定量分析方法概述

第一次测定：
第二次测定： 第三次测定：
28.13 2763699 25.13 99.5% 2491721 100% 94.49% 含量% 29.35
含量%
25.13 99.5%
2491721 100% 93.99%
含量%
25.13 99.5% 27.10
(二）分光光度法
对乙酰氨基酚原料药含量测定
A 1 V D 1% E1cm 100 含量% 100% m
0.582 1 100 250 5 100% 99.05% 715 100 0.0411
(二）分光光度法
甲氧苄啶注射液（规格2 ml：0.1g）含量测定
精密量取本品1ml，置25ml量瓶中，用稀醋酸稀释至刻度，摇 匀，精密量取1ml置100ml量瓶中，用稀醋酸稀释至刻度，摇 匀。照紫外-可见分光光度法，在271nm波长处测定吸光度为
（一）鉴别反应 应能与其它共存的物质或相似化合物区分， 不含被测组分的样品均应呈现负反应。
（二）含量测定和杂质测定
①在能获得杂质的情况下，可加到试样中， 考察对结果的干扰。 ② 在杂质和降解物不能获得的情况下，可 用已验证方法或药典方法进行对照。
（四）检测限 指试样中被测物能被检测出的最低量 (1)非仪器分析目视法 (2)信噪比法 把已知低浓度试样测出的信号 与空白样品测出的信号进行比较，算出能被可 靠地检测出的最低浓度或量。一般以信噪比 （S/N）3∶1或2∶1时的相应浓度或量确定检 测限。
（五）定量限 指试样中被测物能被定量测定的最低量， 常用信噪比法确定定量限。一般以信噪比为 10∶1时相应浓度或注入仪器的量确定定量限。
（六）线性
• 线性 – 系指在设计的范围内，测试 结果与试样中被测物浓度直 接呈正比关系的程度。 线性关系：Y=a+bx （r=0.9999) 线性程度：相关系数
况予以验证
第五节 定量分析有关计算
标示量(S)：就是药品标签上注明，每一单位剂量药 品中主药的量。表示为g/片、mg/ml等。
原料药的含量用百分含量表示：
mx 含量% 100% m
制剂的含量则用标示量的百分含量表示：
标示量% 每片(每支)实测量 100% 标示量
mx 标示量% 100% S
一、分析方法验证的内容
项目 鉴别 内容 准确度 精密度 重复性 中间精密度 专属性② 检测限 定量限 线性 范围 耐用性 + + + +① + -③ + + + + + + + + +① + + + + 定量 + 限度 + 杂质测定 含量测定及溶出量测定
① 已有重现 性验证，不 需验证中间
精密度
② 如一种方 法不够专属， 可用其他分 析方法予以 补充 ③ 视具体情
2.000 平均片重 0.2000 10
实测量 每片实测的含量 平均片重 称样量
标示量% 每片实测的含量 供试品中测得量 平均片重(g) 100% 100% 标示量 供试品重(g) 标示量
注射剂剂表示量百分含量：
标示量% 每支实测的含量 供试品中测得量 每支容量(m l) 100% 100% 标示量 供试品取样量(m l) 标示量
分含量，并判断是否符合规定。
（一）滴定分析法
甲苯磺丁脲片剂（标示量0.5g）的含量测定
V T F 103 W 标示量% 100% m S
18.47 27.04 0.1008 5.948 103 0.1 10 100% 99.9% 0.5996 0.5
测定结果大于98.5%，故本品含量合格
（一）滴定分析法
甲苯磺丁脲片剂（标示量0.5g）的含量测定
取甲苯磺丁脲10片，精密称定为5.948g，研细，精密称取片粉 0.5996g，加中性乙醇25ml，微热，使其溶解，放冷，加酚酞 指示剂3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1008mol/L）滴定至粉红色 ，消耗量18.47ml。每1ml氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于 27.04mg的甲苯磺丁脲。《中国药典》现行版规定本品含甲苯 磺丁脲应为标示量的95.0%～105%。试计算本品的标示量百
0.420。另取甲氧苄啶对照品适量0.05134g，置25ml量瓶中，用
稀醋酸稀释至刻度，精密量取1ml置100ml量瓶中，用稀醋酸 稀释至刻度，摇匀。在271nm波长处测定吸光度为0.416，计 算甲氧苄啶标示量百分含量。
(二）分光光度法
甲氧苄啶注射液（规格2 ml：0.1g）含量测定
cR 标示量% Ax D 每支容量 AR 100% m S
2536847 2491721 100% 93.94%
平均含量%
93.99% 94.49% 93.94% 94.14% 3
（三）色谱法
复方醋酸地塞米松乳膏（10g:7.5mg）醋酸地塞米松标示量百分含量
色谱条件与系统适用性试验： 固定相：C18 流动相：甲醇-水（70∶30） 检测波长：240nm
氧化钠滴定液（0.1003mol/L）14.86ml；并将滴定的结果用 空白试验校正，消耗氢氧化钠滴定液（0.1003mol/L）
0.05ml。每1ml氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于33.07mg
的呋塞米。按干燥品计算，含C12H11ClN2O5S不得少于 99.0%。
（一）滴定分析法
呋塞米原料药含量测定
滴定液浓度校正因子
(V V ) FB TA 含量(%) 100% m
0 B S B
空白试验消耗滴定液B的 体积
剩余的滴定液A消耗的滴 定液B的体积
（一）滴定分析法
司可巴比妥钠原料药含量测定
取本品0.1041g（干燥品），置250ml碘瓶中，加水10m1，振摇使溶 解，精密加溴滴定液（0.05mol/L）25ml，再加盐酸5m1，立即密塞
Y b a X
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（七）范围
• 范围
– 系指能达到一定精密度、准确度和线性，测 试方法适用的高低限浓度或量的区间。
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（八）耐用性
是指在测定条件有小的变动时，测定结果 不受影响的承受程度。 典型的变动因素有：被测溶液的稳定性、样品 提取次数、时间等。
实际工作中常考察的因素：被测溶液的稳定性，流动相的组成 和pH，商品柱的品牌，柱温等

本品含量合格
(二）分光光度法
供试品溶液的浓度CX
1.单位的统一 2.样品有没有稀释 3.表示方法
供试品溶液的浓度CX
(二）分光光度法
对乙酰氨基酚原料药含量测定
精密称取对乙酰氨基酚0.04110g，置250ml量瓶中，加0.4%氢 氧化钠溶液50ml，加水至刻度，摇匀，精密量取5ml，置 100ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液10ml，加水至刻度，摇匀 。依照分光光度法，在257nm波长处测得吸收度为0.582。按 C8H9NO2的百分吸收系数为715计算对乙酰氨基酚的百分含量
，空白实验消耗硫代硫酸钠滴定液（0.1012mol/L）25.02ml
（一）滴定分析法
司可巴比妥钠原料药含量测定
(V0 V) T F 103 含量% 100% m
(25.02 17.20) 13.01 0.1043 0.1012 103 0.1 100% 98.7%
片剂表示量百分含量：
每片实测的含量 标示量% 100% 标示量
？每片实测的含量
在分析时，一般取样10片或20片，精密称定 其总重量，再取一定量的片粉来测量，以平 均片重来代替片重进行计算。
取10片，精密称定重量为2.000 g，研磨，精密称 取片粉0.2100 g，实测量是0.1980 g，求平均片重? 每片实测的含量？
并振摇1min，在暗处静置15min后，注意微开瓶塞，加碘化钾试液
10m1，立即密塞，摇匀后，用硫代硫酸钠滴定液（0.1012mol/L） 滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴
定结果用空白试验校正。每1ml溴滴定液（0.05mo1/L）相当于
13.01mg的C12H17N2NaO3。按干燥品计算，含C12H17N2NaO3不得少 于98.5%。已知样品消耗硫代硫酸钠滴定液（0.1012mol/L）17.20ml
理论板数：按氢化可的松峰计算不低于2000
分离度：地塞米松峰、内标物质峰与相邻杂质峰的分离度应符 合要求
（三）色谱法
复方醋酸地塞米松乳膏（10g:7.5mg）醋酸地塞米松标示量百分含量
内标溶液：甲睾酮0.0100g，置50ml量瓶中，用甲醇溶解并
稀释至刻度
测定法：供试品+内标 记录色谱图；测得数据如下： 试样 供试品 峰面积 1874950
0.05134 0.420 25 100 2 1 25 100 0.416 1 100% 103.7% 1 0.1
（三）色谱法
供试品溶液的浓度CX
（三）色谱法
头孢唑林钠含量测定
取含量为99.5%的头孢唑林钠对照品25.13mg，配成溶液，取 此溶液10µ l注入液相色谱仪，测定峰面积，3次测定值分别为 ：2490189、2492796和2492178；另外称取头孢唑林钠供试品3
• 重复性
– 在相同条件下，由同一个分析人员测定所得结 果的精密度
• 中间精密度
– 在同一个实验室，不同时间由不同分析人员用 不同设备测定结果之间的精密度
• 重现性
– 在不同实验室由不同分析人员测定结果之间的 精密度
（三）专属性 有其他成分（杂质、降解物、辅料等）可能存 在情况下采用的方法能正确测定出被测物的特 性 鉴别、杂质检查、含量测定方法，均 应考察其专属性
测得量 回收率% 100% 加入量 取样量
取样量
原料药 可用已知纯度的对照品或供试品进行测定 用本法所得结果与已知准确度的另一个方 法测定的结果进行比较。
制剂：考察其他组分和辅料对回收率的影响 •①用含已知量被测物的各组分混合物进行测定。 •②可向制剂中加入已知量的被测物进行测定 （加样回收率） •③用本法所得结果与已知准确度的另一个方法 测定结果进行比较。
份，分别为28.13mg、29.35mg和27.10mg，按上法测定，分别
取10µ l溶液注入液相色谱仪，测得峰面积分别为2634858、 2763699和2536847，求供试品的百分含量。
（三）色谱法
头孢唑林钠含量测定
Ax Ax m cR V D R AR AR 含量 % 100% 含量% 100% m m 2490189 2492796 2492178 2491721 对照品平均峰面积： 32634858
含量% (V V0 ) T F 10 100% m
3

(14.86 0.05) 33.07 0.4988
0.1003 103 0.1 100% 98.48%
由于98.48%＜99.0%，故本品含量不合格
剩余滴定法也称回滴法，本法先加入定量过量滴定 液A与药物作用，再用滴定液B与剩余的滴定液A反 应，然后再进行含量计算
（一）滴定分析法
T(滴定度):1ml滴定液(m mol/L)相当于被测 药物的毫克数
（一）滴定分析法
（一）滴定分析法
呋塞米原料药含量测定
取本品0.4988g（干燥品），加乙醇30ml，微温使溶解，放 冷，加甲酚红指示液4滴与麝香草酚蓝指示液1滴，用氢氧
化钠滴定液（0.1003mol/L）滴定至溶液显紫红色，消耗氢
杂质定量测定的准确度
向原料药或制剂中加入已知量杂质进行测定。 本法测定结果与另一成熟的方法进行比较
3．数据要求
• 3个不同浓度，每个浓度各分别制备3份供试 品溶液
3×3，至少9个测定结果
• 在规定范围内，至少用9个测定结果进行评价。
（二）精密度 同一样品多次测量值之间相互接近的程度 表示方法：偏差、标准偏差（SD）或相对标准 偏差（RSD）
第四节 ຫໍສະໝຸດ Baidu析方法的验证
1.验证的目的：证明采用的方法适合于相应检测要 求 2.需验证的分析项目：鉴别试验、杂质检查、有效 成分的含量测定以及制剂中其它成分的测定，药 品溶出度、释放度。
一、分析方法验证的内容
（一）准确度 用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的 程度 表示方法：用回收率（%）表示