mL(冷凝管不短于45cm）2.3碱式滴定管：25mL或50mL2.4.酸式滴定管：25mL或50mL3.试剂和溶液：3.1.氢氧化钠标准滴定溶液【c（NaOH）=0.1mol/L】按GB/T601配置与标定.3.2.氢氧化钠标准溶液【c（NaOH）=3.5mol/L】按GB/T601配置.1H2SO4)=0.1mol/L】按GB/T6013.3.硫酸标准滴定溶液【c(2配置与标定.3.4.乙醇（无酯）溶液【40%（体积分数）】：量取95%的乙醇600mL，于1000mL的回流瓶中，加3.5mol/L的氢氧化钠标准溶液5mL，加热回流皂化1h（小时）。
然后移入蒸馏器中重蒸至不冒气为准，再配成40%（体积分数）乙醇溶液。
简明概括：量取95%的乙醇125mL(600mL÷5)于250mL的回流瓶（三角瓶或锥形瓶）中，加浓度为0.1mol/L的氢氧化钠标准溶液35mL ，加热回流皂化1h（小时）。
然后移入蒸馏器中（也可用酒精灯和电热炉代替）重蒸至不冒气为准，再配成40%（体积分数）乙醇溶液。
【40%无酯乙醇溶液的配制方法：（把95%的乙醇回流皂化后再重蒸，为的是达到100%的乙醇）用移液管抽取100%的乙醇40mL,放入容量瓶或量杯中，加蒸馏水定容至100mL即成40%的无酯乙醇溶液。
定容至就是无酯乙醇和蒸馏水总共为100mL】3.5酚酞指示剂（10g/L）：按GB/T603配制.4.分析步骤：4.1.清洗：先把玻璃仪器洗净，洗净方法：先用洗洁精洗一次，再用自来水洗三次，最后用蒸馏水洗三次。
4.2.加溶液：把碱式滴定管加氢氧化钠标准滴定溶液至0.00刻度，夹到滴定台上。
总醛含量的测定
总醛含量的测定
总醛含量是指一种化学物质在一个样品中的总量。
常用的总醛含量测定方法包括：
1. DNPH法：将样品与2,4-二硝基苯肼(DNPH)反应，生成黄色的衍生物，在紫外光下可测定其吸光度，从而计算出总醛含量。
2. 直接滴定法：将含有水杨酸的试剂溶液滴加到醛样品中，醛试剂求和过量（1.1倍）后，用二氧化硫溶液中和。
测定醛试剂消耗量，能够反映出总醛含量。
3. 色度法：将样品与碘化钾和非那甘汞(MN)反应，在紫外光下测定其吸光度，计算出总醛含量。
4. 其他方法：包括高效液相色谱法、气相色谱法等。
这些方法具有灵敏度高、准确性高、操作简便等优点。
但对于需要随时进行快速检测的应用场合，DNPH法和其他快速定量法更加合适。
血清胆固醇实验报告
一、实验目的1. 熟悉血清胆固醇测定的原理和方法。
2. 掌握血清胆固醇测定的操作步骤。
3. 了解血清胆固醇与人体健康的关系。
二、实验原理血清胆固醇是血液中所有脂蛋白所含胆固醇之总和，包括游离胆固醇和胆固醇酯。
血清胆固醇的测定对于预防、诊断和治疗心血管疾病具有重要意义。
本实验采用氧化酶法测定血清胆固醇含量。
氧化酶法测定血清胆固醇的原理是：胆固醇在氧化酶的作用下，与氧化剂反应生成过氧化氢，过氧化氢再与邻苯二胺反应，生成有色产物。
有色产物的颜色深浅与血清中胆固醇含量成正比，通过比色法测定吸光度，即可计算出血清胆固醇含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 血清标本- 胆固醇氧化酶试剂- 邻苯二胺试剂- 空白试剂- 标准胆固醇溶液- 比色皿- 比色计2. 实验仪器：- 移液器- 离心机- 恒温水浴锅四、实验步骤1. 标准曲线绘制：- 将标准胆固醇溶液用蒸馏水稀释成不同浓度（如：0、1、2、3、4、5mg/dL）。
- 每个浓度分别加入胆固醇氧化酶试剂、邻苯二胺试剂和空白试剂，充分混匀。
- 将混合液放入恒温水浴锅中，反应一定时间（如：30分钟）。
- 用比色计测定吸光度，以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 样品测定：- 将血清标本用蒸馏水稀释成一定浓度。
- 按照标准曲线绘制步骤，进行操作。
- 测定吸光度，根据标准曲线计算血清胆固醇含量。
3. 结果分析：- 对实验数据进行统计分析，得出血清胆固醇含量的平均值、标准差和变异系数。
- 分析实验误差来源，提出改进措施。
五、实验结果1. 标准曲线绘制结果：- 绘制标准曲线，线性相关系数R²为0.998，表明实验结果可靠。
2. 样品测定结果：- 血清胆固醇含量测定结果为（X±SD）mmol/L，其中X为血清胆固醇含量，SD 为标准差。
3. 结果分析：- 通过统计分析，得出本次实验的血清胆固醇含量与参考值（正常范围为2.86-5.17mmol/L）进行比较，判断是否处于正常范围。
血清总胆固醇测定new
二.
实验原理
根据物质对光的吸收特征和吸收强度，对物质进行 定性和定量的分析方法，称为分光光度法 (spectrophotometry)。该法具有一定的灵敏度和准确 度，分析方法简便快速，仪器设备也不复杂，故应 用很广。 原理：在一定范围内，吸光度(OD,A)与光程（液层 厚度，b）和溶液浓度(c)的乘积成正比，称为朗 伯—比尔定律(Lambert-Beer law)，简称比尔定律， 即光的吸收定律。 A=OD=-lgT=-lg(I/Io)=abc
注意
本实验所用的混合酸均为浓酸，使用中一定要注 意安全。 测定时比色杯中溶液体积不能超过高度的2/3。 不能将测定的反应液洒入分光光度计内。若有洒 落到桌凳仪器上需立即擦除，以免发生伤害 胆固醇、醋酸；混合酸分别用0.5mL、5mL干洁的 刻度吸管量取，不要混用。邻苯二甲醛、血清用 移液器量取。
实 验 五
血清总胆固醇的测定 （邻苯二甲醛法）
生命科学学院 杨章民
yzhangmin@
一、实验目的
学习分光光度计的原理及操作
学习用分光光度法测定血清总胆固醇
含量及标准曲线的制作
血浆内胆固醇的酯化
卵磷脂
溶血卵磷脂
胆固醇 卵磷脂胆固醇 脂酰转移酶 （LCAT）
胆固醇酯
Lecithin-cholesterol Acyl transferase (LCAT)
吸光系数的大小，取决于物质(溶质、溶剂)的本性和光的波 长。 1. 物质不同，则吸光系数不同，所以吸光系数可作为物质的特 性常数。在分光光度法中，常用摩尔吸光系数ε来衡量显色 反应的灵敏度，ε值越大，灵敏度越高。 2. 溶剂不同，其吸光系数亦不同， 3. 光的波长不同，其吸光系数亦不同。如将不同波长的单色光 依次通过被分析物质，分别测得吸光度，然后绘制吸光度— 波长曲线，称为吸收曲线(absorption curve)，吸收曲线上有 极大值(Max)的部分，称为吸收峰。吸收峰所对应的波长， 称为最大吸收波长，以符号λmax表示 ，这是物质定性的依 据之一。 4.单色光的纯度也影响吸光系数。单色光越纯，即经单色器分 光后的波长范围越窄，其吸光系数越大。
实验报告(成品白酒总酸,总酯,总醛的测定)
生产实习报告（化学分析）班级应用化学132班姓名林可学号************指导老师申屠超/蒋益花浙江树人大学生物与环境工程学院2015年7月9日成品白酒的分析一. 实验目的1.掌握白酒中总酸、总酯、总醛的测定原理和方法。
2.练习酸碱标准溶液的配制和浓度的滴定。
3.熟练掌握碱式滴定管的操作，掌握中和法的滴定，熟悉酚酞指示剂的使用和终点方法。
二．实验原理（总酸）白酒中的总酸包括甲酸、乙酸、丁酸等脂肪和乳酸等。
酸类是构成脂类的成分之一，它不仅是酒的呈味物质，而且酸对产品的质量关系甚大，酸量过大会使酒发酸、发涩，用化学分析法测得的白酒为白酒中的总酸，常以乙酸计，以酚酞为指示剂，采用标定的氢氧化钠进行直接中和滴定，其反应式为RCOOH + NaOH ── RCOONa + H2O总酸的计算公式为：总酸= [C NaOH·V NaOH·MCH3COOH/50000] ×100（总脂）用标准氢氧化钠溶液中和白酒中的游离酸，再加入一定量的标准氢氧化钠溶液使酯皂化，过量的氢氧化钠溶液再用标准的硫酸溶液进行返滴定，依据反应所消耗的标准硫酸溶液的体积，计算出总酯含量。
第一次加入氢氧化钠标准滴定溶液是中和样品中的游离酸：RCOOH + NaOH → RCOONa + H2O第二次加入氢氧化钠标准滴定溶液是与样品中的酯起皂化反应：RCOOR′+ NaOH → RCOO Na + R′OH加入硫酸标准滴定溶液是中和皂化反应完全后剩余的碱：H2SO4 + 2 NaOH →Na2SO4 +2H2O总酯的计算公式为：总酯（g/100ml）=[(C NaOH×25.00-CHClVHCl) ×M乙酸乙酯/50000] ×100（总醛）白酒中的醛类包括甲醛、乙醛、糖醛等。
醛类毒性较大，但适量的醛类对酒的香味起到一定作用。
甲醛、乙醛沸点比乙醇低，故去掉酒头能出去大部分醛类。
生化实验讲义(10个)教学内容
生物化学实验讲义赵国芬2010年9月实验之前说明1.各班学习委员将成员分成10个大组,每个大组中2人一小组,大组采用循环实验的方法,同时开出不同的10个实验.2.共开出10个不同的实验实验一温度、pH及酶的激活剂、抑制剂对酶活性的影响实验二牛奶中蛋白质的提取与鉴定实验三血液葡萄糖的测定-福林（Folin）-吴宪氏法实验四双缩脲测定蛋白质的含量实验五血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳实验六植物组织中还原糖和总糖的含量测定实验七应用纸层析法鉴定动物组织中转氨基作用实验八植物组织中维生素C的定量测定实验九琥珀酸脱氢酶的作用及其竞争性抑制的观察实验十植物组织中DNA的提取和鉴定3.穿着要利索,做好实验记录4.注意实验室卫生和安全.一. 实验室规则:按照实验室的规则给学生讲解.二. 生物化学所用的实验技术1.样品: :血液、血浆、血清、组织植物样品：果实、花蕾、茎等无论用什么做材料，为了提取物质，需匀浆2．移液管的使用：移液管吸管移液管奥氏吸管读数时视线与凹面相平，取液时要用吸管嘴吸，放出液体时注意嘴部液体的残留问题。
3．离心机的使用：平衡（管平衡、机器平衡）缓起和慢停4．分光光度计机器原理和测定原理（比尔定律）5．水浴锅的使用三、实验报告的书写（用教务处统一印刷的报告纸写）目的、原理、仪器、药品、步骤、结果及结论、讨论实验一、温度、pH及酶的激活剂、抑制剂对酶活性的影响一、实验目的通过本实验了解酶催化的特异性以及pH、温度、抑制剂和激活剂对酶活力的影响，对于进一步掌握代谢反应及其调控机理具有十分重要的意义。
二、实验原理酶的化学本质是蛋白质。
凡是能够引起蛋白质变性的因素，都可以使酶丧失活性。
此外，温度、pH和抑制剂、激活剂对酶的活性都有显著的影响。
酶的活性通常是用测定酶作用底物在酶作用前后的变化来进行观察的。
本实验用唾液淀粉酶作用的底物—淀粉，被唾液淀粉酶分解成各种糊精、麦芽糖等水解产物的变化来观察该酶在各种环境条件下的活性。
实验十七血清总胆固醇测定（CHODPAP终点法）45
实验十七血清总胆固醇测定（CHOD PAP终点法）一、实验目的与要求1 了解血清总胆固醇（cholesterol）测定在人体营养学上的意义及其生理学上的重要性。
2 掌握血清总胆固醇测定方法及721型分光光度计或半自动生化多用仪的使用方法和现代生化检测试剂盒的应用。
二、实验原理胆固醇 + H2O胆固醇酯酶游离胆固醇 + 脂肪酸游离胆固醇+O2胆固醇酯酶Δ4胆甾烯酮+H2O2H2O2+4氨基安替吡啉+酚过氧化物酶红色醌亚胺 + H2O红色醌亚胺在波长505nm处有最大吸收峰,颜色深浅与标本中总胆固醇含量成正比。
三、实验仪器与试剂1 仪器（1） AT648半自动生化分析仪1台；（2）四孔恒温水浴锅1个；（3）振动摇床1台。
2 分组及仪器2人一组，每组仪器包括：（1）试管架1个；（2） 2ml试管10个；（3） 10μl微量加样器1个；（4） 1ml移液管1个；（5） 2ml移液管2个；（6）吸耳球1个；（7）搪瓷盘1个；（8）微量加样滴头；（9）吸水纸。
3 本试剂盒内含3种试剂：（1）酶试剂10ml×2瓶包括： 4AAP 2mmol/L胆固醇酯酶≥1500U/L胆固醇氧化酶≥1500U/L过氧化物酶≥3000U/L缓冲液 50mmol/L保护剂、稳定剂适量（2）稀释液 80ml×1瓶包括：缓冲液 50mmol/L酚 3.889mmol/L胆酸盐、乳化剂适量（3）胆固醇标准液 2ml×1瓶［5.17mmol/L(200mg/dl)］四、实验步骤1 配制酶工作液将酶试剂和稀释液按1∶4混合而成（4℃冰箱中可保存1周）。
2 于一系列试管中，按下表加入各溶液：表171系列反应管中各管所加溶液空白管标准管测定管蒸馏水（μl）10——标准液（μl）—10—血清（μl）——10酶工作液（ml）1.01.01.03 混合，置37℃水浴保温15min。
4 于波长510nm处以空白校零，读取各管吸光度（A）。
new-实验五 血液生化指标的测定
A测 A标
× C标 (5.55mM)
G (mg/dl) = m mol/L × 18
(五)结果与分析（Results and Analysis）：
[参考值] 血清/血浆：血糖 4.22-6.11mmol/L
76-110mg/dl
(六) 思考题(Questions)： 1.血糖的来源和去路有哪些？
四 操作步骤（Operating Procedure）
１. T-Ch管制备：
5ml离心管+ 血清及蒸馏水各0.2ml
加抽提液2.0ml
充分振摇5min
3500r/min离心3min 吸取上清液入新的5ml离心管
２.取长试管３支，按下表操作：
加入物(ml) 蒸馏水 抽提剂 Ch标准液(0.2mg/ml) T-Ch上清液 显色剂 浓硫酸 空白管 0.1 0.5 － － 标准管 0.1 － 0.5 － 各加2.0混匀 各加2.0 T-Ch管 － － － 0.6
制作：柳爱华
实验五
血液生化指标的测定
一、葡萄糖（Glu）
——GOD-POD法测定血糖
(一）实验目的（Experimental Objectives）
1. 掌握利用分光分析技术测定血液 中葡萄糖的基本原理和方法
2. 了解血液中葡萄糖测定的临床意义
（二) 实验原理
葡萄糖氧化酶 GOD 氧化
(Experimental Principles)
G
葡萄糖酸 + H2O2
H2O + O2 POD 过氧化物酶
4-氨基安替比林 + 酚
(4-AAP)
偶联缩合
醌类化合物
（粉红色）
在一定范围内，红色醌类化合物 的生成量与葡萄糖含量成正比
《生物化学检验》课程教学大纲
《生物化学检验》课程教学大纲课程名称：生物化学检验英文名称：Biochemistry test课程类型：专业课总学时：132学时理论课学时：60学时实验学时：72学时适用对象：医学检验专业课程简介：《生物化学检验》是以健康和疾病时的生物化学过程为研究目的，通过测定组织、体液的成分，揭示疾病变化和药物治疗对机体生物化学过程和组织、体液成分的影响，以提供疾病诊断、病情监测、药物疗效、预后判断和疾病预防有用信息的一门学科。
是医学检验专业的一门专业课程。
通过学习使学生获得医学检验专业高素质的高职高专人才所必需的生物化学检验技术的基本知识和基本技能，为毕业后能在各级各类医疗卫生机构、防疫机构、医学科研等单位从事生化检验工作奠定必要的基础。
一、课程教学目的和任务使学生具备医学检验专业高素质的高职高专人才所必需的生物化学检验技术的基本知识和基本技能，具有一定的自学能力和运用知识分析问题、解决问题的能力。
二、教学基本要求在学习本课程前，学生必须具备化学、生物学、生理学、生物化学的基础知识。
生物化学检验是一门实践性很强的课程，只有理论与实践有机地结合，才是一门完整的课程，理论与实验同步进行。
理论学时数与实验学时数之比为1﹕1.2。
三、教学内容及要求理论教学（一）绪论1. 目的与要求【掌握】生物化学检验的任务。
【熟悉】生物化学检验的研究领域。
【了解】生物化学检验的发展。
2. 内容要点生物化学发展简史、研究内容及与医学的关系。
（二）生物化学检验实验室基本知识1. 目的与要求【掌握】分析试剂的选择与保存；实验方法的分级、标准品分级；实验误差的定义、分类和表示方法；方法评价实验（回收试验和干扰试验）的原理；诊断性能评价的指标。
【熟悉】熟悉纯水的制备方法；实验方法选择的原则和步骤；方法评价的基本内容和步骤；方法评价的指标；参考值和医学决定水平的概念。
【了解】水的纯度检查；方法性能判断的指标；受试者工作曲线的应用和用途。
2. 内容要点实验用纯水的制备和纯度检查；分析试剂的选择、保存及实验试剂的配制；实验方法、标准试剂的分级，实验方法选择的原则和步骤；实验误差的定义、分类和表示方法，方法评价指标与评价实验；诊断性能评价的指标（三）光谱分析技术1. 目的与要求【掌握】光吸收定律；比色分析的基本原理及定性和定量方法。
香草醛_硫酸法测定柿子单宁含量条件的优化_杨依姗
柿子单宁主要为缩合单宁，其分子量在 1 万～ 1.5 万，主要由儿茶素、儿茶素-3-棓酸、棓儿茶 素和棓儿茶素-3-棓酸 4 种单体通过 C-4、C-6 或 C-8 位相连接聚合而成[1]。由于柿子单宁具有抑制
(College of Food Science & Technology, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070)
Abstract: Vanillin assay was carried out in H2SO4 medium to determine the content of condensed tannin in
0.8
0.6
0.4
0.2
0
0
1
2
3
4
5
6
硫酸浓度/(mol/L)
2 结果与分析
2.1 测定波长的确定
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2010 年 第 35 卷 第 12 期
食品科技
FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY
食品安全与检测
一般而言，原花青素可与香草醛反应生成红 色的络合物，其最大吸收波长一般位于 490～510 nm 之间。但不同结构的单宁与香草醛反应的动力 学及形成产物结构不同，因此产物的最大吸收波 长也不尽相同。为了确定比色的最大吸收波长， 本文对柿子单宁与香草醛的反应液进行了紫外可 见光区扫描，结果如图 1 所示。
作者简介： 杨依姗(1986—)，女，硕士研究生，研究方向为食品营养与安全。
香草醇制备实验报告
一、实验目的1. 学习香草醇的制备方法。
2. 掌握有机合成实验的基本操作。
3. 了解香草醛与甲醇在催化剂作用下制备香草醇的反应原理。
二、实验原理香草醇（4-羟基-3-甲基丁-2-酮）是一种具有香味的有机化合物，广泛应用于食品、医药、化妆品等领域。
香草醇的制备方法主要有两种：一种是香草醛与甲醇在酸性催化剂作用下进行酯化反应；另一种是香草醛与金属钠在醇溶液中反应。
本实验采用第一种方法进行香草醇的制备。
反应方程式如下：C6H5CHO + CH3OH → C6H5COOCH3 + H2OC6H5COOCH3 + Na → C6H5COONa + CH4C6H5COONa + CH3OH → C6H5CH(OCH3)2 + NaOH三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 香草醛（分析纯）- 甲醇（分析纯）- 醋酸（分析纯）- 碱性氧化铝- 无水硫酸钠- 碘量瓶- 铁架台- 圆底烧瓶- 烧杯- 滴定管- 滴定台- 移液管- 滤纸- 蒸馏装置2. 实验仪器：四、实验步骤1. 准备香草醛与甲醇的混合溶液：- 称取一定量的香草醛，溶解于甲醇中，配制成一定浓度的溶液。
2. 添加催化剂：- 在圆底烧瓶中加入适量的碱性氧化铝，搅拌均匀。
3. 加热反应：- 将香草醛与甲醇的混合溶液加入圆底烧瓶中，加热至回流，保持反应一定时间。
4. 冷却、过滤：- 反应结束后，冷却至室温，过滤掉固体催化剂。
5. 滴定分析：- 使用滴定管滴定一定量的溶液，测定香草醇的含量。
6. 蒸馏纯化：- 将香草醇溶液进行蒸馏，收集蒸馏液。
7. 干燥、称量：- 将蒸馏液用无水硫酸钠干燥，称量所得香草醇的纯度。
五、实验结果与分析1. 实验结果：- 香草醇的纯度：95.2%2. 结果分析：- 本实验通过香草醛与甲醇在酸性催化剂作用下制备香草醇，得到的香草醇纯度较高，符合实验要求。
六、实验总结1. 本实验成功制备了香草醇，掌握了有机合成实验的基本操作。
2. 通过本实验，加深了对香草醇制备原理的理解。
磷酸香草醛法测定不同培养条件下四尾栅藻(Scenedesmusobliquus)总脂含量
定结果准确可靠， 可以用于栅 藻的总脂含量测定。磷 酸香草醛反应的显 色强度可能与脂肪 酸的饱
和度有关 ， 为保障该方法测定总脂含量的准确性， 用该方法估算总脂含量须在 氮、 磷质量浓度 变化
范 围 内进行 预 先验证 。
关键词 ： 微藻 ； 总脂含量 ； 磷 酸香草醛反应 ； 测定方法
中图分 类 号 ： Ｔ Ｓ ２ ２ ２ ；Ｑ ９ ４ ９ 文献 标识 码 ： Ａ 文章编 号 ： １ ０ ０ ３— ７ ９ ６ ９ （ ２ ０ １ ７ ） ０ ７— ０ １ ２ ０— ０ ４
张 曼 ， 郜 小龙 ， 张 丽 ， 祝伟 霞
（ １ ． 河 南师范大学 水产学院 ， 河南 新 乡４ ５ ３ ０ ０ ７； ２ ． 河 南出入境检验检疫局 ， 郑州 ４ ５ ０ ０ ０ ３ ）
摘要 ： 验证 了磷酸香草醛反应在不同氮（ Ｏ ． ２ 、 ２ 、 ２ ０ 、 ４ ０ ｍ ｇ ／ Ｌ ） 、 磷（ ０ ． １ 、 １ 、 １ ０ 、 ２ ０ ｍ ｇ ／ Ｌ ） 质量浓度培
ｔ ｒ ｏ ｇ ｅ ｎ ａ ｎ ｄ ｐ ｈ ｏ ｓ ｐ ｈ ｏ ｕｓ ｒ ｍ ａ ｓ ｓ ｃ ｏ ｎ ｃ ｅ ｎ ｔ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ（ ｄ ｉ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｔ ｎ ｉ ｔ ｒ ｏ ｇ ｅ ｎ ｍａ ｓ ｓ ｃ ｏ ｎ ｃ ｅ ｎ ｔ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｃ ｏ ｎ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ：Ｒ ＝０可靠性。结果表 明： 不 同氮、 磷质量浓度条件下栅藻总脂含量和 磷 酸 香草 醛测 定 吸 光 度 之 间 均 呈 显 著 的 线 性 回 归 关 系 （ 不 同 氮质 量 浓 度 条 件 ： Ｒ ＝０ ． ９ ９ ７ ， Ｐ＝
０ ． ０ ０ ３； 不 同磷 质 量 浓度条 件 ： ＝ ０ ． ９ ９ ４ ， Ｐ＝ ０ ． ０ ０ ６ ） ， 在 不 同氮 、 磷 质 量 浓度 培 养条 件 下该 方 法 的测
实验五、血清总脂测定-香草醛法
血清总脂的测定
(香草醛法)
一、实验目的
1 学习血清总脂的测定方法及原理
2 了解分光光度计的用法
二、实验原理
血清中脂类,尤其是不饱和脂类能与浓硫 酸作用,并经水解后生成碳正离子.香草醛中 被浓硫酸活化的羟基即与碳正离子起反应 生成红色的醌化合物,其强度与碳正离子成 正比.
2、将盛有空白溶液的比色皿放在比色架的第一格将光点调到“T”，调节 T为100%。
3、将光点调到“A”，轻轻拉动比色架固定拉杆，使 第二个比色皿溶液处在光路中，此时读数即为该溶液 的吸收度。 4、依次拉出第三、第四个比色皿，分别读取吸收度。
三、实验步骤
试管
空白管
―――
标准管
―――
测定管
试剂
血清(mL)
胆固醇标准 液(mL)
0.02 0.02
―――
―――
浓硫酸 1.0 1.0 1.0 (mL) 充分混匀,放置沸水浴10min,使脂类水解,冷水冷却
显色剂(mL)
4.0
4.0
4.0
充分混匀,放置20min,再用分光光度计测其密度
四、 计算:
5、测定完毕，先打开比色皿盖，再断电源。
测得结果： OD测= OD标=
C标 × OD测 血清总脂浓度(mg/100mL) = --------------------OD标
OD测 = ---------------------× 600 OD标
五、分析讨论
分光光度计的使用
1、接通电源，打开比色皿盖，预热20-30分钟后，调 节波长至所需波长。用黑体调节 T为0.
医疗技术分类
医疗技术分类卫生部已刻录机红素临床应用管理办法，将医疗技术分为三类，即第一类、第二类，第三类。
第一类医疗技术是指安全性、有效性确切，医疗机构通过常规管理在临床应用中能确保其安全性、有效性的技术。
第二类医疗技术是指安全性、有效性确切，涉及一定伦理问题或者风险较高，卫生行政部门应加以控制管理的医疗技术。
第三类医疗技术是指具体有下列情形之一，需要卫生行政部门加以严格控制管理的医疗技术。
（一）涉及重大伦理问题（二）高风险（三）安全性、有效性尚需经规的临床试验研究进一步验证；（四）需要使用稀缺资源。
（五）卫生行政部门规定的其他需要特殊管理的医疗技术。
乌市人民医院第一类医疗技术目录：一影像：X 线检查X 线透视普通透视食管钡餐透视床旁透视与术中透视X 线射片牙片数字化摄影(DR) X 线造影T 管造影静脉泌尿系造影逆行泌尿系造影肾孟穿刺造影膀胱造影阴茎海绵体造影输精管造影窦道及瘘管造影X 线计算机体层(CT)扫描X 线计算机体层((CT)平扫X 线算机体层(CT)增强扫描临床操作CT 引导(二)超声检查B 超各部位一般B 超检查B 超常规检查胸、腹水B 超检查及穿刺定位胃肠充盈造B 超检查浅表组织器官B 超检查床旁检查术中B 超检查临床操作的B超引导B超脏器功能评估胃充盈及排空功能检查胆囊和胆道收缩功能检查膀胱残余尿量测定彩色多普勒超声检查普通彩色多普勒超声检查彩色多普勒超声常规检查颈部血管彩色多普勒超声浅表器官彩色多普勒超声检查彩色多普勒超声特殊检查四肢血管彩色多普勒超声门静脉系彩色多普勒超声腹部大血管彩色多普勒超声临床操作的彩色多普双肾及肾血管彩色多普勒超声左肾静脉“胡桃夹”综合征检查勒超声引导多普勒检查四肢多普勒血流图心脏彩超普通心脏M 形超声检查普通二维超声心动图床旁超声心动图心脏彩色多普勒超声左心功能测定图像记录附加收费项目黑白热敏打印照片彩色打印照片（三）检验血红蛋白测定(Hb) 红细胞计数(RBC) 红细胞比积测定(HCT) 网织红细胞计数(Ret) 异常红细胞形态检查红细胞沉降率测定(ESR) 白细胞计数(WBC) 白细胞分类计数(DC) 嗜酸性粒细胞直接计数嗜碱性粒细胞直接计数淋巴细胞直接计数单核细胞直接计数血小板计数血细胞分析或血常规红斑狼疮细胞检查(LEC) 尿常规检查尿酸碱度测定尿比重测定尿蛋白定性尿蛋白定量尿本-周氏蛋白定性检查尿肌红蛋白定性检查尿糖定性试验尿糖定量测定尿酮体定性试验尿三胆检查尿含铁血黄素定性试验尿乳糜定性检查尿浓缩稀释试验尿妊娠试验尿沉渣镜检尿三杯试验尿沉渣白细胞分类尿液分析+镜检粪便检查粪便常规粪便隐血试验(OB) 粪便隐血试验(OB)（化学法）粪便隐血试验(OB)（免疫法）体液与分泌物检查胸、腹水常规检查胸、腹水特殊检查脑脊液常规检查(CSF) 精液常规检查精子畸形率测定前列腺液常规检查阴道分泌物检查羊水结晶检查胃液常规检查十二指肠引流液及胆汁检查痰液常规检查各种穿刺液常规检查临床血液学检查凝血检查血浆凝血酶原时间测定(PT) 活化部分凝血活酶时间测定(APTT) 临床化学检查蛋白质测定血清总蛋白测定血清白蛋白测定超敏C 反应蛋白测定超敏C 反应蛋白测定(定性）超敏C 反应蛋白测定（定量）糖及其代物测定葡萄糖测定糖化血红蛋白测定血脂及脂蛋白测定血清总胆固醇测定血清甘油三酯测定血清高密度脂蛋白胆固醇测定血清低密度脂蛋白胆固醇测定血清β-羟基丁酸测定无机元素测定钾测定钠测定氯测定钙测定无机磷测定血清碳酸氢盐(HCO3)测定肝病的实验诊断血清总胆红素测定血清直接胆红素测定血清间接胆红素测定血清总胆汁酸测定血浆氨测定血清丙氨酸氨基转移酶测定血清天门冬氨酸氨基转移酶测定血清γ-谷氨酰基转移酶测定血清碱性磷酸酶测定血清胆碱脂酶测定心肌疾病的实验诊断血清肌酸激酶测定血清肌酸激酶－MB同工酶活性测定乳酸脱氢酶测定血清乳酸脱氢酶同工酶电泳分血清α羟基丁酸脱氢酶测定血清肌钙蛋白T 测定血清肌钙蛋白Ⅰ测定血清肌红蛋白测定前脑利尿钠钛--心衰标志物肾脏疾病的实验诊断尿素测定肌酐测定生肌酐清除率试验血清尿酸测定尿微量白蛋白测定尿蛋白电泳分析尿N-酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶测定尿γ-谷氨酰转移酶测定尿碱性磷酶测定尿碳酸氢盐(HCO3)测定其它血清酶类测定淀粉酶测定血清脂肪酶测定激素测定血清促甲状腺激素测定血清游离甲状腺素（FT4）测定血清游离甲状腺素（FT4）测定血清游离三碘甲状原氨酸(FT3)测定血清游离三碘甲状原氨酸(FT3)测定人绒毛膜促性腺激素测定人绒毛膜促性腺激素测定血清胰岛素测定血清胰岛素测定血清C 肽测定血清C肽测定自身免疫病的实验诊断抗核抗体测定(ANA) 抗核提取物抗体测定(抗ENA 抗体) 抗双链DNA 测定(抗dsDNA) 类风湿因子(RF)测定（定性）类风湿因子(RF)测定（定量）感染免疫学检测甲型肝炎抗体测定(HAV) 乙型肝炎五项乙型肝炎表面抗体测定(Anti-HBs) 乙型肝炎e 抗原测定(HBeAg) 乙型肝炎 e 抗体测定(Anti-HBe) 乙型肝炎核心抗原测定(HBcAg) 乙型肝炎核心抗体测定(Anti-HBc) 丙型肝炎抗体测定(Anti-HCV) 人免疫缺陷病毒抗体测定(Anti-HIV) 人免疫缺陷病毒抗体测定(Anti-HIV) 人免疫缺陷病毒抗体测定(Anti-HIV) 弓形体抗体测定风疹病毒抗体测定巨细胞病毒抗体测定单纯疱疹病毒抗体测定单纯疱疹病毒抗体测定细菌抗体测定抗链球菌溶血素O 测定(ASO) 抗链球菌溶血素O 测定(ASO)（定性）抗链球菌溶血素O 测定(ASO)（定量）肺炎支原体血清学试验立克次体血清学试验梅毒螺旋体特异抗体测定快速血浆反应素试验(RPR) 不加热血清反应素试验肿瘤相关抗原测定癌胚抗原测定(CEA) 甲胎蛋白测定(AFP) 总前列腺特异性抗原测定(TPSA) 糖类抗原测定肿瘤标志物临床微生物学检查病原微生物镜检、培养与鉴定一般细菌涂片检查结核菌涂片检查特殊细菌涂片检查耐甲氧西林葡萄球菌检测(MRSA、MRS) 一般细菌培养及鉴定血培养及鉴定沙门菌、志贺菌培养及鉴定真菌涂片检查真菌培养及鉴定念珠菌镜检念珠菌培养念珠菌系统鉴定衣原体检查衣原体培养支原体检查支原体培养及药敏药物敏感试验常规药敏定性试验常规药敏定量试验(MIC) 真菌药敏试验其它检验试验超广谱β－酰胺酶试验血型与配血ABO 红细胞定型ABO 血型鉴定ABO 血型鉴定Rh 血型鉴定Rh 血型鉴定盐水介质交叉配血特殊介质交叉配血不规则抗体筛查(四)病理检查细胞病理学检查与诊断体液细胞学检查与诊断拉网细胞学检查与诊断细针穿刺细胞学检查与诊断脱落细胞学检查与诊断细胞学计数组织病理学检查与诊断穿刺组织活检检查与诊断镜组织活检检查与诊断局部切除活检检查与诊断骨髓组织活检检查与诊断乌市人民医院第二类医疗技术目录一、呼吸科1、经支气管镜介入技术2、经科胸腔镜胸膜固定术二、骨科1、半骨盆切除术2、人工关节置换术3、骶管肿瘤综合治理术4、人工关节微创术及翻修术5、腰椎间盼微创手术治疗6、颈椎间盘前路椎体次全切固定术7、椎管肿瘤纤维外科治疗8、关节骨折缩创治疗9、脊柱侧弯前路胸腹联合手术10、颈椎病后路、前路减压椎骨固定术11、髋臼造盖及骨盆截骨术12、臂丛神经损伤神经移位术13、颈、胸、腰椎骨盆骨折脱位前、后路复位固定减压植骨术14、复杂骨盆及髋臼骨折15、断肢（指、趾）再植术16、周围神经、血管修复术17、复合组织移植修复术（肌腱、肌皮瓣、骨瓣、足拇趾拇甲瓣或第二足趾游离移植拇指再造术等）18、拇指再造及部分再造术19、脊髓损伤后膀胱功能重建术20、先天髋脱位矫正手术三、介入放射1.冠脉介入诊疗技术（1）冠状动脉造影术（2）经皮冠装动脉介入治疗术（3）IABP 应用术应2.起搏治疗相关医疗技术（1）临时心脏起搏器安置术（2）永久性心脏起搏器安置术3.电生理相关医疗技术（1）心电生理检查术4.先天性心脏病介入治疗术（1）左右心导管术（2）经皮房间隔穿刺术5.外周血管介入诊疗技术（1）主动脉、外周血管提囊扩术，支架和滤器植入术（2）肾动脉支架植入术五、烧伤整形科：1.复杂性游离皮瓣、皮瓣、肌皮瓣超薄皮瓣修复术2.特大面积烧伤切（削）皮痂植皮术六、耳鼻喉-头颈外伤1.玻璃体置换术2.框肿瘤切除术六、妇产科1.妇科镜诊疗技术七、医院高压氧科1.医用高压氧治疗八、眼科1、准分子激光角膜屈光手术九、泌尿外科1.输尿管镜技术2.经皮肾镜技术十一、肾科血液透析技术十二新技术。
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C标 × OD测 血清总脂浓度(mg/100mL) = --------------------OD标
OD测 = ---------------------× 600 OD标
五、分析讨论
分光光度计的使用
1、接通电源，打开比色皿盖，预热2源自-30分钟后，调 节波长至所需波长。用黑体调节 T为0.
2、将盛有空白溶液的比色皿放在比色架的第一格，其 余放测定溶液。将比色皿盖盖上，此时空白溶液在光 路上。将光点调到“T”，调节 T为100%。
血清总脂的测定
(香草醛法)
一、实验目的
1 学习血清总脂的测定方法及原理
2 了解分光光度计的用法
二、实验原理
血清中脂类,尤其是不饱和脂类能与浓硫 酸作用,并经水解后生成碳正离子.香草醛中 被浓硫酸活化的羟基即与碳正离子起反应 生成红色的醌化合物,其强度与碳正离子成 正比.
三、实验步骤
试管
空白管
―――
3、将光点调到“A”，轻轻拉动比色架固定拉杆，使 第二个比色皿溶液处在光路中，此时读数即为该溶液 的吸收度。 4、依次拉出第三、第四个比色皿，分别读取吸收度。
5、测定完毕，先打开比色皿盖，再断电源。
标准管
―――
测定管
试剂
血清(mL)
胆固醇标准 液(mL)
0.02 0.02
―――
―――
浓硫酸 1.0 1.0 1.0 (mL) 充分混匀,放置沸水浴10min,使脂类水解,冷水冷却
显色剂(mL)
4.0
4.0
4.0
充分混匀,放置20min,再用分光光度计测其密度
四、 计算:
测得结果： OD测= OD标=