标准曲线的配制
溶液配制,标准曲线的制作,检测限等
一、定性方法:保留时间或相对保留值步骤: 溶液配制::1.准确称取雌酮,雌二醇,雌三醇,黄体酮各2.5mg ,分别置于4个50ml 容量瓶中,用少量甲醇溶解,定容,得到浓度均为0.05mg/ml 的四种标准性激素液 2.将上述四种性激素的标准溶液和待测物样品溶液,按照标准品,样品,标准品,样品的进样步骤以此进样,得到四种性激素各自的色谱图和待测物的色谱图进行比对。
二、定量方法:标准曲线的制作用标准品配制4种性激素的一系列不同浓度溶液,在设定的实验条件下,分别在高效液相色谱仪下测得其保留值和峰面积,以浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,做峰面积-浓度曲线,得出4种性激素的标准工作曲线,求出回归方程(斜率为灵敏度),作为样品定量测量的依据。
步骤: 1.用移液枪分别移取以上各溶液适量于25ml 容量瓶中,甲醇定容,制成不同浓度的标准混合溶液2..分别用上述配好的标准系列溶液在设置好的色谱条件下测定,得出各自对应的峰面积,峰面积-浓度曲线,并求出回归方程三、检出限(文献记录的四种性激素在该条件下的检出限约为0.2---2.3ng/g )以恰好产生三倍噪声信号时的浓度为检测限(课本:2倍信噪比,文献:3倍信噪比) 步骤:1、观察上述标准混合溶液的响应信号,若最低浓度的混合液各激素响应信号均大于三倍信噪比,则将上述1号标准混合液按梯度稀释,分别稀释. 5/ 10/20/100 倍等(依据实际情况确定),再次检测,直到稀释浓度恰好等于三倍信噪比对应的浓度,此为检测限。
四、线性范围最大进样浓度和检测限浓度的比值精密度标准偏差和标准误(测定某一固定浓度的性激素标准混合溶液)将3号标准混合液平行测定6次,计算相对标准偏差和平均值的标准偏差%100⨯=xSRSD准确度样品加标回收率(高中低三个梯度)取4份体积为10ml 的试样,其中一份为不加标准物质,另外三分分别加入高中低(取上述用于制作标准曲线的1、 3、 5号溶液)三个浓度的高浓度小体积标准混合液,按照以下公式测定加标回收率加标回收率(%)=(加标样品测定值-样品测定值)/加标量×100%ns s x =。
做标准曲线的溶液配制
做标准曲线的溶液配制标线溶液配制通用流程贮备溶液→工作溶液→作标准曲线的各浓度溶液(逐级稀释)贮备溶液由分析试剂直接配制,可以长时间储存备用,浓度较高工作溶液由贮备溶液稀释得到,只能短时间保存,一般现用现配作标准曲线的各浓度的溶液由工作溶液稀释得到以磷酸根为例:1.磷酸根标准贮备溶液(0.5mgPO 43-/mL ):称取0.7165克预先在100~105℃干燥并已恒重过的磷酸二氢钾,精确至0.0002克,溶于约500mL 水中,定量转移至1升容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。
2.磷酸根标准工作溶液(0.02mgPO 43-/mL )准确吸取20.00mL 磷酸根标准贮备溶液于500mL 容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。
3.分别取0.00(空白),1.00,2.00,3.00,4.00,5.00,6.00,7.00,8.00mL 磷标准工作溶液于9个50mL 容量瓶中,依次向各瓶中加入约25mL 水,2.0mL 钼酸铵溶液和3.0mL 抗坏血酸溶液,用水稀释至刻度,摇匀。
以下进行详解1.磷酸根标准贮备溶液(0.5mgPO 43-/mL ):称取0.7165克预先在100~105℃干燥并已恒重过的磷酸二氢钾,精确至0.0002克,溶于约500mL 水中,定量转移至1升容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。
m (PO 43-)=m (KH 2PO 4)*424PO KH PO M M =0.7165*13695 =0.5005g ≈0.5gC (PO 43-)=m (PO 43-)/V=0.5g/1000ml=0.5mg/mL2.磷酸根标准工作溶液(0.02mgPO 43-/mL )准确吸取20.00mL 磷酸根标准贮备溶液于500mL 容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。
C 1*V 1=C 2*V 2 (核心公式)0.5mg/mL*20ml=0.02mg/mL*500ml 这个公式的意义是稀释前后溶质的总量不变3.分别取0.00(空白),1.00,2.00,3.00,4.00,5.00,6.00,7.00,8.00mL 磷标准工作溶液于9个50mL容量瓶中,依次向各瓶中加入约25mL水,2.0mL 钼酸铵溶液和3.0mL抗坏血酸溶液,用水稀释至刻度,摇匀。
内标法-标准曲线
配置不同浓度配比的苯甲醇和苯甲醛标准样品,如表2-4,表2-4 标准液的配制Tab.2-4 Preparation of standard solution标准液编号 1 2 3 4 5 6苯甲醇(ul) 0 20 40 60 80 100苯甲醛(ul) 98 78.5 58.88 39.25 19.63 0十二烷(ul) 50 50 50 50 50 50按照内标法原理,做出苯甲醇和苯甲醛的标准曲线,其原理如下:设在V mL 样品中含有C i mol·mL-1待测样i,加入C S mol·mL-1内标物S,混合均匀后于色谱进样,得到组分i及内标物S的峰面积分别为A i及A S。
由于峰面积正比于通过检测器的物质的量,所以有:C i = f i A i,C S =f S A S,式中fi、fs 分别为组分i和内标S的校正因子。
两式相除,得:C i /C S =f i A i / f S A S= f i / f S•A i /A S (1)由于在实际工作中一般采用相对校正因子(某物i与所选定的基准物质S的绝对定量校正因子之比)即:f = f i / f S ,(1)式可简化为C i /C S = f • A i /A S (2)根据(2)式,在测量过程中,分别称取准确质量的样品,混合均匀后进样,记录其相应的峰面积,计算可得相对质量校正因子。
由于内标法是一种相对测量方法,因此,对进样量要求不太严格,操作条件稍有变化或是仪器的误差对结果均不会产生较大的影响。
在用内标法做色谱定量分析时,先配制一定配比的被测组分和内标样品的混合物做色谱分析,测量峰面积,做浓度比与面积比的关系曲线,此曲线即为标准曲线。
图2-3 反应物苯甲醇的标准曲线Fig.2-3 The standard curve of the reactant benzene alcohol图2-4 产物苯甲醛的标准曲线Fig.2-4 The standard curve of the product benzaldehyde图2-3为反应物苯甲醇的标准曲线及线性回归方程,图2-4产物苯甲醛的标准曲线及线性回归方程,横坐标表示待测物与内标物十二烷的物质的量浓度之比,纵坐标表示待测物与内标物十二烷的峰面积之比,得出的标准曲线的线性相关度R2均满足实验要求。
原子荧光Hg.As标准曲线的配制
砷(As)标准溶液的配制:1.吸取1ml浓度为1mg/ml的砷(As)单元素标准溶液(国家标准物质研究中心)置于100ml容量瓶中,用5%的盐酸稀释至刻度,此溶液为砷(As)的标准储备液,浓度为10μg/ml(10ppm)。
再吸取10ml此储备液置于100ml容量瓶中,用5%盐酸定容至刻度,此溶液为砷标准使用液,含量为1μg/ml(1ppm),以上两种溶液冰箱中保存。
2.分别称取5g硫脲和5g抗坏血酸都置于同一100ml容量瓶中,用去离子水稀释至刻度,配制成含5%硫脲和5%抗坏血酸的混合溶液,备用。
3.取4支100ml和1支200ml的洁净容量瓶,分别加入0.1ml、0.2ml、0.4ml、0.8ml、2ml的浓度为1μg/ml(1ppm)的砷(As)标准使用溶液。
4.再向4支100ml的容量瓶中各加入5ml浓盐酸,向200ml的容量瓶中加入10ml浓盐酸。
5.再向4支100ml的容量瓶中各加入20ml 5%硫脲和5%抗坏血酸的混合液,向200ml的容量瓶中加入40ml 5%硫脲和5%抗坏血酸的混合液。
6.最后,分别用去离子水定容至刻度,标准系列溶液中砷(As)的含量分别1ng/ml、2ng/ml、4ng/ml、8ng/ml、10ng/ml,酸度5%HCL。
汞(Hg)标准溶液的配制:1.吸取1ml浓度为1000μg/ml的汞(Hg)单元素标准溶液(国家标准物质研究中心)至于100ml洁净容量瓶中加入0.05g重铬酸钾(K2Cr2O7),用5%硝酸定容至刻度,此容液为汞标准储备液,浓度10μg/ml(10ppm)置于冰箱中保存。
再吸取1ml汞的标准储备液至于100ml容量瓶中,用5%硝酸定容成汞标准使用液,浓度为0.1μg/ml(0.1ppm)。
2.取5支200ml洁净容量瓶,分别加入0.8ml、1.6ml、2.4ml、3.2ml和4.0ml 的浓度为0.1μg/ml(0.1ppm)的汞标准使用液。
标准曲线的制作方法
标准曲线的制作方法标准曲线是在实验室中常见的一种分析方法,它可以用来确定样品中某种物质的含量。
制作标准曲线是实验室工作中的重要环节,正确的制作方法可以保证实验结果的准确性和可靠性。
下面将介绍标准曲线的制作方法。
首先,准备标准溶液。
标准曲线的制作需要一系列已知浓度的标准溶液作为参照物质。
这些标准溶液需要精确配制,确保其浓度准确无误。
在配制标准溶液时,需要使用准确的称量仪器和容量瓶,按照标准操作程序进行操作,避免因操作不当导致溶液浓度出现误差。
其次,进行实验测定。
将准备好的标准溶液以及待测样品依次进行测定,得到各自的吸光度数值。
在实验测定时,需要使用精密的光度计或分光光度计,确保测定结果的准确性和精度。
同时,还需要注意保持实验条件的一致性,如温度、湿度等因素都可能对测定结果产生影响,需要加以控制。
然后,绘制标准曲线。
将实验测定得到的吸光度数值以及对应的标准溶液浓度数据进行统计整理,然后利用统计软件或绘图工具进行数据处理和绘图。
在绘制标准曲线时,需要选择合适的曲线拟合方法,确保曲线能够准确地反映吸光度和溶液浓度之间的关系。
绘制出的标准曲线应该是平滑的曲线,能够清晰地表达吸光度和浓度之间的函数关系。
最后,进行标准曲线的验证和应用。
制作好标准曲线后,需要进行曲线的验证工作,检查曲线的线性、灵敏度、稳定性等指标,确保曲线符合实验要求。
在实际应用中,可以利用标准曲线来测定未知样品中目标物质的含量,通过测定样品的吸光度数值,利用标准曲线的拟合方程计算出样品中目标物质的浓度。
综上所述,标准曲线的制作是一项重要的实验工作,需要严谨的操作和准确的数据处理。
正确的制作方法和严格的实验操作可以保证标准曲线的准确性和可靠性,为实验结果的准确性提供保障。
希望本文介绍的标准曲线制作方法对您有所帮助。
怎么做标准曲线
怎么做标准曲线标准曲线是实验室常见的实验操作,它是一种用于定量分析的重要工具。
标准曲线可以帮助我们确定未知样品中目标物质的浓度,从而进行准确的定量分析。
下面将介绍如何制作标准曲线的步骤和注意事项。
首先,准备标准溶液。
标准曲线的制作首先需要准备一系列已知浓度的标准溶液。
这些标准溶液的浓度应该覆盖到你需要分析的样品中目标物质的浓度范围。
比如,如果你需要分析样品中某种药物的浓度,那么你需要准备一系列不同浓度的该药物标准溶液。
其次,进行实验操作。
取一定体积的标准溶液,加入适量的试剂,进行反应或者测量。
比如,你可以使用分光光度计测量吸光度,或者进行色谱分析等。
记录下每个标准溶液的测量值。
接下来,绘制标准曲线。
将每个标准溶液的浓度和对应的测量值绘制成图表,通常是浓度作为横坐标,测量值作为纵坐标。
然后使用拟合曲线的方法,比如线性拟合、二次拟合等,得到标准曲线的方程式。
最后,验证标准曲线。
使用未知样品进行测量,得到测量值后,代入标准曲线的方程式,计算出未知样品中目标物质的浓度。
如果计算出的浓度与实际测量值相符合,说明标准曲线是可靠的。
在制作标准曲线的过程中,需要注意一些事项。
首先,标准溶液的制备要求准确,需要严格按照配制方法进行操作,避免浓度误差。
其次,实验操作要规范,避免操作失误带来的数据偏差。
最后,在绘制标准曲线时,要选择合适的拟合方法,确保拟合曲线与实验数据吻合度高。
总之,制作标准曲线是一项需要严谨操作和精确计算的工作,但它对于定量分析具有重要意义。
只有通过正确的制备标准溶液、准确的实验操作和合适的拟合方法,才能得到可靠的标准曲线,为后续的定量分析提供准确的数据支持。
希望以上内容能够帮助您更好地理解和掌握标准曲线的制作方法。
标准曲线怎么做
标准曲线怎么做标准曲线是实验室常见的一种实验方法,它可以用来测定物质的浓度、纯度等参数,是化学分析中常用的一种定量分析方法。
下面将介绍标准曲线的制作方法及注意事项。
首先,准备工作。
在进行标准曲线制作之前,需要准备好实验所需的仪器和试剂,确保实验环境清洁整洁,避免外部因素对实验结果的影响。
其次,制作标准溶液。
选择一种纯度较高的化合物作为标准品,按照一定的比例将其溶解于溶剂中,制备出一系列不同浓度的标准溶液。
在制备标准溶液的过程中,需要严格控制各个浓度点的溶液配制,确保溶液浓度的准确性和稳定性。
接下来,进行实验操作。
将制备好的标准溶液分别加入到实验样品中,进行分析测定。
根据实验结果,绘制出标准曲线图表,通常是以浓度为横坐标,测定数值(如吸光度、电流等)为纵坐标,通过实验数据的拟合,得到标准曲线的方程式。
最后,分析实验结果。
利用标准曲线方程,可以根据待测样品的测定数值,反推出其浓度或其他参数。
需要注意的是,在进行实验分析时,要严格按照实验操作规程进行,确保实验结果的准确性和可靠性。
在进行标准曲线制作的过程中,需要注意以下几点事项:1. 选择合适的标准品,确保其纯度和稳定性,以提高标准曲线的准确性和可靠性。
2. 在制备标准溶液时,需要精确称量和配制,避免因为操作失误导致标准溶液浓度不准确。
3. 实验操作过程中,要注意仪器的使用和维护,确保实验数据的准确性。
4. 在进行实验分析时,要注意环境因素的影响,避免外部因素对实验结果的干扰。
总之,标准曲线的制作是一项重要的实验方法,它可以用来定量分析物质的浓度、纯度等参数,是化学分析中不可或缺的一部分。
在进行标准曲线制作时,需要严格按照操作规程进行,确保实验结果的准确性和可靠性。
同时,也需要不断积累经验,提高实验操作的技能,以提高标准曲线制作的效率和准确性。
做标准曲线的溶液配制
标线溶液配制通用流程贮备溶液→工作溶液→作标准曲线的各浓度溶液 (逐级稀释) 贮备溶液由分析试剂直接配制,可以长时间储存备用,浓度较高工作溶液由贮备溶液稀释得到,只能短时间保存,一般现用现配作标准曲线的各浓度的溶液由工作溶液稀释得到以磷酸根为例:1.磷酸根标准贮备溶液(0.5mgPO 43-/mL ):称取0.7165克预先在100~105℃干燥并已恒重过的磷酸二氢钾,精确至0.0002克,溶于约500mL 水中,定量转移至1升容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。
2.磷酸根标准工作溶液(0.02mgPO 43-/mL )准确吸取20.00mL 磷酸根标准贮备溶液于500mL 容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。
3.分别取0.00(空白),1.00,2.00,3.00,4.00,5.00,6.00,7.00,8.00mL 磷标准工作溶液于9个50mL 容量瓶中,依次向各瓶中加入约25mL 水,2.0mL 钼酸铵溶液和3.0mL 抗坏血酸溶液,用水稀释至刻度,摇匀。
以下进行详解1.磷酸根标准贮备溶液(0.5mgPO 43-/mL ):称取0.7165克预先在100~105℃干燥并已恒重过的磷酸二氢钾,精确至0.0002克,溶于约500mL 水中,定量转移至1升容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。
m (PO 43-)=m (KH 2PO 4)*424PO KH PO M M =0.7165*13695 =0.5005g ≈0.5gC (PO 43-)=m (PO 43-)/V=0.5g/1000ml=0.5mg/mL2.磷酸根标准工作溶液(0.02mgPO 43-/mL )准确吸取20.00mL 磷酸根标准贮备溶液于500mL 容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。
C 1*V 1=C 2*V 2 (核心公式)0.5mg/mL*20ml=0.02mg/mL*500ml 这个公式的意义是稀释前后溶质的总量不变3.分别取0.00(空白),1.00,2.00,3.00,4.00,5.00,6.00,7.00,8.00mL 磷标准工作溶液于9个50mL容量瓶中,依次向各瓶中加入约25mL水,2.0mL 钼酸铵溶液和3.0mL抗坏血酸溶液,用水稀释至刻度,摇匀。
标准曲线制作考马斯亮蓝法测蛋白质含量(精)
标准曲线制作—考马斯亮蓝法测蛋白质含量一、标准曲线一般用分光光度法测物质的含量,先要制作标准曲线,然后根据标准曲线查出所测物质的含量。
因此,制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术。
二、蛋白质含量测定方法1、凯氏定氮法2、双缩脲法3、Folin-酚试剂法4、紫外吸收法5、考马斯亮蓝法三、考马斯亮蓝法测定蛋白质含量—标准曲线制作(一)、试剂:1、考马斯亮蓝试剂:考马斯亮蓝G—250 100mg溶于50ml 95%乙醇,加入100ml 85% H3PO4,雍蒸馏水稀释至1000ml,滤纸过滤。
最终试剂中含0.01%(W/V)考马斯亮蓝G—250,4.7%(W/V)乙醇,8.5%(W/V)H3PO4。
2、标准蛋白质溶液:纯的牛血清血蛋白,预先经微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量,根据其纯度同0.15mol/LNaCl配制成100ug/ml蛋白溶液。
(二)、器材:1、722S型分光光度计使用及原理()。
2、移液管使用()。
(三)、标准曲线制作:1、2、以A595nm为纵坐标,标准蛋白含量为横坐标(六个点为10ug、20 ug、30 ug、40 ug、50 ug、60 ug),在坐标轴上绘制标准曲线。
1)、利用标准曲线查出回归方程。
2)、用公式计算回归方程。
3)、或用origin作图,测出回归线性方程。
即A595nm=a×X( )+6一般相关系数应过0.999以上,至少2个9以上。
4)、绘图时近两使点在一条直线上,在直线上的点应该在直线两侧。
(四)、蛋白质含量的测定:样品即所测蛋白质含量样品(含量应处理在所测范围内),依照操作步骤1操作,测出样品的A595nm,然后利用标准曲线或回归方程求出样品蛋白质含量。
一般被测样品的A595nm值在0.1—0.05之间,所以上述样品如果A595nm值太大,可以稀释后再测A595nm值,然后再计算。
(五)、注意事项:1、玻璃仪器要洗涤干净。
2、取量要准确。
3、玻璃仪器要干燥,避免温度变化。
黄酮、多糖标准曲线制作方案
1、黄酮标准曲线制作1.1 芦丁标准溶液配制精密称取干燥芦丁对照品20 mg,置于100 mL容量瓶中,60 %乙醇溶解,定容,得标准对照液(含无水芦丁0.200 0 g/ L)。
1.2 芦丁标准溶液最大吸收波长的测定准确吸取芦丁标准溶液10mL于25mL容量瓶中,加入5%亚硝酸钠溶液0.7mL,摇匀,静置5 min;再加10%硝酸铝溶液0.7mL,摇匀,静置6 min;再加4% 氢氧化钠溶液5 mL,60 %乙醇稀释至刻度,摇匀,静置10 min后,在100~600nm波长范围测定测定其最大吸收波长,参比为空白试剂。
1.3芦丁标准曲线的制作分别精密移取芦丁标准对照液0、1、2、3、4、5 mL 置25 mL 容量瓶中,补60 %乙醇10 mL,加入5%亚硝酸钠溶液0.7mL,摇匀,静置5 min;再加10%硝酸铝溶液0.7mL,摇匀,静置6 min;再加4% 氢氧化钠溶液10 mL,60 %乙醇稀释至刻度,摇匀,静置10 min,以第1瓶溶液为空白调零,于500 nm测各瓶溶液吸光度;以浓度(C)和吸光度(A)进行线性回归。
2、多糖标准曲线制作2.1葡萄糖标准溶液配制精密称取干燥至恒重的葡萄糖10 mg,加适量去离子水溶解,转移至100 mL容量瓶中,加水稀释至刻度,即得0.1 mg/mL的葡萄糖标准溶液。
2.2 葡萄糖标准溶液最大吸收波长的测定取1ml葡萄糖标准溶液于干燥洁净试管中然后分别加入2.0 mL 5 %的苯酚试剂,再迅速加入7 mL浓硫酸振摇,待其冷却到25 ℃,放置30 min。
在100~600nm波长范围测定测定其最大吸收波长,2.3葡萄糖标准曲线制作用移液管分别量取葡萄糖标准溶液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1 mL转于干燥洁净的试管中,补加去离子水至刻度使其成1 mL。
并编号为1、2、3、4、5、6,然后分别加入2.0 mL 5 %的苯酚试剂,再迅速加入7 mL浓硫酸振摇,待其冷却到25 ℃,放置30 min。
TTC标准曲线制作
根系活力:
TTC标准曲线的制作取0.4% TTC溶液0.2 mL放入大试管中,加9.8 mL乙酸乙酯,再加少许Na2S2O4粉末摇匀,则立即产生红色的TTF。
此溶液浓度为每毫升含有TTF 80 µg。
分别取此溶液0.25 mL、0.50 mL、1.00 mL、1.50 mL、2.00 mL置10 mL刻度试管中,用乙酸乙酯定容至刻度,即得到含TTF 20 µg、40 µg、80 µg、120 µg、160 µg的系列标准溶液,以乙酸乙酯作参比,在485 nm波长下测定吸光度,绘制标准曲线。
种子活力:
标准曲线的配制在容器瓶中配0.1%TTC母液(即1000μg/ml)。
取5ml容量瓶5只,每只瓶中加入极少量(粒数)的强还原剂连二亚硫酸钠(Na2S2O4),以便将四唑还原成红色的TTF,用微量注射器分别加入0.1%TTC溶液25、50、75、100、150μl,并加入定容,摇匀,配制成每毫升含有5、10、15、20、30μg的标准溶液。
在490nm波长的72-1型分光光度计下,分别测定其光密度,并绘出标准曲线图。
A=0.00142×C (R^2=0.99960,A为吸光度,C为TTC浓度μg/L),这是用硫代硫酸钠与TTC标准溶液反应得出来的回归曲线。
标准曲线、标准系列物质制作方法
标准曲线、标准系列物质制作方法Q/JL.06.39-2009 1.铁标准曲线1.1 0.01mg/ml铁标准溶液配制称取硫酸高铁铵[Fe(NH4)(SO4)2·12H2O](分析纯)0.864g(精确至0.0002g)溶解于200ml水中,移入1000ml容量瓶中,加入2.5ml 浓硫酸,用水稀释至刻度,摇匀即为0.1mg/ml铁的标准溶液。
0.01mg/ml的标液由此稀释而得。
1.2标准曲线制作用10ml微量滴定管分别量取0.01mg/ml铁标准溶液2.0、4.0、6.0、8.0、10.0ml置于100ml容量瓶中,分别依次加入3ml盐酸、20ml乙酸钠、10ml盐酸羟胺、15ml邻菲罗啉,然后用盐酸和氨水调pH=4—5,用水稀释至刻度,摇匀放置30min,以同样的试剂作参比,用3cm比色皿,在490nm波长处测其吸光值A,用回归方程求出曲线的斜率和截距。
2. 1.0、5.0、10.0ppm钠标准系列2.1 0.5mg/ml(500ppm)钠标准溶液的配制称取经500—600℃灼烧至恒重的基准氯化钠1.2711g(精确至0.0001g),于50ml烧杯中,加水溶解,移入1000ml容量瓶中,稀释至刻度,摇匀。
再移至塑料瓶中保存(有效期1个月)。
2.2钠标准系列溶液配制用微量滴定管分别量取钠标准溶液2、10、20ml置于1000ml容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,即为1.0、5.0、10.0ppm钠标准系列溶液。
3. 1.0、5.0、10.0ppm钾标准系列3.1 0.1mg/ml钾标准溶液的配制称取经500—600℃灼烧至恒重的基准氯化钾0.1907g(精确至0.0001g),溶于水中,移入1000ml容量瓶中,稀释至刻度,摇匀。
3.2钾标准系列溶液配制用微量滴定管分别量取钾标准溶液1、5、10ml置于100ml容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,即为1.0、5.0、10.0ppm钾标准系列溶液。
标准曲线制备法
标准曲线制备法
简介
标准曲线制备法是一种常用的实验方法,用于确定待测物质的浓度。
该方法通过制备一系列已知浓度的标准溶液,并测量其对应的光谱吸光度,建立一条由浓度与吸光度之间关系构成的曲线,从而根据待测物质的吸光度确定其浓度。
步骤
1. 准备标准溶液:根据实验要求,制备一系列已知浓度的标准溶液。
2. 测量吸光度:使用光谱仪或分光光度计,分别测量标准溶液的吸光度。
记录下每个标准溶液对应的浓度与吸光度数据。
3. 绘制标准曲线:将浓度与吸光度数据绘制成散点图,并进行拟合得到曲线方程。
4. 测量待测物质:使用同样的测量条件,测量待测物质的吸光度。
5. 计算浓度:将待测物质的吸光度代入曲线方程,计算出其浓度。
注意事项
- 准备标准溶液时,要严格按照实验要求进行配制,确保浓度准确无误。
- 在测量吸光度时,要注意选择适当的波长以获得准确的测量结果。
- 绘制标准曲线时,可以使用专业软件进行数据拟合,以得到更准确的曲线方程。
- 在测量待测物质时,要保持相同的测量条件,以确保测量结果的可靠性。
总结
标准曲线制备法是一种可靠和常用的测定物质浓度的方法。
通过制备标准溶液,测量吸光度,并建立曲线,可以准确地确定待测物质的浓度。
在进行实验时,需要注意配制准确的标准溶液,选择适当的波长进行测量,使用专业软件进行数据拟合,以及保持相同的测量条件。
标准曲线的制作方法
、做标准曲线样品检测时有几个问题需要注意
1、样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的,所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事,否则后面的实验结果无从谈起。
2、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度,并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度,即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内,包括上限和下限。
而对于呈S型的标准曲线,尽量要使实验样品的浓度在中间坡度最陡段,即曲线几乎成直线的范围内。
3、最好采用倍比稀释法配制标准曲线中的标准样品浓度,这样就能够保证标准样品的浓度不会出现较大的偏离。
4、检测标准样品时,应按浓度递增顺序进行,以减少高浓度对低浓度的影响,提高准确性。
5、标准曲线的样品数一般为7个点,但至少要保证有5个点。
6、做出的标准曲线相关系数因实验要求不同而有所变动,但一般来说,相关系数R
至少要大于0.98,对于有些实验,至少要0.99甚至是0.999.。
HPLC标准曲线制备步骤
HPLC标准曲线制备步骤1.配制1mg/mL的TA/甲醇母液。
流动相共6mL。
准备10个进样瓶,并标记。
2.配制100µg/ml的标曲。
从1mg/mL的TA母液取100µl放入进样瓶,加入900µl的流动相,旋涡震荡。
3.配制50µg/ml的标曲。
从100µg/ml的标曲取500µl放入进样瓶,加入500µl的流动相,旋涡震荡。
4.配制20µg/ml的标曲。
从50µg/ml的标曲取400µl放入进样瓶,加入600µl的流动相,旋涡震荡。
5.配制10µg/ml的标曲。
从20µg/ml的标曲取500µl,加入500µl的流动相,旋涡震荡。
6.配制5µg/ml的标曲。
从10µg/ml的标曲取500µl,加入500µl的流动相,旋涡震荡。
7.配制2µg/ml的标曲。
从5µg/ml的标曲取400µl,加入600µl的流动相,旋涡震荡。
8.配制1µg/ml的标曲。
从2µg/ml的标曲取500µl,加入500µl的流动相,旋涡震荡。
9.配制0.5µg/ml的标曲。
从1µg/ml的标曲取500µl,加入500µl的流动相,旋涡震荡。
10.配制0.2µg/ml的标曲。
从0.5µg/ml的标曲取400µl,加入600µl的流动相,旋涡震荡。
11.配制0.1µg/ml的标曲。
从0.2µg/ml的标曲取500µl,加入500µl的流动相,旋涡震荡。
称量法配制金属元素标准曲线
称量法配制金属元素标准曲线
金属元素标准曲线配制是利用定量分析常见金属元素,以生成一条从无量纲状
态到有量纲状态的金属元素响应曲线,用以估算和校正金属元素定量。
由于金属元素曲线是建立在已知金属量上的,因此在配制这条金属元素标准曲线时,必须遵循一定的规则,完善的比例称量法是这一配制过程强调的内容。
首先,配制金属元素标准曲线需要有足够的量,这里的量是指比例的量,即给
定的金属浓度可以进行比例称量。
另外,在进行比例称量时,要避免金属元素的沉淀,有利于配制出更加准确的金属元素标准曲线。
例如,选取金属元素的溶剂如氯化钠、酒精、醋酸等溶剂,以防止金属元素发生沉淀。
其次,要确保量程的精度和准确度,因为金属元素标准曲线需要将各个金属元
素的浓度均已线性变化的方式做出趋势性配制,若量程的精度较低,无法反映出准确的数据,也就无法精确地配制出金属元素标准曲线。
因此,在配制金属元素标准曲线时,要认真检查比较器,确保其稳定性和精确度。
最后,要注意所选取的金属元素,以及其要测量的量纲状态。
在此配制过程中,需要选取能代表性的金属元素,以构建可靠的定量分析数据标准。
同时,除要考虑金属元素的无量纲状态之外,也要了解其在常见的有量纲状态下的表现情况,以便更好地计量分析。
综上,为了更好地配制金属元素标准曲线,在配制过程中,要求采用比例称量法,以保证金属元素测量和精度;此外,所选取的金属元素种类和量纲状态也决定了金属元素标准曲线的准确和可靠性。
称质量法配置标准曲线
称质量法配置标准曲线目的建立称量法配制金属元素标准曲线的方法.方法利用万分之一分析天平和移液器,通过"衡量法",质量与实际体积计算测定标准溶液的密度.移取1 ml标准溶液于洁净塑料瓶中,记录其准确质量换算实际体积,按比例加入超纯水,使金属元素标准溶液介质的酸浓度稀释至1%,再加入1%的硝酸溶液至100 g,记录准确质量,按1%硝酸的密度计算稀释后体积,换算稀释后标液浓度,按照实际需求,配制相应的标准曲线浓度.标准系列的配制使用洁净塑料瓶,按质量比值稀释,计算实际浓度,完成配制过程.结果标准曲线相关系数
r=1.000 0,环境水样质控检测结果准确,方法比对结果一致,称量法的不确定度与容量法的不确定度保持一致.结论本方法准确可靠、简便快捷、能够有效避免污染,适用于金属元素标准曲线的配制.。
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标准曲线的绘制
精密称取标准品10.0毫克(实际称取的量为10.1 mg),用50%甲醇定容于10.0 mL容量瓶中。
所得的标准品溶液约为1.0mg/mL,作为标准品母液。
分别从其中吸取0.8 mL、0.7 mL、0.6 mL、0.45 mL和0.3 mL标准品溶液,再用50%甲醇定容于10.0 mL容量瓶中,即得一系列浓度梯度的标准品溶液。
最大吸收波长的确定:
用中等浓度的标准品溶液(即0.6 mL标准品母液定容于10.0 mL容量瓶中的标准品溶液),从200nm到400nm,进行扫描,得到该标准品溶液的紫外吸收图谱来确定该标准品的最大吸收波长(可得一个大概范围)。
然后在最大吸收波长范围内每隔0.2nm设定一个检测波长,进一步确定最大吸收波长的具体值。
标准品溶液吸收值的测定:
在确定标准品溶液的最大吸收波长后,在该检测波长下测定各标准品溶液的吸收值,绘制标准曲线。
每次测定两个吸收值取其平均值作为结果。
精密度实验:
同时进行精密度实验,用中等浓度的标准品溶液(即0.6 mL标准品母液定容于10.0 mL 容量瓶中的标准品溶液)连续测定6次,每次测定两个吸收值取其平均值作为结果。